CN109662802A - 一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 - Google Patents
一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109662802A CN109662802A CN201811602474.8A CN201811602474A CN109662802A CN 109662802 A CN109662802 A CN 109662802A CN 201811602474 A CN201811602474 A CN 201811602474A CN 109662802 A CN109662802 A CN 109662802A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pain
- dysmenorrhea
- transfer rod
- group
- measurement
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 title claims abstract description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- 238000005259 measurement Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 230000004973 motor coordination Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 claims abstract description 63
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 claims abstract description 61
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 44
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 15
- 238000010171 animal model Methods 0.000 claims abstract description 8
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 claims abstract description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 31
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 29
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 claims description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 claims description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 abstract description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 18
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 14
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 3
- 239000002547 new drug Substances 0.000 abstract description 3
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 23
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 10
- HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N nimesulide Chemical compound CS(=O)(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1OC1=CC=CC=C1 HYWYRSMBCFDLJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 10
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000736199 Paeonia Species 0.000 description 8
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 8
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 7
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 7
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 5
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 5
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 5
- 235000000604 Chrysanthemum parthenium Nutrition 0.000 description 4
- 244000163122 Curcuma domestica Species 0.000 description 4
- 235000003392 Curcuma domestica Nutrition 0.000 description 4
- 240000007890 Leonurus cardiaca Species 0.000 description 4
- 235000000802 Leonurus cardiaca ssp. villosus Nutrition 0.000 description 4
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000003373 curcuma longa Nutrition 0.000 description 4
- 239000008956 guizhi-fuling Substances 0.000 description 4
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 235000013976 turmeric Nutrition 0.000 description 4
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 229960000965 nimesulide Drugs 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- SILDPWPVKZETMP-AMUMSSSMSA-N (2S)-1-[(4R,7S,10S,13S,16S,19R)-19-amino-7-(2-amino-2-oxoethyl)-10-(3-amino-3-oxopropyl)-13-[(2S)-butan-2-yl]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carbonyl]-N-[(2S,3S)-1-[(2-amino-2-oxoethyl)amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1)C(=O)NCC(N)=O SILDPWPVKZETMP-AMUMSSSMSA-N 0.000 description 2
- -1 20mg/kg) group Chemical compound 0.000 description 2
- UYIFTLBWAOGQBI-BZDYCCQFSA-N Benzhormovarine Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4O)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 UYIFTLBWAOGQBI-BZDYCCQFSA-N 0.000 description 2
- 101800004705 Mesotocin Proteins 0.000 description 2
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 2
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031951 Oxytocin-neurophysin 1 Human genes 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000003821 menstrual periods Effects 0.000 description 2
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MFSJSVNVUDQHLV-UHFFFAOYSA-N 2-(3-benzoylphenyl)propanoic acid Chemical group OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1.OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 MFSJSVNVUDQHLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005641 Adenomyosis Diseases 0.000 description 1
- 241000382455 Angelica sinensis Species 0.000 description 1
- 244000037364 Cinnamomum aromaticum Species 0.000 description 1
- 235000014489 Cinnamomum aromaticum Nutrition 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 244000236658 Paeonia lactiflora Species 0.000 description 1
- 235000008598 Paeonia lactiflora Nutrition 0.000 description 1
- 244000248825 Peltandra virginica Species 0.000 description 1
- 235000001188 Peltandra virginica Nutrition 0.000 description 1
- 208000029082 Pelvic Inflammatory Disease Diseases 0.000 description 1
