CN109200069A - 树舌灵芝乙醇提取物及其用途 - Google Patents
树舌灵芝乙醇提取物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109200069A CN109200069A CN201811166127.5A CN201811166127A CN109200069A CN 109200069 A CN109200069 A CN 109200069A CN 201811166127 A CN201811166127 A CN 201811166127A CN 109200069 A CN109200069 A CN 109200069A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ganoderma lipsiense
- ethanol extract
- ganoderma
- lipsiense
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001460390 Ganoderma lipsiense Species 0.000 title claims abstract description 117
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 title claims abstract description 66
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 43
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 9
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 claims abstract description 9
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 13
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 8
- -1 DPPH free radical Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N AAPH Chemical compound Cl.Cl.NC(=N)C(C)(C)\N=N\C(C)(C)C(N)=N LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N 0.000 abstract description 14
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 10
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 10
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 abstract description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 238000002376 fluorescence recovery after photobleaching Methods 0.000 description 23
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 15
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 12
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 12
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 12
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 10
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 8
- 235000001637 Ganoderma lucidum Nutrition 0.000 description 8
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 8
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 8
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 8
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 6
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 6
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 4
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 4
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000207961 Sesamum Species 0.000 description 2
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tripyridin-2-yl-1,3,5-triazine Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=NC(C=2N=CC=CC=2)=NC(C=2N=CC=CC=2)=N1 KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208140 Acer Species 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 description 1
- 241001149422 Ganoderma applanatum Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000007443 Neurasthenia Diseases 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- 241000124033 Salix Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 150000004675 formic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019394 potassium persulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
- A61K36/074—Ganoderma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/15—Preparation or pretreatment of starting material involving mechanical treatment, e.g. chopping up, cutting or grinding
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/17—Preparation or pretreatment of starting material involving drying, e.g. sun-drying or wilting
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供一种树舌灵芝的乙醇提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)、取树舌灵芝，在50℃‑60℃下干燥10‑14小时；2)、加入1400‑1600mL的质量分数50％‑70％的乙醇溶液，浸泡1至2小时，于80‑100℃水浴微沸回流提取4.5‑5.5h，滤渣重提2次，合并3次滤液；3)、减压浓缩滤液至浸膏状，加无水乙醇至流状膏体溶解完全，60‑80℃水浴5至6小时，然后真空冷冻干燥23‑25小时。本发明还提供一种树舌灵芝乙醇提取物的用途：用于制备抗氧化和/或抗神经细胞衰老活性的食品和/或药物。本发明通过实验证明树舌灵芝乙醇提取物有一定的抗氧化能力的基础上，以其为研究对象，用AAPH诱导的细胞氧化应激体外模型进行干预，研究树舌灵芝对抗PC12细胞氧化应激引起的衰老的影响。
Description
技术领域
本发明涉及的一种树舌灵芝的新用途，具体涉及一种树舌灵芝乙醇提取物及其用途。
背景技术
