CN109820947A - 一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征药物中的应用 - Google Patents
一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提出了一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:羚羊角5‑15份或山羊角50‑150份、平贝母10‑60份、大黄15‑60份、黄芩7‑30份、青礞石7‑30份、石膏10‑50份、人工牛黄5‑20份、甘草15‑60份。本发明的治疗上气道咳嗽综合征的复方组合药物,能够显著抑制LPS诱导巨噬细胞RAW 264.7的炎症因子的产生;能够明显抑制PolyI:C刺激呼吸道上皮细胞中黏蛋白MUC5AC的分泌;对上气道咳嗽综合征大鼠,能够降低大鼠炎症状态评分,降低血清中炎症因子IL‑8、TNF‑a水平。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域,具体而言,涉及一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征(简称UACS)药物中的应用。
背景技术
上气道咳嗽综合征是指由上呼吸道疾病产生的分泌物经过鼻后孔倒流入鼻咽、口咽以及下咽等部位,甚至向下蔓延至声门或气管,刺激咳嗽感受器,引起临床以慢性咳嗽为主症的综合征,其共同特点是鼻腔分泌物异常增多向后滴漏落到咽喉部黏膜,刺激此处咳嗽感受器而引发咳嗽。典型临床表现有:一、阵发性或持续性咳嗽,以白天咳嗽为主,入睡后较少咳嗽;二、多数患者伴有鼻内分泌物后流、口腔黏液附着、咽部发痒、有异物感,并频繁清喉;三、有鼻痒、鼻塞、流鼻涕、打喷嚏等症状;四、部分患者还会声音嘶哑,甚至讲话也会诱发咳嗽;五、有鼻炎、鼻窦炎、鼻息肉或慢性咽喉炎等病史。
目前医学界对上气道咳嗽综合征的治疗方法为:保守治疗方法:口服药物:如抗组胺药(氯雷他定等)等;或局部行鼻甲射频或鼻腔冲洗、鼻窦置换、上颌窦穿刺冲洗等;手术治疗方法:术式据病情选择,包括鼻中隔偏曲矫正术、下鼻甲部分切除术、鼻内镜下鼻腔鼻窦手术和腺样体切除术等。然而,组织瘀血、水肿、增厚、血管增生、淋巴细胞和浆细胞浸润、上皮纤毛脱落等一系列难以逆转的病理改变现象,增加了本病的难治性及复发性。因此,上气道咳嗽综合征的预防与治疗至关重要,如何能够快速有效的治愈上气道咳嗽综合征显得尤为重要。
发明内容
针对现有技术中存在的不足,本发明的目的是提供一种治疗上气道咳嗽综合征的复方组合药物,以实现有效治疗上气道咳嗽综合征等疾病。具体地,
本发明提出了一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:羚羊角5-15份或山羊角50-150份、平贝母10-60份、大黄15-60份、黄芩7-30份、青礞石7-30份、石膏10-50份、人工牛黄5-20份、甘草15-60份。
进一步地,所述中药组合物包括:羚羊角8-12份或山羊角80-120份、平贝母15-55份、大黄20-35份、黄芩10-18份、青礞石10-18份、石膏15-25份、人工牛黄8-12份、甘草20-35份。
优选地,所述中药组合物包括:羚羊角9.45份、平贝母17.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
优选地,所述中药组合物包括:山羊角94.5份、平贝母47.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份
具体地,所述治疗上气道咳嗽综合征药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
具体地,所述治疗上气道咳嗽综合征药物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
其中,以上所述本发明的组合物,可以按传统方法直接将几味组合物直接研磨成粉,也可以是经过常规手段制得提取物,以便制成不同剂型,得到疗效更好并且更利于制备成现代药物剂型。
