CN101884617A - 一种原花青素脂质体的制备方法 - Google Patents
一种原花青素脂质体的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101884617A CN101884617A CN 201010184716 CN201010184716A CN101884617A CN 101884617 A CN101884617 A CN 101884617A CN 201010184716 CN201010184716 CN 201010184716 CN 201010184716 A CN201010184716 A CN 201010184716A CN 101884617 A CN101884617 A CN 101884617A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- proanthocyanidins
- liposomes
- preparation
- phosphate buffer
- specific embodiment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
一种原花青素脂质体的制备方法,它涉及一种脂质体的制备方法。它解决了现有采用微胶囊的形式保护原花青素存在粒径较大,不利于人体吸收的问题的问题。方法:一、将大豆卵磷脂和胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的混合液,再加入原花青素和磷酸盐缓冲液并混合得混合液;二、混合液置于25℃的水浴中超声处理,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加磷酸盐缓冲液,水合后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜即完成。本发明采用脂质体包埋原花青素,使原花青素更加稳定,且粒径较小,具有靶向性,有利于人体吸收,原花青素脂质体的包埋率高达88.89%,制备工艺简单。
Description
技术领域
本发明涉及一种脂质体的制备方法。
背景技术
近代研究发现,原花青素具有抗氧化、抗血栓形成、调节血管细胞功能、降低血小板凝聚、抗炎、抗微生物、减轻缺血再灌注损伤、减缓早老性痴呆和帕金森氏病发展进程等作用。国外对原花青素的性能研究较多,并广泛用于食品、化妆品及保健药品等领域。许多研究表明,原花青素在体内其抗氧化、清除自由基的能力是VE的50倍、Vc的20倍,以安全低毒、高效、高生物利用率而著称,其在食品添加剂、保健品、药物、化妆品等领域得到了广泛的应用。由此可见,对原花青素的研究可以更好的利用这一宝贵资源。1961年英国学者Bangham和Standish在电镜下发现当磷脂分子分散在水中时会自然形成有序排列的类似生物膜结构的多层囊泡,后来人们将这种具有双层膜形态的生物膜结构的中空小球通称为脂质体。
原花青素水溶性较好,但稳定性较差,易受外界条件影响,如易氧化,对光、温度、pH值敏感等,这使其应用受到限制。目前研究较多的是原花青素微胶囊,并且已经进行了工业化生产,但是其粒径较大,不利于人体吸收,如何在有效保护原花青素的同时减小其粒径一直是个难题。
发明内容
本发明目的是为了解决现有采用微胶囊的形式保护原花青素存在粒径较大,不利于人体吸收的问题,而提供一种原花青素脂质体的制备方法。
原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.2672~0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362~0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0053~0.0364g的原花青素和2~20mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合物置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8~80mL的磷酸盐缓冲液,水合5~10min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混合液中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
脂质体作为这种营养成分的有效载体,可以增加易氧化、易挥发、光敏性和热敏性物料的稳定性;控制芯材的释放;降低某些物质的毒性;减少副作用;屏蔽不良味道与气味等。
本发明采用逆相蒸发法制备原花青素脂质体,把原花青素包埋在内水相中,降低了对外界环境的敏感性,使原花青素更加稳定;原花青素脂质体的包埋率高达88.89%,并且适合进行大规模工业操作。
本发明采用脂质体包埋原花青素,粒径较小,具有靶向性,有利于人体吸收,实现了在有效保护原花青素的同时减小其粒径这一技术难题,并且制备工艺简单,具有广泛的应用前景。
具体实施方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式,还包括各具体实施方式间的任意组合。
具体实施方式一:本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.2672~0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362~0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0053~0.0364g的原花青素和2~20mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合物置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8~80mL的磷酸盐缓冲液,水合5~10min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混合液中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式步骤一中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0,含有质量浓度为0.2%的叠氮化钠。
本实施方式步骤三中所得的原花青素脂质体为混悬液,可在4℃下保存,也可以制备成冻干粉末或者喷干成粉末。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中将0.2672g的大豆卵磷脂和0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中将0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中将0.2765g的大豆卵磷脂和0.1235g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中将0.2976g的大豆卵磷脂和0.1024g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式六:本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是步骤一中加入乙醚和无水乙醇的100~300mL混合液。其它步骤及参数与具体实施方式一至五之一相同。
具体实施方式七:本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是步骤一中加入乙醚和无水乙醇的200mL混合液。其它步骤及参数与具体实施方式一至五之一相同。
具体实施方式八:本实施方式与具体实施方式一至七之一不同的是步骤一中加入0.006~0.03g的原花青素和5~15mL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式一至七之一相同。
具体实施方式九:本实施方式与具体实施方式一至七之一不同的是步骤一中加入0.009g的原花青素和8mL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式一至七之一相同。
具体实施方式十:本实施方式与具体实施方式一至七之一不同的是步骤一中加入0.025g的原花青素和10mL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式一至七之一相同。
具体实施方式十一:本实施方式与具体实施方式一至十之一不同的是步骤二中30℃的水浴中,在700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8mL的磷酸盐缓冲液,水合5min后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式一至十之一相同。
具体实施方式十二:本实施方式与具体实施方式一至十之一不同的是步骤二中50℃的水浴中,在400MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入80mL的磷酸盐缓冲液,水合10min后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式一至十之一相同。
具体实施方式十三:本实施方式与具体实施方式一至十之一不同的是步骤二中35~45℃的水浴中,在450~650MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入20~60mL的磷酸盐缓冲液,水合6~9min后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式一至十之一相同。
具体实施方式十四:本实施方式与具体实施方式一至十之一不同的是步骤二中40℃的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入50mL的磷酸盐缓冲液,水合8min后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式一至十之一相同。
具体实施方式十五:本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.3532g的大豆卵磷脂和0.0468g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40mL混合液,再加入0.0053~0.0364g的原花青素和2mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合液置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于30℃的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8mL的磷酸盐缓冲液,水合6min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式所得原花青素脂质体,把原花青素包埋在内水相中,降低了对外界环境的敏感性,使原花青素更加稳定;原花青素脂质体的包埋率达88.89%。
具体实施方式十六:本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.2672g的大豆卵磷脂和0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0065g的原花青素和5mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合液置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于35℃的水浴中,在600MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入20mL的磷酸盐缓冲液,水合8min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88.52%。
具体实施方式十七:本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0282g的原花青素和10mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合液置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于40℃的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入30mL的磷酸盐缓冲液,水合7min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88.01%。
具体实施方式十八:本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.3246g的大豆卵磷脂和0.0753g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0302g的原花青素和15mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合液置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于50℃的水浴中,在450MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入50mL的磷酸盐缓冲液,水合10min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88.63%。
Claims (8)
1.一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现:一、将0.2672~0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362~0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0053~0.0364g的原花青素和2~20mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合物置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8~80mL的磷酸盐缓冲液,水合5~10min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混合液中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
2.根据权利要求1所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中将0.2765g的大豆卵磷脂和0.1235g的胆固醇置于梨形烧瓶中。
3.根据权利要求1所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中将0.2976g的大豆卵磷脂和0.1024g的胆固醇置于梨形烧瓶中。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入乙醚和无水乙醇的100~300mL混合液。
5.根据权利要求1、2或3所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入乙醚和无水乙醇的200mL混合液。
6.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入0.006~0.03g的原花青素和5~15mL的磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入0.009g的原花青素和8mL的磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入0.025g的原花青素和10mL的磷酸盐缓冲液。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010184716 CN101884617A (zh) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | 一种原花青素脂质体的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010184716 CN101884617A (zh) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | 一种原花青素脂质体的制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101884617A true CN101884617A (zh) | 2010-11-17 |
Family
ID=43070820
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201010184716 Pending CN101884617A (zh) | 2010-05-27 | 2010-05-27 | 一种原花青素脂质体的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101884617A (zh) |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102793665A (zh) * | 2011-05-26 | 2012-11-28 | 河南羚锐制药股份有限公司北京药物研究院 | 一种原花青素柔性纳米脂质体及其制备方法 |
CN102793666A (zh) * | 2012-05-31 | 2012-11-28 | 中国农业大学 | 花色苷提取物脂质体及其制备方法 |
CN103181544A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 深圳劲创生物技术有限公司 | 新型膜分离技术制备的稳定花青素及其方法 |
CN103432010A (zh) * | 2013-09-23 | 2013-12-11 | 上海相宜本草化妆品股份有限公司 | 原花青素脂质体及其制备方法和用途 |
CN103432013A (zh) * | 2013-09-12 | 2013-12-11 | 南京财经大学 | 一种花青素脂质体的制备方法 |
CN103550239A (zh) * | 2013-10-26 | 2014-02-05 | 苏州天南星生物科技有限公司 | 用于肝损伤治疗的组合物 |
CN104800161A (zh) * | 2015-04-24 | 2015-07-29 | 沈阳药科大学 | 一种利用新型表面活性剂制备的原花青素柔性纳米脂质体及其制备方法 |
CN105639654A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-06-08 | 中国计量学院 | 一种杨梅花色苷纳米脂质体的制备方法 |
CN106174490A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-12-07 | 上海广得利保健食品有限公司 | 一种帮助消化的乳酸菌复合粉 |
CN106726639A (zh) * | 2016-11-28 | 2017-05-31 | 广东工业大学 | 一种peg修饰原花青素脂质体的制备方法 |
CN108720022A (zh) * | 2018-05-03 | 2018-11-02 | 安徽农业大学 | 一种花色苷纳米脂质体的制备方法和应用 |
CN108968074A (zh) * | 2018-06-06 | 2018-12-11 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法 |
CN109419774A (zh) * | 2017-08-28 | 2019-03-05 | 吉林农业大学 | 一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1745747B (zh) * | 2005-07-11 | 2010-04-14 | 兰州大学 | 原花青素在制备治疗结肠炎药物的新用途 |
-
2010
- 2010-05-27 CN CN 201010184716 patent/CN101884617A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1745747B (zh) * | 2005-07-11 | 2010-04-14 | 兰州大学 | 原花青素在制备治疗结肠炎药物的新用途 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
《Biochemistry》 19780930 FRANCIS SZOKA,JR.,DEMETRIOS PAPAHADJOPOULOS Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation 第4194-4198页 1-8 第75卷, 第9期 2 * |
《制药工程原理与设备》 20090930 袁其朋,梁浩 脂质体 第224-245 1-8 , 1 * |
《药物新剂型与新技术》 20050731 陆彬 脂质体制备技术 第120-185页 1-8 , 1 * |
《食品工业科技》 20081125 任文霞, 李建科 茶多酚脂质体的制备 第186-189页 1-8 , 第11期 2 * |
Cited By (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102793665A (zh) * | 2011-05-26 | 2012-11-28 | 河南羚锐制药股份有限公司北京药物研究院 | 一种原花青素柔性纳米脂质体及其制备方法 |
CN103181544A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 深圳劲创生物技术有限公司 | 新型膜分离技术制备的稳定花青素及其方法 |
CN103181544B (zh) * | 2011-12-30 | 2014-12-17 | 深圳劲创生物技术有限公司 | 新型膜分离技术制备的稳定花青素及其方法 |
CN102793666B (zh) * | 2012-05-31 | 2014-04-02 | 中国农业大学 | 花色苷提取物脂质体及其制备方法 |
CN102793666A (zh) * | 2012-05-31 | 2012-11-28 | 中国农业大学 | 花色苷提取物脂质体及其制备方法 |
CN103432013B (zh) * | 2013-09-12 | 2015-04-08 | 南京财经大学 | 一种花青素脂质体的制备方法 |
CN103432013A (zh) * | 2013-09-12 | 2013-12-11 | 南京财经大学 | 一种花青素脂质体的制备方法 |
CN103432010A (zh) * | 2013-09-23 | 2013-12-11 | 上海相宜本草化妆品股份有限公司 | 原花青素脂质体及其制备方法和用途 |
CN103550239A (zh) * | 2013-10-26 | 2014-02-05 | 苏州天南星生物科技有限公司 | 用于肝损伤治疗的组合物 |
CN104800161A (zh) * | 2015-04-24 | 2015-07-29 | 沈阳药科大学 | 一种利用新型表面活性剂制备的原花青素柔性纳米脂质体及其制备方法 |
CN105639654A (zh) * | 2016-01-27 | 2016-06-08 | 中国计量学院 | 一种杨梅花色苷纳米脂质体的制备方法 |
CN106174490A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-12-07 | 上海广得利保健食品有限公司 | 一种帮助消化的乳酸菌复合粉 |
CN106726639A (zh) * | 2016-11-28 | 2017-05-31 | 广东工业大学 | 一种peg修饰原花青素脂质体的制备方法 |
CN109419774A (zh) * | 2017-08-28 | 2019-03-05 | 吉林农业大学 | 一种蓝莓中花青素脂质体的简易薄膜分散制备方法 |
CN108720022A (zh) * | 2018-05-03 | 2018-11-02 | 安徽农业大学 | 一种花色苷纳米脂质体的制备方法和应用 |
CN108720022B (zh) * | 2018-05-03 | 2022-04-12 | 安徽农业大学 | 一种花色苷纳米脂质体的制备方法和应用 |
CN108968074A (zh) * | 2018-06-06 | 2018-12-11 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法 |
CN108968074B (zh) * | 2018-06-06 | 2021-09-28 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101884617A (zh) | 一种原花青素脂质体的制备方法 | |
CN105054070B (zh) | 一种白刺花色苷粗提物及其微胶囊 | |
Tan et al. | Combination of copigmentation and encapsulation strategies for the synergistic stabilization of anthocyanins | |
Tavano et al. | Co-encapsulation of antioxidants into niosomal carriers: gastrointestinal release studies for nutraceutical applications | |
Ke et al. | Synergistic antioxidant activity and anticancer effect of green tea catechin stabilized on nanoscale cyclodextrin-based metal–organic frameworks | |
Liao et al. | Enhanced antibacterial activity of curcumin by combination with metal ions | |
Han et al. | Extraction optimization and nanoencapsulation of jujube pulp and seed for enhancing antioxidant activity | |
CN107163160B (zh) | 一种抗坏血酸化壳聚糖季铵盐及其制备方法 | |
CN109566954B (zh) | 一种包埋月桂精油和纳米银的脂质体/壳聚糖抗菌、抗氧化涂膜液及制备方法与应用 | |
JP6543190B2 (ja) | 酸化性の活性物質を含むマイクロカプセル、および、その製造方法 | |
WO2009115023A1 (zh) | 花色苷磷脂复合物及其制备方法 | |
CN111035579A (zh) | 一种复合脂质体/壳聚糖抗氧化制剂及其制备方法 | |
EP2862447A1 (en) | Multilayer microcapsules containing an oxidizable active, and a process for preparing the same | |
Kasote et al. | Encapsulation of polyphenols: An effective way to enhance their bioavailability for gut health | |
Niu et al. | Nano-strategies for enhancing the bioavailability of tea polyphenols: Preparation, applications, and challenges | |
CN102210658B (zh) | 高含量α-亚麻酸微囊软胶囊制剂 | |
Lin et al. | Anthocyanins: Modified new technologies and challenges | |
CN107049992A (zh) | 一种egcg微丸胶囊及其制备方法 | |
CN103828798A (zh) | 外加包膜的甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微球及其制备方法 | |
CN101401799A (zh) | 花粉微囊药物制备方法 | |
CN104719895A (zh) | 一种葡多酚微胶囊保健品及其制备方法 | |
Srinivasan et al. | Liposomes for nanodelivery systems in food products | |
CN105687155B (zh) | 鱼用复方制剂的制备方法 | |
CN103141853A (zh) | 一种茶黄素保健食品或药品及其制备方法 | |
KR101000470B1 (ko) | 브로콜리 나노입자 제조방법 및 브로콜리 나노입자를함유하는 식용가능 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20101117 |