树舌灵芝(Ganoderma applanatum(Pers.)Pat)又称古菌灵芝、槭树菌、灵芝草、仙草之王。树舌灵芝属于真菌界、无鞭毛菌门、担子菌纲、多孔菌科、灵芝属。其特点有子实体比较大，没有柄或者几乎无柄，菌帽呈半圆形或圆形，表面的颜色不同的灵芝会呈现不同的颜色，最常见的有褐色，淡黄色以及白色。树舌灵芝的基部通常寄生在腐木上，比如橡木、杨树、柳树以及其他的一些枯木上。灵芝是多年生的，最高年龄的树舌灵芝有二十多岁。我国树舌灵芝分布的特点和气候以及降雨量有关，降雨量多的地方灵芝一般分布多，反之，则少。树舌灵芝主要生长在我国的海南、珠江三角洲、江浙沪、东北、闽南以及台湾等地区，树舌灵芝在其他国家分布的也比较多，如巴西、澳大利亚、非洲、南欧洲等地区。可以在两本书中查找到树舌灵芝的药用价值，一本是《长白山植物药志》，另外一本是《中国药用真菌图鉴》，在这两本书中，树舌灵芝微苦，性质介于寒凉和温热性质的药物之间,是一种良好的平性药物。能清热解毒、抗菌及抗病毒、还可以抗肿瘤、降低血糖和降低免疫活性。在临床多用于治疗乙型肝炎、食道癌、肺结核、神经衰弱等。
树舌灵芝在中医的应用里是一种价值非常高的药用真菌，不但营养丰富且气味独特。为了更明确它的药理作用，刘英杰等人采用一些常见的物理方法(如红外光谱、紫外光谱)对树舌灵芝进行了分析鉴定，结合资料，推断出树舌灵芝含有三种化合物，分别是三萜类化合物、多糖和麦角甾醇；除此之外，林倩倩等采用物理化学法鉴定出了树舌灵芝脂溶性成分，分离得到几类化合物：甲酸盐，胺类，酯类，酸类，麦角醇类，醛类，烷烃类，另外，还有一些比较常见的物质，比如苯烯类。这些有效成分都具有广泛的生物活性和和药用价值，为后人进一步研究树舌灵芝的药效提供了基础。
因此，需要对现有技术进行改进。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种高效的树舌灵芝的粉末及其用途。
为解决上述技术问题，本发明提供一种树舌灵芝乙醇提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)、取树舌灵芝，切块，在50℃-60℃(最优55℃)下(干燥10-14小时)，粉碎成粉末状，过40目筛，得到树舌灵芝粉末；
2)、取69g-70g(最优69.31g)树舌灵芝粉末，加入1400-1600mL(最优1500mL)的质量分数50％-70％(最优60％)的乙醇溶液，浸泡1至2小时，于80-100℃(最优90℃)水浴微沸回流提取4.5-5.5h(最优5h)，滤渣重提2次，合并3次滤液；
3)、减压浓缩滤液至浸膏状，得到流状膏体，加无水乙醇至流状膏体溶解完全，60-80℃(最优70℃)水浴5至6小时，然后真空冷冻干燥(置于真空冷冻干燥机中干燥)23-25小时(最优24小时)，得到树舌灵芝的乙醇提取物。
作为对本发明树舌灵芝的乙醇提取物的制备方法的改进，步骤2为：
取69g-70g(最优69.31g)树舌灵芝粉末，加入1400-1600mL(最优1500mL)的质量分数50％-70％(最优60％)的乙醇溶液，浸泡1至2小时，于80-100℃(最优90℃)水浴微沸回流提取4.5-5.5h(最优5h)，滤渣重提2次，合并3次微沸回流的滤液；再超声提取滤渣3次，每次1.5-2.5h(最优2h)，超声功率为100～300W，合并3次超声提取的滤液；将微沸回流得到的滤液与超声提取得到的滤液合并。
本发明还提供一种树舌灵芝乙醇提取物的用途：
用于制备抗氧化和/或抗神经细胞衰老活性的食品和/或药物。
作为对本发明一种树舌灵芝乙醇提取物的用途的改进：
用于制备缓解对PC12细胞的细胞衰老的抗神经细胞衰老活性的食品和/或药物。
作为对本发明一种树舌灵芝乙醇提取物的用途的进一步改进：
用于制备清除DPPH自由基的抗氧化活性的食品和/或药物。
本发明树舌灵芝乙醇提取物及其用途的技术优势为：
本发明通过实验证明树舌灵芝乙醇提取物有一定的抗氧化能力的基础上，以其为研究对象，用AAPH诱导的细胞氧化应激体外模型进行干预，研究树舌灵芝对抗PC12细胞氧化应激引起的衰老的影响。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1为树舌灵芝乙醇提取物对DPPH自由基的清除作用(*P<0.01,**P<0.05)；
横坐标为树舌灵芝乙醇提取物溶液中树舌灵芝乙醇提取物浓度，纵坐标为DPPH自由基清除率；
图2为树舌灵芝乙醇提取物对ABTS自由基的清除作用(*P<0.01)；
横坐标为树舌灵芝乙醇提取物溶液中树舌灵芝乙醇提取物浓度，纵坐标为ABTS自由基清除率；
图3为硫酸亚铁标准曲线；
图4为树舌灵芝乙醇提取物的总还原能力(*P<0.01)；
横坐标为树舌灵芝乙醇提取物溶液中树舌灵芝乙醇提取物浓度，纵坐标为FRAP值；
图5为抗坏血酸Vc的总还原能力(*P<0.01)；
横坐标为树舌灵芝乙醇提取物溶液中树舌灵芝乙醇提取物浓度，纵坐标为FRAP值；
图6为树舌灵芝乙醇提取物的细胞毒实验(*P<0.01)；
横坐标为树舌灵芝乙醇提取物溶液中树舌灵芝乙醇提取物浓度，纵坐标为细胞存活率；
