CN109806402A - 一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针、其制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针、其制备方法及应用。所述肿瘤靶向的荧光纳米链探针包括作为载体的自组装纳米链，以及负载于所述自组装纳米链上的荧光材料和肿瘤靶向配体，所述荧光材料和肿瘤靶向配体经化学交联负载于所述自组装纳米链上。所述制备方法包括：将双亲性多肽自组装形成自组装纳米链；利用化学交联的方式将荧光材料和肿瘤靶向配体分别化学交联至所述自组装纳米链上。本发明的肿瘤靶向的荧光纳米链探针具有近红外荧光肿瘤靶向的特性，可实现对肿瘤细胞的高效体内外靶向，为肿瘤的诊断及手术导航中可克服传统手术难以实时监测和指导的困难，为腹腔转移瘤等一系列肿瘤的手术治疗提供一种可视化和精准化的导航工具。

Description

一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针、其制备方法及应用

技术领域

本发明涉及一种肿瘤靶向性纳米链，具体涉及一种基于近红外二区量子点的肿瘤靶向的荧光纳米链探针及其制备方法，以及其在肿瘤检测及手术导航中的应用，并属于纳米生物材料技术领域。

背景技术

世界肿瘤的发病率逐年增高，肿瘤致死人数巨大。肿瘤的治疗手段主要有化学治疗、放射治疗、手术治疗等。手术治疗是实体瘤的首选治疗手段。其优势主要体现在以下方面：可以显著减少肿瘤体积，延长患者生存期；无耐药性问题；相比于化疗和放射治疗，手术治疗一般为一次性操作，费用相对而言低。而成功实时手术的关键在于清晰界定肿瘤边界、发现隐匿的微小病灶，精准的影像手术导航技术可为其提供强有力的工具。

在多种成像形式中，荧光成像技术由于其直观可视化、实时便捷、可实现多通道检测、高灵敏性、无辐射等优点在生物医学成像中具有独特优势。而近红外荧光在生物组织内具有良好的穿透性、背景干扰小和分辨率高，能够实现非侵入式的实时深层组织成像，因此，在生物成像应用中具有显著优势。近红外荧光可分为近红外一区(NIR-I，650-950nm)和近红外二区(NIR-II，1000-1700nm)两个窗口，其中近红外二区具有更高的组织穿透深度和更高的信噪比，被视为最具发展潜力的新一代活体荧光影像技术。

靶向性是纳米荧光探针应用的关键性因素。肿瘤细胞表面会显著性的高表达特异性肿瘤标志物(例如整合素α_vβ₃)，这为肿瘤检测提供了一个很好的靶标。但是传统手术都存在难以实时监测和指导的困难，因此，如何实现对肿瘤的高灵敏度检测成为了业界亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的主要目的就是针对以上现状，提供一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针及其制备方法，以克服现有技术中的不足。

本发明的另一目的还在于提供所述肿瘤靶向的荧光纳米链探针的应用。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其包括：作为载体的自组装纳米链，以及负载于所述自组装纳米链上的荧光材料和肿瘤靶向配体。

在一些实施例中，所述荧光材料和肿瘤靶向配体经化学交联负载于所述自组装纳米链上。

进一步地，所述肿瘤靶向配体包括多肽、小分子、抗体和核酸适配体中的任意一种或两种以上的组合。

本发明实施例还提供了前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针的制备方法，其包括：

将双亲性多肽自组装形成自组装纳米链；

利用化学交联的方式将荧光材料和肿瘤靶向配体分别化学交联至所述自组装纳米链上。

本发明实施例还提供了前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针在制备肿瘤靶向荧光成像试剂、肿瘤细胞标记或肿瘤手术摘除导航领域中的用途。

相应的，本发明实施例还提供了一种肿瘤细胞标记方法，其包括：使待标记的肿瘤细胞与前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针共孵育，实现对肿瘤细胞的标记。

与现有技术相比，本发明的优点包括：

本发明利用自组装纳米链为载体，利用了化学交联的方法合成具有近红外荧光信号的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，实现多个近红外二区量子点的富集，可充分发挥近红外二区荧光特性，具有近红外荧光探针的优良特性，如可实现高组织穿透深度、高时间分辨率、高空间分辨率等。同时，通过表面功能化修饰可赋予纳米链探针以肿瘤靶向的功能。继而此纳米链结构具有近红外荧光肿瘤靶向的特性，可实现对肿瘤细胞的高效体内外靶向，为肿瘤的诊断及手术导航中可克服传统手术难以实时监测和指导的困难，为腹腔转移瘤等一系列肿瘤的手术治疗提供一种可视化和精准化的导航工具。

