CN109651469A - 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用 - Google Patents

阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109651469A
CN109651469A CN201710933894.3A CN201710933894A CN109651469A CN 109651469 A CN109651469 A CN 109651469A CN 201710933894 A CN201710933894 A CN 201710933894A CN 109651469 A CN109651469 A CN 109651469A
Authority
CN
China
Prior art keywords
formula
preparation
compound
azacitidine
reaction
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710933894.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109651469B (zh
Inventor
邓海存
郭起
蒋兵
任晋生
张连第
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NANJING SIMCERE DONGYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
WUHU SIMCERE ZHONGREN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Jiangsu Simcere Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
NANJING SIMCERE DONGYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
WUHU SIMCERE ZHONGREN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Jiangsu Simcere Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NANJING SIMCERE DONGYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd, WUHU SIMCERE ZHONGREN PHARMACEUTICAL CO Ltd, Jiangsu Simcere Pharmaceutical Co Ltd filed Critical NANJING SIMCERE DONGYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201710933894.3A priority Critical patent/CN109651469B/zh
Priority to PCT/CN2018/099074 priority patent/WO2019072005A1/zh
Publication of CN109651469A publication Critical patent/CN109651469A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109651469B publication Critical patent/CN109651469B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/12—Triazine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/04—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/06—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Abstract

本发明涉阿扎胞苷二糖杂质及其制备方法与应用，以式Ⅳ所示的化合物作为起始原料，与四乙酰基核糖在Lewis酸的催化作用下制得式Ⅲ的化合物，式Ⅲ化合物水解制得式Ⅱ的化合物。制备的式Ⅱ的化合物可作为阿扎胞苷的有关物质检测用对照品，用于阿扎胞苷及其相关制剂的质量控制的应用。

Description

阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用。
背景技术
阿扎胞苷(Azacitidine)最早由捷克斯洛伐克科学家Piskala和Sorm合成，后来又从拉达克链轮丝菌(Streptoverticilliumladakanus)发酵液中被分离得到。
阿扎胞苷为胞苷的5-氮杂类似物，属于一类被称为低甲基化药物(Hypomethylating agents)的表观遗传学(Epigenetic)抗肿瘤药。异常的DNA甲基化使得调控正常细胞生长、分化和凋亡的关键基因失活，与肿瘤的发生和发展有关。阿扎胞苷治疗MDS有效主要源自其DNA低甲基化活性和对骨髓中异常造血细胞的直接细胞毒作用。阿扎胞苷为DNA甲基转移酶抑制剂，其在最大抑制DNA甲基化的浓度时并不会显著抑制DNA合成。
阿扎胞苷结构式如式Ⅰ所示：
在阿扎胞苷的生产过程中可能会产生少量的如式Ⅱ所示结构的杂质：
关于该杂质的制备分离方法，国内外尚未有文献报道，因此阿扎胞苷的二糖杂质是阿扎胞苷原料药及相关制剂的质量研究的重要化合物。
发明内容
在研究中我们发现阿扎胞苷在生产过程中会产生少量的式Ⅱ的化合物杂质。因此本发明对该化合物的合成进行了研究。
本发明的第一个方面提供具有式Ⅱ、Ⅲ所示结构的化合物：
本发明的第二个方面，提供一种式Ⅱ所示化合物的制备方法，其路线如下所示：
本发明所述的制备方法包括：步骤1：式Ⅳ所示化合物与四乙酰基核糖在路易斯酸的催化作用下进行反应制备得式Ⅲ所示化合物；步骤2：式Ⅲ所示化合物进行水解反应后制备得到式Ⅱ所示的化合物。
所述步骤1中的路易斯酸选自三氟甲磺酸三甲基硅酯或三氯化铝，优选自三氯化铝。
所述路易斯酸与四乙酰基核糖的投料摩尔比为1～10:1，优选2～5:1，优选自2.5～3:1。
所述式Ⅳ所示化合物与四乙酰基核糖的投料量摩尔比为1.5～10:1，优选2～6:1，进一步，优选自3.5～5:1。
所述步骤1中的反应是在有机溶剂下进行的，所述有机溶剂可以为非质子性溶剂，优选自二氯甲烷、氯仿或1,2-二氯乙烷中的一种或几种。
所述步骤1中的反应温度为20～60℃，优选20～50℃。
所述步骤2的水解反应是在碱性物质下进行的，所述碱性物质选自甲醇钠。
所述水解反应是在质子性溶剂下进行的，所述质子性溶剂选自甲醇或乙醇中的一种或两种混合。
所述水解反应的温度为0～30℃，优选0～10℃，进一步优选为5～10℃。
本发明的第三个方面，提供式Ⅱ化合物作为对照品在阿扎胞苷及其相关制剂的质量控制的应用。式Ⅱ所示的化合物可作为杂质作为阿扎胞苷的有关物质检测用对照品，用于阿扎胞苷及其相关制剂的质量控制的应用。
具体实施方式
本发明将于下文通过实施例更加详细的描述，这些实施例示例性地用于进一步说明，且不应当视为对本发明的限制。
使用Bruker的光谱仪在室温记录1H-NMR谱。将氘代二甲亚砜作溶剂，所述溶剂包括四甲基硅烷作为内标(如果没有另外提及的话)。使用安捷伦6100液质连用仪记录MS谱。给出了相对信号强度(以基于主峰的百分比表示)。使用安捷伦1200HPLC进行纯度检查。确定的条件伴随各自的工作实施例给出。
实验过程中各化合物的分子量如下所示：
实施例1：式Ⅲ化合物的制备
将四乙酰基核糖20g(62.9mmol)与式Ⅳ的化合物57g(222.7mmol)混合，加入二氯甲烷，升温至30℃，加入三氯化铝21g(157.9mmol)，反应23小时。降温至常温25℃，将反应液倒入到碳酸氢钠的冰水中，同时加入二氯甲烷，过滤除去不溶物，分液，有机相浓缩至干。硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝30:1)，得到类白色固体24.1g(38.3mmol，收率61％)。
实施例2：式Ⅲ化合物的制备
将四乙酰基核糖17g(53.4mmol)与式Ⅳ的化合物55g(214.5mmol)混合，加入1,2-二氯甲烷，升温至50℃，加入三氯化铝18g(133.5mmol)，反应19小时。降温至常温25℃，将反应液倒入到碳酸氢钠的冰水中，同时加入二氯甲烷，过滤除去不溶物，分液，有机相浓缩至干。硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝30:1)，得到类白色固体19.1g(30.4mmol，收率57％)。
实施例3：式Ⅲ化合物的制备
将四乙酰基核糖15g(47.1mmol)与式Ⅳ的化合物60g(235.6mmol)混合，加入1,2-二氯甲烷，升温至30℃，加入三氟甲磺酸三甲基硅酯42g(188.4mmol.)，反应19小时。降温至常温25℃，将反应液倒入到碳酸氢钠的冰水中，同时加入二氯甲烷，过滤除去不溶物，分液，有机相浓缩至干。硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝30:1)，得到类白色固体13.0g(20.7mmol，收率44％)。
式Ⅲ所示的化合物的结构确证数据见表1和表2所示。
表1氢谱测定结果
化学位移 质子数 峰形 相关质子化学位移 归属 备注
9.18 1 d 5.70 H<sub>15</sub> J＝9.2Hz
8.50 1 s / H<sub>17</sub> /
5.76 1 d 5.59 H<sub>8</sub> J＝3.6Hz
5.70 1 dd 5.21 H<sub>25</sub> J＝9.2,5.7Hz
5.59 1 dd 5.44,5.76 H<sub>6</sub> J＝6.2,3.6Hz
5.44 1 t 4.26,5.59 H<sub>4</sub> J＝6.5Hz
5.29 1 m 4.16,5.21 H<sub>21</sub> /
5.21 1 t 5.29 H<sub>23</sub> J＝5.6Hz
4.36 1 dd 4.26 H<sub>2</sub> J＝11.7,3.1Hz
4.26 1 m 4.10,4.36,5.44 H<sub>3</sub> /
4.24 1 m 4.16 H<sub>19</sub> /
4.16 1 m 5.29 H<sub>20</sub> /
4.11 1 m 4.16 H<sub>19</sub> /
4.10 1 m 4.26 H<sub>2</sub> /
2.06 18 s / H<sub>28</sub>,H<sub>31</sub>,H<sub>34</sub>,H<sub>38</sub>,H<sub>40</sub>,H<sub>43</sub> /
表2碳谱测定结果
实施例4：式Ⅱ化合物的制备
将式Ⅲ的化合物31g(49.3mmol)与甲醇250mL，乙醇50mL混合溶解，降温至5℃，加入甲醇钠甲醇溶液(30wt％)1mL，搅拌30分钟，大量淡黄色固体析出，过滤，干燥得白色固体16.4g。制备HPLC分离纯化得白色固体10.2g(27.1mmol，收率55％)。
实施例5：式Ⅱ化合物的制备
将式Ⅲ的化合物29g(46.1mmol)与乙醇500mL混合溶解，降温至5℃，加入甲醇钠甲醇溶液(30wt％)2mL，搅拌30分钟，大量淡黄色固体析出，过滤，干燥得白色固体15.2g。制备HPLC分离纯化得白色固体11.1g(29.5mmol，收率64％)。
结构确证：
式Ⅱ所示的化合物的结构确证数据如表3和表4所示。
表3氢谱测定结果
化学位移 质子数 峰形 相关质子化学位移 归属 备注
8.67 1 s / H<sub>2</sub> /
5.99 1 br s / H<sub>6</sub> 重水交换消失
5.68 1 d 4.08 H<sub>11</sub> J＝3.5Hz
5.40 1 d 3.89 H<sub>19</sub> J＝4.0Hz
4.08 1 t 3.87,4.02,5.68 H<sub>10</sub> J＝4.0Hz
4.02 1 t 3.89 H<sub>17</sub> J＝4.0Hz
3.91 1 d 3.74,4.02,5.40 H<sub>18</sub> J＝4.0Hz
3.89 1 d 3.91,4.08 H<sub>9</sub> J＝4.0Hz
3.87 1 t 3.58,3.71,3.87 H<sub>13</sub> J＝4.0Hz
3.74 1 t 3.39,3.47 H<sub>21</sub> J＝4.0Hz
3.71 1 dd 3.58,3.91 H<sub>15-1</sub> J＝12.2,2.8Hz
3.58 1 dd 3.71,3.91 H<sub>15-2</sub> J＝12.2,2.8Hz
3.47 1 dd 3.39,3.74 H<sub>24-1</sub> J＝11.7,4.6Hz
3.39 1 dd 3.47,3.74 H<sub>24-2</sub> J＝11.7,4.6Hz
表4碳谱测定结果

