CN109799123A - 一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，包括以下步骤：准备好瑞氏吉姆萨工作液、PBS、固定液、适当的离子水及实验仪器；用移液枪将待检测溶液滴在载玻片上，并均匀涂抹在涂片上，并阴凉处自然风干；用固定液固定载玻片1‑3min，并将载玻片放置在染色架上；滴加瑞氏吉姆萨工作液至涂片上并均匀覆盖涂片，操作环境控制在室温环境下，时间控制在10‑15min；待染色完成后，将涂片放置在PBS中，并轻轻晃动涂片后静置5‑10min；取出静置后的涂片，并用离子水从涂片的一端冲洗；干燥后镜检。本发明通过将吉姆萨染液和瑞氏染液联合使用，能够得到更好的染色效果，并且使得染色时间缩短，可以进行快速染色，镜检，辅助临床诊断。
Description
技术领域
本发明涉及瑞氏吉姆萨染色技术领域，具体为一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法。
背景技术
瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法，瑞氏染液中酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后，变成中性之伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青，此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色，由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚，吉姆萨染液由天青，伊红组成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同；嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质；为兼顾二者之长，可用复合染色法，但传统的流程染色时间较长，染色过程中需在玻片上将染液A与染液B通过吹打混匀，比较繁琐，为此，我们提出一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法。
发明内容
发明的目的在于提供一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，包括以下步骤：
准备好瑞氏吉姆萨工作液、PBS、固定液、适当的离子水及实验仪器；
用移液枪将待检测溶液滴在载玻片上，并均匀涂抹在涂片上，并阴凉处自然风干；
用固定液固定载玻片1-3min，并将载玻片放置在染色架上；
滴加瑞氏吉姆萨工作液至涂片上并均匀覆盖涂片，操作环境控制在室温环境下，时间控制在10-15min；
待染色完成后，将涂片放置在PBS中，并轻轻晃动涂片后静置5-10min；
取出静置后的涂片，并用离子水从涂片的一端冲洗；
干燥后镜检。
优选的，步骤1中的所述瑞氏吉姆萨工作液包括瑞氏工作液和吉姆萨工作液。
优选的，所述吉姆萨工作液的制备方法包括以下步骤：
按照各组份的重量份数准备好吉姆色素染料1份、甘油83.5份和甲醇52.5份；
将称量好的吉姆色素染料与与甘油混合，并通过超声波搅拌均匀，使吉姆色素染料与与甘油充分溶解；
向上一步骤中所得混合液中加入全部甲醇，再次搅拌混合；
向上一步骤中所得混合液中加入PBS，将上一步骤中所得混合液稀释10倍；
所得即为吉姆萨工作液。
优选的，吉姆萨工作液现用现配，且配置完成的吉姆萨工作液在5℃～35℃环境保存。
优选的，步骤1中的所述固定液包括3体积份数的乙醇和1体积份数的冰乙酸。
优选的，所述吉姆色素染料与与甘油混合时，控制混合液温度为60°，保持温度2h。
优选的，所述载玻片以及涂片在使用前均清理干净。
本发明的有益效果：将吉姆萨染液和瑞氏染液联合使用，能够得到更好的染色效果，并且使得染色时间缩短，可以进行快速染色，镜检，辅助临床诊断。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供的一种技术方案：一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，包括以下步骤：
S10、准备好瑞氏吉姆萨工作液、PBS、固定液、适当的离子水及实验仪器；
S20、用移液枪将待检测溶液滴在载玻片上，并均匀涂抹在涂片上，并阴凉处自然风干；
S30、用固定液固定载玻片1-3min，并将载玻片放置在染色架上；
S40、滴加瑞氏吉姆萨工作液至涂片上并均匀覆盖涂片，操作环境控制在室温环境下，时间控制在10-15min；
S50、待染色完成后，将涂片放置在PBS中，并轻轻晃动涂片后静置5-10min；
S60、取出静置后的涂片，并用离子水从涂片的一端冲洗；
S70、干燥后镜检。
步骤1中的所述瑞氏吉姆萨工作液包括瑞氏工作液和吉姆萨工作液。
所述吉姆萨工作液的制备方法包括以下步骤：
S1、按照各组份的重量份数准备好吉姆色素染料1份、甘油83.5份和甲醇52.5份；
S3、将称量好的吉姆色素染料与与甘油混合，并通过超声波搅拌均匀，使吉姆色素染料与与甘油充分溶解；
S5、向上一步骤中所得混合液中加入全部甲醇，再次搅拌混合；
S7、向上一步骤中所得混合液中加入PBS，将上一步骤中所得混合液稀释10倍；
S9、所得即为吉姆萨工作液。
吉姆萨工作液现用现配，且配置完成的吉姆萨工作液在5℃～35℃环境保存。
步骤1中的所述固定液包括3体积份数的乙醇和1体积份数的冰乙酸。
所述吉姆色素染料与与甘油混合时，控制混合液温度为60°，保持温度2h。
载玻片以及涂片在使用前均清理干净。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (7)
1.一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10、准备好瑞氏吉姆萨工作液、PBS、固定液、适当的离子水及实验仪器；
S20、用移液枪将待检测溶液滴在载玻片上，并均匀涂抹在涂片上，并阴凉处自然风干；
S30、用固定液固定载玻片1-3min，并将载玻片放置在染色架上；
S40、滴加瑞氏吉姆萨工作液至涂片上并均匀覆盖涂片，操作环境控制在室温环境下，时间控制在10-15min；
S50、待染色完成后，将涂片放置在PBS中，并轻轻晃动涂片后静置5-10min；
S60、取出静置后的涂片，并用离子水从涂片的一端冲洗；
S70、干燥后镜检。
2.根据权利要求1所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：步骤1中的所述瑞氏吉姆萨工作液包括瑞氏工作液和吉姆萨工作液。
3.根据权利要求2所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：所述吉姆萨工作液的制备方法包括以下步骤：
按照各组份的重量份数准备好吉姆色素染料1份、甘油83.5份和甲醇52.5份；
将称量好的吉姆色素染料与与甘油混合，并通过超声波搅拌均匀，使吉姆色素染料与与甘油充分溶解；
向上一步骤中所得混合液中加入全部甲醇，再次搅拌混合；
向上一步骤中所得混合液中加入PBS，将上一步骤中所得混合液稀释10倍；
所得即为吉姆萨工作液。
4.根据权利要求3所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：吉姆萨工作液现用现配，且配置完成的吉姆萨工作液在5℃～35℃环境保存。
5.根据权利要求1所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：步骤1中的所述固定液包括3体积份数的乙醇和1体积份数的冰乙酸。
6.根据权利要求2所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：所述吉姆色素染料与与甘油混合时，控制混合液温度为60°，保持温度2h。
7.根据权利要求1所述的一种快速进行瑞氏吉姆萨染色的方法，其特征在于：所述载玻片以及涂片在使用前均清理干净。
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