CN109553610A

CN109553610A - 一种恩曲他滨异构体的制备方法

Info

Publication number: CN109553610A
Application number: CN201811568494.8A
Authority: CN
Inventors: 杜峰; 周忠波; 龚杰; 余翔; 王静; 谢永居
Original assignee: JINGDEZHEN FUXIANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: JINGDEZHEN FUXIANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2018-12-21
Filing date: 2018-12-21
Publication date: 2019-04-02
Anticipated expiration: 2038-12-21
Also published as: CN109553610B

Abstract

本发明公开了一种恩曲他滨异构体的制备方法，包括：以丙酮缩甘油为起始物料，经过酯化、水解、氧化、缩合成环、乙酰化、糖苷化缩合六步反应，合成恩曲他滨的四种混旋体中间体；利用手性试剂将四种异构体中间体拆分成顺式异构体混旋物和反式异构体混旋物。本发明采用简单的起始原料，经过六步反应合成了拆分关键中间体恩曲他滨四种旋光异构体的混旋物，然后先利用一种手性酸将四种异构体拆分为顺式与反式异构体的混旋物，操作简便，收率较高，异构体手性纯度高。

Description

一种恩曲他滨异构体的制备方法

技术领域

本发明属于药物合成技术领域，具体是涉及一种恩曲他滨异构体的合成及拆分方法。

背景技术

恩曲他滨，化学名：5-氟-1-(2R,5S)-[2-羟甲基-1,3-氧硫环-5-酰]胞嘧啶，英文名：Emtricitabine国外商品名：Emtriva，英文代号：FTC，其结构如下：

恩曲他滨是美国吉利德科学公司开发的一种新型核苷类逆转录酶抑制剂，对HIV-1,HIV-2,HBV病毒有很好的抑制活性，2003年在美国申请上市。临床上可用于与其他抗逆转录病毒药物联合用于成人Hiv感染的治疗，以及用于慢性乙型肝炎的治疗。

目前，恩曲他滨的合成工艺按原料不同主要分为以下几种：

(1)以1,4-丁烯二醇为原料，用丁酰氯将其酰化，臭氧将烯键断裂，得到相应的醛。该醛与巯基乙酸反应得到2-丁酰氧基甲基-1,3-氧硫杂环戊烷-5-酮。再还原，酰化得到2-丁酰氧基甲基-5-丁酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷后，用四氯化锡作为耦合催化剂，与硅烷保护的5-氟胞嘧啶选择性反应生成两个顺式产物，最后用PLE-A酶催化水解或手性柱分离得恩曲他滨 (WO9214743)。

(2)以l-古洛糖为原料，将糖环上的伯羟基选择性地用对甲基本磺酰氯进行磺酰化，再将其余的羟基乙酰化。由于1-的羟基活泼，用溴化氢将其溴化，溴化产物与乙基黄原酸钾反应，在羟胺，甲醇溶液中脱乙酰基，得1,6-硫-脱水-l-1古洛糖。碘酸钠氧化断键，然后硼氢化钠还原，保护邻二羟基得其异亚丙基衍生物，羟基用叔丁基二苯基氯硅烷进行硅烷化保护，然后脱醚化保护，依次用醋酸铅，重铬酸吡啶氧化，醋酸铅处理后得到乙酰化产物，乙酰化产物与硅烷保护的N₄-乙酰-5-氟胞嘧啶得2位为R的一对异构体，经过柱层析得β产物，用甲醇，氨脱去乙酰基，n-Bu₄NF脱硅烷得恩曲他滨(Jeong,L.S.,et al.,Journal ofMedicinal Chemistry 1993,36 (2),181-195.)。

(3)以烯丙醇衍生物为原料，用臭氧将烯键断裂，得到相应的醛。该醛与巯基乙酸反应得到1,3-氧硫杂环戊烷-5-酮衍生物。再还原，酰化得到烷氧甲基-5-烷氧基-1,3-氧硫杂环戊烷后，用四氯化锡作为耦合催化剂，与硅烷保护的5-氟胞嘧啶选择性反应，最后脱保护基得恩曲他滨 (US5700973)。

(4)以乙二醇为原料，与丁酰氯反应得到2-羟乙基丁酸脂，用二甲亚砜将2-羟乙基丁酸脂的羟基氧化成醛基。该化合物先与2,5-二羟基-1,4- 二硫噻烷反应，然后与醋酸酐反应得到2-丁酰甲氧基-5-乙酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷四个异构体，通过拆分得到一对2位手性为R的异构体，与三甲基硅烷保护的5-氟胞嘧啶反应得一对异构体，水解，成为盐酸盐，再用乙醇重结晶，分离出β产物。最后用IRA-92离子树脂脱酸得恩曲他滨 (WO0009494)。

(5)以水合乙醛酸为原料，和2,5-二羟基1,4-二硫噻烷，得到只有反式的5-羟基-1,3-氧硫杂环戊烷-2-羧酸。该产物与醋酸酐反应，得到反式的乙酰化产物。乙酰化产物和手性的l-薄荷醇反应，得到一对反式的产物5R- 乙酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷-2R-羧酸l-孟基酯和5S-乙酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷-2S-羧酸l-孟基酯,重结晶，得单一结构5R-乙酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷-2R-羧酸l-孟基酯，再与用二甲基叔丁基硅烷保护的5-氟胞嘧啶反应，得(5S)-(5-氟胞嘧啶)-1,3-氧硫杂环戊烷-(2R)-羧酸l-孟基酯，最后用氢化铝锂还原得恩曲他滨(Jin,H.,et al.,The Journal of Organic Chemistry,1995,60 (8),2621-2623.)。

(6)以(S)-(+)-苯甘氨酸为原料，和异戊酰氯发生酯化，再将其和光气反应，形成酰氯。酰氯和2,2-二甲氧基乙醇反应得(2S)-2-特戊酰氧基苯乙酸(2,2-二甲氧基)乙酯。该化合物与巯基乙酸反应后重结晶得 2R-2-[(2’S)-2’-(特戊酰氧基)苯乙酰氧基甲基]-1,3-氧硫杂环戊烷-5-酮，将酮还原后，与三甲基硅烷保护的5-氟胞嘧啶反应得一对2位手性为R的异构体，水解，成为盐酸盐，再重结晶得顺式产物，最后用碱游离得恩曲他滨(US6380388)。

由于恩曲他滨结构式中含有两个手性中心，因此该化合物存在四种不同构型的旋光异构体(其结构如下式所示)，分别为恩曲他滨(2R,5S)，对映异构体(2S,5R)和两个非对映异构体(2R,5R)，(2S,5S)。

上述工艺中有关对映异构体分离时多采用柱层析分离或生物酶催化分离的方法，但关于非对映异构体的合成与分离报道很少。如何获得高光学纯度的构型是恩曲他滨合成工艺中最关键的因素之一，也是评价一条工艺路线优劣的关键参数之一。

发明内容

本发明针对现有的恩曲他滨的合成工艺中有关三种异构体合成分离报道较少且不全的问题，提供了一种工艺操作简单，收率高，中间体易于纯化操作，产品光学纯度高，适合较大量合成的恩曲他滨三种异构体的制备新方法，对恩曲他滨的工艺及质量研究提供有力的保障。

本发明的目的是通过如下技术方案来实现的：

一种恩曲他滨异构体的制备方法，包括：以丙酮缩甘油为起始原料，与羟基保护剂反应，得到羟基保护的化合物II；化合物II酸化得到化合物 III，化合物III经过氧化得到化合物IV，化合物IV与硫代乙醇酸反应得到化合物V，化合物V经还原和乙酰化得到化合物VI，化合物VI与5- 氟胞嘧啶的硅烷化物在催化剂作用下反应得到化合物I，化合物I与手性试剂I反应，得到两种异构体混合物的盐，两种异构体混合物的盐分别脱掉保护基，分别得到恩曲他滨顺式异构体混旋物和恩曲他滨反式异构体混旋物。

作为可选择的步骤，可以通过手性试剂II，实现恩曲他滨顺式异构体混旋物和恩曲他滨反式异构体混旋物中异构体的进一步分离，得到四种异构体分别为：恩曲他滨(2R,5S)、恩曲他滨对映异构体(2S,5R)、恩曲他滨非对映异构体(2R,5R)、恩曲他滨非对映异构体(2S,5S)。所述手性试剂II优选为手性试剂联二萘酚(S)-BINOL((S)-(-)-1,1'-Bi-2-naphthol，CAS 号:18531-99-2)。

一种恩曲他滨异构体的制备方法，包括如下步骤：

(1)以丙酮缩甘油为起始原料，RX为酰卤试剂，10℃以下反应(优选为0～5℃反应)，得到化合物II；

(2)化合物II在酸溶液中，40～50℃反应，得到化合物III；

(3)化合物III在氧化剂作用下，20～25℃反应，得到化合物IV；

(4)化合物IV与硫代乙醇酸在催化剂I条件下，0-5℃反应，得到化合物V；

(5)化合物V在还原剂作用下，反应完全后加入乙酰化试剂和催化剂II反应得到化合物VI；

(6)化合物VI与5-氟胞嘧啶的硅烷化物在催化剂III存在下，35～40℃反应，得到关键中间体化合物I；

(7)化合物I在醇溶剂中与手性试剂成盐，析出得到白色固体I，白色固体I在氨甲醇溶液中脱掉保护基即为恩曲他滨顺式异构体混旋物cis (±)；母液浓缩后重结晶得到白色固体II，白色固体II在氨甲醇溶液中脱掉保护基即为恩曲他滨反式异构体混旋物trans(±)。

本发明采用简单的起始原料，经过六步反应合成了拆分关键中间体恩曲他滨四种旋光异构体的混旋物，然后先利用一种手性酸将四种异构体拆分为顺式与反式异构体的混旋物，可以进一步利用手性拆分试剂 (S)-BINOL分别将两组对映异构体拆分开来，操作简便，收率较高，异构体手性纯度高。

下面对本发明优选的方案做进一步说明：

作为优选，步骤(1)中，作为优选，所述酰氯试剂RX选自对甲氧基苯甲酰氯、2-甲氧基苯甲酰氯、间甲氧基苯甲酰氯、对甲基苯甲酰氯、 2-甲基苯甲酰氯、间甲基苯甲酰氯、苯甲酰氯、对甲苯磺酰氯、邻甲苯磺酰氯、间甲苯磺酰氯。作为进一步优选，所述酰氯试剂RX为对甲氧基苯甲酰氯、苯甲酰氯、对甲苯磺酰氯，进一步优选为苯甲酰氯。反应溶剂可以采用二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃等，优选为二氯甲烷。作为可选择的方案，可以在反应体系中加入缚酸剂，所述缚酸剂可以是常见的有机碱和无机碱，比如常见的有机碱有三乙胺等；常见的无机碱有碳酸钠、碳酸氢钠等。其中，丙酮缩甘油、酰氯试剂RX与缚酸剂(如果加入的话) 的摩尔比为1：(1～5)：(1～2)，进一步优选为1：(1～2)：(1～1.2)。

步骤(1)反应结束后，可以直接加入水进行萃取，经过有机层经过简单的洗涤(根据需要也可以进行干燥等)、浓缩等即可得到化合物II的浓缩物，不需要纯化直接投入下一步反应。

作为优选，步骤(2)中，所述酸为硫酸、盐酸、对甲苯磺酸，进一步优选为盐酸。反应溶剂可以为THF、丙酮等。

步骤(2)反应结束后，可利用无机碱(例如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾或者碳酸氢钾)等对反应体系进行中和，然后再经过简单的过滤，滤液旋干即可得到化合物III的浓缩物，不需要纯化直接投入下一步反应。

作为优选，步骤(3)中，所述的氧化剂为高碘酸钠、四乙酸铅、高锰酸钾、碘苯二乙酸，优选高碘酸钠；高碘酸钠的用量优选为1.0～2.0当量，加料方式为分批加入，加入温度优选为10～30℃，保证加入过程中，体系温度低于30℃，避免副反应的发生。加入完毕后，反应温度为20～ 25℃。该步骤的反应溶剂可以采用二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃等，优选为二氯甲烷。

步骤(3)反应结束后，可经过简单的过滤、浓缩操作得到化合物IV 的浓缩物，不需要纯化直接投入下一步反应。

作为优选，步骤(4)中，所述反应中所述的催化剂I为四氯化锡、四氯化钛、三氟化硼乙醚、三甲基氯硅烷中的一种或多种，优选为三氟化硼乙醚。步骤(4)中，化合物IV与硫代乙醇酸以及催化剂I的摩尔比为 1：(1.5～3)：(2.5～3.5)。该步骤中反应溶剂可以采用二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃等，优选为二氯甲烷。

步骤(4)反应结束后，可将反应体系直接加入到弱碱水溶液中(比如碳酸氢钠水溶液、碳酸氢钾水溶液)，分层，有机相经过简单的洗涤，浓缩即可得到化合物V的浓缩物，不需要纯化直接投入下一步反应。

作为优选，步骤(5)中，所述还原剂为四氢铝锂、硼氢化钠、三叔丁氧基氢化铝锂、而异丙基氢化铝，优选三叔丁氧基氢化铝锂；所述乙酰化试剂为乙酰氯、乙酸酐、乙酰溴，优选为乙酸酐；所述催化剂II为二甲氨基吡啶。化合物V与还原剂、催化剂II、乙酰化试剂的摩尔比为1：(1～2)： (0.1～1)：(1～10)。该步骤中反应溶剂可以采用二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃等，优选为四氢呋喃。

步骤(5)反应结束后，可将反应体系直接加入到弱碱水溶液中(比如碳酸氢钠水溶液、碳酸氢钾水溶液)，加入萃取剂(比如乙酸乙酯)，分层，有机相经过简单的洗涤，浓缩即可得到化合物V的浓缩物，不需要纯化直接投入下一步反应。

作为优选，步骤(6)中，所述5-氟胞嘧啶的硅烷化物的制备方法为 5-氟胞嘧啶中加入六甲基二硅氮烷(HMDS)和甲烷磺酸，回流2～5小时后浓缩干制备得到；所述催化剂III为四氯化锡、三甲基硅三氟甲磺酸酯 (TMSOTf)、叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯(TBDMSOTf)，优选为三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)。该步骤中，反应溶剂一般采用二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃等，优选为二氯甲烷。步骤(6)中，化合物VI、 5-氟胞嘧啶的硅烷化物、催化剂III的摩尔比为1：(1～2)：(1～2)，进一步优选为1：(1～1.5)：(1～1.5)。

步骤(6)反应结束后，可利用水淬灭反应，然后分层，分层后有机相经过干燥洗涤等，浓缩，得到化合物I的浓缩物。该浓缩物可以选择再次溶于甲醇中，进行浓缩，以出去其中的二氯甲烷。然后甲醇重结晶最终得到高纯度的化合物。

步骤(7)中，所述手性试剂为苹果酸、酒石酸、樟脑磺酸、苯甘氨酸、苯甘氨酸，优选为L-苯甘氨酸。步骤(7)中，所述化合物I与手性试剂的摩尔比为1:1。选择的反应溶剂为甲醇，反应结束后顺式物苯甘氨酸盐(恩曲他滨顺式异构体混旋物cis(±))直接析出，剩余的反式物苯甘氨酸盐溶(恩曲他滨反式异构体混旋物trans(±))于甲醇中，经过简单的浓缩和重结晶即可得到纯品。步骤(7)的反应温度一般为60～90℃，实际反应过程中，直接加热回流2-3小时即可。

可选择的进入步骤(8)：

(8)在反式异构体混旋物的甲醇溶液中，加入手性试剂联二萘酚,固体析出，得到恩曲他滨非对映异构体-BINOL复合物(2R,5R)，游离后得到恩曲他滨非对映异构体(2R,5R)；母液浓缩干，重结晶得到白色固体，即为恩曲他滨非对映异构体(2S,5S)；

在恩曲他滨的顺式异构体混旋物的甲醇溶液中，加入手性试剂联二萘酚，固体析出，得到恩曲他滨-BINOL复合物(2R,5S)，游离后得到恩曲他滨(2R,5S)；母液浓缩干，重结晶得到白色固体，即为恩曲他滨对映异构体(2S,5R)。

作为优选，所述联二萘酚与反式异构体混旋物或者顺式异构体混旋物的摩尔比为1:0.5～2.0。反应在回流条件下进行。所述重结晶采用的溶剂为甲醇和水，比例为1:1左右。

本发明的反应路线如下：

与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

本发明的方法在用于制备恩曲他滨异构体中具有独创性，在制备关键拆分中间体过程中，起始原料与合成路线与已有技术有所不同，且后处理简便，不需要柱层析纯化，只需第六步反应后重结晶一次即可获得高纯度拆分混旋物，收率较高；后续手性拆分试剂与现有技术不同，且操作简单，三个异构体光学纯度较高，用于恩曲他滨质量分析研究可以达到中国药典所述要求。

本发明技术实验结果已经过恩曲他滨中国药典2015版本中所述手性方法所验证，各异构体RRT值与药典所述一致，对映异构体cis(+)RRT＝0.6，非对映异构体trans(+)、trans(-)RRT＝1.2，和1.3，见附图。

本发明的所有步骤均可采用萃取、过滤、重结晶等简单成熟的后处理操作，均不需要柱层析等不适于工业化的后处理操作，保证整个工艺适于工业化大量生产。

本发明提供了一种工艺操作简单，收率高，中间体易于纯化操作，产品光学纯度高，适合较大量合成的恩曲他滨三种异构体的制备新方法，对恩曲他滨的工艺及质量研究提供有力的保障。

附图说明

图1为实施例6中化合物I的质谱图(ESI-MS)。

图2为实施例6中化合物I的核磁共振氢谱图(¹H-NMR)。

图3为实施例6中化合物I的HPLC纯度图。

图4为实施例8中恩曲他滨顺式混旋物的质谱图(ESI-MS)。

图5为实施例8中恩曲他滨顺式混旋物的核磁共振氢谱图(¹H-NMR)。

图6为实施例8中恩曲他滨顺式混旋物的HPLC纯度图。

图7为实施例8中恩曲他滨顺式混旋物的手性HPLC纯度图。

图8为实施例8中恩曲他滨反式混旋物的质谱图(ESI-MS)。

图9为实施例8中恩曲他滨反式混旋物的核磁共振氢谱图(¹H-NMR)。

图10为实施例8中恩曲他滨反式混旋物的HPLC纯度图。

图11为实施例8中恩曲他滨反式混旋物的手性HPLC纯度图。

图12为恩曲他滨与顺式混旋、反式混旋物的对比图。

上述检测方法中HPLC和手性HPLC方法均为恩曲他滨中国药典2015 版中所述检测方法。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步描述本发明，但这些实施例仅是例证性的，并不对本发明的保护范围构成任何限制，本领域技术人员应当理解的是，根据本发明精神所做的替换、修改均落入本发明的保护范围。

实施例1：

化合物II(R为苯甲酰基)的制备：54g(1.0eq)丙酮缩甘油溶解在300ml 二氯甲烷和62g(1.5eq)三乙胺的溶液中，冷却至0-5℃，1h内滴加溶于 60ml二氯甲烷中的60g(1.05eq)苯甲酰氯溶液，滴加后保温反应约1h。反应结束后向反应混合物中加入200ml水，分液，有机层用100ml水洗涤。有机相蒸干，浓缩干得到油状物90g，不需要纯化直接投入下一步反应。

实施例2：

化合物III的制备：将上步所得油状物90g溶于200ml四氢呋喃，滴加40ml 2N盐酸，滴毕加热至45-50℃，搅拌2h后，室温搅拌过夜。反应结束后用5g碳酸氢钠中和，过滤。滤液蒸干，得到85g油状物，不需要纯化直接投入下一步反应。

实施例3：

化合物IV的制备：将85g上步油状物溶于400ml二氯甲烷和40ml 水中的，在20-25℃下分8批加入80g高碘酸钠(1.0eq)。继续反应4小时。过滤固体，浓缩滤液，得油状物75g，不需要纯化直接投入下一步反应。

实施例4：

化合物V的制备：将75g上步油状物和69g硫代乙醇酸(2.4eq)加入500ml二氯甲烷中，降温至0～5℃，滴加三氟化硼乙醚溶液140ml(3.0eq)，滴毕保温反应2小时。反应结束后将反应液滴入碳酸氢钠溶液中，搅拌30 分钟后分层，有机相用氯化钠溶液洗涤一遍后浓缩干得棕色油状物70g，不需要纯化直接投入下一步反应。

实施例5：

化合物VI的制备：将70g上步油状物加入300ml四氢呋喃中，降温至-10～0℃，加入80g三叔丁氧基氢化铝锂(1.3eq)，滴毕保温反应2小时。反应完全后加入15g二甲氨基吡啶(0.5eq)，缓慢滴加280g乙酸酐(5.0eq)，滴毕反应2小时。结束后将反应液滴入碳酸氢钠溶液中，搅拌30分钟后乙酸乙酯萃取两遍，合并有机相用氯化钠溶液洗涤一遍后浓缩干得棕色油状物80g，不需要纯化直接投入下一步反应。

实施例6：

化合物I的制备：将41.6g(1.3eq)5-氟胞嘧啶，104g(2.6eq)HMDS (六甲基二硅胺)和0.34g甲烷磺酸混合，在125-130℃下回流2-4小时，直到得到澄清溶液。将反应液冷却至100℃，蒸干，得到三氟甲磺酸三甲基硅酯(TMSOTf)。向残余物中加入200ml二氯甲烷和80g(1.0eq)上步所得中间体化合物VI的二氯甲烷溶液，升温至40℃，1-2h缓慢滴加55.0g(1.3eq)TMSOTf，滴加完毕后将反应混合物回流20小时，然后将其冷却至室温，并加入200ml水淬灭反应。分层后有机相用200ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤一遍，有机相浓缩干得到棕色糖浆状物质。加入200ml甲醇带蒸二氯甲烷，200ml甲醇重结晶，0℃搅拌1小时，过滤得92.0g白色固体湿品， 45℃烘干得75.0g，六步总收率为52.2％。HPLC纯度(见图3)：97.6％，氢谱(¹H-NMR,DMSO,500Hz)δ：3.22-3.33(1H,m)，3.49-3.65(1H，m)， 4.33-4.57(1H,m)，4.62-4.85(1H,m)，5.35-6.15(1H，t)，6.19-6.51(1H， t)，7.45-7.64(3H，m)，7.68-7.75(1H,d)，7.82-7.97(2H，s)，7.99-8.05 (2H，d)(见图2)。质谱(ESI-MS)：374.05[M+Na]⁺(见图1)。

实施例7：

顺反异构体拆分：

20g的化合物I加入100ml的甲醇升温溶清，加入9.2g(1.0eq)的L- 苯甘氨酸，加热回流2-3小时，降温到室温，搅拌过夜。有固体析出，过滤，用20ml的冷的甲醇洗涤得到12.8g固体，顺式物苯甘氨酸盐，收率 45.0％；母液旋干，用50ml甲醇重结晶后得到10.8g固体，反式物苯甘氨酸盐，收率38.3％。

实施例8：

拆分后脱保护基：

12.8g的顺式物苯甘氨酸盐加入60ml 15％甲醇氨水溶液，室温搅拌8 小时，反应完蒸干，加入40ml乙醇，室温搅拌2小时，过滤得5.7g顺式混旋物，收率91.0％。HPLC纯度：98.3％(见图6)，手性HPLC纯度(见图7)：cis(-)＝49.91％，cis(+)＝50.07％，氢谱(¹H-NMR,DMSO,500Hz) δ：3.01-3.29(1H,m)，3.40-3.52(2H，m)，3.53-3.63(1H,m)，5.05-5.29(1H,t)，5.48-5.75(1H，t)，6.16-6.48(1H，t)，7.43-7.70(1H，s)，7.73-7.94 (2H,s)(见图5)。质谱(ESI-MS)：495.09[2M+H]⁺。(见图4)

10.8g的反式苯甘氨酸盐加入40ml 15％甲醇氨水溶液，室温搅拌8小时，反应完蒸干，加入10ml的乙醇，室温搅拌2小时，过滤得4.5g反式混旋物，收率86.0％。HPLC纯度：99.6％(见图10)，手性HPLC纯度(见图11)：trans(+)＝49.97％，trans(-)＝49.84％(见图11)，氢谱(¹H-NMR, DMSO,500Hz)δ：3.07-3.29(1H,m)，3.40-3.52(1H，m)，3.64-3.92(2H,m)， 5.09-5.30(1H,t)，5.35-5.65(1H，t)，6.01-6.38(1H，t)，7.32-8.02(2H， s)，8.10-8.38(1H,d)(见图9)。质谱(ESI-MS)：495.09[2M+H]⁺。(见图8)。

实施例9：

对映异构体的拆分：5.7g顺式混悬物加入40ml甲醇，加入13.6g(1.5eq) S-BINOL，升温溶清，回流反应2-3小时，缓慢降至室温，搅拌过夜。有固体析出，过滤，用20ml的冷的甲醇洗涤得到5.6g白色固体，即为恩曲他滨-BINOL复合物(2R,5S)，收率46.0％；母液浓缩干后，少量乙酸乙酯洗涤一遍后，用20ml甲醇:水＝1:1溶液重结晶后得到2.1g白色固体，即为恩曲他滨对映异构体(2S,5R)，收率35.2％。

4.5g反式混悬物加入40ml甲醇，加入6.8g(1.5eq)S-BINOL，升温溶清，回流反应2-3小时，缓慢降至室温，搅拌过夜。有固体析出，过滤，用10ml的冷的甲醇洗涤得到4.4g白色固体，即为恩曲他滨非对映异构体 -BINOL复合物(2R,5R),收率45.3％；母液浓缩干后，少量乙酸乙酯洗涤一遍后，用10ml甲醇:水＝1:1溶液重结晶后得到1.5g白色固体，即为恩曲他滨非对映异构体(2S,5S)，收率34.5％。

实施例10：

复合物解离：5.6g恩曲他滨-BINOL复合物(2R,5S)，加入40ml水， 40ml乙酸乙酯，用6N盐酸调节PH至2-3，搅拌30分钟后分层，水相用乙酸乙酯洗涤一遍后，再用碳酸氢调节PH至7，水相浓缩干后用乙醇：水＝3:1重结晶得到2.3g白色固体，即为恩曲他滨(2R,5S)，收率88.9％； 4.4g恩曲他滨非对映异构体-BINOL复合物(2R,5R)，加入20ml水，20ml 乙酸乙酯，用6N盐酸调节PH至2-3，搅拌30分钟后分层，水相用乙酸乙酯洗涤一遍后，再用碳酸氢调节PH至7，水相浓缩干后用乙醇：水＝3:1 重结晶得到1.8g白色固体，即为恩曲他滨非对映异构体(2R,5R)，收率 90.5％。图12为恩曲他滨(2R,5S)与顺式混旋、反式混旋物的对比图。

Claims

1.一种恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，包括：以丙酮缩甘油为起始原料，与羟基保护剂反应，得到羟基保护的化合物II；化合物II酸化得到化合物III，化合物III经过氧化得到化合物IV，化合物IV与硫代乙醇酸反应得到化合物V，化合物V经还原和乙酰化得到化合物VI，化合物VI与5-氟胞嘧啶的硅烷化物在催化剂作用下反应得到化合物I，化合物I与手性试剂I反应，得到两种异构体混合物的盐，两种异构体混合物的盐脱掉保护基，分别得到恩曲他滨顺式异构体混旋物和恩曲他滨反式异构体混旋物；所述化合物I～化合物VI的结构分别如下：

R选自对甲氧基苯甲酰基、2-甲氧基苯甲酰基、间甲氧基苯甲酰基、对甲基苯甲酰基、2-甲基苯甲酰基、间甲基苯甲酰基、苯甲酰基、对甲苯磺酰基、邻甲苯磺酰基、间甲苯磺酰基；

可选择的，利用手性试剂II与恩曲他滨顺式异构体混旋物或恩曲他滨反式异构体混旋物反应，后处理，分别得到恩曲他滨的四个异构体。

2.根据权利要求1所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)以丙酮缩甘油为起始原料，RX为酰卤试剂，10℃以下反应，得到化合物II；

(2)化合物II在酸溶液中，40～50℃反应，酸解开环得到化合物III；

(3)化合物III在氧化剂作用下，氧化得到化合物IV；

(4)化合物IV与硫代乙醇酸在催化剂I条件下，10℃以下反应，环合得到化合物V；

(7)化合物I在醇溶剂中与手性试剂成盐，析出得到白色固体I，白色固体I在氨甲醇溶液中脱掉保护基得到恩曲他滨的顺式异构体混旋物；母液浓缩后重结晶得到白色固体II，白色固体II在氨甲醇溶液中脱掉保护基得到恩曲他滨的反式异构体混旋物；

可选择的进入步骤(8)：

3.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，所述酰氯试剂RX为对甲氧基苯甲酰氯、苯甲酰氯、对甲苯磺酰氯中的一种或多种。

4.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，所述催化剂I为四氯化锡、四氯化钛、三氟化硼乙醚、三甲基氯硅烷中的一种或多种。

5.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述还原剂为四氢铝锂、硼氢化钠、三叔丁氧基氢化铝锂、而异丙基氢化铝中的一种或多种；所述乙酰化试剂为乙酰氯、乙酸酐、乙酰溴中的一种或多种；所述催化剂II为二甲氨基吡啶。

6.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，所述催化剂III为四氯化锡、三甲基硅三氟甲磺酸酯、叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯中的一种或多种。

7.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，所述手性试剂为苹果酸、酒石酸、樟脑磺酸、苯甘氨酸、苯甘氨酸中的一种或多种。

8.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，所述手性试剂为L-苯甘氨酸。

9.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，化合物IV与硫代乙醇酸以及催化剂I的摩尔比为1：(1.5～3)：(2.5～3.5)。

10.根据权利要求2所述的恩曲他滨异构体的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，化合物V与还原剂、催化剂II、乙酰化试剂的摩尔比为1：(1～2)：(0.1～1)：(1～10)。