CN109289082A - 一种吸收性医用止血纤维材料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种吸收性医用止血纤维材料及其制备方法，以丝素蛋白、聚氨基酸、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物等为主要原料制成，具有较好的生物相容性，体内可降解吸收，能够实现快速止血，止血效果好，而且，具有消炎抑菌作用，避免引发炎性反应。
Description
技术领域
本发明涉及医用材料技术领域，特别是涉及一种吸收性医用止血纤维材料及其制备方法。
背景技术
血是医院各科室手术中的一个重要环节，对于手术的成功和患者的安危起到非常大的作用。医生手术通常采用的止血方法有两种，一种是采用止血纱布或止血海绵等，另一种是采用凝血酶注射止血，这两种方法都有很大的局限性。止血纱布、止血海绵等常常会在体内有残留物，给患者造成不良反应，而且疗效差，止血慢，操作起来也比较麻烦。凝血酶注射止血属于一种生理止血方法，但其造价高，普通患者很难接受其高额的医疗费用。
后来发展了一种止血纤维织物，是将天然纤维处理后制成，但是其溶解慢，凝血性差，仍旧有很多不足之处。近年来人们又将视线投向生物相容性好的明胶、胶原蛋白、壳聚糖等，但是明胶、胶原蛋白主要来源于猪骨或牛骨，可能引发过敏反应，还有疯牛病风险，吸收倍率低；壳聚糖价格贵且吸收慢。
发明内容
本发明的目的就是要提供一种吸收性医用止血纤维材料及其制备方法，具有较好的生物相容性，体内可降解吸收，能够实现快速止血，止血效果好。
为实现上述目的，本发明是通过如下方案实现的：
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡1～2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
优选的，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3～4倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6～6.5，于120～130℃焙烧10～15分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。
进一步优选的，步骤（1）中，淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至40～45℃，加入8～10U普鲁兰酶，反应25～27小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：30～40mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
优选的，步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为2～3%。
优选的，步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。
进一步优选的，所述甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在30～35℃和0.2～0.3MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合 4～5 小时即得。
更进一步优选的，所述聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
优选的，步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1:8～10:2～3:0.5～0.8:1～2:2～3。
优选的，步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度45～55℃，泵工料液速度为200～250g/分钟，离心盘线速度为5～6km/分钟，纺丝温度为200～230℃。
优选的，步骤（4）中，迅速干燥成型时间为20～30s。
优选的，步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度200～400MPa条件下，-40～-50℃冷冻3～4小时，升温至25～35℃升华3～5小时。
优选的，步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为15000～20000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
本发明的有益效果是：
1、本发明以丝素蛋白、聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物等为主要原料制成一种医用止血纤维材料，具有较好的生物相容性，体内可降解吸收，能够实现快速止血，止血效果好，而且，具有消炎抑菌作用，避免引发炎性反应。
2、与淀粉分子相比，淀粉酶解产物分子量更小，有助于人体快速吸收；淀粉酶解产物具有微孔结构，可快速吸收血液中的水分，实现对血管破口的封堵，还可以聚集血液中的固体成分，形成胶状混合物，加速自然凝血过程，实现快速止血。另外，淀粉的吸水较慢，粘附性较差，对于大面积渗血很难达到较好的止血效果，但淀粉酶解产物是利用预处理的绿豆淀粉制成，预处理方法是采用淀粉浆在酸性条件下焙烧，结构趋向网状，胶粘性更佳，降温至0℃以下投料更有助于与其他原料的融合。
3、丝素蛋白、聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物等协同增强止血效果。
4、聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物协同起到消炎抑菌作用。
5、申请人筛选了玉米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉、绿豆淀粉等，通过对比发现绿豆带奶粉制成的止血纤维材料止血效果最佳。
6、最后一步迅速干燥成型后进行冷冻干燥，有助于进一步形成微孔结构，增强止血效果。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明涉及的露那辛（冻干粉），购自广州倍享生物科技有限公司；D-甘露糖醛酸单体，购自青岛博智汇力生物科技有限公司。
实施例1
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡1小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6，于120℃焙烧10分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至40℃，加入8U普鲁兰酶，反应25小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：30mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为2%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在30℃和0.2MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合 4小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1:8:2:0.5:1:2。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度45℃，泵工料液速度为200g/分钟，离心盘线速度为5km/分钟，纺丝温度为200℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为20s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度200MPa条件下，-40℃冷冻3小时，升温至25℃升华3小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为15000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
实施例2
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入4倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6.5，于130℃焙烧15分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至45℃，加入10U普鲁兰酶，反应27小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g： 40mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为3%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在35℃和0.3MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合 5 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1: 10: 3: 0.8: 2: 3。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度55℃，泵工料液速度为250g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为230℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为30s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度400MPa条件下， -50℃冷冻4小时，升温至35℃升华5小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为20000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
实施例3
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡1小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入4倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6，于130℃焙烧10分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至45℃，加入8U普鲁兰酶，反应27小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：30mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为3%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在30℃和0.3MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合 4 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1: 10:2: 0.8:1: 3。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度45℃，泵工料液速度为250g/分钟，离心盘线速度为5km/分钟，纺丝温度为230℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为20s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度400MPa条件下，-40℃冷冻4小时，升温至25℃升华5小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为15000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
实施例4
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6.5，于120℃焙烧15分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至40℃，加入10U普鲁兰酶，反应25小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g： 40mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为2%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在35℃和0.2MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合5 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1:8: 3:0.5: 2:2。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度55℃，泵工料液速度为200g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为200℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为30s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度200MPa条件下， -50℃冷冻3小时，升温至35℃升华3小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为20000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
实施例5
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6，于125℃焙烧12分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至42℃，加入9U普鲁兰酶，反应26小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：35mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为3%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在32℃和0.2MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合5 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1:9:2:0.6:1.5:2.5。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度50℃，泵工料液速度为220g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为220℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为25s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度300MPa条件下，-45℃冷冻3小时，升温至30℃升华4小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为18000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
对比例1
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）绿豆淀粉，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）的绿豆淀粉，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为3%。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在32℃和0.2MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合5 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、绿豆淀粉的质量比为1:9:2:0.6:1.5:2.5。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度50℃，泵工料液速度为220g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为220℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为25s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度300MPa条件下，-45℃冷冻3小时，升温至30℃升华4小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为18000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
对比例2
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）去离子水，备用；
（3）向步骤（2）的去离子水中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6，于125℃焙烧12分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至42℃，加入9U普鲁兰酶，反应26小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：35mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在32℃和0.2MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合5 小时即得。聚乙烯醇为医用级，选自PVA17-88、PVA17-99、PVA-124中的任一种。
步骤（3）中，去离子水与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为35:9:2:0.6:1.5:2.5。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度50℃，泵工料液速度为220g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为220℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为25s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度300MPa条件下，-45℃冷冻3小时，升温至30℃升华4小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为18000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
对比例3
一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
其中，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6，于125℃焙烧12分钟，自然冷却至室温（25℃），然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至42℃，加入9U普鲁兰酶，反应26小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：35mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为3%。
步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比为1:9:2:1.5:2.5。
步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度50℃，泵工料液速度为220g/分钟，离心盘线速度为6km/分钟，纺丝温度为220℃。
步骤（4）中，迅速干燥成型时间为25s。
步骤（4）中，冷冻干燥的工艺条件是：真空度300MPa条件下，-45℃冷冻3小时，升温至30℃升华4小时。
步骤（4）中，采用真空包装，采用Co60-γ射线消毒，剂量范围为18000Gy。
一种吸收性医用止血纤维材料，是通过上述制备方法得到的。
试验例
1、检测实施例1～5和对比例1～3止血纤维材料的吸液倍数和孔隙率，结果见表1。
表1.吸液倍数和孔隙率检测结果
| 吸液倍数 | 孔隙率（%） | |
| 实施例1 | 31 | 96 |
| 实施例2 | 31 | 96 |
| 实施例3 | 32 | 97 |
| 实施例4 | 32 | 97 |
| 实施例5 | 32 | 97 |
| 对比例1 | 25 | 93 |
| 对比例2 | 18 | 91 |
| 对比例3 | 29 | 94 |
由表1可知，实施例1～5的止血纤维材料具有极高的吸液倍数和较高的孔隙率。对比例1中绿豆淀粉不经任何处理直接投料，对比例2中丝素蛋白溶液用去离子书代替，对比例3略去甘露糖醛酸聚合物，吸液倍数和孔隙率两个指标均有不同程度地变差。
2、35只新西兰白兔，随机分为7组，耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠30mg/kg，麻醉成功后，逐层开腹，暴露肝脏。在肝表面作lcm × lcm × 0. 5cm出血创面，每组分别将合适大小的实施例1～5和对比例1～2的止血纤维材料置于创口，用50g砝码在止血材料上加压，每隔30s观察一次出血情况，以移去砝码后l0min不再出血为“止血”，记录止血时间。用分析天平精确称量止血前后止血材料的质量，计算出血量。出血量(mL) =(止血后重量-止血前重量)/血液比重(1.050g/mL)。计算出血量。结果见表2。
表2.止血实验结果
| 止血时间（s） | 出血量（mL） | |
| 实施例1 | 30 | 0.55 |
| 实施例2 | 30 | 0.55 |
| 实施例3 | 28 | 0.54 |
| 实施例4 | 29 | 0.53 |
| 实施例5 | 27 | 0.52 |
| 对比例1 | 36 | 1.01 |
| 对比例2 | 46 | 1.56 |
由表2可知，实施例1～5的止血纤维材料具有非常好的止血效果。对比例1中绿豆淀粉不经任何处理直接投料，对比例2中丝素蛋白溶液用去离子书代替，止血效果明显变差。
3、抑菌效果测定：
将实施例1～5和对比例3的止血纤维材料进行抑菌率实验，其中抑菌率采用本领域常见的大肠杆菌+金黄色葡萄球菌为观察对象，采用常规条件以医用薄膜袋垫于容器内进行细菌培养实验，相比较其抑菌性能。测试结果见表3。
表3.抑菌效果比较
| 抑菌率（培养时间48小时） | |
| 实施例1 | ≥99.8% |
| 实施例2 | ≥99.8% |
| 实施例3 | ≥99.8% |
| 实施例4 | ≥99.8% |
| 实施例5 | ≥99.8% |
| 对比例3 | 82.3% |
由表3可知，本发明的止血纤维材料具有良好的抑菌效果。对比例3略去甘露糖醛酸聚合物，抑菌效果明显变差，说明聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物协同起到抑菌作用。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (10)
1.一种吸收性医用止血纤维材料的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
（1）预处理的绿豆淀粉经淀粉酶处理得到淀粉酶解产物，备用；
（2）蚕丝脱胶后制成丝素蛋白，溶于水中制成丝素蛋白溶液，备用；
（3）向步骤（2）所得丝素蛋白溶液中加入聚氨基酸，搅拌溶解，然后边搅拌边加入聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛以及步骤（1）所得淀粉酶解产物，超声振荡1～2小时，得到纺丝原液；
（4）纺丝原液经离心法纺丝，迅速干燥成型，冷冻干燥，包装，消毒，即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，绿豆淀粉的预处理方法为：将绿豆淀粉加入3～4倍重量的水中制成淀粉浆，调整其pH=6～6.5，于120～130℃焙烧10～15分钟，自然冷却至室温，然后冰盐浴冷却至0℃以下，并保持此温度范围直至投料。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，淀粉酶解处理的具体方法是：将预处理的绿豆淀粉加入pH值为5的醋酸钠-醋酸缓冲液中配制得到淀粉乳，糊化后冷却至40～45℃，加入8～10U普鲁兰酶，反应25～27小时，在120℃下溶解3小时，将溶解液快速以无水乙醇沉淀，然后离心，40℃下真空干燥，即得；绿豆淀粉与醋酸钠-醋酸缓冲液的质量体积比为5g：30～40mL，普鲁兰酶的酶活为1350U/g。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，丝素蛋白溶液的制备方法如下：将蚕丝脱胶后，经溶解、透析、冷冻干燥而得的丝素蛋白，加入水中搅拌至完全溶解而得，其质量浓度为2～3%。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述甘露糖醛酸聚合物是以D-甘露糖醛酸单体与聚乙烯醇络合而得。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述甘露糖醛酸聚合物的制备方法如下：以三乙醇胺为络合剂，在30～35℃和0.2～0.3MPa条件下，将D-甘露糖醛酸单体和聚乙烯醇于恒压反应釜中络合 4～5 小时即得。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，丝素蛋白溶液中所含丝素蛋白与聚氨基酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、甘露糖醛酸聚合物、露那辛、淀粉酶解产物的质量比约为1:8～10:2～3:0.5～0.8:1～2:2～3。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，离心法纺丝的工艺条件为：纺丝原液温度45～55℃，泵工料液速度为200～250g/分钟，离心盘线速度为5～6km/分钟，纺丝温度为200～230℃。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，迅速干燥成型时间为20～30s。
10.一种吸收性医用止血纤维材料，是通过权利要求1～9中任一项所述的制备方法得到的。
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Application publication date: 20190201 |