CN109832192A

CN109832192A - 一种红掌组培繁殖方法

Info

Publication number: CN109832192A
Application number: CN201711201197.5A
Authority: CN
Inventors: 陈向阳; 李海飞
Original assignee: Guangxi Beiliu Sen Porcelain Industry Co Ltd
Current assignee: Guangxi Beiliu Sen Porcelain Industry Co Ltd
Priority date: 2017-11-27
Filing date: 2017-11-27
Publication date: 2019-06-04

Abstract

本发明公开了一种红掌组培繁殖方法，包括外植体处理、诱导培养、增殖培养和生根培养，选取红掌子株作为外植体，对外植体进行洗净灭菌消毒处理后，接种于诱导培养基中培养获得红掌愈伤组织，再将红掌愈伤组织转接至增殖培养基中进行增殖培养，最后将分化出的长1‑2cm的丛生芽转接到生根培养基中培养获得生根红掌，生根率达到100%。本发明通过对红掌的茎尖进行诱导、增殖、生根，快速获得红掌组培苗，生根快，缩短了红掌组培时间，成本低，同时提高了红掌成活、分化和生根率，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

Description

一种红掌组培繁殖方法

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，涉及一种红掌组培繁殖方法。

背景技术

红掌，又称花烛，安祖花，系天南星科花烛属多年生附生常绿草本植物，原产于南美洲热带雨林。其花朵独特，有佛焰花序，色泽鲜艳华丽，色彩丰富，每朵花花期长，花的颜色变化大，常见苞片颜色有红色、粉红、白色等，有极大观赏价值。近年来，红掌的品质越来越高，国内市场相对稳定，市场接受越来越好，销售稳定，前景看好。1980 年以来，组织培养技术得到快速发展。我国自20 世纪80 年代引进红掌以来，由于其独特的花型，叶形别致，被赋予“大展宏图，热情”之意。受到了广大人民的喜爱，但其核心栽培技术一直受到国外垄断，因此价格也相当的昂贵。随着人们生活水平质量的提高，对红掌的需求也越来越大。为了形成红掌规模化生产，探索出一种适合红掌组织快繁的方法是很有必要的。

发明内容

本发明是为了克服现有技术的不足，提供一种生长周期短，生长效果好，扩繁快的红掌组培繁殖方法。

为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：

一种红掌组培繁殖方法，包括外植体处理、诱导培养、增殖培养和生根培养，选取红掌子株作为外植体，对外植体进行洗净灭菌消毒处理后，接种于诱导培养基中培养获得红掌愈伤组织，再将红掌愈伤组织转接至增殖培养基中进行增殖培养，最后将分化出的长1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中培养获得生根红掌；主要包括如下步骤：

（1）外植体处理：选取红掌子株作为外植体，用纯净水冲洗外植体2-3次，然后在体积浓度0.1%代森锌蓝粉溶液中浸泡30-40min，用清水洗净后用体积浓度0.15 % HgCl₂溶液对外植体浸泡15-20min进行灭菌消毒，最后用无菌水冲洗干净外植体后，置于无菌滤纸上吸干水，备用；

（2）诱导培养：将步骤（1）处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中培养，先暗培养3-4 d，然后光照培养，光照时间12h/d，光照强度500-1000lx，培养温度22-28℃，培养时间20-22d，培养得到红掌愈伤组织；

（3）增殖培养：将步骤（2）中诱导得到的红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间10-12h/d，光照强度3000-3500lx，培养温度22-28℃，培养时间20-25d，分化出芽；

（4）生根培养：将步骤（3）中分化出的芽长至1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx，培养温度22-28℃，培养时间20-30d，得到生根红掌。

以上步骤（2）所述的诱导培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+IBA 2.0-3.0 mg/L +VC 15 mg/L +聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+VB₂15 mg/+琼脂粉3.6 g/L+蔗糖20 g/L。

以上步骤（3）所述的增殖培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 3.0-5.0 mg/L+NAA 1.5-2.0 mg/L+ZT 0.1-0.5 mg/L+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

