CN109331088B - 石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用。所述石崖茶提取物作为解酒活性物在制备具有解酒作用的药物、食品或保健品中的应用。石崖茶提取物在作用于醉酒小鼠后，可以显著性降低醉酒小鼠血液中乙醇浓度、缩短醒酒时间；同时，还可以显著性延长小鼠醉酒潜伏期和攀附时间、提高机体肝脏内乙醇脱氢酶活力和乙醛脱氢酶活力，进而有效地使乙醇在机体肝脏内被代谢为乙醛，乙醛再代谢为乙酸，最后转变成二氧化碳和水，排出体外，有效地解酒毒，摆脱醉酒状态。因此，石崖茶提取物可用于制备具有解酒作用的药物、食品或保健品。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术及保健品技术领域，更具体地，涉及石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用。
背景技术
“酒文化”是中华民族饮食文化的一个重要组成部分，而长期过量饮酒对人体有较大伤害，比如摄入的酒精及其有毒代谢产物乙醛会间接或直接引发脂肪肝、肝硬化、低血糖、高脂血症、破坏中枢神经系统等各种疾病。因此，寻求有效的解酒剂是人们长期关注的热点之一。
石崖茶(Adinandra nitida)，别名石芽茶，是山茶科杨桐属植物。其中总黄酮含量十分丰富，一般可高达20％以上，比其他茶叶都会高很多；而其咖啡碱含量低，最低可为一般茶叶的五分之一。石崖茶主要产自广西，而广西平乐县的尤为有名，是一种稀有的野生资源，在当地被视为珍品。石崖茶虽然是一种人们喜爱的茶叶，但其并未得到较好的开发利用，特别是石崖茶提取物在制备具有解酒作用的食品或药品中的应用，未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用。
本发明的上述目的是通过以下方案予以实现的：
石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用，石崖茶提取物作为解酒活性物在制备具有解酒作用的药物、食品或保健品中的应用。
优选地，所述石崖茶提取物在制备提高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的药物、食品或保健品中的应用。
石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用，特别是石崖茶提取物在制备预防和/或治疗由饮酒导致的肝脏氧化损伤的药物、食品或保健品中的应用也在本发明的保护范围内。
优选地，所述石崖茶提取物在制备提高还原型谷胱甘肽酶和超氧化物歧化酶活性的药物、食品或保健品中的应用。
优选地，石崖茶提取物在制备降低血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的药物、食品或保健品中的应用。
优选地，所述石崖茶提取物的制备过程为：将石崖茶干燥并粉碎后，按照料液比为1:15～1:30浸泡于质量百分数为60～80％的乙醇溶液中，加热并超声处理，超声结束后分离得到滤液，浓缩后即可得到石崖茶提取物。
优选地，所述料液比为1:20；所述乙醇的质量百分数为70％。
优选地，加热的温度为80℃；超声处理时间为300min。
优选地，上述提取过程可重复多次后合并滤液；所述滤液先经过3000r/min的条件下离心10min后再进行浓缩处理。
优选地，所述石崖茶在60℃下干燥4h。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
石崖茶提取物在作用于醉酒小鼠后，可以显著性降低醉酒小鼠血液中乙醇浓度、缩短醒酒时间；同时，还可以显著性延长小鼠醉酒潜伏期和攀附时间、提高机体肝脏内乙醇脱氢酶活力和乙醛脱氢酶活力，进而有效地使乙醇在机体肝脏内被代谢为乙醛，乙醛再代谢为乙酸，最后转变成二氧化碳和水，排出体外，有效地解酒毒，摆脱醉酒状态。因此，石崖茶提取物可用于制备具有解酒作用的药物、食品或保健品。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
以下实施例中，使用的石崖茶购自广西昭平县昭平镇上岸村象棋山茶叶有限公司；小鼠肝匀浆中乙醇脱氢酶活力水平，采用南京建成的乙醇脱氢酶(ADH)测定试剂盒测定；小鼠肝匀浆中乙醛脱氢酶活力水平，采用南京建成的乙醛脱氢酶(ALDH)测定试剂盒测定。
实施例1石崖茶提取物的制备
将石崖茶放入60℃恒温干燥箱中干燥4h，用中药粉碎机粉碎，过80目筛，得到石崖茶粉末。称取石崖茶粉以1:20的料液比加入70％乙醇溶液，将具塞锥形瓶轻轻振摇，使具塞锥形瓶中的粉末均匀溶解在乙醇溶液中，然后在80℃的温度下，超声波辅助提取30min，第一次提取结束后，所得提取液在3000r/min的条件下离心10min，收集上清液，并将滤渣以1:10的料液比加入70％乙醇溶液，80℃进行第二次超声提取，同样提取30min。此时所得提取液离心，弃去滤渣，所得上清液与第一次提取所得上清液合并。于45℃经旋转蒸发仪减压除去乙醇并浓缩，将浓缩液真空冷冻干燥，获得到石崖茶提取物。
实施例2石崖茶提取物对醉酒小鼠的行为学影响
将50只雄性昆明小鼠，按体重随机分为5组，分别为：空白对照组，醉酒模型对照组，低剂量石崖茶提取物组，中剂量石崖茶提取物组，高剂量石崖茶提取物组，每组10只。试验前禁食不禁水一夜(12h)。空白对照组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的蒸馏水；模型组小鼠和石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的50％(V/V)乙醇。30min后，空白对照组小鼠和模型组小鼠灌胃12mL/(kg·bw)的蒸馏水；石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠按相应剂量(35、105、315mg/(kg·bw))分别灌胃低、中、高剂量的石崖茶提取物。对其进行行为学实验，分为翻正反射实验和攀附实验两部分，观察各组小鼠外观状态和行为的变化，记录醒酒时间、醉酒潜伏期和攀附时间。结果如表1所示。
表1各实验组小鼠行为学实验结果(Mean±S.D.)
注：*为与模型组对比，P＜0.05；**为与模型组对比，P＜0.01。
表1的结果显示，相比醉酒模型对照组，中剂量石崖茶提取物组的醒酒时间显著减少(P＜0.05)，醉酒潜伏期和攀附时间显著延长(P＜0.05)；高剂量石崖茶提取物组的醒酒时间极显著减少(P＜0.01)，醉酒潜伏期和攀附时间极显著延长(P＜0.01)。
根据表1的结果可知，石崖茶提取物能缩短醒酒时间，延长醉酒潜伏期和攀附时间，说明石崖茶提取物能延缓小鼠醉酒，帮助醉酒小鼠恢复正常状态，有一定的解酒效果。
实施例3石崖茶提取物对乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶体外激活作用的影响(体外实验)
采用改良后的瓦勒-霍赫(Valle&Hoch)法，测定乙醇脱氢酶的活性。将1.5mL 32mM的焦磷酸钠缓冲液(pH8.8)，1.0mL 27mMNAD+溶液，0.5mL 11.5％(v/v)乙醇，0.1mL 30mg/mL石崖茶提取物混匀，25℃温育5min后，立即加入0.1mLADH(0.64μg/mL)溶液。对照组用0.1mL蒸馏水代替石崖茶提取物溶液，其余操作相同。立即在340nm波长下，每隔10s读数一次，连续测定5min。乙醇脱氢酶活性计算法以A对时间作图，计算A340/10s的增加值，根据NADH在340nm处的摩尔消光系数为6.22，计算酶活力。ADH的活力以每分钟NADH生成的纳摩尔数来表示。结果如表2所示。
式中：V为总反应液的体积(mL)；
DF为稀释倍数；
6.22为NADH在340nm波长下的毫摩尔消光系数；
0.1为酶液的体积(mL)。
采用改良的Blair&Bodley方法。在测定管中分别加入100mM pH值为9.5的焦磷酸钠缓冲液1.6mL、3.6mM氧化型辅酶I(NAD+)1mL，100mM乙醛溶液0.1mL，10mM吡唑0.1mL，30mg/mL石崖茶提取物溶液0.1mL，混合后，放入30℃的水浴锅中，加盖温育5min。再向测定管中加入18mMALDH 0.1mL，摇匀后立即用分光光度计测定其吸光度(A340)值，以后每隔1min读数1次，直至每分钟吸光度的增大值达到稳定为止。以A值对时间作图，计算A340/1min的增加值，根据NADH在340nm处的摩尔吸光系数为6.22，计算酶活力单位。结果如表6所示。ALDH的活力以每分钟NADH生成的纳摩尔数来表示，计算公式如下：
式中：V为总反应液的体积(mL)；
DF为稀释倍数；
6.22为NADH在340nm波长下的毫摩尔消光系数；
0.1为酶液的体积(mL)。
表2石崖茶提取物对乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的体外激活率结果(Mean±S.D.)