图7为树舌灵芝乙醇提取物作用后PC12细胞β-半乳糖苷酶染色结果(*p<0.05，**p<0.01)。
*p代表显著差异，**p代表极显著差异。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1、树舌灵芝乙醇提取物。
本实验采用的树舌灵芝采自于浙江杭州临安天目山，PC12细胞购自于中国科学院上海细胞库。
首先，采摘到树舌灵芝后，将其切成小块，放到烘箱内(55℃)过夜，待树舌灵芝完全烘干之后，放入电动粉碎机中粉碎成粉末状，过40目筛，放到室温处，用做于下一步的实验材料。
树舌灵芝的提取：
称取69.31g树舌灵芝放置于3000mL的圆底烧瓶中，加入约1500mL的质量分数60％的乙醇溶液，浸泡2小时，然后充分搅拌混匀后，连接回流装置，置90℃水浴锅中回流提取，缓缓加热至沸，并保持微沸5h(置90℃水浴锅中微沸回流提取5h)。停止加热，放置15分钟后，过滤收集滤液。再用相同的方法提取两次滤渣，合并3次滤液。再超声提取滤渣3次，每次2h，超声功率为200W，合并3次滤液；将微沸回流得到的滤液与超声提取得到的滤液全部合并。用旋转蒸发仪减压浓缩滤液至浸膏状，得到流状膏体，用无水乙醇将流状膏体在圆底烧瓶中慢慢溶解并转移出来至蒸发皿中，置于70℃的水浴锅，将水浴锅放在通风橱中5至6小时(至无水乙醇挥发完全)，再放置到冷冻干燥机中干燥，24小时之后，取出装瓶，称量，计算得率，得到树舌灵芝乙醇提取物。
实验：
1)基于96孔板3种方法检测树舌灵芝的抗氧化活性：
分别采用DPPH、ABTS、FRAP三种方法对两种树舌灵芝乙醇提取物进行抗氧化测定。
基于96孔板3种方法检测上述树舌灵芝乙醇提取物的抗氧化活性：
DPPH法：用电子分析天平准确称取DPPH(C18H12N5O6，FW:394.32分子量)粉末约3.943mg，加入无水乙醇溶解并定容到100mL，放置到棕色容量瓶中，得到0.1mM(mg/L)的DPPH的标准品储备液，现配现用。
分别称取得到的10mg树舌灵芝乙醇提取物，用无水乙醇配制成10mg/mL的母液，然后再用无水乙醇将母液梯度稀释为2、1.6、1.2、0.8、0.4、0.1mg/mL浓度的树舌灵芝乙醇提取物溶液。
分别吸取20μL不同浓度的树舌灵芝乙醇提取物溶液至96孔板中，分别加入180μL的DPPH的标准品储备液，混匀，反应体系200μL，避光反应15min后，将96孔板放置到酶标仪中，于517nm处测吸光值注为Ai；进行3次平行试验；
取不同浓度树舌灵芝乙醇提取液溶液，与180μL无水乙醇溶液混合，测定吸光值，注为Aj；
20μL的无水乙醇溶液与180μL的DPPH的标准品储备液混匀，反应体系200μL，避光反应15min后，将96孔板放置到酶标仪中，于517nm处测吸光值注为A0；进行3次平行试验。
按公式(3-1)计算自由基清除率E0，以抗坏血酸VC作为阳性对照，计算结果用于制作自由基清除率-样品质量浓度柱形图。
E0＝(1-(Ai-Aj)/A0)×100％(3-1)
ABTS法：准确称取ABTS试剂20.3mg，加入5mL的蒸馏水溶解；准确称取过硫酸钾粉末3.51mg，加入5mL的蒸馏水溶解。将两者混合均匀，置于室温，避光反应12-16小时，取1mL混合试液，加入40mL的无水乙醇，混匀，得到ABTS溶液，备用。
分别吸取20μL不同浓度的树舌灵芝乙醇提取液溶液至96孔板中，加入180μL的ABTS溶液，混匀，反应体系200μL，避光反应2min后，将96孔板放置到酶标仪中，于734nm处测吸光值注为Ai；进行3次平行试验；
同上述方法，取样品液20μL与180μL无水乙醇溶液混合，测定吸光值，注为Aj；20μL的无水乙醇溶液与180μL的ABTS溶液混匀，测定吸光值，注为A0；进行3次平行试验。
按公式(3-1)计算自由基清除率E0，以抗坏血酸VC作为阳性对照，计算结果用于制作自由基清除率-样品质量浓度柱形图。
FRAP法：首先，绘制标准曲线，用电子分析天平，精确称取硫酸亚铁约6.08mg，用少量的蒸馏水溶解，之后，缓缓加入250μL的18mol/L的浓硫酸，接着，加水稀释到50mL的容量瓶中，取5mL该溶液，加蒸馏水定容到50mL的容量瓶中，该溶液即为800μmol/L的硫酸亚铁溶液，并置入小铁钉。
用该溶液配制梯度硫酸亚铁溶液，包括400μmol/L，200μmol/L，100μmol/L，50μmol/L，25μmol/L，依次取上述溶液20μL，加入180μL的FRAP工作液，利用酶标仪，于593nm处测吸光值，绘制标准曲线。
FRAP工作液的配制(现配现用)：由醋酸钠缓冲液：TPTZ溶液：FeCl3溶液按10:1:1混合而成。
