CN109265428A - 一种流苏菲的提取制备方法 - Google Patents
一种流苏菲的提取制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109265428A CN109265428A CN201811207909.9A CN201811207909A CN109265428A CN 109265428 A CN109265428 A CN 109265428A CN 201811207909 A CN201811207909 A CN 201811207909A CN 109265428 A CN109265428 A CN 109265428A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tasselled
- phenanthrene
- chloroform
- petroleum ether
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/78—Ring systems having three or more relevant rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种流苏菲的提取制备方法，该方法经过醇提、石油醚‑氯仿溶液萃取浓缩，碱性开环除杂，酸性环合纯化流苏菲，环合流苏菲粗品过正相柱层析用氯仿‑甲醇液洗脱，收集含流苏菲的洗脱液，溶剂法结晶，制得流苏菲；本发明方法简单易操作，适于工业化生产和推广应用。
Description
技术领域
本发明公开了一种流苏菲的提取制备方法，属于提取物制备领域。
背景技术
流苏石斛( Dendrobium fimbriatum Hook.)为兰科石斛属植物,是中药石斛的主要来源之一，又名马鞭石斛。与兰科石斛属植物金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl）、鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl）、铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura etMigo）及近似种霍山石斛（Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng）、细茎石斛（Dendrobium momiliforme（L.）Sw.）等为同属植物。为多年生附生草本植物，生于海拔600-1700m的树干上或山谷阴湿岩石上，主产于我国西南部至西北部，国外的印度、尼泊尔、锡金、不丹、缅甸、泰国和越南等地都有分布，其药用部位为新鲜或干燥茎；流苏石斛具有滋阴清热、生津益胃和润肺止咳等功效，通常用于治疗热病伤津、口干烦渴和病后虚热等症状，具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管等作用。其为补阴要药，列为上品，古今应用广泛，始见于《神农本草经》；流苏石斛富含多糖、多种氨基酸及S、P、K、Ca、Mg、Fe、Zn、Mn等。
近年来，众多科研工作者对流苏石斛化学成分、药理性能做了大量的相关工作。李满飞等、Talapatra SK、毕志明等相继报道了从流苏石斛中分离得到各种化学成分，主要包括菲类、连苄类、大黄素型蒽醌类、香豆素类等。菲类包括流苏菲（fimbriatone）、鼓槌菲（chrysotoxene）、毛兰菲（confusarin），其中，流苏菲的系统命名为2,7-二羟基-1-甲氧基-五氢菲[4,5-环]吡喃-5-酮，化学结构式如下：
；
中药发挥疗效的物质基础是其所含的化学成分，从已有研究来看，石斛属植物所含化学成分结构类型众多，生物碱、菲类、连苄类、多糖类是其较为重要的有效成分，但迄今为止，从流苏石斛中分离提取流苏菲的方法鲜有报道，本文通过基础研究测定了不同产地马鞭石斛（流苏石斛）中主要抗癌活性成分流苏菲（fimbriatone）、鼓槌菲（chrysotoxene）、毛兰菲（confusarin）含量，其中以流苏菲含量做高，含量为0.02%-0.03%左右，毛兰菲含量约为流苏菲含量一半。目前文献关于流苏菲制备方法停留在基础研究上，纯化手段单一，基本上为萃取物反复过硅胶柱、凝胶柱层析得到该化合物，收率低，纯化过程中损失较大，无法形成大规模工业制备。
发明内容
本发明提供了一种流苏菲的提取制备方法，该方法经过醇提、石油醚-氯仿溶液萃取浓缩，碱性开环除杂，酸性环合纯化流苏菲，环合流苏菲粗品过正相柱层析用氯仿-甲醇液洗脱，收集含流苏菲的洗脱液，溶剂法结晶。
本发明方法步骤如下：
（1）以流苏石斛鲜条为原料，分选除去杂质，洗净后干燥切片；
（2）取步骤（1）流苏石斛切片，用质量浓度80%-95%的乙醇溶液热回流提取2-3次，每次1.5-2h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，浓缩得乙醇粗提液；
（3）在步骤（2）乙醇粗提液中加入其体积2-3倍的石油醚-氯仿溶液，萃取2-3次，收集合并石油醚氯仿萃取液，浓缩回收有机溶剂，得萃取浓缩物；
（4）在步骤（3）萃取浓缩物加入其质量5-10倍的质量浓度70%-80%的乙醇溶液溶解，溶解后滴加碱性溶剂，使溶液pH值为9-10，然后置于60-80℃水浴中处理30-60min，使得流苏菲在碱性条件下开环，并与碱结合增大极性溶于水中，水浴后，回收乙醇出现沉淀杂质，过滤取水溶液，加入稀HCL溶液调节pH值到中性环合流苏菲化合物，静置2-4小时，待流苏菲沉淀完成后，过滤干燥得灰黄色流苏菲粗品，含量大于83%；
（5）将步骤（4）流苏菲粗品用氯仿溶解，过200-300目硅胶柱，硅胶用量为粗品质量15-20倍，氯仿湿法装柱，氯仿-甲醇液洗脱，薄层层析鉴定，收集含流苏菲的洗脱液，洗脱液干燥回收有机溶剂，得干燥品；
（6）将步骤（5）干燥品用石油醚-丙酮溶液结晶，过滤干燥，得流苏菲，纯度大于98%。
所述石油醚-氯仿溶液是石油醚和氯仿按体积比2-1:1的比例混合制得。
所述碱性溶剂为氢氧化钠、氨水、三乙胺或二乙胺。
所述氯仿-甲醇液是氯仿和甲醇按体积比50:1-60:1的比例混合制得。
所述步骤（6）中石油醚-丙酮溶液是石油醚与丙酮按体积比3:2的比例混合制得。
本发明利用流苏菲在水中无溶解性，碱性开环后溶解于水，酸性环合的方法提取制备流苏菲，去除鼓槌菲、毛兰菲等大量脂溶性杂质，纯化后纯度大于83%，降低后续硅胶柱层析硅胶用量，传统萃取物过硅胶柱法，在做低含量药材化合物纯化时大部分目标化合物都损失于硅胶柱死吸附上，该法利于后续硅胶柱分离纯化，降低硅胶柱死吸附，提高了流苏菲得率；该方法提高了流苏石斛的应用价值，为开发抗癌新药和扩大药源，提供更科学的依据；本发明方法简单易操作，适于工业化生产和推广应用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明保护范围不局限于所述内容。
实施例1: 本流苏菲的提取制备方法步骤如下：
（1）以流苏石斛鲜条为原料，分选除去杂质，洗净后干燥切片；
（2）取步骤（1）流苏石斛切片，用质量浓度80%的乙醇溶液热回流提取3次，每次1.5h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，浓缩得乙醇粗提液；
（3）在步骤（2）乙醇粗提液中加入其体积2倍的石油醚-氯仿溶液（石油醚和氯仿按体积比2:1），萃取3次，收集合并石油醚氯仿萃取液，浓缩回收有机溶剂，得萃取浓缩物；
（4）在步骤（3）萃取浓缩物加入其质量6倍的质量浓度70%的乙醇溶液溶解，溶解后滴加氢氧化钠，使溶液pH值为9，然后置于60℃水浴中处理60min，使得流苏菲在碱性条件下开环，并与碱结合增大极性溶于水中，水浴后，回收乙醇出现沉淀杂质，过滤取水溶液，加入稀HCL溶液调节pH值到中性环合流苏菲化合物，静置2小时，待流苏菲沉淀完成后，过滤干燥得灰黄色流苏菲粗品，含量85%；
（5）将步骤（4）流苏菲粗品用氯仿溶解，过200目硅胶柱，硅胶用量为粗品质量15倍，氯仿湿法装柱，氯仿-甲醇液（氯仿和甲醇按体积比50:1）洗脱，薄层层析鉴定，收集含流苏菲的洗脱液，洗脱液干燥回收有机溶剂，得干燥品；
（6）将步骤（5）干燥品用石油醚-丙酮溶液（石油醚与丙酮按体积比3:2）结晶，过滤干燥，制得流苏菲，含量98.5%。
实施例2: 本流苏菲的提取制备方法步骤如下：
（1）以流苏石斛鲜条为原料，分选除去杂质，洗净后干燥切片；
（2）取步骤（1）流苏石斛切片，用质量浓度90%的乙醇溶液热回流提取2次，每次2h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，浓缩得乙醇粗提液；
（3）在步骤（2）乙醇粗提液中加入其体积3倍的石油醚-氯仿溶液（石油醚和氯仿按体积比1:1），萃取2次，收集合并石油醚氯仿萃取液，浓缩回收有机溶剂，得萃取浓缩物；
（4）在步骤（3）萃取浓缩物加入其质量8倍的质量浓度75%的乙醇溶液溶解，溶解后滴加三乙胺，使溶液pH值为10，然后置于80℃水浴中处30min，使得流苏菲在碱性条件下开环，并与碱结合增大极性溶于水中，水浴后，回收乙醇出现沉淀杂质，过滤取水溶液，加入稀HCL溶液调节pH值到中性环合流苏菲化合物，静置3小时，待流苏菲沉淀完成后，过滤干燥得灰黄色流苏菲粗品，含量86%；
（5）将步骤（4）流苏菲粗品用氯仿溶解，过250目硅胶柱，硅胶用量为粗品质量20倍，氯仿湿法装柱，氯仿-甲醇液（氯仿和甲醇按体积比55:1）洗脱，薄层层析鉴定，收集含流苏菲的洗脱液，洗脱液干燥回收有机溶剂，得干燥品；
（6）将步骤（5）干燥品用石油醚-丙酮溶液（石油醚与丙酮按体积比3:2）结晶，过滤干燥，制得流苏菲，含量99%。
实施例3: 本流苏菲的提取制备方法步骤如下：
（1）以流苏石斛鲜条为原料，分选除去杂质，洗净后干燥切片；
（2）取步骤（1）流苏石斛切片，用质量浓度95%的乙醇溶液热回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，浓缩得乙醇粗提液；
（3）在步骤（2）乙醇粗提液中加入其体积2.5倍的石油醚-氯仿溶液（石油醚和氯仿按体积比1.5:1），萃取2次，收集合并石油醚氯仿萃取液，浓缩回收有机溶剂，得萃取浓缩物；
（4）在步骤（3）萃取浓缩物加入其质量10倍的质量浓度80%的乙醇溶液溶解，溶解后滴加氨水，使溶液pH值为9，然后置于70℃水浴中处理45min，使得流苏菲在碱性条件下开环，并与碱结合增大极性溶于水中，水浴后，回收乙醇出现沉淀杂质，过滤取水溶液，加入稀HCL溶液调节pH值到中性环合流苏菲化合物，静置4小时，待流苏菲沉淀完成后，过滤干燥得灰黄色流苏菲粗品，含量88%；
（5）将步骤（4）流苏菲粗品用氯仿溶解，过200目硅胶柱，硅胶用量为粗品质量15倍，氯仿湿法装柱，氯仿-甲醇液（氯仿和甲醇按体积比60:1）洗脱，薄层层析鉴定，收集含流苏菲的洗脱液，洗脱液干燥回收有机溶剂，得干燥品；
（6）将步骤（5）干燥品用石油醚-丙酮溶液（石油醚与丙酮按体积比3:2）结晶，过滤干燥，制得流苏菲，含量98.9%。
Claims (5)
1.一种流苏菲的提取制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）以流苏石斛鲜条为原料，分选除去杂质，洗净后干燥切片；
（2）取步骤（1）流苏石斛切片，用质量浓度80%-95%的乙醇溶液热回流提取2-3次，每次1.5-2h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，浓缩得乙醇粗提液；
（3）在步骤（2）乙醇粗提液中加入其体积2-3倍的石油醚-氯仿溶液，萃取2-3次，收集合并石油醚氯仿萃取液，浓缩回收有机溶剂，得萃取浓缩物；
（4）在步骤（3）萃取浓缩物加入其质量5-10倍的质量浓度70%-80%的乙醇溶液溶解，溶解后滴加碱性溶剂，使溶液pH值为9-10，然后置于60-80℃水浴中处理30-60min，使得流苏菲在碱性条件下开环，并与碱结合增大极性溶于水中，水浴后，回收乙醇出现沉淀杂质，过滤取水溶液，加入稀HCL溶液调节pH值到中性环合流苏菲化合物，静置2-4小时，待流苏菲沉淀完成后，过滤干燥得灰黄色流苏菲粗品；
（5）将步骤（4）流苏菲粗品用氯仿溶解，过200-300目硅胶柱，硅胶用量为粗品质量15-20倍，氯仿湿法装柱，氯仿-甲醇液洗脱，薄层层析鉴定，收集含流苏菲的洗脱液，洗脱液干燥回收有机溶剂，得干燥品；
（6）将步骤（5）干燥品用石油醚-丙酮溶液结晶，过滤干燥，制得流苏菲。
2.根据权利要求1所述的流苏菲的提取制备方法，其特征在于：石油醚-氯仿溶液是石油醚和氯仿按体积比2-1:1的比例混合制得。
3.根据权利要求1所述的流苏菲的提取制备方法，其特征在于：碱性溶剂为氢氧化钠、氨水、三乙胺或二乙胺。
4.根据权利要求1所述的流苏菲的提取制备方法，其特征在于：氯仿-甲醇液是氯仿和甲醇按体积比50:1-60:1的比例混合制得。
5.根据权利要求1所述的流苏菲的提取制备方法，其特征在于：步骤（6）中石油醚-丙酮溶液是石油醚与丙酮按体积比3:2的比例混合制得。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811207909.9A CN109265428A (zh) | 2018-10-17 | 2018-10-17 | 一种流苏菲的提取制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811207909.9A CN109265428A (zh) | 2018-10-17 | 2018-10-17 | 一种流苏菲的提取制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109265428A true CN109265428A (zh) | 2019-01-25 |
Family
ID=65197469
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811207909.9A Pending CN109265428A (zh) | 2018-10-17 | 2018-10-17 | 一种流苏菲的提取制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109265428A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110118844A (zh) * | 2019-04-24 | 2019-08-13 | 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所 | 一种高纯度毛兰菲的制备方法及其应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107789500A (zh) * | 2017-11-14 | 2018-03-13 | 文山壮族苗族自治州农业科学院 | 叠鞘石斛中香豆素类物质的制备方法 |
-
2018
- 2018-10-17 CN CN201811207909.9A patent/CN109265428A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107789500A (zh) * | 2017-11-14 | 2018-03-13 | 文山壮族苗族自治州农业科学院 | 叠鞘石斛中香豆素类物质的制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| HONG YANG 等: "Two New Compounds from Dendrobium chrysotoxum", 《HELVETICA CHIMICA ACTA》 * |
| HONG YANG 等: "Two New Compounds from Dendrobium chrysotoxum", 《HELVETICA CHIMICA ACTA》, vol. 87, 31 December 2004 (2004-12-31), pages 398 * |
| 中国科学院上海药物研究所: "《中草药有效成分提取与分离》", vol. 2, 31 July 1983, 上海科学技术出版社, pages: 366 * |
| 李医明: "《中药化学》", vol. 2, 31 August 2018, 上海科学技术出版社, pages: 317 - 318 * |
| 毕志明 等: "流苏石斛化学成分研究", 《药学学报》 * |
| 毕志明 等: "流苏石斛化学成分研究", 《药学学报》, vol. 38, no. 07, 31 December 2003 (2003-12-31), pages 527 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110118844A (zh) * | 2019-04-24 | 2019-08-13 | 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所 | 一种高纯度毛兰菲的制备方法及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103204765B (zh) | 一种从废次烟叶中提取茄尼醇和绿原酸的方法 | |
| CN102101840B (zh) | 由桑叶中提取分离高纯度1-脱氧野尻霉素的方法 | |
| CN105237537B (zh) | 一种制备苦豆子中苦参碱和槐定碱的方法 | |
| CN101812100A (zh) | 一种制备淫羊藿苷的方法 | |
| CN106083871A (zh) | 一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法 | |
| CN102453075A (zh) | 一种甘草酸的分离纯化工艺 | |
| CN102875562A (zh) | 制备补骨脂素和异补骨脂素或包含它们的提取物的方法 | |
| CN101348474A (zh) | 一种从丹参茎叶中制备丹酚酸b和丹参素的方法 | |
| CN102228515B (zh) | 一种分离和富集莲子心总黄酮和总生物碱的方法 | |
| CN101967119A (zh) | 一种槟榔碱的提纯方法 | |
| CN109265428A (zh) | 一种流苏菲的提取制备方法 | |
| CN101255183A (zh) | 从葫芦巴中提取原薯蓣皂甙的方法 | |
| CN101177426B (zh) | 从甘肃棘豆中分离提取苦马豆素的工艺方法 | |
| CN108218885A (zh) | 一种改良的粉防己碱的提取方法 | |
| CN104231011B (zh) | 一种毛蕊花糖苷的制备方法 | |
| CN103588832B (zh) | 从常春藤叶中分离常春藤苷c及苷元的方法 | |
| CN102920727B (zh) | 制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法 | |
| CN102218087A (zh) | 一种刺槐花总黄酮提取物的制备方法 | |
| CN101879208A (zh) | 一种从绿豆壳中提取总黄酮的方法 | |
| CN102863439A (zh) | 从育亨宾树皮中提取育亨宾盐酸盐的方法 | |
| CN103059037A (zh) | 一种富集纯化白屈菜中白屈菜碱的方法 | |
| CN102010409B (zh) | 一种从非洲育亨宾树皮中提取分离育亨宾碱的方法 | |
| CN101928325A (zh) | 一种制备天然18-α甘草酸的方法 | |
| CN101704873A (zh) | 一种从枇杷叶提取熊果酸的方法 | |
| CN103933122B (zh) | 一种厚朴总酚提取物的吸附分离制备工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |