CN109030837A - 血液样本的判断方法、以及血液样本分析装置 - Google Patents

Abstract

本发明的技术问题为提供一种能够判断受检者的血液样本是否是包括直接抗凝血药的血液样本的手段。本发明使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂，测定受检者的血液样本、正常血液样本和这些混合得到的混合样本的各自的凝固时间，从这些凝固时间获取第1和第2指标值，并基于这些指标值进行该受检者的血液样本的判断，由此解决上述技术问题。

Description

血液样本的判断方法、以及血液样本分析装置

技术领域

本发明涉及一种血液样本的判断方法。本发明还涉及一种用于分析血液样本的装置。

背景技术

狼疮抗凝物(LA)是干扰具有磷脂依赖性的凝固反应的自身抗体，其在呈现出血栓形成、妊娠并发症的抗磷脂抗体综合征的患者中检测出来。LA干扰具有磷脂依赖性的凝固反应所必须的磷脂，因此在LA阳性患者的血液中凝固时间延长。另一方面，在配与了华法林等抗凝血药的患者血液中凝固时间也延长。因此，为了正确地检测出LA阳性患者的血液样本，需要判别包括LA的血液样本和包括抗凝血药的血液样本。但是，在通常的凝固检查中难以区分两者。

受检者疑似为LA阳性时，进行混合试验并将其作为LA的检查。在混合试验中，混合受检者的血浆和正常血浆并测定得到的混合血浆的凝固时间。受检者为LA阳性患者时，即使进行混合试验凝固时间的延长也不会改善。还已知有一种方法，在这种方法中，从受检者的血浆、正常血浆和混合血浆的凝固时间算出循环抗凝物指数（Index of CirculatingAnticoagulant，ICA）、狼疮比率（Lupus Ratio，LR）值等用于定量评价混合试验的结果的指标值，基于该指标值检测出LA。另外，在LA的确认试验中，确认凝固时间的延长是否依赖于磷脂。具体而言，使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂测定凝固时间，基于由试剂得到的凝固时间的比确认依赖于磷脂浓度的凝固时间的延长，检测出包括LA的样本。

例如，在专利文献1中记载有组合混合试验和磷脂依赖性的确认试验判别了包括LA的样本和包括华法林的样本。具体而言，使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂来测定混合血浆和正常血浆的凝固时间，通过从这些凝固时间算出的LR值判别LA阳性患者的血浆和配与了华法林的患者的血浆。

在先技术文献

专利文献

专利文献1 美国专利申请第2004/091952号说明书。

发明内容

发明要解决的技术问题

以往，经常会使用华法林作为抗凝血药，但是近几年，也会使用有与华法林不同的作用机制的新的抗凝血药。那种抗凝血药与凝固因子结合，表现出直接干扰该凝固因子所介导的凝固反应的作用。以下也将有直接干扰凝固反应的作用的抗凝血药称为“直接抗凝血药”或“DAC”。在配与了DAC的患者的血液样本中凝固时间也延长。但是，用以往的方法难以进行包括DAC的样本和包括LA的样本的判别。如果被配与了DAC的受检者的血液样本被错误判断为包括LA的样本的话，可能会对该受检者进行多余的抗凝固疗法。多余的抗凝固疗法会增大出血风险。因此，判别包括DAC的血液样本和包括LA的血液样本对临床来说很重要。

另一方面，考虑到检查的成本等的话，那种判别优选为不需要用于检测出DAC的特别的试剂等。因此人们希望开发出能够通过以往的凝固时间测定试剂来判别包括DAC的血液样本和包括LA的血液样本的手段。

解决技术问题的技术手段

因此，本发明的第1形态提供一种血液样本的判断方法，在该血液样本的判断方法中包括以下工序：获取作为受检者的血液样本的凝固时间的第1凝固时间、作为正常血液样本的凝固时间的第2凝固时间、以及作为混合该受检者的血液样本和该正常血液样本得到的混合样本的凝固时间的第3凝固时间的工序；获取作为该受检者的血液样本的凝固时间的第4凝固时间、作为该正常血液样本的凝固时间的第5凝固时间、以及作为该混合样本的凝固时间的第6凝固时间的工序；基于该第1凝固时间、该第2凝固时间和该第3凝固时间获取第1指标值，并基于该第4凝固时间、该第5凝固时间和该第6凝固时间获取第2指标值的工序；基于该第1指标值和该第2指标值判断该受检者的血液样本是否是包括直接抗凝血药的血液样本的工序。在该方法中，该第1凝固时间、该第2凝固时间和该第3凝固时间是使用第1凝固时间测定试剂测定出的凝固时间，该第4凝固时间、该第5凝固时间和该第6凝固时间是使用第2凝固时间测定试剂测定出的凝固时间，该第1凝固时间测定试剂包括磷脂，该第2凝固时间测定试剂包含磷脂且浓度高于该第1凝固时间测定试剂。

本发明的第2形态提供一种血液样本分析装置，该血液样本分析装置具有制备包括血液样本和凝固时间测定试剂的测定试样并从制备的该测定试样获取凝固时间的测定部和基于该凝固时间进行血液样本的分析的分析部。在该装置中，该测定部进行以下作业：由受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂制备第1测定试样来测定第1凝固时间，由正常血液样本和该第1凝固时间测定试剂制备第2测定试样来测定第2凝固时间，由混合该受检者的血液样本与该正常血液样本得到的混合样本和该第1凝固时间测定试剂制备第3测定试样来测定第3凝固时间，由该受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂制备第4测定试样来测定第4凝固时间，由该正常血液样本和该第2凝固时间测定试剂制备第5测定试样来测定第5凝固时间，由该混合样本和该第2凝固时间测定试剂制备第6测定试样来测定第6凝固时间。该分析部基于该第1凝固时间、该第2凝固时间和该第3凝固时间获取第1指标值，并基于该第4凝固时间、该第5凝固时间和该第6凝固时间获取第2指标值。在此，该第1凝固时间测定试剂包括磷脂，该第2凝固时间测定试剂包含磷脂且浓度高于该第1凝固时间测定试剂。

本发明的第3形态提供一种血液样本分析装置，该血液样本分析装置具有制备包括血液样本和凝固时间测定试剂的测定试样并由制备的该测定试样获取凝固时间的测定部和基于该凝固时间进行血液样本的分析的分析部。在该装置中，该测定部进行以下作业：从受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂制备第1测定试样来测定第1凝固时间，由混合该受检者的血液样本与正常血液样本得到的混合样本和该第1凝固时间测定试剂制备第3测定试样来测定第3凝固时间，由该受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂制备第4测定试样来测定第4凝固时间，由该混合样本和该第2凝固时间测定试剂制备第6测定试样来测定第6凝固时间。该分析部基于该第1凝固时间、该第3凝固时间、以及该第1凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间，即第2凝固时间获取第1指标值，并基于该第4凝固时间、该第6凝固时间、以及所述第2凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间，即第5凝固时间获取第2指标值。在此，该第1凝固时间测定试剂包括磷脂，该第2凝固时间测定试剂包含磷脂且浓度高于该第1凝固时间测定试剂。

发明效果

通过本发明能够得到能够判别包括DAC的血液样本(以下也称为“DAC样本”)、包括LA的血液样本(以下也称为“LA样本”)、凝固因子缺乏的血液样本(以下也称为“凝固因子缺乏样本”)的2个指标值。通过这些指标值能够判断受检者的血液样本是否是DAC样本。

附图的简单说明

图1是血液样本分析装置的外观结构的斜视图；

图2是从上侧看血液样本分析装置的测定部内部时的平面图；

图3是血液样本分析装置的测定部的结构的示图；

图4是测定装置所具有的灯单元的结构的示图；

图5A是测定装置所具有的检测部的结构的示图；

图5B是测定装置所具有的检测部的结构的示图；

图5C是测定装置所具有的检测部的结构的示图；

图5D是测定装置所具有的检测部的结构的示图；

图6是血液样本分析装置的控制装置的硬件结构的示图；

图7A是血液样本分析装置的血液样本的测定处理的流程图；

图7B是测定数据的分析处理以及分析结果的显示处理的次序的流程图；

图8是显示血液样本分析装置的测定结果的界面的一例的示图；

图9是显示血液样本分析装置的测定结果的界面的一例的示图；

图10A是血液样本分析装置的血液样本的分析处理的流程图；

图10B是血液样本分析装置的血液样本的分析处理的流程图；

图11A是使用磷脂浓度低的凝固时间测定试剂时的DAC样本、LA样本、以及凝固因子缺乏样本中的第1指标值(ICA)的分布的示图；

图11B是使用磷脂浓度高的凝固时间测定试剂时的DAC样本、LA样本、以及凝固因子缺乏样本中的第2指标值(ICA)的分布的示图。

发明的实施方式

[1．血液样本的判断方法]