- 235000008599 Poria cocos Nutrition 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 230000002929 anti-fatigue Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 201000009274 endometriosis of uterus Diseases 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-WKUFJEKOSA-N estradiol group Chemical group [C@@H]12CCC(O)[C@@]1(C)CC[C@@H]1C3=C(CC[C@@H]21)C=C(O)C=C3 VOXZDWNPVJITMN-WKUFJEKOSA-N 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 239000002266 menstruation inducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-MQYCRUOZSA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1C(CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-MQYCRUOZSA-N 0.000 description 1
- 229940082408 oxytocin injection Drugs 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
- A61D7/00—Devices or methods for introducing solid, liquid, or gaseous remedies or other materials into or onto the bodies of animals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pathology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法，其特征在于，该方法包括：以转棒式疲劳仪记录转棒转速并测量实验动物的跌落时间以确定其疼痛程度。本发明通过雌二醇和催产素对雌鼠进行诱导构建痛经模型，利用痛经疼痛使实验动物运动协调性下降或丧失基本参数的变化为特征，用鼠转棒式疲劳仪或类似器具通过跌落时间表征实验动物运动协调性的变化，以此来定量测量实验动物痛经性疼痛的程度，从而对痛经疼痛评价过程中运动协调性能评估。该测定方法敏感度强、重复性高，在相关科研、教学、产品应用、技术开发等领域有广泛用途，也可为治疗痛经新药的开发提供可靠的实验评估。
Description
技术领域
本发明涉及疼痛评价技术领域，特别涉及一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用。
背景技术
疼痛是一种令人不快的感觉和情绪上的感受，伴有实质上的或潜在的组织损伤，它是一种主观感受。其中痛经指女性在月经前后或行经期这段时间内出现的一系列不适症状，包括下腹部坠胀、疼痛、腰酸等，是最常见的妇科症状之一。在妇产科中，具体将痛经分为原发性痛经与继发性痛经两种，其中原发性痛经又称功能性痛经，指盆腔器官未有明显异常，无器质性病变的发生的痛经现象；而继发性痛经是指盆腔由于一系列的器质性疾病，如子宫肌腺症、子宫内膜异位症、慢性盆腔炎、子宫畸形等疾病所引起的痛经现象。我国早在1978年就设立妇女月经生理常数协作组，对全国13万妇女进行调查分析，而在2017年发布的《2017中国女性生理健康白皮书》中表明有接近70％的女性伴有轻度及以上的痛经现象，有超过12％的女性痛经已经对其生活产生不良影响，并且呈现早龄化的趋势。调查发现国内外痛经率每年呈上升趋势，国外痛经发生率远远高于国内，有报道称美国妇女90％均有痛经困扰。痛经严重影响女性的日常生活和正常工作，长期痛经不及时治疗反复，或者依靠止痛药来止痛，都会给女性的身体健康带来一定的不良影响，甚至会造成女性不孕。
常见的痛经模型的观察及测量指标目前主要是造模雌鼠的扭体反应，具体指对小白鼠或大白鼠腹腔注射某些药物所引起的一种刺激腹膜的持久性疼痛、且间歇发作的运动反应，表现为腹部收缩内凹、腹前壁紧贴笼底、臀部歪扭和后肢伸张，呈一种特殊姿势。由于镇痛药可对抗这一反应，因此这种现象曾被建议用为筛选镇痛药的方法。
在小鼠痛经模型中，痛经疼痛的表现是不明确和多样化的，比如同样处理的一批痛经模型小鼠，其疼痛表现存在明显差异：一些小鼠表现出明显的扭体，而有另一部分的小鼠相比正常组其活力降低，活跃程度明显下降，静待于笼内不动，毛色暗淡不光滑，说明其有疼痛产生，但小鼠并不表现扭体现象或者现象不明显，这为具体的实验造成了很大的不便，同时引入了强烈的主观意识，对实验结果产生很大影响，因此缺乏一致的客观评价标准。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种客观评价疼痛的方法，并建立疼痛评价的评分标准，该评分标准可以客观评价药品镇痛效果，不仅仅能进行痛经发病、疼痛、以及痛经相关不孕症等机制的实验性探索，而且在开发痛经相关预防、诊断、评分和预后等技术的转化医学和大数据上也有广泛的应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法，其特征在于，该方法包括：以转棒式疲劳仪记录转棒转速并测量实验动物的跌落时间以确定其疼痛程度。
具体地，所述方法包括：以转棒式疲劳仪作为测量仪器，检测动物运动协调性的改变情况，以动态观测反馈动物对疼痛的反应，并通过加载参数反映实验动物运动协调性的变化，并记录动物疼痛的相关数据。
优选地，所述疼痛为痛经引起的疼痛。
进一步地，该方法还包括建立动物痛经模型。
具体地，所述痛经模型通过注射雌二醇和催产素建立。
本发明还提出了一种建立疼痛评价的评分标准的方法，其特征在于，该方法包括：以转棒式疲劳仪记录转棒转速并测量实验动物的跌落时间，根据转棒转速以及跌落时间建立疼痛评价的评分标准。其中，所述疼痛优选为痛经引起的疼痛。
具体地，该方法包括：所述转棒转速优选设置为15rmp；当所述跌落时间t分别为0＜t≤3分钟、3＜t≤6分钟、6＜t≤9分钟、9＜t≤12分钟、t＞12分钟时，将实验动物的得分分别设为0、1、2、3、4分。
进一步地，前述使用的转棒式疲劳仪可以是通用成熟商品化的测量仪器，如北京众实迪创小鼠转棒式疲劳仪(型号：ZS-YLS-4C)。
本发明还提出了一种前述任一方法得到的所述评分标准在评价药品镇痛效果上的应用。
具体地，所述应用过程包括：基于所述评分标准，用统计学方法比较药品和正常组，或，药品和阳性对照组之间的差别。