用移液枪吸取相应份数的20μL两种不同浓度的树舌灵芝样品溶液，接着,在每份加入180μL的FRAP工作液，利用酶标仪测其吸光度值，注为Ai，进行3次平行试验，用无水乙醇代替样品加入FRAP工作液作为空白，测定吸光值，注为A0。根据测得吸光值，在FeSO4标准曲线上求出相应浓度，定义为FRAP值，用VC抗坏血酸作为阳性对照，计算结果用于绘制FRAP值-样品质量浓度柱形图。
50％抑制浓度(Half Maximal Inhibitory Concentration,IC50)可通过软件GraphPad Prism 5求出，其数值越大，树舌灵芝乙醇提取物的抗氧化活性越小。
2)建立以AAPH诱导的氧化应激引起的细胞衰老为基础的抗衰老活性测定体系，以纯化后的树舌灵芝乙醇提取物为研究对象进行干预，采用β-半乳糖苷酶染色法观察药物组对该氧化损伤机制的抑制作用：
树舌灵芝乙醇提取物对PC12细胞的细胞毒性：
取处于对数生长期的细胞，弃去旧的培养液，用PBS洗两次。然后，用质量分数0.25％的胰酶对细胞进行消化，消化完全后，接着，加入培养液使贴壁细胞悬浮起来，800rmp离心3min以充分去除胰酶。离心后保留细胞沉淀，加入1mL的培养液使细胞分散，用1mL的枪头反复吹打细胞，使细胞充分悬浮。最终以每孔100μL细胞悬液、5000个细胞接种于96孔板，空白孔加0.1mL培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养过夜，使之贴壁。
两种树舌灵芝分别设为240、120、60、30、15、7.5、3.75、1.875mg/L和50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625mg/L等浓度梯度的灵芝乙醇提取物药物组。反应体系共110μL，将不同浓度10μL树舌灵芝提取物分别加入不同孔中，空白对照组和阴性对照组加入10μL无血清RPIM-1640培养液，每组分别设4个复孔。96孔板横向依次为：空白对照、阴性对照、8个不同药物浓度孔。加药后将96孔板置于5％CO2，37℃培养箱继续培养24h。
MTT法检测细胞存活率：
待药物处理细胞24h后，依次向每个孔加5g/L的MTT 20μL。接着，继续培养4h。之后，沿着培养液上部小心吸取上清液，完全弃去MTT。然后，每个孔加150μL的DMSO溶液，振摇摇匀15min，让结晶充分溶解。利用酶标仪，于490nm处检测吸光度值，按公式计算(3-2)各种药物浓度的抑制率。
细胞存活率(％)＝(OD加药孔-OD调零孔)/(OD对照孔-OD调零孔)×100％(3-2)
AAPH诱导的衰老模型的建立以及给药：
用PBS洗两次。然后，用质量分数0.25％的胰酶对细胞进行消化，消化完全后，接着，加入培养液使贴壁细胞悬浮起来，800rmp离心3min以充分去除胰酶。800rmp离心3min。离心后弃去上清，加入新鲜培养液，用吸管轻轻吹打细胞，使其充分悬浮，制成单个细胞悬液，然后进行细胞计数，最终以每孔2mL细胞悬液、2x105个细胞铺于六孔板中，培养过夜使之贴壁。对照组继续培养，PC12细胞加药组和AAPH组均加入终浓度为1mM的AAPH，加药组分别另外加入对应浓度的树舌灵芝乙醇提取物，培养48h后进行染色并检测。
β-半乳糖苷酶染色
利用试剂盒对PC12细胞进行染色。加入一定浓度的树舌灵芝乙醇提取物培养48h后，然后，用200μL的移液枪吸除细胞培养液，用2mL的1x PBS洗涤1次。接着，向每孔加入1mL的稳定液(1x Fixative Solution)，在常温下固定10-15分钟。吸除稳定液，用1x PBS洗涤2次。接着，每孔加入1mL的染色液(β-Galactosidase Staining Solution)进行染色；将6孔板放入干燥的无CO2的37摄氏度培养箱过夜(或室温培养过夜)。在倒置显微镜下观察细胞染色情况，并拍照记录。
树舌灵芝乙醇提取物结果
树舌灵芝粉末经过实施例1后，得率为5.96％。
抗氧化结果
树舌灵芝乙醇提取物对DPPH自由基的清除作用
抗氧化剂对DPPH自由基清除率越高，其抗氧化活性就越强。由图1可以看出，随着树舌灵芝乙醇提取物浓度的增大，DPPH自由基清除率逐渐增高。当树舌灵芝乙醇提取物样品终浓度为0.2mg/mL时，清除率达到93.34％，可见树舌灵芝乙醇提取物有较高的抗氧化活性。样品浓度(X)与DPPH自由基清除率(Y)存在较好的量效关系，它们的回归直线方程为：
Y＝4.0506X+0.1984(R2＝0.9664)和Y＝0.4534X+0.3356(R2＝0.9576)。
IC50数值越小，样品的抗氧化活性越大。用VC做对照，可用IC50值表征树舌灵芝乙醇提取物的抗氧化性大小，由表1可知，VC(IC50＝0.003153)<树舌灵芝(IC50＝0.05759)；可见树舌灵芝提取物的抗氧化活性较强。
表1两种树舌灵芝提取物对DPPH的清除能力
