CN109512820B - iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明提供了iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用。本发明的iCRT14化合物能降低随机血糖水平和空腹血糖水平，降低糖化血红蛋白水平，降低乳酸脱氢酶水平，能用于制备治疗I型糖尿病的药物，为I型糖尿病的治疗提供了新的药物选择。

Description

iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用

技术领域

本发明涉及iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

糖尿病(Diabetes mellitus,DM)是一组由胰岛素分泌和(或)作用缺陷所引起，以慢性血糖水平增高为特征的代谢性疾病。它可以分为两种类型：I型或胰岛素依赖型糖尿病和II型或非胰岛素依赖糖尿病。I型糖尿病是由胰脏胰岛B细胞被破坏造成，II型糖尿病是由于胰岛素功能受损造成。I型糖尿病是T细胞介导的胰岛β细胞破坏的自身免疫性疾病，多发于儿童或青少年期，同时在各个年龄段特别是更年期也可见I型糖尿病。I型糖尿病需应用外源性胰岛素来控制血糖，目前没有根治办法。因此，建立除注射胰岛素外，其他有效的治疗方法和手段，对于改善糖尿病患者生活质量，延长患者寿命，具有十分重要的意义。

iCRT14是一种新型的β-catenin通路抑制剂，具有分子小、脂溶性高、容易通过细胞膜等特点，通过抑制β-catenin与其下游的核转录因子TCF/LEF家族结合发挥作用。目前的体内外研究发现，iCRT14通过抑制肿瘤细胞增殖、抑制病毒复制发挥抗肿瘤、抗病毒的生物学作用。iCRT14的结构式如下所示：

但目前，iCRT14使用后对糖尿病糖脂代谢紊乱的影响目前尚不清楚。因此，本项目利用链脲霉素(Streptozocin,STZ)建立I型糖尿病小鼠模型，旨在研究iCRT14对糖尿病糖脂代谢紊乱的影响。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用，本发明的iCRT14化合物能降低随机血糖水平和空腹血糖水平，降低糖化血红蛋白水平，降低乳酸脱氢酶水平。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：本发明提供了iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用。

作为本发明所述应用的优选实施方式，所述治疗I型糖尿病的药物为降低随机血糖水平和空腹血糖水平的药物。

作为本发明所述应用的优选实施方式，所述治疗I型糖尿病的药物为降低糖化血红蛋白水平的药物。

作为本发明所述应用的优选实施方式，所述治疗I型糖尿病的药物为降低乳酸脱氢酶水平的药物。

本发明还提供了一种治疗I型糖尿病的药物，所述药物含有iCRT14化合物。

作为本发明所述治疗I型糖尿病的药物的优选实施方式，所述药物还含有药用载体。

作为本发明所述治疗I型糖尿病的药物的优选实施方式，所述药物的剂型为胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液体制剂或注射剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明的iCRT14化合物能降低随机血糖水平和空腹血糖水平，降低糖化血红蛋白水平，降低乳酸脱氢酶水平，能用于制备治疗I型糖尿病的药物。

附图说明

图1为实施例1中各组小鼠体重变化的统计分析图。

图2为实施例1中各组小鼠随机血糖变化的统计分析图。

图3为实施例2中各组小鼠体重变化的统计分析图。

图4为实施例2中各组小鼠随机血糖变化的统计分析图。

图5为实施例2中各组小鼠空腹血糖变化的统计分析图。

图6为实施例2中给药8周各组小鼠糖耐量变化图。

图7为实施例2中给药20周各组小鼠糖耐量变化图。

图8为实施例2中各组小鼠糖耐量变化的统计分析图。

图9为实施例2中各组小鼠糖化血红蛋白水平变化的统计分析图。

图10为实施例2中各组小鼠甘油三酯水平变化的统计分析图。

图11为实施例2中各组小鼠总胆固醇水平变化的统计分析图。

图12为实施例2中各组小鼠乳酸脱氢酶水平变化的统计分析图。

具体实施方式

为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。

下述实施例中，若未特别指明，所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，本申请中的试剂和材料均可从市场上或其它公共渠道获得。本发明中，统计学分析多组间比较用单因素方差分析，多个样本两两比较选择Tukey检验，P<0.05认为差异有统计学意义进行分析。

实施例1短期给药iCRT14对链脲佐菌素诱导的I型糖尿病小鼠血糖的影响

1.药物配置：100mg iCRT14加入2mL PEG400(聚乙二醇400)，超声混匀至乳黄色油状液体，再加入8mL PBS(磷酸缓冲盐溶液)，继续超声为均匀的浅黄色液体，配置10mg/mL的药物母液，随后使用80％PBS和20％PEG400的混合液稀释为工作液进行注射。

2.动物造模：7～8周龄C57BL/6雄性小鼠腹腔注射0.2％链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)45mg/kg/day，连续注射5天。正常组给予等量的柠檬酸缓冲液。注射结束72小时后测小鼠血糖，血糖浓度高于16.7mmol/L的小鼠视为造模成功。

3.试验分组：糖尿病小鼠模型造模成功后第四周，检测小鼠血糖持续、稳定升高，进行试验分组，分组如下：

(1)CON：正常对照组，正常小鼠腹腔注射等体积溶剂；

(2)CON+iCRT40：正常给药组，正常小鼠腹腔注射iCRT14 40mg/kg；

(3)T1DM(Type 1diabetes mellitus)：I型糖尿病组，糖尿病小鼠腹腔注射等体积溶剂；

(4)T1DM+iCRT5：I型糖尿病给药iCRT14 5mg/kg组，糖尿病小鼠腹腔注射5mg/kgiCRT14；

(5)T1DM+iCRT10：I型糖尿病给药iCRT14 10mg/kg组，糖尿病小鼠腹腔注射10mg/kg iCRT14；

(6)T1DM+iCRT20：I型糖尿病给药iCRT14 20mg/kg组，糖尿病小鼠腹腔注射20mg/kg iCRT14；

(7)T1DM+iCRT40：I型糖尿病给药iCRT14 40mg/kg组，糖尿病小鼠腹腔注射40mg/kg iCRT14。

每组20只小鼠，每天注射药物1次，连续给药14天，给药期间，正常饮食，自由饮水。

4.检测指标

给药7天后、14天后，称量各组小鼠体重；同时使用血糖仪检测小鼠随机血糖。

鼠尾静脉测血糖法：动物麻醉后，刺穿小鼠尾部静脉采血，待血滴出在1μL以上时滴于稳豪型血糖仪专用试纸上，测定血糖值，取血后棉球压迫止血。

5.试验结果

考察短期给予不同剂量的iCRT14对STZ诱导的I型糖尿病小鼠体重、随机血糖的影响。

(1)死亡率

连续给药2周记录小鼠死亡率，结果显示除腹腔注射20mg/kg iCRT14(T1DM+iCRT20组)、40mg/kg iCRT14(T1DM+iCRT40组)的糖尿病小鼠外，各组小鼠状态正常，未见死亡。T1DM+iCRT20组共死亡2只，死亡率10％；T1DM+iCRT40组共死亡6只，死亡率30％。

(2)体重

各组小鼠体重变化的统计分析图如图1所示，其中，**表示与CON组相比P<0.01，##表示与T1DM组相比P<0.05。由图1可知，连续给药14天后，与CON组相比，CON+iCRT40组体重未见明显变化，T1DM组体重显著降低22.9％(P<0.01)；随着给药剂量的增加，T1DM+iCRT20组体重与T1DM组相比体重降低8.1％，T1DM+iCRT40组与T1DM组相比体重降低15.51％(P<0.05)。

(3)随机血糖

各组小鼠随机血糖变化的统计分析图如图2所示，其中，**表示与CON组相比P<0.01，#表示与T1DM组相比P<0.01。由图2可知，连续给药14天后，与CON组比较，CON+iCRT40组血糖没有明显变化，T1DM组血糖明显升高(P<0.01)；糖尿病给予iCRT14的各组小鼠与T1DM组相比随机血糖呈下降趋势，其中T1DM+iCRT40组降低有统计学意义(P<0.01)。

根据短期给药结果，选择2.5、5、10mg/kg的iCRT40进行长期给药观察该化合物的降糖作用及不良反应。

实施例2长期给药iCRT14对链脲佐菌素诱导的I型糖尿病小鼠血糖的影响

1.试验分组

糖尿病小鼠模型造模成功后第四周，检测小鼠血糖持续、稳定升高，进行试验分组，分组如下：

(1)CON：正常溶剂组，正常小鼠腹腔注射等体积溶剂；

(2)CON+iCRT10：正常给药组，正常小鼠腹腔注射10mg/kg iCRT14；

(3)T1DM(Type 1diabetes mellitus)：糖尿病溶剂组，糖尿病小鼠腹腔注射等体积溶剂；

(4)T1DM+iCRT2.5：iCRT14低剂量组，糖尿病小鼠腹腔注射2.5mg/kg iCRT14；

(5)T1DM+iCRT5：iCRT14中剂量组，糖尿病小鼠腹腔注射5mg/kg iCRT14；

(6)T1DM+iCRT10：iCRT14高剂量组，糖尿病小鼠腹腔注射10mg/kg iCRT14。

每组小鼠12只小鼠，每天腹腔注射药物1次，连续给药20周。给药期间，正常饮食，自由饮水。

2.检测指标

(1)分别在给药8、20周时称量小鼠体重，同时使用血糖仪检测小鼠随机血糖、空腹血糖；

(2)分别在给药8、20周时，腹腔注射葡萄糖进行糖耐量(IPGTT)检测。1×PBS制备10％葡萄糖并消毒灭菌。小鼠禁食16小时后尾静脉取血测量空腹血糖，随后每只小鼠以2mg/g的剂量腹腔注射葡萄糖，并在注射葡萄糖后0.5、1、1.5、2h测量血糖水平；

(3)分别在给药8周、20周后，处死小鼠、收集血液标本，使用自动生化分析仪检测糖化血红蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的含量。

3.试验结果

(1)死亡率

连续给药20周记录观察各组小鼠死亡率，在实验观察终点显示各组小鼠状态正常，均未见死亡。

(2)体重

各组小鼠体重变化的统计分析图如图3所示，其中，**、*表示与CON组相比P<0.01，#表示与T1DM组相比P<0.05。由图3可知，在长期给药期间，正常小鼠体重随周龄逐渐增加。与CON组相比，CON+iCRT10组小鼠体重无明显变化，T1DM组小鼠体重逐渐降低(P<0.01)。连续给药8周，给予2.5～10mg/kg iCRT14的糖尿病小鼠与T1DM组相比，体重未见有统计学意义的变化；连续给药20周，给予2.5～10mg/kg iCRT14的糖尿病小鼠与T1DM组相比体重逐渐增加，其中T1DM+iCRT10组体重增加有统计学意义(P<0.05)。

(3)随机血糖

各组小鼠随机血糖变化的统计分析图如图4所示，其中，#表示与T1DM组相比P<0.05，##表示与T1DM组相比P<0.01。由图4可知，连续给药期间，CON组小鼠随周龄增加随机血糖稳定；CON+iCRT10组小鼠，随机血糖未见明显变化；T1DM组小鼠随机血糖随周龄增加持续升高。连续给药8周，给予2.5～10mg/kg iCRT14的糖尿病小鼠与T1DM组相比，血糖逐渐降低，其中T1DM+iCRT10组下降20％(P<0.05)。连续给药20周，与T1DM组相比，给予2.5～10mg/kg iCRT14的糖尿病小鼠随机血糖呈剂量依赖性降低，其中T1DM+iCRT5组血糖下降21.7％(P<0.05)，T1DM+iCRT10组下降32.8％(P<0.01)。说明在此模型下，iCRT14对I型糖尿病小鼠随机血糖有明显抑制作用。

(4)空腹血糖

各组小鼠空腹血糖变化的统计分析图如图5所示，其中，#表示与T1DM组相比P<0.05，##表示与T1DM组相比P<0.01。由图5可知，连续给药期间，CON组小鼠随周龄增加空腹血糖稳定；CON+iCRT10组小鼠，空腹血糖未见明显变化；T1DM组空腹血糖随周龄增加逐渐升高。连续给药8周，与T1DM组空腹血糖相比，给予2.5～10mg/kg iCRT14后，糖尿病小鼠空腹血糖逐渐降低，其中T1DM+iCRT10组下降35.2％(P<0.05)。连续给药20周，给予2.5～10mg/kg iCRT14的糖尿病小鼠与T1DM组相比空腹血糖呈剂量依赖性降低，其中T1DM+iCRT5组血糖下降34.0％(P<0.05)，T1DM+iCRT10组下降41.2％(P<0.01)。结果显示，iCRT14对I型糖尿病小鼠空腹血糖有明显抑制作用；与对随机血糖的影响相比，iCRT14抑制空腹血糖的作用更为显著。

(5)糖耐量

测量葡萄糖耐量(Intraperitoneal glucose tolerance test，IPGTT)进行曲线下面积(Area of under curve，AUC)统计。给药8周各组小鼠糖耐量变化如图6所示，给药20周各组小鼠糖耐量变化如图7所示，各组小鼠糖耐量变化的统计分析图如图8所示，其中，**表示与CON组相比P<0.01，#表示与T1DM组相比P<0.05，##表示与T1DM组相比P<0.01。

由图6～8可知，与CON组相比，CON+iCRT10组AUC未见明显变化；T1DM组AUC明显升高(P<0.01)。连续给药8周，与T1DM组相比，T1DM+iCRT10组小鼠AUC下降23.1％(P<0.05)。连续给药20周，与T1DM组相比，T1DM+iCRT5组小鼠AUC下降20.1％(P<0.05)，T1DM+iCRT10组AUC下降33.1％(P<0.01)。

(6)糖化血红蛋白(HbAc)

糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物，糖化血红蛋白测试通常可以反映近8～12周的血糖控制情况。各组小鼠糖化血红蛋白水平变化的统计分析图如图9所示，其中，**表示与CON组相比P<0.01，#表示与T1DM组相比P<0.05，##表示与T1DM组相比P<0.01。由图9可知，连续给药8周，T1DM组HbAc与CON组相比显著升高(P<0.01)；给予2.5～10mg/kg iCRT14后，糖尿病小鼠HbAc逐渐降低，但未见有统计学意义。连续给药20周，与T1DM组相比，2.5～10mg/kg iCRT14能剂量依赖性地降低糖尿病小鼠HbAc浓度，其中T1DM+iCRT5组小鼠HbAc下降15.22％(P<0.05)，T1DM+iCRT10组HbAc下降29.6％(P<0.01)。

(7)甘油三酯(Triglyceride,TG)

各组小鼠甘油三酯水平变化的统计分析图如图10所示。由图10可知，与CON组相比，T1DM组小鼠血清中甘油三酯水平略有降低，但差异不具有统计学意义。连续给药8周、20周，与T1DM组相比，2.5～10mg/kg iCRT14能上调甘油三酯水平，但差异无统计学意义。

(8)总胆固醇(Total cholesterol,CHOL)

各组小鼠总胆固醇水平变化的统计分析图如图11所示。由图11可知，与CON组相比，T1DM组小鼠总胆固醇水平有所增高，但差异无统计学意义。连续给药8周、20周，与T1DM组相比，2.5～10mg/kg iCRT14对糖尿病小鼠总胆固醇无明显影响。

(9)乳酸脱氢酶(LDH)

乳酸脱氢酶是一种存在于细胞浆中，参与糖酵解最后一步的催化酶，正常极少存在于血浆中，但患糖尿病时受损的细胞会释放LDH入血，导致LDH在血浆中含量增高。故临床上常用血清LDH活性来判断疾病和评价药物治疗作用。各组小鼠乳酸脱氢酶水平变化的统计分析图如图12所示，其中，**表示与CON组相比P<0.01，##表示与T1DM组相比P<0.01。由图12可知，连续给药后，与CON组相比，CON+iCRT10组小鼠乳酸脱氢酶未见明显变化，T1DM组小鼠乳酸脱氢酶显著升高(P<0.01)。连续给药8周，2.5～10mg/kg iCRT14对糖尿病小鼠血清乳酸脱氢酶含量未见明显影响。连续给药20周，与T1DM组相比，2.5～10mg/kg iCRT14能剂量依赖性降低糖尿病小鼠乳酸脱氢酶浓度，其中T1DM+iCRT10组下降38.2％(P<0.01)。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (5)

1.iCRT14化合物在制备治疗I型糖尿病的药物中的应用，其特征在于，所述iCRT14化合物的结构如下式所示：

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗I型糖尿病的药物为降低随机血糖水平和空腹血糖水平的药物。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗I型糖尿病的药物为降低糖化血红蛋白水平的药物。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗I型糖尿病的药物为降低乳酸脱氢酶水平的药物。

5.如权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液体制剂或注射剂。

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