以上步骤（4）所述的生根培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 1.5-2.0 mg/L+NAA 0.5-1.0 mg/L+VC 10 mg/L+VB₂20 mg+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮30mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

以上所述的改良LS培养基的配方为：NH₄NO₃880 mg/L+KNO₃780mg/L+CaCl₂·2H₂O300mg/L+MgSO_4.·7H₂O 350 mg/L+KH₂PO₄220 mg/L+H₃BO₃4.5 mg/L+MnSO_4.·4H₂O 22.3mg/L+ZnSO₄·4H₂O 8.6 mg/L+KI0.56mg/L+Na₂MoO₄·H₂O 0.25 mg/L+CuSO_4.·5H₂O 0.025mg/L+CoCl₂·6H₂O 0.025 mg/L+FeSO₄ 27.8 mg/L+NaEDTA 37.0 mg/L+肌醇 75 mg/L+烟酸0.5 mg/L+盐酸吡哆醇0 .5 mg/L+甘氨酸 2 mg/L+盐酸吡哆醇0 .5 mg/L。

本发明具有的优点及有益效果如下：

1、本发明以红掌子株作为外植体作为外植体，经过诱导培养基培养，红掌愈伤组织诱导率90-95%；经过4-5个周期增殖培养，形成丛生芽，芽增殖系数4/30d-6/30d，再将丛生芽接入生根培养基中培养30-35 d，生根率达到100%。

2、本发明对LS基本培养基进行了改良，添加酚类物质的专一性吸附剂聚乙烯吡咯烷酮（PVP），迅速有效的抑制红掌组培芽的褐死，同时加入促进芽生长并且粗壮的氨基酸和维生素，使得培养基的营养更加全面，更有效的促使红掌芽诱导的发生、增殖和生根，实现大量增殖。

3、本发明通过对红掌的茎尖进行诱导、增殖、生根，快速获得红掌组培苗，生根快，缩短了红掌组培时间，成本低，同时提高了红掌成活、分化和生根率。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。

实施例1：

选取红掌子株作为外植体，用纯净水冲洗外植体2-3次，然后在体积浓度0.1%代森锌蓝粉溶液中浸泡30min，用清水洗净后用体积浓度0.15 % HgCl₂溶液对外植体浸泡15-20min进行灭菌消毒，最后用无菌水冲洗干净外植体后，置于无菌滤纸上吸干水，备用。

将处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中培养，先暗培养3-4 d，然后光照培养，光照时间12h/d，光照强度500lx，培养温度22-25℃，培养时间20-22d，培养得到红掌愈伤组织，愈伤组织诱导率达99%；其中，所述的诱导培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA6.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L +VC 15 mg/L +聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+VB₂15 mg/+琼脂粉3.6g/L+蔗糖20 g/L。

将得到的红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间10h/d，光照强度3000lx，培养温度22-25℃，培养时间20-25d，分化出芽；其中，所述的增殖培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+ZT 0.1 mg/L+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

将增殖分化出的芽长至1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中，光照时间12h/d，光照强度1500lx，培养温度22-25℃，培养时间20-30d，得到生根红掌，生根率达到100%；其中，所述的生根培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+VC 10 mg/L+VB₂20 mg+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮30mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

实施例2：

选取红掌子株作为外植体，用纯净水冲洗外植体2-3次，然后在体积浓度0.1%代森锌蓝粉溶液中浸泡35min，用清水洗净后用体积浓度0.15 % HgCl₂溶液对外植体浸泡15-20min进行灭菌消毒，最后用无菌水冲洗干净外植体后，置于无菌滤纸上吸干水，备用。

将处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中培养，先暗培养3-4 d，然后光照培养，光照时间12h/d，光照强度1000lx，培养温度25-26℃，培养时间20-22d，培养得到红掌愈伤组织，愈伤组织诱导率达99%；其中，所述的诱导培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA7.5 mg/L+IBA 2.5 mg/L +VC 15 mg/L +聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+VB₂15 mg/+琼脂粉3.6g/L+蔗糖20 g/L。