附图说明

图1是本发明实施例1中的CAP-Ag₂S-RGD的透射电镜图。

图2是本发明实施例1中的细胞标记荧光图。

图3a-图3c分别是本发明实施例1中的细胞标记毒性检测图。

图4是本发明实施例1中的活体成像图。

图5是本发明实施例1中的肿瘤切片病理图。

图6是本发明实施例1中靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD的制备流程图。

具体实施方式

下文将对本发明的技术方案作更为详尽的解释说明。但是，应当理解，在本发明范围内，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

鉴于现有技术中的不足，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案，其主要是：双亲性多肽通过自组装获得纳米链结构；利用化学交联反应，通过氨基与羧基形成酰胺键，将荧光材料化学偶联到上述制备的纳米链上；利用化学交联反应，将肿瘤靶向配体化学偶联到纳米链上。如下将结合附图对该技术方案、其实施过程及原理等作进一步的解释说明。

本发明实施例的一个方面提供的一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针包括：作为载体的自组装纳米链，以及负载于所述自组装纳米链上的荧光材料和肿瘤靶向配体，同时具有成像功能和靶向特性。

在一些实施例中，所述荧光材料和肿瘤靶向配体经化学交联负载于所述自组装纳米链上。

进一步地，所述化学交联的方式主要为氨基-羧基交联、巯基-巯基交联和氨基-巯基交联等中的任意一种或两种以上的组合，尤其优选为氨基-羧基交联和/或氨基-巯基交联为主要交联方式，但不限于此。

在一些实施例中，所述自组装纳米链：荧光材料：肿瘤靶向配体的摩尔比为1～1000：1～1000：1～1000。

本发明所述体系利用将自组装纳米链偶联上荧光材料和肿瘤靶向配体，具有良好的水溶性及生物相容性，组装通过化学交联进行。总体上，本发明系统中，各组分的量以摩尔计，所述自组装纳米链：荧光材料：肿瘤靶向配体的摩尔比例可以为1～1000：1～1000：1～1000。应理解，在实践中，本领域技术人员可以根据实际情况，选择适当的比例，而不影响本发明的目的。

在一些实施例中，所述自组装纳米链由双亲性多肽自组装而成。

进一步地，所述双亲性多肽具有双亲性而且易被调控为纳米链结构。

进一步地，所述双亲性多肽包括CAP多肽。

在一些实施例中，所述荧光材料包括荧光发射位于近红外区的量子点。

进一步地，所述量子点的荧光发射位于近红外二区，其中发射波长在1000～1700nm之间。研究表明近红外二区具有更高的空间分辨率和更好的组织穿透深度，与传统的可见光区(400-650nm)和近红外一区(650-950nm)相比，近红外二区荧光(NIR-II 1000-1700nm)极大程度降低了生物组织对光子的散射和吸收，几乎没有生物自发荧光的干扰，并且在体内、体外经过不同程度的表面修饰后，呈现出比较好的生物相容性和更低的生物毒性。

进一步地，所述的近红外荧光量子点为近红外二区(NIR-II 1000-1700nm)，可以是1000、1100、1200nm等等。

进一步地，所述近红外荧光量子点包括Ag₂S、InAs、Ag₂Se、Ag₂Te和Ag₂Se_xS_1-x等中的任意一种或两种以上的组合，其中x＝0.1～0.9，尤其优选为Ag₂S，但不限于此。

进一步地，本发明选择位于近红外二区的Ag₂S量子点，该量子点具有近红外二区荧光成像的特点。

因近红外荧光量子点能够实现近红外II区的成像，而NIR-II区荧光技术有着高空间分辨率和组织穿透力深等优势。且在NIR-II区波长范围内，生物组织产生的自发荧光极弱，生物成像结果有很高的信噪比。因此，本发明利用CAP自组装纳米链为载体，实现多个近红外二区量子点的富集，可充分发挥近红外二区荧光特性。同时，通过表面功能化修饰可赋予纳米链以肿瘤靶向的功能。继而此纳米链结构具有近红外荧光肿瘤靶向的特性。

在一些实施方案中，所述肿瘤靶向配体包括多肽(例如RGD肽)、小分子(例如叶酸)、抗体及核酸适配体等中的任意一种或两种以上的组合，但不限于此。

进一步地，RGD肽是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列的短肽，广泛存在于生物体内，是整合素(α_vβ₃)与其配体蛋白相互作用的主要识别位点。

本发明实施例的另一个方面还提供了前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针的制备方法，其包括：

