CN109833366A - 一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药制剂领域,具体涉及一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用。所述中药组合物主要由狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药制成。试验证明,本发明制备的中药组合物可使免疫功能减低的小鼠体重显著增高,并显著(P<0.01)提高碳粒廓清指数,吞噬指数也有增高的趋势,具有显著的改善免疫的作用。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂领域,具体涉及一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用。
背景技术
随着经济的发展,现代工业大量废气排放造成地球大气层的破坏,全球气候变暖,有害物质过量排放,使空气、土壤、水源污染。现代化的生活用品,如家具、室内装饰、装潢材料夹带着甲醛等有害致癌物质通过呼吸道进入人体,侵蚀着人类的健康。此时就需要依靠人体自身的免疫力来识别和消灭外来侵入的异物(如病毒、细菌等),处理机体内部衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞,以及识别和处理体内突变的细胞和病毒感染的细胞,是人体抵御外邪、排除异己、保卫自己的能力。
在人体免疫力低下时,容易招致细菌、病毒、真菌等感染,最直接的表现就是容易患病,而经常患病加重了机体的消耗,一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现,并且每次生病都需要很长时间才能恢复,甚至常常反复发作,长此以往会导致身体和智力发育不良,还易诱发重大疾病,因此迫切需要一种改善人体免疫的中药组合物。
如中国专利申请CN105748769A公开了一种提高机体免疫力的中药组合物及其制备方法,所述中药组合物由党参、茯苓、石菖蒲、远志为原料制备而成,动物药效学结果显示:该发明中药组合物能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数和吞噬率,增强机体的非特异性免疫能力;还能使正常小鼠血清溶血素的含量明显增高,具有增强小鼠体液免疫功能的作用。中国专利申请CN107441368A公开了一种具有提高免疫力作用的药食同源组合物及其制备方法,该组合物由麦苗、人参、龙眼肉、桑葚、黑芝麻、黄精等药食同源药材和低聚果糖、低聚半乳糖组成,可降低正常小鼠的足趾肿胀厚度,提高NK细胞活性、血清溶血素水平、抗体生成细胞数量、碳廓清吞噬指数和巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力,具有显著的提高免疫功能作用。
本发明的主要原料狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药是制备舒筋健腰丸的主要原料,制成的舒筋健腰丸具有补益肝肾,强健筋骨,驱风除湿,活络止痛的功效,临床主要用于腰膝酸痛,坐骨神经痛,但目前还没有舒筋健腰丸能够改善免疫作用的相关报道,其改善免疫功能的开发是企业的研发难题。
发明内容
本发明旨在提供一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊550-650份、金樱子150-250份、鸡血藤300-400份、千斤拔100-200份、黑老虎300-400份、牛大力200-300份、女贞子20-35份、桑寄生150-200份、菟丝子20-35份、延胡索20-30份、两面针20-30份、乳香10-18份和没药15-25份。
进一步地,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊550-600份、金樱子150-200份、鸡血藤350-400份、千斤拔100-150份、黑老虎350-400份、牛大力200-250份、女贞子30-35份、桑寄生180-200份、菟丝子30-35份、延胡索25-30份、两面针25-30份、乳香10-15份和没药20-25份。
更进一步地,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊600份、金樱子192份、鸡血藤360份、千斤拔144份、黑老虎360份、牛大力240份、女贞子30份、桑寄生180份、菟丝子30份、延胡索26份、两面针26份、乳香12份和没药20份。
进一步地,所述中药组合物的制备方法包括以下步骤:
S1、取相应量的狗脊、金樱子、千斤拔和黑老虎的木部,加入原料重量10-25倍量的水,煎煮2次,每次1-2h,合并煎液,过滤,浓缩,得稠膏;
S2、取相应量的鸡血藤、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药和黑老虎的皮部用粉碎机粉碎,得混合粗粉;
S3、将步骤S2所得混合粗粉加入步骤S1所得稠膏,混匀,干燥,粉碎成细粉,过筛,混匀,即得。
更进一步地,所述中药组合物可加入临床上可接受的辅料制成口服制剂。
进一步地,所述口服制剂包括丸剂、片剂、胶囊、颗粒剂和分散片。
更进一步地,所述中药组合物可显著提高巨噬细胞的碳粒廓清指数。
进一步地,所述中药组合物的临床日用量为9.75-19.5g生药/kg。
更进一步地,所述中药组合物的临床日用量为9.75g生药/kg。
