CN109463525A - 一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法及应用。限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法是先将蛋清粉配置成质量浓度为10％～20％的原液，然后利用限制性酶酶液对原液进行酶解、灭酶，最后对原液进行冷冻干燥得到脂质替代物。本发明利用酶改性法对蛋清粉进行了改性。较以往的化学改性法，本发明的制备方法操作更简洁、更温和且更环保；较以往的物理改性法，本发明制备的脂质替代物的应用效果更好，且更易实现工业化生产。同时，较以往报道的混合酶改性方法，本发明的限制性酶改性法可大大降低蛋清蛋白的水解度。这样保证了蛋清蛋白水解结束后的产物仍主要为蛋白质而非多肽，更利于脂质替代物获得脂肪的相关特性。
Description
技术领域
本发明涉及脂质替代物制备技术领域，具体为一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法及应用。
背景技术
脂肪替代品一般分为3类：代脂肪、模拟脂肪和改性脂肪。代脂肪和改性脂肪有时也被称为合成物质类替代品，它们大部分都是化学合成而得到，这类脂肪替代品有时因为过量使用会导致肛漏和渗透性腹泻等问题而受到限制。模拟脂肪是一类极性的水溶性化合物，能模仿脂肪的感官和物理性质，包括蛋白质基和碳水化合物基模拟脂肪。其中，碳水化合物基模拟脂肪不能完全以1:1的比例替代脂肪，且较大添加量时会给食品带来不良的苦味。蛋白质基模拟脂肪能够被人体消化吸收、提供脂肪的口感性状且能量较低，是一类认可度较高的脂质替代物。根据蛋白质来源不同，可将蛋白质基模拟脂肪分为植物类蛋白脂质替代物和动物类蛋白脂质替代物。其中，植物类脂质替代物以大豆蛋白为代表，但其豆腥味使它的实际应用受到了影响；动物类脂质替代物以乳清蛋白和蛋清蛋白为主，蛋清蛋白较乳清蛋白更加方便易得且成本更低，同时国内对蛋清蛋白脂质替代物的研究较为欠缺。因此，对蛋清蛋白脂质替代物的研究开发显得十分有意义。
虽然蛋清中含有丰富的蛋白质，但是它是一种常见的过敏食物，位居食物过敏排行榜的第二位。据流行病学调查表明，鸡蛋过敏占婴幼儿和儿童食物过敏的35％，占成年人食物过敏的12％。研究发现酶解不仅可以降低鸡蛋蛋清蛋白致敏性，而且酶解后的蛋清蛋白更易被人体消化吸收，同时与原蛋白相比，它的起泡性、黏度、乳化性等功能均得到了改善。需要注意是，过度酶水解会对蛋清蛋白的功能性质造成不良后果。限制性酶解是一种在较低的水解范围内对蛋白质进行酶解的方法。限制性酶水解不仅能够在一定程度上提高和改善蛋白质某些功能性质和结构性质，还可以保留未酶解蛋白的功能特性，以及保留未酶解蛋白中原有的特征风味。因此，适度酶解蛋清蛋白是获得高品质蛋清蛋白水解物的关键。
当前，关于鸡蛋清蛋白酶解产物的功能性和生理活性研究较多，而针对其限制性酶解产物的研究还较少，尤其利用限制性酶解制备不同水解度的蛋清蛋白脂质替代物更是鲜有报道。田朝杰等将蛋清蛋白粉及蛋黄粉充分混匀配制蛋白分散液，添加柠檬酸调节pH值置于恒温水浴条件下湿热处理，使蛋白适度变性，使用高速剪切机进行微粒化处理，得到均匀(平均粒子直径＜10μm)、润滑的蛋清蛋白基脂肪模拟物。此方法较为繁琐，且含有蛋黄粉，不能算真正意义上的纯蛋清蛋白脂肪模拟物。王玉利用耐热酶对鸡蛋清进行了酶解，获得了乳化性和乳化稳定性较好的蛋清水解物，但未对蛋清蛋白脂肪模拟物做系统研究。因此，开展不同水解度的蛋清蛋白脂质替代物研究显得十分有价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法及应用，以弥补现有技术中利用蛋清蛋白制备脂质替代物的空白。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，包括以下步骤：
将蛋清粉溶于蒸馏水中得到原液，对所述原液的上清液进行预冻，将预冻后的上清液进行冷冻干燥后获得脂质替代物；
所述限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法在预冻前，对所述原液做以下步骤处理：
向所述原液中加入酶量为300～5000u/g的限制性酶酶液后得到混合液一，其中，所述混合液一的pH值为6.0～7.0，所述原液的质量浓度为10％～20％；
将所述混合液一放置在温度为25～60℃的恒温水浴锅中进行酶解，酶解的时间为1～6h；以及
将酶解后的混合液一放在沸水锅中进行灭酶，然后待灭酶后的混合液一冷却至室温时，对所述灭酶后的混合液一进行离心操作得到混合液二；
其中，对所述混合液二的上清液进行预冻，将预冻后的上清液进行冷冻干燥后获得脂质替代物。
优选的，所述预冻的时间为2～3d，预冻的温度为-70℃，所述冷冻干燥的时间为40～50h，冷冻干燥的温度为-60～-40℃，冷冻干燥的真空度为0.1～0.3mbar。
优选的，所述限制性酶酶液为风味蛋白酶酶液、木瓜蛋白酶酶液、碱性蛋白酶以及中性蛋白酶中的一种；其中，所述风味蛋白酶酶液加入的酶量为300～1500u/g，所述木瓜蛋白酶酶液加入的酶量为1000～5000u/g。
优选的，在酶解的过程中，需间隔性的对所述混合液一进行摇晃，所述间隔的时间为15～30min；对所述原液和所述限制性酶酶液进行搅拌混合，所述搅拌的时间为5～10min。
优选的，采用玻璃棒、磁力搅拌中的一种方式进行搅拌。
优选的，将所述上清液放置在超低温冰箱中进行预冻，将所述上清液放置在冷冻干燥机中进行冷冻干燥。
优选的，所述灭酶的时间为5～10min。
优选的，所述离心操作的条件为：离心时间15～25min，离心转速6000～8000r/min。
本发明还提出一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的应用，所述脂质替代物应用于低脂酸奶的制备或者应用于低脂冰淇淋的制备。
优选的，所述脂质替代物应用于低脂酸奶制备中的具体应用方法包括以下步骤：
制备所述脂质替代物；
在脱脂复原乳中添加蔗糖后，再添加所述脂质替代物并进行高速搅拌得到调配复原乳，所述脱脂复原乳的脂肪含量为0.1％，所述蔗糖的加入量是所述脱脂复原乳质量的5～10％，所述脂质替代物的加入量是所述脱脂复原乳质量的14～22％；
在压力为10～15MPa下，对所述调配复原乳进行均质处理，所述均质处理的时间为5～10min；
对均质处理后的调配复原乳进行杀菌处理，所述杀菌的温度为80℃，杀菌的时间为15min；
待杀菌后的调配复原乳的温度冷却到35～43℃时，向所述杀菌后的调配复原乳中加入浓度为12～18％的酸奶发酵剂进行接种；
然后将接种后的调配复原乳放入温度为40～45℃的培养箱中培养4～6h，然后在4～6℃条件下冷藏后熟12h以上得到所述低脂酸奶。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明利用酶改性法对蛋清粉进行了改性。较以往的化学改性法，本发明的制备方法操作更简洁、更温和且更环保；较以往的物理改性法，本发明制备的脂质替代物的应用效果更好，且更易实现工业化生产；
2、较以往报道的混合酶改性方法，本发明的限制性酶改性法可大大降低蛋清蛋白的水解度。这样保证了蛋清蛋白水解结束后的产物仍主要为蛋白质而非多肽，更利于脂质替代物获得脂肪的相关特性；
3、本发明将制备出的脂质替代物可以很好的作为脂肪替代原料进行食品加工。应用脂质替代物后的食品的口感和色泽等方面的效果更好并可易实现工业化。本发明还可以采用所述脂质替代物去制备其他开发系列的代脂产品，为生产低脂类食品提供了良好的保障。同时，利用限制性酶酶液对蛋清蛋白进行酶解制备脂质替代物使得蛋品的综合开发利用得以更好的发展，并有利于禽蛋产业附加值的提高和产业升级。
附图说明
图1为本发明的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法流程图；