转棒式疲劳仪是用于研究药物抗疲劳特性的仪器，有较好的实验性，是抗疲劳药物筛选和鉴定检测的理想工具，适用于大小鼠测试。其原理为：当被测动物体感疲劳，其动作协调性能下降或丧失，会从具有一定转速的转棒上跌落，因此其爬行时间相对较短。在小鼠痛经模型中，疼痛会造成雌鼠动作协调性能严重下降(扭体反应或静止不动)，小鼠在一定转速的转棒上爬行时间与正常对照组相比会显著变短；药物治疗组小鼠症状减轻，其相对爬行时间与未治疗组相比会相应变长，对时间变化进行分组计分，以此分数为参数来表征实验动物运动协调性能的变化。目前，尚未有利用转棒式疲劳仪进行治疗痛经药物效果测定评估的应用。
本发明建立痛经模型，利用转棒式疲劳仪，结合爬行时间作为指标表征疼痛评价过程中运动协调性能的变化，从而确立了疼痛的客观评价标准，因此避免了过去观测扭体反应的主观因素影响。转棒式疲劳仪作为十分成熟的商品化测量仪器，方便快捷，质量控制严格，参数条件一致，作为引入的痛经实验测量工具没有带入多余的误差可能。该方法将实验动物疼痛反应总体归纳为运动协调性下降或丧失，符合生物行为学要求；其规避小鼠在扭体现象中的个体差异，将衡量疼痛的指标转化为运动协调性能的变化并通过跌落时间、转棒转速等一系列组合参数进行表征，完全解决了实验结果主观性较强的缺陷。
本发明不仅仅能提供一种疼痛客观评价的标准，还可以利用此标准对治疗痛经药物效果进行测评，从而更好地预测药物的药理效果。本发明转棒式疲劳仪测量痛经疼痛的方法可用于疾病诊断治疗或非诊断治疗领域，在基础医学研究应用方面，可以利用该方法进行痛经发病、疼痛、以及痛经相关不孕症等机制的实验性探索；在生物医药产业方面，利用该方法测量疼痛程度和疼痛反应特征，进行痛经的预防、护理以及各类应用的研究和技术的开发，对治疗痛经、疼痛新药研发进行药效评价和安全性评估；另外，此方法在转化医学和大数据应用方面，例如利用测量方法建立痛经疼痛评分标准和数据库，对痛经疼痛检测技术进行优化，在开发痛经相关预防、评分和预后等技术也有着十分广泛的应用。
附图说明
图1为本发明中催产素诱导的痛经疼痛小鼠模型跌落时间测定及运动协调性得分示意图；
A图为未诱导的基准组(baseline)及oxytocin处理的痛经组的小鼠跌落时间(分钟)，n＝7；B图为跌落时间数据按表1折算的运动协调程度得分；**P<0.01，独立样本T检验。
图2为本发明中催产素诱导的痛经实验组织染色图(基准组baseline与oxytocin组的组织染色)；其中，基准组(baseline)未见明显组织水肿现象，oxytocin组可见明显组织水肿现象(箭头)。
图3为本发明中痛经模型对布洛芬的验证示意图；其中，
基准组(baseline，n＝7)与oxytocin组(n＝7)、placebo组进行独立样本T检验，**表示P<0.01；布洛芬(ibuprofen，50mg/kg，灌胃)组与oxytocin组独立样本T检验，##p<0.01。
图4为本发明中痛经模型对尼美舒利、奈普生及酮洛芬的验证示意图；其中，
基准组(baseline，n＝7)与oxytocin组进行独立样本T检验：**表示P<0.01；oxytocin组(n＝7)与尼美舒利(nimesulide，20mg/kg,灌胃，n＝7)、奈普生(naproxen，60mg/kg，灌胃，n＝7)、酮洛芬(ketoprofen，25mg/kg，灌胃，n＝7)组进行独立样本T检验，##P<0.01。
图5为本发明中痛经模型对当归和芍药的验证示意图；其中，
基准组(baseline，n＝7)与oxytocin组(n＝7)进行独立样本T检验：**表示P<0.01；oxytocin组与当归(Angelica sinensis，n＝7)、芍药(Paeonia lactiflora，n＝7)提取物组进行独立样本T检验，#P<0.05，##P<0.01。
图6为本发明中痛经模型对当归和芍药的验证示意图；其中，
基准组(baseline，n＝7)与oxytocin组(n＝7)进行独立样本T检验：**表示P<0.01；oxytocin组与商品中成药复方益母胶囊(FFYMc，n＝7)、桂枝茯苓胶囊(GZFLc，n＝7)、姜黄温经颗粒(JHWJp，n＝7)组进行独立样本T检验，##P<0.01。
具体实施方式
本发明建立了一种检测痛经疼痛评价过程中运动协调性能的方法及应用。以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员可根据本发明具体实施方案作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的本质精神，应均属于本发明所附权利要求的范围。
除特别指出，本发明提供的技术方案中所用药品、试剂、仪器均可由常规渠道或市场购得。
1动物、仪器与试药
实验动物：7-9周雌性ICR小鼠，体重约20-22g,购买于南京市江宁区青龙山动物繁殖场(许可证号SCXK(苏)2017-0001)。
实验试剂：雌二醇和催产素。
1).雌二醇：MedChem Express,Cat.No.HY-B1192/CS-4780.
2).催产素：MedChem Express,Cat.No.HY-17571A
测量装置：小鼠转棒式疲劳仪(厂家：北京众实迪创科技发展有限责任公司，型号：ZS-YLS-4C)
药物：
1).布洛芬：ibuprofen,sigma-aldrich,Lot#BCBJ1499V
2).尼美舒利：nimesulide,MedChem Express,Cat.No.HY-B0363
3).奈普生：naproxen,MedChem Express,Cat.No.HY-15030
4).酮洛芬：ketoprofen,MedChem Express,Cat.No.HY-B0227
5).当归：购买于和信堂生药厂
6).芍药：购买于和信堂生药厂(从桂枝茯苓文章中找到，和信堂三字不知正确与否)
7).复方益母胶囊：FFYMc,翔宇药业股份有限公司，国药准字Z20030006
8).桂枝茯苓胶囊：GZFLc,江苏康缘药业股份有限公司，国药准字Z10950005
9).姜黄温经颗粒：JHWJp,沈阳双鼎制药有限公司，国药准字Z20020036
2实验方法
a.向实验小鼠腹腔注射生理盐水100μl或雌二醇，连续注射3天，注射剂量为1mg/kg；
b.第4天在实验前1小时将实验鼠放在15rmp的转棒上使其适应转棒环境，待从转棒上跌落3次后认为已适应，之后进行灌胃，将待检测药物依照剂量要求进行溶解，通过灌胃针将药物灌至实验鼠胃中，等待30min药物被实验鼠充分吸收后腹腔注射催产素，诱发宫缩痛经性疼痛，注射剂量为50U/kg(100ul)；
c.腹腔注射催产素后将已适应转棒环境的实验鼠放在转速稳定(15rmp)的转棒上，待实验鼠跌落同时记录数据，即跌落时间(即滞留时间，分钟或秒，min或s)。根据所记录的数据，将跌落时间(分钟或秒)折算成对应的数值参数(见表1，score)定量描述实验鼠的运动协调性程度；在转棒速度15rmp条件下，生理盐水组小鼠滞留时间一般为15分钟左右，而雌二醇组一般小于3分钟；
d.在第4天注射催产素前30分钟对实验动物进行药物或生理盐水灌胃，注射催产素之后记录实验小鼠在转棒上的滞留时间；
e.将记录的数据按表1换算，计算各组平均跌落时间和标准差，并计算p值；
表1，小鼠跌落时间对应的得分参数换算及标准
f.统计生理盐水(baseline)组(即基准组)与诱导(oxytocin)组(即痛经组)实验小鼠的转棒滞留时间，并根据表1换算为对应的数值参数，见图1。为了佐证小鼠痛经模型诱导成功，在平行实验中，将生理盐水(baseline)组与痛经(oxytocin)组小鼠进行脊椎脱臼处死，取出小鼠子宫用4％多聚甲醛-PBS固定，将组织进行HE染色，观察组织水肿现象见图2。
g.统计生理盐水(baseline)组、诱导(oxytocin)组、布洛芬(ibuprofen,50mg/kg)组与安慰剂(placebo)组实验小鼠的转棒滞留时间对应数值参数，见图3；
h.统计生理盐水(base line)组、诱导(oxytocin)组、尼美舒利(nimesulide,20mg/kg)组、奈普生(naproxen,60mg/kg)组、酮洛芬(ketoprofen,25mg/kg)组实验小鼠的转棒滞留时间对应数值参数，见图4；
i.统计生理盐水(baseline)组、诱导(oxytocin)组、当归(1.2g/kg)组与芍药(1.2g/kg)组实验小鼠的转棒滞留时间对应数值参数，见图5；药液制备：分别称取适量当归、芍药，加10倍量水浸泡2小时后微沸煎煮2小时，过滤；药渣加8倍量水微沸煎煮1.5小时，过滤，合并2次滤液，加热浓缩制成每毫升相当5g生药的当归、芍药单煎液同时收集挥发油，混合入以上浓缩液中；
j.统计生理盐水(baseline)组、诱导(oxytocin)组、复方益母胶囊(FFYMc，700mg/kg)组、桂枝茯苓胶囊(GZFLc,300mg/kg)组、姜黄温经颗粒(JHWJp，800mg/kg)组实验小鼠的转棒滞留时间对应数值参数，见图6。
3实验结果
1.图1显示，诱导(oxytocin)组与生理盐水(baseline)组相比滞留时间明显缩短，根据表1换算对应得分后保持相同实验结果，表明实验模型构建成功，且得分对应后符合原始数据结果；
2.图2显示，诱导(oxytocin)组与生理盐水(baseline)组相比其在子宫内膜出现明显中性粒细胞浸润现象，说明组织严重水肿；
3.图3显示，与诱导(oxytocin)组相比布洛芬(ibuprofen)组明显延长实验小鼠转棒滞留时间，安慰剂(placebo)组则没有明显变化；
4.图4显示，与诱导(oxytocin)组相比尼美舒利(nimesulide)组、奈普生(naproxen)组、酮洛芬(ketoprofen)组明显延长实验小鼠转棒滞留时间；
5.图5显示，与诱导(oxytocin)组相比当归组明显延长实验小鼠转棒滞留时间，芍药组延长实验小鼠转棒滞留时间；
6.图6显示，与诱导(oxytocin)组相比复方益母胶囊(FFYMc)组、桂枝茯苓胶囊(GZFLc)组、姜黄温经颗粒(JHWJp)组明显延长实验小鼠转棒滞留时间。
以上用各种药物都能表明本方法所建立的评分标准能准确客观地对疼痛进行评价，该模型经多次重复实验，都说明了模型和疼痛测量方法可靠性。
本发明所建立方法，能检测治疗痛经药物效果，其在痛经发病机制研究、开发治疗痛经中西药物、药物靶标研究，提供客观实验数据并进行实验性治疗以及应用评估等方面有广泛的应用。本发明的方法敏感度强、重复性高，在相关科研、教学、产品应用、技术开发等领域有广泛用途，可为治疗痛经新药的开发提供可靠的实验评估。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法，其特征在于，该方法包括：以转棒式疲劳仪记录转棒转速并测量实验动物的跌落时间以确定其疼痛程度。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述疼痛为痛经引起的疼痛。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，该方法包括建立动物痛经模型。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述痛经模型通过注射雌二醇和催产素建立。
5.一种建立疼痛评价的评分标准的方法，其特征在于，该方法包括：以转棒式疲劳仪记录转棒转速并测量实验动物的跌落时间，根据转棒转速以及跌落时间建立疼痛评价的评分标准。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，该方法包括：所述转棒转速设置为15rmp；当所述跌落时间t分别为0＜t≤3分钟、3＜t≤6分钟、6＜t≤9分钟、9＜t≤12分钟、t＞12分钟时，将实验动物的得分分别设为0、1、2、3、4分。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述疼痛为痛经引起的疼痛。
8.根据权利要求5-7任一所述的方法，其特征在于，所述的转棒式疲劳仪为：型号ZS-YLS-4C的北京众实迪创小鼠转棒式疲劳仪。
9.权利要求5-7任一方法得到的所述评分标准在评价药品镇痛效果上的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，包括基于所述评分标准，用统计学方法比较药品和正常组，或，药品和阳性对照组之间的差别。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811602474.8A CN109662802A (zh) | 2018-12-26 | 2018-12-26 | 一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811602474.8A CN109662802A (zh) | 2018-12-26 | 2018-12-26 | 一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109662802A true CN109662802A (zh) | 2019-04-23 |