| 组别 | 乙醇脱氢酶体外激活率(％) | 乙醛脱氢酶体外激活率(％) |
| 石崖茶提取物 | 29.2±1.2 | 43.0±1.4 |
根据表2的结果，石崖茶提取物对乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶是产生激活作用的，表明石崖茶提取物能更好地将乙醇转化成乙醛，乙醛再转化成乙酸，乙酸再转化成水和二氧化碳，进而排出体外的，通过体外实验可初步推测其有一定的解酒作用。
实施例4石崖茶提取物对醉酒小鼠肝脏ADH、ALDH活力和乙醇浓度的影响
将50只雄性昆明小鼠，按体重随机分为5组，分别为：空白对照组，醉酒模型对照组，低剂量石崖茶提取物组，中剂量石崖茶提取物组，高剂量石崖茶提取物组，每组10只；试验前禁食不禁水一夜(12h)。空白对照组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的蒸馏水；模型组小鼠和石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的50％(V/V)乙醇。30min后，空白对照组小鼠和模型组小鼠灌胃12mL/(kg·bw)的蒸馏水；石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠按相应剂量(35、105、315mg/(kg·bw))分别灌胃低、中、高剂量的石崖茶提取物。3h后，采取眼眶取血法取血，再断颈椎处死小鼠，摘取其肝脏。检测血清中的乙醇浓度和肝脏组织中的ADH(乙醇脱氢酶)活力和ALDH(乙醛脱氢酶)活力。结果如表3所示。
表3各实验组小鼠肝脏组织中ADH、ALDH活力和乙醇浓度结果(Mean±S.D.)
注：#为与空白组对比，P＜0.05；##为与空白组对比，P＜0.01；*为与模型组对比，P＜0.05；**为与模型组对比，P＜0.01。
表3的结果显示，相比醉酒模型对照组，中剂量石崖茶提取物组的乙醇浓度显著降低(P＜0.05)，ADH活力显著提高(P＜0.05)，ALDH活力极显著提高(P＜0.01)；高剂量石崖茶提取物组的乙醇浓度极显著降低(P＜0.01)，ADH活力和ALDH活力极显著提高(P＜0.01)。
根据表3的结果，石崖茶提取物能促进乙醇的代谢，加速乙醇的分解和排出，从而降低血液中乙醇的含量，可从根本上有效地缓解了醉酒的症状，有一定的解酒效果。
实施例5石崖茶提取物对醉酒小鼠肝脏TG、MDA、GSH和SOD的影响
将50只雄性昆明小鼠，按体重随机分为5组，分别为：空白对照组，醉酒模型对照组，低剂量石崖茶提取物组，中剂量石崖茶提取物组，高剂量石崖茶提取物组，每组10只。试验前禁食不禁水一夜(12h)。空白对照组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的蒸馏水；模型组小鼠和石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的50％(V/V)乙醇。30min后，空白对照组小鼠和模型组小鼠灌胃12mL/(kg·bw)的蒸馏水；石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠按相应剂量(35、105、315mg/(kg·bw))分别灌胃低、中、高剂量的石崖茶提取物。3h后，采取眼眶取血法取血，再断颈椎处死小鼠，摘取其肝脏。检测肝脏组织中的TG(甘油三酯)含量、MDA(丙二醛)含量、GSH(还原型谷胱甘肽)含量和SOD(超氧化物歧化酶)活力。结果如表4所示。
表4各实验组小鼠肝脏组织中TG、MDA、GSH和SOD结果(Mean±S.D.)
注：#为与空白组对比，P＜0.05；##为与空白组对比，P＜0.01；*为与模型组对比，P＜0.05；**为与模型组对比，P＜0.01。
表4的结果显示，相比醉酒模型对照组，中剂量石崖茶提取物组的TG含量显著降低(P＜0.05)，GSH含量显著提高(P＜0.05)，SOD活力显著提高(P＜0.05)；高剂量石崖茶提取物组的TG含量极显著降低(P＜0.01)，MDA含量显著降低(P＜0.05)，GSH含量和SOD活力极显著提高(P＜0.01)。
根据表4的结果，石崖茶提取物可以通过清除自由基，减少自由基的大量生成，起到保护肝脏免受过氧化损伤的作用，有改善肝脏内脂肪沉积的问题，维持了机体的正常，缓解了酒精代谢过程中产生的大量自由基给机体带来的损害。
实施例6石崖茶提取物对醉酒小鼠血清中ALT和AST的影响
将50只雄性昆明小鼠，按体重随机分为5组，分别为：空白对照组，醉酒模型对照组，低剂量石崖茶提取物组，中剂量石崖茶提取物组，高剂量石崖茶提取物组，每组10只。试验前禁食不禁水一夜(12h)。空白对照组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的蒸馏水；模型组小鼠和石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠灌胃10mL/(kg·bw)的50％(V/V)乙醇。30min后，空白对照组小鼠和模型组小鼠灌胃12mL/(kg·bw)的蒸馏水；石崖茶提取物的低、中、高剂量组小鼠按相应剂量(35、105、315mg/(kg·bw))分别灌胃低、中、高剂量的石崖茶提取物。3h后，采取眼眶取血法取血，再断颈椎处死小鼠，摘取其肝脏。检测血清中的ALT(谷丙转氨酶)活力和AST(谷草转氨酶)活力。结果如表5所示。
表5各实验组小鼠血清中ALT和AST结果(Mean±S.D.)
| 组别 | ALT活力(U/L) | AST活力(U/L) |
| 空白对照组 | 31.76±1.63 | 144.09±31.37 |
| 醉酒模型对照组 | 38.20±6.70<sup>##</sup> | 182.73±26.82<sup>##</sup> |
| 低剂量石崖茶提取物组(35mg/kg·b)) | 35.48±0.91 | 174.53±10.36 |
| 中剂量石崖茶提取物组(105mg/kg·bw) | 34.74±0.89<sup>*</sup> | 160.87±9.09<sup>**</sup> |
| 高剂量石崖茶提取物组(315mg/kg·bw) | 32.40±0.70<sup>**</sup> | 145.42±15.60<sup>**</sup> |
注：#为与空白组对比，P＜0.05；##为与空白组对比，P＜0.01；*为与模型组对比，P＜0.05；**为与模型组对比，P＜0.01。
表5的结果显示，相比醉酒模型对照组，中剂量石崖茶提取物组的ALT活力显著降低(P＜0.05)，AST活力极显著降低(P＜0.01)；高剂量石崖茶提取物组的ALT活力和AST活力极显著降低(P＜0.01)。根据表5的结果，石崖茶提取物能降低肝细胞受损。
综上所述，研究数据充分表明，石崖茶提取物具有解酒作用，具有一定的开发应用前景。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (6)
1.石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用，其特征在于，石崖茶提取物作为唯一活性物在制备具有解酒作用的药物、食品或保健品中的应用；
所述石崖茶提取物的制备过程为：将石崖茶干燥并粉碎后，按照料液比为1:15～1:30浸泡于质量百分数为60～80%的乙醇溶液中，加热并超声处理，超声结束后分离得到滤液，浓缩后即得到石崖茶提取物。
2.石崖茶提取物在制备解酒产品中的应用，其特征在于，石崖茶提取物作为唯一活性物在制备预防和/或治疗由饮酒导致的肝脏氧化损伤的药物中的应用；
所述石崖茶提取物的制备过程为：将石崖茶干燥并粉碎后，按照料液比为1:15～1:30浸泡于质量百分数为60～80%的乙醇溶液中，加热并超声处理，超声结束后分离得到滤液，浓缩后即得到石崖茶提取物。
3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述料液比为1:20；所述乙醇的质量百分数为70%。
4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，加热的温度为80℃；超声处理时间为300min。
5.根据权利要求1所述应用，其特征在于，上述提取过程重复多次后合并滤液；所述分离过程为在3000r/min的条件下离心10 min。
6.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述石崖茶在60℃下干燥4h。
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