CN109419774A - 一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,以胆固醇、大豆卵磷脂和花青素为原料,先按照固定的比例称取胆固醇和大豆卵磷脂,用适量的氯仿进行完全溶解,置于茄型的旋转蒸发瓶中,在适宜的温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿,真空继续旋蒸直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;加入花青素水溶液和玻璃珠,水浴超声使膜脱落,在加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理,即得蓝莓中花青素脂质体。本发明可以较大程度的提高花青素的储存稳定性,制作方法与常用的方法比,包封率较高,工艺简便,且制得的脂质体粒径较小、大小均一、不易沉聚。
Description
技术领域
本发明属于药物制备技术领域,具体是一种包裹花青素的脂质体囊泡的制备方法。
背景技术
蓝莓 ( Blueberry) 又称越橘,杜鹃花科( Ericaceae) 越桔属( Vacciniumspp.) 多年生落叶或常绿灌木,其营养成分丰富,除了常规的有机酸和糖类以外,还含有多种的维生素、不饱和脂肪酸、矿物质、花青素等成分。花青素(anthocyanins)又名花色素,是一种广泛存在于植物中的天然色素,与合成色素相比,具有安全性高,资源丰富等优点,同时花青素还具有一定的营养和药理作用,通常以糖苷的形式存在。花青素属于类黄酮类化合物,基本结构母核是2-苯基苯并吡喃阳离子,目前自然界已知的花青素有20多种,植物中常见的有天竺葵色素、矢车菊色素、飞燕草色素、芍药色素、牵牛色素及锦葵色素的衍生物6种,而蓝莓中的花青素主要由飞燕草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药色素和锦葵色素5种色素与葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖各自结合形成的花色苷和乙酰化花色素苷组成。
脂质体囊泡是亲油、亲水分子构成的双分子膜,是一种定向药物载体,属于靶向给药系统的一种新剂型,由于其自身结构和组成的多样性,已经成为生物学、化学和医学方面非常普遍的研究对象。脂质体直径仅有几十纳米至数微米,按结构分为单层脂质体、多层脂质体和多囊脂质体,磷脂作为构成脂质体的主要膜材,常用天然磷脂和合成磷脂。脂质体在一定程度上对药物有保护作用,可以改善和提高药物的稳定性,同时作为药物载体也延长了药物的作用时间,还能在一定程度上降低不良反应。
目前,蓝莓花青素在食品、化妆、医药等方面都有着巨大的应用潜力,蓝莓花青素对人体视力的独特保健作用使其在保健食品、 医疗行业深受欢迎,但是花青素稳定性较差,容易分解,如何提高花青素稳定性已经成为国内外的研究热点,而使用脂质体对花青素进行包裹,作为药物载体,可以良好的避免其不稳定性,提高给药剂量,使其能更好的作用于靶细胞,正因为这些优势,花青素脂质体的研究在未来将具有更广泛的研究价值。
发明内容
本发明提供了一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,制得的脂质体包封率高,不易沉聚。
为了实现上述目的,以胆固醇、大豆卵磷脂和花青素为原料,通过薄膜分散法制备花青素脂质体,其步骤包括:
1)按照配方比例称取合适的胆固醇和大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在适宜的温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理,即得蓝莓花青素脂质体。
本发明所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,所述的配方中胆固醇和大豆卵磷脂各组分的摩尔比为:1:2、1:3、1:4。
本发明所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,所述的除去溶剂氯仿,形成薄膜过程中分别以40℃、50℃、60℃减压旋转蒸发。
本发明所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,所述的加入花青素水溶液的量分别为5mL、10mL、15mL,水浴超声30min使膜脱落。
本发明所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,所述的加入适量的PBS缓冲溶液通过低速旋转的方法使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min。
本发明所述的花青素脂质体的制备方法得到的混悬液性质稳定,不易沉聚,包封率高,同时能提高花青素的稳定性,进而提高花青素的生物活性,不仅制备方法简单,同时还能提高药物的治疗效果。
具体实施方式:
下面结合具体实施例对本发明所述蓝莓花青素脂质体的制备方法作进一步说明,但是本发明的保护范围并不限于此。
实施例1:
本发明提供了一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,其步骤包括:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和300mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在50℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入10mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例2:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和200mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在60℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入10mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例3:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和300mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在60℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入15mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例4:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和300mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在60℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入5mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例5:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和200mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在50℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入15mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例6:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和400mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在50℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入5mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例7:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和300mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在40℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入15mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例8:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和300mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在40℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入5mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例9:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和200mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在40℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入10mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例10:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和200mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在50℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入5mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例11:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和400mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在40℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入10mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例12:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和400mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在60℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入10mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
实施例13:
1)按照比例称取100mg的胆固醇和400mg的大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在50℃温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入15mL花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声30min使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min,即得蓝莓花青素脂质体。
包封率的检测:
包封率(%)=(1-C1/C2)×100(C1为游离花青素的含量;C2为总花青素的含量)。
Claims (5)
1.一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,以胆固醇、大豆卵磷脂和花青素为原料,通过薄膜分散法制备花青素脂质体,其特征在于,具体步骤包括:
1)按照配方比例称取合适的胆固醇和大豆卵磷脂,溶于适量的氯仿中,不断搅拌使其完全溶解;
2)将步骤1)中的混合物置于茄型的旋转蒸发瓶中,在适宜的温度下减压旋蒸除去溶剂氯仿;
3)待溶剂全部除去后,真空继续旋转直至瓶内壁形成均匀的干燥薄膜;
4)加入花青素水溶液和少量玻璃珠,水浴超声使膜脱落,得悬浮液;
5)往步骤4)的悬浮液中加入适量的PBS缓冲溶液使膜充分水化,最后将混合物超声处理,即得蓝莓花青素脂质体。
2.根据权利要求1所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,在所属的步骤1)中,胆固醇和大豆卵磷脂各组分的摩尔比为:1:2、1:3、1:4。
3.根据权利要求1所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,在所属的步骤2)中,分别以40℃、50℃、60℃减压旋蒸除去溶剂氯仿。
4.根据权利要求1所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,在所属的步骤4)中,分别加入浓度为2mg/mL的花青素水溶液5mL、10mL、15mL,水浴超声30min使膜脱落。
5.根据权利要求1所述的一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法,在所属的步骤5)中,加入适量的PBS缓冲溶液通过低速旋转的方法使膜充分水化,最后将混合物超声处理40min。
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Legal Events
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
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Application publication date: 20190305 |