Claims (12)

1.如式Ⅱ和式Ⅲ所示的化合物：
2.一种式Ⅱ所示化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤1：式Ⅳ所示化合物与四乙酰基核糖在路易斯酸的催化作用下进行反应制备得式Ⅲ所示化合物；
步骤2：式Ⅲ所示化合物进行水解反应后制备得到式Ⅱ所示的化合物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤1中的路易斯酸选自三氟甲磺酸三甲基硅酯或三氯化铝，优选自三氯化铝。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述路易斯酸与四乙酰基核糖的投料摩尔比为1～10:1，优选2～5:1，进一步，优选自2.5～3:1。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述式Ⅳ所示化合物与四乙酰基核糖的投料量摩尔比为1.5～10:1，优选2～6:1，进一步，优选自3.5～5:1。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤1中的反应是在有机溶剂下进行的，所述有机溶剂可以为非质子性溶剂，优选二氯甲烷、氯仿或1,2-二氯乙烷中的一种或几种。
7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤1中的反应温度为20～60℃，优选20～50℃。
8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤2的水解反应是在碱性物质下进行的。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于所述碱性物质选自甲醇钠。
10.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于所述反应是在质子性溶剂下进行的，所述质子性溶剂选自甲醇或乙醇中的一种或两种混合。
11.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于所述反应的温度为0～30℃，优选0～10℃，进一步优选为5～10℃。
12.如权利要求1所述的式Ⅱ化合物作为对照品在阿扎胞苷及其相关制剂的质量控制的应用。
CN201710933894.3A 2017-10-10 2017-10-10 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用 Active CN109651469B (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710933894.3A CN109651469B (zh) 2017-10-10 2017-10-10 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用
PCT/CN2018/099074 WO2019072005A1 (zh) 2017-10-10 2018-08-07 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710933894.3A CN109651469B (zh) 2017-10-10 2017-10-10 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109651469A true CN109651469A (zh) 2019-04-19
CN109651469B CN109651469B (zh) 2023-07-11