Family
ID=66146216
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811602474.8A Pending CN109662802A (zh) | 2018-12-26 | 2018-12-26 | 一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109662802A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110531076A (zh) * | 2019-07-19 | 2019-12-03 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种检测药物镇痛评价过程中cox-2酶活性的方法 |
Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1382145A (zh) * | 1999-08-24 | 2002-11-27 | 东丽株式会社 | 神经性疼痛治疗剂和神经性疼痛的动物模型 |
| US20060085865A1 (en) * | 2001-03-29 | 2006-04-20 | Allen Keith D | Transgenic mice containing GPCR-like gene disruptions |
| CN202999032U (zh) * | 2013-01-15 | 2013-06-19 | 岳桂华 | 实验用模拟眩晕测试器 |
| CN103405225A (zh) * | 2013-08-28 | 2013-11-27 | 深圳先进技术研究院 | 一种获取疼感评测指标的方法、装置及设备 |
| CN104232731A (zh) * | 2014-08-13 | 2014-12-24 | 四川省人民医院 | 盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞钙离子影响的评价方法 |
| CN104524545A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-04-22 | 南京中医药大学 | 一种寒凝血瘀型原发性痛经动物模型的造模方法 |
| CN105878251A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-08-24 | 上海市同济医院 | 帕金森病动物模型的制备方法及其用途 |
| CN106377533A (zh) * | 2016-09-08 | 2017-02-08 | 中国海洋大学 | 一种海参磷脂及其在提高机体运动协调能力制品中的应用 |
| CN106730159A (zh) * | 2017-01-16 | 2017-05-31 | 马挺 | 一种基于疼痛评估的电子输液泵自动调节输液参数的方法及系统 |
| CN107714046A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-02-23 | 安徽东石软件科技有限公司 | 转棒疲劳仪 |
| CN107736873A (zh) * | 2016-12-27 | 2018-02-27 | 上海浦灵生物科技有限公司 | 一种非人灵长类动物痛经模型的建立及痛经疼痛测定方法 |
| CN108780080A (zh) * | 2016-03-04 | 2018-11-09 | 泰尔茂株式会社 | 对由药液施予引起的疼痛进行评价的方法及药液施予的选定方法 |
-
2018
- 2018-12-26 CN CN201811602474.8A patent/CN109662802A/zh active Pending
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1382145A (zh) * | 1999-08-24 | 2002-11-27 | 东丽株式会社 | 神经性疼痛治疗剂和神经性疼痛的动物模型 |
| US20060085865A1 (en) * | 2001-03-29 | 2006-04-20 | Allen Keith D | Transgenic mice containing GPCR-like gene disruptions |
| CN202999032U (zh) * | 2013-01-15 | 2013-06-19 | 岳桂华 | 实验用模拟眩晕测试器 |
| CN103405225A (zh) * | 2013-08-28 | 2013-11-27 | 深圳先进技术研究院 | 一种获取疼感评测指标的方法、装置及设备 |
| CN104232731A (zh) * | 2014-08-13 | 2014-12-24 | 四川省人民医院 | 盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞钙离子影响的评价方法 |
| CN104524545A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-04-22 | 南京中医药大学 | 一种寒凝血瘀型原发性痛经动物模型的造模方法 |
| CN108780080A (zh) * | 2016-03-04 | 2018-11-09 | 泰尔茂株式会社 | 对由药液施予引起的疼痛进行评价的方法及药液施予的选定方法 |
| CN105878251A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-08-24 | 上海市同济医院 | 帕金森病动物模型的制备方法及其用途 |
