CN109406781A - 一种可降低传染风险的hiv（1+2）抗体检测卡及其适配试纸条 - Google Patents

一种可降低传染风险的hiv（1+2）抗体检测卡及其适配试纸条 Download PDF

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Abstract

本发明创造提供一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，所述试纸条包括有依次搭接在PVC底板上的样品垫、金垫、层析膜和吸样垫，所述样品垫包括有吸附层、过滤层和样本层；所述吸附层为多孔固体材料层，所述吸样垫由吸水纸和位于吸水纸下表面的多孔固体材料层组成，所述多孔固体材料采用gp120抗体亲和蛋白进行处理，所述gp120抗体亲和蛋白可与艾滋病病毒特异性结合。本发明创造吸附层在不影响HIV抗体检测效果的同时，使吸附层具有针对吸附和灭活艾滋病病毒的特异性；而试纸条的吸样垫可以在检测结束后对艾滋病毒等进一步吸附和灭活，进一步降低艾滋病病毒的传染可能性，降低检测完成后检测卡上残留的病毒给检测人员带来的危险性。

Description

一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条
技术领域
本发明创造属于生物医药检测装置领域，尤其是涉及一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条。
背景技术
艾滋病，1981年在美国首次发现和确认，全名为“获得性免疫缺陷综合症”(Acquired Immune Deficiency Syndrome)，英文缩写AIDS的音译，曾译为“爱滋病”、“爱死病”；艾滋病是人体感染了“人类免疫缺陷病毒”(HIV-human immunodeficiency virus，又称艾滋病病毒)所导致的传染病，HIV分为两型：HIV1型和HIV2型，它们又有各自的亚型，不同地区流行的亚型不同，同一亚型在不同地区也存在一定差异。
人类天生具有免疫功能，当细菌、病毒等侵入人体时，在免疫功能正常运作下，就算生病了也能治愈。然而，HIV所攻击的正是人体免疫系统的中枢细胞—T4淋巴细胞，致使人体丧失抵抗能力，因此艾滋病病毒HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴细胞作为攻击目标，大量吞噬、破坏T4淋巴细胞，使机体抵抗力极度下降会出现多种感染，如带状疱疹、口腔霉菌感染、肺结核，特殊病原微生物引起的肠炎、肺炎、脑炎，念珠菌、肺孢子虫等多种病原体引起的严重感染等，在感染后期常常发生恶性肿瘤，并发生长期消耗，以至全身衰竭而死亡。
艾滋病已被我国列入乙类法定传染病，并被列为国境卫生监测传染病之一，艾滋病人的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液以及尿液都有艾滋病毒，都可能成为艾滋病传染的介质，虽然全世界众多医学研究人员付出了巨大的努力，但至今尚未研制出根治艾滋病的特效药物，也还没有可用于预防的有效疫苗，所以降低艾滋病的传染是很有必要的。
目前针对HIV抗体的检测方法包括有ELISA法、化学发光法或免疫荧光试验法、快速检测法(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒快速试验、明胶颗粒凝集试验、免疫层析试验)等，其中胶体金快速检测法操作简便，检测速度快，结果比对明显，可实现自测。但现有的胶体金检测装置通常为简易的试纸盒结构，检测视窗和样本都暴露在外面，增加了检测人员与样本接触的次数，而且检测后无消毒装置，因此整个装置对艾滋病传染的预防有不足，提高了HIV传染的可能性，对现场检测人员和被检测人员都带来了不便和危险。
专利公开号为CN 1552454 A的专利“一种用于吸附和灭活病毒的多孔固体材料及其应用”提供了一种用于吸附和灭活病毒的多孔固体材料，文献中指出该多孔固体材料成分为TiO2、ZrO2、SiO2、Al2O3或P2O5中的一种或其组合，结构特点是具有多孔的性质，孔径在0.3-500nm范围内，孔容为0.01-3ml/g；该多孔固体材料对病毒具有非特异性吸附和灭活作用，可用于对病毒、核酸、蛋白质或者微生物非特异的吸附和灭活，其原理是基于无机固体材料的酸碱性质、氧化还原性质、吸附性质和催化性质等特性，采用多孔固体材料吸附病毒，并对病毒中的糖或核酸上的基团发生化学作用，使病毒灭活；文献还指出，该多孔固体材料可用于制作与人体接触和非接触的病毒防护器材和设施，因此，如果该多孔固体材料可用于HIV抗体检测卡上病毒的消毒，那么将大大降低检测卡的危险性。
发明创造内容
本发明创造要解决的技术问题是提供一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，完善现有卡型HIV抗体检测装置的不足，提供一种具有隔离样本、检测后消毒、降低传染风险作用的HIV抗体快速检测卡。
为解决上述技术问题，本发明创造采用的技术方案是：
一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，所述检测卡包括有上卡盖、下卡盖、位于上卡盖与下卡盖之间的隔离层；所述检测卡内还设有试纸条，所述下卡盖的内表面设有放置试纸条的凹槽；
所述下卡盖内表面的边缘处设有一卡槽，所述卡槽内设有消毒液，所述卡槽上表面有薄膜覆盖，相应地，在所述上卡盖的内表面的边缘处设有一卡槽针，所述卡槽针与所述上卡盖的内表面通过转动轴连接，在上卡盖与下卡盖扣合时，所述卡槽针转动至与所述上卡盖内表面垂直设置，并刺破所述薄膜使消毒液溢出；
所述试纸条包括有依次搭接在PVC底板上的样品垫、金垫、层析膜和吸样垫，所述样品垫包括有吸附层、过滤层和样本层；所述吸附层为多孔固体材料层，所述吸样垫由吸水纸和位于吸水纸下表面的多孔固体材料层组成；所述多孔固体材料采用可与艾滋病病毒特异性结合的gp120抗体亲和蛋白进行处理。
进一步，所述上卡盖的内表面的边角处设有若干柱形固定棒，所述下卡盖内表面的相应位置分布有相应的中空柱形槽，该柱形槽的内径与上卡盖的固定棒的外径相适配，用于与上卡盖固定紧密扣合。
进一步，所述上卡盖的一端设有上卡盖手柄，所述下卡盖也相应地设有下卡盖手柄，所述上卡盖与下卡盖扣合时，所述上卡盖手柄和下卡盖手柄也实现扣合，形成手持柄，所述手持柄的外表面设有防滑纹。
进一步，所述隔离层各边角设有与下卡盖的柱形槽相对应的柱形孔，所述柱形孔的尺寸与所述柱形槽的外径相适配。
进一步，所述上卡盖上设有第一观察视窗；所述隔离层为片状结构，所述隔离层开设有加样孔，在隔离层的中央设有用透明材质制成的第二观察视窗，所述第二观察视窗与所述第一观察视窗对应设置。
进一步，所述隔离层的边缘处设有与所述卡槽对应的开口。
进一步，所述过滤层选用定性滤纸。
进一步，所述层析膜采用硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上包被有质控线C线和检测线T线，所述质控线C线为羊抗鼠IgG，所述检测线T线包括了HIV1型抗原与HIV2型抗原。
进一步，所述金垫由金液喷洒在聚酯膜上制作而成，所述金液包括有标记HIV抗原和鼠IgG抗体的胶体金颗粒，所述HIV抗原包括HIV1型抗原和HIV2型抗原。
本发明创造具有的优点和积极效果是：
(1)本发明创造在检测卡中间设有样本隔离层，在隔离层上设有加样孔，所述隔离层上设有第二观察视窗，所述第二观察视窗与上卡盖的第一观察视窗相对应，当上卡盖与下卡盖有所扣合时，检测者通过上卡盖上的第一观察视窗即可观察试纸条显色；同时相比于传统检测卡直接在上卡盖开设有加样孔，该检测卡的上卡盖并未设置加样孔，当上卡盖与下卡盖口扣合时，上卡盖将样品隔离，使检测人员既安全又方便地观察检测结果；因此，加设隔离层的设计相比于现有的检测卡结构有显著的优势。
(2)本发明创造的检测卡设有手持柄，可使操作者手持卡更方便，减小接触到具有传染性的样本，从而降低传染风险；
(3)本发明创造的检测卡设有消毒装置，在检测完成后通过扣合上盖，使卡槽针刺破卡槽，从而释放出消毒液，对试纸条上的样本进行消毒，这样很大程度上降低了样本对操作者带来的危险；
(4)本发明创造试纸条的样品垫中包含有吸附层，该吸附层选用可吸附和灭活病毒的多孔固体材料制作，并用能与艾滋病病毒结合的gp120抗体亲和蛋白进行处理，在不影响HIV抗体检测效果的同时，使吸附层具有针对吸附和灭活艾滋病病毒的特异性；而试纸条的吸样垫中也加入一层该经过处理的多孔固体材料，可以在检测结束后对艾滋病毒等进一步吸附和灭活，进一步降低艾滋病病毒的传染可能性，降低检测完成后检测卡上残留的病毒给检测人员带来的危险性。
附图说明
图1：检测卡上卡盖的结构示意图；
图2：检测卡下卡盖的结构示意图；
图3：检测卡隔离层的结构示意图；
图4：试纸条的俯视图；
图5：试纸条的结构示意图；
图6：用于比对实施例中HIV抗原(或抗体)检测试纸条显色的显色卡示意图。
图中：1-上卡盖，2-试纸条，21-样品垫，211-吸附层，212-过滤层，213-样本层，22-金垫，23-层析膜，24-吸样垫，3-下卡盖，4-第一观察视窗，5-上卡盖手柄，6-卡槽针，7-固定棒，8-柱形槽，9-下卡盖手柄，10-卡槽，11-隔离层，12-第二观察视窗，13-加样孔，14-柱形孔，15-质控线C线，16-检测线T线。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明创造中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在本发明创造的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明创造和简化描述，而不是指示或暗示所指的机构或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明创造的限制。此外，术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”等的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明创造的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
在本发明创造的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以通过具体情况理解上述术语在本发明创造中的具体含义。
下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明创造。
实施例1
如附图所示，本实施例在于提供一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，所述检测卡包括有上卡盖1、下卡盖3、位于上卡盖1与下卡盖3之间的隔离层11。所述检测卡内还设有试纸条2，所述下卡盖3的内表面设有放置试纸条2的凹槽，所述凹槽尺寸与试纸条2相同，使得试纸条2可以恰好放置在下卡盖3内。
所述上卡盖1上设有第一观察视窗4，可以直观地看到隔离层11下面的检测结果；所述上卡盖1的一端设有上卡盖手柄5，所述下卡盖3也相应地设有下卡盖手柄9，所述上卡盖1与下卡盖3扣合时，所述上卡盖手柄5和下卡盖手柄9也实现扣合，形成手持柄，所述手持柄的外表面设有防滑纹，可方便检测者手持检测卡，减少和样本接触的机会从而降低传染风险；
所述上卡盖1的内表面的边角处设有若干柱形的固定棒7，所述下卡盖3内表面的相应位置分布有相应的中空柱形槽8，该中空柱形槽8的内径与上卡盖1的柱形固定棒7的外径相适配，用于与上卡盖1固定紧密扣合，防止样本溢出或渗入检测盒内部，影响检测结果。
所述隔离层11为片状结构，所述隔离层11各边角设有与下卡盖3的中空柱形槽8相对应的柱形孔14，所述柱形孔14的尺寸与下卡盖3的柱形槽8的外径相适配；所述隔离层11开设有加样孔13，可方便操作者滴加样本，在隔离层11的中央设有用透明材质制成的第二观察视窗12，所述第二观察视窗12与所述第一观察视窗4对应设置，既方便观察结果又能保证检测人员与样品不接触；
在检测使用时，先将试纸条2放置在下卡盖3内的凹槽中，再使隔离层11的所述柱形孔14与所述中空柱形槽8一一对准，将隔离层11放置在下卡盖3内；随后通过隔离层11的加样孔13对样品进行滴加，样品滴加至试纸条2上进行检测，可从所述第二观察视窗12观察检测结果。检测完成后将所述上卡盖1与所述下卡盖3扣合，完成检测卡的安装，检测人员仍可根据第一观察视窗4观察试纸条2的显示情况，完全扣合上的检测卡可充分保证检测人员与样品的隔绝。
进一步地，所述下卡盖3内表面的边缘处设有一卡槽10，所述卡槽10内设有消毒液(消毒液可选择次氯酸钠、甲醛或者戊二醛溶液等)，所述卡槽10上表面有薄膜覆盖，使得消毒液不外漏，相应地，在所述上卡盖1的内表面的边缘处设有一卡槽针6，所述卡槽针6与所述上卡盖1的内表面通过转动轴连接。在上卡盖1与下卡盖3未扣合时，所述卡槽针6贴合上卡盖1的内表面放置，在样品滴加完成相关检测后需扣合上卡盖1时，掰开所述卡槽针6使其转动至与所述上卡盖1内表面垂直设置，在所述上卡盖1和下卡盖3扣合的过程中，卡槽针6刺破卡槽10的薄膜，使得卡槽10内的消毒液可以溢出至整个下卡壳内，使试纸条2上浸有消毒液，完成对试纸条2的消毒处理，避免后期检测卡上的样品暴露，威胁相关人员安全，检测人员可从所述第一观察视窗4进行消毒情况的检测。具体实施时，为了充分保证检测人员与样品的隔绝，可以在样品滴加完后，令所述柱形槽8和固定棒7先对准放置，但不完全扣合，此时卡槽针6与薄膜接触但并不刺破，检测者仍可以通过第一观察视窗4观察检测结果，待检测完成后，将上卡盖1和下卡盖3完全扣合，所述卡槽针6同时刺破薄膜，释放溶液，静止10-20分钟，即完成消毒。
所述隔离层11的边缘处设有与所述卡槽10对应的开口，使得所述隔离层11不妨碍卡槽针6对卡槽10的刺破。所述卡槽10的大小及其内的消毒液含量要满足一旦卡槽10上的薄膜被刺破，溢出的消毒液量足以浸入试纸条2，完成充分消毒。
所述试纸条2包括有依次搭接在PVC底板上的样品垫21、金垫22、层析膜23和吸样垫24，所述样品垫21包括有吸附层211、过滤层212和样本层213：
所述吸附层211选用一种吸附和灭活病毒的多孔固体材料(可参见专利“一种用于吸附和灭活病毒的多孔固体材料及其应用”)，本实施例中，该材料从中国科学院大连化学物理研究院购买，孔径选用100-120nm，该孔径大小可与艾滋病病毒分子大小相匹配的；该材料用于吸附层211时，需要用能与艾滋病病毒结合的gp120抗体亲和蛋白进行处理，从而使吸附层211具有针对吸附和灭活艾滋病病毒的特异性材质，针对性更强，具体处理方式见实施例2；
所述过滤层212采用定性滤纸制作，主要用于过滤掉样本中的杂质，使HIV抗体快速检测试纸条2避免出现假阳性的结果；滴加的样本经过吸附层211和过滤层212，最后相对特异性比较高的样本通过所述样本层213层析到层析膜23上；
所述样本层为玻璃纤维素膜材质。
所述金垫22由金液喷洒在聚酯膜上制作而成，所述金液包括有标记HIV抗原和鼠IgG抗体的胶体金颗粒，所述HIV抗原包括gp41HIV抗原(即HIV1型抗原)和gp36HIV抗原(即HIV2型抗原)；所述金垫可结合样本中的HIV抗体而显色，进而可以判断出试纸条2的阴阳性；所述gp41 HIV抗原和gp36 HIV抗原均购于Arista Biologicals。
所述层析膜23为硝酸纤维素膜，即NC膜，购于Sartorius；所述NC膜上包被有质控线C线15和检测线T线16，所述质控线C线为羊抗鼠IgG，所述检测线T线包括gp41HIV抗原与gp36HIV抗原；
以上所述羊抗鼠IgG和鼠IgG抗体购于杭州隆基生物科技有限公司。
所述吸样垫24由吸水纸和吸水纸下表面的所述多孔固体材料层组成，对样本的层析速度及艾滋病病毒的灭活起到一定作用；因为样品在经过所述样品垫上特异性处理的多孔固体材料的吸附后，应当足以灭活相应的艾滋病病毒，但为了保证样品中艾滋病病毒的完全吸附和灭活，将传染风险降至最低，在吸水纸下表面也设有一层所述多孔固体材料，这里的多孔固体材料同样进行gp120抗体亲和蛋白的特异性处理，根据该材料对艾滋病病毒的特异性吸附和灭活，可对样品中残留的艾滋病病毒进行处理。
上述吸水纸、玻璃纤维素膜、聚酯膜以及PVC底板均购于上海捷宁生物科技有限公司。
如上所述，本实施例中的所述试纸条2是采用双抗原夹心技术法原理进行工作，具体实施步骤如下：将样品滴加至试纸条2的样品垫21上，样品垫21的吸附层211主要用于吸附样本中的艾滋病病毒，即吸附层211上的gp120抗体亲和蛋白与艾滋病病毒进行特异性结合，降低HIV的传染性和危险系数；吸附层211下层是过滤层212，过滤层212对样本中的杂质进行过滤，减少检测结果出现假阳性几率；过滤层212下层是样本层213，主要用于层析样本，使样本能顺利层析到金垫22上，被检测物质中HIV抗体能与金标物-gp41HIV抗原和金标物-gp36HIV抗原结合，形成HIV抗体-HIV抗原复合物，同时，金垫中含有金标物-鼠IgG抗体，继续层析到包被质控线C线(羊抗鼠IgG)和检测线T线(gp41HIV抗原与gp36HIV抗原)的层析膜23上，C线形成羊抗鼠IgG-鼠IgG金标物复合物，T线形成HIV抗原金标物-HIV抗体-HIV抗原复合物，从而通过金标颜色辨别出样本的阴阳性，C线和T线都显色表明样本为阳性样本，C线显色T线不显色表明样本为阴性样本，C线和T线都不显色，表明检测无效；吸样垫24在试纸条2中用于控制样本的流速，通过吸样的快慢影响产品的性能，由于本试纸条2在吸样垫24中也加了一层上述可吸附和灭活艾滋病毒的多孔固体材料，该多孔固体材料可在检测结束后再一次降低艾滋病毒的传染性以及给检测人员带来的危险性。
具体地，检测结果分析如下：若质控线C线15呈紫红色条，检测T线颜色无色，则结果为阴性；若检测T线和质控C线都呈紫红色条，结果为阳性；如果质控C线不出现紫红色条，说明操作不正确或检测卡以失效。
实施例2
本实施例在于提供实施例1所述的试纸条的制备方法，重点提供关于试纸条样品垫和吸样垫材料的选择和处理过程。
一、样品垫的制备
1、样品垫吸附层的处理方法：
(1)将可吸附和灭活病毒的多孔固体材料准备好，准备缓冲液PB、可与艾滋病毒结合的gp120抗体亲和蛋白(gp120抗体亲和蛋白购自于Abcam)；缓冲液中gp120抗体亲和蛋白的含量分别设为0ug/ml，2ug/ml，4ug/ml，8ug/ml，16ug/ml，32ug/ml，64ug/ml，128ug/ml，分别用以上8种不同浓度的gp120抗体亲和蛋白缓冲液浸泡吸附和灭活病毒的多孔固体材料12小时，使其达到饱和状态。
(2)浸泡后进行45℃过夜(约8小时)烘干。
(3)为形成对照试验，将用gp120抗体亲和蛋白含量为0ug/ml的缓冲液处理的多孔固体材料作为对照组；将以上8种不同gp120抗体亲和蛋白含量的吸附层材料分别放入可过滤的器材中，加入含有艾滋病病毒的样本进行过滤：由于人体在刚感染病毒的时候不会产生免疫反应，只有当病毒载量达到一定数量的时候才会设法降低体内病毒含量，但是在病毒即将发作时，体内的淋巴细胞无法与病毒对抗，所以在刚感染和即将发病阶段，艾滋病病毒载量最大，传播效率最高，所以用于实验的样本选择刚感染和即将发病阶段的患者样本，每个阶段的样本各选5个(刚感染样本编号为A-E，即将发病样本编号哦为a-e)，每个样本重复3次(例如样本A为A1、A2、A3)。
经过8种不同吸附层材料过滤后，病毒样本再用HIV抗原检测试纸条进行残留艾滋病病毒的检测，实验结果如表1所示：
表1：吸附层中不同gp120抗体含量的HIV抗原检测结果分析表
通过表1可得，gp120抗体亲和蛋白含量在64ug/ml时，HIV抗原检测试纸条用显色卡对照已不显色；gp120抗体亲和蛋白浓度在2-64ug/ml范围内，HIV抗原检测试纸条的显色呈梯度；即随着吸附层中gp120抗体量的增加，样本中的艾滋病毒含量是逐渐减少的；针对该吸附和灭活病毒的多孔固体材料，利用浓度为64ug/ml的gp120抗体亲和蛋白缓冲液处理时，样本中的艾滋病病毒已基本被全部吸附和灭活，加上成本因素的考虑，将处理该多固体材料的gp120抗体亲和蛋白的含量定为64ug/ml最合适。
2、关于吸附层对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能的影响的分析
如上所述，将所述多孔固体材料利用64ug/ml的gp120抗体亲和蛋白缓冲液进行处理后，用于制作HIV(1+2)抗体检测试纸条，即有吸附层的HIV(1+2)抗体检测试剂条；为了验证gp120抗体亲和蛋白是否对该试纸条HIV抗体检测过程产生影响，进行如下实验：
实验方法：用国家标准物质中的HIV抗体阴性参考品，最低检出限参考品和重复性参考品测试以下两组实验，对比两组HIV(1+2)抗体检测试纸条的性能，从而确定吸附层对HIV抗体检测试纸条的产品性能是否有影响。本申请文件中的国家标准物质参考品均购于北京康彻思坦生物技术有限公司。
第一组：无吸附层的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第二组：有吸附层的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
表2：吸附层对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能分析表
结论：通过对国家标准物质HIV抗体阴性参考品，最低检出限参考品和重复性参考品的测试，有吸附层HIV(1+2)抗体检测试纸条和无吸附层的HIV(1+2)抗体检测试纸条的产品性能是一致的，表明有吸附层对HIV(1+2)抗体检测试纸条的产品性能是无影响的，因此可以将经过gp120抗体亲和蛋白处理后的多孔固体材料用于HIV(1+2)抗体检测试纸条的吸附层的制作，可以在不影响HIV(1+2)抗体检测试纸条的吸附层的前提下进行艾滋病病毒的特异性吸附和灭活。
3、样品垫过滤层材料的筛选
过滤层的材质要求是在不影响试剂灵敏度的前提下只需要过滤掉杂质即可，所以选用实验现有4种不同材质滤膜和6种不同滤纸进行试验；其中，滤纸购自于抚顺市民政滤纸厂，滤膜购自于Millipore。
实验方法：每种材质点3个重复HIV(1+2)抗体检测试纸条，上样70ul，主要观察渗透及层析现象。试验过程中，发现滤膜有3种为疏水性材质，且整体渗透性差，对于无外力作用的过滤效果不是很好，这样样本不能完全的被样本层吸收并很好的层析，从而影响HIV(1+2)抗体检测试纸条的灵敏度；滤纸渗透性好，吸收样本效果好，但太厚的滤纸吸收样本多，使原本层析的样本量减少，从而影响结果。具体结果如下表所示：
表3：过滤层中不同材质的渗透效果及层析现象
结论：根据过滤层不同材质的HIV(1+2)抗体检测试纸条渗透及层析现象对比，选出1种滤膜和2种滤纸进行后续产品性能实验，其中滤膜选Millipore亲水表面滤膜，滤纸选择定量滤纸和定性滤纸两种。
实验方法：用国家标准物质中的HIV抗体阴性参考品，最低检出限参考品和重复性参考品测试以下四组实验，对比四组HIV(1+2)抗体检测试纸的性能，从而确定该试剂是否需要过滤层，如果需要，确定其材质。
第一组：无滤膜的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第二组：有滤膜的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第三组：有定量滤纸的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第四组：有定性滤纸的HIV(1+2)抗体检测试剂条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
试验结果如以下两个表所示：
表4：过滤层对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能分析表
表5：过滤层材质对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能分析汇总表
过滤层 最低检测限 重复性 非特异性
无 100％ 100％ 90％
亲水性滤膜 100％ 70％ 80％
定量滤纸 100％ 80％ 80％
定性滤纸 100％ 100％ 100％
结论：通过产品性能对比可以看出，有过滤层比无过滤层的非特异性好一些，且过滤层的材质选用定性滤纸为最佳。
二、吸样垫的制备
吸样垫由吸水纸和具有吸附和灭活病毒作用的多孔固体材料组成，吸样垫的多孔固体材料同样采用gp120抗体亲和蛋白进行处理；根据上述吸附层gp120抗体亲和蛋白浓度的对比试验可知，吸附层采用64ug/mlgp120抗体亲和蛋白处理理论上即可满足艾滋病病毒载量最大的样本(刚感染和即将发病阶段的样本)的特异性吸附，将吸样垫多孔固体材料的gp120抗体亲和蛋白处理浓度也设为64ug/ml，完全足够样本上残留艾滋病病毒的吸附和灭活。
本实验通过无多孔材料、吸水纸底部有一层多孔固体材料、吸水纸上部和底部共两层多孔固体材料三组实验进行测试并观察产品性能及物理现象。用国家标准物质的HIV抗体阴性参考品，最低检出线参考品和重复性参考品进行三组材料的HIV(1+2)抗体检测试纸条的性能进行测试。
第一组：无多孔固体材料的HIV(1+2)抗体检测试纸条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第二组：吸水纸底部有一层多孔材料的HIV(1+2)抗体检测试纸条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
第三组：吸水纸上下各一层多孔材料的HIV(1+2)抗体检测试纸条，阴性参考品(N1-N10)，最低检测限(S1-S5)，重复性参考品CV10次重复。
实验结果如表5所示：
表6：吸样垫对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能的影响
表7：吸样垫对HIV(1+2)抗体检测试纸条性能分析汇总表
结论：从表6和7中可以看出:吸水纸底部加一层多孔固体材料对产品的最低检出限，阴性符合率及重复性无影响，符合率均为100％，即不影响原吸水纸的性能。但当吸水纸上下各加一层固体材料时，产品的最低检出限的符合率为80％，重复性80％，这样影响了吸水层的性能，所以在吸水纸底部加一层可吸附和灭活病毒的多孔固体材料，可以达到吸样垫自身性能标准的同时又能发挥多孔固体材料吸附和灭活病毒的功能。
实施例3
本实施例在于提供如实施例1和2所述的一种可降低传染风险的的HIV(1+2)抗体检测试纸条的整体性能分析。
实验方法：用国家标准物质测试试纸条的性能，包括HIV抗体阴性参考品(N1-N20)，HIV1型阳性参考品(P1-P18)，HIV2型阳性参考品(P19-P20)，最低检测线参考品(S1-S5)，重复性参考品(CV)。试验结果如表8所示：
表8：可降低传染风险的的HIV(1+2)抗体检测试纸条性能分析表
结论表明：阳性参考品符合率100％，阴性参考品符合率100％。最低检出限合格，重复性颜色均一，该试纸条2性能可以满足使用要求。
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述检测卡包括有上卡盖、下卡盖、位于上卡盖与下卡盖之间的隔离层；所述检测卡内还设有试纸条，所述下卡盖的内表面设有放置试纸条的凹槽；
所述下卡盖内表面的边缘处设有一卡槽，所述卡槽内设有消毒液，所述卡槽上表面有薄膜覆盖，相应地，在所述上卡盖的内表面的边缘处设有一卡槽针，所述卡槽针与所述上卡盖的内表面通过转动轴连接，在上卡盖与下卡盖扣合时，所述卡槽针转动至与所述上卡盖内表面垂直设置，并刺破所述薄膜使消毒液溢出；
所述试纸条包括有依次搭接在PVC底板上的样品垫、金垫、层析膜和吸样垫，所述样品垫包括有吸附层、过滤层和样本层；所述吸附层为多孔固体材料层，所述吸样垫由吸水纸和位于吸水纸下表面的多孔固体材料层组成；所述多孔固体材料采用可与艾滋病病毒特异性结合的gp120抗体亲和蛋白进行处理。
2.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述上卡盖的内表面的边角处设有若干柱形固定棒，所述下卡盖内表面的相应位置分布有相应的中空柱形槽，该柱形槽的内径与上卡盖的固定棒的外径相适配，用于与上卡盖固定紧密扣合。
3.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述上卡盖的一端设有上卡盖手柄，所述下卡盖也相应地设有下卡盖手柄，所述上卡盖与下卡盖扣合时，所述上卡盖手柄和下卡盖手柄也实现扣合，形成手持柄，所述手持柄的外表面设有防滑纹。
4.如权利要求2所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述隔离层各边角设有与下卡盖的柱形槽相对应的柱形孔，所述柱形孔的尺寸与所述柱形槽的外径相适配。
5.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述上卡盖上设有第一观察视窗；所述隔离层为片状结构，所述隔离层开设有加样孔，在隔离层的中央设有用透明材质制成的第二观察视窗，所述第二观察视窗与所述第一观察视窗对应设置。
6.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述隔离层的边缘处设有与所述卡槽对应的开口。
7.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述过滤层选用定性滤纸。
8.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述层析膜采用硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上包被有质控线C线和检测线T线，所述质控线C线为羊抗鼠IgG，所述检测线T线包括了HIV1型抗原与HIV2型抗原。
9.如权利要求1所述的一种可降低传染风险的HIV(1+2)抗体检测卡及其适配试纸条，其特征在于，所述金垫由金液喷洒在聚酯膜上制作而成，所述金液包括有标记HIV抗原和鼠IgG抗体的胶体金颗粒，所述HIV抗原包括HIV1型抗原和HIV2型抗原。
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