本发明主要由狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力等中药原料制成,是一种具有补益肝肾,强健筋骨,驱风除湿,活络止痛功效的舒筋健腰丸。在二次开发研究中,申请人惊喜的发现,本发明中药组合物具有显著的改善免疫的作用。试验例1可以证明,本发明中药组合物一定剂量可使免疫功能减低的小鼠体重显著增高,并显著(P<0.01)提高碳粒廓清指数,吞噬指数也有增高的趋势。而单核巨噬细胞系统是机体最重要的防御系统,具有强大而迅速吞噬廓清异体颗粒或某些有害物质,当静脉注入特定大小的惰性碳后,可被机体免疫系统中的巨噬细胞迅速吞噬而从血液中廓清。因此由试验例1数据可知本发明中药组合物具有显著的改善免疫的作用。
本发明具有以下优点:
本发明制备的中药组合物的中、高剂量可使免疫功能减低的小鼠体重显著增高,并显著(P<0.01)提高碳粒廓清指数,吞噬指数也有增高的趋势,具有显著的改善免疫的作用。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
其中,本发明采用的试剂均为常用试剂,可于常规试剂生产销售公司购买。
实施例1一种中药组合物
由以下原料及其重量份数制成:狗脊600份、金樱子192份、鸡血藤360份、千斤拔144份、黑老虎360份、牛大力240份、女贞子30份、桑寄生180份、菟丝子30份、延胡索26份、两面针26份、乳香12份和没药20份。
制备方法:
S1、取相应量的狗脊、金樱子、千斤拔和黑老虎的木部,加入原料重量10倍量的水,煎煮2次,每次1.5h,合并煎液,过滤,浓缩,得稠膏;
S2、取相应量的鸡血藤、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药和黑老虎的皮部用粉碎机粉碎,得混合粗粉;
S3、将步骤S2所得混合粗粉加入步骤S1所得稠膏,混匀,干燥,粉碎成细粉,过筛,混匀,制得2.49g生药/g的中药组合物。
实施例2一种中药组合物丸剂
取实施例1制备的中药组合物每100g粉末用炼蜜35g泛丸,包衣,干燥,打光,即得。
试验例1对免疫功能减低小鼠体内碳粒廓清试验研究
1.试验材料:实施例1制备的中药组合物、阳性对照1:壮骨关节丸(购自华润三九医药股份有限公司)、阳性对照2:盐酸左旋咪唑片(购自桂林南药股份有限公司)、阴性对照:0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)(购自天津市大茂化学试剂厂)。
2.试验对象:ICR小鼠,雄性,20.8-28.0g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。
3.试验方法:
(1)试剂制备:
①阴性对照-0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na):称取CMC-Na,加入纯水溶解,配成浓度为0.5%CMC-Na溶液,其中,羧甲基纤维素钠(CMC-Na)购自天津市大茂化学试剂厂。
②受试物-实施例1:称取一定量实施例1制备的中药组合物药粉,在药粉中一边加入0.5%CMC-Na溶液一边搅拌,至均匀没有块状物,分别制成浓度为0.25g/mL、0.13g/mL和0.064g/mL的药液。
③阳性对照1-壮骨关节丸:称取一定量的壮骨关节丸,研磨后,在药粉中一边加入0.5%CMC-Na溶液一边搅拌,至均匀没有块状物,制成浓度为0.156g/mL的药液。
④阳性对照2-盐酸左旋咪唑片:取2片盐酸左旋咪唑片,研磨后,在药粉中一边加入0.5%CMC-Na溶液一边搅拌,至均匀没有块状物,制成浓度为0.0023g/mL的药液。
⑤0.1%碳酸钠溶液:称取100mg的无水碳酸钠,用适量0.9%氯化钠注射液溶解后稀释至100mL,现用现配,其中,无水碳酸钠购自天津市大茂化学试剂厂。
⑥印度墨汁:吸取印度墨汁1mL,用0.9%氯化钠生理盐水稀释5倍,现用现配,其中,印度墨汁购自Solarbio。
⑦5mg/mL环磷酰胺溶液:取1瓶注射用环磷酰胺,用适量0.9%氯化钠注射液溶解后稀释至10mL,配成浓度为20mg/mL的母液,吸取母液1.0mL,用0.9%氯化钠注射液稀释至4mL,其中,注射用环磷酰胺购自山西德普药业股份有限公司。
(2)试验步骤:
选取检疫合格的ICR小鼠,分为7组,即阴性对照组(0.5%CMC-Na溶液)、模型组、壮骨关节丸组、左旋咪唑组及实施例1高、中、低剂量组,每组12只,均为雄性。分组后各试验组动物均进行灌胃给药,连续7天给药,每天1次,给药组别及剂量参见表1。给药的第3天,除阴性对照组外,余下各组腹腔给予5mg/mL环磷酰胺溶液,注射体积为5mL/kg,连续5天。末次给药后1h,除阴性对照组动物外,余下各组动物尾静脉给予稀释后的印度墨汁,注射体积为10mL/kg,给予稀释后的印度墨汁后的2min、20min,各组动物分别眼眶采血20μL,溶于2mL的0.1%碳酸钠溶液中摇匀,离心后,吸其上清液于波长为630nm的分光光度计上进行比色,测定光密度(OD值)。各组动物采血后颈椎脱臼处死,分别取出肝脏、脾脏并称重。
表1组别及剂量设计表
4.结果判定:
根据各组试验动物的OD值和肝脏、脾脏称重量,计算碳粒廓清指数K和吞噬指数α。
K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)
注:OD1、OD2为不同时间所取血样的光密度,t2-t1为取两血样的时间差。
5.试验结果:
给药第1-3天,各组动物进食、饮水、排泄、一般状况均未见明显异常;给药第3-7天,除阴性对照组动物外,其余动物均可见进食减少现象。体重、碳粒廓清指数K和吞噬指数α的结果详见表2。
表2实施例1中药组合物对免疫功能减低小鼠体内碳粒廓清试验结果
组别 | 体重(g) | 碳粒廓清指数K | 吞噬指数α |
阴性对照组 | 30.6±1.8 | 0.023±0.004 | 4.254±0.295 |
模型组 | 26.7±1.5<sup>**</sup> | 0.010±0.005<sup>**</sup> | 3.493±0.712<sup>**</sup> |