图2为风味蛋白酶酶液在不同加酶量下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图3为风味蛋白酶酶液在不同酶解时间下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图4为风味蛋白酶酶液在不同酶解温度下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图5为木瓜蛋白酶酶液在不同加酶量下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图6为木瓜蛋白酶酶液在不同酶解时间下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图7木瓜蛋白酶酶液在不同酶解温度下制备的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性图；
图8为实施例2中低脂酸奶制备工艺路线图；
图9为实施例2中制备的低脂酸奶感官评价图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，包括以下步骤：
将蛋清粉溶于蒸馏水中得到原液。对所述原液的上清液进行预冻，将预冻后的上清液进行冷冻干燥后获得脂质替代物。所述蛋清粉的平均粒径约为2μm，乳化稳定性为45％。
本实施例中，所述限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法在预冻前，对所述原液做以下步骤处理。
参考图1，向所述原液中加入酶量为300～5000u/g的限制性酶酶液后得到混合液一。并对所述原液和所述限制性酶酶液进行搅拌混合。所述搅拌的时间为5～10min，采用玻璃棒、磁力搅拌中的一种方式进行搅拌并利用精密pH计调整所述混合液一的pH值。所述混合液一的pH值为6.0～7.0。所述原液的质量浓度为10％～20％；其中，所述限制性酶酶液为风味蛋白酶酶液、木瓜蛋白酶酶液中、碱性蛋白酶以及中性蛋白酶中的一种；所述风味蛋白酶酶液加入的酶量为300～1500u/g，所述木瓜蛋白酶酶液加入的酶量为1000～5000u/g。
将所述混合液一放置在温度为25～60℃的恒温水浴锅中进行酶解，酶解的时间为1～6h；其中，在酶解的过程中，需间隔性的对所述混合液一进行摇晃以保证所述蛋清粉充分水解。所述间隔的时间为15～30min。以及
将酶解后的混合液一放在沸水锅中进行灭酶。然后待灭酶后的混合液一冷却至室温时，对所述灭酶后的混合液一进行离心操作得到混合液二。其中，所述灭酶的时间为5～10min；所述离心操作的条件为：离心时间15～25min，离心转速6000～8000r/min。
其中，将所述混合液二的上清液放置在超低温冰箱中进行预冻后，再将预冻后的上清液放置在冷冻干燥机中进行冷冻干燥后获得脂质替代物。即，预冻后的上清液在冷冻干燥机中完全冻干时取出获得脂质替代物，所述完全冻干是指上清液冷冻干燥后形成的固体的外观不粘结且呈疏松结构。得到的所述脂质替代物的水解度小于10％，平均粒径为1.2μm。且得到的所述脂质替代物的乳化稳定性为原来蛋清粉的乳化稳定性的1.5倍以上。其中，所述预冻的时间为2～3d，预冻的温度为-70℃，所述冷冻干燥的时间为40～50h，冷冻干燥的温度为-60～-40℃，冷冻干燥的真空度为0.1～0.3mbar。
本实施例中，将以风味蛋白酶酶液和木瓜蛋白酶酶液分别为例，具体说明所述脂质替代物的制备方法。
案例一：将蛋清粉溶于蒸馏水中得到原液，所述原液的质量浓度为10％～20％。所述蛋清粉的平均粒径约为2μm，乳化稳定性为45％。
向所述原液中加入酶量为300～15000u/g的风味蛋白酶酶液，搅拌5～10min后得到混合液一，采用玻璃棒进行搅拌并利用采用精密pH计调整所述混合液一的pH值为6.0。