将双亲性多肽自组装形成自组装纳米链；

利用化学交联的方式将荧光材料和肿瘤靶向配体分别化学交联至所述自组装纳米链上。

在一些实施例中，所述制备方法具体包括：利用化学交联反应，通过氨基与羧基形成酰胺键，将荧光材料化学偶联到所述自组装纳米链上；以及，利用化学交联反应，将肿瘤靶向配体化学偶联到所述自组装纳米链上。基于肿瘤靶向配体与肿瘤细胞表面标志物间高特异性亲和作用，将肿瘤靶向配体化学交联至负载了多个近红外二区量子点的双亲性多肽纳米链上，可通过单个肿瘤靶向配体实现多个量子点对细胞的靶向，进而实现对肿瘤的高灵敏度检测。

进一步地，所述制备方法包括其利用自组装蛋白CAP纳米链为载体，负载多个近红外二区量子点，使其具有近红外荧光成像功能。其次，通过表面功能化修饰，将RGD肽偶联到CAP纳米链上，使荧光纳米链具有靶向的特性。

进一步地，将双亲性蛋白CAP，通过调控自组装的方式，获得CAP纳米链。

进一步地，所述化学交联的方式主要为氨基-羧基交联、巯基-巯基交联和氨基-巯基交联等中的任意一种或两种以上的组合，尤其优选为氨基-羧基交联和/或氨基-巯基交联为主要交联方式，但不限于此。

作为举例，化学交联的具体操作可以为：在缩合剂存在下，将原料于室温混合1-24小时。然而应理解，化学交联反应为本领域已知的化学反应，本领域技术人员在实际操作中可以根据需要或原料的不同选择合适的缩合剂、反应条件，进行化学交联反应。

例如，当化学交联为氨基-羧基交联时，缩合剂可以选用EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二酰亚胺)/NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)，或者HATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)/HBTU(o-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐)等，但不限于此。

例如，当化学交联为氨基-巯基交联时，缩合剂可以选用4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐，但不限于此。

本发明实施例的另一个方面还提供了前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针在制备肿瘤靶向荧光成像试剂、肿瘤细胞标记或肿瘤手术摘除导航等领域中的用途。

在一些较为优选的实施方案中，本发明利用透射电镜对上述方法制备的近红外靶向纳米链结构的形貌进行了表征。

例如，本发明实施例的另一个方面还提供了一种肿瘤细胞标记方法，其包括：使待标记的肿瘤细胞与前述肿瘤靶向的荧光纳米链探针共孵育，实现对肿瘤细胞的标记。

在一些实施方案中，本发明提供上述方法制备的靶向纳米链在肿瘤细胞标记的应用。具体地，选用两种不同的肿瘤细胞系，U87-MG细胞系和MCF-7细胞系。U87-MG细胞为α_vβ₃高表达的细胞系，而MCF-7则为α_vβ₃低表达的细胞系。将上述方法制备的靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD分别与U87-MG细胞和MCF-7细胞共孵育。结合Hoechst 33258商业染料对细胞进行细胞核定位，并在近红外荧光显微镜下检测两种细胞的荧光强度。

在一些实施方案中，选择流式细胞仪，利用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒对近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD标记的U87-MG细胞进行体外毒性评估。验证此近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD用于体外肿瘤细胞标记的安全性。

在一些较为优选的实施方案中，利用含生物发光的U87-MG细胞进行腹腔肿瘤注射构建腹腔肿瘤转移瘤。腹腔注射近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD后，结合生物发光信号，对荷瘤小鼠肿瘤的手术摘除实施可视化精准导航。

进一步地，选择切片HE染色作为肿瘤病理检测的标准。具体的，将上述荧光指导的结节做石蜡切片并进行苏木精和伊红染色，观察组织间的形态变化。

综上，本发明的肿瘤靶向的荧光纳米链探针具有近红外荧光肿瘤靶向的特性，可实现对肿瘤细胞的高效体内外靶向，为肿瘤的诊断及手术导航中可克服传统手术难以实时监测和指导的困难，为腹腔转移瘤等一系列肿瘤的手术治疗提供一种可视化和精准化的导航工具。

下面结合若干优选实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例都属于本发明保护的范围。以下实施例中采用的实施条件可以根据实际需要而做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。

实施例1

(1)近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD的制备方法

在超声条件下，取200μg CAP蛋白加入到9.8mL的10mM Tris-HCl(pH＝8.0)中。继续超声1小时，即得到成功自组装的CAP纳米链。取480μg Ag₂S加入到去离子水中，再加入EDC和NHS(0.2mg/mL)，搅拌下反应30分钟。30分钟后，将Ag₂S溶液加入到超滤管(30K)中，室温条件下4000rpm离心超滤15min。加入磷酸缓冲液(1X PBS)离心洗涤三次以去除EDC、NHS，条件不变。将得到的Ag₂S加入到上述完成自组装的CAP纳米链溶液中，在室温下避光搅拌反应2h。2h后反应结束加入230μg Sulfo-SMCC，继续维持反应条件搅拌。搅拌2h后，加入170μgRGD到反应液中，在避光条件下持续搅拌3h后终止反应。得到终反应液约20mL左右，将终反应液按照上述超滤浓缩的条件(30K的超滤管，4000rpm/15min)，浓缩至约5mL。加入磷酸缓冲液(1xPBS)重复洗涤三次后，得终产物CAP-Ag₂S-RGD。

近红外荧光靶向纳米链探针CAP-Ag₂S-RGD的制备流程参照图6所示。

(2)近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD的透射电镜表征

CAP-Ag₂S-RGD的TEM制样方法如下：吸取10μL样品滴加到含有碳膜层的铜网面，静置放置10min后，小心用滤纸将多余液体吸干后立即用磷钨酸溶液(2％)作为复染液，复染6min后滤纸吸干复染液，通风橱中晾干。CAP-Ag₂S-RGD的电镜图参照图1所示。

(3)近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD用于体外细胞标记靶向性检测

U87-MG细胞和MCF-7细胞进行消化处理，计数接种至三组共聚焦皿中(浓度为10⁵个/皿)。培养箱中孵育过夜。过夜贴壁后，PBS润洗细胞后，加入100μL用新鲜无血清的DMEM低糖培养基为溶剂配制的CAP-Ag₂S-RGD培养液(终Ag₂S浓度为80μg/mL)。于37℃培养箱中孵育3h。将培养液弃去，加入PBS溶液清洗细胞，重复3次。加入100μL Hoechst染色液(按Hoechst试剂盒说明书进行配制)，避光染色5min后，用PBS溶液清洗三次。用倒置荧光显微镜观察Hoechst染色情况以定位细胞核，近红外荧光显微成像系统观察细胞量子点的荧光标记效果。体外细胞荧光标记图参照考图2所示。

(4)近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD体外细胞标记的安全性评估

利用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒对CAP-Ag₂S-RGD标记的U87-MG细胞进行体外毒性评估。具体操作为：分别取1×10⁶个U87-MG细胞加入至6孔板内。细胞于培养箱中贴壁过夜，将上清吸弃。5个复孔依次加入2.5mL含CAP-Ag₂S-RGD培养基(终Ag₂S浓度为80μg/mL)。细胞培养箱中共孵育24h后，弃去上清培养液。加入无菌PBS溶液润洗两次后加入胰酶消化液消化收集细胞。离心弃上清，加入PBS溶液吹打细胞团块，计数后吸取10⁵个细胞1000rpm/5min离心。加入195μL Annexin V-FITC结合液重悬细胞后补加5μL Annexin V-FITC溶液。将细胞悬液置于冰上，室温避光孵育20min，期间数次震荡溶液。加入10μL PI溶液，于流式细胞仪上检测。体外细胞标记的毒性评估图参照图3a-图3c所示。

(5)近红外靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD用于体内肿瘤手术导航

荷瘤小鼠无菌腹腔注射水合氯醛溶液。待小鼠麻醉后，通过腹腔注射2mg荧光素酶底物D-luciferin，采集荷瘤小鼠的生物发光信号。腹腔注射200μL以PBS溶液配制的CAP-Ag₂S-RGD溶液(即腹腔给荷瘤小鼠的Ag₂S的含量为80μg/只)。使用近红外荧光活体成像系统采集不同时间点小鼠腹腔近红外荧光信号。与生物发光信号对比吻合程度，判断肿瘤荧光靶向情况。当近红外荧光信号与生物发光信号较好匹配时将荷瘤小鼠腹腔解剖开，分别采集小鼠腹腔内的生物发光信号和近红外荧光信号。进一步，在近红外荧光信号的指导下，将结节摘除。体内成像图参照图4所示。

(6)摘除结节切片的HE染色检测

将上述不同组别摘取的结节，用PBS溶液清洗后，加入5％多聚甲醛溶液避光固定过夜。固定后样品于石蜡切片机进行规范操作，切片厚度约为10μm(按结节最大横截面切片)。将切片继续按照以下步骤操作：二甲苯脱蜡－梯度酒精(无水乙醇、95％、80％、70％乙醇溶液)水化－苏木精染色－伊红染色－梯度酒精脱水－二甲苯透明－中性树胶封片－光学显微镜下观察。肿瘤切片病理图参照图5所示。

综上所述，本发明藉由上述技术方案，设计了一种基于近红外荧光靶向纳米链CAP-Ag₂S-RGD，具有精准靶向肿瘤细胞的特性。包括：双亲性多肽CAP的自组装获得CAP纳米链结构；利用化学交联反应，Ag₂S化学偶联到CAP纳米链上；利用化学交联反应，将RGD化学偶联到CAP纳米链上。本探针具有近红外荧光探针的优良特性，如可实现高组织穿透深度、高时间分辨率、高空间分辨率等。同时结合RGD靶向肽，可实现对肿瘤细胞的高效体内外靶向，为肿瘤的手术摘除供一种可视化导航治疗策略。

此外，本案发明人还利用前文所列出的其它原料以及其它工艺条件等替代实施例中的各种原料及相应工艺条件进行了相应试验，例如，还以小分子(叶酸)、抗体及核酸适配体作为肿瘤靶向肽，以Ag₂Se、InAs、InSb和Ag₂Se_xS_1-x作为量子点分别进行了试验，所获得的肿瘤靶向检测性能等亦较为理想，基本与实施例相似。故而此处不对各个实施例的验证内容进行逐一说明，仅以上述实施例作为代表说明本发明申请优异之处。

应当理解，上述实施例仅为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于包括：作为载体的自组装纳米链，以及负载于所述自组装纳米链上的荧光材料和肿瘤靶向配体。

2.根据权利要求1所述的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于：所述荧光材料和肿瘤靶向配体经化学交联负载于所述自组装纳米链上；优选的，所述化学交联的方式包括氨基-羧基交联、巯基-巯基交联和氨基-巯基交联中的任意一种或两种以上的组合，尤其优选为氨基-羧基交联和/或氨基-巯基交联。

3.根据权利要求1所述的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于：所述自组装纳米链：荧光材料：肿瘤靶向配体的摩尔比为1～1000：1～1000：1～1000。

4.根据权利要求1所述的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于：所述自组装纳米链由双亲性多肽自组装而成；优选的，所述双亲性多肽具有双亲性而且易被调控为纳米链结构；优选的，所述双亲性多肽包括CAP多肽。

5.根据权利要求1所述的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于：所述荧光材料包括量子点；优选的，所述量子点的荧光发射位于近红外二区，发射波长为1000～1700nm；优选的，所述量子点选自近红外二区量子点；优选的，所述量子点包括Ag₂S、InAs、Ag₂Se、Ag₂Te和Ag₂Se_xS_1-x中的任意一种或两种以上的组合，其中x＝0.1～0.9；尤其优选的，所述量子点为Ag₂S。

6.根据权利要求1所述的肿瘤靶向的荧光纳米链探针，其特征在于：所述肿瘤靶向配体包括多肽、小分子、抗体和核酸适配体中的任意一种或两种以上的组合；优选的，所述肿瘤靶向配体包括RGD肽和/或叶酸。

7.权利要求1-6中任一项所述肿瘤靶向的荧光纳米链探针的制备方法，其特征在于包括：

将双亲性多肽自组装形成自组装纳米链；

利用化学交联的方式将荧光材料和肿瘤靶向配体分别化学交联至所述自组装纳米链上。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于包括：利用化学交联反应，通过氨基与羧基形成酰胺键，将荧光材料化学偶联到所述自组装纳米链上；以及，利用化学交联反应，将肿瘤靶向配体化学偶联到所述自组装纳米链上；

优选的，所述化学交联的方式包括氨基-羧基交联、巯基-巯基交联和氨基-巯基交联中的任意一种或两种以上的组合，尤其优选为氨基-羧基交联和/或氨基-巯基交联；

优选的，所述氨基-羧基交联采用的缩合剂包括1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二酰亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺和/或2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/o-苯并三唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐；

优选的，所述氨基-巯基交联采用的缩合剂包括4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐。

9.权利要求1-6中任一项所述肿瘤靶向的荧光纳米链探针在制备肿瘤靶向荧光成像试剂、肿瘤细胞标记或肿瘤手术摘除导航领域中的用途。

10.一种肿瘤细胞标记方法，其特征在于包括：使待标记的肿瘤细胞与权利要求1-6中任一项所述肿瘤靶向的荧光纳米链探针共孵育，实现对肿瘤细胞的标记。