优选地,如前所述中药组合物制备方法包括以下步骤:取羚羊角或山羊角镑成丝,用含碱水溶液水解,滤过,取滤液浓缩;取青礞石、石膏粉碎成粗粉,水加热煎煮,滤过,取滤液浓缩;取人工牛黄用70%乙醇提取,滤过,滤液浓缩;其余药材,加水煎煮,滤液浓缩并离心后,上清液加乙醇沉淀,静置,取上清液,滤过,滤液浓缩;将上述浓缩液混合,即得。
更具体地,如前所述组合物采用以下方法提取:
羚羊角或山羊角镑成丝,用含碱水溶液水解回流两次,合并两次滤液,浓缩;青礞石、石膏粉碎成粗粉,水加热煎煮两次,滤过,合并两次滤液,浓缩至相对密度为1.01~1.04(75℃~85℃);人工牛黄用70%乙醇回流提取两次,滤过,合并两次滤液,减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1.02~1.05(75℃~85℃);其余平贝母等四味药,加水煎煮两次,滤过,合并两次滤液,浓缩至相对密度为1.10(85℃),离心,上清液加乙醇使沉淀,静置,取上清液,滤过,减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08(85℃);上述浓缩液混合,即得。
本发明还提出一种前述口服液的制备方法,即:将上述混合后的浓缩液与0.2%甜菊素混匀,加水至1000ml,搅匀,煮沸40分钟,冷藏不低于48h,滤过,滤液加水至1000ml,调节pH值为8.0~9.0,灌封,灭菌,即得。
通过上述制备方法可以得到液体制剂,如果要制备成固体制剂,则可在液体药物中加入药用辅料,再制备成该药物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
本发明的治疗上气道咳嗽综合征的复方组合药物,能够显著抑制LPS诱导巨噬细胞RAW 264.7的炎症因子的产生;能够明显抑制PolyI:C刺激呼吸道上皮细胞中黏蛋白MUC5AC的分泌;对上气道咳嗽综合征大鼠,能够降低大鼠炎症状态评分,降低血清中炎症因子IL-8、TNF-a水平。而且治疗上气道咳嗽综合征的复方组合药物的制备方法简单、快速、高效、易于操作。制备出的合剂、片剂、胶囊、微丸等便于携带,方便服用。
附图说明
图1为本发明中药复方口服液对MUC5AC的影响图;其中,与模型组比较:*P<0.05**P<0.01。
具体实施方式
本发明提供了一种中药组合物的用途,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
除有特别说明,本发明采用的药品、生物材料或仪器皆为普通市售品,皆可于市场购得。
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1中药复方口服液的制备
山羊角94.5g镑成丝,用含碱水溶液水解回流两次,合并两次滤液,浓缩;青礞石15.75g、石膏23.62g碎成粗粉,水加热煎煮两次,滤过,合并两次滤液,浓缩至相对密度为1.01~1.04(75℃~85℃);人工牛黄9.45g用70%乙醇回流提取两次,滤过,合并两次滤液,减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1.02~1.05(75℃~85℃);其余四味药平贝母47.25g、大黄31.5g、黄芩15.75g、甘草31.5g,加水煎煮两次,滤过,合并两次滤液,浓缩至相对密度1.10(85℃),离心,上清液加乙醇使沉淀,静置,取上清液,滤过,减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08(85℃);上述浓缩液混合,即得。
将上述浓缩液与0.2%甜菊素混匀,加水至1000ml,搅匀,煮沸40分钟,冷藏不低于48h,滤过,滤液加水至1000ml,调节pH值为8.0~9.0,灌封,灭菌,即得。
实施例2中药复方口服液抗炎活性
1、实验材料
1.1细胞株
小鼠巨噬细胞系RAW 264.7购于中科院上海细胞库。
1.2药品与试剂
DMEM/HIGH GLUCOSE,Gibco,Lot:8118035;
FBS:Hyclone,Lot:SH30084.03;