壮骨关节丸组 | 27.4±1.4<sup>**</sup> | 0.013±0.003<sup>**</sup> | 3.740±0.521<sup>**</sup> |
左旋咪唑组 | 29.7±1.6<sup>##</sup> | 0.020±0.003<sup>##</sup> | 4.185±0.369<sup>##</sup> |
实施例1高剂量组 | 29.0±1.3<sup>*##</sup> | 0.016±0.003<sup>**##</sup> | 3.893±0.391<sup>*</sup> |
实施例1中剂量组 | 28.6±1.8<sup>*#</sup> | 0.014±0.003<sup>**#</sup> | 3.791±0.534<sup>*</sup> |
实施例1低剂量组 | 27.0±2.0<sup>**</sup> | 0.011±0.003<sup>**</sup> | 3.556±0.461<sup>**</sup> |
注:与阴性对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.05。
由表2可知:
(1)与阴性对照组相比,模型组在给予环磷酰胺后,动物体重出现明显下降(P<0.01);且在静脉注射印度墨汁后,碳粒廓清指数和吞噬指数均明显下降(P<0.01)。与模型组相比,左旋咪唑组(阳性对照药物)在给予环磷酰胺后,动物体重明显高于模型组(P<0.01);且在静脉注射印度墨汁后,碳粒廓清指数和吞噬指数均明显高于模型组(P<0.01)。以上结果提示本试验动物模型复制成功,试验系统合格。
(2)与模型组相比,壮骨关节丸组在给予环磷酰胺后,动物体重未见明显差异(P>0.05);且在静脉注射印度墨汁后,碳粒廓清指数和吞噬指数亦未见明显差异(P>0.05),说明壮骨关节丸没有明显的增强免疫作用。
(3)与模型组相比,实施例1低剂量组在给予环磷酰胺后,动物体重未见明显差异(P>0.05);且在静脉注射印度墨汁后,碳粒廓清指数和吞噬指数亦未见明显差异(P>0.05)。实施例1中剂量组和高剂量组在给予环磷酰胺后,动物体重可见明显上升(P<0.05或P<0.01);且在静脉注射印度墨汁后,碳粒廓清指数明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),吞噬指数亦有高于模型组的趋势(P>0.05)。说明受试物舒筋健腰丸(剂量为1.27g/kg和2.54g/kg)具有一定的增强免疫作用。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (9)
1.一种中药组合物在制备改善免疫作用的药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊550-650份、金樱子150-250份、鸡血藤300-400份、千斤拔100-200份、黑老虎300-400份、牛大力200-300份、女贞子20-35份、桑寄生150-200份、菟丝子20-35份、延胡索20-30份、两面针20-30份、乳香10-18份和没药15-25份。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊550-600份、金樱子150-200份、鸡血藤350-400份、千斤拔100-150份、黑老虎350-400份、牛大力200-250份、女贞子30-35份、桑寄生180-200份、菟丝子30-35份、延胡索25-30份、两面针25-30份、乳香10-15份和没药20-25份。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述中药组合物包括以下原料及其重量份数:狗脊600份、金樱子192份、鸡血藤360份、千斤拔144份、黑老虎360份、牛大力240份、女贞子30份、桑寄生180份、菟丝子30份、延胡索26份、两面针26份、乳香12份和没药20份。
4.如权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于,所述中药组合物的制备方法包括以下步骤:
S1、取相应量的狗脊、金樱子、千斤拔和黑老虎的木部,加入原料重量10-25倍量的水,煎煮2次,每次1-2h,合并煎液,过滤,浓缩,得稠膏;
S2、取相应量的鸡血藤、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药和黑老虎的皮部用粉碎机粉碎,得混合粗粉;
S3、将步骤S2所得混合粗粉加入步骤S1所得稠膏,混匀,干燥,粉碎成细粉,过筛,混匀,即得。
5.如权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于,所述中药组合物可加入临床上可接受的辅料制成口服制剂。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述口服制剂包括丸剂、片剂、胶囊、颗粒剂和分散片。
7.如权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于,所述中药组合物可显著提高巨噬细胞的碳粒廓清指数。
8.如权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于,所述中药组合物的临床日用量为9.75-19.5g生药/kg。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述中药组合物的临床日用量为9.75g生药/kg。
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