CN109705179A

CN109705179A - 一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法

Info

Publication number: CN109705179A
Application number: CN201910197318.6A
Authority: CN
Inventors: 李小冬; 李军涛; 尤雅莉; 田永强
Original assignee: Longde Bao Yi Holy Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Longde Bao Yi Holy Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-03-15
Filing date: 2019-03-15
Publication date: 2019-05-03

Abstract

本发明提供了一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，步骤如下：收集黄芩籽壳，干燥后粉碎；回流提取，收集提取液；将提取液浓缩，低温冷藏，过滤，调节pH值，加热保温，静置，过滤得一次中间体；加入水，搅拌均匀，调节pH值，搅拌均匀，加入乙醇，加热搅拌，调节溶液pH值，静置，过滤洗涤，过滤，得二次中间体；加入水，搅拌均匀，调节pH值，加入活性炭，充分搅拌，50℃下保温，加入乙醇，搅拌均匀后过滤，滤液调节pH值，保温，静置，过滤，滤饼用纯水洗涤即得。本发明的方法解决了灯盏花乙素提取率低的情况，方法简单易行，产品质量稳定，易于工业化生产，同时实现了黄芩废弃物的再利用问题，提升黄芩产业整体附加值。

Description

一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法

技术领域

本发明涉及一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法。

背景技术

黄芩为唇形科黄芩属植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，是我国的传统常用中药，国内70％的中成药均含有黄芩。由于黄芩药材临床用量较大，而野生资源逐渐匮乏，为了满足需求，人工栽培资源已成为黄芩药材的主要来源，且栽培面积和产量日益增加。在采收黄芩根的过程中产生了大量的黄芩地上部分等非传统药用部位，黄芩地上部分包括地上的茎、叶、花和籽壳，每年的产量约是根产量的3倍，约4.2万吨，且绝大部分地上部分未被有效利用而废弃，造成大量资源浪费及环境污染。上世纪八十年代开始，国内外学者开始对黄芩地上部分化学成分开始了深入研究，发现黄酮类化学成分为黄芩地上部分（花、茎和叶）含量最高且种类最为丰富的资源性化学成分。骆冉冉等在优化黄芩茎叶总黄酮提取工艺时测出茎叶中总黄酮含量可达5%。杨丽等利用乙醇回流法得到黄芩籽壳的总黄酮收率为11.67％。张文岭等利用反相高效液相色谱同时测定了黄芩茎叶中的野黄芩苷与黄芩苷的含量，叶中含量高达2.55%以上。而目前未有从黄芩籽壳中提取灯盏花乙素的相关研究。

灯盏花乙素具有扩张脑血管的作用，能降低脑血管阻力，增加脑血流量，改善微循环，并有对抗血小板聚集作用。临床使用量较大，传统的来源是从灯盏细辛中提取，相比灯盏细辛药材中灯盏花乙素的含量黄芩籽壳中要高出50%以上，药材成本要降低90%以上，而且在解决了大量的废弃物，可产生巨大的经济效益。

发明内容

要解决的技术问题：本发明提供了一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，选择的原料为中药加工过程的废弃物，且与选择黄芩茎叶相比更加合理和高效，解决了一般灯盏花乙素提取率低于60%的情况，并且不需要经过柱层析的方式就可对其进行分离纯化，该方法简单易行，且产品质量稳定，易于工业化生产。

技术方案：一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，包括以下步骤：

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后粉碎；

步骤2：加入8~12倍黄芩籽壳重量的提取溶剂，回流提取3次，收集提取液；

步骤3：将提取液浓缩至黄芩籽壳重量的1.5~3倍，低温冷藏12~24h，过滤，调节pH值至1.5~2.0，加热至70~80℃，保温30~60min，静置12~24h，过滤得一次中间体；

步骤4：向一次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.0~7.0，搅拌均匀，加入乙醇，调节溶液至乙醇体积含量为45~50%，加热至70~80℃，搅拌30~60min，使用酸溶液调节溶液pH值至1.5~2.0，静置12~24h，过滤，用1~2倍量纯水洗涤3~5次，过滤，得二次中间体；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.0～7.0，加入0.5~1wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至1.5~2.0，70~80℃保温30min，静置12h，过滤，滤饼用1~2倍量纯水洗涤3~5次，即得高纯度灯盏花乙素。

进一步的，所述黄芩籽壳为8~10月份采收的黄芩晾晒干的种荚，包括种子。

进一步的，所述步骤1中，黄芩籽壳粉碎至100-200目。

进一步的，所述步骤2中，提取溶剂为乙醇或碱水，乙醇浓度为60~80%，碱水为使用浓度为30~50%NaOH或KOH溶液进行配制，溶液pH值为7~8，提取时间为30~60min。

进一步的，所述步骤2中，提取时间为30~40min。

进一步的，步骤4中，乙醇浓度为90~99.99%，酸溶液为1~2mol/l盐酸溶液。

有益效果：

1. 以黄芩废弃物黄芩籽壳为原料进行提取，实现了废弃物的利用，提高了经济价值。

2. 提取纯化方法简单，不需要经过柱层析等方式，简单易行，成本低。

3. 所提取得到的灯盏花乙素纯度高，最高可达98.25%。

4. 当应用于工业化生产时，实施例4可以看出，其纯度依然可以高达97.32%，适宜于工业化生产。

5. 按照目前废弃籽壳的数量计算，每年产生100吨以上原料，结合市场目前灯盏花乙素的价格，每年可产生超过2000万经济效益。

具体实施方式

实施例1

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后称取50g粉碎；

步骤2：加入500mL pH为8的碱水，回流提取3次，收集提取液；

步骤3：将提取液浓缩至100mL，10℃冷藏16h，过滤，调节pH值至1.5，加热至80℃，保温40min，静置16h，过滤得一次中间体；

步骤4：向一次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.5，搅拌均匀，加入乙醇，调节溶液至乙醇体积含量为50%，加热至75℃，搅拌40min，使用1mol/l盐酸溶液调节溶液pH值至2.0，静置24h，过滤，用2倍量纯水洗涤5次，过滤，得二次中间体；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至7.0，加入0.7wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至2.0，75℃保温30min，静置12h，过滤，滤饼用2倍量纯水洗涤5次，即得高纯度灯盏花乙素1.13g。

经测定，50g干燥黄芩籽壳中灯盏花乙素含量为1.19g，计算得灯盏花乙素的提取率为94.96%。

同时，经HPLC检测，所得高纯度灯盏花乙素中灯盏花乙素含量为98.25%。

实施例2

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后称取100g粉碎，经HPLC检测粉末灯盏花乙素含量为2.83%；

步骤2：加入1100mL pH为7.5的碱水，回流提取3次，收集提取液；

步骤3：将提取液浓缩至300mL，8℃下冷藏20h，过滤，调节pH值至2.0，加热至75℃，保温50min，静置20h，过滤得一次中间体；

步骤4：向一次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.5，搅拌均匀，加入乙醇，调节溶液至乙醇体积含量为48%，加热至75℃，搅拌50min，使用1mol/l盐酸溶液调节溶液pH值至1.8，静置20h，过滤，用2倍量纯水洗涤5次，过滤，得二次中间体；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至7.0，加入0.8wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至1.8，75℃保温30min，静置12h，过滤，滤饼用2倍量纯水洗涤5次，即得高纯度灯盏花乙素2.19g。

经测定，100g干燥黄芩籽壳中灯盏花乙素含量为2.38g，计算得灯盏花乙素的提取率为92.02%。

同时，经HPLC检测，所得高纯度灯盏花乙素中灯盏花乙素含量为98.07%。

实施例3

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后称取100g粉碎，经HPLC检测粉末灯盏花乙素含量为2.63%；

步骤2：加入1100mL 浓度为60~80%的乙醇溶液，回流提取3次，收集提取液；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至7.0，加入0.8wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至1.8，75℃保温30min，静置12h，过滤，滤饼用2倍量纯水洗涤5次，即得高纯度灯盏花乙素2.15g。

经测定，100g干燥黄芩籽壳中灯盏花乙素含量为2.38g，计算得灯盏花乙素的提取率为90.33%。

同时，经HPLC检测，所得高纯度灯盏花乙素中灯盏花乙素含量为97.83%。

实施例4

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后称取100kg进行粉碎，经HPLC检测粉末灯盏花乙素含量为2.79%；

步骤2：投入至2吨提取罐中，加入800L pH为7.5的碱水，回流提取3次，收集提取液2100L；

步骤3：将提取液浓缩至200L，8℃冷藏12h，过滤，调节pH值至1.5，加热至80℃，保温30min，静置24h，过滤得一次中间体；

步骤4：向一次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至7.0，搅拌均匀，加入乙醇，调节溶液至乙醇体积含量为50%，加热至80℃，搅拌30min，使用1.5mol/l盐酸溶液调节溶液pH值至1.5，静置24h，过滤，用1.5倍量纯水洗涤3次，过滤，得二次中间体；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至7.0，加入0.5wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至2.0，80℃保温30min，静置12h，过滤，滤饼用2倍量纯水洗涤3次，即得高纯度灯盏花乙素2.16kg。

经测定，100kg干燥黄芩籽壳中灯盏花乙素含量为2.38kg，计算得灯盏花乙素的提取率为90.76%。

同时，经HPLC检测，所得高纯度灯盏花乙素中灯盏花乙素含量为97.32%。

对比例1

根据专利文本“CN201710806480-一种从黄芩茎叶中提取分离高纯度野黄芩苷的方法及野黄芩苷”中实施例3的方法对黄芩籽壳进行灯盏花乙素的提取，得到灯盏花乙素的产品收率为77.9%，经过HPLC检测纯度为93.76%。

对比例2

根据史高峰等研究论文“从黄芩茎叶粗提物中制备野黄芩苷的研究”中灯盏花乙素的提取工艺研究方法对黄芩籽壳进行灯盏花乙素的提取，使用了有毒试剂，经过HPLC检测纯度为92.16%。

Claims

1.一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：收集黄芩籽壳，干燥后粉碎；

步骤2：加入提取溶剂，回流提取3次，收集提取液；

步骤4：向一次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.0~7.0，搅拌均匀，加入乙醇，调节溶液至乙醇体积含量为45~50%，加热至70~80℃，搅拌30~60min，使用酸溶液调节溶液pH值至1.5~2.0，静置，过滤，用纯水洗涤，过滤，得二次中间体；

步骤5：向二次中间体中加入水，搅拌均匀，调节pH值至6.0～7.0，加入0.5~1wt%活性炭，充分搅拌，50℃下保温30min，加入乙醇，搅拌均匀后，立即过滤，滤液调节pH值至1.5~2.0，70~80℃保温30min，静置，过滤，滤饼用1~2倍量纯水洗涤，即得高纯度灯盏花乙素。

2.根据权利要求1所述的一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：所述黄芩籽壳为8~10月份采收的黄芩晾晒干的种荚，包括种子。

3.根据权利要求1所述的一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：所述步骤1中，黄芩籽壳粉碎至100-200目。

4.根据权利要求1所述的一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：所述步骤2中，提取溶剂为乙醇或碱水，乙醇浓度为60~80%，碱水为使用浓度为30~50%NaOH或KOH溶液进行配制，溶液pH值为7~8，提取时间为30~60min。

5.根据权利要求1所述的一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：所述步骤2中，提取时间为30~40min。

6.根据权利要求1所述的一种从黄芩籽壳中提取纯化高纯度灯盏花乙素的方法，其特征在于：步骤4中，乙醇浓度为90-99.99%，酸溶液为1~2mol/l盐酸溶液。