CN109486887A - 一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法 - Google Patents

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Abstract

一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法，其特征在于将鲜活牡蛎取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机打碎，按蛎肉重量1～3倍加水制成匀浆；按匀浆质量的1～5%添加蛋白酶制剂，调节pH 6.0～8.5，温度40～65℃，处理2～5h，同时用15～45 KHz，50～300W的超声每小时处理15～30min，得到酶解液；将酶解液离心取上清液，按上清液重量的2～5%添加1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌30～60min，再离心取上清液；将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。本发明的优点在于操作简便，酶制剂用量少，成本低，提取物多肽含量较高，无异味，口感好。

Description

一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法
技术领域
本发明涉及多肽的制备技术领域，特别是涉及一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法。
背景技术
肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。通常由10～100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10000Da。多肽也简称为肽，是20世纪被发现的。近年来的研究表明，人体吸收蛋白质主要是以肽的形式吸收的。由于多肽可以直接吸收，提高了蛋白质的吸收效率，同时也减少了人体消化吸收系统器官的磨损；此外，多肽对调节人体的生理机能也有重要作用。因此，多肽是关乎人体健康的重要物质之一。
鲜活牡蛎肉质细嫩鲜美，略带腥味，有一种独特的味道，广受人们喜爱。此外，牡蛎富含蛋白质、糖原、牛磺酸及多种人体必需微量元素，胆固醇含量低，也是一种传统中药材。随着现代医学的深入研究，人们发现牡蛎还具有强肝解毒、净化淤血、恢复疲劳、强筋健骨、美容养颜、增强免疫力、提高性性功能、促进新陈代谢等多种生物学活性功能。因此，将新鲜牡蛎制成牡蛎多肽食用，有利于人体的消化吸收。目前多采用对牡蛎肉匀浆或蒸煮液直接酶解的方式提取牡蛎多肽，但是酶解的效率较低，提取效果不佳，造成极大浪费，产品杂质多，有腥味。
发明内容
本发明的目的是提供一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法，需要解决的技术问题是：将鲜活牡蛎去壳去脏后取出完整蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机制成肉质匀浆，再在超声辅助条件下用蛋白酶水解肉质匀浆，水解后离心取上清液，加入壳聚糖絮凝大分子蛋白，再离心取上清液，用活性炭去除上清液腥味，最后冻干得到多肽粗提物，该方法操作简便，制得的提取物多肽含量高，无异味，口感好。
一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法，其特征在于将鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以10000～12000r/min处理蛎肉3～5min，按蛎肉重量1～3倍加水配制成匀浆；将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的1～5%添加蛋白酶制剂，调节pH 6.0～8.5，温度40～65℃，处理2～5h，同时在20～45 KHz，50～300W条件下每小时超声处理15～30min，得到酶解液；将酶解液1000～3000r/min的条件下离心3～5min，取上清液，按上清液重量的2～5%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理30～60min，6000～12000r/min离心3～5min，再取上清液；将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。
本发明的优点在于操作简便，超声辅助酶解可减少酶制剂的添加量，节约成本，制得的提取物多肽含量较高，无异味，口感好。
具体实施方式
本发明以鲜活牡蛎为原料，经取肉制成匀浆，超声辅助条件下蛋白酶水解、离心后取上清液沉淀大分子蛋白后再离心过滤后，最后冷冻干燥制成多肽提取物，其制作步骤是：
(1) 鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以10000～12000r/min处理蛎肉3～5min，按蛎肉重量1～3倍加水配制成匀浆；
(2) 将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的1～5%添加蛋白酶制剂，调节pH 6.0～8.5，温度40～65℃，处理2～5h，同时在20～45 KHz，50～300W条件下每小时超声处理15～30min，得到酶解液；
(3) 将酶解液1000～3000r/min的条件下离心3～5min，取上清液，按上清液重量的2～5%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理30～60min，6000～12000r/min离心3～5min，再取上清液；
(4) 将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。
所述蛋白酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一种。
实施例1
(1) 鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以10000r/min处理蛎肉5min，按蛎肉重量3倍加水配制成匀浆；
(2) 将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的2.5%添加胰蛋白酶制剂，调节pH 8.0，温度45℃，处理4h，同时在30 KHz，100W条件下每小时超声处理15min，得到酶解液；
(3) 将酶解液2500r/min的条件下离心3min，取上清液，按上清液重量的3%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理45min，10000r/min离心3min，再取上清液；
(4) 将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。
实施例2
(1) 鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以12000r/min处理蛎肉3min，按蛎肉重量2倍加水配制成匀浆；
(2) 将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的3%添加木瓜蛋白酶制剂，调节pH 6.0，温度60℃，处理4h，同时在40 KHz，200W条件下每小时超声处理20min，得到酶解液；
(3) 将酶解液3000r/min的条件下离心3min，取上清液，按上清液重量的3%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理45min，12000r/min离心3min，再取上清液；
(4) 将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。
实施例3
(1) 鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以12000r/min处理蛎肉3min，按蛎肉重量1.5倍加水配制成匀浆；
(2) 将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的4%添加中性蛋白酶制剂，调节pH 7.0，温度50℃，处理5h，同时在40 KHz，250W条件下每小时超声处理25min，得到酶解液；
(3) 将酶解液3000r/min的条件下离心2min，取上清液，按上清液重量的4%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理60min，8000r/min离心5min，再取上清液；
(4) 将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。

Claims (2)

1.一种超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法，其特征在于将鲜活牡蛎去壳去脏后取蛎肉，清洗后用高速组织捣碎机以10000～12000r/min处理蛎肉3～5min，按蛎肉重量1～3倍加水配制成匀浆；将匀浆转入酶解罐，按匀浆质量的1～5%添加蛋白酶制剂，调节pH 6.0～8.5，温度40～65℃，处理2～5h，同时在15～45 KHz，50～300W条件下每小时超声处理15～30min，得到酶解液；将酶解液1000～3000r/min的条件下离心3～5min，取上清液，按上清液重量的2～5%添加浓度为1%的壳聚糖溶液，自然pH，室温条件下100r/min匀速搅拌处理30～60min，6000～12000r/min离心3～5min，再取上清液；将上清液用活性炭过滤去除腥味，最后冷冻干燥制得多肽粗提物。
2.如权利要求1所述的超声和酶解协同制备牡蛎多肽的方法，其特征在于所述的蛋白酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一种。
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