将所述混合液一放置在温度为25～60℃的恒温水浴锅中进行酶解，酶解的时间为1～6h；其中，在酶解的过程中，需间隔性的对所述混合液一进行摇晃以保证所述蛋清粉充分水解。所述间隔的时间为15～30min。
将酶解后的混合液一放在沸水锅中进行灭酶。然后待灭酶后的混合液一冷却至室温时，对所述灭酶后的混合液一进行离心操作得到混合液二。其中，所述灭酶的时间为5～10min；所述离心操作的条件为：离心时间15～25min，离心转速6000～8000r/min；
将所述混合液二的上清液放置在超低温冰箱中进行预冻后，再将预冻后的上清液放置在冷冻干燥机中进行冷冻干燥后获得脂质替代物。其中，所述预冻的时间为2～3d，所述冷冻干燥的时间为48h，冷冻干燥的温度为-55℃，冷冻干燥的真空度为0.1mbar。
对案例一中风味蛋白酶酶液的加入酶量、酶解时间以及酶解时间进行不同的调控制备出不同的脂质替代物。然后对所述不同的脂质替代物分别进行乳化性以及乳化稳定性的检测，以获取所述风味蛋白酶酶液在制备脂质替代物时的最优条件。所述不同的脂质替代物的测定结果如图2至4所示。
从图2可以看出，随着风味蛋白酶酶液的加酶量的增加，得到的脂质替代物的乳化性先上升后降低。当风味蛋白酶酶液的加酶量提高到最适加酶量时，即风味蛋白酶酶液的加酶量为900u/g时，得到的脂质替代物的乳化性及乳化稳定性为最佳。这是因为在一定的加酶量范围内，蛋清粉中的蛋清蛋白受到风味蛋白酶酶液的作用，其结构发生变化。且随着分子链变短，水溶性增加，包裹在蛋白质内的组多疏水基团暴露出来，亲脂性增强从而改善蛋清蛋白的乳化特性。
从图3可以看出，随着风味蛋白酶酶液的酶解时间的延长，蛋清蛋白上更多的疏水基团暴露。由于蛋清蛋白的肽链分子长度降低，分子的柔性得到改善，从而在不同程度上改变了蛋清蛋白结构的氢键、范得华力以及离子键，导致蛋白表面的亲水疏水基团比例的改变和蛋白质迁移灵活性的改变，最终改善蛋清蛋白的乳化特性。
从图4可以看出，随着温度的提高会使蛋清蛋白的蛋白质内部的疏水基团外露。这将改变蛋白质的界面吸附作用，使酶解后的蛋清液的乳化特性得到增强。但是，当温度的不断提高，酶解后的蛋清液的乳化稳定性会由于疏水基团的聚合而降低。
通过图2至4的测定结果，可知风味蛋白酶的加酶量为900u/g、酶解时间3h、酶解温度55℃，pH为6.0是最优条件。
案例二：与案例一不同的是，选择木瓜蛋白酶酶液为限制性酶酶液。所述木瓜蛋白酶酶液的加入酶量为1000～15000u/g，pH值为7.0。对木瓜蛋白酶酶液加入酶量、酶解时间以及酶解时间进行不同的调控制备出不同的脂质替代物。然后对所述不同的脂质替代物分别进行乳化性以及乳化稳定性的检测，以获取所述木瓜蛋白酶酶液在制备脂质替代物时的最优条件。所述不同的脂质替代物的测定结果如图5至7所示。按照案例一的分析方法可得，木瓜蛋白酶在pH为7.0，加酶量为4000u/g，酶解时间3h，酶解温度55℃时，为最优条件。
所述案例一和案例二中的乳化性以及乳化稳定性的测定方法如下。
将冻干的脂质替代物样品溶解于pH为7.4，浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液制成待测样品液。所述待测样品液的浓度为1mg/mL。然后在待测样品液中加入10mL大豆油并在室温(25℃)下进行均质处理形成乳化液。均质转速为11000r/min，均质时间为1min。在均质后0min和10min时分别从乳化液底部吸取300μL于试管中，加入5ml、0.1％SDS进行稀释后，以在500nm处测的吸光值为A0。用乳化活性指数(EAI)表示乳化性，10min后再测其吸光值A10，其中空白以0.1％的SDS溶液做对照。其中，
乳化性(EAI)＝A0
乳化稳定性(ES)＝AA100×100％
