CN109355318A - 一种发酵生产丁酸的方法 - Google Patents

一种发酵生产丁酸的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109355318A
CN109355318A CN201811322835.3A CN201811322835A CN109355318A CN 109355318 A CN109355318 A CN 109355318A CN 201811322835 A CN201811322835 A CN 201811322835A CN 109355318 A CN109355318 A CN 109355318A
Authority
CN
China
Prior art keywords
brown alga
butyric acid
hydrolyzate
glucose
tyrobutyricum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811322835.3A
Other languages
English (en)
Inventor
王菊芳
傅宏鑫
廖正平
索玉凯
张亚南
胡佳磊
郭晓龙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
South China University of Technology SCUT
Original Assignee
South China University of Technology SCUT
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by South China University of Technology SCUT filed Critical South China University of Technology SCUT
Priority to CN201811322835.3A priority Critical patent/CN109355318A/zh
Publication of CN109355318A publication Critical patent/CN109355318A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/52—Propionic acid; Butyric acids

Abstract

本发明属于生物技术领域，公开了一种发酵生产丁酸的方法，包括如下步骤：(1)将酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)活化，制备成种子液；(2)以甘露醇和葡萄糖的混合物为碳源，配制液体培养基，并经过灭菌；(3)将步骤(1)种子液接种于步骤(2)的液体培养基中，在温度为35‑39℃，pH为5‑7，转速为100‑300rpm的条件下，进行细胞发酵，得到丁酸。本发明可以降低副产物乙酸的积累，提高目标产物丁酸的转化率和选择性，从而降低后续的分离纯化成本。此外，该发明中的混合底物还可以用褐藻水解液或褐藻加工废弃物作为替代，从而实现廉价海洋生物质向高选择性丁酸的高效生物转化。

Description

一种发酵生产丁酸的方法
技术领域
本发明涉及一种利用酪丁酸梭菌以葡萄糖和甘露醇为混合底物发酵生产高选择性丁酸的方法，属于有机酸发酵技术领域。
背景技术
丁酸(butyric acid)又称酪酸，是指含四个碳原子的直链饱和一元脂肪酸，常以游离状态或酯的形式存在于自然界中。丁酸及其衍生物在化工、食品、医药和饲料行业等领域有着广泛的用途。
目前，丁酸的生产主要有化学合成和微生物发酵两种方法。在丁酸工业化生产中，丙烯羰基合成法和正丁醛氧化法是最常用的方法。其中，丙烯羰基合成法主要是通过糖基化作用先将丙烯转化为丁醛，然后再将丁醛氧化为丁酸，但此方法存在投资较大，原料费用较高，色泽度不理想等缺点，并且副产物丁醛的存在也降低了丁酸的得率和纯度，这大大增加了后续分离纯化成本；而正丁醛氧化法是通过氧化正丁醛生产丁酸，并且在反应中无需采用催化剂从而避免了后续分离催化剂与产物的工序，此外其还具有合成工艺简单、原料成本较低、生产控制方便、底物转化率高(>99％)、产物色泽好等优点，因此是目前工业生产丁酸普遍采用的方法。与化学合成法相比，微生物发酵法产丁酸具有可再生、污染低、能耗低等优点，并且人们对有机食品的偏爱也使得生物源丁酸更适用于食品、医药和饲料行业。
在厌氧条件下，自然界中有许多微生物都能够通过发酵产丁酸，目前已经被证实的主要有梭菌属(Clostridium)、丁酸杆菌属(Butyribacterium)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、真杆菌属(Eubacterium)、八叠球菌属(Sarcina)、巨球形菌属(Megasphaera)、梭杆菌属(Fusobacterium)等。其中，厌氧梭菌在发酵产丁酸方面被研究的较多，并且因其较高的丁酸产量和产率以及清晰的代谢途径等原因被认为更具有工业应用前景。厌氧梭菌一般为典型的革兰氏阳性菌，严格厌氧，并且在恶劣环境中可以通过形成芽孢增强自身对外界环境的适应能力，其中酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)能够利用葡萄糖、木糖和果糖合成丁酸、乙酸、二氧化碳和氢气，由于其具有较好的丁酸产量和选择性、较好的稳定性和较低的营养需求等优点，被认为是最具商业化开发潜力的丁酸发酵菌株。但是目前微生物发酵法产丁酸存在得率低和分离纯化成本高等问题，严重制约了生物丁酸的工业化生产。因此，如何降低副产物的生成已经成为微生物发酵法产丁酸能否工业化的先决条件。
甘露醇是大型褐藻(如海带、马尾藻等)的主要成分之一，约占干重的10％～20％。目前，大型海藻通过物理、化学和生物酶法处理，提取海藻酸，而甘露醇成为主要的副产物被废弃。若能将褐藻水解液或废弃的甘露醇用于高选择性丁酸生产，不仅可以变废为宝，降低丁酸生产成本，还能减轻环境污染，缓解能源危机。与目前广泛研究的廉价农业废弃物相比，海洋生物质具有以下优势：生长速度快、产量高、光合作用效率高、CO2固定效率高、不含难降解的木质素，不与粮食作物争夺土地、肥料、淡水等资源。因此，开发廉价海洋生物质转化高选择性丁酸的方法具有相当大的潜力和重要意义。
目前丁酸发酵的底物主要为葡萄糖和农业废弃物(如甘蔗渣和玉米皮)水解液，虽然后者解决了原料来源的问题，但是由于预处理过程中产生大量毒性抑制物，使得发酵产物浓度低。虽然脱毒可以缓解这一效应，但是会造成糖损失，产生额外的操作成本。使用以上两种底物发酵还存在另一个瓶颈：那就是副产物乙酸的存在不仅降低了丁酸的得率，还会使得后续分离纯化步骤繁琐、成本较高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用酪丁酸梭菌以葡萄糖和甘露醇为混合底物发酵生产高选择性丁酸的方法，有助于提高发酵液中丁酸的选择性和得率，降低微生物发酵法生产丁酸的成本。
本发明的具体技术方案如下：
一种发酵生产丁酸的方法，包括如下步骤：
(1)将酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)活化，制备成种子液；
(2)以甘露醇和葡萄糖的混合物为碳源，配制液体培养基，并经过灭菌；
(3)将步骤(1)种子液接种于步骤(2)的液体培养基中，在温度为35-39℃，pH为5-7，转速为100-300rpm的条件下，进行细胞发酵，得到丁酸。发酵方式为分批发酵、补料分批发酵或连续发酵。
优选地，所述酪丁酸梭菌为酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)ATCC25755。
优选地，所述甘露醇和葡萄糖的质量比为1:4～3:2。
优选地，所述甘露醇和葡萄糖的质量比为1:2～1:1。
优选地，所述液体培养基为：2g/L酵母提取物，4g/L胰蛋白胨，2g/L(NH4)2SO4或CH3COONH4，1g/L K2HPO4，0.5g/L KH2PO4，0.1g/L MgSO4·7H2O和30-120g/L碳源。
优选地，所述灭菌为115-121℃条件下灭菌15-30min。
优选地，所述甘露醇来源于褐藻水解液(包括酸解和酶解两种)或褐藻加工废弃物(含有甘露醇)。
优选地，所述褐藻水解液是指褐藻通过物理、化学法和/或生物酶法处理得到的以甘露醇为主要成分的水解液；所述褐藻为海带、马尾藻或裙带菜。
所述褐藻加工业废弃物是指通过物理、化学和生物酶法处理，提取海藻酸后的副产物。
优选地，所述褐藻酸水解液的制备方法如下：
(1)清洗褐藻去除表面的泥沙和盐分，烘干，将褐藻碎成粉末；
(2)将褐藻粉末与0.05-0.5mol/L的硫酸以2.5-10:100的固液比混合，于100-121℃条件下水解0.5-2h；所得水解液离心后取上清，制得褐藻酸水解液(主要成分是甘露醇)。
优选地，所述褐藻酶水解液的制备方法如下：
(1)调节上述褐藻酸水解液pH值为5.0，加入1-10％(w/w褐藻粉末)纤维素酶，在40-60℃、100-200rpm条件下酶解24-72h；
(2)所得酶解液离心后取上清，得到褐藻酶解液(主要成分是甘露醇和葡萄糖)。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
从环境保护和资源利用角度，研究海洋生物质(如海带水解液或海带加工业废弃物)发酵生产高选择性丁酸的生物炼制工艺。
目前丁酸发酵的底物主要为葡萄糖和农业废弃物(如甘蔗渣和玉米皮)水解液，虽然后者解决了原料来源的问题，但是由于预处理过程中产生大量毒性抑制物，使得发酵产物浓度低。虽然脱毒可以缓解这一效应，但是会造成糖损失，产生额外的操作成本。相反，海洋生物质由于木质素含量低，水解液毒性小，可以获得高浓度丁酸发酵液。此外，甘露醇是大型褐藻的主要成分，为海藻酸提取过程中的副产物。若将褐藻水解液/工业废弃物用于生物丁酸生产，不仅可以实现褐藻加工业废弃物的资源化利用，降低丁酸生产成本，还能减轻环境污染，缓解能源危机。
限制丁酸产业化应用的另一个瓶颈是副产物乙酸的存在不仅降低了丁酸的得率，还会使得后续分离纯化步骤繁琐、成本较高。本发明通过选用具有较高还原性的底物甘露醇，并将它与葡萄糖混合发酵，有助于提高了发酵液中目标产物丁酸的选择性和得率，最优条件下丁酸选择性甚至可以达到100％，这将极大降低下游分离纯化成本，提高丁酸发酵的经济可行性。
附图说明
图1为葡萄糖、甘露醇和葡萄糖/甘露醇混合底物发酵对丁酸发酵的影响；葡萄糖为唯一碳源(A)，甘露醇与葡萄糖质量比分别为1:4(B)、1:2(C)、1:1(D)、3:2(E)，甘露醇为唯一碳源(F)。
图2为酪丁酸梭菌Clostridium tyrobutyricumATCC 25755分别以葡萄糖(A)、葡萄糖/甘露醇混合物(B)、海带酶解液(C)为底物发酵生产丁酸。
具体实施方式
为了使本发明的技术方案更加清楚，下面将结合附图和实施例对本发明作进一步的详细描述。
实施例1：不同比例葡萄糖和甘露醇混合底物发酵对丁酸发酵的影响
(1)培养基的配制
CGM(Clostridium Growth Medium)培养基(1L体系)：2g酵母提取物，4g胰蛋白胨，2g(NH4)2SO4，1g K2HPO4，0.5g KH2PO4，0.1g MgSO4·7H2O，碳源为葡萄糖和/或甘露醇，并且碳氮和培养基分开灭菌(121℃,20min)。
(2)摇瓶发酵实验
在容积为100mL的厌氧瓶(装有50mL不含碳源的无菌CGM培养基和2g/L CaCO3)中加入不同比例、灭菌后的葡萄糖和/或甘露醇作为碳源。将酪丁酸梭菌C.tyrobutyricumATCC 25755(美国菌种保藏中心,American Type Culture Collection)在CGM培养基中活化培养过夜，然后按照5％(v/v)的接种量将种子液接入厌氧瓶中，然后在37°С、150rpm条件下培养，并且在培养过程中定期取样用于检测底物消耗和产物生成。
实验结果如图1所示，以葡萄糖为唯一碳源时，丁酸浓度和选择性(丁酸浓度和所有产物浓度之比)分别为18.9g/L和93.4％(图1A)。取具有较高还原态的底物甘露醇(C6H14O6)，并将它与葡萄糖(C6H12O6)按一定质量比(0:50,1:4,1:2,1:1,3:2和58:0)混合发酵，结果显示乙酸浓度随甘露醇比例的增加而降低，当甘露醇与葡萄糖质量比为1:4时，丁酸浓度无显著变化，但是丁酸选择性提高至95.3％(图1B)；当甘露醇与葡萄糖质量比为1:2和1:1时，丁酸浓度无显著变化，副产物乙酸完全消失，即丁酸选择性达到100％(图1C和D)；进一步增大甘露醇的质量比(3:2)，尽管丁酸选择性依旧为100％，但是菌体生长受到抑制，丁酸产量降低(图1E)。当甘露醇为唯一底物时，胞内氧化还原不平衡使得菌体生长受到严重抑制，乳酸成为主要的产物，伴随有少量丁酸生成(图1F)。
值得一提的是，当甘露醇与葡萄糖质量比为1:2时，获得了最佳的丁酸浓度(18.2g/L)和选择性(100％)。与葡萄糖为唯一碳源时的发酵相比(图1A)，葡萄糖和甘露醇混合底物发酵时丁酸得率由0.40g/g提高至0.42-0.46g/g(图1B-E)。因此，该发明在不影响丁酸终浓度的条件下，显著提高了目标产物丁酸的选择性和得率，有助于降低下游分离纯化成本，提高底物转化率和生物丁酸发酵的经济可行性。
实施例2：海带水解液的制备
(1)海带成分测定
海带购于广州大学城穗石村菜市场，海带中水分、总灰分、蛋白质、脂肪和总糖含量的测定分别参照GB5009.3-2016、GB5009.4-2016、GB5009.52010、GB5009.6-2016和苯酚-硫酸法。具体成分如下表所示：
水分 总灰分 蛋白质 脂肪 总糖
含量(％) 9.56 28.67 7.21 1.30 58.95
(2)海带酸水解液的制备
通过机械粉碎法将干海带粉碎成粉末，过100目筛并存放于65℃烘箱烘干，然后按固液比1:12(w/v)的比例将上述海带粉末与0.1M的H2SO4混合均匀。在121℃条件下预处理45min，冷却后，将水解液振荡混匀后取样，8000rpm离心10min去除沉淀，高效液相色谱法检测水解液中各组分的浓度。海带酸水解液中的主要成分为甘露醇，其浓度为16.85g/L。
(3)海带酶水解液的制备
通过机械粉碎法将干海带粉碎成粉末，过40目筛并存放于65℃烘箱烘干，然后按固液比1:12(w/v)的比例将上述海带粉末与0.1M的H2SO4混合均匀。在121℃条件下预处理45min，冷却后，用NaOH调节pH至5.0。按5％(w/w干海带粉)的比例加入纤维素酶CTec2，并在50℃，180rpm条件下水解72h。8000rpm离心30min去除沉淀，高效液相色谱法检测水解液中各组分的浓度。海带酶水解液中的主要成分为葡萄糖和甘露醇，其浓度分别10.18g/L和23.07g/L。
实施例3：酪丁酸梭菌Clostridium tyrobutyricum分别以葡萄糖、葡萄糖/甘露醇混合物、海带酶解液为底物发酵生产丁酸
分别以葡萄糖(～90g/L)、葡萄糖/甘露醇混合底物(～60g/L葡萄糖和～30g/L甘露醇)、海带酶解液(培养基中乙酸铵替代硫酸铵，且补加葡萄糖，使葡萄糖：甘露醇＝44:23)作为发酵实验的碳源。发酵实验是在5L全自动机械搅拌发酵罐中进行的。发酵前，先将发酵罐装置在121℃条件下灭菌20min，然后加入CGM培养基(1L)，并在121℃条件下灭菌20min，冷却后通入无菌氮气置换罐中的空气以达到无氧环境。将酪丁酸梭菌ATCC25755在CGM培养基中活化培养过夜，然后按照5％(v/v)的接种量将种子液接入发酵罐中，搅拌速度和温度分别设定为150rpm和37℃，并通过添加氨水(30％,v/v)将发酵液的pH严格控制在6.0。在发酵过程中，定期取样用于检测菌体密度、底物消耗和产物生成。
结果如图2所示，以含有94.16g/L葡萄糖的CGM培养基作为底物发酵时，最终的丁酸浓度、得率和选择性分别达到27.00g/L、0.287g/g和80.3％(图2A)。与之相比，以含有60g/L葡萄糖和30g/L甘露醇的混合底物发酵时，最终的丁酸浓度、得率和选择性分别达到33.71g/L、0.382g/g和100％，分别提高了24.9％、33.1％和24.5％(图2B)。与此类似，以海带酶解液为底物发酵时，最终的丁酸浓度、得率和选择性分别达到27.80g/L、0.398g/g和100％(图2C)。
值得一提的是，与葡萄糖为唯一碳源时的发酵相比，以葡萄糖/甘露醇或海带酶解液为混合底物发酵时，丁酸得率显著提高，即使用较少的底物可以获得更多的丁酸；且发酵液中产物只有丁酸，即丁酸选择性达到100％，有助于减少后续分离纯化工段的成本，提高生物丁酸的市场竞争力。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进也应在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种发酵生产丁酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)活化，制备成种子液；
(2)以甘露醇和葡萄糖的混合物为碳源，配制液体培养基，并经过灭菌；
(3)将步骤(1)种子液接种于步骤(2)的液体培养基中，在温度为35-39℃，pH为5-7，转速为100-300rpm的条件下，进行细胞发酵，得到丁酸。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酪丁酸梭菌为酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)ATCC 25755。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述甘露醇和葡萄糖的质量比为1:4～3:2。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述甘露醇和葡萄糖的质量比为1:2～1:1。
5.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述液体培养基为：2g/L酵母提取物，4g/L胰蛋白胨，2g/L(NH4)2SO4或CH3COONH4，1g/L K2HPO4，0.5g/L KH2PO4，0.1g/LMgSO4·7H2O和30-120g/L碳源。
6.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述灭菌为115-121℃条件下灭菌15-30min。
7.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述甘露醇来源于褐藻水解液或褐藻加工废弃物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述褐藻水解液是指褐藻通过物理、化学法和/或生物酶法处理得到的以甘露醇为主要成分的水解液；所述褐藻为海带、马尾藻或裙带菜。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述褐藻水解液的制备方法如下：
(1)清洗褐藻去除表面的泥沙和盐分，烘干，将褐藻碎成粉末；
(2)将褐藻粉末与0.05-0.5mol/L的硫酸以2.5-10:100的固液比混合，于100-121℃条件下水解0.5-2h；所得水解液离心后取上清，制得褐藻酸水解液。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述褐藻酶水解液的制备方法如下：
(1)调节权利要求9所述褐藻酸水解液pH值为5.0，加入1-10％(w/w褐藻粉末)纤维素酶，在40-60℃、100-200rpm条件下酶解24-72h；
(2)所得酶解液离心后取上清，得到褐藻酶解液。
CN201811322835.3A 2018-11-08 2018-11-08 一种发酵生产丁酸的方法 Pending CN109355318A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811322835.3A CN109355318A (zh) 2018-11-08 2018-11-08 一种发酵生产丁酸的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811322835.3A CN109355318A (zh) 2018-11-08 2018-11-08 一种发酵生产丁酸的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109355318A true CN109355318A (zh) 2019-02-19

Family

ID=65344558

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811322835.3A Pending CN109355318A (zh) 2018-11-08 2018-11-08 一种发酵生产丁酸的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109355318A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111334532A (zh) * 2020-04-27 2020-06-26 驻马店华中正大有限公司 一种丁酸连续发酵的方法
CN112358986A (zh) * 2020-11-09 2021-02-12 华南理工大学 一种丁酸梭菌及其在固定化发酵生产 1，3-丙二醇的应用
EP3978603A1 (en) 2020-09-30 2022-04-06 Tianjin University A butyric acid-producing bacillus subtilis strain, method of construction and application thereof
CN114540434A (zh) * 2022-04-27 2022-05-27 驻马店华中正大有限公司 一种提高丁酸发酵产物收率的方法
CN114540435A (zh) * 2022-04-27 2022-05-27 驻马店华中正大有限公司 一种利用代谢酶提高丁酸产量的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160298146A1 (en) * 2015-04-09 2016-10-13 Korea Institute Of Science And Technology Hydrolysate of mixture of seaweed biomass and lignocellulosic biomass to improve biochemical and biofuel production, and preparation using the same
CN107746862A (zh) * 2017-10-09 2018-03-02 浙江大学 利用酪丁酸梭菌发酵玉米皮水解液生产丁酸的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160298146A1 (en) * 2015-04-09 2016-10-13 Korea Institute Of Science And Technology Hydrolysate of mixture of seaweed biomass and lignocellulosic biomass to improve biochemical and biofuel production, and preparation using the same
CN107746862A (zh) * 2017-10-09 2018-03-02 浙江大学 利用酪丁酸梭菌发酵玉米皮水解液生产丁酸的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HONGXIN FU ET AL.: "High-Selectivity Butyric Acid Production from Saccharina japonica Hydrolysate by Clostridium tyrobutyricum", 《IND. ENG. CHEM. RES.》 *
HYUN JU OH ET AL.: "Enhanced butyric acid production using mixed biomass of brown algae and rice straw by Clostridium tyrobutyricum ATCC25755", 《BIORESOURCE TECHNOLOGY》 *
JI-HEE SONG ET AL.: "Butyric Acid Production from Brown Algae Using Clostridium tyrobutyricumGATCC 25755", 《BIOTECHNOLOGY AND BIOPROCESS ENGINEERING》 *
胡佳磊: "酪丁酸梭菌发酵海带水解液产丁酸和丁醇的研究", 《中国学位论文全文数据库》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111334532A (zh) * 2020-04-27 2020-06-26 驻马店华中正大有限公司 一种丁酸连续发酵的方法
EP3978603A1 (en) 2020-09-30 2022-04-06 Tianjin University A butyric acid-producing bacillus subtilis strain, method of construction and application thereof
CN112358986A (zh) * 2020-11-09 2021-02-12 华南理工大学 一种丁酸梭菌及其在固定化发酵生产 1，3-丙二醇的应用
CN114540434A (zh) * 2022-04-27 2022-05-27 驻马店华中正大有限公司 一种提高丁酸发酵产物收率的方法
CN114540435A (zh) * 2022-04-27 2022-05-27 驻马店华中正大有限公司 一种利用代谢酶提高丁酸产量的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109355318A (zh) 一种发酵生产丁酸的方法
Roy et al. Thermophilic biohydrogen production using pre-treated algal biomass as substrate
Liu et al. Fermentative hydrogen production from macro-algae Laminaria japonica using anaerobic mixed bacteria
CN1807610A (zh) 微生物发酵生产低温纤维素酶的方法
CN102174602A (zh) 一种利用生物质发酵生产l-乳酸的方法
WO2005118775A1 (en) Methods and bacterial strains for producing hydrogen from biomass
CN110106223B (zh) 一种促进玉米秸秆光合产氢的方法
CN105274178B (zh) 一种褐煤非原位制取甲烷联产腐植酸的方法及其中应用的复合菌剂
CN107746862A (zh) 利用酪丁酸梭菌发酵玉米皮水解液生产丁酸的方法
CN102703339A (zh) 高产精氨酸脱亚胺酶菌株及用它生产l-瓜氨酸的方法
CN102304480B (zh) 一株高产l-乳酸的鼠李糖乳杆菌菌株及发酵木薯、甘蔗糖蜜产乳酸的方法
CN103421850A (zh) 一种利用丰富栅藻生产生物乙醇的方法
CN103509832A (zh) 一种以高浓度磷酸二氢钾为缓冲盐的发酵生产γ-氨基丁酸的方法
CN105349588A (zh) 利用裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法
CN110004202B (zh) 一种微生物共培养催化碳水化合物合成己酸的方法
CN111394397A (zh) 一种利用餐厨垃圾发酵生产己酸的方法
Ravinder et al. Fermentative production of acetic acid from various pure and natural cellulosic materials by Clostridium lentocellum SG6
CN112501218B (zh) 一种利用木质纤维素同步糖化发酵生产l-乳酸的方法
CN105087737A (zh) 一种利用菊芋为原料发酵生产虾青素的方法与应用
CN112143770B (zh) 一种海洋红酵母及其在以秸秆为原料生产β-胡萝卜素中的应用
CN107058449A (zh) 一种餐厨垃圾解淀粉芽孢杆菌与鼠李糖乳杆菌混合发酵产乳酸的方法
CN103436585A (zh) 一种通过发酵乳杆菌生产虾青素的方法
CN101659925A (zh) 一种光滑球拟酵母突变株及其在发酵生产丙酮酸中的应用
CN112662710B (zh) 一种利用木质纤维素连续发酵生产l-乳酸的方法
CN101225412B (zh) 一种完全利用木质纤维素生产富马酸的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190219

RJ01 Rejection of invention patent application after publication