CN109310597B

CN109310597B - 用于促进人毛发生长和/或抑制或延迟毛发脱落的化合物以及用于此类用途的组合物

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Publication number: CN109310597B
Application number: CN201780030965.7A
Authority: CN
Inventors: 拉尔夫·保斯; 杰里米·谢雷特; 汉斯·哈特; S·巴罗尼
Original assignee: Giuliani SpA
Current assignee: Giuliani SpA
Priority date: 2016-05-19
Filing date: 2017-05-19
Publication date: 2021-12-14
Anticipated expiration: 2037-05-19
Also published as: JP7034944B2; JP2019519502A; ES2851899T3; EP3458020B1; KR102452350B1; RU2741021C2; UA124236C2; MD3458020T2; SG10202011357RA; SG11201810318RA; BR112018073626B1; PT3458020T; EP3458020A1; HUE053265T2; MA45043A; MX2018013763A; US20190216696A1; ITUA20163604A1; RU2018144755A; AU2017267278B2

Abstract

本发明涉及通式(I)的化合物用于促进人头皮中的毛发生长和/或抑制或延迟人头皮中的毛发脱落的用途，以及适用于此类用途的化妆品组合物和药物组合物：

其中：R₁和R₂一起形成双键，或者R₁和R₂一起形成环丙基基团；R₃、R₄相同或不同，并且独立地选自氢、甲基，或者R₃和R₄一起形成双键；R₅、R₆相同或不同，并且独立地选自氢、甲基；或者R₅和R₆一起形成双键，或者R₅和R₆一起形成环丙基基团；R₇＝甲基或乙基；R₈＝氢或甲基。

Description

用于促进人毛发生长和/或抑制或延迟毛发脱落的化合物以及用于此类用途的组合物

发明领域

本发明涉及化合物促进人毛发生长和/或抑制或延迟毛发脱落的用途，以及包含这些化合物作为活性成分的用于此类用途的组合物。

现有技术

术语檀香(sandalwood)是指来自檀香属(Santalum)的树木的一类木材。檀香精油通常通过蒸汽蒸馏来自成熟的檀香树的木材来提取，并是香水的众所周知的有价值的成分。

在化妆品领域的多种不同用途中，主要与其有价值的香味有关，檀香油也是关于多种不同用途的药用和经验制剂的专利出版物的主题，包括毛发脱落和头皮屑的一般性治疗，诸如例如专利出版物CN1075250A描述了一种实际上被定义为中药的药物提取物，包括与辛夷的花蕾、玫瑰花、甘草根、粉丹皮、山萘(kaempferia)、丁香、细辛(herba asari)、人参和白芷 (angelica dahurica)的根混合的檀香。

CN102000293和CN103735443描述了类似的中药，前者由檀香木、当归根、山萘(rhizoma kaempferiae)子、滑石、零陵香、青黛和甘松香的混合物制成，后者由檀香木、制首乌、松针和丹参(salvia miltiorrhiza)的混合物制成，以施加于毛发。

对于基本类似的一般性用途，印度专利出版物IN00177MU2002A描述了一种用于防止毛发脱落的组合物，该组合物包含与椰子油、桉油、丁香油、薰衣草油和迷迭香油混合的檀香油。

对于这些经验制剂，混合在最终油中的每种成分的具体作用在这些出版物中没有定义，因此混合物中成分檀香油的具体功能，无论是作为香料还是可能地不同于香料，都没有确定。

无论如何，檀香油的主要成分是α-檀香醇和β-檀香醇，它们是基本上显示倍半萜型链的醇。α-檀香醇的结构式为：

而β-檀香醇的结构式为：

其特征分别在于末端三环庚-3-基或二环庚-2-基基团。

另一方面，被称为sandalore的化合物是一种合成气味剂，其具有类似檀香的香味，并因此用在香水、润肤剂和皮肤清洁剂中，作为模仿檀香香味的较便宜的成分。sandalore以及结构相似的命名为婆罗门檀香 (brahmanol)的化合物，是化学结构与天然檀香油的所述成分(即α-檀香醇和β-檀香醇)非常不同的醇。

事实上，具有下式的sandalore或檀香戊醇：

和具有下式的婆罗门檀香或檀香环戊烷：

是合成分子，二者的特征都在于末端环戊烯-1-基基团，且不具有倍半萜链。它们也是关于化妆品制剂诸如香波和护发素中毛发的处理的专利出版物的主题，然而仅仅用作香料，实际上是为了利用它们模仿有价值的檀香香味的特性的特定目的。例如，EP1561476描述了用于改善除臭效果的除臭组合物，其中，在大量物质和大量用途中，sandalore和婆罗门檀香的用途也被描述为护发产品诸如香波、护发素、染发液(hair rinse)、染发剂、烫发剂(permanent-wave agent)、发蜡、喷发胶和摩丝中的除臭香料。在 EP1561476中用作香料的天然来源的香料材料包括檀香油，且sandalore和婆罗门檀香被定义为上述材料的商品名，因此意味着根据该文件，由天然提取物及其合成替代品提供的香料之间没有区别。

EP1346720涉及一种具有类似范围的用于毛发染色的除臭组合物。在这些出版物中没有描述，甚至没有一般性地描述用于治疗毛发脱落或用于促进毛发生长的这类合成气味剂。

根据Busse等人,A Synthetic Sandalwood Odorant Induces Wound-HealingProcesses in Human Keratinocytes via the Olfactory Receptor OR2AT4,Journal ofInvestigative Dermatology,2014,134:2823–2832， sandalore和婆罗门檀香已被确定为皮肤嗅觉受体OR2AT4的激动剂，并被发现在培养的人角质细胞中诱导Ca²⁺信号。在体外伤口划痕测定中，用 sandalore长期刺激角质细胞积极影响细胞增殖、迁移和角质细胞单层的再生，且sandalore刺激促进人皮肤器官培养物中表皮伤口的愈合。

根据Busse等人，有证据表明，天然檀香油和其他合成檀香气味剂不是嗅觉受体OR2AT4的激动剂，并且不表现出相同的表皮伤口愈合效果。

嗅觉受体(OR)表达不局限于鼻上皮，而是，它也存在于不同的人体组织中，参见Feldmesser E,Olender T,Khen M,Yanai I,Ophir R,Lancet D., Widespread ectopicexpression of olfactory receptor genes.BMC Genomics. 2006May 22；7:121；ZhangX,Firestein S.,Nose thyself:individuality in the human olfactorygenome.Genome Biol.2007；8(11):230；Flegel C,Manteniotis S,Osthold S,Hatt H,Gisselmann G.,Expression profile of ectopic olfactory receptors determined bydeep sequencing.PLoS One.2013；8(2):55368。许多研究已经描述了OR在多种人细胞类型中的生理作用(Kang N,Koo J. Olfactory receptors in non-chemosensorytissues.BMB Rep.2012 Nov；45(11):612-22)，所述人细胞类型诸如精子(Spehr M,Gisselmann G, Poplawski A,Riffell JA,Wetzel CH,Zimmer RK,HattH.Identification of a testicular odorant receptor mediating human spermchemotaxis.Science.2003 Mar 28；299(5615):2054-8；Veitinger T,Riffell JR et al,Chemosensory Ca2+ dynamics correlate with diverse behavioural phenotypes inhuman sperm.J Biol Chem.2011May 13；286(19):17311-25)、前列腺上皮细胞(NeuhausEM, Zhang W,Gelis L,Deng Y,Noldus J,Hatt H.Activation of an OlfactoryReceptor Inhibits Proliferation of Prostate Cancer Cells.J Biol Chem. 2009；284(24):16218-16225)、和肠嗜铬细胞(Braun T,Voland P,Kunz L,Prinz C,GratzlM.Enterochromaffin cells of the human gut:sensors for spices and odorants.Gastroenterology.2007May；132(5):1890-901)。

发明概述

根据本发明，已令人惊讶地发现，通过使用通式(I)的化合物，可以促进人头皮中的毛发生长，并且可以抑制或延迟人头皮中的毛发脱落：

其中：

R₁和R₂一起形成双键，或者R₁和R₂一起形成环丙基基团；

R₃、R₄相同或不同，并且独立地选自氢、甲基，或者R₃和R₄一起形成双键；

R₅、R₆相同或不同，并且独立地选自氢、甲基；

或者R₅和R₆一起形成双键，或者R₅和R₆一起形成环丙基基团；

R₇＝甲基或乙基；

R₈＝氢或甲基。

在根据本发明的新用途范围内，优选的式(I)的化合物，包括前述檀香戊醇(化合物1)和檀香环戊烷(化合物5)，在下表中报告：

本发明的一个目的也是适于在人头皮上局部施用的用于促进毛发生长和/或抑制或延迟毛发脱落的组合物，其中一种或更多种式(I)的化合物用作活性成分，优选地量为按重量(w/w％)计0.1％和10％之间，所述式(I)的化合物与适于局部施用的成分一起配制。

本发明的组合物适用于促进人头皮中的毛发生长和/或治疗人头皮中的毛发脱落的化妆品和治疗用途两者，其中至少一种通式(I)的化合物作为活性成分被包含。

发明详述

为了最好地理解本发明的特征和优点，下面描述本发明的非限制性实用实施例。组分根据INCI命名法命名。

实施例

实施例1

洗液

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

变性乙醇........................................15-35

PEG-40氢化蓖麻油................................0.5-3

檀香戊醇........................................0.1-10.0

乙氧基乙二醇....................................0.25-1.0

适量加水至100g

实施例2

洗发前发膜(PRE-SHAMPOO MASK)

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

甘油............................................1.5-4.5

丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物...................1.0-2.0

檀香戊醇........................................0.1-10.0

环戊硅氧烷......................................1.0-2.0

苯氧乙醇........................................0.25-0.75

香精............................................0.5-1.0

辛乙二醇........................................0.25-0.75

苯基三甲硅油....................................0.25-0.75

聚硅氧烷季铵盐-17...............................0.1-0.4

二甲硅油........................................0.1-0.4

月桂醇聚醚-4....................................0.1-0.4

丝胶蛋白........................................0.1-0.4

生育酚乙酸酯....................................0.1-0.3

月桂醇聚醚-23...................................0.1-0.3

山梨酸钾........................................0.05-0.15

甘草酸铵........................................0.05-0.15

柠檬酸..........................................0.04-0.08

乙二胺四乙酸二钠................................0.025-0.075

乙基己基甲氧基肉桂酸盐..........................0.025-0.075

聚二甲基硅氧烷醇(dimethiconol)..................0.025-0.075

适量加水至100g

实施例3

强化定型凝胶

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

檀香戊醇........................................0.1-10.0

PEG-40氢化蓖麻油................................1-3

香精............................................0.5-1.5

聚丙烯酸酯-14...................................0.5-1.5

羟丙基瓜尔胶....................................0.5-1.5

氢化淀粉水解物..................................0.5-1.5

羟甲基甘氨酸钠..................................0.25-1.0

二苯甲酮-4......................................0.15-0.45

乙二胺四乙酸二钠................................0.05-0.15

聚季铵盐-11.....................................0.0025-0.025

适量加水至100g

实施例4

强化护发素

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

鲸蜡硬脂醇......................................15-25

硬脂酸甘油酯....................................15-25

二甲硅油........................................10-20

C12-13烷基乳酸酯................................5-15

西曲氯铵........................................2.5

PEG-100硬脂酸酯.................................2.5-7.5

环戊硅氧烷......................................2-6

木糖醇..........................................2-6

檀香戊醇........................................0.1-10.0

羟乙基纤维素....................................1-3

聚二甲基硅氧烷醇................................1-3

苯甲醇..........................................0.1-1.0

泛醇............................................1-3

香精............................................1-2

双异丁基PEG/PPG-20/35/氨端聚二甲基硅氧烷共聚物..0.5-1.0

植烷三醇........................................0.5-1.0

苯甲酸钠........................................0.5-1.0

脱氢乙酸钠......................................0.5-1.0

鲸蜡基乙基己酸酯................................0.5-1.0

丁二醇..........................................0.5-1.0

乙二胺四乙酸二钠................................0.2-0.6

聚山梨醇酯80....................................0.2-0.6

丝胶蛋白........................................0.2-0.6

脱氢乙酸........................................0.1-0.3

酵母多糖........................................0.1-0.3

葡糖酸内酯......................................0.05-0.15

适量加水至100g

实施例5

修护香波

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

月桂醇聚醚硫酸酯镁..............................5-10

月桂酰肌氨酸钠..................................2-3

檀香戊醇........................................0.1-10.0

月桂醇聚醚磺基丁二酸二钠........................1.5-2.5

PEG-200氢化棕榈酸甘油酯.........................1-2

椰油酰胺mipa....................................0.5-1.5

香精............................................0.5-1

乙二醇二硬脂酸酯................................0.5-1

PEG-7椰油酸甘油酯...............................0.25-0.75

甜菜碱..........................................0.25-0.75

月桂基甲基葡萄糖聚醚-10羟丙基二甲基氯化铵(lauryl methyl gluceth-10hydroxypropyldimonium chloride).........................0.25-0.75

月桂醇聚醚-7....................................0.25-0.75

聚季铵盐-10.....................................0.25-0.75

羟甲基甘氨酸钠..................................0.25-0.75

十一碳烯酰基水解小麦蛋白钾......................0.2-0.4

泛醇............................................0.1-0.3

乙二胺四乙酸四钠................................0.1-0.3

苯基三甲硅油....................................0.05-0.15

聚硅氧烷季铵盐-17...............................0.05-0.12

月桂醇聚醚-4....................................0.05-0.12

月桂醇聚醚-23...................................0.025-0.075

椰油酰两性基乙酸钠..............................0.025-0.075

BHA.............................................0.005-0.015

适量加水至100g

实施例6

摩丝

组分(INCI名称)..................................量(w/w％)

乙醇............................................10-20

檀香戊醇........................................0.1-10.0

PEG-40氢化蓖麻油................................1-2

甘油............................................1-1.5

橄榄油酰两性基乙酸钠............................0.5-1.5

香精............................................0.5-1

生育酚..........................................0.05-0.15

乙二胺四乙酸二钠................................0.025-0.075

聚季铵盐-16.....................................0.025-0.075

焦亚硫酸钾......................................0.01-0.03

适量加水至100g

附图简述

参考附图的图1至5，

图1显示了从人头皮皮肤组织和毛囊(HF)样品拍摄的免疫荧光图像。

图2示出了与毛干伸长相关的图。

图3示出了与毛发生长周期相关的、特别是关于过渡期(catagen)阶段的图。

图4显示了与毛发基质角质细胞增殖和凋亡相关的图。

图5显示了与促过渡期生长因子TGFβ2相关的图。

图1至图5涉及在下面的实验研究中获得的结果，并因此在下面的描述中详细描述。

实验研究

从式(I)的化合物中选择根据本发明的所述化合物1，即檀香戊醇，以测试如下的实验目的。檀香戊醇在图2至 5的图中被命名为Sandalore。

研究设计

作为第一步，标准免疫荧光技术被用于来自健康供体的人头皮皮肤组织切片，以评估OR2AT4是否在人头皮毛囊(HF)中表达。

然后，为了评估OR2AT4的刺激是否会影响人的毛发生长，用浓度为 500μM的檀香戊醇作为激动剂处理显微切割的HF，并进行毛干伸长测量 (参见Philpott等人，1990)。此外，进行了激酶测定，以鉴定哪些信号通路参与檀香戊醇对OR2AT4的特异性刺激。

随后，为了证实檀香戊醇的生长期(anagen)的延长作用是特异性的，使用作为激动剂的檀香戊醇和特异性拮抗剂Phenirat(苯氧乙基异丁酸酯) (一种合成香料)，进行HF器官培养，参见上面提到的Busse等人的参考资料。

将HF用媒介物、檀香戊醇、Phenirat或檀香戊醇和Phenirat的混合物处理。为了分析毛发周期的改变，进行Ki67/TUNEL并被用于评估毛发周期评分和毛发基质角质细胞增殖和凋亡。

此外，关于上述相同的化合物，研究了TGFβ2，一种强效的过渡期诱导剂。

为了下调人HF中OR2AT4的表达，并研究其在毛发生长中的作用，用OR2AT4-siRNA转染HF。

采用了qRT-PCR和(免疫)组织形态计量学分析以证实显微切割的HF 中siRNA介导的OR2AT4基因和蛋白的成功下调。最后，为了研究OR2AT4 的敲低(knockdown)如何影响人毛发生长，Ki67/TUNEL免疫荧光被用于定量毛发周期评分和毛发基质角质细胞增殖和凋亡。为了检查敲低是否会影响过渡期诱导，通过免疫荧光分析TGFβ2的表达。

材料与方法

组织样本

颞部和枕部正常人头皮皮肤取自在知情同意和伦理批准后经历常规整容手术的健康供体(年龄范围在38–69岁)。

免疫荧光

用低温恒温器对OCT包埋的样品进行切片(6μm厚度)。将切片固定在4％多聚甲醛中，与10％山羊血清(对于OR2AT4)或5％山羊血清+0,3％ Tritton X-100(对于裂解的半胱天冬酶3)一起预孵育，并与相应的一抗(对于OR2AT4为1/100，且对于裂解的半胱天冬酶3为1/400)一起在4℃孵育过夜。在室温进行二抗孵育持续45分钟。用DAPI(1μg/mL)进行复染色以可视化细胞核。对于TGFb2，将样品固定在丙酮中，且内源性过氧化物酶被3％的H₂O₂阻断。该步骤之后是亲和素-生物素阻断步骤和与TNB缓冲液(Tris HCl+NaCl+酪蛋白)的预孵育。将相应的一抗在4℃孵育过夜(对于 TGFb2为1/1000)。在室温进行二抗孵育持续45分钟，随后使用酪胺信号放大试剂盒(Perkin Elmer)。用DAPI进行复染色以可视化细胞核。为了染色凋亡细胞和增殖细胞，我们按照制造商的方案使用了apoptag试剂盒 (MerckMilipore)，然后是Ki67染色。在TdT酶步骤后，将一抗孵育过夜 (Ki67,1/20)。在apoptag试剂盒的荧光标记的抗地高辛步骤 (fluorescent-labelled anti-Digoxigenin step)之后，将二抗在室温孵育持续 45分钟。用DAPI进行复染色以可视化细胞核。通过省略一抗进行阴性对照。使用Keyence荧光显微镜(Osaka,Japan)拍摄图像，在整个成像过程中保持恒定设置的曝光时间，用于进一步分析。

HF器官培养

在整容手术后获得人头皮样品，并在同一天用于显微切割人生长期VI 头皮HF。将显微切割的人头皮HF在37℃用5％CO₂在补充有2mM的 L-谷氨酰胺(Gibco)、10ng/ml氢化可的松(Sigma-Aldrich)、10μg/ml胰岛素 (Sigma-Aldrich)和1％青霉素/链霉素混合物(Gibco)(WEM)的William E培养基(Gibco,Life technologies)的最小培养基中培养，如前所述(Philpott, 1990；Kloepper,2010；Langan等人,2015)。

1)用OR2AT4檀香戊醇(激动剂)和Phenirat(拮抗剂)化学刺激人显微切割的HF

孵育24小时后，更换WEM培养基，并根据实验条件用相应的物质处理HF 6天。将HF用媒介物(0.1％DMSO)、檀香戊醇(500μM)、Phenirat(与激动剂的比为1:1)或檀香戊醇+Phenirat的混合物处理。

在檀香戊醇之前30分钟加入Phenirat。每天使用倒置双目显微镜 (Philpott等人,1990)测量毛干伸长，并且每隔一天更换培养基。然后将HF 包埋在低温基质(cryomatrix)(Fisher Scientific)中，并在液氮中快速冷冻。用低温恒温器切割厚度为6μm的切片，并储存在-80℃用于进一步免疫组织化学分析。

定量(免疫)组织形态计量学

如前所述(Bertolini等人,2014)，使用NIH IMAGE软件(NIH,Bethesda, MD,USA)通过定量(免疫)组织形态计量学在良好界定的参考区域评估染色强度。

统计分析

所有数据表示为平均值±SEM，并且当比较多于两组时，通过单因素方差分析或Kruskall Wallis检验进行分析，并且当比较檀香戊醇处理与媒介物时，通过学生t检验或Mann-Whitney检验进行分析(Graph Pad Prism 6, GraphPad Software,San Diego,CA,USA)。

结果

参考附图的图1至图5描述了结果。

1)人HF表达嗅觉受体2AT4

首先，研究了HF中嗅觉受体2AT4(OR2AT4)的存在。OR2AT4在人头皮生长期HF的球上(suprabulbar)外根鞘(ORS)角质细胞中观察到，如图 1中的免疫荧光所示。图1中的图片A)至D)表示人头皮皮肤中的HF(参见图片A和相应的放大图)和来自三个不同供体(n＝3)的显微切割的HF(参见图片B-D和相应的放大图)中的OR2AT4免疫荧光。CTS代表结缔组织鞘，DP代表真皮乳头，HM代表毛发基质，IRS代表内根鞘，ORS代表外根鞘， HS代表毛干，HB代表毛球，HF代表毛囊。虚线描绘了IRS(内根鞘)、 ORS(外根鞘)和DP(真皮乳头)。

图1显示，OR2AT4在生长期头皮HF的球上ORS角质细胞、以及在显微切割的生长期HF中的球上和球ORS、和毛发基质尖端角质细胞中表达。

显微切割的生长期HF(Philpott模型)显示了毛球中，即在ORS和毛发基质(HM)尖端中的OR2AT4细胞，参见图1B，以及特征性的球上滤泡内表达，参见图1D。

2)由檀香戊醇对OR2AT4的特异性刺激促进了毛干伸长并抑制凋亡信号传导通路

为了检验OR2AT4的激活是否能够影响人HF的毛发周期，用潜在激动剂檀香戊醇特异性刺激显微切割的人HF。檀香戊醇处理的效果通过测量与媒介物相比的毛干伸长来评估。

在培养的显微切割的HF中测量HF伸长。平均值±SEM，每个供体n＝ 18HF，2个供体，学生t检验，Graph Pad Prism 6。尽管个体间存在差异，结果显示，浓度为500μM的檀香戊醇刺激源自两个供体的培养的显微切割的HF的毛干伸长，如图2的图所示，其报告了与媒介物相比sandalore 的伸长％与培养天数的关系。

3)通过檀香戊醇激活OR2AT4显著延迟过渡期的诱导并减少人毛发基质角质细胞的凋亡

为了研究通过檀香戊醇刺激OR2AT4对毛发生长的影响的特异性，将显微切割的HF与檀香戊醇和/或Phenirat一起培养，并如前所述进行毛发周期分期分析(Kloepper,2010；Langan等人,2015)。培养6天后，在处理的HF和媒介物HF两者中测量毛发周期分数。来自3位患者的N＝16-24HF，平均值±SEM，Kruskal Wallis检验和Dunn的多重比较检验，作为事后检验，ns，Mann-Whitney检验，#p<0.05，Graph Pad Prism 6。

获得的结果表明，培养6天后，与媒介物相比，通过单独的浓度为500 μM的檀香戊醇对OR2AT4的特异性刺激延迟了处理的HF中的过渡期诱导，如图3的图所示。相反，与媒介物相比，单独的对比参考Phenirat和与Phenirat一起施用的檀香戊醇混合物并没有延长处理的HF的生长期。数据表明，通过檀香戊醇刺激OR2AT4促进过渡期延迟，而当使用Phenirat时，这些作用被OR2AT4抑制抵消。

总而言之，图3显示，本发明的化合物显著延迟过渡期的进展。

4)檀香戊醇显著降低毛发基质角质细胞凋亡

参考图4的证据，为了研究檀香戊醇是否影响毛发基质角质细胞的增殖和凋亡，进行了Ki67/TUNEL染色。在处理的HF和媒介物HF的毛发基质中计数增殖的(图4A的图)和凋亡的(图4B的图)毛发基质角质细胞。 Ki67/TUNEL的代表性图片显示在图4C到4E中。平均值±SEM，来自3 位患者的n＝18-21HF，Kruskal-Wallis检验和Dunn的多重比较检验，作为事后检验，**p<0.01，***p<0.001，Mann-Whitney检验#p<0.05，Graph Pad Prism 6。

培养6天后，用单独的檀香戊醇或Phenirat处理的HF中毛发基质角质细胞增殖没有改变。然而，OR2AT4的特异性拮抗剂Phenirat与檀香戊醇的共施用导致毛发基质角质细胞增殖显著降低，如图4A所示。