本实施方式的血液样本的判断方法(以下也称为“判断方法”)是判断受检者的血液样本是否是DAC样本的方法。如上所述，直接抗凝血药(DAC)指的是与凝固因子结合，直接干扰该凝固因子所介导的凝固反应的药剂。能够口服的直接抗凝血药称作直接口服抗凝血药(DOAC)。关于DAC，Xa因子抑制剂和凝血酶抑制剂在该技术中众所周知。Xa因子抑制剂能够与Xa因子直接结合，其干扰从凝血素向凝血酶转换。Xa因子抑制剂例如能够列举出利伐沙班（Rivaroxaban）、阿哌沙班（Apixaban）、依杜沙班（Edoxaban）、贝曲沙班（Betrixaban）、奥米沙班（Otamixaban）、雷扎沙班（Razaxaban）、Darexaban、Letaxaban、Eribaxaban、Antistasin等。凝血酶抑制剂能够与凝血酶直接结合，其干扰凝血酶所介导的纤维蛋白原活化。凝血酶抑制剂例如能够列举出达比加群（Dabigatran）、比伐卢定（bivalirudin）、水蛭素（hirudin）、来匹卢定（Lepirudin）、地西卢定（desirudin）、阿加曲班（Argatroban）、美拉加群（melagatran）、希美加群（Ximelagatran）等。

在本实施方式的判断方法中，获取受检者的血液样本、正常血液样本、以及混合那些得到的混合样本的各自的凝固时间。在本说明书中，所谓“获取凝固时间”意味着使用凝固时间测定试剂实际测定血液样本的凝固时间，以及获取使用凝固时间测定试剂预先测定并记录的血液样本的凝固时间的值两者。

在本实施方式中，上述血液样本的凝固时间是分别使用第1凝固时间测定试剂和第2凝固时间测定试剂测定出的凝固时间。第1凝固时间测定试剂是包括磷脂的凝固时间测定试剂，第2凝固时间测定试剂是包含磷脂且浓度高于该第1凝固时间测定试剂的凝固时间测定试剂。以下将使用第1凝固时间测定试剂测定出的受检者的血液样本的凝固时间称为“第1凝固时间”，将使用该试剂测定出的正常血液样本的凝固时间称为“第2凝固时间”，将使用该试剂测定出的混合样本的凝固时间称为“第3凝固时间”。另外，将使用第2凝固时间测定试剂测定出的受检者的血液样本的凝固时间称为“第4凝固时间”，将使用该试剂测定出的正常血液样本的凝固时间称为“第5凝固时间”，将使用该试剂测定出的混合样本的凝固时间称为“第6凝固时间”。

受检者的血液样本是采自受检者的血液(全血)或由该血液制备的血浆即可。在这其中，优选为血浆，更优选为血小板去除血浆。血小板能够通过离心分离、过滤器分离等众所周知的手法来去除。在本实施方式中，受检者的血液样本优选为疑似凝固异常的血液样本。那种血液样本例如能够列举出通过通常的凝固检查确认了凝固时间的延长的血液样本、自血栓症患者或疑似有血栓症的人得到的血液样本等。

正常血液样本是采自健康者的血液(全血)或由该血液制备的血浆即可。在本实施方式中，优选为正常血浆。正常血浆可以是在医疗机关等制备的正常混合血浆，也可以是市场销售的正常血浆。市场销售的正常血浆例如能够列举出Control N(希森美康株式会社)、CRYOcheck Pooled Normal Plasma(Precision BioLogic Inc)等。

混合样本是至少以1个混合比混合受检者的血液样本和正常血液样本得到的样本。受检者的血液样本和正常血液样本的混合比适当决定即可。混合样本中的受检者的血液样本的比率例如从5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、以及95％(v/v)至少选择1个。在本实施方式中，优选为制备受检者的血液样本的比率为50％(v/v)的混合样本。混合样本的制备可以手动进行，也可以用全自动凝固时间测定装置进行。

第1和第2凝固时间测定试剂是基于在该技术中众所周知的测定原理的、用于测定凝固时间的试剂即可。例如能够列举出用于测定稀释罗素蝰蛇蛇毒的时间(dilutedRussell’s viper venom time，dRVVT)、活化部分凝血活酶时间(activated partialthromboplastin time，APTT)、稀释活化部分凝血活酶时间(activated partialthromboplastin time，dAPTT)、凝血酶原时间(PT)、稀释凝血酶原时间(dPT)、凝血酶时间(TT)、以及稀释凝血酶时间(dTT)的至少1种的试剂。在这其中，优选为dRVVT测定试剂、dAPTT测定试剂和APTT测定试剂。还可以用市场销售的凝固时间测定试剂以及试剂组。在优选实施方式中，第1凝固时间测定试剂和第2凝固时间测定试剂是基于相同测定原理的、用于测定凝固时间的试剂。

第1和第2凝固时间测定试剂所含磷脂能够列举出磷脂酰乙醇胺 (PE)、磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰丝氨酸(PS)。第1和第2凝固时间测定试剂包括从PE、PC和PS选择的1种，优选为2种，更优选为所有种类的磷脂。磷脂可以是来自天然的磷脂，也可以是合成磷脂。从提高针对LA的灵敏度的观点出发，优选为合成磷脂或精制到纯度99％以上的来自天然的磷脂。PE、PC和PS的脂肪酸侧链无特别限定，例如能够列举出棕榈酸、油酸、硬脂酸等。在这其中，优选为油酸。

第1凝固时间测定试剂中的磷脂浓度低于第2凝固时间测定试剂中的磷脂浓度即可，无特别限定。在本实施方式中，优选为第1凝固时间测定试剂中的磷脂浓度为在测定LA样本时出现LA对磷脂的干扰(凝固时间的延长)的程度的浓度。此时，第1凝固时间测定试剂相当于LA的筛查用试剂。更具体而言，以体积比1：1混合血液样本和第1凝固时间测定试剂时，该试剂中的磷脂浓度例如是20～150μg/mL，优选为30～70μg/mL。血液样本和第1凝固时间测定试剂的混合比例不是1：1时，按照其混合比例适当调整该试剂中的磷脂的浓度即可。

第2凝固时间测定试剂中的磷脂浓度高于第1凝固时间测定试剂中的磷脂浓度即可，无特别限定。在本实施方式中，优选为第2凝固时间测定试剂中的磷脂浓度为在测定LA样本时能够抑制或降低LA对磷脂的干扰(凝固时间的延长)的程度的浓度。此时，第2凝固时间测定试剂相当于LA的确认试验用试剂。例如，第2凝固时间测定试剂中的磷脂浓度也可以是第1凝固时间测定试剂中的磷脂浓度的1.1倍以上100倍以下。更具体而言，以体积比1：1混合血液样本和第2凝固时间测定试剂时，该试剂中的磷脂浓度例如是150～2000μg/mL，优选为150～600μg/mL。血液样本和第2凝固时间测定试剂的混合比例不是1：1时，按照其混合比例适当调整该试剂中的磷脂的浓度即可。

第1和第2凝固时间测定试剂按照测定的凝固时间的种类包括凝固所需要的成分。在本说明书中，凝固所需要的成分是指对于在体外产生血液凝固所需要的成分。那样的成分在该技术中众所周知，例如能够列举出活化剂、蛇毒、组织因子等。活化剂优选为接触因子活化剂，例如能够列举出鞣花酸、陶土、硅藻土、二氧化硅等。鞣花酸也可以是形成了金属离子和螯合物的状态下的鞣花酸。蛇毒能够列举出罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s vipervenom）、Textarin蛇毒、Ecarin蛇毒等。组织因子能够列举出来自兔脑或人的胎盘的组织因子、重组组织因子等。在优选实施方式中，第1凝固时间测定试剂和第2凝固时间测定试剂包括相同成分。

为了让血液凝固开始，第1和第2凝固时间测定试剂也可以包括钙离子。此时，第1和第2凝固时间测定试剂也可以是包括磷脂、凝固所需要的成分和钙离子的1液型的试剂。或者第1凝固时间测定试剂也可以是由包括磷脂和凝固所需要的成分的第1部分试剂和包括钙离子的第2部分试剂构成的2液型的试剂。同样地，第2凝固时间测定试剂也可以由包括磷脂和凝固所需要的成分的第3部分试剂和包括钙离子的第4部分试剂构成。在本实施方式中，也可以将包括钙离子的1个部分试剂用作第1凝固时间测定试剂的第2部分试剂及第2凝固时间测定试剂的第3部分试剂。