LPS:南京大治生物科技有限公司;
DMSO:阿拉丁,批号:D1712055;
0.25%Trypsin-EDTA:Gibco,Lot:1697785;
NO检测试剂盒:碧云天,产品编号:S0021;
小鼠IL-6检测试剂盒:invitrogen,Lot:1913800020;
小鼠TNF-α检测试剂盒:invitrogen,Lot:184786017;
小鼠PGE2检测试剂盒:Enzo Life Sciences,Lot:08211709C。
1.3实验仪器
CO2细胞培养箱:thermofisher公司;
Nikon TS100型倒置显微镜:尼康;
超净工作台:苏州艾克林净化设备有限公司;
Thermo VarioSkanFlash多功能读数仪:Thermofisher公司;
移液器:Thermofisher公司;
离心机:湖南湘仪实验室仪器开发有限公司,型号:L530。
2、实验方法
2.1细胞种板
将细胞以0.25%胰酶(含0.02%EDTA)消化,离心收集,含血清的DMEM培养基调整细胞密度为2×106个/ml,均匀接种至96孔板,每孔100μl,接种后放入培养箱培养24h。
2.2细胞给药
培养24小时后,取出96孔板,吸去原来的培养基,治疗组以表1稀释倍数加入以无血清的DMEM配制的含药培养基;同时设3个复孔,加药完毕后将96孔板放入CO2细胞培养箱培养1h。取出96孔板,模型组和治疗组每孔加入LPS终浓度为1μg/ml,加药完毕后将96孔板放入CO2细胞培养箱培养22小时,取细胞培养液离心取上清。
2.3NO、IL-6、TNF-α、PGE2的ELISA检测
根据ELISA试剂盒的说明书检测细胞上清中炎症因子的浓度。
2.4抑制率计算
抑制率计算公式:
抑制率=(模型组炎症因子平均含量-样品组炎症因子平均含量)/(模型组炎症因子平均含量-DMSO组炎症因子平均含量)×100%
2.5统计学处理
数据均以mean±SD表示,采用SPSS 11.5软件进行统计处理,组间比较用t检验。
3、实验结果
表1中药复方口服液对炎症因子的影响(mean±SD,n=3)
以上实验结果表明该中药复方口服液对炎症发展过程中的几个重要的细胞因子如NO、TNF-α、IL-6、PGE2有着显著影响,能够显著抑制LPS诱导巨噬细胞RAW 264.7的炎症因子的产生。
实施例3中药复方口服液抑制痰液分泌活性研究
1、实验材料
1.1细胞株
NCI-H292细胞购于中科院上海细胞库。
1.2药品与试剂
Poly I:C:sigma,Lot:P9582;
含EDTA 0.25%胰酶:Gibco,Lot:25200072;
RPMI 1640培养基:Gibco,Lot:C11875500BT;
胎牛血清:hyclone,Lot:SH30084.03;
Human MUC5AC酶联免疫检测试剂盒:上海生工生物,Lot:C505562-0096。
1.3实验仪器
CO2细胞培养箱:Thermofisher公司;
CO2细胞培养箱:thermofisher公司;
Nikon TS100型倒置显微镜:尼康;
超净工作台:苏州艾克林净化设备有限公司;
移液器:eppendorf公司;
酶标仪:MD公司(M2e型)。
2、实验方法
2.1细胞铺板
将NCI-H292细胞以0.25%胰酶(含0.02%EDTA)消化,含10%胎牛血清的1640培养基调整细胞密度为1×104/孔接种至96孔板,培养24h。
2.2细胞给药
取出96孔板,吸去上清液,加入以无血清的1640培养基饥饿培养24h。分为空白组、模型组、治疗组;治疗组分别给予1600、800、400、200、100倍稀释的中药复方口服液。模型组和治疗组都加入PolyI:C终浓度为10ug/ml加药完毕后将96孔板放入CO2细胞培养箱培养24h。
2.3样品检测
收集细胞上清液,按Elisa试剂盒说明书检测MUC5AC含量。
2.4抑制率计算
抑制率=(模型组MUC5AC平均含量-样品组MUC5AC平均含量)/(模型组MUC5AC平均含量–空白组MUC5AC平均含量)×100%
2.5统计学处理
数据均以mean±SD表示,采用SPSS 11.5软件进行统计处理,组间比较用t检验。
3、实验结果
如图1所示,该实验通过PolyI:C刺激呼吸道上皮细胞,模拟病毒感染上呼吸道导致的炎症,实验结果表明该中药复方口服液在稀释100、200倍时能够明显抑制黏蛋白MUC5AC的分泌,表明该中药复方口服液具有一定的抑制痰液分泌作用。
实施例4中药复方口服液治疗上气道咳嗽综合征大鼠的作用
1、材料
1.1实验动物
80只SPF级健康雄性SD大鼠由由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供,实验动物生产许可格证号SCXK(苏)2017-0001。受试动物引进后饲养观察1周。
1.2主要材料与试剂
膨胀海绵:惠州华扬医疗器械有限公司;
南京(特醇)香烟:由江苏中烟南京卷烟厂生产,焦油量:12mg烟气烟碱量:1.2mg一氧化碳量:12mg;
水合氯醛:南京森贝伽生物科技有限公司;
大鼠IL-8试剂盒:博士德生物lotNO.13414537704;
大鼠TNF-a试剂盒:博士德生物lotNO.24014500704。
1.3主要仪器
酶标仪:MD公司(M2e型);
DT-100电子分析天平:北京光学仪器厂;
自制风箱大小约50cm×50cm×50cm。
2、实验方法
2.1动物造模
先将大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,取膨胀明胶海绵片(3mm×5mm)放进大鼠左侧鼻腔内,距离前鼻孔约15mm的位置,即窦口鼻道复合体处。用移液器吸取0.5mL金黄色葡萄球菌悬浊液缓慢滴入左侧鼻腔内,海绵滞留4周后,每天进行被动吸烟,连续20天。具体方法为:每天上午将大鼠置于自制的风箱内,同时点燃3支香烟进行烟熏,持续约20min后,再点燃3支香烟,共燃烧9支香烟。实验结束6h后进行第2次吸烟。
通过记录大鼠抓鼻、咳嗽、喷嚏、咯痰样次数来评估鼻窦及咽喉不适程度。方法如下:(1)抓鼻、喷嚏:轻度抓鼻1分;频繁抓鼻2分;抓鼻不止3分。(2)咳嗽:2个以内1分,3~5个2分;5个以上3分。(3)清喉:轻度咯痰样1分;中度咯痰样2分;咯痰样不止3分。从造模最后一次烟熏结束后观察30min内大鼠的症状,采用叠加法记分,总分超过5分视为动物造模成功。
2.2大鼠分组及给药
取40只造模成功的大鼠,随机分为模型组,中药复方口服液低、中、高剂量(0.8、1.6、3.2g生药/kg)组,每组10只。同时取随机抽取10只未造模的大鼠做为空白组。中药复方低、中、高治疗组根据大鼠体重,每天进行灌胃,连续给药10天。模型组同样根据体重给予生理盐水。
2.3大鼠血样采集
在治疗10天后,进行眼眶取血后离心取血清用于炎症因子的检测。
2.4统计学处理
数据均以mean±SD表示,采用SPSS 11.5软件进行统计处理,组间比较用t检验。
3、实验结果
2.1模型炎性症状观察
在连续进行被动吸烟20天后,模型组由于长时间鼻腔填塞和吸入烟雾,出现抓鼻,打喷嚏,发作性咳嗽,清嗓子,咯痰样,易激惹,饮水量明显增多的症状,并且活动频繁且烦躁不安。而空白组大鼠没有发现任何不适的表现。造模后选取鼻窦-咽部炎症状累计积分平均达到5分以上的大鼠进行后续实验。
在治疗过程中的第10天,将大鼠置于自制的风箱内,同时点燃3支香烟进行烟熏,共燃烧9支香烟。仔细记录大鼠抓鼻、咳嗽、喷嚏、咯痰样次数。从表2可以看出治疗前,模型组,中药复方低、中、高剂量治疗组炎性评分数值无统计学区别,在治疗10天后,中药复方口服液低、中、高剂量组呈现剂量相关性,中、高剂量组指数相较于模型组明显下降,表明该中药口服液能够明显抑制大鼠上气道咳嗽综合征。
表2中药复方口服液对大鼠炎性症状的影响(mean±SD,n=10)
与模型组治疗后比较*p<0.05**P<0.01。
2.2血清中炎症因子IL-8、TNF-a水平
在治疗结束后,通过眼眶取血,离心后分离血清,利用ELISA试剂盒检测血清中的炎症因子IL-8、TNF-a,实验发现模型组与空白组比较,炎症因子IL-8、TNF-a都有明显上升,而中药复方口服液治疗后,这两种炎症都成剂量相关性下降,表明该中药复方口服液能都一定程度抑制血清中炎症因子的产生,进而缓解症状。
