CN107736873A - 一种非人灵长类动物痛经模型的建立及痛经疼痛测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种非人灵长类动物痛经模型的建立方法以及非人灵长类动物痛经疼痛的测量原理。本发明使用雌激素和催产素组合诱导建立非人灵长类动物痛经性疼痛，并以一个测量装置来测量该疼痛。该装置测量疼痛时，介质加载单元与柔性扩充单元以连通管连接，柔性扩充单元置入动物阴道后，按预设程序加载介质使扩充单元膨大，测量监控单元分别与动物和介质加载控制单元连接，通过检测动物对疼痛的反应，反馈至介质加载控制单元，同时记录加载数据以定量测定痛经疼痛的程度。案例说明该测定方法敏感度和重复性高。本发明的痛经模型、痛经性疼痛测量原理和方法，在相关科研、教学、产品、技术开发等领域有广泛用途，也可为痛经疼痛新药开发提供实验评估。

Description

一种非人灵长类动物痛经模型的建立及痛经疼痛测定方法

技术领域

本发明涉及疼痛模型的建立，具体涉及一种激素诱导的非人灵长类动物痛经疼痛模型的建立方法。

技术背景

痛经指月经前后或行经期间出现的下腹部疼痛、坠胀、腰酸等不适，为最常见的妇科症状之一，特别在女性青春期，其发生率高达45％-80％，影响女性日常生活和工作，反复发生或发生严重的可导致不孕。痛经疼痛的表现是不明确和多样化的，缺乏一致的客观评价标准。

现有的痛经试验模型是建立在一些小型啮齿类动物上的(如大鼠和小鼠)，由于啮齿类动物在进化关系上、生理周期、激素调节、神经分布等与人类相距甚远，以其为模型研究所获得痛经相关的机制和实验性干预数据对现实指导意义不大。而非人灵长类动物在基因功能、生物演化、解剖特征、各系统生理功能、病理、以及对实验性药物干预的反应性等与人类极为相近，其子宫构造、月经周期、激素调节等与人类相同，是研究痛经及相关疼痛的理想和敏感实验动物。

建立非人灵长类动物痛经模型以及痛经疼痛的测量方法，为研究痛经，开发痛经相关产品和技术，对探索痛经诊断和治疗新方法提供了更为可靠实验评估工具。例如，在基础研究应用方面，可以以该模型进行实验性探索痛经发病、痛经疼痛、以及痛经相关不孕症等机制；在生物医药产业方面，可以以该模型进行针对痛经和痛经疼痛的潜在治疗药物和技术等进行评价；另外，该模型在转化医学和大数据应用方面，开发痛经相关(疼痛、不孕、生物标示物、遗传等)预测、评分、预防、诊断、和预后等技术也有着广泛的用途。

雌性激素是促进雌性附性器官成熟及第二性征出现，并维持正常性欲及生殖功能的激素。

催产素是一种哺乳动物激素，它能在分娩时引发子宫收缩。

目前，尚未有非人灵长类动物痛经疼痛模型的报道。本发明结合中国人工繁育非人灵长类实验动物大量存栏的产业资源，在非人灵长类实验动物上以激素诱导建立类似人痛经的状况，并以阴道膨胀对痛经性疼痛敏感反应的原理，结合观察动物的疼痛反应来定量测量痛经相关疼痛的程度。

本发明所建立痛经模型的疼痛表现与人类痛经有高度相似性，其在痛经的发病机制研究，药物靶标研究，开发治疗痛经药物和技术，提供实验数据和进行实验性治疗应用评估等方面有广泛的应用。

发明内容

本发明建立了一种非人灵长类动物痛经模型及痛经疼痛测定方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

a.适龄雌性非人灵长类实验动物；

b.定时、定量，给实验动物注射雌性激素，持续若干天；

c.在疼痛测量当天，于注射雌性激素1小时后，注射催产素诱发宫缩痛经性疼痛，以以下方法测量实验动物对疼痛感的反应：

a)阴道膨胀装置(图1)：柔性扩充单元通过连通管与介质加载单元连接，并可通过介质加载控制单元将介质按设定程序送入柔性扩充单元并使其直径扩张；

b)测量监控单元(图1)：实时监测动物的疼痛信号(如视频、图像分析、电生理等)，同时可对加载的压力、时间、体积、速率等编程，并传送至介质加载控制单元控制加载；

c)测量时，先将柔性扩充单元置入实验动物的阴道中：

i.启动测量监控单元以程序通过介质加载控制单元控制介质加载，柔性扩充单元在阴道内由介质加载而直径扩张；

ii.通过测量监控单元动态观察或反馈动物对疼痛的反应(如视频、图像分析、电生理等)时，通过分析将信号反馈到介质加载控制单元，停止介质注入，同时记录数据；

iii.根据所记录的数据，以介质加载的量、时间、速率、及压力等参数定量测定实验动物的疼痛程度。

本发明所提供的一种非人灵长类动物痛经模型及痛经疼痛测定方法，优选的是：创新使用非人灵长类动物作为实验动物，建立非人灵长类动物痛经疼痛及其定量测量方法。

本发明的优点是：

本发明的动物实验模型具有相关啮齿类动物模型无法实现的应用价值：

a、非人灵长类实验动物的生物进化、解剖特点、子宫构造、月经周期等，以及各系统生理功能和对疼痛和治疗的反应性与人类极为相近；

b、采用人工繁育非人灵长类实验动物，遗传背景清楚，质量控制严格，实验动物资源丰富；

c、以雌激素诱导产生非人灵长类实验动物的痛经与人类痛经相似。

本发明的动物实验模型在痛经和疼痛相关科研和产业化领域有广泛的用途，例如：

a、利用模型进行痛经疼痛的发生机制、诊断、生物标示物、和转化医学实验研究；

b、利用模型测量疼痛程度和疼痛反应特征，进行痛经的预防、护理、以及各类应用技术的研究开发，对新药研发进行药效及安全性研究和评价等；

c、利用模型建立痛经疼痛评分标准和数据库，进行痛经疼痛检测技术优化等。

以下通过具体实施方案对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

附图说明

图1，一种非人灵长类动物痛经疼痛测定方法：通过介质加载单元与柔性扩充单元以连通管连接，柔性扩充单元置入动物阴道后，通过介质加载控制单元控制介质加载单元向柔性扩充单元按预设程序加载介质，使柔性扩充单元直径扩张；测量监控单元分别与介质加载控制单元和待测动物疼痛信号连接，将程序信号传送至介质加载控制单元控制介质加载，同时对动物疼痛的反应变化动态检测，记录疼痛的相关数据。

图2，动物痛经测量示意图

具体实施方案

为了可以使本专业技术人员更全面地理解本发明,下面结合实施案例进一步阐述本发明，但不以任何方式限制本发明。

实验动物：选取月经正常、适龄的雌性食蟹猴(Macaca fascicularis)；

主要试剂：雌性激素和催产素；

阴道膨胀装置：包括柔性扩充单元、介质加载单元、介质加载控制单元；

测量监视单元：视频监视器；

方法：

a、每天定时、定量给实验猴注射雌性激素，连续注射多天；

b、测量时(见图2)，将阴道膨胀装置的柔性扩充单元与介质加载单元链接，同时通过测量监视单元对动物疼痛的图像变化动态检测；先将柔性扩充单元插入实验猴的阴道中，通过介质加载控制单元定时定量加载介质(如气体或者液体)，使柔性扩充单元直径不断扩胀，通过测量监视单元对动物疼痛的图像观测，直到实验猴发生疼痛逃避排斥反应(扭体)时停止加载，记录此时介质加载控制单元加载的体积数：

i.测量疼痛基础值：在需疼痛测量当天，于注射雌性激素1小时后，按以上b方法测量基础反应数值；

ii.测量痛经疼痛值：在需疼痛测量当天，于注射雌性激素1小时后，注射催产素诱发宫缩性疼痛，10分钟后，按以上b方法测量疼痛反应数值；

iii.视频记录保存实验猴测量前后30分钟的动态反应。

实验结果：

1、实验猴在雌性激素和催产素的作用下产生类痛经的疼痛；

2、注射催产素后的介质加载体积数显著减小，证明此时其阴道对膨胀的敏感度显著提高；

3、比较实验猴的基础值，膨胀介质加载体积数减小提示疼痛程度增加；

4、本模型经多次重复实验，说明模型和疼痛测量方法可靠。

附表说明：

表1，激素诱导的痛经疼痛实验数据表

表1。

Claims (10)

1.使用雌激素和催产素组合诱导建立非人灵长类动物痛经性疼痛模型。

2.利用阴道膨胀对痛经性疼痛敏感反应的原理来定量测量非人灵长类动物痛经性疼痛的程度。

3.一种非人灵长类动物痛经疼痛测定装置，其特征在于：介质、柔性扩充单元、介质加载单元、介质加载控制单元、和测量监控单元。所述介质加载控制单元按预设程序控制介质加载单元加载介质，所述介质加载单元通过连通管与柔性扩充单元链接，所述柔性扩充单元置入动物阴道内，由介质加载而直径扩张；所述测量监控单元分别与待测动物和介质加载控制单元连接，以动态观测和反馈动物对疼痛的反应并对加载参数(体积、时间、压力、速率等)设定程序，并记录动物疼痛数据。

4.如权利要求1所述的通过使用雌激素和催产素组合诱导非人灵长类动物产生痛经性疼痛，其特征在于：所述的非人灵长类动物是雌性食蟹猴(Macaca fascicularis)，雌性恒河猴(Macaca mulatta)或雌性狨猴(Marmoset)。

5.如权利要求2所述的阴道膨胀对痛经性疼痛反应的原理，其特征在于：人工诱导或创伤性介入方法建立的非人灵长类动物痛经，或自发的非人灵长类动物痛经。

6.如权利要求3所述的测量监控单元，其特征在于：动态观测和反馈动物对疼痛的反应，如人工观察、视频、生理、或图像分析的信号。

7.如权利要求3所述的测量监控单元，其特征在于：记录动物疼痛数据，如介质加载体积、时间、压力、速率或各项参数的组合。

8.如权利要求1所述的使用雌激素和催产素组合诱导非人灵长类动物产生痛经性疼痛，其特征在于：评估一种技术、方法、装置、或药物在实验性干预痛经中的应用。

9.如权利要求2所述的阴道膨胀对痛经性疼痛反应的原理，其特征在于：评估一种技术、方法、装置、或药物在实验性干预痛经疼痛中的应用。

10.如权利要求3所述的测量监控单元，其特征在于：与介质加载控制单元连接是有线的或无线的。