优选为钙离子通过钙盐或其水溶液供应至凝固时间测定试剂中。钙盐例如能够列举出氯化钙等。第1和第2凝固时间测定试剂中的钙离子的含有量是对让凝固发生来说充分的量即可，例如以氯化钙的浓度表示，通常为2mmol/L以上40 mmol/L以下，优选为4mmol/L以上30 mmol/L以下。凝固时间测定试剂为2液型的试剂时，包括钙离子的部分试剂优选为钙盐的水溶液。在本说明书中，也将“mmol/L”表示为“mM”。

第1和第2凝固时间测定试剂是将罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）作为凝固所需要的成分包括在内的试剂时，这些试剂也可以不包括钙离子。这是因为罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）直接使X因子活化来引起血液凝固。

如上所述，罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）引起的血液凝固通过X因子直接活化来被引起，因此不介由外源性凝血途径的VII因子及接触因子以及内源性凝血途径的VIII因子。因此已知dRVVT不受接触因子异常和VIII因子缺乏等的影响，其针对LA的灵敏度高。在本实施方式中，优选为第1凝固时间测定试剂为包括罗素蝰蛇蛇毒（Russel’sviper venom）及磷脂的试剂(dRVVT测定试剂)，第2凝固时间测定试剂为包括罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）及浓度高于第1凝固时间测定试剂的磷脂的试剂。

在本实施方式中，优选为通过使用第1和第2凝固时间测定试剂来实际测定第1～第6凝固时间，由此获取这些凝固时间。各凝固时间的测定就混合上述各血液样本和第1或第2凝固时间测定试剂制备的测定试样进行。具体而言，第1凝固时间通过对混合受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂得到的第1测定试样进行测定来获取，第2凝固时间通过对混合正常血液样本和第1凝固时间测定试剂得到的第2测定试样进行测定来获取，第3凝固时间通过对混合混合样本和第1凝固时间测定试剂得到的第3测定试样进行测定来获取。另外，第4凝固时间通过对混合受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂得到的第4测定试样进行测定来获取，第5凝固时间通过对混合正常血液样本和第2凝固时间测定试剂得到的第5测定试样进行测定来获取，第6凝固时间通过对混合混合样本和第2凝固时间测定试剂得到的第6测定试样进行测定来获取。

血液样本和凝固时间测定试剂的反应条件能够按照该试剂的种类适当决定。例如，第1或第2凝固时间测定试剂为2液型的试剂时，血液样本和第1或第3部分试剂的反应时间通常为1分钟以上10分钟以下，优选为3分钟以上5分钟以下。温度条件通常为25℃以上45℃以下，优选为35℃以上38℃以下。测定试样的制备可以手动进行，也可以用全自动测定装置进行。那样的装置例如能够列举出CS-5100(希森美康株式会社)、CS-2400(希森美康株式会社)、CS-2000i(希森美康株式会社)等。

凝固时间的测定在测定试样制备之后迅速进行。具体而言，第1或第2凝固时间测定试剂是2液型的试剂时，从添加包括钙离子的第2或第4部分试剂的时间点起对血液样本和第1或第3部分试剂的混合物开始凝固时间的测定。第1或第2凝固时间测定试剂为包括钙离子或蛇毒的1液型的试剂时，从向血液样本添加该试剂的时间点起开始凝固时间的测定。

凝固时间的测定可以手动进行，也可以用上述全自动凝固时间测定装置进行。优选为用全自动凝固时间测定装置进行测定。在通过该装置测定凝固时间时，向测定试样照射光，基于得到的光学信息算出凝固时间。照射的光为凝固时间的测定中通常使用的光即可，例如能够列举出波长为660 nm附近的光。光源无特别限定，例如能够列举出发光二极管、卤钨灯等。从光源向测定试样照射光，由此从该测定试样产生散射光和透射光。在本实施方式中，与光量有关的光学信息例如能够列举出与散射光量或透射光量有关的信息，优选为散射光强度、透射度、吸光度等。

在本实施方式中，第1～第6凝固时间可以同时测定，也可以逐次测定。逐次测定第1～第6凝固时间时，测定的顺序无特别限定。

在其他实施方式中，第2凝固时间也可以是第1凝固时间测定试剂下的既定的凝固时间。另外，第5凝固时间也可以是第2凝固时间测定试剂下的既定的凝固时间。即，第2凝固时间也可以用使用第1凝固时间测定试剂预先测定并记录的正常血液样本的凝固时间，第5凝固时间也可以用使用第2凝固时间测定试剂预先测定并记录的正常血液样本的凝固时间。由此能够省去第2和第5测定试样的制备和测定。第1和第2凝固时间测定试剂为市场销售的试剂或试剂组时，也可以将其所附说明书中所述的正常血液样本的凝固时间用作第2和第5凝固时间。

因此，在其他实施方式中，第1凝固时间通过对混合受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂得到的第1测定试样进行测定来获取，第2凝固时间是第1凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间，第3凝固时间通过对混合混合样本和第1凝固时间测定试剂得到的第3测定试样进行测定来获取。另外，第4凝固时间通过对混合受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂得到的第4测定试样进行测定来获取，第5凝固时间是第2凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间，第6凝固时间通过对混合混合样本和第2凝固时间测定试剂得到的第6测定试样进行测定来获取。在该其他实施方式中，除了将预先测定并记录的正常血液样本的凝固时间用作第2和第5凝固时间以外都如上所述。

在本实施方式的判断方法中，基于第1凝固时间、第2凝固时间和第3凝固时间获取第1指标值，基于第4凝固时间、第5凝固时间和第6凝固时间获取第2指标值。在本实施方式中，第1和第2指标值优选为用于基于受检者的血液样本、正常血液样本、以及那些的混合样本的凝固时间定量评价混合试验的结果的值。

在LA的检查中，推荐用于定量评价混合试验的结果的ICA等指标值从使用磷脂浓度低的筛查用试剂测定出的凝固时间来获取。另一方面，在该技术领域中，不从使用磷脂浓度高的确认试验用试剂测定出的凝固时间获取指标值。这是因为磷脂浓度高的试剂会抑制LA对凝固时间的延长，因此无法从获取的指标值得到有用的信息。但是，本发明者尝试使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂测定受检血浆、正常血浆及那些的混合血浆的凝固时间，获取2种指标值。然后发现了通过2种指标值能够区分DAC样本、LA样本和凝固因子缺乏样本。

在本实施方式中，第1和第2指标值可以是通过相同的算出方法得到的值，也可以是通过不同的算出方法得到的值。优选为第1和第2指标值是通过相同的算出方法得到的值。例如第1指标值也可以是从第2凝固时间及第3凝固时间之差和第1凝固时间获取的值，第2指标值也可以是从第5凝固时间及第6凝固时间之差和第4凝固时间获取的值。

第2凝固时间和第3凝固时间的差通过下述某个公式算出来。(第2凝固时间和第3凝固时间的差)＝(第2凝固时间)－(第3凝固时间)、或(第2凝固时间和第3凝固时间的差)＝(第3凝固时间)－(第2凝固时间)。

同样地，第5凝固时间和第6凝固时间的差通过下述某个公式算出来。(第5凝固时间和第6凝固时间的差)＝(第5凝固时间)－(第6凝固时间)、或(第5凝固时间和第6凝固时间的差)＝(第6凝固时间)－(第5凝固时间)。

在本实施方式中，也可以获取从上述公式算出的值乘以常数得到的值并将其作为差。

从第2凝固时间及第3凝固时间的差和第1凝固时间获取的值例如能够列举出该差的值和第1凝固时间的值的积或比等。同样地，从第5凝固时间及第6凝固时间的差和第4凝固时间获取的值例如能够列举出该差的值和第4凝固时间的值的积或比等。

在优选实施方式中，第1指标值是第2凝固时间及第3凝固时间的差和第1凝固时间的比的相关值，第2指标值是第5凝固时间及第6凝固时间的差和第4凝固时间的比的相关值。比的相关值不仅是比的值本身，还包括从该比的值算出的值。

作为第1指标值的比的值为以下述某个公式算出的值。(比的值)＝(第2凝固时间及第3凝固时间的差)／(第1凝固时间)、或(比的值)＝(第1凝固时间)／(第2凝固时间及第3凝固时间的差)。

同样地，作为第2指标值的比的值是以下述某个公式算出的值。(比的值)＝(第5凝固时间及第6凝固时间的差)／(第4凝固时间)、或(比的值)＝(第4凝固时间)／(第5凝固时间及第6凝固时间的差)。

从比的值算出的值例如能够列举出该比的值乘以常数得到的值、该比的值加上常数得到的值、从该比的值减去常数得到的值、该比的值的倒数、以及组合这些计算得到的值等。

在本实施方式中，优选为第1指标值是通过下述公式(1)获取的比的值，第2指标值为通过下述公式(2)获取的比的值。

(第1指标值)＝[(第3凝固时间)－(第2凝固时间)]／(第1凝固时间) ・・・公式(1)

(第2指标值)＝[(第6凝固时间)－(第5凝固时间)]／(第4凝固时间) ・・・公式(2)。

在本实施方式中，也可以获取将从上述公式(1)及(2)算出的值变成100倍之后得到的比率(％)并将其作为第1和第2指标值。此时，得到的比率相当于后述ICA。

在本实施方式中，也可以使用众所周知的定量化指标作为第1和第2指标值。众所周知的定量化指标例如能够列举出ICA及百分比修正率（Percent Correction ，PC）等。ICA本身公开于Pengo V.等、Update of the guidelines for lupus anticoagulantdetection. Journal of Thrombosis and Haemostasis 2009; 7: 1737-1740，PC本身公开于Chang S-H.等、"Percent Correction" Formula for Evaluation of MixingStudies., Am J Clin Pathol 2002;117:62-73。下面就ICA及PC进行说明。

ICA也称作罗斯纳指数(Rosner Index)，其为用于判断LA样本的指标。ICA通过下述公式算出来。

ICA ＝ [(E－B)／A]×100(公式中，A：受检血浆的凝固时间、B：正常血浆的凝固时间、E：受检血浆的比率为50％(v/v)的混合血浆的凝固时间)。

如下所述，PC的算出公式按照混合样本中的受检血浆的比率而不同。

PC(9:1) ＝ [(A－C)／(A－B)]×100；PC(8:2) ＝ [(A－D)／(A－B)]×100；PC(5:5) ＝ [(A－E)／(A－B)]×100；PC(2:8) ＝ [(A－F)／(A－B)]×100；PC(1:9) ＝ [(A－G)／(A－B)]×100(公式中，A：受检血浆的凝固时间、B：正常血浆的凝固时间、C：受检血浆的比率为10％(v/v)的混合血浆的凝固时间、D：受检血浆的比率为20％(v/v)的混合血浆的凝固时间、E：受检血浆的比率为50％(v/v)的混合血浆的凝固时间、F：受检血浆的比率为80％(v/v)的混合血浆的凝固时间、G：受检血浆的比率为90％(v/v)的混合血浆的凝固时间)。

在本实施方式的方法中，基于第1指标值和第2指标值判断受检者的血液样本是否是包括DAC的血液样本。在优选实施方式中，比较第1指标值和第1阈值且比较第2指标值和第2阈值，并基于这些比较结果进行判断。第1阈值和第2阈值可以为相同的值，也可以为不同的值。第1和第2指标值为通过相同的算出方法得到的值时，优选为第1阈值和第2阈值为相同的值。

例如，关于以公式(1)算出的第1指标值，DAC样本及LA样本往往高于凝固因子缺乏样本。关于以公式(2)算出的第2指标值，DAC样本往往高于LA样本及凝固因子缺乏样本。因此，第1指标的值为第1阈值以上，且第2指标的值为第2阈值以上时，也可以判断受检者的血液样本为包括DAC的血液样本。另外，第1指标的值小于第1阈值或第2指标的值小于第2阈值时，也可以判断受检者的血液样本为有DAC以外的凝固异常原因的血液样本。DAC以外的凝固异常原因例如能够列举出LA及凝固因子缺乏。

在本实施方式中，在判断受检者的血液样本为有DAC以外的凝固异常原因的血液样本时，还能够基于第1和第2指标值判断该受检者的血液样本是否为包括LA的血液样本或是否为凝固因子缺乏的血液样本。将第1和第2指标值分别为以公式(1)及(2)算出的值时的判断次序作为一例进行表示。第1指标值为第1阈值以上且第2指标值小于第2阈值时，也可以判断受检者的血液样本为包括LA的血液样本。第1指标值小于第1阈值且第2指标值小于第2阈值时，也可以判断受检者的血液样本为凝固因子缺乏的血液样本。第1指标值小于第1阈值且第2指标值为第2阈值以上时，也可以判断受检者的血液样本有DAC、LA及凝固因子缺乏以外的凝固异常原因。

在本实施方式中，第1阈值及第2阈值的数值本身无特别限定。例如，能够通过累积配与了DAC的患者、LA阳性患者和凝固因子缺乏患者的血液样本的凝固时间的相关数据来按照经验设定第1和第2阈值。或者分别从配与了DAC的患者的血液样本的群、LA阳性患者的血液样本的群、以及凝固因子缺乏患者的血液样本的群获取第1指标值及第2指标值，并基于获取的值将能够明确区分这些群的值设定为第1和第2阈值。阈值的算出也可以使用受试者工作特征曲线解析等统计学手法。

[2．血液样本分析装置和计算机程序]

以下参照附图就本实施方式的血液样本分析装置的一例进行说明。但是，本实施方式不仅限定于该例。以下也将血液样本分析装置简称为“分析装置”。如图1所示，血液样本分析装置10具有进行测定试样的制备和光学测定的测定装置50、以及对通过测定装置50获取的测定数据进行分析并给测定装置50指示的控制装置40。测定装置50具有获取与来自测定试样的光量相关的光学信息的测定部20和配置于测定部20的前方的样本运送部30。

在本实施方式中，测定部20和样本运送部30成为一体构成分析装置10的一部分。在进一步的实施方式中，样本运送部30也可以不与分析装置10为一体。例如，在包括数个分析装置的大规模的系统中，也可以不在各分析装置设置样本运送部，而是采用数个的分析装置与大型的运送线连接的方式。

测定部20中设置有盖20a及20b、罩20c、电源按钮20d。用户能够打开盖20a来将放置于试剂台11及12(参照图2)的试剂容器103更换为新的试剂容器103，或者新追加其他试剂容器103。试剂容器103上贴附有条形码标签103a，该条形码标签103a上印刷有包括收纳的试剂的种类和由赋予试剂的序列号组成的试剂ID的条形码。

用户能够打开盖20b来更换灯单元27(参照图2)。用户还能够打开罩20c来更换钻孔器17a(参照图2)。样本运送部30将被样本架102支撑的样本容器101运送至钻孔器17a的吸移位置。样本容器101被橡胶制的盖101a密封。

使用血液样本分析装置10时，用户首先按下测定部20的电源按钮20d来让测定部20启动，按下控制装置40的电源按钮439来让控制装置40启动。控制装置40启动之后，在显示部41显示登录界面。用户在登录界面输入用户名和密码来在控制装置40登录，开始使用血液样本分析装置10。

就测定装置50的结构进行说明。如图2所示，测定部20具有试剂台11及12、反应杯台13、条形码读取器14、反应杯供应部15、抓取器16、样本分装臂17、试剂分装臂18、紧急样本装配部19、光纤21、检测部22、反应杯移送部23、加热部24、废弃口25、流体部26、灯单元27。在本实施方式中，测定部20有作为由血液样本制备测定试样的测定试样制备部的功能、以及作为从制备的测定试样获取光学信息的光学信息获取部的功能。

(测定试样制备部)

试剂台11及12和反应杯台13分别有圆环形状，且能够旋转。试剂台11及12相当于试剂收容部，试剂容器103载置于此。载置于试剂台11及12的试剂容器103的条形码由条形码读取器14读取。从条形码读取的信息(试剂的种类、试剂ID)输入到控制装置40，保存于硬盘434(参照图6)。

在本实施方式的装置中，试剂台11及／或12上载置分别收纳有第1凝固时间测定试剂的第1部分试剂及第2部分试剂(氯化钙水溶液)、第2凝固时间测定试剂的第3部分试剂及第4部分试剂(氯化钙水溶液)等的试剂容器103。在该例中，第1和第2凝固时间测定试剂为2液型的试剂，但这些也可以是1液型的试剂。

反应杯台13上形成有由能够支撑反应杯104的数个孔组成的支撑部13a。用户向反应杯供应部15投入的新的反应杯104被反应杯供应部15依次移送，并通过抓取器16放置于反应杯台13的支撑部13a。

样本分装臂17和试剂分装臂18分别与步进电机连接，以实现上下移动和旋转移动。样本分装臂17的前端设置有钻孔器17a，钻孔器17a的前端锐利以能够穿刺样本容器101的盖101a。试剂分装臂18的前端设置有吸移管18a。与钻孔器17a不同，吸移管18a的前端平坦。另外，电容式液面检出传感器213(参照图3)与吸移管18a连接。

样本容器101通过样本运送部30(参照图1)运送到既定位置之后，钻孔器17a通过样本分装臂17的旋转移动被定位到样本容器101的正上。然后，样本分装臂17向下方移动，钻孔器17a贯通样本容器101的盖101a，样本容器101所收纳的血液样本被钻孔器17a吸移。需要紧急的血液样本装配于紧急样本装配部19时，钻孔器17a在从样本运送部30供应的样本之前优先吸移需要紧急的血液样本。钻孔器17a吸移的血液样本排出到反应杯台13上的空的反应杯104。

排出有血液样本的反应杯104由反应杯移送部23的抓取器23a从反应杯台13的支撑部13a移送至加热部24的支撑部24a。加热部24以既定温度(例如37℃)加热设置于支撑部24a的反应杯104所收纳的血液样本一定时间。加热部24对血液样本的加热结束之后，该反应杯104再次由抓取器23a夹持。然后，该反应杯104由抓取器23a夹持着被定位于既定位置，在该状态下，吸移管18a吸移的试剂排出到反应杯104内。

在吸移管18a对试剂的分装中，首先，试剂台11及12旋转，收纳与测定项目相对应的试剂的试剂容器103被运送到吸移管18a的吸移位置。然后，基于用于检出原点位置的传感器使得吸移管18a的上下方向的位置被定位在原点位置之后，通过液面检出传感器213，吸移管18a下降到吸移管18a的下端与试剂的液面接触为止。吸移管18a的下端与试剂的液面接触之后，吸移管18a进一步下降到能够吸移所需量的试剂的程度。然后，吸移管18a的下降停止，通过吸移管18a吸移试剂。吸移管18a吸移的试剂排出到由抓取器23a夹持的反应杯104。然后，通过抓取器23a的振动功能搅拌反应杯104内的血液样本和试剂。由此制备测定试样。然后，收纳测定试样的反应杯104由抓取器23a移送到检测部22的支撑部22a。

(光学信息获取部)

灯单元27供应检测部22检测光学信号时用到的数种波长的光。参照图4就灯单元27的结构的一例进行说明。灯单元27相当于光源，其具有卤钨灯27a、灯盒27b、聚光镜27c～27e、圆盘形状的过滤器部27f、发动机27g、光透射型传感器27h、光纤耦合器27i。

参照图2，来自灯单元27的光介由光纤21供应到检测部22。检测部22设置有数个穴状的支撑部22a，反应杯104能够插入各支撑部22a。光纤21的端部分别安装于各支撑部22a，来自光纤21的光能够照射到支撑部22a所支撑的反应杯104。检测部22介由光纤21向反应杯104照射从灯单元27供应的光，并检测出透射反应杯104的光(或来自反应杯104的散射光)的光量。

参照图5A～D，表示配于检测部22的数个支撑部22a中的一个的结构例，其他支撑部22a也有同样的结构。参照图5A，检测部22有供光纤21的前端插入的圆形的穴22b。检测部22还有让穴22b与支撑部22a连通的圆形的连通孔22c。穴22b的直径大于连通孔22c的直径。穴22b的端部配置有用于聚集来自光纤21的光的透镜22d。在支撑部22a内壁面，在与连通孔22c相对的位置还有孔22f。该孔22f的里面配置有光检测器22g。光检测器22g相当于受光部，且输出与受光光量相应的电信号。透射过透镜22d的光介由连通孔22c、支撑部22a和孔22f聚集于光检测器22g的受光面。光纤21在端部插入穴22b的状态下通过板弹簧22e来防止脱落。

参照图5B，反应杯104支撑于支撑部22a的话，被透镜22d聚集的光透射过反应杯104和反应杯104所收纳的试样，入射到光检测器22g。在试样中血液凝固反应发展的话，试样的浊度上升。与此相伴，透射过试样的光的光量(透射光量)减少，光检测器22g的检测信号的等级降低。

参照图5C，就使用散射光时的检测部22的结构进行说明。在支撑部22a的内侧面，在与连通孔22c相同高度的位置设置孔22h。光检测器22i配置于该孔22h的里面。反应杯104插入支撑部22a，光自光纤21出射之后，被反应杯104内的测定试样散射的光介由孔22h照射到光检测器22i。在该例中，来自光检测器22i的检测信号表示测定试样引起的散射光的强度。另外，如图5D所示，也可以使得能够检测出透射过测定试样的透射光和被测定试样散射的散射光两者。

如上所述，检测部22向反应杯104照射灯单元27供应的光，并获取来自测定试样的光学信息。获取的光学信息发送至控制装置40。控制装置40基于光学信息进行分析，并将分析结果显示在显示部41。

测定结束后，不需要的反应杯104由反应杯台13运送，并由抓取器16废弃至废弃口25。在测定作业时，钻孔器17a和吸移管18a由流体部26供应的清洗液等液体适当清洗。

就测定装置50的硬件结构进行说明。如图3所示，测定部20包括控制部200、步进电机部211、旋转编码器部212、液面检出传感器213、传感器部214、机构部215、光学信息获取部216、条形码读取器14。控制部200有进行测定部20和样本运送部30中的各机构的作业控制的功能。

参照图3，控制部200包括CPU201、存储器202、通信接口203、I／O接口204。CPU201用于执行存储器202所存储的计算机程序。存储器202由ROM、RAM、硬盘等组成。CPU201还介由通信接口203让样本运送部30驱动并在与控制装置40之间进行指示信号和数据的发送与接收。CPU201还介由I／O接口204控制测定部20内的各部并接收从各部输出的信号。

步进电机部211包括分别用于驱动试剂台11及12、反应杯台13、抓取器16、样本分装臂17、试剂分装臂18、反应杯移送部23的步进电机。旋转编码器部212包括用于输出与步进电机部211所含各步进电机的旋转位移量相应的脉冲信号的旋转编码器。

液面检出传感器213与设置于试剂分装臂18的前端的吸移管18a连接，其用于检出吸移管18a的下端与试剂的液面接触一事。传感器部214包括用于检出吸移管18a的上下方向的位置被定位于原点位置一事的传感器、以及用于检出电源按钮20d被按下一事的传感器。机构部215包括用于驱动反应杯供应部15、紧急样本装配部19、加热部24、流体部26的机构、以及用于向钻孔器17a和吸移管18a供应压力以使得能够进行钻孔器17a和吸移管18a的分装作业的气压源。参照图2，光学信息获取部216至少包括灯单元27、光纤21、检测部22。

就控制装置40的结构进行说明。如图1所示，控制装置40由显示部41、输入部42、计算机主体43构成。控制装置40从测定部20接收光学信息。然后，控制装置40的处理器基于光学信息算出第1～第6凝固时间。控制装置40的处理器算出第1指标并将其作为基于第1、第2和第3凝固时间的值，算出第2指标并将其作为基于第4、第5和第6凝固时间的值。控制装置40的处理器还执行用于分析血液样本的计算机程序。控制装置40还作为用于判断血液样本的装置发挥功能。显示部41显示在计算机主体43得到的分析结果。

如图6所示，控制装置40的计算机主体43具有CPU431、ROM432、RAM433、硬盘434、读出装置435、输入输出接口436、通信接口437、图像输出接口438、电源按钮439。CPU431、ROM432、RAM433、硬盘434、读出装置435、输入输出接口436、通信接口437、图像输出接口438、以及电源按钮439通过总线440连接，且能够通信。

CPU431用于执行存储于ROM432的计算机程序和载入RAM433的计算机程序。CPU431执行用于分析血液样本的计算机程序，控制装置40由此作为用于判断血液样本的装置发挥功能。

ROM432由掩膜ROM、PROM、EPROM、EEPROM等构成。ROM432中记录有由CPU431执行的计算机程序及其所用数据。

RAM433由SRAM、DRAM等构成。RAM433用于读出ROM432及硬盘434所记录的计算机程序。在执行这些计算机程序时，RAM433还用作CPU431的工作区域。

硬盘434安装有操作系统、用于让CPU431执行的应用程序(用于分析血液样本的计算机程序)等计算机程序、执行该计算机程序时用到的数据、以及控制装置40的设定内容。

读出装置435由软盘驱动器、CD－ROM驱动器、DVD－ROM驱动器等构成。读出装置435能够读出CD、DVD等可移动记录媒介441所记录的计算机程序或数据。

输入输出接口436例如由USB、IEEE1394、RS－232C等串行接口、SCSI、IDE、接口等并行接口、由D／A转换器、A／D转换器等组成的模拟接口构成。键盘、鼠标等输入部42与输入输出接口436连接。用户介由输入部42输入指示，输入输出接口436接受介由输入部42输入的信号。

通信接口437例如是Ethernet(注册商标)接口等。控制装置40能够通过通信接口437向打印机发送印刷数据。通信接口437与测定部20连接，CPU431介由通信接口437与测定部20之间进行指示信号及数据的发送与接收。

图像输出接口438与用LCD、CRT等构成的显示部41连接。图像输出接口438向显示部41输出与图像数据相应的映像信号，显示部41基于从图像输出接口438输出的映像信号显示图像。

在本实施方式的血液样本分析装置中，控制装置40作为基于通过检测部22检测出的光学信息(例如透射光强度)获取第1～第6凝固时间，并基于所获取的凝固时间获取第1和第2指标值的分析部发挥功能。

(血液样本分析装置的处理次序)

参照图3，在测定作业时，测定部20的CPU201在存储器202中暂时保存将从检测部22(参照图2)输出的检测信号数字化而形成的数据(光学信息)。存储器202的存储区域分别针对各个支撑部22a进行领域分割。各领域中依次保存对对应的支撑部22a支撑的反应杯104照射既定波长的光时获取的数据(光学信息)。这样，经过既定的测定时间，数据依次保存于存储器202。经过测定时间之后，CPU201中止针对存储器202的数据的保存，并介由通信接口203向控制装置40发送所保存的数据。控制装置40处理所接收的数据并进行分析，将分析结果显示在显示部41。

测定部20中的处理主要在测定部20的CPU201的控制下进行，控制装置40中的处理主要在控制装置40的CPU431的控制下进行。但是，本实施方式不限定于该例。也可以在控制装置40的CPU431的控制下进行测定部20中的处理。参照图7A，测定处理开始之后，如上所述，测定部20从由样本运送部30运送的样本容器101吸移受检者的血液样本(血浆)，并将其分装至反应杯台13上的空的反应杯104。另外，测定部20从试剂收纳部所收纳的、有正常血液样本进入的试剂容器103吸移正常血液样本(血浆)，并将其分装至反应杯台13上的空的反应杯104。在此，受检者的血液样本和正常血液样本的混合样本也可以由用户预先手动制备并收纳于样本容器101。或者，混合样本也可以由测定部20制备。测定部20对混合样本的制备例如如下进行。测定部20从收纳有正常血液样本的试剂容器103吸移既定量的正常血液样本(血浆)，并将其 分装至空的反应杯104。然后，测定部20从收纳有受检者的血液样本的样本容器101吸移既定量的血液样本(血浆)，并将其分装至有正常血液样本进入的反应杯104并搅拌，由此制备混合样本。在本实施方式中，使用第1和第2凝固时间测定试剂2种，因此各准备2个分别有受检者的血液样本、正常血液样本、以及混合样本进入的反应杯104。

接着，测定部20将分别有受检者的血液样本、正常血液样本和混合样本进入的反应杯104移送至加热部24，将反应杯104内的样本加热到既定温度(例如37℃)。然后，测定部20向有各血液样本进入的反应杯104添加第1凝固时间测定试剂(第1部分试剂和第2部分试剂)，制备第1～第3测定试样。另外，测定部20向有各血液样本进入的其他反应杯104添加第2凝固时间测定试剂(第3部分试剂和第4部分试剂)，制备第4～第6测定试样(步骤S11)。

测定部20在从向反应杯104添加包括氯化钙水溶液的部分试剂的时间点起开始测定凝固时间。第1和第2凝固时间测定试剂都是包括钙离子或蛇毒的1液型的试剂时，从添加该试剂的时间点起开始测定凝固时间。之后，测定部20将添加有试剂的反应杯104移送至检测部22，向反应杯104照射光测定测定试样(步骤S12)。在该测定中，基于波长660nm的光的数据(散射光量或透射光量)在测定时间期间依次保存于存储器202。此时，数据在与自试剂添加时间点起的经过时间相对应的状态下保存于存储器202。然后，测定时间经过之后，测定部20中止测定，并将保存于存储器202的测定结果(数据)发送至控制装置40(步骤S13)。

如上所述，正常血液样本的凝固时间也可以是使用第1和第2凝固时间测定试剂预先测定并记录的既定的值。因此，在其他实施方式中，测定部20也可以不测定正常血液样本的凝固时间。此时，让作为第2及第5凝固时间的既定的值预先存储于硬盘434。

控制装置40从测定部20接收测定结果(数据)之后(步骤S21：是），控制装置40对所接收的测定结果执行分析处理(步骤S22)。即，控制装置40就添加了第1凝固时间测定试剂的测定试样算出第1～第3凝固时间及第1指标值，就添加了第2凝固时间测定试剂的测定试样算出第4～第6凝固时间及第2指标值。进行分析处理(步骤S22)之后，控制装置40执行分析结果的显示处理(步骤S23)。

参照图7B，就上述分析处理及显示处理进行说明。在步骤S31中，控制装置40的CPU431基于从测定部20接收的数据(散射光量或透射光量)获取光学信息(散射光强度、或者透射度或吸光度)。在步骤S32中，CPU431按照存储于硬盘434的用于算出凝固时间的公式由所获取的光学信息算出第1～第6凝固时间，并将算出的值存储于硬盘434。在步骤S33中，CPU431按照存储于硬盘434的用于算出第1指标值的公式由第1～第3凝固时间的值算出第1指标值。同样地，CPU431按照存储于硬盘434的用于算出第2指标值的公式由第4～第6凝固时间的值算出第2指标值。然后，CPU431将算出的第1和第2指标值存储于硬盘434。在步骤S34中，CPU431至少让显示部41显示第1和第2指标值，并将其作为分析结果。CPU431也可以还让显示部41显示第1～第6凝固时间。CPU431也可以还让显示部41显示标绘有第1～第3凝固时间的图表。该图表优选为是横轴为各血液样本中受检者的血液样本的比例(v/v%)，纵轴为凝固时间(秒)的图表。

作为显示分析结果的界面的一例，参照图8就显示测定各样本的凝固时间的结果的界面进行说明。在图8所示界面中，显示有架编号及位置、样本编号、测定的开始时刻及结束时刻、第1凝固时间测定试剂下的凝固时间(LA1 1-1 sec)、第2凝固时间测定试剂下的凝固时间(LA2 1-1 sec)，但本发明不限于此。在图8中，样本编号中附有“1-1”的样本为受检者的血液样本的比率为50％(v/v)的混合样本。在本实施方式中，在该界面中也可以显示第1和第2指标值。用户能够将界面中显示的第1和第2指标值用于判断受检者的血液样本是否是DAC样本。

或者，第1和第2指标值也可以显示在其他界面。例如，在图8所示界面中，用户在介由输入部42选择既定的血液样本时，第1和第2指标值也可以显示在图9所示界面。参照图9，界面D1包括显示样本编号的区域D11、显示测定项目名的区域D12、用于显示测定日期时间的区域D13、显示样本评述的区域D14、显示凝固时间及混合比的区域D15、显示参考信息的区域D16、显示标绘有凝固时间的图表的区域D17。在图9中，区域D15中显示有混合比、LA的筛查用试剂(第1凝固时间测定试剂)和确认试验用试剂(第2凝固时间测定试剂)下的凝固时间。在混合比一栏中，“0/1”意味着正常血液样本，“1/2”意味着受检血浆率为50％(v/v)的混合样本，“1/1”意味着受检者的血液样本。在图9中，区域D16中作为第1和第2指标值显示有ICA的值。在本实施方式中，优选为在区域D17中显示标绘有第1凝固时间测定试剂下的凝固时间的图表。这是因为在该技术领域中，交叉混合试验通常用磷脂浓度低的筛查用试剂来进行。

本实施方式的装置也可以基于获取的第1和第2指标值判断受检者的血液样本是否是包括DAC的血液样本，并将其判断结果作为参考信息输出。参照图10A，下面就控制装置的判断流程进行说明。图10A表示由受检者的血液样本、正常血液样本、以及以体积比1：1混合这些得到的混合样本的测定结果进行血液样本的判断时的处理流程。在此，将分别将以上述公式(1)及(2)算出的值作为第1和第2指标值来获取，并比较获取的值和第1及第2阈值来判断血液样本的情况作为例子来说明。但是，本实施方式不仅限定于该例。能够参照就本实施方式的方法所述内容适当变更混合样本的混合比、指标值的种类。