将得到的红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间11h/d，光照强度3000lx，培养温度25-26℃，培养时间20-25d，分化出芽；其中，所述的增殖培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 3.5 mg/L+NAA 1.8 mg/L+ZT 0.4 mg/L+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

将增殖分化出的芽长至1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中，光照时间12h/d，光照强度200lx，培养温度25-26℃，培养时间20-30d，得到生根红掌，生根率达到100%；其中，所述的生根培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 1.8mg/L+NAA 0.8 mg/L+VC 10 mg/L+VB₂20 mg+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮30mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

实施例3：

选取红掌子株作为外植体，用纯净水冲洗外植体2-3次，然后在体积浓度0.1%代森锌蓝粉溶液中浸泡40min，用清水洗净后用体积浓度0.15 % HgCl₂溶液对外植体浸泡15-20min进行灭菌消毒，最后用无菌水冲洗干净外植体后，置于无菌滤纸上吸干水，备用。

将处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中培养，先暗培养3-4 d，然后光照培养，光照时间12h/d，光照强度1000lx，培养温度26-28℃，培养时间20-22d，培养得到红掌愈伤组织，愈伤组织诱导率达99%；其中，所述的诱导培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA8.0 mg/L+IBA 3.0 mg/L +VC 15 mg/L +聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+VB₂15 mg/+琼脂粉3.6g/L+蔗糖20 g/L。

将得到的红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间12h/d，光照强度3500lx，培养温度26-28℃，培养时间20-25d，分化出芽；其中，所述的增殖培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 5.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+ZT 0.5 mg/L+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

将增殖分化出的芽长至1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中，光照时间12h/d，光照强度2000lx，培养温度26-28℃，培养时间20-30d，得到生根红掌，生根率达到100%；其中，所述的生根培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+VC 10 mg/L+VB₂20 mg+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮30mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

Claims

1.一种红掌组培繁殖方法，其特征在于：包括外植体处理、诱导培养、增殖培养和生根培养，选取红掌子株作为外植体，对外植体进行洗净灭菌消毒处理后，接种于诱导培养基中培养获得红掌愈伤组织，再将红掌愈伤组织转接至增殖培养基中进行增殖培养，最后将分化出的长1-2cm的丛生芽转接到生根培养基中培养获得生根红掌；主要包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种红掌组培繁殖方法，其特征在于：步骤（2）所述的诱导培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+IBA 2.0-3.0 mg/L +VC 15 mg/L +聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+VB₂15 mg/+琼脂粉3.6 g/L+蔗糖20 g/L。

3.根据权利要求1所述的一种红掌组培繁殖方法，其特征在于：步骤（3）所述的增殖培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 3.0-5.0 mg/L+NAA 1.5-2.0 mg/L+ZT 0.1-0.5 mg/L+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮50mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

4.根据权利要求1所述的一种红掌组培繁殖方法，其特征在于：步骤（4）所述的生根培养基的配方为：改良LS培养基+6-BA 1.5-2.0 mg/L+NAA 0.5-1.0 mg/L+VC 10 mg/L+VB₂20mg+L-半胱氨酸 10 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮30mg/L+琼脂粉 3.6 g/L+蔗糖 30 g/L。

5.根据权利要求2-4任一所述的一种红掌组培繁殖方法，其特征在于：所述的改良LS培养基的配方为：NH₄NO₃880 mg/L+KNO₃780mg/L+CaCl₂·2H₂O 300mg/L+MgSO_4.·7H₂O 350mg/L+KH₂PO₄220 mg/L+H₃BO₃4.5 mg/L+MnSO_4.·4H₂O 22.3 mg/L+ZnSO₄·4H₂O 8.6 mg/L+KI0.56mg/L+Na₂MoO₄·H₂O 0.25 mg/L+CuSO_4.·5H₂O 0.025 mg/L+CoCl₂·6H₂O 0.025 mg/L+FeSO₄ 27.8 mg/L+NaEDTA 37.0 mg/L+肌醇 75 mg/L+烟酸 0.5 mg/L+盐酸吡哆醇0 .5mg/L+甘氨酸 2 mg/L+盐酸吡哆醇0 .5 mg/L。