Family

ID=66101224

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710933894.3A Active CN109651469B (zh) 2017-10-10 2017-10-10 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN109651469B (zh)
WO (1) WO2019072005A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113201039A (zh) * 2021-05-19 2021-08-03 南京德克瑞医药化工有限公司 一种医药中间体2’,3’,5’-三乙酰阿扎胞苷的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006099132A1 (en) * 2005-03-11 2006-09-21 Supergen, Inc. Azacytosine analogs and derivatives
CN102702292A (zh) * 2012-05-20 2012-10-03 湖州展望药业有限公司 一种阿扎胞苷的制备方法
CN104672289A (zh) * 2013-11-29 2015-06-03 南京圣和药业股份有限公司 一种阿扎胞苷杂质的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006099132A1 (en) * 2005-03-11 2006-09-21 Supergen, Inc. Azacytosine analogs and derivatives
CN102702292A (zh) * 2012-05-20 2012-10-03 湖州展望药业有限公司 一种阿扎胞苷的制备方法
CN104672289A (zh) * 2013-11-29 2015-06-03 南京圣和药业股份有限公司 一种阿扎胞苷杂质的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NAEEM B. HANNA 等: "6-Methyl-5-Azacytidine-Synthesis, Conformational Properties and Biological Activity. A Comparison of Molecular Conformation with 5-Azacytidine", 《NUCLEOSIDES AND NUCLEOTIDES》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113201039A (zh) * 2021-05-19 2021-08-03 南京德克瑞医药化工有限公司 一种医药中间体2’,3’,5’-三乙酰阿扎胞苷的制备方法
CN113201039B (zh) * 2021-05-19 2022-04-29 南京德克瑞医药化工有限公司 一种医药中间体2’,3’,5’-三乙酰阿扎胞苷的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109651469B (zh) 2023-07-11
WO2019072005A1 (zh) 2019-04-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kore et al. Synthesis and evaluation of 2′-O-allyl substituted dinucleotide cap analog for mRNA translation
CN111511722B (zh) 一种制备噁拉戈利中间体的方法及其组合物
EP4293026A1 (en) High-purity thienopyrimidine compound and preparation method therefor
EP0289619B1 (en) Process for synthesizing oligonucleotides and compounds for forming high-molecular protective group
CN102702292B (zh) 一种阿扎胞苷的制备方法
CN109651469A (zh) 阿扎胞苷二糖杂质与其制备方法与应用
CN110279869B (zh) 一种葡聚糖-槲皮素前药聚合物的制备方法
SASAKI et al. Development of lipophilic prodrugs of mitomycin C. III. Physicochemical and biological properties of newly synthesized alkoxycarbonyl derivatives
CN101899072A (zh) 基于硼氢化钠还原法制备吉西他滨中间体
CN107089967A (zh) 一种r‑硫辛酸胆碱酯卤化物的制备方法
CN108409818B (zh) 一种合成胞嘧啶核苷的方法
CN113024517A (zh) 一种制备厄达替尼的方法
EP3907230A1 (en) Novel benzimidazole derivatives, preparation method thereof and use thereof as anti-cancer agent comprising the same
CN101948492A (zh) 化学合成法生产阿糖胞苷的工艺
CN102516215B (zh) 含饱和环己烷结构的c-葡萄糖苷的制备方法
CN109021048A (zh) 一种曲氟尿苷工艺杂质的合成方法
CN110028495B (zh) 帕唑帕尼盐酸盐的制备方法
CN104610057B (zh) 一种合成乙酰化白藜芦醇的方法
CN113024518A (zh) 一种厄达替尼的制备方法
CN102260298A (zh) 一种合成1，2，3-O-三乙酰基-5-脱氧-β-D-核糖的方法
CN109456376A (zh) 核苷修饰物5’-DMTr-2’-EOE-5-Me-胞嘧啶核苷的新型制备方法
CN102718747B (zh) 盐酸奥普力农衍生物及其合成方法
CN110590862A (zh) 阿糖胞苷4-n位氨基酸衍生物及其制备方法与应用
CN114920684B (zh) 含硒苯甲酰胺类化合物及其合成方法与应用
CN107281180B (zh) 8-烷基小檗碱盐在制备预防和治疗肺癌药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information
CB02 Change of applicant information

Address after: Ma Fu Lu Development Zone of green food in Anhui province 241000 Wuhu Sanshan District No. 2

Applicant after: WUHU SIMCERE ZHONGREN PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Applicant after: JIANGSU SIMCERE PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Applicant after: SIMCERE PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Address before: Ma Fu Lu Development Zone of green food in Anhui province 241000 Wuhu Sanshan District No. 2

Applicant before: WUHU SIMCERE ZHONGREN PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Applicant before: JIANGSU SIMCERE PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Applicant before: NANJING SIMCERE DONGYUAN PHARMACEUTICA Co.,Ltd.

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant