CN109307777A - 一种适用于葡萄糖/乳酸分析仪用的血糖校准液配置方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种适用于葡萄糖/乳酸分析仪用的血糖校准液配置方法，包括如下步骤：装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中，把所述量杯置于磁力搅拌器上，让搅拌转子匀速转动起来，其中，所述5L磷酸盐缓冲稀释液中各化学品的添加量浓度为：磷酸二氢钾添加量0.055％，二水合磷酸氢二钠添加量浓度0.237％—0.238％，氯化钾添加量0.15％，硝酸钠添加量浓度为0.019％—0.020％，二水合依地酸二钠添加量浓度为0.038％—0.040％，TritonX‑100的添加量为0.005％—0.0055％，Kathon WT的添加量为0.05％—0.06％，并且用超纯水做溶剂。本发明的方法，更加精确的实现校准液对血糖仪等仪器的测试所需，便于生产中简单，直观的配置。
Description
技术领域
本发明涉及医疗器械体外诊断试剂。
背景技术
12mmol/L血糖校准液是生物化学研究中使用最为广泛的一种校准液，主要成分为无水葡萄糖、Na2HPO4.2H2O、KH2PO4、NaNO3、KCL、K40杀菌剂等，余量为超纯水，作为体外诊断试剂所用12mmol/L校准液，所研究其技术指标主要涉及的是准确度和精密度，再根据相关技术，发现准确度在±10％，精密度在≤2.00％范围的校准液符合市面多种款型的POCT血糖分析仪使用，并且测试效果优于一些血糖仪配套的试剂。
市面上血糖仪的12mmol/L的血糖校准液一般采用溶剂为注射用水作为溶剂，注射用水的PH值为5.0-7.0，电导率为1.3us/cm该方法生产的校准液由于电导率的偏大，在临床上不良反应较多，并且稳定性不好，而我们配置的校准液所用的水质的技术指标PH值6.0-7.0，水质更靠近中性，电导率为0.65us/cm，避免了微生物影响校准液的质量。同时配置校准液所用到的稀释液中含有5倍的K40，保证了校准液长期稳定性的可能，用于仪器上测试血液的结果相当乐观。
该方法所配置的校准液技术指标准确性为±5％，精密度≤1.5％，仪器检测时不易受空气环境的影响，检测结果更准确可靠，所以对于浓缩液中各化学原材料的添加量经过大量的实验验证数据，得出适用于市面上一些全自动血糖/乳酸分析仪测试所需要的校准液。
发明内容
本发明涉及主要一种适用于葡萄糖/乳酸分析仪用的血糖校准液配置方法，包括如下步骤：
(1)装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中，把所述量杯置于磁力搅拌器上，让搅拌转子匀速转动起来，其中，所述5L磷酸盐缓冲稀释液中各化学品的添加量浓度为：磷酸二氢钾添加量0.055％，二水合磷酸氢二钠添加量浓度0.237％—0.238％，氯化钾添加量0.15％，硝酸钠添加量浓度为0.019％—0.020％，二水合依地酸二钠添加量浓度为0.038％—0.040％，TritonX-100的添加量为0.005％—0.0055％，Kathon WT的添加量为0.05％—0.06％，并且用超纯水做溶剂；其中，TritonX-100即曲拉通-100，分子式：(C14H22O(C2H4O)n)，是一种非离子表面活性剂，在混合溶液中主要起增溶效果，添加量为0.005％—0.0055％，Kathon WT即卡松，添加量为0.05％—0.06％，是一种高效低毒的杀菌剂，其主要成分为异噻唑啉酮组成的混合物
(2)然后缓慢向5L量杯中加入108.09gβ-D(+)的无水葡萄糖，放于磁力搅拌器上不断搅拌30min；
(3)等上述化学品完全溶解后，然后再向所述5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处；
(4)从所述步骤(3)中移取500ml的混合溶液加入新的5L量杯中，然后加磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，放于磁力搅拌器上不断搅拌30min，然后静置30min；
(5)再次移取所述步骤(4)中的100ml磷酸盐缓冲稀释液加入新的5L量杯中，继续缓慢加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌30min，然后静置30min；
(6)溶解均匀后，即得灌装前溶液，在过滤器中放入三蒸水中浸泡过的0.22um的醋酸纤维滤膜，过滤三次，即为需要的校准液；
(7)若溶液是澄清透明状，则取样检测，连做三批，开始测试其准确性，若有沉淀和浑浊现象则祛除，重新配置；
(8)测试OK合格后，再用所述的12mmol/L校准液进行上机验证试验，用葡萄糖/乳酸分析仪及血糖分析仪对血样进行校准测试并与标准校准品做对比及一致性临床验证。
优选地，溶解所述的磷酸盐缓冲稀释液的步骤为，预先准备溶剂体积的60％预先溶解。
优选地，添加顺序为先添加TritonX-100后添加Kathon WT。
本发明的配置方法具备以下优点：
1、更加精确的实现校准液对血糖仪等仪器的测试所需；
2、便于生产中简单，直观的配置；
3、本发明采用低转速搅拌溶解法，配置后搅拌30min，无水葡萄糖属于亲水物质，易于溶解，不影响溶液的均一性，避免高转速导致产生泡沫和气泡，低转速节能，适合工业生产要求；
4、加入5倍含量的Kathon WT，易于控制校准液的稳定性，是测试结果更加准确；
5、使用超纯水作为磷酸盐缓冲稀释液的溶剂，提高了配置校准液的准确性和精密性。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。可以理解的是，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
本发明的阶段目标：
第一阶段设计含有5倍Kathon WT杀菌剂的稀释液技术配方；
第二阶段配置12mmol/L的血糖校准液；
第三阶段依据配方建立成熟的工艺流程；
第四阶段利用血糖仪等仪器进行准确性测试，精密度测试，重复试验及临床校准一致性试验，并正式投入生产。
最终目的：制备一种全血样本检测用的12mmol/L血糖校准液的方法。
创新点：
1、配置过程不会产生大量泡沫；
2、12mmol/L校准液配置工艺简单操作，效率提高很多，易于控制其准确度和精密度；
3、重复性在±1％之内；
4、该12mmol/L校准液稳定性良好，不易受空气影响；
5、可以作为多种品牌的POCT血糖仪的校准，校准效果佳，同时节省总体试剂的使用成本
主要内容：
1、此研究的浓缩液所具备的附件如下：
(1)分析天平(0.0001g)
(1)磁力搅拌器；
(2)数字温控器；
(3)PH计；
(4)电导率仪；
(5)5L大量杯；
(6)配置的磷酸盐缓冲稀释液放置于一个100ml的小烧杯中；
(7)PH计和电导率仪校准后把它们的电极插入溶液中；
(8)分别按下PH计和电导率仪的“读数”按钮；
(9)等待1min-2min，记录下PH计上的读数和电导率上的读数；
(10)用配置的缓冲稀释液，配置120mmol/L的10倍血糖校准液，再
次稀释10倍后得到12mmol/L的校准液，并再次稀释50倍，得到样品，
与标准品的校准液作技术对比和临床测试分析。
2、关键技术要领：
(1)5L磷酸盐缓冲稀释液中各化学品的添加量浓度及添加量，磷酸二氢钾添加量0.055％，二水合磷酸氢二钠添加量浓度0.237％—0.238％，氯化钾添加量0.15％，硝酸钠添加量浓度为0.019％—0.020％，二水合依地酸二钠添加量浓度为0.038％—0.040％，TritonX-100的添加量为0.005％—0.0055％，Kathon WT的添加量为0.05％—0.06％，并且用超纯水做溶剂；
(2)溶解上述的所有无机盐应该预先准备溶剂体积的60％预先溶解，方可避免泡沫的产生；
(3)对于有机物Kathon WT和TritonX-100，一个是起杀菌、灭菌的作用，一个是离散血样中的细胞使之分散，便于仪器检测，同时降低稀释液的表面张力从而减少气泡的产生，消除气泡给对测量带来的干扰，该物质同时还具有鞘液的作用；添加顺序是先添加TritonX-100后添加Kathon wt；
(4)准确称取108.09gβ-D(+)无水葡萄糖倒入预先装有3L含有5倍Kathon wt杀菌剂的磷酸盐缓冲稀释液的5L量杯中，不断搅拌约30min，再加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处；
(5)移取500ml120mmol/L的浓缩校准液至新的5L量杯中，稀释10倍，即到5L刻度线处，并放于磁力搅拌器上不断搅拌约30min，同时静置30min；
(6)移取100ml 12mmol/L的校准液至新的5L量杯中，继续缓慢加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌约30min，同时静置30min；
(7)本发明采用低转速搅拌溶解法，配置后搅拌30min，β-D(+)无水葡萄糖属于亲水物质，易于溶解，不影响溶液的均一性，同时低转速节能，适合工业生产要求；
(8)Kathon WT的含量为0.05％～0.06％，配置出的校准液稳定性更加良好，同时测试出的结果更加准确；
(9)水质最好是三蒸水或超纯水。
3、具体制备方法：
(1)装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中(体积要用已经校准过的)，把量杯置于磁力搅拌器上，让搅拌转子匀速转动起来；
(2)然后缓慢往5L量杯中加入108.09gβ-D(+)无水葡萄糖，放于磁力搅拌器上不断搅拌约30min；
(3)等上述化学品完全溶解后，然后再往5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处；
(4)移取500ml的混合溶液加入新的5L量杯中，然后加磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，放于磁力搅拌器上不断搅拌，约30min，静置30min；
(5)再次移取100ml的磷酸盐缓冲稀释液加入新的5L量杯中，继续缓慢加入磷酸盐缓冲稀释液至L5L刻度线处，不断搅拌30min，静置30min；
(6)溶解均匀后，即得灌装前溶液，在过滤器中放入三蒸水中浸泡过的0.22um的醋酸纤维滤膜，过滤三次，即为需要的校准液；
(7)若溶液是澄清透明状，则取样检测，连做三批，开始测试其准确性，若有沉淀和浑浊现象则祛除，重新配置；
(8)测试OK合格后，再用所述的12mmol/L校准液进行上机验证试验，用葡萄糖/乳酸分析仪及血糖分析仪对血样进行校准测试并与标准校准品做对比及一致性临床验证。
实施例一
1、装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中(体积要校准，已校准)，把量杯置于搅拌器下，让搅拌棒伸入到液面1/2处，匀速搅拌，然后继续往5L量杯中加入无水葡萄糖，等化学品都完全溶解后，然后再往5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处(已校准过的刻度线)，继续搅拌，搅拌30min，静置30min，移取500ml的混合溶液加入新的5L的量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液，至刻度线处，搅拌30min，静置30min，再移取100ml的磷酸盐缓冲稀释液至新的5L量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌30min，静置30min，结束后溶液经除菌过滤，即可得到所需要的12mmol/L的血糖校准液，
2、静置1h，即得灌装前溶液，所得浓缩液澄清透明无沉淀浑浊现象，则测试其PH值和电导率，合格后，稀释成系统液做上机测试，取样检测，连做三批，，批号分别是20161220、20161221、20161222；
3、结论：
实施例二
1、装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中(体积要校准，已校准)，把量杯置于搅拌器下，让搅拌棒伸入到液面1/2处，匀速搅拌，然后继续往5L量杯中加入无水葡萄糖，等化学品都完全溶解后，然后再往5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处(已校准过的刻度线)，继续搅拌，搅拌30min，静置30min，移取500ml的混合溶液加入新的5L的量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液，至刻度线处，搅拌30min，静置30min，再移取100ml的磷酸盐缓冲稀释液至新的5L量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌30min，静置30min，结束后溶液经除菌过滤，即可得到所需要的12mmol/L的血糖校准液，
2、静置1h，即得灌装前溶液，所得浓缩液澄清透明无沉淀浑浊现象，则测试其PH值和电导率，合格后，稀释成系统液做上机测试，取样检测，连做三批，批号分别是20161223、20161224、20161225；
3、结论：
具体实施方式三：
1、装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中(体积要校准，已校准)，把量杯置于搅拌器下，让搅拌棒伸入到液面1/2处，匀速搅拌，然后继续往5L量杯中加入无水葡萄糖，等化学品都完全溶解后，然后再往5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处(已校准过的刻度线)，继续搅拌，搅拌30min，静置30min，移取500ml的混合溶液加入新的5L的量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液，至刻度线处，搅拌30min，静置30min，再移取100ml的磷酸盐缓冲稀释液至新的5L量杯中，继续加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌30min，静置30min，结束后溶液经除菌过滤，即可得到所需要的12mmol/L的血糖校准液，
2、静置1h，即得灌装前溶液，所得浓缩液澄清透明无沉淀浑浊现象，则测试其PH值和电导率，合格后，稀释成系统液做上机测试，取样检测，连做三批，，批号分别是20161228、20170103、20170105；
3、结论：
引证：YYT 0456.1-2014血液分析仪用试剂 第1部分：清洗液；YYT0456.3-2014血液分析仪用试剂 第3部分：稀释剂；ISO18113-2第2部分：专业用体外诊断试剂；GBT 26124-2011临床化学体外诊断试剂盒标准(GB)YYT 0701-2008血细胞分析仪用校准物(品)GBT1.1-2009标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写(摘要)
以上仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种适用于葡萄糖/乳酸分析仪用的血糖校准液配置方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)装3L磷酸盐缓冲稀释液于5L量杯中，把所述量杯置于磁力搅拌器上，让搅拌转子匀速转动起来，其中，所述5L磷酸盐缓冲稀释液中各化学品的添加量浓度为：磷酸二氢钾添加量0.055％，二水合磷酸氢二钠添加量浓度0.237％—0.238％，氯化钾添加量0.15％，硝酸钠添加量浓度为0.019％—0.020％，二水合依地酸二钠添加量浓度为0.038％—0.040％，TritonX-100添加量为0.005％—0.0055％，Kathon WT添加量为0.05％—0.06％；并且用超纯水做溶剂；
(2)然后缓慢向5L量杯中加入108.09gβ-D(+)的无水葡萄糖，放于磁力搅拌器上不断搅拌30min；
(3)等上述组合物完全溶解后，然后再向所述5L量杯中加磷酸盐缓冲稀释液至刻度线处；
(4)从所述步骤(3)中移取500ml的混合溶液加入新的5L量杯中，然后加磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，放于磁力搅拌器上不断搅拌30min，然后静置30min；
(5)再次移取所述步骤(4)中的100ml磷酸盐缓冲稀释液加入新的5L量杯中，继续缓慢加入磷酸盐缓冲稀释液至5L刻度线处，不断搅拌30min，然后静置30min；
(6)溶解均匀后，即得灌装前溶液，在过滤器中放入三蒸水中浸泡过的0.22um的醋酸纤维滤膜，过滤三次，即为需要的校准液；
(7)若溶液是澄清透明状，则取样检测，连做三批，开始测试其准确性，若有沉淀和浑浊现象则祛除，重新配置；
(8)测试合格后，再用所述的12mmol/L校准液进行上机验证试验，用葡萄糖/乳酸分析仪及血糖分析仪对血样进行校准测试并与标准校准品做对比及一致性临床验证。
2.如权利要求1所述的血糖校准液配置方法，其特征在于，溶解所述的磷酸盐缓冲稀释液的步骤为，预先准备溶剂体积的60％预先溶解。
3.如权利要求1所述的血糖校准液配置方法，其特征在于，添加顺序为先添加TritonX-100后添加Kathon WT。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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