本实施例中的脂质替代物的制备方法是利用酶改性法对蛋清粉进行了改性。较以往的化学改性法操作，本实施例中的制备方法更简洁、更温和且更环保；较以往的物理改性法，利用本实施例的制备方法制备的脂质替代物的应用效果更好，且更易于实现工业化生产。且限制性酶改性法较以往报道的混合酶改性方法，限制性酶改性法可大大降低蛋清蛋白的水解度。这样保证了蛋清蛋白水解结束后的产物仍主要为蛋白质而非多肽，更利于脂质替代物获得脂肪的相关特性，如乳化性的特性。
实施例2
为验证实施例1中制备的脂质替代物具有很好的应用效果并能实现工业化。本实施例中，将所述脂质替代物应用于低脂酸奶制备中。一种的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的应用，所述脂质替代物应用于低脂酸奶的制备。
参考图8，所述脂质替代物应用于低脂酸奶制备中的具体应用方法包括以下步骤：
制备实施例1所述的脂质替代物，所述脂质替代物制备过程中选择风味蛋白酶酶液为限制性酶酶液；
在脱脂复原乳中添加蔗糖后，再添加所述脂质替代物并进行高速搅拌得到调配复原乳，所述脱脂复原乳的脂肪含量为0.1％，所述脂质替代物的加入量为14～22％，所述蔗糖的加入量是所述脱脂复原乳质量的5～10％，所述脂质替代物的加入量是所述脱脂复原乳质量的14～22％；
在压力为10～15MPa下，对所述调配复原乳进行均质处理，所述均质处理的时间为5～10min；
对均质处理后的调配复原乳进行杀菌处理，所述杀菌的温度为80℃，杀菌的时间为15min；
待杀菌后的调配复原乳的温度冷却到35～43℃时，向所述杀菌后的调配复原乳中加入浓度为12～18％的酸奶发酵剂进行接种；
然后将接种后的调配复原乳放入温度为40～45℃的培养箱中培养4～6h，然后在4～6℃条件下冷藏后熟12h以上得到所述低脂酸奶。
对本实施例制备的低脂酸奶进行感官评价，以判定实施例1中制备的脂质替代物是否具有积极效果。选择并培训30名经感官评定培训过的人员，在室温下按参照《GB19302-2010》制定的感官评分标准表，如表1。对事先编好号的所有样品进行综合评价打分并取其平均值。参考图9，低脂酸奶的感官评价图可以看出，相比于市售的全脂酸奶，利用实施例1制备的脂质替代物来制备的低脂酸奶在组织状态、色泽、口感以及气味等方面都有着显著的提升。
表1低脂酸奶感官指标评价表
实施例3
实施例1中制备的脂质替代物还可应用于低脂冰淇淋制备中。一种的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的应用，所述脂质替代物还应用于低脂冰淇淋的制备。本实施例中，制备脂质替代物中，采用木瓜蛋白酶为限制性酶酶液。低脂冰淇淋的配方表如表2所示。
表2低脂冰淇淋配方表
选择30名经感官评定培训过的人员对低脂冰淇淋进行感官评价。具体的，对事先编好号的所有样品进行综合评价打分，取其平均值。根据冰淇淋感官评价的国家标准结合文献报道中的实验方案，最终确定评价指标为色泽、形态、组织、滋味气味和杂质5个方面。具体评价标准如表3所示。
表3低脂冰淇淋感官评价表
| 项目 | 要求 | 得分 |
| 色泽 | 主体颜色分布均匀，具有品种应有的 | 0～20 |
| 形态 | 形态完整，大小均匀，不变形，无塌 | 0～20 |
| 组织 | 细腻滑润，无气孔，具有品种该有的 | 0～25 |
| 滋味气味 | 柔和，具有品种该有的乳香味，无异 | 0～25 |
| 杂质 | 无肉眼可见杂质 | 0～10 |
如表4所示，本实施例制备的低脂酸奶在色泽、形态、组织以及滋味气质等方面都具有很好的效果。
表4低脂冰淇淋与市售全脂冰淇淋的感官评价表
且同时，通过实施例2和实施例3中可以得知，制备出的脂质替代物可以很好的作为脂肪替代原料进行食品加工。应用脂质替代物后的食品的口感和色泽等方面的效果更好并可易实现工业化。本发明还可以采用所述脂质替代物去制备其他开发系列的代脂产品，为生产低脂类食品提供了良好的保障。同时，利用限制性酶酶液对蛋清蛋白进行酶解制备脂质替代物使得蛋品的综合开发利用得以更好的发展，并有利于禽蛋产业附加值的提高和产业升级。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，包括以下步骤：
将蛋清粉溶于蒸馏水中得到原液，对所述原液的上清液进行预冻，将预冻后的上清液进行冷冻干燥后获得脂质替代物；
其特征在于，所述限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法在预冻前，对所述原液做以下步骤处理：
向所述原液中加入酶量为300～5000u/g的限制性酶酶液后得到混合液一；其中，所述混合液一的pH值为6.0～7.0，所述原液的质量浓度为10％～20％；
将所述混合液一放置在温度为25～60℃的恒温水浴锅中进行酶解，酶解的时间为1～6h；以及
将酶解后的混合液一放在沸水锅中进行灭酶，然后待灭酶后的混合液一冷却至室温时，对所述灭酶后的混合液一进行离心操作得到混合液二；
其中，对所述混合液二的上清液进行预冻，将预冻后的上清液进行冷冻干燥后获得脂质替代物。
2.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，所述预冻的时间为2～3d，预冻的温度为-70℃，所述冷冻干燥的时间为40～50h，冷冻干燥的温度为-60～-40℃，冷冻干燥的真空度为0.1～0.3mbar。
3.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，所述限制性酶酶液为风味蛋白酶酶液、木瓜蛋白酶酶液、碱性蛋白酶以及中性蛋白酶中的一种；其中，所述风味蛋白酶酶液加入的酶量为300～1500u/g，所述木瓜蛋白酶酶液加入的酶量为1000～5000u/g。
4.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，在酶解的过程中，需间隔性的对所述混合液一进行摇晃，所述间隔的时间为15～30min；对所述原液和所述限制性酶酶液进行搅拌混合，所述搅拌的时间为5～10min。
5.根据权利要求4所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，采用玻璃棒、磁力搅拌中的一种方式进行搅拌。
6.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，将所述上清液放置在超低温冰箱中进行预冻，将所述上清液放置在冷冻干燥机中进行冷冻干燥。
7.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，所述灭酶的时间为5～10min。
8.根据权利要求1所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的方法，其特征在于，所述离心操作的条件为：离心时间15～25min，离心转速6000～8000r/min。
9.一种如权利要求9所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的应用，其特征在于，所述脂质替代物应用于低脂酸奶的制备或者应用于低脂冰淇淋的制备。
10.根据权利要求9所述的限制性酶水解蛋清蛋白制备脂质替代物的应用，其特征在于，所述脂质替代物应用于低脂酸奶制备中的具体应用方法包括以下步骤：
制备按权利要求1至8中任意一项所述的脂质替代物；
在脱脂复原乳中添加蔗糖后，再添加所述脂质替代物并进行高速搅拌得到调配复原乳，所述脱脂复原乳的脂肪含量为0.1％，所述蔗糖的加入量是所述脱脂复原乳质量的5～10％，所述脂质替代物的加入量是所述脱脂复原乳质量的14～22％；
在压力为10～15MPa下，对所述调配复原乳进行均质处理，所述均质处理的时间为5～10min；
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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