表3中药复方口服液对血清中炎症因子的影响(mean±SD,n=10)
与空白组比较#P<0.05;与模型组比较*p<0.05**P<0.01。
实施例5中药组合物治疗上气道咳嗽综合征的临床观察
1、病例选择
本组病例均为2015年1月至2018年1月确诊的上气道咳嗽综合征的患者,年龄8~60岁,200例患者随机分为治疗组(中药复方口服液)120例,对照组(美敏伪麻溶液)80例。两组在性别、年龄、病程和病情分布上无统计学意义(P>0.05)。
2、诊断标准
2.1西医诊断标准
(1)发作性或持续性咳嗽;
(2)可有鼻窦炎病史;
(3)鼻后滴流感、咽部异物感及咽后壁黏液附着感,经常需清喉,可伴鼻塞、流涕及咽痒;
(4)查体见咽后壁滤泡增生,鹅卵石样观;
(5)鼻窦x线片或鼻窦CT示鼻窦黏膜增厚,窦腔模糊不清或有液平面。
2.2中医诊断标准
咳嗽,咯痰不爽,早晚咳重,鼻内肌膜红肿,鼻塞时轻时重,倒流涕黄白粘稠量多,头痛咽干或咽异物感,舌淡红,苔白或微黄,脉滑。
3、治疗方法
治疗组给予各中药复方口服液,口服,每日3次,每次用量相当于各生药材40g;对照组美敏伪麻溶液(惠氏制药有限公司)口服10ml/次,每日3次。12岁以下儿童:16~21公斤,3毫升/次,一日3次。>7~9岁:22~27公斤,4毫升/次,一日3次;疗程均为14天。
4、疗效标准
上气道咳嗽综合征为非独立性疾病,而且病因多样,本研究以患者主诉症状基本或完全消失,相应原发病客观检查基本或完全恢复正常为判断指标。
表4上气道咳嗽综合征疗效判断标准
5、结果
表5中药复方口服液治疗上气道咳嗽综合征疗效结果
运用本发明实施例1的中药复方口服液治疗上气道咳嗽综合征。结果表明中药复方口服液治疗组临床改善总有效率80.8%,显效率为44.2%;对照组临床改善总有效率76.3%,显效率为36.3%。且在该临床治疗观察中未发现中药复方口服液的毒副作用,表明该中药复方口服液对感冒、炎症、鼻塞等上气道咳嗽综合征一系列疾病或症状具有良好的治疗效果。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种中药组合物在制备治疗上气道咳嗽综合征药物中的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:羚羊角5-15份或山羊角50-150份、平贝母10-60份、大黄15-60份、黄芩7-30份、青礞石7-30份、石膏10-50份、人工牛黄5-20份、甘草15-60份。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:羚羊角8-12份或山羊角80-120份、平贝母15-55份、大黄20-35份、黄芩10-18份、青礞石10-18份、石膏15-25份、人工牛黄8-12份、甘草20-35份。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:羚羊角9.45份、平贝母17.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述中药组合物包括:山羊角94.5份、平贝母47.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用,其特征在于,所述治疗上气道咳嗽综合征药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述治疗上气道咳嗽综合征药物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
7.根据权利要求1-4任一所述的应用,其特征在于,所述中药组合物制备方法包括以下步骤:取羚羊角或山羊角镑成丝,用含碱水溶液水解,滤过,取滤液浓缩;取青礞石、石膏粉碎成粗粉,水加热煎煮,滤过,取滤液浓缩;取人工牛黄用70%乙醇提取,滤过,滤液浓缩;其余药材,加水煎煮,滤液浓缩并离心后,上清液加乙醇沉淀,静置,取上清液,滤过,滤液浓缩;将上述浓缩液混合,即得。
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