树舌灵芝乙醇提取物对ABTS自由基的清除作用
采用96孔板法，反应体系200μL，运用酶标仪于734nm处测定吸光值，计算ABTS自由基清除率，并绘制自由基清除率-样品质量浓度曲线，结果如图2。从图2中可以看出，随着树舌灵芝乙醇提取物浓度的增大，ABTS自由基清除率逐渐增高，其中，当样品终浓度分别为0.08mg/mL时，清除率达到97.76％，可见树舌灵芝乙醇提取物有较高的抗氧化活性。
IC50数值越小，样品的抗氧化活性越大。用VC做对照，可用IC50值表征这两种树舌灵芝乙醇提取物的抗氧化性大小，由表2可知，VC(IC50＝0.001999)<样品1(IC50＝0.01676)。
表2两种树舌灵芝提取物对ABTS的清除能力
FRAP法检测两种树舌灵芝的抗氧化结果
FeSO4标准曲线的绘制，硫酸亚铁的标准曲线，结果见图3。
树舌灵芝乙醇提取物对硫酸亚铁的还原能力：
用FRAP值来表征树舌灵芝乙醇提取物的抗氧化能力，由图4可知，树舌灵芝乙醇提取物都随着浓度的增大，FRAP值逐渐增长，达到10000；以VC做对照，由图4和图5可知，树舌灵芝乙醇提取物在不同浓度下，呈现的FRAP值和VC的FRAP值有相同的趋势，最高浓度的数值大小相差不大。从自由基清除率实验和FRAP法测定的结果得知，自由基清除率越高，FRAP值越大，两者有一定的相关性。
树舌灵芝乙醇提取物细胞毒性的检测结果
由图6可知，当树舌灵芝乙醇提取物浓度在3.75mg/L以下时，细胞的存活率大于95％，当其浓度大于3.75mg/L时，细胞存活率呈梯度下降，所以可以认为3.75mg/L是最大的安全浓度。
β-半乳糖苷酶染色结果
树舌灵芝样品的β-半乳糖苷酶染色结果
在倒置显微镜下用白光观察染色结果，如图7可知，AAPH组染成蓝色的细胞占大多数，对照组的细胞几乎没有染上蓝色，而不同浓度的药物作用后，染上蓝色的细胞明显低AAPH组，可见，不同浓度的树舌灵芝样品对PC12细胞具有一定的抗衰老作用。
树舌灵芝的抗氧化测定
抗氧化活性的测定结果和测试体系有密切联系，反应原理不一样，评价结果有时存在较大的差异。所以，采用DPPH、ABTS、FRAP三种方法，可以更准确、更标准地反映树舌灵芝的抗氧化能力。本研究通过DPPH和ABTS两种方法实验，发现树舌灵芝随着浓度的增大，清除自由基的能力越强，甚至达到90％以上，通过FRAP法，由图4可得知，树舌灵芝的FRAP值达到1000以上，甚至到10000。当树舌灵芝乙醇提取物的浓度增大，其自由基清除率和FRAP值呈现不断增高的趋势，FRAP值甚至和VC的FRAP值相等。由此说明，树舌灵芝乙醇提取物在相应的浓度下，有较高的抗氧化能力。
树舌灵芝乙醇提取物细胞毒性的检测
采用MTT法确定药物的安全浓度范围，确保药物在该浓度范围内对PC12细胞无影响或者影响较小，可以忽略。由图6可知，树舌灵芝样品的最大安全浓度是3.75mg/L。
树舌灵芝对AAPH诱导的细胞氧化应激的作用
本实验针对PC12细胞采用AAPH作为氧化应激诱导剂来诱导细胞产生衰老模型。AAPH作为一种自由基诱导剂，是一种含氮的水溶性小分子，在生理温度(37℃，pH＝7.0)下，能够分解产生氮分子和两种含碳的自由基。这些含碳的自由基可以快速地与氧气发生反应，生成过氧自由基，且以稳定的速率释放，为建立稳定的氧化应激模型提供了有利的条件。
衰老的细胞在各方面表现出与正常细胞所不同的特性，细胞进入衰老状态后，仍然是存活的，只是细胞的蛋白和基因表达谱发生了很大改变。衰老细胞内，在pH＝6.0的条件下，β-半乳糖苷酶表现出很高的酶活性，我们可以根据β-半乳糖苷酶染色阳性细胞的多少来判断体外培养细胞的衰老程度。如图7，可以看出AAPH组染色阳性细胞的比例明显较多，对照组由于未进行氧化应激诱导，几乎未见衰老细胞的发生。经过树舌灵芝提取物处理的实验组，可看出其染色阳性细胞的比例明显低AAPH模型组，且随着树舌灵芝浓度的增加，染色阳性细胞的数目明显减少。这表明，不同浓度的树舌灵芝对于PC12细胞具有一定程度的抗衰老作用，可以缓解AAPH诱导氧化应激所引起的细胞衰老，且在安全浓度范围内，随着树舌灵芝浓度的增加，其抗衰老作用显著提高。
缩略语
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
Claims (5)
1.树舌灵芝的乙醇提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)、取树舌灵芝，切块，在50℃-60℃下干燥10-14小时，粉碎成粉末状，过40目筛，得到树舌灵芝粉末；
2)、取69g-70g树舌灵芝粉末，加入1400-1600mL的质量分数50％-70％的乙醇溶液，浸泡1至2小时，于80-100℃水浴微沸回流提取4.5-5.5h，滤渣重提2次，合并3次滤液；
3)、减压浓缩滤液至浸膏状，得到流状膏体，加无水乙醇至流状膏体溶解完全，60-80℃水浴5至6小时，然后真空冷冻干燥23-25小时，得到树舌灵芝的乙醇提取物。
2.根据权利要求1所述的树舌灵芝的乙醇提取物的制备方法，其特征在于，步骤2为：
取69g-70g树舌灵芝粉末，加入1400-1600mL的质量分数50％-70％的乙醇溶液，浸泡1至2小时，于80-100℃水浴微沸回流提取4.5-5.5h，滤渣重提2次，合并3次微沸回流的滤液；再超声提取滤渣3次，每次1.5-2.5h，超声功率为100～300W，合并3次超声提取的滤液；将微沸回流得到的滤液与超声提取得到的滤液合并。
3.利用如权利要求1或2所述方法制备所得树舌灵芝乙醇提取物的用途，其特征在于：
用于制备抗氧化和/或抗神经细胞衰老活性的食品和/或药物。
4.根据权利要求3所述的树舌灵芝乙醇提取物的用途：
用于制备缓解对PC12细胞的细胞衰老的抗神经细胞衰老活性的食品和/或药物。
5.根据权利要求3所述的树舌灵芝乙醇提取物的用途：
用于制备清除DPPH自由基的抗氧化活性的食品和/或药物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811166127.5A CN109200069A (zh) | 2018-10-08 | 2018-10-08 | 树舌灵芝乙醇提取物及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811166127.5A CN109200069A (zh) | 2018-10-08 | 2018-10-08 | 树舌灵芝乙醇提取物及其用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109200069A true CN109200069A (zh) | 2019-01-15 |
Family
ID=64983191
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811166127.5A Pending CN109200069A (zh) | 2018-10-08 | 2018-10-08 | 树舌灵芝乙醇提取物及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109200069A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115120622A (zh) * | 2022-07-07 | 2022-09-30 | 江南大学 | 树舌灵芝乙醇提取物在缓解沙门氏菌感染的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103408631A (zh) * | 2013-08-13 | 2013-11-27 | 南京标科生物科技有限公司 | 一种氧化树舌酸d的制备方法 |
| CN104650251A (zh) * | 2015-01-22 | 2015-05-27 | 孙继勇 | 灵芝多糖醇的提取方法 |
| CN106901326A (zh) * | 2017-03-15 | 2017-06-30 | 福建农林大学 | 一种树舌灵芝全活性物质的制备与应用 |
| CN107669711A (zh) * | 2017-11-23 | 2018-02-09 | 广东省微生物研究所 | 树舌提取物的制备方法及其用途 |
-
2018
- 2018-10-08 CN CN201811166127.5A patent/CN109200069A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103408631A (zh) * | 2013-08-13 | 2013-11-27 | 南京标科生物科技有限公司 | 一种氧化树舌酸d的制备方法 |
| CN104650251A (zh) * | 2015-01-22 | 2015-05-27 | 孙继勇 | 灵芝多糖醇的提取方法 |
| CN106901326A (zh) * | 2017-03-15 | 2017-06-30 | 福建农林大学 | 一种树舌灵芝全活性物质的制备与应用 |
| CN107669711A (zh) * | 2017-11-23 | 2018-02-09 | 广东省微生物研究所 | 树舌提取物的制备方法及其用途 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| EL-ÇAYAN G, ZTÜRK M, DURU M E, ET AL.: "Phytochemical investigation, antioxidant and anticholinesterase activities of Ganoderma adspersum", 《INDUSTRIAL CROPS & PRODUCTS》 * |