在步骤S101中，控制装置40的CPU431基于从测定部20接收的数据(散射光量或透射光量)获取光学信息(散射光强度、或者透射度或吸光度)。在步骤S102中，算出部按照存储于硬盘434的用于算出凝固时间的公式由CPU431获取的光学信息算出第1～第6凝固时间。在步骤S103中，CPU431按照存储于硬盘434的公式(1)由第1～第3凝固时间算出第1指标值。CPU431还按照存储于硬盘434的公式(2)由第4～第6凝固时间算出第2指标值。

在步骤S104中，CPU431比较算出的第1指标值和存储于硬盘434的第1阈值。第1指标值不低于第1阈值时(即第1指标值高于第1阈值或与第1阈值相同时)，处理向步骤S105推进。在步骤S105中，CPU431比较算出的第2指标值和存储于硬盘434的第2阈值。第2指标值不低于第2阈值时(即第2指标值高于第2阈值或与第2阈值相同时)，处理向步骤S106推进。在步骤S106中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为包括DAC的样本这一判断结果。

在步骤S104中，第1指标值低于第1阈值时，处理向步骤S107推进。另外，在步骤S105中，第2指标值低于第2阈值时，处理向步骤S107推进。在步骤S107中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为有DAC以外的凝固异常原因的血液样本这一判断结果。

在步骤S108中，图像输出接口438输出判断结果，并让显示部41显示或让打印机印刷。或者也可以用语音输出判断结果。与判断结果相关的参考信息也可以是“疑似包括DAC”等的文字信息。也可以是旗子等标识。由此能够将判断结果作为关于受检者的血液样本的参考信息提供给用户。还能够将第1和第2阈值作为参考信息显示。另外，人们希望进行血液样本的判断时不仅考虑到本实施方式的分析装置的判断结果，还考虑到其他检查结果等信息。因此，为了表示本实施方式的分析装置的判断结果及既定的阈值为参考信息，也可以显示为“(参考)”。

在进一步的实施方式中，当判断受检者的血液样本为有DAC以外的凝固异常原因的血液样本时，控制装置40还能够基于第1和第2指标值判断该受检者的血液样本是否是包括LA的血液样本或者是否是凝固因子缺乏的血液样本。参照图10B，下面就控制装置的判断流程进行说明。

关于图10B所示步骤201、步骤202及步骤203，与就图10A的步骤101、步骤102及步骤103所述内容相同。在步骤S204中，CPU431比较算出的第1指标值和存储于硬盘434的第1阈值。第1指标值不低于第1阈值时(即第1指标值高于第1阈值或与第1阈值相同时)，处理向步骤S205推进。在步骤S205中，CPU431比较算出的第2指标值和存储于硬盘434的第2阈值。第2指标值不低于第2阈值时(即第2指标值高于第2阈值或与第2阈值相同时)，处理向步骤S206推进。在步骤S206中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为包括DAC的样本这一判断结果。

在步骤S205中，第2指标值低于第2阈值时，处理向步骤S207推进。在步骤S207中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为包括LA的血液样本这一判断结果。

在步骤S204中，第1指标值低于第1阈值时，处理向步骤S208推进。在步骤S208中，CPU431比较算出的第2指标值和存储于硬盘434的第2阈值。第2指标值低于第2阈值时，处理向步骤S209推进。在步骤S209中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为凝固因子缺乏的血液样本这一判断结果。

在步骤S208中，第2指标值不低于第2阈值时(即第2指标值高于第2阈值或与第2阈值相同时)，处理向步骤S210推进。在步骤S210中，CPU431向图像输出接口438发送受检者的血液样本为有其他凝固异常原因的血液样本这一判断结果。

步骤S211与就步骤S108所述内容相同。显示部41的界面中也可以用“疑似包括DAC”、“疑似包括LA”、“疑似缺乏凝固因子”等文字显示判断结果。

以下通过实施例详细说明本发明，但本发明不被这些实施例限定。

【实施例】

实施例1

就是否能够通过使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂进行混合试验，获得2种指标值来区分包括DAC的血液样本和有LA等其他凝固异常原因的血液样本进行了探讨。

(1) 试剂及样本(1.1) 凝固时间测定试剂

作为凝固时间测定试剂使用了LA1 Screening Reagent(Lot No. 549855AA、Siemens公司：以下称为“第1试剂”)和LA2 Confirm Reagent(Lot No. 548732A、Siemens公司：以下称为“第2试剂”)。第1试剂是基于dRVVT测定的LA的筛查用试剂，其包括罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）和磷脂。第2试剂是基于dRVVT测定的LA的确认试验用试剂，其包括罗素蝰蛇蛇毒（Russel’s viper venom）且以高于第1试剂的浓度包括磷脂。

(1.2) 血液样本

作为受检者的血液样本使用了表1所示LA含有血浆(13样本)、表2所示利伐沙班（Rivaroxaban）含有血浆(10样本：以下也称为“DAC含有血浆”)、以及表3所示凝固因子(II因子、V因子、VII因子或X因子)缺乏血浆。在该实施例中，为了获得凝固因子缺乏程度不同的样本，以各种比率混合各凝固因子缺乏血浆和正常血浆，制备出了凝固因子的比例为20%、10％、5%、2.5%和不足1%的血浆(20样本：以下也称为“凝固因子缺乏血浆”)。各凝固因子的比例不足1%的血浆正是表3所示血浆。下面也将这些血浆总称为“受检血浆”。作为正常血液样本使用了正常血浆Control N(Lot No. 503197A：希森美康株式会社)。

【表1】

【表2】

【表3】

(2) 凝固时间的测定

以37℃加热受检血浆(100μL)4分钟之后，混合第1试剂(100μL)，测定第1凝固时间。以37℃加热正常血浆(100μL)4分钟之后，混合第1试剂(100μL)，测定第2凝固时间。混合正常血浆(50μL)和受检血浆(50μL)，以37℃加热得到的混合血浆4分钟。然后，将第1试剂(100μL)与混合血浆混合，测定第3凝固时间。除了用第2试剂代替第1试剂之外与上述同样地由受检血浆测定第4凝固时间，由正常血浆测定第5凝固时间，由混合血浆测定第6凝固时间。凝固时间的测定通过全自动凝固时间测定装置CS-5100(希森美康株式会社)进行。

(3) 指标值的获取

按照以下公式(3)及(4)，由就各样本测定得的凝固时间获取第1和第2指标值。第1指标值为作为用于LA检测的混合试验的定量化指标广为人知的ICA(Index of CirculatingAnticoagulant)。

(第1指标值)＝[(C－B)／A]×100 ・・・公式(3)

(第2指标值)＝[(F－E)／D]×100 ・・・公式(4)

(公式中，A：第1凝固时间、B：第2凝固时间、C：受检血浆的比率为50％(v/v)的混合血浆的第3凝固时间、D：第4凝固时间、E：第5凝固时间、以及F：受检血浆的比率为50％(v/v)的混合血浆的第6凝固时间) 。

(4) 结果

第2凝固时间为37.2秒，第5凝固时间为34.4秒。作为受检血浆的测定结果的一例，在表4表示样本的一部分凝固时间(第1、第3、第4和第6凝固时间)、以及第1和第2指标值。LA群、DAC群以及凝固因子缺乏群中的第1和第2指标值分别在图11A及B中表示。

【表4】

如图11A所示，可知第1指标值在LA群及DAC群中往往比较高，在凝固因子缺乏群中往往比较低。如图11B所示，可知第2指标值在DAC群中往往比较高，在LA群及凝固因子缺乏群中往往比较低。由此表示，在各个DAC群、LA群及凝固因子缺乏群中，第1和第2指标值的大小具有明显特征。例如可知DAC群的第1和第2指标值两者往往比较高。因此教导了通过使用磷脂浓度不同的2种凝固时间测定试剂进行混合试验，获得2种指标值能够判断受检者的血液样本是否是包括DAC的血液样本。

就能否通过使用第1和第2指标值鉴别凝固异常原因进行了探讨。具体而言，基于表5所示matrix对上述受检血浆进行分类，并就分类结果算出灵敏度及特异度。第1和第2指标值的临界值(阈值)都为12.0。结果如表6所示。

【表5】

【表6】

如此，表示了分别将第1和第2指标值与阈值相比较，基于其比较结果能够以高精确度判断疑似凝固异常的血液样本为包括DAC的血液样本、包括LA的血液样本、以及凝固因子缺乏的血液样本中的哪个。

符号说明

10　 　血液样本分析装置

11、12　 　试剂台

20　 　测定部

22g、22i　 光检测器

27　　 灯单元

30　　 样本运送部

40　　 控制装置

41　 　显示部

42　　 　输入部

43　　 　计算机主体

50　　 　测定装置

Claims (20)

