CN109384781B - 长春胺手性杂质的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及长春胺手性杂质的制备方法。本发明通过定向合成的方法，以及后期的柱层析分离，从而得到了七个手性杂质的高纯品，并将其用于长春胺生产中的杂质定性和定量的分析，实现了长春胺药物中七个手性杂质分离确认，并提高了长春胺的药品质量标准，从而能够获得高纯度的长春胺。与现有的长春胺的制备方法相比，本发明涉及到了七个手性异构体的制备，制备方法更加的全面，且操作简单。

Description

长春胺手性杂质的制备方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及长春胺手性杂质的制备方法。

背景技术

长春胺的化学结构式为：

长春胺是一种药物，用于中风遗症、缺血性高血压脑病、脑动脉硬化症、脑局部缺血、脑栓塞；适于早衰性脑退化的症状消除，如眩晕、头痛、记忆力减退、注意力不集中、失语、美尼尔氏综合征等；还可用于视网膜出血、神经性心动过速和其他植物神经功能紊乱等。

药物的质量控制主要是控制活性成分和有关物质的含量，特别是有关物质的含量需要满足药用要求。有关物质又可称为杂质，杂质主要来源于活性成分的制备过程以及在药物降解中产生。《化学药物杂质研究的技术指导原则》(【H】GPH3-1，第6-7页)指出：有机杂质的检测一般多采用HPLC法。如采用HPLC法，须采用峰面积法，具体定量方法采用外标法(杂质对照品法)，外标法定量比较准确。但现有的HPLC分析方法中，如果没有对照品，对于含量低于0.1％的杂质进行结构确证存在难度。

长春胺的手性异构体是质量标准中需重点关注的一系列杂质，对于长春胺的相关研究意义重大。在现有文献中已明确报道过长春胺的七个手性异构体杂质，但在现有技术中没有文献报道过七个手性杂质的具体制备方法。

发明内容

本发明通过定向合成的方法，以及后期的柱层析分离，从而得到了七个手性杂质的高纯品，并将其用于长春胺生产中的杂质定性和定量的分析，实现了长春胺药物中七个手性杂质分离确认，并提高了长春胺的药品质量标准，从而能够获得高纯度的长春胺。

与现有的长春胺的制备方法相比，本发明涉及到了七个手性异构体的制备，制备方法更加的全面，且操作简单。

本发明通过对起始物料4a-乙基-4a,5,6,7,10,15-六氢-2H,9H-吲哚并[2,3-a]吡喃并[3,2-i]喹嗪-3,3(4H)-二羧酸酯的手性拆分，得到互为对映异构体的两个重要中间体(4aR,15bR)-4a-乙基-4a,5,6,7,10,15-六氢-2H,9H-吲哚并[2,3-a]吡喃并[3,2-i]喹嗪-3,3(4H)-二羧酸酯与(4aS,15bS)-4a-乙基-4a,5,6,7,10,15-六氢-2H,9H-吲哚并[2,3-a]吡喃并[3,2-i]喹嗪-3,3(4H)-二羧酸酯。在制备七个手性异构体的过程中，这两个中间体在不同条件下开环。由于开环条件不同，得到的产物的手性也不同。

本发明在最终关环生成七个手性异构体杂质时，通过运用焦亚硫酸钠使羟基得到了保留。

本发明中所涉及到的七个化合物为长春胺的异构体，在已有的制备方法中涉及到的都是长春西汀的异构体，所以本发明通过一步酯交换过程得到了制备长春胺相关杂质的重要中间体。继而得到了长春胺的七个手性异构体杂质。

本发明提供的七个手性杂质的制备方法，其反应条件温和，制备步骤和后处理十分简单。

本发明对长春胺以及其七个手性异构体杂质进行了相关的结构确证以及液相分离，确定根据本发明的制备方法可准确的制备出长春胺的七个手性异构体。

长春胺七个手性杂质结构如下所示，CCT064-J为(41S,12S,13aR)，CCT064-K为(41S,12R,13aR)，CCT064-H为(41R,12S,13aR)，CCT064-N为(41R,12R,13aR)，CCT064-L为(41R,12R,13aS)，CCT064-M为(41R,12S,13aS)，CCT064-I为(41S,12R,13aS)：

本发明通过如下技术方案实现：

长春胺手性杂质的制备方法，包括如下步骤：

1）.

2a).

2b).

2c).

2d).

1)将化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106和CCT064-A-107；然后将化合物CCT064-A-106游离得到化合物CCT064-A-106(1)；

2)以化合物CCT064-A-106(1)为原料合成化合物CCT064-J，CCT064-K，CCT064-H或CCT064-N，或以化合物CCT064-A-107为原料合成化合物CCT064-L，CCT064-M或CCT064-I，包括：

2a1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-106(1)进行还原开环得到化合物CCT064-E-102；

2a2)化合物CCT064-E-102发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-E-103；

2a3)将化合物CCT064-E-103进行酯交换反应得到化合物CCT064-J-101；

2a4)将化合物CCT064-J-101关环得到化合物CCT064-J和CCT064-K；

或者，

2b1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-106(1)进行还原开环得到化合物CCT064-F-101；

2b2)化合物CCT064-F-101发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-F-102；

2b3)将化合物CCT064-F-102进行酯交换反应得到化合物CCT064-N-101；

2b4)将化合物CCT064-N-101关环得到化合物CCT064-H和CCT064-N；或者，

2c1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-107进行还原开环得到化合物CCT064-G-101；

2c2)化合物CCT064-G-101发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-G-102；

2c3)将化合物CCT064-G-102进行酯交换反应得到化合物CCT064-L-102；

2c4)将化合物CCT064-L-102关环得到化合物CCT064-L和CCT064-M；或者，

2d1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-107进行还原开环得到化合物CCT064-A-108；

2d2)化合物CCT064-A-108发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-A-109；

2d3)将化合物CCT064-A-109进行酯交换反应得到化合物CCT064-I-101；

2d4)将化合物CCT064-I-101关环得到化合物CCT064-I。

步骤1)中，

化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应优选在溶剂中进行。对于所述溶剂没有特别限制，对反应呈惰性即可。例如可以选自醇类溶剂(甲醇、乙醇、丙醇)、醚类溶剂(乙醚、四氢呋喃)、芳烃类溶剂(苯、二甲苯、甲苯)、卤代烃类溶剂(二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳)、腈类溶剂(乙腈)等中的一种或多种，作为示例性的实例，所述溶剂为乙醇与二氯甲烷的混合溶剂。

根据本发明，所述二苯甲酰基-L-酒石酸例如可以为水合物。化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸的摩尔比可以为1:(1～1.2)，优选为1:(1～1.05)，进一步优选为1:1。

根据本发明，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应温度为0-30℃，优选为15-30℃，更优选为25-30℃。

根据本发明，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到CCT064-A-106的反应时间为0.5-2小时，例如反应时间为1小时。

根据本发明，化合物CCT064-A-106的游离反应在弱无机碱的作用下进行，例如在K₂CO₃、Na₂CO₃、NaHCO₃等一种或多种的混合物的作用下进行；所述弱无机碱的质量浓度可以为5-20％，优选为10％。

步骤2)中，

步骤2a1)化合物CCT064-A-106(1)开环反应得到化合物CCT064-E-102或步骤2c1)化合物CCT064-A-107开环反应得到化合物CCT064-G-101在反应活化剂、开环试剂及浓氨水的作用下进行；其中所述反应活化剂可以为有机弱酸，例如甲酸、乙酸、丙酸等其中一种或多种的混合物；所述开环试剂可以为硼氢化钠、硼氢化钾或其混合物。

步骤2a1)或步骤2c1)的反应可以在醇类溶剂(甲醇、乙醇、丙醇)的作用下进行。

步骤2a1)中化合物CCT064-A-106(1)或步骤2c1)中化合物CCT064-A-107与开环试剂的摩尔比可以为1:(1～3)，优选为1:(2～2.5)，进一步优选为1:2。

步骤2b1)中化合物CCT064-A-106(1)进行催化氢化开环得到化合物CCT064-F-101或步骤2d1)中化合物CCT064-A-107进行催化氢化开环得到化合物CCT064-A-108可以在催化氢化催化剂及氢气的作用下进行，例如在氢气及如下一种或多种催化剂的作用下进行：20％Pd(OH)₂-C、Pd-C、PdCl₂、Pd-C/HCOOH、Pd-C/HCOONH₄或者Pd-C/环已烯；优选在钯碳及氢气的作用下进行。

根据本发明，步骤2b1)中催化氢化催化剂与化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)中催化氢化催化剂与CCT064-A-107的质量比可以为(0.01-0.2):1，优选为(0.05-0.2):1，例如为0.1:1。

根据本发明，步骤2b1)化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)中CCT064-A-107的催化氢化开环反应可以在溶剂中进行，例如使用四个体积的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)。

根据本发明，步骤2b1)化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)CCT064-A-107的催化氢化开环反应完成后，还可以对反应液进行处理，例如使用一个体积的浓氨水进行后处理。

根据本发明，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述水解反应可以在强碱的作用下进行；所述强碱可以为无机强碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾或其混合物；

所述强碱与化合物CCT064-E-102或CCT064-F-101或CCT064-G-101或CCT064-A-108的摩尔比可以为1:1。

根据本发明，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中，所述水解反应还包括加入强碱待原料反应完后调节反应pH为5-6，除去析出的固体，将滤液浓缩为固体的步骤；

根据本发明，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成生成肟的反应在含亚硝基化合物的作用下进行，例如在亚硝酸钠、亚硝酸钾等作用下进行；所述含亚硝基化合物与化合物CCT064-E-102或CCT064-F-101或CCT064-G-101或CCT064-A-108的摩尔比可以是(1～2):1，优选为1.6:1。

根据本发明，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成反应可以在有机酸的作用下进行，例如可以在甲酸、乙酸或丙酸中的任一种或其混合物的作用下进行；有机酸与所述固体的体积比可以为(2.5-5):1，例如为3.3:1。

根据本发明，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中水解、消除及加成反应的温度均为0-30℃，优选为15-20℃。

步骤2a3)、步骤2b3)、步骤2c3)或步骤2d3)中的反应在甲醇钠的作用下进行；所述甲醇钠与化合物CCT064-E-103或化合物CCT064-F-102或化合物CCT064-G-102或化合物CCT064-A-109的摩尔比可以为(1～1.5):1，优选为1:1。

根据本发明，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应可以在焦亚硫酸钠的作用下进行；所述焦亚硫酸钠与化合物CCT064-J-101或CCT064-N-101或CCT064-L-102或CCT064-I-101的摩尔比可以为(2～6):1，优选为4:1。

根据本发明，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环在酸性条件下进行，反应体系的pH为4-6.5。

根据本发明，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应使用的溶剂为水。

根据本发明，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述反应的温度可以为50-150℃。

本发明的有益效果

1)与现有的长春胺的制备方法相比，本发明所述方法涉及到了七个手性异构体的制备，更加全面，且操作简单。本发明制备方法的反应条件温和，操作也十分简单，所用到的试剂都为常规试剂，较易得到，无危险性。

2)本发明的制备方法通过对CCT064-J与CCT064-K的一条制备路线的摸索，其余五个化合物都可依照上述路线进行制备，从而节约了研发的时间以及成本。

3)本发明的制备方法通过简单的定向制备方法，定向地合成了长春胺的七个手性异构体，与使用正相柱子分离制备相比，这种制备方法更加简单，准确，节约成本，并且可批量生产。

4)本发明通过合成制备长春胺的七个手性杂质，首次提出了一种包括长春胺在内的八个化合物的检测和分离方法，解决了长春胺的手性杂质难以检测和分离的问题，为制备高纯度且满足用药要求的长春胺提供了基础。

附图说明

图1为实施例5化合物CCT064-H与CCT064-I分离的HPLC色谱图。

图2为实施例5化合物CCT064-L与CCT064-J分离的HPLC色谱图。

图3为实施例5化合物CCT064-M与CCT064-K分离的HPLC色谱图。

图4为实施例5长春胺与CCT064-N分离的HPLC色谱图。

图5为实施例5化合物CCT064-L、CCT064-M、CCT064-I与长春胺分离的HPLC色谱图。

具体实施方式

下文将结合具体实施例对本发明手性杂质的制备方法做更进一步的详细说明。下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。

除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。

实施例1

1.1、(4aR,15bR)-4a-乙基-4a,5,6,7,10,15-六氢-2H,9H-吲哚并[2,3-a]吡喃并[3,2-i]喹嗪-3,3(4H)-二羧酸酯与(4aS,15bS)-4a-乙基-4a,5,6,7,10,15-六氢-2H,9H-吲哚并[2,3-a]吡喃并[3,2-i]喹嗪-3,3(4H)-二羧酸酯(CCT064-A-106(1)&CCT064-A-107)的制备

将CCT064-A-105(216g，0.476mol，1.0eq)、乙醇(2.16L)、二氯甲烷(DCM)(110mL)加入3L三口瓶中，油浴升温至30℃加入L-二苯甲酰酒石酸水合物(178.8g，0.473mol，1.0eq)，加毕搅拌大约1h。将反应液过滤，滤饼用乙醇(300mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得CCT064-A-106(236g,61％)，黄色固体。

将收集的滤液于40℃减压浓缩至干，得黄色泡沫状固体(250g)，加入二氯甲烷(500mL)，10％碳酸钾水溶液(500mL)搅拌分液，水相用二氯甲烷(250mL×2)萃取两次，合并有机相，饱和氯化钠水溶液(250mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，得黄色固体160g。固体加入乙醇(160mL)打浆，过滤，滤饼于40℃鼓风烘干，得白色固体80g，之后固体用三倍量丙酮重结晶两次，得CCT064-A-107(43.3g，20％)。

结构确证：

熔点：CCT064-A-106测试的熔点为：137-141℃(乙醇)，文献报道值为139-141℃(乙醇)；

CCT064-A-107测试的熔点为130-134℃(丙酮)，文献报道值为133-136℃(丙酮)。

比旋值：CCT064-A-106：测定值[α]₂₀ ^D＝-72.8°(c＝1，N,N-二甲基甲酰胺)，文献报道值-72.5°。

将CCT064-A-106(236g)，二氯甲烷(0.9L)，10％K₂CO₃水溶液(0.9L)加入5L烧杯中，分液，水相用二氯甲烷(450mL×2)萃取两次，合并有机相并用饱和氯化钠水溶液(0.9L)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干，得黄色固体117g，加入乙醇(120mL)打浆一次，过滤，滤饼乙醇(100mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得化合物CCT064-A-106(1)(105g,79.6％)，黄色固体。

1.2、2-(((1R，12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)甲基)丙二酸二乙酯(CCT064-E-102)的制备

将CCT064-A-106(1)(36g，0.079mol，1.0eq)，乙醇(540mL，15vol)加入1L三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入冰醋酸(10.8mL，0.3vol)搅拌10min，再分批加入硼氢化钠(6g，0.159mol，2.0eq)，加毕搅拌10min，加入浓氨水(14.4mL，0.4vol)，移入油浴锅中升温至50℃，大约反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩除去溶剂，得黄色固体，加入二氯甲烷(350mL)，水(200mL)搅拌分液，水相用二氯甲烷(200mL×3)萃取三次，合并有机相并用饱和氯化钠水溶液(200mL×2)洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干，得橘黄色油状物36g，加入乙醇(40mL)打浆一次，过滤，滤饼乙醇(100mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得CCT064-E-102(20.7g,61％)，浅黄色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝427.19[M+H]⁺。

熔点：测试值为85-95℃(乙醇)，文献报道值为98℃(乙醇)。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-20.5°(c＝1，N,N-二甲基甲酰胺)，文献报道值-21°。

1.3、(Z)-3-((1R,12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸乙酯(CCT064-E-103)的制备

将CCT064-E-102(16.9g，0.0396mol，1.0eq)，乙醇(230mL，13.3vol)加入500mL三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入KOH(2.66g，0.0475mol，1.2eq)的水(17mL)溶液，反应液室温搅拌10min后移入油浴锅中升温至30℃，大约反应1h，TLC(PE/EA＝5/1)显示原料反应完全。将反应液用醋酸调节pH至5～6，搅拌10min左右析出固体，过滤，滤液减压浓缩，得黄色泡沫状固体。将上述固体加入乙酸(56mL，3.3vol)搅拌溶解，待固体全部溶清后，冰浴降温至10～15℃，滴加NaNO₂(4.38g，0.634mol，1.6eq)水(9mL)溶液，加毕移至室温20℃左右搅拌反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。向反应液中加入4N盐酸(38mL)，搅拌析晶1h，过滤，滤饼用水(20mL)淋洗，得棕色固体直接用等质量氨水(大约30mL)打浆一次(45min)，过滤滤饼用水(30mL)淋洗，于45℃鼓风烘干，得CCT064-E-103(7.6g,50％)，土黄色固体。调酸后滤液静置过夜，析出黄色固体，重复上述操作，得CCT064-E-103(2.5g,62.9％)，土黄色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝384.17[M+H]⁺。

熔点：测试值为160-165℃，文献报道值为168-169℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-54.1°(c＝1,N,N-二甲基甲酰胺)，文献报道值为-53°。

1.4、(Z)-3-((1R,12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸甲酯(CCT064-J-101)的制备

将甲醇(60mL)置于250mL三口瓶中，室温磁力搅拌下加入钠丝(600mg,26.1mmol，1.0eq)，搅拌至溶清，加入CCT064-E-103(10g，26.1mol，1.0eq)反应液澄清，加毕将三口瓶移入油浴锅中升温至回流，反应大约6h，TLC监控(DCM/MeOH＝20/1，加3d氨水)原料反应完全。停止加热，降至室温后用醋酸调节pH至中性，于40℃减压浓缩。浓缩物加入水(50mL)，用二氯甲烷(30mL×3)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得棕色固体13g。层析柱纯化，洗脱剂4％(DCM/MeOH)冲出下点，浓缩得CCT064-J-101(5g,52％)，浅黄色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝370.10[M+H]⁺。

1.5、(41S,12S,13aR)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-J)&(41S,12R,13aR)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-K)的制备

将CCT064-J-101(4.8g，0.013mol，1.0eq)，水(48mL)，乙酸(9.7mL)置于100mL三口瓶中，室温磁力搅拌至溶清，移入油浴锅中升温至100℃，分批加入焦亚硫酸钠(10g，52.6mmol，4.0eq)，反应大约3h，TLC监控(DCM/MeOH＝20/1)原料反应完全。停止加热降温至室温，将反应液倒入冰水(50mL)中，低温加入氢氧化钠溶液调pH至9，加入二氯甲烷(80mL)分液，有机相饱和食盐水(50mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得黄色固体3.2g。

柱层析(300-400目硅胶干法上样)，洗脱剂(PE/EA＝5/1)冲出上点，富集浓缩得白色固体1.2g，3倍甲醇打浆纯化得CCT064-J(800mg，18％)，白色固体。HPLC显示产品纯度为99.65％。

CCT064-J结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.15[M+H]⁺。

熔点：测试值为185-188℃(甲醇)，文献报道值为187-188℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-87.1°(c＝1,氯仿)，文献报道值为-88°。

核磁：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.46(d,1H),7.12(s,3H),4.57(br,1H),3.82(s,3H),3.09-2.96(d,J＝49.7Hz,4H),2.72(d,1H),2.52(s,1H),2.26(d,2H),2.04-1.89(m,4H),1.55(s,2H),1.31-1.28(s,1H),1.07(s,1H),0.85(s,3H).

洗脱剂(PE/EA＝4/1)冲出下点，富集浓缩得白色固体800mg，10倍甲醇重结晶三次，得CCT064-K(400mg，90％)，白色固体。HPLC:99.57％。

CCT064-K结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.11[M+H]⁺。

熔点：测试值为160-168℃(氯仿)，文献报道值为166-168℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-36.2°(c＝1,氯仿)，文献报道值-36°。

核磁：¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.47-7.45(m,1H),7.13-7.10(m,3H),4.38(br,1H),3.76(s,3H),3.06-2.94(m,4H),2.71-2.65(m,2H),2.49(s,1H),2.29-2.28(m,1H),1.94-1.83(m,4H),1.59-1.57(m,2H),1.26-1.07(m,2H),0.66-0.63(t,J＝7.5Hz,3H).

实施例2

2.1、2-(((1R，12bR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)甲基)丙二酸二乙酯(CCT064-F-101)的制备

将CCT064-A-106(1)(55.2g，0.12mol，1.0eq)，N,N二甲基甲酰胺(DMF)(220mL，4vol)加入500mL三口瓶中，室温磁力搅拌，待反应液溶清后，加入钯碳(5.5g，0.1w/w)，氢气置换三次，大约反应4h后，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应1/2，将反应液过滤，更换钯碳，继续反应大约5h，TLC原料反应完全。将反应液过滤，除去钯碳，滤液加入浓氨水(55mL)搅拌1h。之后向反应液中加入水(600mL)，乙酸乙酯(200mL)充分搅拌，分液，水相用乙酸乙酯(EA)(200mL×2)萃取两次，合并有机相并用饱和氯化钠水溶液(300mL×2)洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干，得酒红色油状物66g，加入乙醇(60mL)打浆一次，过滤，滤饼乙醇(100mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得CCT064-F-101(45.8g,88％)，白色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝427.19[M+H]⁺。

熔点：测试值为80-85℃(乙醇)，文献报道值为85-87℃(乙醇/水)。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+95.4°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值-96.6°。

2.2、(Z)-3-((1R,12bR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸乙酯(CCT064-F-102)的制备

将CCT064-F-101(45.8g，0.107mol，1.0eq)，乙醇(610mL，13.3vol)加入1L三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入KOH(7.23g，0.129mol，1.2eq)的水(14.5mL)溶液，反应液室温搅拌10min后移入油浴锅中升温至30℃，大约反应1h(反应液逐渐溶解至澄清)，TLC(PE/EA＝5/1)显示原料反应完全。将反应液用醋酸调节pH至5～6，随后减压浓缩，得橘红色油状物。将上述油状物加入AcOH(151mL，3.3vol)搅拌溶解，冰浴降温至10～15℃，滴加NaNO₂(14.8g，0.212mol，2.0eq)水(29.6mL)溶液，加毕移至室温20℃左右搅拌反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。向反应液中加入4N盐酸(120mL)，搅拌析晶1h，过滤，滤饼用水(100mL)淋洗，得白色固体，直接用等质量氨水(大约110mL)打浆一次(45min)，过滤滤饼用水(150mL)淋洗，于45℃鼓风烘干，得CCT064-F-102(35g,85％)，白色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝384.18[M+H]⁺。

熔点：mp 170-172℃(乙醇)，文献报道值mp 172-173℃(乙醇/水)参考对映异构体CCT064-A-109的文献数据。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+63.1°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值+61°。

2.3、(Z)-3-((1R，12bR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸甲酯(CCT064-N-101)的制备

将甲醇(60mL)置于250mL三口瓶中，室温磁力搅拌下加入Na丝(600mg,26.1mmol，1.0eq)，搅拌至溶清，加入CCT064-F-102(10g，26.1mol，1.0eq)反应液澄清，加毕将三口瓶移入油浴锅中升温至回流，反应大约4h，TLC监控原料反应完全。停止加热降温析晶，过滤得CCT064-N-101(6g,62％)，白色固体。

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝370.17[M+H]⁺。

2.4、(41R,12S,13aR)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-H)&(41R,12R,13aR)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-N)的制备

将CCT064-N-101(6g，0.016mol，1.0eq)，水(60mL)，乙酸(12mL)置于250mL三口瓶中，室温磁力搅拌至溶清，分批加入焦亚硫酸钠(15g，78.9mol，5.0eq)，加毕将三口瓶移入油浴锅中升温至100℃，反应大约5h，TLC监控(DCM/MeOH＝20/1)原料反应完全。停止加热降温至室温，加入碳酸氢钠饱和溶液调pH至9，加入DCM(80mL)分液，有机相饱和食盐水(50mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得黄色固体6.7g。

CCT064-H：

FLASH柱层析(300-400目硅胶干法上样)洗脱剂3％(DCM/MeOH)冲出上点，富集浓缩得白色固体2.8g，5倍甲醇打浆纯化(可多次)得CCT064-H(1.8g，30％)，白色固体。HPLC:97.26％.

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.12[M+H]⁺。

熔点：mp 230-233℃(甲醇)，文献报道值234-235℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-40.8°(c＝1,吡啶)，文献报道值-43°。

核磁：¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49-7.48(d,J＝3.1Hz,1H),7.13-7.10(m,3H),4.59(br,1H),3.95(s,1H),3.74(s,3H),3.34(m,2H),3.04-2.96(m,1H),2.61-2.48(m,3H),2.25-2.11(m,3H),1.72-1.66(m,2H),1.51-1.38(m,3H),0.94-0.92(t,J＝7.4Hz,3H).

CCT064-N：

洗脱剂6％(DCM/MeOH)冲出下点，富集浓缩得白色固体1.5g。5倍甲醇重结晶(两次)，得CCT064-N(700mg，11.7％)，白色固体。HPLC:98.64％.

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.11[M+H]⁺。

熔点：mp 183-184℃(乙腈)，文献报道值mp 187-188℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+39.1°(c＝1,氯仿)，文献报道值+40°。

¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48-7.47(m,1H),7.28-7.26(m,1H),7.13-7.12(t,J＝2.9Hz,2H),4.07(br,1H),3.91(s,1H),3.74(s,3H),3.31-3.30(m,2H),2.99(m,1H),2.60-2.56(m,4H),2.11-2.07(m,2H),1.70(m,1H),1.47-1.46(m,1H),1.35-1.32(m,2H),1.25(d,J＝13.3Hz,1H),0.91-0.89(t,J＝7.4Hz,3H).

实施例3

3.1、2-(((1S，12bR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)甲基)丙二酸二乙酯(CCT064-G-101)的制备

将CCT064-A-107(20g，0.044mol，1.0eq)，乙醇(300mL，15vol)加入1L三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入冰醋酸(10.8mL，0.3vol)搅拌10min，再分批加入硼氢化钠(3.35g，0.088mol，2.0eq)，加毕搅拌10min，加入浓氨水(8mL，0.4vol)，移入油浴锅中升温至50℃，大约反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩除去溶剂，得黄色固体28.8g，加入二氯甲烷(300mL)，水(200mL)搅拌分液，水相用二氯甲烷(200mL×3)萃取三次，合并有机相并用饱和氯化钠水溶液(200mL×2)洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干，得黄色固体20g，加入乙醇(20mL)打浆一次，过滤，滤饼乙醇(10mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得CCT064-G-101(10.85g,58％)，浅黄色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝427.20[M+H]⁺。

熔点：mp 86-99℃(乙醇)，文献报道值mp 99℃(乙醇)。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+21°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值+25°。

3.2、(Z)-3-((1S，12bR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸乙酯(CCT064-G-102)的制备

将CCT064-G-101(10.85g，0.025mol，1.0eq)，乙醇(145mL，13.3vol)加入500mL三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入KOH(1.7g，0.03mol，1.2eq)的水(11mL)溶液，反应液室温搅拌10min后移入油浴锅中升温至30℃，大约反应1h(反应液逐渐溶解至澄清)，TLC(PE/EA＝5/1)显示原料反应完全。将反应液用醋酸调节pH至5～6，随后减压浓缩，得黄色半固体13.8g。将上述固体加入AcOH(36mL，3.3vol)搅拌溶解，待固体全部溶清后，冰浴降温至10～15℃，滴加NaNO₂(2.8g，0.04mol，1.6eq)水(5.6mL)溶液，加毕移至室温20℃左右搅拌反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。向反应液中加入4N盐酸(24mL)，搅拌析晶1h，过滤，滤饼用水(20mL)淋洗，得棕色固体直接用等质量氨水(大约36mL)打浆一次(45min)，过滤滤饼用水(30mL)淋洗，于45℃鼓风烘干，得CCT064-G-102(4.9g,50％)，土黄色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝384.16[M+H]⁺。

熔点：mp 160-168℃，文献报道值mp 168-170℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+52°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值+53°。

3.3、(Z)-3-((1S,12bSR)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸甲酯(CCT064-L-102)的制备

将CCT064-G-102(30g，0.0782mol，1.0eq)，甲醇钠(1.3g，0.117mol，1.5eq)，甲醇(600mL)置于1L三口瓶中，将反应混合物加热至回流(80℃)，搅拌5小时。LC-MS监控原料基本反应完全，加入乙酸调节pH至中性，减压浓缩至干，得CCT064-L-102(9.5g，33％)，白色固体。

3.4、(41R,12R,13aS)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-L)与(41R,12S,13aS)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-M)的制备

将CCT064-L-102(8g，0.022mol，1.0eq)，水(80mL)，乙酸(16mL)置于250mL三口瓶中，室温磁力搅拌至溶清，分批加入焦亚硫酸钠(21g，0.11mol，4.0eq)，加毕将三口瓶移入油浴锅中升温至100℃，反应大约5h，TLC监控(DCM/MeOH＝20/1)原料反应完全。停止加热降温至室温，加入碳酸氢钠饱和溶液调pH至9，加入DCM(100mL)分液，有机相饱和食盐水(70mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得黄色固体7.2g。

CCT064-L：

FLASH柱层析(300-400目硅胶干法上样)洗脱剂3％(DCM/MeOH)冲出上点，富集浓缩得白色固体2.9g，5倍甲醇打浆纯化得CCT064-L(1.7g，22％)，白色固体。HPLC:98.48％。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.15[M+H]⁺。

熔点：mp 184-188℃(甲醇)，文献报道值mp 187-188℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+88.7°(c＝1,氯仿)，文献报道值(+89°)。

核磁：¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.46-7.44(mz,1H),7.13-7.08(m,3H),4.57(br,1H),3.82(s,3H),3.09-2.96(m,4H),2.71-2.68(m,1H),2.52(t,1H),2.29-2.26(d,J＝14.1Hz,2H),2.03-1.89(m,4H),1.60-1.58(d,J＝13.1Hz,1H),1.31-1.29(m,1H),1.07-1.06(m,1H),0.86-0.83(t,J＝7.4Hz,3H).

CCT064-M：

洗脱剂6％(DCM/MeOH)冲出下点，富集浓缩得白色固体1.6g。5倍甲醇重结晶，得CCT064-M(800mg，10.5％)，白色固体。HPLC:98.64％.

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.13[M+H]⁺。

熔点：mp 160-168℃(氯仿)，文献报道值mp 166-168℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝+34.7°(c＝1,氯仿)，文献报道值(+36°)。

核磁：¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.49-7.48(s,1H),7.12(m,3H),4.38(br,1H),3.77(s,3H),3.08-2.97(m,4H),2.73-2.67(t,J＝14.8Hz,2H),2.53-2.51(t,J＝9.2Hz,1H),2.32-2.27(t,J＝10.7Hz,1H),1.96-1.85(m,4H),1.61(d,J＝12.9Hz,1H),1.25-1.23(m,1H),1.13-1.08(m,1H),0.69-0.66(t,J＝7.5Hz,3H).

实施例4

4.1、2-(((1S，12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)甲基)丙二酸二乙酯(CCT064-A-108)的制备

将CCT064-A-107(15g，0.033mol，1.0eq)，N,N二甲基甲酰胺(60mL，4vol)加入100mL三口瓶中，室温磁力搅拌，待反应液溶清后，加入钯碳(1g，0.1w/w)，氢气置换三次，大约反应4h后，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应1/2，将反应液过滤，更换钯碳，继续反应大约5h，TLC原料反应完全。将反应液过滤，除去钯碳，滤液加入浓氨水(15mL)搅拌1h。之后向反应液中加入水(50mL)，乙酸乙酯(100mL)充分搅拌，分液，水相用乙酸乙酯(80mL×2)萃取两次，合并有机相并用饱和氯化钠水溶液(80mL×2)洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至干，得酒红色油状物15.5g，加入乙醇(60mL)打浆一次，过滤，滤饼乙醇(100mL)淋洗，于40℃鼓风烘干，得CCT064-A-108(10.5g,75％)，白色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝427.19[M+H]⁺。

熔点：mp 81-85℃(乙醇)，文献报道值mp 85-87℃(乙醇/水)。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-94.9°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值-96.6°。

4.2、(Z)-3-((1S，12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸乙酯(CCT064-A-109)的制备

将CCT064-A-108(10.5g，0.025mol，1.0eq)，乙醇(140mL，13.3vol)加入1L三口瓶中，室温磁力搅拌，随后加入KOH(1.65g，0.03mol，1.2eq)的水(11mL)溶液，反应液室温搅拌10min后移入油浴锅中升温至30℃(外温)，大约反应1h(反应液逐渐溶解至澄清)，TLC(PE/EA＝5/1)显示原料反应完全。将反应液用醋酸调节pH至5～6，随后减压浓缩，得橘红色油状物。将上述油状物加入AcOH(35mL，3.3vol)搅拌溶解(保持室温，高温易脱羧基)，冰浴降温至10～15℃，滴加NaNO₂(2.7g，0.039mol，1.6eq)水(5.4mL)溶液，加毕移至室温20℃左右搅拌反应1h，TLC(DCM/MeOH＝20/1)显示原料反应完全。向反应液中加入4N盐酸(24mL)，搅拌析晶1h，过滤，滤饼用水(100mL)淋洗，得白色固体，直接用等质量氨水(大约35mL)打浆一次(45min)，过滤滤饼用水(50mL)淋洗，于45℃鼓风烘干，得CCT064-A-109(8g,85％)，白色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝384.15[M+H]⁺。

熔点：mp 169-172℃(乙醇)，文献报道值mp 172-173℃(乙醇/水)。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-63.1°(c＝1,N,N二甲基甲酰胺)，文献报道值-61°。

4.3、(Z)-3-((1S,12bS)-1-乙基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-1-基)-2-(羟基亚氨基)丙酸甲酯(CCT064-I-101)的制备

将CCT064-A-109(6.2g，0.0162mol，1.0eq)，甲醇钠(1.3g，0.0242mol，1.5eq)，甲醇(120mL)置于250mL三口瓶中，将反应混合物加热至回流(80℃)，搅拌5小时。LC-MS监控原料基本反应完全，加入乙酸调节pH至中性，减压浓缩至干，直接投下一步，得CCT064-I-101(7.8g，100％)，白色固体。

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝370.15[M+H]⁺。

4.4、(41S,12R,13aS)-13a-乙基-12-羟基-2,3,41,5,6,12,13,13a-八氢-1H-吲哚并[3,2,1-de]吡啶并[3,2,1-ij][1,5]萘啶-12-羧酸甲酯(CCT064-I)的制备

将CCT064-I-101(6g，0.013mol，1.0eq)，焦亚硫酸钠(12g，0.065mol，4.0eq)，水(60mL)，乙酸(12mL)置于250mL三口瓶中，将反应瓶移入油浴锅中升温至100℃，反应大约5h，TLC监控(DCM/MeOH＝20/1)原料反应完全。停止加热降温至室温，将反应液倒入冰水(50mL)中，低温(5℃)加入氢氧化钠溶液调pH至9，加入二氯甲烷(80mL)分液，有机相饱和食盐水(50mL)洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得黄色固体3.2g。柱层析(300-400目硅胶干法上样)，洗脱剂6～9％(DCM/MeOH)冲出下点，富集浓缩得白色固体800mg，刮大板，展开剂(DCM/MeOH/氨水＝20/1/1)，得CCT064-I(380mg，6.7％)，白色固体。HPLC:99.02％.

结构确证：

质谱：LC-MS谱图显示m/z＝355.11[M+H]⁺。

熔点：mp 182-187℃(乙腈)，文献报道值mp 187-188℃。

比旋值：测定值[α]₂₀ ^D＝-37.4°(c＝1,氯仿)，文献报道值-38°。

核磁：¹H-NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.48-7.46(m,1H),7.29-7.26(m,1H),7.13-7.11(m,2H),4.11(br,1H),3.90(s,1H),3.74(s,3H),3.31-3.22(m,2H),2.99(m,1H),2.60-2.55(m,4H),2.17-2.16(m,1H),2.10-2.07(m,1H),1.72-1.70(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.34-1.32(m,2H),1.25-1.22(m 1H),0.91-0.89(t,J＝7.6Hz,3H).

实施例5.手性杂质的分离

将CCT064-H与CCT064-I经HPLC色谱进行分离定位，采用的HPLC色谱条件如下：

色谱柱：手性柱(AD-H，4.6×250mm，5μm)；

检测波长：227nm；

柱温：30℃；

流速：1.0ml/min；

进样量：20μl；

流动相：正己烷-异丙醇(90:10)；

稀释剂：正己烷-异丙醇(50:50)；

供试品溶液：0.3mg/ml。

测定结果：该方法可以对CCT064-H、CCT064-I进行分离，其分离度为4.611，CCT064-I、CCT064-H的保留时间分别为13.125min、33.623min。HPLC色谱图如图1所示。

将CCT064-J与CCT064-L经HPLC色谱进行分离定位，采用的HPLC色谱条件如下：

色谱柱：手性柱(AD-H，4.6×250mm，5μm)；

检测波长：227nm；

柱温：未开启柱温箱；

流速：1.0ml/min；

进样量：20μl；

流动相：正己烷-异丙醇(92:8)；

稀释剂：正己烷-异丙醇(50:50)；

供试品溶液：0.3mg/ml。

测定结果：该方法可以对CCT064-L、CCT064-J进行分离，其分离度为9.392，CCT064-L、CCT064-J的保留时间分别为13.059min、22.116min。HPLC色谱图如图2所示。

将CCT064-K与CCT064-M经HPLC色谱进行分离定位，采用的HPLC色谱条件如下：

色谱柱：手性柱(AD-H，4.6×250mm，5μm)；

检测波长：227nm；

柱温：未开启柱温箱；

流速：1.0ml/min；

进样量：20μl；

流动相：正己烷-异丙醇(95:5)；

稀释剂：正己烷-异丙醇(50:50)；

供试品溶液：0.3mg/ml。

测定结果：该方法可以对CCT064-M、CCT064-K进行分离，其分离度为3.407，CCT064-M、CCT064-K的保留时间分别为21.334min、26.110min。HPLC色谱图如图3所示。

将长春胺与CCT064-N经HPLC色谱进行分离定位，采用的HPLC色谱条件如下：

色谱柱：手性柱(AD-H，4.6×250mm，5μm)；

检测波长：227nm；

柱温：30；

流速：1.0ml/min；

进样量：20μl；

流动相：正己烷-异丙醇(70:30)；

稀释剂：正己烷-异丙醇(50:50)；

供试品溶液：0.3mg/ml。

测定结果：该方法可以对CCT064-N、长春胺进行分离，其分离度为3.158，长春胺、CCT064-N的保留时间分别为16.042min、24.682min。HPLC色谱图如图4所示。

将CCT064-L、CCT064-M、CCT064-I、长春胺经HPLC色谱进行分离定位，采用的HPLC色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Kromasil C18，4.6×250mm，5μm)；

检测波长：227nm；

柱温：30℃；

流速：1.0ml/min；

进样量：20μl；

流动相A：0.01M磷酸氢二钾溶液(含0.1％三乙胺，用磷酸调节pH值至7.0)

流动相B：乙腈

稀释剂：流动相A-流动相B(50:50)。

测定结果：该方法可以对CCT064-L、CCT064-M、CCT064-I、长春胺进行分离定位，CCT064-I的保留时间为13.640min；长春胺的保留时间为15.791min；CCT064-M的保留时间为18.306min；CCT064-L的保留时间为22.022。HPLC色谱图如图5所示。

结合实施例2与附图5的结果可以确定长春胺与其七个手性异构体的定位，从而将这八个化合物进行分离。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (22)

1.长春胺手性异构体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）.

2a).

2b).

2c).

2d).

1)将化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106和CCT064-A-107；进一步将化合物CCT064-A-106游离得到化合物CCT064-A-106(1)；

2)以化合物CCT064-A-106(1)为原料合成化合物CCT064-J，CCT064-K，CCT064-H或CCT064-N，或以化合物CCT064-A-107为原料合成化合物CCT064-L，CCT064-M或CCT064-I，包括：

2a1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-106(1)进行还原开环得到化合物CCT064-E-102；

2a2)化合物CCT064-E-102发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-E-103；

2a3)将化合物CCT064-E-103进行酯交换反应得到化合物CCT064-J-101；

2a4)将化合物CCT064-J-101关环得到化合物CCT064-J和CCT064-K；或者，

2b1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-106(1)进行还原开环得到化合物CCT064-F-101；

2b2)化合物CCT064-F-101发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-F-102；

2b3)将化合物CCT064-F-102进行酯交换反应得到化合物CCT064-N-101；

2b4)将化合物CCT064-N-101关环得到化合物CCT064-H和CCT064-N；或者，

2c1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-107进行还原开环得到化合物CCT064-G-101；

2c2)化合物CCT064-G-101发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-G-102；

2c3)将化合物CCT064-G-102进行酯交换反应得到化合物CCT064-L-102；

2c4)将化合物CCT064-L-102关环得到化合物CCT064-L和化合物CCT064-M；

或者，

2d1)将步骤1)得到的化合物CCT064-A-107进行还原开环得到化合物CCT064-A-108；

2d2)化合物CCT064-A-108发生水解、消除及加成反应得到化合物CCT064-A-109；

2d3)将化合物CCT064-A-109进行酯交换反应得到化合物CCT064-I-101；

2d4)将化合物CCT064-I-101关环得到化合物CCT064-I；

步骤1)中，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应在溶剂中进行；

所述溶剂选自醇类溶剂、醚类溶剂、芳烃类溶剂、卤代烃类溶剂、腈类溶剂中的一种或多种；

化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应温度为0-30℃；

步骤2a1)化合物CCT064-A-106(1)开环反应得到化合物CCT064-E-102或步骤2c1)化合物CCT064-A-107开环反应得到化合物CCT064-G-101在反应活化剂、开环试剂及浓氨水的作用下进行；其中所述反应活化剂为有机弱酸；所述开环试剂为硼氢化钠、硼氢化钾或其混合物；

步骤2a1)或步骤2c1)的反应在醇类溶剂的作用下进行；

步骤2b1)中化合物CCT064-A-106(1)进行催化氢化开环得到化合物CCT064-F-101或步骤2d1)中化合物CCT064-A-107进行催化氢化开环得到化合物CCT064-A-108在氢气及如下一种或多种催化剂的作用下进行：20％Pd(OH)₂-C、Pd-C、PdCl₂、Pd-C/HCOOH、Pd-C/HCOONH₄或者Pd-C/环已烯；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述水解反应在强碱的作用下进行；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成反应在有机酸的作用下进行；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成生成肟的反应在含亚硝基化合物的作用下进行；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中水解、消除及加成反应的温度均为0-30℃；

步骤2a3)、步骤2b3)、步骤2c3)或步骤2d3)中所述酯交换反应在甲醇钠的作用下进行；

步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应在焦亚硫酸钠的作用下进行；

步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应在酸性条件下进行；

步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应的温度为50-150℃。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应在如下溶剂中进行；

甲醇、乙醇、丙醇、乙醚、四氢呋喃、苯、二甲苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、乙腈。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述二苯甲酰基-L-酒石酸为水合物。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸的摩尔比为1:(1～1.2)。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，化合物CCT064-A-106的游离反应在弱无机碱的作用下进行。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸的摩尔比为1:(1～1.05)；

化合物CCT064-A-105与二苯甲酰基-L-酒石酸混合得到化合物CCT064-A-106的反应温度为15-30℃；

化合物CCT064-A-106的游离反应在弱无机碱K₂CO₃、Na₂CO₃、NaHCO₃的作用下进行；所述弱无机碱的质量浓度为5-20％。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a1)化合物CCT064-A-106(1)开环反应得到化合物CCT064-E-102或步骤2c1)化合物CCT064-A-107开环反应得到化合物CCT064-G-101使用的反应活化剂为甲酸、乙酸、丙酸其中一种或多种的混合物。

8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a1)中化合物CCT064-A-106(1)或步骤2c1)中化合物CCT064-A-107与开环试剂的摩尔比为1:(1～3)。

9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a1)或步骤2c1)的反应在甲醇、乙醇、或丙醇的作用下进行。

10.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a1)中化合物CCT064-A-106(1)或步骤2c1)中化合物CCT064-A-107与开环试剂的摩尔比为1:(2～2.5)。

11.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2b1)中催化氢化催化剂与化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)中催化氢化催化剂与CCT064-A-107的质量比为(0.01-0.2):1。

12.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2b1)中化合物CCT064-A-106(1)进行催化氢化开环得到化合物CCT064-F-101或步骤2d1)中化合物CCT064-A-107进行催化氢化开环得到化合物CCT064-A-108在钯碳及氢气的作用下进行；

步骤2b1)中催化氢化催化剂与化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)中催化氢化催化剂与CCT064-A-107的质量比为(0.05-0.2):1；

步骤2b1)化合物CCT064-A-106(1)或步骤2d1)中CCT064-A-107的催化氢化开环反应使用四个体积的N，N-二甲基甲酰胺。

13.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述水解反应在强碱氢氧化钠、氢氧化钾或其混合物的作用下进行。

14.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述强碱与化合物CCT064-E-102或CCT064-F-101或CCT064-G-101或CCT064-A-108的摩尔比为1:1。

15.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中，所述水解反应还包括加入强碱待原料反应完后调节反应pH为5-6，除去析出的固体，将滤液浓缩为固体的步骤。

16.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述有机酸与原料的体积比为(2.5-5):1。

17.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述含亚硝基化合物与化合物CCT064-E-102或CCT064-F-101或CCT064-G-101或CCT064-A-108的摩尔比是(1～2):1。

18.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成反应在有机酸甲酸、乙酸或丙酸中的任一种或其混合物的作用下进行；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中所述消除及加成生成肟的反应在含亚硝基化合物亚硝酸钠、或亚硝酸钾作用下进行；所述含亚硝基化合物与化合物CCT064-E-102或CCT064-F-101或CCT064-G-101或CCT064-A-108的摩尔比为1.6:1；

步骤2a2)、步骤2b2)、步骤2c2)或步骤2d2)中水解、消除及加成反应的温度为15-20℃。

19.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a3)、步骤2b3)、步骤2c3)或步骤2d3)中所述甲醇钠与化合物CCT064-E-103或化合物CCT064-F-102或化合物CCT064-G-102或化合物CCT064-A-109的摩尔比为(1～1.5):1。

20.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述焦亚硫酸钠与化合物CCT064-J-101或CCT064-N-101或CCT064-L-102或CCT064-I-101的摩尔比为(2～6):1。

21.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应在pH为4-6.5的条件下进行。

22.如权利要求1-8任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤2a4)、步骤2b4)、步骤2c4)或步骤2d4)中所述关环反应使用的溶剂为水。

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