| YOO-HWAN LEE: "Ethanol Extract of Ganoderma lucidum Augments Cellular Anti-oxidant Defense through Activation of Nrf2/HO-1", 《J PHARMACOPUNCTURE》 * |
| 塞冬: "《自由基与健康》", 30 September 2012 * |
| 林倩倩等: "树舌灵芝中三萜类化合物的提取工艺研究 ", 《安徽农业科学》 * |
| 贾瑞博: "树舌灵芝总三萜提取工艺优化及其抗氧化作用研究", 《应用化工》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115120622A (zh) * | 2022-07-07 | 2022-09-30 | 江南大学 | 树舌灵芝乙醇提取物在缓解沙门氏菌感染的应用 |
| CN115120622B (zh) * | 2022-07-07 | 2023-06-13 | 江南大学 | 树舌灵芝乙醇提取物在缓解沙门氏菌感染的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104274355B (zh) | 含有草绿盐角草和芦根的复合提取物的化妆品组合物 | |
| CN111454844B (zh) | 一种灵芝新菌种、基于该灵芝菌制备的灵芝多糖及抗衰老化妆品 | |
| CN103919712B (zh) | 北虫草提取物及其制备方法和应用 | |
| CN108392500B (zh) | 一种制备灵芝三萜的方法 | |
| CN108530549B (zh) | 一种提取灵芝菌丝体中多糖的方法 | |
| CN109528568A (zh) | 一种具有延缓衰老和美白功效的组合物及其制备方法 | |
| CN102242069A (zh) | 一种蝉拟青霉菌株及其应用 | |
| CN108530430B (zh) | 酯型儿茶素吡咯烷生物碱及其制备方法和应用 | |
| Radhika et al. | Pharmacognostic and preliminary phytochemical evaluation of the leaves of Bixa orellana | |
| CN107722131A (zh) | 一种具有显著辅助抗肿瘤活性的全灵芝孢子粉精制多糖及其制备方法和应用 | |
| CN113288831B (zh) | 灵芝和/或人参在制备抗炎症因子产品方面的用途及其护肤品或化妆品 | |
| CN109200069A (zh) | 树舌灵芝乙醇提取物及其用途 | |
| CN110755344A (zh) | 灵芝-黄精双向发酵工艺及组合物 | |
| CN106434380A (zh) | 一种利用黄芪培养冬虫夏草菌的方法及其应用 | |
| CN110090209A (zh) | 刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用 | |
| CN110123946A (zh) | 一种利用啤酒酵母菌固态发酵黄精的工艺方法 | |
| CN108938677A (zh) | 一种具有治疗乳腺癌作用的匍枝马尾藻提取物及其制备方法与应用 | |
| CN105394770B (zh) | 具有抗氧化协同增效作用的桂花茶在制备抗癌保健品或食品中的应用 | |
| CN108029952A (zh) | 一种用于培养灵芝菌丝体的培养基及制成的灵芝菌丝体 | |
| CN103333770A (zh) | 一种添加中药材的纯种药红曲的制备方法 | |
| CN107137431A (zh) | 一种灵芝的加工方法 | |
| CN106924297A (zh) | 一种粒毛盘菌胞内黑色素作为急性肝损伤药物的用途 | |
| CN113209193A (zh) | 一种具有抗氧化功能的中药组合物及其应用 | |
| CN113413326A (zh) | 一种大米酒糟多肽面膜及制备方法和应用 | |
| CN107308179A (zh) | 一种附子甘草多糖提取物及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190115 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |