CN110090209A - 刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用。本发明采用体外动物模型和体外细胞模型，以刺芒柄花素来治疗动物，观察刺芒柄花素对于非酒精性脂肪肝、肥胖、胰岛素抵抗及脂代谢紊乱等代谢综合症的改善作用。实验证明，刺芒柄花素明显降低能够使得非酒精性脂肪肝患病机体的体重、肝重/体重指数、肝脏甘油三酯（TG）含量、肝脏的脂质沉积、肝功能损伤指标‑谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)，同时改善胰岛素抵抗。经血生化检测，发现刺芒柄花素还可以降低HFD小鼠的血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和低密度脂蛋白（LDL‑C）的水平，改善脂代谢紊乱。可见刺芒柄花素对于治疗非酒精性脂肪肝具有重要作用。

Description

刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用

技术领域

本发明涉及刺芒柄花素在医学中的新用途，具体地说涉及刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用。

背景技术

非酒精性脂肪肝又称非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)，是一种肝组织学改变与酒精性肝病相类似，但无过量饮酒史的临床病理综合征。其病理变化随病程的进展而表现有单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬化。近年来NAFLD的发病率呈明显的上升趋势，随着肥胖及其相关代谢综合征全球化的流行趋势，非酒精性脂肪性肝病现已成为欧美等发达国家和我国富裕地区慢性肝病的重要病因，普通成人NAFLD患病率10％～30％。

目前临床治疗非酒精性脂肪肝并没有特效药，由于脂肪肝不作为一个独立疾病存在，目前脂肪肝的治疗通常根据其发病原因，如酒精过量摄入、肥胖、糖尿病等，针对其原发病因进行治疗，并坚持体育锻炼和合理饮食，药物仅起到辅助治疗的作用。但是，由于治疗原发类疾病的药物(如降脂类药物、降糖类药物、减肥药等)存在严重程度不等的副作用，在治疗脂肪肝的同时，可能增加心脏和肾脏的毒性，且其中一些药物可能存在加重肝脏代谢负担，增加脂质在肝脏中沉积的作用。因此寻找安全有效的治疗药物就具有一定的社会价值。

据研究，刺芒柄花素(Formononetin，FMN)是一种异黄酮类黄酮，广泛分布于黄芪、苦参、甘草、葛根等豆科植物中，具有抗肿瘤、清除自由基、降脂和改善雌激素水平等药理活性。目前为止，尚未有将刺芒柄花素用于研究治疗非酒精性脂肪肝的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种刺芒柄花素的新用途。

本发明所提供的新用途具体为刺芒柄花素在如下（A）（B）中的应用：

(A)制备用于治疗非酒精性脂肪肝的产品；

(B)治疗非酒精性脂肪肝。

更加具体的，为如下任一中的应用：

(a) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体体重的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体体重；

(b) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数；

(c) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量；

(d) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积；

(e) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)；

(f) 制备用于改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗的产品，或改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗；

(g) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量；

(h) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量；

(i) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平；

(j) 制备用于改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱的产品，或改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱。

相应的，本发明还请求保护一种产品，其活性成分为刺芒柄花素；所述产品具有如下功能中的至少一种：

(a1) 治疗非酒精性脂肪肝；

(a2) 降低非酒精性脂肪肝患病机体体重；

(a3) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数；

(a4) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量；

(a5) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积；

(a6) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)；

(a7)改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗；

(a8)降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量；

(a9)降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量；

(a10)降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平；

(a11)改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱。

在本发明中，所述机体具体为小鼠。相应的，所述非酒精性脂肪肝为由于高脂饲料（HFD）诱导的小鼠非酒精性脂肪肝。

其中，所述产品可为药物。

在本发明中，所述刺芒柄花素（FMN）的结构式如式I所示：

式I。

在本发明的实施例中，所述刺芒柄花素的用量约为100 mg/kg/day。

有益效果：本发明实验证明，刺芒柄花素明显降低能够使得非酒精性脂肪肝患病机体的体重、肝重/体重指数、肝脏甘油三酯（TG）含量、肝脏的脂质沉积、肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)，同时改善胰岛素抵抗。经血生化检测，发现刺芒柄花素还可以降低HFD小鼠的血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和低密度脂蛋白（LDL-C）的水平，改善脂代谢紊乱。可见刺芒柄花素对于治疗非酒精性脂肪肝具有重要作用。

附图说明

图1为FMN治疗16周可以显著降低HFD小鼠的体重。ND为正常饲料喂养；HFD：高脂饲料喂养。

图2为FMN治疗16周可以显著降低HFD小鼠的体重增加。

图3为FMN治疗对于小鼠的摄食量没有显著影响。

图4为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的肝脏/体重指数。

图5为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的肝脏甘油三酯（TG）的含量。

图6为各组小鼠肝脏大体形态、肝脏H&E染色和肝脏油红O染色情况。

图7为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的血清中甘油三酯（TG）的含量。

图8为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的血清中胆固醇（TC）的含量。

图9为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的血清中低密度脂蛋白的水平。

图10为FMN治疗16周可以显著降低小鼠的血清中肝功能损伤指标-谷草转氨酶AST和谷丙转氨酶ALT。

图11为FMN治疗16周可以显著改善小鼠的全身性胰岛素抵抗。

图12为体外利用HepG2细胞和原代分离小鼠肝细胞建立游离脂肪刺激脂质沉积的细胞模型，检测不同剂量FMN对于细胞增殖的影响，发现20uM以下FMN处理，对于细胞没有毒性。

图13为体外利用HepG2细胞和原代分离小鼠肝细胞，发现FMN可以剂量依赖地降低游离脂肪酸刺激导致的肝细胞TG含量的增加。

图14为体外利用HepG2细胞和原代分离小鼠肝细胞，发现FMN可以剂量依赖地降低游离脂肪酸刺激导致的肝细胞脂质沉积。

图15为本发明研究提出机制模型。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

本发明采用体外动物模型和体外细胞模型，以刺芒柄花素来治疗动物，观察刺芒柄花素对于非酒精性脂肪肝、肥胖、胰岛素抵抗及脂代谢紊乱等代谢综合症的改善作用。

实施例1：体内动物模型实验

一、高脂饲料（HFD）饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝模型的制备

1.1 试验分组

本发明采用C57BL/6小鼠给予高脂饲料（HFD）16周的方法建立非酒精性脂肪肝动物模型，通过灌胃给予FMN方式验证其疗效；

具体过程：采用高脂饲料（HFD）喂养小鼠，HFD中脂肪提供60%饲料总热量。HFD诱导的脂肪肝被公认为是NAFLD的经典模型之一，长期（高于2个月）喂食HFD的啮齿类动物将自然进展为肝脏脂肪变性，同时发生肥胖、高脂血症、胰岛素抵抗，较少发生炎症与纤维化。选取24只C57BL/6J雄性小鼠，经适应性喂养7天后，随机纳入正常饲养（ND）组、正常饲养+刺芒柄花素（ND+FMN）组、高脂饲料（HFD）组、高脂饲料+刺芒柄花素（HFD+FMN）组，每组6只小鼠。连续16周给予ND组小鼠正常饲料（啮齿类动物维持饲料）、HFD组小鼠高脂饲料。ND+FMN组和HFD+FMN组小鼠在喂养基础上进行刺芒柄花素灌胃给药；刺芒柄花素小鼠灌胃量为100 mg/kg/day，灌胃体积为0.1 mL/10 g；同时以蒸馏水灌胃ND组、HFD组，体积与HFD+FMN组一致，均为0.1 mL/10 g。

动物处死取材

取材前过夜禁食但不禁水，取材当日以1 %戊巴比妥钠、50 mg/kg、体积50 μL/10 g腹腔注射麻醉小鼠。待小鼠充分麻醉后，方可进行后续解剖。心脏穿刺取血：小鼠四肢摊平，固定在鼠板四个角上，于正中线逐层剪开胸壁，右手持1 mL注射器，针尖斜面朝上，与腹部形成20°夹角小心刺入心尖或心脏搏动最强处心肌，待针尖完全没入心肌，即可回抽血液，取血至0.8-1 mL，拔除针头，经注射器钝头将全血缓慢贴壁推入1.5 mL EP管，冰上暂时存放。肝脏采摘：沿正中线剪开腹部皮肤、肌层、腹膜后，左手轻轻托起小鼠上半部身体，充分暴露肝脏上极，右手持眼科剪由上向下小心分离下腔静脉、韧带、十二指肠、空肠、腹腔脂肪，至肝脏完全游离，然后右手持直平镊钳夹肝脏上极韧带，摘取完整肝脏，于生理盐水清洗血污2遍后，放置于滤纸上，吸净水分。

二、作用研究

2.1 对于摄食量、体重等常规指标的影响

a)每日观察小鼠反应性、毛发颜色、饮食及排泄状况。每周测定小鼠体重。于第6周测定小鼠摄食量；

b)结果分析：如图1、2、3所示，FMN治疗对动物的摄食量没有明显影响，却可以显著降低HFD小鼠的体重增长，起到减肥的效果。

对于非酒精性脂肪肝的肝重指数的影响

a)测定小鼠肝重和体重的比值，即肝重指数；

b)结果分析：如图4所示，FMN治疗可以显著降低HFD小鼠的肝重指数，提示其具有治疗脂肪肝的效果。

对于非酒精性脂肪肝的肝脏甘油三酯（TG）的含量的影响

a)通过试剂盒法测定肝脏组织中甘油三酯TG的含量；

b)测定方法：小鼠肝脏TG含量按照南京建成公司TG测试商品试剂盒说明书进行测定。（1）组织样品制备：天平称取并记录肝脏组织重量后，将肝脏组织置入1.5 mL EP管，按照重量（g）：体积（mL）=1：9比例，再加入100 %乙醇，将1.5 mL EP管插入10 mL小烧杯冰面上，进行冰上机械匀浆，继而以转速1000 rpm、10 min、4 ℃离心，将上清移入新1.5 mL EP管，完成组织样品制备；（2）加样：设置空白孔（即调零孔，加入去离子水，但不加入标准品和样本）、标准孔、样本孔，逐孔加入去离子水2.5 μL、标准品（含有TG 2.26 mmol/gprot）2.5 μL、样品2.5 μL，以上均设置1个复孔；然后向以上各孔，依次加入甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶（glycerophosphate oxidase peroxidase，GPO-PAP）反应液250 μL；（3）酶促反应：37 ℃温箱反应10min后，酶标仪510nm波长处，测定各孔OD值，根据OD值计算组织中TG含量；

c)结果分析：如图5所示，FMN治疗16周可以显著降低小鼠的肝脏甘油三酯（TG）的含量。

对于非酒精性脂肪肝的肝脏形态及病理组织切片结果的观察

a)通过HE染色和油红O染色测定FMN治疗对于非酒精性脂肪肝的影响；

b)苏木素伊红（hematoxylin and eosin，H&E）染色：（1）制备肝脏石蜡切片：统一取小鼠肝中叶中间2/3以及肝左叶，置于包埋盒后浸入10 %中性福尔马林，过夜固定，继续脱水、透明，顺序为50 %乙醇1 h→75 %乙醇1 h→85 %乙醇1 h→95 %乙醇1 h→100 %乙醇30min→100 %乙醇30 min→100 %乙醇+二甲苯（1：1，V/V）45 min→二甲苯I 30 min→二甲苯II 30 min，三次浸蜡，二甲苯+石蜡（1：1，V/V）45 min→石蜡1 h→石蜡过夜，制备肝脏石蜡包埋块后，制备厚度5 μm的肝脏石蜡切片，75 ℃温箱烘烤1 h后，室温保存备用；（2）取出待染肝脏石蜡切片，依次移入二甲苯与梯度乙醇进行脱蜡与水化，顺序如下：二甲苯I 15 min→二甲苯II 15 min→100 %乙醇I 5 min→100 %乙醇II 5 min→95 %乙醇5 min→75 %乙醇5 min→50 %乙醇5 min→流水贴染色缸侧边（流水勿触及切片，防止脱片）冲洗5 min；（3）切片浸入Mayer苏木素8 min，流水贴染色缸侧边冲洗1 min；（4）切片浸入0.5 %盐酸酒精30 sec，流水贴染色缸侧边冲洗10 min，至细胞核返蓝；（5）切片浸入1 %伊红7 min，流水贴染色缸侧边冲洗1 min，洗去浮色。（6）切片进行脱水与透明，顺序如下：50 %乙醇5 min→75 %乙醇5 min→95 %乙醇5 min→100 %乙醇I 5 min→100%乙醇II 5 min→二甲苯I 15min→二甲苯II 15 min；（7）封片：中性树胶封片，静置至树胶凝固、二甲苯完全挥发；（8）白光显微镜下观察与拍照；