檀香戊醇处理显著降低了毛发基质角质细胞凋亡，而檀香戊醇 +Phenirat的共施用显著增加了毛发基质角质细胞凋亡，如图4B所示。

5)通过檀香戊醇对OR2AT4的特异性刺激显著降低促过渡期生长因子TGFβ2

参考图5的证据，为了进一步研究OR激动剂和拮抗剂如何影响HF 生长，检查了近端OR中在生理性人HF循环期间相关促过渡期生长因子即TGFβ2的表达(Soma等人，2002)。用檀香戊醇处理6天后，在蛋白质水平观察到TGFβ2表达显著下降，而用Phenirat阻断受体则没有检测到变化。在这种情况下，檀香戊醇与Phenirat的共施用显示了与由单独施用檀香戊醇获得的结果相当的结果，如图5A的图所示。在处理的HF和媒介物HF的ORS角质细胞中测量TGFβ2表达。

TGFβ2免疫荧光的相应代表性图片显示在图5B(媒介物)、5C (sandalore)、5D(sandalore+Phenirat)中。

TGFβ2的表达使用Image J定量。平均值±SEM，来自2位患者的 n＝14-22HF，Kruskal-Wallis和Dunn的多重比较检验作为事后检验，*p<0.05， ***p<0.001，和Mann-Whitney检验，ns.Graph Pad Prism 6。

结论

上述结果总体上显示，OR2AT4是毛发生长调节剂，且本发明的化合物是生长期延长剂(anagen-prolonging agent)。通过本发明的化合物对 OR2AT4的刺激增加了毛干伸长并延迟了过渡期阶段转换，而用OR2AT4 抑制剂Phenirat未获得这种效果，并且当本发明的化合物与Phenirat共施用时，这种效果基本上被抵消。

通过本发明的化合物对OR2AT4的刺激调节凋亡信号传导通路，并显著降低人毛发基质角质细胞的凋亡，而用Phenirat未获得这种效果，并且当本发明的化合物与Phenirat共施用时，这种效果基本上被抵消。

通过本发明的化合物对OR2AT4的刺激显著降低了相关的促过渡期生长因子TGFβ2，而用Phenirat未获得这种效果。

总的来说，实验证据表明，如上定义的式(I)的化合物可有效地用于促进人头皮中的毛发生长和/或抑制或延迟人头皮中的毛发脱落。

Claims

1.通式(I)的化合物用于促进人头皮中的毛发生长的化妆品用途：

其中：

R₁和R₂一起形成双键，或者R₁和R₂一起形成环丙基基团；

R₅、R₆相同或不同，并且独立地选自氢、甲基；

R₇＝甲基或乙基；

R₈＝氢或甲基；

其中所述通式(I)的化合物选自由以下组成的组：3-甲基-5-(2,2,3-三甲基环戊-3-烯-1-基)戊-2-醇和2-甲基-4-(2,2,3-三甲基-3-环戊烯-1-基)丁醇；

其中所述用途用于非治疗目的。

2.根据权利要求1所述的化妆品用途，其中所述式(I)的化合物被配制在用于局部施用的组合物中。

3.根据权利要求2所述的化妆品用途，其特征在于，所述组合物包含量为按重量(w/w％)计0.1％和10％之间的至少一种式(I)的化合物，所述式(I)的化合物与适于局部施用的成分一起配制。

4.通式(I)的化合物在制备用于治疗人头皮中的毛发脱落的药物中的用途：

其中：

R₁和R₂一起形成双键，或者R₁和R₂一起形成环丙基基团；

R₅、R₆相同或不同，并且独立地选自氢、甲基；

R₇＝甲基或乙基；

R₈＝氢或甲基，

其中所述通式(I)的化合物选自由以下组成的组：3-甲基-5-(2,2,3-三甲基环戊-3-烯-1-基)戊-2-醇和2-甲基-4-(2,2,3-三甲基-3-环戊烯-1-基)丁醇。

5.包含权利要求4中定义的化合物作为活性成分的药物组合物在制备用于治疗人头皮中的毛发脱落的药物中的用途。

6.根据权利要求5所述的用途，其中所述药物组合物包含量为按重量(w/w％)计0.1％和10％之间的至少一种式(I)的化合物作为活性成分，所述式(I)的化合物与适于局部施用的成分一起配制。

7.权利要求1中定义的化合物在制备用于促进人头皮中的毛发生长和/或抑制或延迟人头皮中的毛发脱落的药物中的用途。