| CN106377533A (zh) * | 2016-09-08 | 2017-02-08 | 中国海洋大学 | 一种海参磷脂及其在提高机体运动协调能力制品中的应用 |
| CN107736873A (zh) * | 2016-12-27 | 2018-02-27 | 上海浦灵生物科技有限公司 | 一种非人灵长类动物痛经模型的建立及痛经疼痛测定方法 |
| CN106730159A (zh) * | 2017-01-16 | 2017-05-31 | 马挺 | 一种基于疼痛评估的电子输液泵自动调节输液参数的方法及系统 |
| CN107714046A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-02-23 | 安徽东石软件科技有限公司 | 转棒疲劳仪 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 周茹，郝银菊，姚婉霞: "苦参碱对神经病理性疼痛小鼠疼痛行为学的影响", 《中药药理与临床》 * |
| 孙海燕，曹永孝，刘静: "小鼠痛经模型的建立", 《中国药理学通报》 * |
| 嵇波，张露芬，朱江: "痛经模型建立和评价方法的思考", 《中国药理学通报》 * |
| 肖程予，张会永，杨关林: "动物行为学在医学实验研究中应用", 《辽宁中医药大学学报》 * |
| 许咏思，嵇波，胡琅琳: "寒凝血瘀证痛经大鼠模型制备和评价方法述评", 《中国药学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110531076A (zh) * | 2019-07-19 | 2019-12-03 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种检测药物镇痛评价过程中cox-2酶活性的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107727753B (zh) | 百乐眠胶囊指纹图谱的建立方法 | |
| CN105194550B (zh) | 一种中药复方组合物及其在抗前列腺癌中的应用 | |
| CN102323371B (zh) | 一种止血药物致康胶囊的检测方法 | |
| Möller et al. | Measurement of subcutaneous adipose tissue topography (SAT‐Top) by means of a new optical device, LIPOMETER, and the evaluation of standard factor coefficients in healthy subjects | |
| CN104161847B (zh) | 一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN109260203A (zh) | 荜茇酰胺类化合物在制备抗痛风性关节炎药物中的应用 | |
| CN109662802A (zh) | 一种检测疼痛评价过程中运动协调性能的方法以及应用 | |
| CN114184717B (zh) | 一种基于谱效关系的兽用双黄连口服液质量检测方法 | |
| Lu et al. | Study on correspondence between prescription and syndrome and the essence of phlegm and blood stasis syndrome in coronary heart disease based on metabonomics | |
| Ezimah et al. | Absolute platelet count in adult patients with musculoskeletal pain: Current perspectives | |
| CN104155383B (zh) | 青蒲颗粒的检测方法 | |
| CN106153812A (zh) | 一种治疗子宫内膜异位症的中药制剂的检测方法 | |
| CN104007198B (zh) | 一种灵芝皇制剂hplc标准指纹图谱及其构建方法和应用 | |
| CN108143825A (zh) | 一种治疗银屑病的药物及其制备方法与检测方法 | |
| CN101288762A (zh) | 一种治疗产后恶露不行的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN101380359B (zh) | 健骨胶囊及其制备方法 | |
| CN110638990A (zh) | 一种桂枝芍药知母处方制剂提取物的提取工艺 | |
| CN115266975A (zh) | 一种鸡内金及其炮制品饮片、标准汤剂、配方颗粒中染料木苷的含量测定方法 | |
| CN107736873A (zh) | 一种非人灵长类动物痛经模型的建立及痛经疼痛测定方法 | |
| CN113759035A (zh) | 小承气汤指纹图谱的构建方法 | |
| CN106156512A (zh) | 一种中医药方用于类风湿性关节炎临床治疗的研究方法 | |
| CN106645475B (zh) | 原料药蜂蜡gc标准指纹图谱及其构建方法 | |
| CN106266476B (zh) | 葱籽总黄酮在制备治疗绝经前综合征药物中的应用 | |
| CN103120718B (zh) | 一种治疗慢性肝炎、肝硬化的药物组合物 | |
| Watanabe et al. | CT analysis of the use of the electrical impedance technique to estimate local oedema in the extremities in patients with lymphatic obstruction |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190423 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |