CN109349613A - 一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液及其制备方法，所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液采用新鲜的剔肉骆驼骨、益生菌、白糖和脱脂乳粉作为原料，通过脱脂、酶解、益生菌发酵、过滤和配液过程，最终制备得到高浓度、分子量小的骆驼骨胶原蛋白肽口服液。本发明所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液是骆驼骨胶原蛋白肽、益生菌和益生菌发酵物的混合物，含有胶原蛋白肽、小分子肽、钙、磷、氨基酸、乳糖酶，维生素、短链脂肪酸和抗氧化剂等物质，具有预防骨质疏松症、提高机体免疫力、改善肠道功能的保健功效。本发明所述的制备方法是酶解和发酵联合技术的高效结合，不仅可以提高骨胶原蛋白肽的收率和骆驼骨中钙的转化率，而且还能够保证所得小分子肽的生物活性。

Description

一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液及其制备方法
技术领域
本发明属于生物化学和发酵工程学技术领域，具体涉及一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液及其制备方法。
背景技术
骆驼是我国荒漠地区特有的畜种资源，经过长期随机选育，已成为独具特色的地方良种，具有适应性强、耐干旱、耐风沙、耐酷暑严寒的特性，是守土戍边的帮手，也是沙漠戈壁不可或缺的动物。
驼产业作为沙产业中不可分割的一部分，是一种健康产业。骆驼一身都是宝，驼乳、驼绒、胎盘、驼肉等对人体的肝脏、子宫、肾脏、关节等器官、部位及免疫力具有保健作用，开发前景可观。现在，市面上已经研发出液态奶、奶粉、奶片、化妆保养品等驼奶产品，胎盘片、胎盘胶囊等骆驼胎盘产品、各类驼绒制品及驼肉产品。目前，驼奶处于研发阶段，驼肉属于起步阶段，驼绒开发仍是驼产品的主要内容。目前，骆驼骨仅应用于雕刻艺术市场，虽然骆驼骨是骨雕艺术者深受欢迎的原材料，毕竟股雕刻艺术的爱好者相对是一个小众群体。
随着生物活性肽研究领域的迅速发展，目前活性肽的多种营养保健功能已经明确。随着肽类保健功能的不断挖掘，越来越多的肽类保健品问世，但是肽类保健品的质量鱼龙混杂，人们服用后的吸收率成为当前我们需要解决的重要问题之一。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液及其制备方法。本发明所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液不仅包含胶原蛋白肽、小分子肽、钙、磷、氨基酸等主要成分，还包含许多有益物质，如：乳糖酶、维生素(如泛酸、尼克酸、维生素B1、维生素B2、维生素B6及维生素K)、短链脂肪酸、抗氧化剂等。本发明所述方法是运用酶解和发酵联用技术的结合，是在传统酶解骨胶原蛋白提取方法上的创新，不仅能够提高骨胶原蛋白的提取效率，还提高了骆驼骨中可溶性钙的转率。
本发明所采用的技术方案为：
一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液，原料组分包括：
骆驼骨150-250重量份、益生菌0.5-1.5重量份、白砂糖6-10重量份、脱脂乳粉0.5-1.5重量份。
进一步优选所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的原料组分包括：
骆驼骨200重量份、益生菌1重量份、白砂糖8重量份、脱脂乳粉1重量份。
进一步地，所述益生菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和植物乳杆菌按照质量比(0.5-1.5):1:1组成的混合物
进一步地，一种制备所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的方法，包括如下步骤：
(1)将骆驼骨破碎为骨渣、清洗、高压蒸煮、冷却，去除蒸煮水的上层油脂，得到去油脂水和蒸煮后的骨渣；
(2)将所述去油脂水和蒸煮后的骨渣混合后磨制为骨泥；
(3)向所述骨泥中加入纯化水，得到加水骨泥，随后向加水骨泥中加入木瓜蛋白酶进行酶解和酶灭活，得到酶解物；
(4)取少量所述酶解物，加入白糖、脱脂乳粉和纯化水，灭菌后得到种子液备用；
(5)向剩余所述酶解物中加入白糖和纯化水，灭菌后得到发酵液备用；
(6)将益生菌加入到所述种子液中进行发酵，得到益生菌发酵种子液；
(7)将所述益生菌发酵种子液加入到发酵液中进行发酵，发酵过程中定时进行搅拌，并且定时检测活性钙离子浓度的增长情况、pH值的变化和益生菌的生长情况，得到发酵成熟原液；
(8)将所述发酵成熟原液进行过滤得到过滤后原液；
(9)将所述过滤后原液进行离心，取上清液进行微滤，得到微滤液，对所得微滤液调节pH，并检测骨胶原蛋白肽含量，随后用蒸馏水调整骨胶原蛋白肽含量，得到骨胶原蛋白肽原液；
(10)将所述骨胶原蛋白肽原液进行超滤，得到超滤液，将超滤液进行除菌，得到所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液。
进一步地，步骤(1)中，所述骆驼骨为新鲜的剔除肉的骆驼骨；所述骨渣大小为4-6cm；用自来水清洗2-4次，随后用纯化水清洗1-2次；蒸煮时加入的纯化水与骆驼骨质量比为(1-1.5)：1；所述高压蒸煮温度为110-130℃，所述高压蒸煮压力为0.15-0.25MPa，高压蒸煮时间为1.5-2.5h。
进一步地，步骤(2)中，所述骨泥的细度为50-100目。
进一步地，步骤(3)中，所述纯化水的加入量与骨泥的质量比为(2-4)：1；所述木瓜蛋白酶的加入量与加水骨泥的质量比为(3-5)：200；酶解温度为36-38℃，酶解时间为6-8h；酶灭活温度为90-100℃，酶灭活时间为10-15min。
进一步地，步骤(4)中，种子液中酶解物、白糖、脱脂乳粉和纯化水的质量比为(5-7)：1:1:12；灭菌温度为120-130℃，灭菌压力为0.15-0.25Mpa，灭菌时间为40-50min。
进一步地，步骤(5)中，发酵液中酶解物、白糖和纯化水的质量比为(48-52):7:43；所述灭菌温度为120-130℃，所述灭菌压力为0.15-0.25Mpa，所述灭菌时间为40-50min。
进一步地，步骤(6)中，所述发酵温度为37-39℃，所述发酵时间为24-36h。
进一步地，步骤(7)中，益生菌发酵种子液与发酵液的质量比为(3-5):100；发酵温度为37-39℃，发酵时间为24-36h；发酵过程中每隔25-35min搅拌8-12min；每隔7-9h检测活性钙离子浓度的增长情况和pH值的变化，当pH值降到3.5-4.5，活性钙离子含量达到220-250mg/100mL时，停止发酵。
进一步地，步骤(8)中，发酵成熟原液过滤通过桶式过滤器进行。
进一步地，步骤(9)中，所述微滤使用孔径为0.1-0.3μm的滤膜进行切向流微滤；用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH调节pH至6.5-7.0；利用福林酚法测骨胶原蛋白肽含量；蒸馏水调整后使骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL。
进一步地，步骤(10)中，所述超滤采用4500-5500Da的超滤膜；所述除菌采用0.05-0.15μm的除菌过滤器。
进一步地，所述制备的骆驼骨胶原蛋白肽在制作各类保健食品中的应用。
本发明的有益效果为：
本发明所述的骆驼骨胶原蛋白肽口服液，是骆驼骨胶原蛋白肽、益生菌和益生菌发酵物的混合物，含有胶原蛋白肽、小分子肽、钙、磷、氨基酸、乳糖酶，维生素、短链脂肪酸和抗氧化剂等物质，具有预防骨质疏松症、提高机体免疫力、改善肠道功能的保健功效。本发明所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液中小分子肽的含量≥2.0mg/mL，可溶性钙的含量≥220.0mg/100mL。本发明所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法是将新鲜的剔肉骆驼骨和益生菌作为原料，通过脱脂、酶解、益生菌发酵、过滤和配液过程，最终制备得到高浓度、分子量小的骆驼骨胶原蛋白肽口服液。本发明所述的制备方法是酶解和发酵联合技术的高效结合，不仅可以提高骨胶原蛋白肽的收率和骆驼骨中钙的转化率，而且还能够保证所得小分子肽的生物活性。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液，原料组分包括：
骆驼骨150g、益生菌0.5g、白砂糖6g、脱脂乳粉0.5g。
进一步，本实施例提供所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将新鲜的剔除肉的骆驼骨破碎为4cm左右大小的骨渣，用自来水清洗2次，随后用纯化水清洗1次，加入同等质量的的纯化水，110℃高压蒸煮1.5h，高压蒸煮压力为0.15MPa，随后进行冷却，去除蒸煮水的上层油脂，得到去油脂水和蒸煮后的骨渣；
(2)将所述去油脂水和蒸煮后的骨渣混合后磨制为细度为50目的骨泥；
(3)向所述骨泥中加入2倍质量的纯化水，得到加水骨泥，随后向加水骨泥中加入质量分数为3/200的木瓜蛋白酶进行酶解，36℃酶解6h，随后90℃进行酶灭活10min，得到酶解物；
(4)取少量所述酶解物，加入白糖、脱脂乳粉和纯化水，质量比依次为5：1:1:12，120℃灭菌40min，灭菌压力为0.15Mpa，得到种子液备用；
(5)向剩余所述酶解物中加入白糖和纯化水，质量比依次为48:7:43，120℃灭菌40min，灭菌压力为0.15Mpa，得到发酵液备用；
(6)将比例为嗜酸乳杆菌：嗜热链球菌：植物乳杆菌＝1:2:2的益生菌加入到所述种子液中进行发酵，37℃发酵24h，得到益生菌发酵种子液；
(7)将质量分数为发酵液3％的益生菌发酵种子液加入到发酵液中，37℃发酵24h，发酵过程中每隔25min搅拌8min，并且每隔7h检测活性钙离子浓度的增长情况和pH值的变化，当pH值降到3.5，活性钙离子含量达到220mg/100mL时，停止发酵，得到发酵成熟原液；
(8)将所述发酵成熟原液利用桶式过滤器进行过滤得到过滤后原液；
(9)将所述过滤后原液进行离心，取上清液后使用孔径为0.1μm的滤膜进行切向流微滤，得到微滤液，用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH将所得微滤液调节pH至6.5，利用福林酚法测骨胶原蛋白肽含量，随后用蒸馏水调整骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL，得到骨胶原蛋白肽原液；
(10)采用4500Da的超滤膜对所述骨胶原蛋白肽原液进行超滤，得到超滤液，采用0.05μm除菌过滤器对超滤液进行除菌，得到所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液。
实施例2
本实施例提供一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液，原料组分包括：
骆驼骨250g、益生菌1.5g、白砂糖10g、脱脂乳粉1.5g。
进一步，本实施例提供所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将新鲜的剔除肉的骆驼骨破碎为6cm左右大小的骨渣，用自来水清洗4次，随后用纯化水清洗2次，加入同等质量的的纯化水，130℃高压蒸煮2.5h，高压蒸煮压力为0.25MPa，随后进行冷却，去除蒸煮水的上层油脂，得到去油脂水和蒸煮后的骨渣；
(2)将所述去油脂水和蒸煮后的骨渣混合后磨制为细度为100目的骨泥；
(3)向所述骨泥中加入4倍质量的纯化水，得到加水骨泥，随后向加水骨泥中加入质量分数为1/40的木瓜蛋白酶进行酶解，38℃酶解8h，随后100℃进行酶灭活15min，得到酶解物；
(4)取少量所述酶解物，加入白糖、脱脂乳粉和纯化水，质量比依次为7：1:1:12，130℃灭菌50min，灭菌压力为0.25Mpa，得到种子液备用；
(5)向剩余所述酶解物中加入白糖和纯化水，质量比依次为52:7:43，130℃灭菌50min，灭菌压力为0.25Mpa，得到发酵液备用；
(6)将比例为嗜酸乳杆菌：嗜热链球菌：植物乳杆菌＝3:2:2的益生菌加入到所述种子液中进行发酵，39℃发酵36h，得到益生菌发酵种子液；
(7)将质量分数为发酵液5％的益生菌发酵种子液加入到发酵液中，39℃发酵36h，发酵过程中每隔35min搅拌12min，并且每隔9h检测活性钙离子浓度的增长情况和pH值的变化，当pH值降到4.5，活性钙离子含量达到250mg/100mL时，停止发酵，得到发酵成熟原液；
(8)将所述发酵成熟原液利用桶式过滤器进行过滤得到过滤后原液；
(9)将所述过滤后原液进行离心，取上清液后使用孔径为0.3μm的滤膜进行切向流微滤，得到微滤液，用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH将所得微滤液调节pH至7.0，利用福林酚法测骨胶原蛋白肽含量，随后用蒸馏水调整骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL，得到骨胶原蛋白肽原液；
(10)采用5500Da的超滤膜对所述骨胶原蛋白肽原液进行超滤，得到超滤液，采用0.15μm除菌过滤器对超滤液进行除菌，得到所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液。
实施例3
本实施例提供一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液，原料组分包括：
骆驼骨200g、益生菌1g、白砂糖8g、脱脂乳粉1g。
进一步，本实施例提供所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将新鲜的剔除肉的骆驼骨破碎为5cm左右大小的骨渣，用自来水清洗3次，随后用纯化水清洗1次，加入同等质量的的纯化水，120℃高压蒸煮2h，高压蒸煮压力为0.2MPa，随后进行冷却，去除蒸煮水的上层油脂，得到去油脂水和蒸煮后的骨渣；
(2)将所述去油脂水和蒸煮后的骨渣混合后磨制为细度为80目的骨泥；
(3)向所述骨泥中加入3倍质量的纯化水，得到加水骨泥，随后向加水骨泥中加入质量分数为1/50的木瓜蛋白酶进行酶解，37℃酶解8h，随后95℃进行酶灭活12min，得到酶解物；
(4)取少量所述酶解物，加入白糖、脱脂乳粉和纯化水，质量比依次为6：1:1:12，125℃灭菌45min，灭菌压力为0.2Mpa，得到种子液备用；
(5)向剩余所述酶解物中加入白糖和纯化水，质量比依次为50:7:43，125℃灭菌45min，灭菌压力为0.2Mpa，得到发酵液备用；
(6)将比例为嗜酸乳杆菌：嗜热链球菌：植物乳杆菌＝1:1:1的益生菌加入到所述种子液中进行发酵，38℃发酵30h，得到益生菌发酵种子液；
(7)将质量分数为发酵液4％的益生菌发酵种子液加入到发酵液中，38℃发酵30h，发酵过程中每隔30min搅拌10min，并且每隔8h检测活性钙离子浓度的增长情况和pH值的变化，当pH值降到4，活性钙离子含量达到235mg/100mL时，停止发酵，得到发酵成熟原液；
(8)将所述发酵成熟原液利用桶式过滤器进行过滤得到过滤后原液；
(9)将所述过滤后原液进行离心，取上清液后使用孔径为0.22μm的滤膜进行切向流微滤，得到微滤液，用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH将所得微滤液调节pH至6.8，利用福林酚法测骨胶原蛋白肽含量，随后用蒸馏水调整骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL，得到骨胶原蛋白肽原液；
(10)采用5000Da的超滤膜对所述骨胶原蛋白肽原液进行超滤，得到超滤液，采用0.1μm除菌过滤器对超滤液进行除菌，得到所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液。
实验例
一、酶解最适条件和发酵最适条件的探索
1、骨泥的制备
(1)取新鲜的剔肉骆驼骨10kg于破骨机中经过破碎为5cm左右的小骨渣，然后送清洗机，用饮用水清洗3次，然后用纯化水清洗1次。
清洗后的骆驼骨经破骨机破碎，成细碎的骨渣，然后加入1.0-1.5倍纯化水，于高压蒸煮釜内，121摄氏度，0.2MPa，蒸煮2h，冷却将上浮油脂收集至贮油罐，冷却蒸煮后的水和骨渣备用。
(2)将蒸煮去油后的水和骨渣混合物用胶体磨和骨泥磨制成骨泥，骨泥细度达50-100目。
2、骨泥的酶解和发酵
(1)取6kg处理好的脱脂骆驼骨泥，按1:2(w:v)比例加入12L蒸馏水。将以上处理好的样品，均等分成6份于三角瓶中，每份3.0L，并按A-F标记。然后按1.5％、2.0％、2.5％加入木瓜蛋白酶，于恒温摇床中，150r/min，37℃±0.5℃，分别酶解6h-8h(具体操作见表1)。酶解完成后，升温至90-100℃，10-15min酶灭活，弃去上层失活酶，检测不同酶浓度和酶解时间下，胶原蛋白肽和活性钙的含量。
表1木瓜蛋白酶酶解骆驼骨泥的不同指标表
(2)选最适条件下酶解的酶解物(包括骨泥和酶解液)配置成骨泥发酵液，进行益生菌发酵。
I.种子液的配置(1000mL)：酶解物300g、白砂糖50g、脱脂乳粉50g，加蒸馏水定容至1000mL，125℃，0.2Mpa，45min灭菌。
II.发酵液的配置(5000mL)：酶解物2.5kg、白砂糖350g、加蒸馏水定容至5000mL于发酵灌中，125℃，0.2Mpa，45min灭菌。
III.菌种的扩大培养：驯化的菌种在无菌条件下，按5％的接种量接种于种子培养液中，38℃±0.5培养箱中培养，测定活菌数达到对数生长>106-109CFU/mL为止。
驯化的菌种质量比为嗜酸乳杆菌：嗜热链球菌：植物乳杆菌＝1:1:1。
IV.酶解物发酵：无菌条件下，取菌种扩大培养好的种子液250mL(5％的接种量)接种于发酵液中，38℃±0.5发酵培养。发酵过程中，每隔8h，取样检测活性钙离子浓度的增长情况及pH值的变化和菌种的生长情况。当发酵液的pH值降到4.0±0.5，活性钙离子含量达到220-250mg/100mL时，停止发酵。
①.pH值的检测：采用酸度计于25.0±5.0摄氏度测定。
②.活性钙的测定：采用GB5009.92-2016的标准检测。
3、过滤：发酵结束后，停止搅拌，使骨泥等颗粒物质充分沉淀，然后发酵罐中打入经空气过滤系统处理的无菌净化空气，在一定的压力下，使发酵成熟的原液，通过过滤器，过滤得的发酵液与酶解液混合。
4、配液：将配液罐中液体用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH调节pH值至6.5-7.0之间，福林酚法测骨胶原蛋白肽含量，蒸馏水配液使骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL。
5、酶解结果
表2不同加酶量、时间对骨泥酶解的结果
由表2可知，不同加酶量，不同酶解时间对骨泥酶解后蛋白肽的含量是不同的。2.0％木瓜蛋白酶，酶解8h所得蛋白肽含量、活性钙的含量均最高，因此，2.0％木瓜蛋白酶，8h酶解是该骆驼骨胶原蛋白肽制备方法中酶解的最适条件。
6、发酵结果
表3发酵液不同时间各指标的变化情况
由表3可知，发酵时间在8-36h之间，发酵液中pH值逐渐降低，24h-36h之间在4.0左右；活性钙含量、蛋白肽含量在8-36h之间不断升高，24-36h之间相比，活性钙含量和蛋白肽含量的变化基本没有差异。
7、结论
骆驼骨胶原蛋白肽制备中，酶解最适条件为2％木瓜蛋白酶，酶解8h，发酵最适温度为38℃±0.5，最适时间为24-36h。
二、实施例3所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的保健效果试验
将172位伴随有骨质疏松或免疫力低下的人不分年龄、性别随机分为两组，每组86人，分别为实验组和空白对照组，让受试者分别饮用对应饮品，观察受试对象的骨质疏松或免疫力低下症状的恢复情况：
实验组：让受试对象在每日早上和晚上均饮用本发明实施例3所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液，每次一瓶，观察受试对象骨质疏松或免疫力低下症状的恢复情况；
空白对照组：让受试对象在每日早上和晚上均饮用一瓶清水，观察受试对象骨质疏松或免疫力低下症状的恢复情况；
各种试用期限结束后，以基本无改善、略有改善、改善、明显改善为4级评价标准，对各组受试对象的骨质疏松或免疫力低下症状的恢复情况做统计。结果如表1所示：
表1试验结果
组别 基本无改善 略有改善 改善 明显改善 有效率
实验组 2 6 10 68 97.6％
空白对照组 84 2 0 0 2.3％
由以上结果可知，实验组受试对象骨质疏松或免疫力低下症状的恢复情况较好，说明实验组受试对象饮用本发明所述的骆驼骨胶原蛋白肽口服液，能够明显改善其骨质疏松或免疫力低下症状，也证明了本发明所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的保健功效。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种骆驼骨胶原蛋白肽口服液，其特征在于，原料组分包括：
骆驼骨150-250重量份、益生菌0.5-1.5重量份、白砂糖6-10重量份、脱脂乳粉0.5-1.5重量份。
2.根据权利要求1所述的骆驼骨胶原蛋白肽口服液，其特征在于，原料组分包括：
骆驼骨200重量份、益生菌1重量份、白砂糖8重量份、脱脂乳粉1重量份。
3.根据权利要求1所述的骆驼骨胶原蛋白肽口服液，其特征在于，所述益生菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和植物乳杆菌按照质量比(0.5-1.5):1:1组成的混合物。
4.权利要求1-3任一项所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将骆驼骨破碎为骨渣、清洗、高压蒸煮、冷却，去除蒸煮水的上层油脂，得到去油脂水和蒸煮后的骨渣；
(2)将所述去油脂水和蒸煮后的骨渣混合后磨制为骨泥；
(3)向所述骨泥中加入纯化水，得到加水骨泥，随后向加水骨泥中加入木瓜蛋白酶进行酶解和酶灭活，得到酶解物；
(4)取少量所述酶解物，加入白糖、脱脂乳粉和纯化水，灭菌后得到种子液备用；
(5)向剩余所述酶解物中加入白糖和纯化水，灭菌后得到发酵液备用；
(6)将益生菌加入到所述种子液中进行发酵，得到益生菌发酵种子液；
(7)将所述益生菌发酵种子液加入到发酵液中进行发酵，得到发酵成熟原液；
(8)将所述发酵成熟原液进行过滤得到过滤后原液；
(9)将所述过滤后原液进行离心，取上清液进行微滤，得到微滤液，对所得微滤液调节pH，并检测骨胶原蛋白肽含量，随后用蒸馏水调整骨胶原蛋白肽含量，得到骨胶原蛋白肽原液；
(10)将所述骨胶原蛋白肽原液进行超滤，得到超滤液，将所述超滤液进行除菌，得到所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液。
5.根据权利要求4中所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述骆驼骨为新鲜的剔除肉的骆驼骨；所述骨渣大小为4-6cm；用自来水清洗2-4次，随后用纯化水清洗1-2次；蒸煮时加入的纯化水与骆驼骨质量比为(1-1.5):1；所述高压蒸煮温度为110-130℃，所述高压蒸煮压力为0.15-0.25MPa，高压蒸煮时间为1.5-2.5h；
步骤(2)中，所述骨泥的细度为50-100目。
6.根据权利要求4中所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述纯化水的加入量与骨泥的质量比为(2-4):1；所述木瓜蛋白酶的加入量与加水骨泥的质量比为(3-5):200；酶解温度为36-38℃，酶解时间为6-8h；酶灭活温度为90-100℃，酶灭活时间为10-15min。
7.根据权利要求4中所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，种子液中酶解物、白糖、脱脂乳粉和纯化水的质量比为(5-7)：1:1:12；灭菌温度为120-130℃，灭菌压力为0.15-0.25Mpa，灭菌时间为40-50min；
步骤(5)中，发酵液中酶解物、白糖和纯化水的质量比为(48-52):7:43；所述灭菌温度为120-130℃，所述灭菌压力为0.15-0.25Mpa，所述灭菌时间为40-50min。
8.根据权利要求4中所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，所述发酵温度为37-39℃，所述发酵时间为24-36h；
步骤(7)中，所述益生菌发酵种子液与发酵液的质量比为(3-5):100；发酵温度为37-39℃，发酵时间为24-36h；发酵过程中每隔25-35min搅拌8-12min；每隔7-9h检测pH值的变化和活性钙离子浓度的增长情况，当pH值降到3.5-4.5，活性钙离子含量达到220-250mg/100mL时，停止发酵；
步骤(8)中，发酵成熟原液过滤通过桶式过滤器进行。
9.根据权利要求4中所述骆驼骨胶原蛋白肽口服液的制备方法，其特征在于，步骤(9)中，所述微滤使用孔径为0.1-0.3μm的滤膜进行切向流微滤；用2.0mol/L的HCl与2.0mol/L的NaOH调节pH至6.5-7.0；利用福林酚法测定骨胶原蛋白肽含量；蒸馏水调整后使骨胶原蛋白肽含量≥2.0mg/mL；
步骤(10)中，所述超滤采用4500-5500Da的超滤膜；所述除菌采用0.05-0.15μm的除菌过滤器。
10.权利要求1-3任一项所述骆驼骨胶原蛋白肽在制作保健食品中的应用。
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