CN108968074B - 一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖‑芙蓉李花青素复合物及其制备方法，其是利用银耳糖醛酸多糖荷载芙蓉李花青素，再经乙基纤维素包裹制得所述复合物。所得复合物具有结肠靶向释放作用，可避免芙蓉李花青素接触胃内高酸度和肠道偏碱性环境及胆盐而破坏，使到达结肠的花青素保留率在90%以上，从而可直接作用于结肠细胞，起到调解肠道菌群结构、维持肠道微生物平衡、防治结肠疾病等健康功效，解决了花青素直接口服生物利用率低、难以在结肠中发挥健康功效的技术难题。
Description
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法。
背景技术
人体肠道内的微生物参与许多人类生理活动和新陈代谢，包括食物的消化、矿物元素的吸收、调节免疫反应，它们能影响人体体重和消化能力、抵御感染和自体免疫疾病的患病风险。肠道微生物群落结构或数量的改变与肥胖、糖尿病、高血压、高血脂等人体健康问题息息相关。结肠是肠道菌群最多的消化部位，结肠微生物与结肠营养及功能物质代谢吸收密切相关。结肠靶向递送系统能将功能活性成分运载并释放于结肠特定部位，从而大幅度提高诸如肠易激综合症、溃疡性结肠炎等结肠相关疾病的治疗效果。
花青素（anthocyanin）又称花色素，属于类黄酮类化合物，是自然界中广泛存在于植物中的一类水溶性天然色素。花青素对肠道益生菌（如双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等）具有增殖作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等有害菌具有抑制作用。此外，花青素还具有抗氧化、抗癌（尤其结肠癌）、预防心脑血管疾病等对人体健康有益效果。然而，花青素不稳定，在口腔、胃肠消化过程中会受到人体消化环境的破坏，如在人体肠道内因偏碱性环境而转变成醌式结构进而导致其在人体内生物利用率低。此外，在结肠内花青素可直接作用于肠细胞，或调解肠道菌群结构，从而发挥其健康功效，但花青素属于小分子物质，在上消化道就会被吸收，很难到达大肠发挥其益生元功效。结肠递送是提高花青素生物利用率的方法之一，在结肠内，花青素可直接作用于肠细胞，或调解肠道菌群结构，从而发挥其健康功效。
发明内容
本发明针对花青素直接口服生物利用率低、难以在下消化道（特别是结肠）中发挥健康功效的问题，提供了一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物及其制备方法，其可减少胃肠道环境及消化酶对花青素的损害，从而提高花青素在人体内的生物利用率。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物，其制备方法包括如下步骤：
（1）芙蓉李花青素的制备：选取八九成熟、无病虫害、果肉呈鲜红色的新鲜芙蓉李，经清洗、去核后切片，50℃热风干燥至水分含量小于12%，再粉碎得果粉；按质量体积比1g∶15mL将所得果粉加入pH值为3.0的80vol.%乙醇溶液中，600W超声波50℃提取30min，然后4000rpm离心10min，所得上清液经50℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇，得到花青素粗提液；再将所得花青素粗提液经AB-8大孔树脂纯化后进行真空冷冻干燥，得到花青素含量大于800mg/kg的芙蓉李花青素；
（2）银耳糖醛酸多糖提取液的制备：将废弃的银耳耳基洗净，组织破碎机捣碎至颗粒小于3mm，加入其重量5倍的蒸馏水，600W超声波80℃提取60min，7500rpm离心10min，所得上清液即为银耳糖醛酸多糖提取液，其多糖含量大于1mg/mL，糖醛酸含量大于100µg/mL；
（3）荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液的制备：在800r/min的搅拌速度下，将步骤（2）所得银耳糖醛酸多糖提取液缓慢滴入到等重量浓度为15~20mg/L的芙蓉李花青素溶液中，然后在25℃条件下继续以800r/min的速度搅拌30min，得到荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液；
（4）银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备：在1000r/min的搅拌速度下，按体积比1.5~2:1在浓度为20g/L的乙基纤维素乙醇溶液中缓慢滴入荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液，在25℃条件下继续以1000r/min的速度搅拌60min，然后经45℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇后，真空冷冻干燥，得到所述银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
本发明的有益效果：
1. 本发明所得复合物具有可控靶向释放作用，可避免芙蓉李花青素接触胃内高酸度环境及胆盐而破坏，使到达结肠的花青素保留率在90%以上，从而发挥花青素益生元和防治结肠疾病的健康功效。经试验发现，银耳糖醛酸多糖微球荷载的芙蓉李花青素在经过胃肠道后仅释放40％左右，而经乙基纤维素包裹保护后，其释放比例降至10％以下，说明大部分花青素被保留在糖醛酸多糖微球内。在进入结肠后，银耳糖醛酸多糖及乙基纤维素经肠道菌群降解，使内部保留的花青素逐渐释放，从而直接作用于结肠细胞或调解肠道菌群结构，发挥对人体的健康作用。
2. 既提高花青素稳定性和生物利用率，又可改善糖醛酸多糖功能特性。本发明中银耳糖醛酸多糖与芙蓉李花青素通过氢键和范德华力等分子间作用力吸附和包埋形成复合物。这种复合作用对银耳糖醛酸多糖或芙蓉李花青素的影响是相互的；一方面，通过与多糖复合，花青素的稳定性得到了提升，同时其生物利用率和抗氧化性等均较其游离时有明显提高；另一方面，与花青素的复合使银耳糖醛酸多糖的流变学、消化特性等发生明显改善。
3. 本发明在制备过程中不需使用交联剂。
附图说明
图1为所得银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物在模拟体外结肠发酵过程中花青素的累积释放率。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
（1）芙蓉李花青素的制备：选取八九成熟、无病虫害、果肉呈鲜红色的新鲜芙蓉李，经清洗、去核后切片，50℃热风干燥至水分含量小于12%，再粉碎得果粉；取100g果粉，加入1500 mL pH值为3.0的80vol.%乙醇溶液中，600W超声波50℃提取30min，然后4000rpm离心10min，所得上清液经50℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇，得到花青素粗提液；再将所得花青素粗提液采用AB-8大孔树脂进行纯化，以蒸馏水洗树脂，80vol.%乙醇溶液解吸洗脱，洗脱液经45℃真空浓缩去除乙醇，然后真空冷冻干燥，得到花青素含量为950mg/kg的芙蓉李花青素；
（2）银耳糖醛酸多糖提取液的制备：将废弃的银耳耳基洗净，取200g组织破碎机捣碎至颗粒小于3mm，加入1000g蒸馏水，600W超声波80℃提取60min，7500rpm离心10min，所得上清液即为银耳糖醛酸多糖提取液，其多糖含量为1.2mg/mL，糖醛酸含量为128µg/mL；
（3）荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液的制备：在800r/min的搅拌速度下，将步骤（2）所得银耳糖醛酸多糖提取液缓慢滴入到等重量浓度为15mg/L的芙蓉李花青素溶液中，然后在25℃条件下继续以800r/min的速度搅拌30min，得到荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液；
（4）银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备：将乙基纤维素溶于无水乙醇中，得到浓度为20g/L的乙基纤维素乙醇溶液；在1000r/min的搅拌速度下，按体积比1.5:1在乙基纤维素乙醇溶液中缓慢滴入荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液，在25℃条件下继续以1000r/min的速度搅拌60min，然后经45℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇后，真空冷冻干燥，得到所述银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
实施例2
（1）芙蓉李花青素的制备：选取八九成熟、无病虫害、果肉呈鲜红色的新鲜芙蓉李，经清洗、去核后切片，50℃热风干燥至水分含量小于12%，再粉碎得果粉；取300g果粉，加入4500 mL pH值为3.0的80vol.%乙醇溶液中，600W超声波50℃提取30min，然后4000rpm离心10min，所得上清液经50℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇，得到花青素粗提液；再将所得花青素粗提液采用AB-8大孔树脂进行纯化，以蒸馏水洗树脂，80vol.%乙醇溶液解吸洗脱，洗脱液经45℃真空浓缩去除乙醇，然后真空冷冻干燥，得到花青素含量为837mg/kg的芙蓉李花青素；
（2）银耳糖醛酸多糖提取液的制备：将废弃的银耳耳基洗净，取400g组织破碎机捣碎至颗粒小于3mm，加入2000g蒸馏水，600W超声波80℃提取60min，7500rpm离心10min，所得上清液即为银耳糖醛酸多糖提取液，其多糖含量为1.1mg/mL，糖醛酸含量为109µg/mL；
（3）荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液的制备：在800r/min的搅拌速度下，将步骤（2）所得银耳糖醛酸多糖提取液缓慢滴入到等重量浓度为20mg/L的芙蓉李花青素溶液中，然后在25℃条件下继续以800r/min的速度搅拌30min，得到荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液；
（4）银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备：将乙基纤维素溶于无水乙醇中，得到浓度为20g/L的乙基纤维素乙醇溶液；在1000r/min的搅拌速度下，按体积比2:1在乙基纤维素乙醇溶液中缓慢滴入荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液，在25℃条件下继续以1000r/min的速度搅拌60min，然后经45℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇后，真空冷冻干燥，得到所述银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
实施例3
（1）芙蓉李花青素的制备：选取八九成熟、无病虫害、果肉呈鲜红色的新鲜芙蓉李，经清洗、去核后切片，50℃热风干燥至水分含量小于12%，再粉碎得果粉；取50g果粉，加入750 mL pH值为3.0的80vol.%乙醇溶液中，600W超声波50℃提取30min，然后4000rpm离心10min，所得上清液经50℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇，得到花青素粗提液；再将所得花青素粗提液采用AB-8大孔树脂进行纯化，以蒸馏水洗树脂，80vol.%乙醇溶液解吸洗脱，洗脱液经45℃真空浓缩去除乙醇，然后真空冷冻干燥，得到花青素含量为890mg/kg的芙蓉李花青素；
（2）银耳糖醛酸多糖提取液的制备：将废弃的银耳耳基洗净，取100g组织破碎机捣碎至颗粒小于3mm，加入500g蒸馏水，600W超声波80℃提取60min，7500rpm离心10min，所得上清液即为银耳糖醛酸多糖提取液，其多糖含量为1.4mg/mL，糖醛酸含量为136µg/mL；
（3）荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液的制备：在800r/min的搅拌速度下，将步骤（2）所得银耳糖醛酸多糖提取液缓慢滴入到等重量浓度为18mg/L的芙蓉李花青素溶液中，然后在25℃条件下继续以800r/min的速度搅拌30min，得到荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液；
（4）银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备：将乙基纤维素溶于无水乙醇中，得到浓度为20g/L的乙基纤维素乙醇溶液；在1000r/min的搅拌速度下，按体积比2:1在乙基纤维素乙醇溶液中缓慢滴入荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液，在25℃条件下继续以1000r/min的速度搅拌60min，然后经45℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇后，真空冷冻干燥，得到所述银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
一、银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物体外模拟消化的稳定性试验
体外模拟消化液的配制：
（1）人工唾液：分别称取2.38 g Na2HPO4、0.19 g KH2PO4和8.00 g NaCl溶于1 L蒸馏水中， 调节pH值至6.75后加入α-淀粉酶，使溶液的酶活力为200 U/mL。
（2）人工胃液：将0.1 mol/L稀盐酸用蒸馏水稀释至pH=1.2。每100 mL pH=1.2的盐酸溶液中加入0.20 g胃蛋白酶，混匀。
（3）人工小肠液：取KH2PO4 6.80 g，加500 mL蒸馏水溶解，用0.1 mol/L NaOH溶液回调pH值至6.8。每100 mL溶液中加入0.20 g胰蛋白酶，混匀。
将实施例1、实施例2和实施例3制备的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物进行体外模拟消化的稳定性试验。其具体是将20.0 mg/mL银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物0.5 mL分别用人工唾液、人工胃液和人工小肠液稀释至2.5mL，在漩涡混合器上震荡1min。然后将混合液体置于恒温振荡器中，并设置摇床转速为120 r/min，人工唾液样品37℃孵育1 h，人工胃液样品和人工小肠液样品在37 ℃孵育4 h，孵育结束后消化液经8000r/min离心10 min，取上清液，测定上清液中花青素含量，并计算花青素的保留率。以芙蓉李游离花青素作为对照，结果见表1。
表1 复合物在不同消化液中花青素的保留情况对比（%）
由表1可知，芙蓉李游离花青素在人工唾液、人工胃液和人工小肠液中都有不同程度的损失，其中在人工小肠液中的保留率仅为68.34%。而实施例1、实施例2和实施例3制备的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物在人工唾液、人工胃液和人工小肠液中花青素保留率都超过90%以上，这说明本发明制备的复合物稳定性较好。
二、银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物体外结肠发酵释放试验
结肠肠道菌群培养液配制：
（1）厌氧培养液的制备：37.5 mL 0.78% K2HPO4、37.5 mL混合液（0.47% KH2PO 4、1.18% NaCl 、1.2% (NH4)2SO4、0.12% CaCl2、0.25% MgSO4·H2O）、2 mL 25% L-抗坏血酸、0.5 g L-半胱氨酸、50 mL 8% Na2CO3、1 g蛋白胨、1 g牛肉膏，加蒸馏水至1 L，将pH值调至7.5～8.0范围内。
（2）结肠肠道菌群培养液的制备：取SD大鼠的新鲜粪便和生理盐水按1:4（m/v）的比例混合制成混悬液，2000 r/min离心15 min后取上清液，即为大鼠肠道菌液。将所得肠道菌液与厌氧培养液按1:9（v/v）混匀后得到结肠肠道菌群培养液。
将实施例1、实施例2和实施例3制备的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物进行体外结肠发酵释放试验。其具体是将20.0 mg/mL银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物0.5mL用结肠肠道菌群培养液稀释至2.5mL，在漩涡混合器上震荡1 min。然后将混合液体置于恒温振荡器中，并设置摇床转速为120 r/min，37℃厌氧培养，间隔一定时间取消化液，8000r/min离心10 min后取上清液，测定上清液中花青素的含量，并计算花青素释放率。结果见图1。
由图1可见，各实施例制备的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物在体外结肠发酵前6～8h，花青素的平均释放速率相对较快，累积释放率达到80%以上。
由此说明，人工小肠液与人工结肠液的离子条件和pH环境差别不大，而人工结肠液有大量微生物，银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物在结肠微生物的作用下其复合物结构发生变化，使得包埋吸附在其中的花青素被释放出来，以发挥花青素的功能特性，改善结肠微环境。因此，本发明所得银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物具有一定的结肠靶向性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (2)
1.一种结肠靶向递送的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）芙蓉李花青素的制备：选取八九成熟、无病虫害、果肉呈鲜红色的新鲜芙蓉李，经清洗、去核后切片，50℃热风干燥至水分含量小于12%，再粉碎得果粉；按质量体积比1g∶15mL将所得果粉加入pH值为3.0的80vol.%乙醇溶液中，600W超声波50℃提取30min，然后4000rpm离心10min，所得上清液经50℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇，得到花青素粗提液；再将所得花青素粗提液经AB-8大孔树脂纯化后进行真空冷冻干燥，得到花青素含量大于800mg/kg的芙蓉李花青素；
（2）银耳糖醛酸多糖提取液的制备：将废弃的银耳耳基洗净，捣碎至颗粒小于3mm，加入其重量5倍的蒸馏水，600W超声波80℃提取60min，7500rpm离心10min，所得上清液即为银耳糖醛酸多糖提取液，其多糖含量大于1mg/mL，糖醛酸含量大于100µg/mL；
（3）荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液的制备：在800r/min的搅拌速度下，将步骤（2）所得银耳糖醛酸多糖提取液缓慢滴入到等重量浓度为15~20mg/L的芙蓉李花青素溶液中，然后在25℃条件下继续以800r/min的速度搅拌30min，得到荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液；
（4）银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物的制备：在1000r/min的搅拌速度下，按体积比1.5~2:1在浓度为20g/L的乙基纤维素乙醇溶液中缓慢滴入荷载芙蓉李花青素的银耳糖醛酸多糖溶液，在25℃条件下继续以1000r/min的速度搅拌60min，然后经45℃、0.01MPa减压浓缩去除乙醇后，真空冷冻干燥，得到所述银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
2.一种如权利要求1所述方法制得的银耳糖醛酸多糖-芙蓉李花青素复合物。
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Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1807463A (zh) * | 2005-01-18 | 2006-07-26 | 上海辉文生物技术有限公司 | 银耳杂多糖及其提取物、制备方法和用途 |
| CN1931181A (zh) * | 2005-09-16 | 2007-03-21 | 上海市新文达生物科技有限公司 | 银耳杂多糖或其提取物的新用途 |
| CN101884617A (zh) * | 2010-05-27 | 2010-11-17 | 东北农业大学 | 一种原花青素脂质体的制备方法 |
| CN103181544A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 深圳劲创生物技术有限公司 | 新型膜分离技术制备的稳定花青素及其方法 |
| CN105146273A (zh) * | 2015-10-09 | 2015-12-16 | 青海泰柏特生物科技有限公司 | 黑果枸杞花青素软胶囊及其制备方法 |
| CN105166862A (zh) * | 2015-08-12 | 2015-12-23 | 天津科技大学 | 高稳定性纤维素基天然食用花青素色素复合物的制备方法 |
| CN107455754A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-12-12 | 江南大学 | 一种具有定点释放特性的茶多酚微胶囊及其应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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-
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Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1807463A (zh) * | 2005-01-18 | 2006-07-26 | 上海辉文生物技术有限公司 | 银耳杂多糖及其提取物、制备方法和用途 |
| CN1931181A (zh) * | 2005-09-16 | 2007-03-21 | 上海市新文达生物科技有限公司 | 银耳杂多糖或其提取物的新用途 |
| CN101884617A (zh) * | 2010-05-27 | 2010-11-17 | 东北农业大学 | 一种原花青素脂质体的制备方法 |
| CN103181544A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 深圳劲创生物技术有限公司 | 新型膜分离技术制备的稳定花青素及其方法 |
| CN105166862A (zh) * | 2015-08-12 | 2015-12-23 | 天津科技大学 | 高稳定性纤维素基天然食用花青素色素复合物的制备方法 |
| CN105146273A (zh) * | 2015-10-09 | 2015-12-16 | 青海泰柏特生物科技有限公司 | 黑果枸杞花青素软胶囊及其制备方法 |
| CN107455754A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-12-12 | 江南大学 | 一种具有定点释放特性的茶多酚微胶囊及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 超声波辅助提取三华李花青素及其抗氧化活性研究;孔美兰等;《广东农业科学》;20141110;第93页1.2.1小节，第95页右列第2段 * |
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