1.一种血液样本的判断方法，其包括以下工序：

获取作为受检者的血液样本的凝固时间的第1凝固时间、作为正常血液样本的凝固时间的第2凝固时间、以及作为混合所述受检者的血液样本和所述正常血液样本得到的混合样本的凝固时间的第3凝固时间的工序，

获取作为所述受检者的血液样本的凝固时间的第4凝固时间、作为所述正常血液样本的凝固时间的第5凝固时间、以及作为所述混合样本的凝固时间的第6凝固时间的工序，

基于所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间获取第1指标值，并基于所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间获取第2指标值的工序，

基于所述第1指标值和所述第2指标值判断所述受检者的血液样本是否是包括直接抗凝血药的血液样本的工序，其中

所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间是使用第1凝固时间测定试剂测定出的凝固时间，所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间是使用第2凝固时间测定试剂测定出的凝固时间，

所述第1凝固时间测定试剂包括磷脂，所述第2凝固时间测定试剂包含磷脂且磷脂的浓度高于所述第1凝固时间测定试剂。

2.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

在获取所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间的工序中，所述第1凝固时间通过对混合所述受检者的血液样本和所述第1凝固时间测定试剂得到的第1测定试样进行测定来获取，

所述第2凝固时间通过对混合所述正常血液样本和所述第1凝固时间测定试剂得到的第2测定试样进行测定来获取，

所述第3凝固时间通过对混合所述混合样本和所述第1凝固时间测定试剂得到的第3测定试样进行测定来获取。

3.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

在获取所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间的工序中，所述第4凝固时间通过对混合所述受检者的血液样本和所述第2凝固时间测定试剂得到的第4测定试样进行测定来获取，

所述第5凝固时间通过对混合所述正常血液样本和所述第2凝固时间测定试剂得到的第5测定试样进行测定来获取，

所述第6凝固时间通过对混合所述混合样本和所述第2凝固时间测定试剂得到的第6测定试样进行测定来获取。

4.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

在获取所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间的工序中，所述第1凝固时间通过对混合所述受检者的血液样本和所述第1凝固时间测定试剂得到的第1测定试样进行测定来获取，

所述第2凝固时间是所述第1凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间，

所述第3凝固时间通过对混合所述混合样本和所述第1凝固时间测定试剂得到的第3测定试样进行测定来获取。

5.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

在获取所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间的工序中，所述第4凝固时间通过对混合所述受检者的血液样本和所述第2凝固时间测定试剂得到的第4测定试样进行测定来获取，

所述第5凝固时间是所述第2凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间,

所述第6凝固时间通过对混合所述混合样本和所述第2凝固时间测定试剂得到的第6测定试样进行测定来获取。

6.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值是用于基于所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间对混合试验的结果进行定量评价的值，所述第2指标值是用于基于所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间对混合试验的结果进行定量评价的值。

7.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值是从所述第2凝固时间及所述第3凝固时间的差和所述第1凝固时间获取的值，

所述第2指标值是从所述第5凝固时间及所述第6凝固时间的差和所述第4凝固时间获取的值。

8.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值是所述第2凝固时间及所述第3凝固时间的差和所述第1凝固时间之比的相关值，

所述第2指标值是所述第5凝固时间及所述第6凝固时间的差和所述第4凝固时间之比的相关值。

9.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值通过下述公式(1)来获取，所述第2指标值通过下述公式(2)来获取；

(第1指标值)＝[(第3凝固时间)－(第2凝固时间)]／(第1凝固时间) ・・・公式(1)；

(第2指标值)＝[(第6凝固时间)－(第5凝固时间)]／(第4凝固时间) ・・・公式(2)。

10.根据权利要求1～9其中任意一项所述的判断方法，其特征在于：

所述判断工序是比较所述第1指标值和第1阈值，比较所述第2指标值和第2阈值，并基于这些比较结果判断所述受检者的血液样本是否是包括直接抗凝血药的血液样本的工序。

11.根据权利要求10所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值在第1阈值以上，且所述第2指标值在第2阈值以上时，判断所述受检者的血液样本是包括直接抗凝血药的血液样本，

所述第1指标值小于第1阈值，或者所述第2指标值小于第2阈值时，判断所述受检者的血液样本是有直接抗凝血药以外的凝固异常原因的血液样本。

12.根据权利要求10所述的判断方法，其特征在于：

所述第1指标值在所述第1阈值以上，且所述第2指标值小于所述第2阈值时，判断所述受检者的血液样本是包括狼疮抗凝物的血液样本，

所述第1指标值小于所述第1阈值，且所述第2指标值小于所述第2阈值时，判断所述受检者的血液样本为凝固因子缺乏的血液样本。

13.一种血液样本分析装置，其具有：

测定部，其制备包括血液样本和凝固时间测定试剂的测定试样，并由制备的所述测定试样获取凝固时间，以及

分析部，其基于所述凝固时间进行血液样本的分析，其中

所述测定部由受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂制备第1测定试样来测定第1凝固时间，由正常血液样本和所述第1凝固时间测定试剂制备第2测定试样来测定第2凝固时间，由混合所述受检者的血液样本和所述正常血液样本得到的混合样本和所述第1凝固时间测定试剂制备第3测定试样来测定第3凝固时间，

所述测定部还由所述受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂制备第4测定试样来测定第4凝固时间，由所述正常血液样本和所述第2凝固时间测定试剂制备第5测定试样来测定第5凝固时间，由所述混合样本和所述第2凝固时间测定试剂制备第6测定试样来测定第6凝固时间，

所述分析部基于所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间获取第1指标值，基于所述第4凝固时间、所述第5凝固时间和所述第6凝固时间获取第2指标值，

所述第1凝固时间测定试剂包括磷脂，所述第2凝固时间测定试剂包含磷脂且磷脂的浓度高于所述第1凝固时间测定试剂。

14.一种血液样本分析装置，其具有：

测定部，其制备包括血液样本和凝固时间测定试剂的测定试样，并由所制备的所述测定试样获取凝固时间，以及

分析部，其基于所述凝固时间进行血液样本的分析，其中

所述测定部由受检者的血液样本和第1凝固时间测定试剂制备第1测定试样来测定第1凝固时间，由混合所述受检者的血液样本与正常血液样本得到的混合样本和所述第1凝固时间测定试剂制备第3测定试样来测定第3凝固时间，

所述测定部还由所述受检者的血液样本和第2凝固时间测定试剂制备第4测定试样来测定第4凝固时间，由所述混合样本和所述第2凝固时间测定试剂制备第6测定试样来测定第6凝固时间，

所述分析部基于所述第1凝固时间、所述第3凝固时间、以及作为所述第1凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间的第2凝固时间获取第1指标值，

所述分析部基于所述第4凝固时间、所述第6凝固时间、以及作为所述第2凝固时间测定试剂下的正常血液样本的既定的凝固时间的第5凝固时间获取第2指标值，

所述第1凝固时间测定试剂包括磷脂，所述第2凝固时间测定试剂包含磷脂且磷脂的浓度高于所述第1凝固时间测定试剂。

15.根据权利要求13所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述血液样本分析装置还具有显示部。

16.根据权利要求15所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述分析部向所述显示部输出所述第1指标值和所述第2指标值。

17.根据权利要求15所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述分析部向所述显示部输出标绘有所述第1凝固时间、所述第2凝固时间和所述第3凝固时间的图表。

18.根据权利要求15～17其中任意一项所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述分析部比较所述第1指标值和第1阈值并比较所述第2指标值和第2阈值，并基于比较结果向所述显示部输出关于所述受检者的血液样本是否是包括直接抗凝血药的血液样本的参考信息。

19.根据权利要求18所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述第1指标值在第1阈值以上，且所述第2指标值在第2阈值以上时，所述分析部向所述显示部输出所述受检者的血液样本为包括直接抗凝血药的血液样本这一参考信息，

所述第1指标值小于第1阈值，或者所述第2指标值小于第2阈值时，所述分析部向所述显示部输出所述受检者的血液样本为有直接抗凝血药以外的凝固异常原因的血液样本这一参考信息。

20.根据权利要求19所述的血液样本分析装置，其特征在于：

所述第1指标值为所述第1阈值以上，且所述第2指标值小于所述第2阈值时，所述分析部向所述显示部输出所述受检者的血液样本是包括狼疮抗凝物的血液样本这一参考信息，

所述第1指标值小于所述第1阈值，且所述第2指标值小于所述第2阈值时，所述分析部向所述显示部输出所述受检者的血液样本是凝固因子缺乏的血液样本这一参考信息。