c)油红O染色：（1）实验前准备工作：统一取小鼠肝中叶下1/3，将其完全浸入OCT包埋剂，于液氮-空气交界面急速冷冻至OCT完全凝固，制备肝脏冰冻组织包埋块，-20 ℃保存备用。切片当日，于-20 ℃冰冻切片机进行肝脏切片，厚度8 μm，肝脏冰冻切片于-80 ℃冰箱保存备用；配制新鲜油红O工作液：按照油红O储存液：去离子水=3：2（V/V）比例，配制油红O工作液；（2）取出肝脏冰冻组织切片于室温放置30 min，浸入丙酮10 sec，利于保持肝脏组织形态；（3）切片浸入60 %异丙醇预处理10 sec，利于后续油红O染液导入细胞，利于胞内中性脂肪着色；（4）切片浸入油红O工作液10 min，对肝细胞内中性脂肪进行染色；（5）切片浸入60 %异丙醇10 sec，去除多余染液（此时应在白光显微镜下观察以确定中止时间，防止中性脂肪过度褪色；如果染色较深，可以再次浸入60 %异丙醇至红色深浅适中为至）；随后浸入自来水5 min，再重复2次，洗去浮色；（6）细胞核染色：切片侧边立于滤纸上，控干多余水分，然后浸入Mayer苏木素，细胞核染色8 min，白光显微镜下观察以确定终止时间；然后浸入自来水10 min，洗去浮色；（7）水性封片：以10 %甘油-PBS进行封片；（8）白光显微镜下观察并拍照，随机不连续采集10个视野，以Image-Pro Plus软件分析并测定红色的脂肪阳性面积；

d)结果分析：如图6所示，肝脏大体形态显示，ND喂养小鼠肝脏形态正常，色泽红润，质地柔软，HFD喂养小鼠肝脏体积异常增大，色泽土黄，质地较硬，表面油腻感较显著，提示该组小鼠产生脂肪变性；给予刺芒柄花素治疗后，肝脏体积减小，色泽、质地均有显著改善，触之无油腻感。肝脏H&E染色结果显示，HFD喂养小鼠肝细胞出现较为明显的气球样变，脂肪变性面积明显高于ND喂养小鼠；刺芒柄花素治疗后，肝细胞气球样变性程度、脂肪变性面积明显减轻；与肝脏H&E染色结果一致，肝脏油红O染色结果显示，HFD喂养小鼠肝细胞内红色脂滴阳性面积明显高于ND喂养小鼠；经过16周刺芒柄花素灌胃治疗，肝细胞脂滴红色阳性面积明显减少。

对于血脂代谢紊乱的治疗作用研究

a)通过全自动生化分析仪测定动物血清中血脂及肝功相关指标；

b)结果分析：如图7-11所示，HFD喂养小鼠由于肝细胞内脂质持续蓄积，氧化应激等有害产物过度积聚导致肝细胞损害，血清ALT、AST水平高于ND喂养小鼠；给予刺芒柄花素治疗后，血清ALT、AST水平向正常水平恢复，表示刺芒柄花素具有肝脏保护作用；与ND喂养小鼠相比，HFD喂养小鼠血清TG、TC、LDL-C水平明显升高，血清HDL-C水平明显下降，表明小鼠体内脂肪代谢出现异常；给予刺芒柄花素治疗后，小鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低，但对HDL-C水平无影响。

对于胰岛素抵抗的治疗研究

a)通过腹腔注射葡萄糖耐量实验（IPGTT）测定胰岛素抵抗情况；

b)测定方法：于第16周（取材前），进行小鼠IPGTT。（1）准备工作：高脂饲料动物实验的各组小鼠过夜禁食不禁水;（2）腹腔注射葡萄糖：以1 mL注射器腹腔注射小鼠10 %葡萄糖工作液，注射体积为0.1 mL/10 g;（3）测定血糖：以手持式血糖仪测定鼠尾静脉全血血糖，测定时间点为注射前（记录为0 min），以及注射后15 min、30 min、60 min、90 min、120 min，记录血糖值;（4）使用Graphpad软件计算每只小鼠的曲线下面积（area under the curve，AUC），进行各组间统计比较；

c)结果分析：如图12所示，HFD喂养小鼠IPGTT的AUC高于正常饲料喂养小鼠，在腹腔糖耐量实验中表现出明显的胰岛素抵抗。给予刺芒柄花素治疗后，小鼠糖耐量恢复，胰岛素敏感性得到改善。

实施例2：体外细胞模型实验

1)选用HepG2肝癌细胞系和原代分离的小鼠肝细胞，以1 mM FFAs刺激HepG2细胞、小鼠原代肝细胞24h，成功建立细胞脂肪变性模型后，再以刺芒柄花素（20μM）孵育24 h，同时设置BSA组（以含1 % BSA、不含胎牛血清的DMEM低糖培养基培养HepG2细胞）。药物干预结束后，收集细胞与细胞蛋白，后期检测细胞内TG、脂滴含量变化。

2)脂滴染色：（1）细胞同步化：将HepG2细胞、原代小鼠肝细胞接种于96孔板（2×103/每孔）；置37 ℃、5 % CO2培养24 h，更换DMEM低糖完全培养基（不含胎牛血清），培养12h，使细胞同步于G0期。（2）加药：纳入PA组、PA+糖肾方组的HepG2细胞、原代小鼠肝细胞，更换含0.3 mM PA DMEM低糖完全培养基，每孔200 μL；置37℃、5% CO2培养箱中培养24h。肝细胞脂肪变性成功诱导后，PA +糖肾方组分别加入含25μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL糖肾方的新培养基（含0.3 mM PA DMEM低糖完全培养基），每孔200μL；继续于37 ℃、5 % CO2培养箱中培养24 h。纳入BSA组的HepG2细胞、原代小鼠肝细胞，以含0.3% BSA DMEM低糖完全培养基培养细胞。以上各组均设置5个复孔。（3）固定：PBS浸洗HepG2细胞、原代小鼠肝细胞5min，重复2次；加入4%中性多聚甲醛，每孔200μL，4℃固定10min；PBS浸洗细胞5min，重复2次。（4）脂滴染色：吸弃PBS，加入1μg/mL BODIPY493/503工作液，每孔200μL，在37℃条件下避光孵育15 min；PBS浸洗细胞5min，再重复浸洗2次。（5）细胞核染色：吸弃PBS，加入DAPI（1μg/μL），每孔200 μL，在室温条件下避光孵育5min；PBS浸洗细胞5min，再重复浸洗2次。（6）使用宽场高内涵筛选仪，采集96孔板荧光图片与绿色积分荧光强度信息，并使用仪器配套软件分析脂滴染色的绿色积分荧光强度。细胞TG含量按照南京建成公司TG测试商品试剂盒说明书进行测定。

3)结果分析：如图12-14所示，刺芒柄花素干预可以明显降低造模情况下肝细胞的脂质沉积。

综上，结果发现FMN对正常饲料（NC）喂养小鼠和HFD小鼠的摄食量没有明显影响，却可以明显降低HFD小鼠的体重、肝重/体重指数、肝脏甘油三酯（TG）含量、肝脏的脂质沉积、肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)，同时改善胰岛素抵抗。血生化检测发现FMN还可以降低HFD小鼠的血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和低密度脂蛋白（LDL-C）的水平，改善脂代谢紊乱。除了体内动物模型以外，还建立了2种肝细胞脂质沉积的体外细胞模型（包括肝癌细胞HepG2+棕榈酸PA模型， 和原代分离的小鼠肝细胞+棕榈酸PA模型），发现FMN可以剂量依赖地降低肝细胞的脂质沉积。结合图15，相关机制研究发现FMN通过诱导肝细胞脂质自噬、改善自噬流，从而减少肝细胞脂质沉积、改善非酒精性脂肪肝。

Claims (8)

1.刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，如下（A）（B）中的应用：

(A)制备用于治疗非酒精性脂肪肝的产品；

(B)治疗非酒精性脂肪肝。

2.如权利要求1所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，为如下任一中的应用：

(a) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体体重的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体体重；

(b) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数；

(c) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量；

(d) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积；

(e) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)；

(f) 制备用于改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗的产品，或改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗；

(g) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量；

(h) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量；

(i) 制备用于降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平的产品，或降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平；

(j) 制备用于改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱的产品，或改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱。

3.如权利要求1或2任一所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，涉及一种产品，其活性成分为刺芒柄花素；所述产品具有如下功能中的至少一种：

(a1) 治疗非酒精性脂肪肝；

(a2) 降低非酒精性脂肪肝患病机体体重；

(a3) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝重/体重指数；

(a4) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏甘油三脂(TG)含量；

(a5) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝脏内脂质沉积；

(a6) 降低非酒精性脂肪肝患病机体肝功能损伤指标-谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)；

(a7)改善非酒精性脂肪肝患病机体胰岛素抵抗；

(a8)降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中甘油三酯(TG) 的含量；

(a9)降低非酒精性脂肪肝患病机体血清中胆固醇(TC)的含量；

(a10)降低非酒精性脂肪肝患病机体低密度脂蛋白（LDL-C）的水平；

(a11)改善非酒精性脂肪肝患病机体脂代谢紊乱。

4.如权利要求2或3任一所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，所述机体具体为小鼠。

5.如权利要求4所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，所述非酒精性脂肪肝为由于高脂饲料（HFD）诱导的小鼠非酒精性脂肪肝。

6.如权利要求1或3所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，所述产品可为药物。

7.如权利要求1-6任一所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，在本发明中，所述刺芒柄花素（FMN）的结构式如式I所示：

式I。

8.如权利要求1-6任一所述的刺芒柄花素在治疗非酒精性脂肪肝中的应用，其特征在于，所述刺芒柄花素的用量约为100 mg/kg/day。