JP6430809B2 - 血液検体を判定するための方法、システム及びコンピュータプログラム、並びに血液検体分析装置 - Google Patents
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Description
第1の態様に係る血液の判定方法(以下、単に「方法」ともいう)では、まず、LA又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する疑いのある血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、上記の測定試料から光量に関する光学的情報を取得する。
・|min 1|の値と第1の閾値とを比較して、|min 1|の値が第1の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 1|の値が第1の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第2の閾値とを比較して、|min 2|の値が第2の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 2|の値が第2の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
・max 2の値と第3の閾値とを比較して、max 2の値が第3の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
・|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|の値と第2の閾値とを比較して、|min 1|の値が第1の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第2の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 1|の値が第1の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第2の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
・|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、max 2の値と第3の閾値とを比較して、|min 1|の値が第1の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第3の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 1|の値が第1の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2の値と第3の閾値とを比較して、|min 2|の値が第2の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第3の閾値以上であるとき、血液検体は、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 2|の値が第2の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2の値と第3の閾値とを比較して、|min 1|の値が第1の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第2の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第3の閾値以上であるとき、血液検体が、LAを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。一方、|min 1|の値が第1の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第2の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する。
以下に、本実施形態の血液検体分析装置の一例を、図面を参照して説明する。しかし、本実施形態はこの例のみに限定されない。図2に示されるように、血液検体分析装置10は、測定試料からの光量に関する光学的情報を取得する測定部20と、測定部20の前方に配置された検体搬送部30と、測定部20により取得された測定データを分析すると共に測定部20に指示を与える制御装置40を備えている。なお、測定部20と検体搬送部30とは、光学的情報取得部50を構成している。
凝固波形の微分に関するパラメータに基づいて、LA陽性検体と凝固因子インヒビター陽性検体とを鑑別することが可能であるか否かを検討した。
凝固時間測定試薬として、APTT試薬のトロンボチェックAPTT-SLA(シスメックス株式会社)及びトロンボチェック20 mM塩化カルシウム液(シスメックス株式会社)を用いた。被検血漿として、LA陽性患者の血漿(8例)及び第VIII因子インヒビター陽性患者の血漿(5例)を用いた。また、正常血漿として、クロスミキシングテスト用正常血漿のCRYOcheck Pooled Normal Plasma(Precision BioLogic Inc社)を用い、精度管理用コントロール試料として、コアグトロールIX及びコアグトロールIIX(シスメックス株式会社)を用いた。
各検体(50μL)を反応キュベットに分注し、37℃で1分間加温した。ここに、予め37℃で加温した上記のAPTT試薬(50μL)を添加して、37℃で3分間反応させた。そして、20 mM塩化カルシウム液(50μL)を混合して、透過度を420秒間連続的に測定した。なお、測定には、全自動血液凝固測定装置CS-2400(シスメックス株式会社)を用いた。
得られた透過度の経時的変化に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータとして|min 1|、|min 2|及びmax 2を算出した。正常血漿の|min 1|、|min 2|及びmax 2の値に対する各被検血漿の|min 1|、|min 2|及びmax 2の割合を算出し、グラフにプロットした。得られたグラフを図10A〜10Cに示す。
クロスミキシングテストにおいて、即時型(正常血漿と被検血漿との混合直後に凝固時間を測定する方法)のグラフパターンと、遅延型(正常血漿と被検血漿とを混合して、2時間37℃で加温後に凝固時間を測定する方法)グラフパターンとのグラフ変化度合いを比較することにより、LA陽性検体と凝固因子インヒビター陽性検体とを鑑別し得るとの情報に基づき、実際に検討を行った。
この参考例で用いた試薬、被検血漿、正常血漿及び精度管理用コントロール試料は、実施例1と同じである。
正常血漿と被検血漿とを10:0、9:1、8:2、5:5、2:8、1:9、及び、0:10の各比率で混合し、得られた各検体の凝固時間を測定した。なお、即時型のグラフパターンを得る測定では、正常血漿と被検血漿との混合及び凝固時間の測定をCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。遅延型のグラフパターンを得る測定では、正常血漿と被検血漿との混合を用手法で行い、得られた各検体を37℃で2時間加温した後、凝固時間の測定をCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。各検体について得られた凝固時間を、検体中の被検血漿の割合をX軸とし、凝固時間をY軸とするグラフにプロットした。
LA陽性検体群の一部について、即時型及び遅延型のグラフパターンを図11Aに示した。また、凝固因子インヒビター陽性検体群の一部について、即時型及び遅延型のグラフパターンを図11Bに示した。これらの図に示されるように、LA陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体のグラフパターンの変化は類似していた。よって、グラフパターンの変化による両者の鑑別は定性的評価にならざるを得ず、熟練者でない場合は判定が困難であることがわかる。
近年、クロスミキシングテストの定量化指標としてICAが考案され、LAの診断方法として推奨されている。ICAによりLA陽性検体と凝固因子インヒビター陽性検体とを鑑別できるか否かを検討した。
この参考例で用いた試薬、被検血漿、正常血漿及び精度管理用コントロール試料は、実施例1と同じである。
正常血漿と被検血漿とを10:0、5:5、及び、0:10の各比率で混合し、得られた各検体の凝固時間を測定した。なお、即時型のグラフパターンを得る測定では、正常血漿と被検血漿との混合及び凝固時間の測定をCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。遅延型のグラフパターンを得る測定では、正常血漿と被検血漿との混合を用手法で行い、得られた各検体を37℃で2時間加温した後、凝固時間の測定をCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。各検体について得られた凝固時間を、下記の式に当てはめてICAを算出し、グラフにプロットした。得られたグラフを図12に示す。
(式中、Aは、正常血漿の凝固時間を表し、Bは、正常血漿と被検血漿とを混合して得た検体の凝固時間を表し、Cは、被検血漿の凝固時間を表す。)
図12に示されるように、ICAの値は、LA陽性検体群と凝固因子インヒビター陽性検体群との間に明確な差は認められなかった。よって、ICAによって、LA陽性検体と凝固因子インヒビター陽性検体とを鑑別することは困難である。
20 測定部
30 検体搬送部
40 制御装置(制御部)
41 表示部
42 入力部
43 コンピュータ本体
50 光学的情報取得部
Claims (20)
- ループスアンチコアグラント又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する疑いのある血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、前記測定試料から光量に関する光学的情報を取得する工程と、
取得した光学的情報に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも1つ取得する工程と、
取得したパラメータの値に基づいて、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるかを判定する工程と
を含む、血液検体の判定方法。 - 前記判定工程において、取得した前記パラメータの値と所定の閾値とを比較し、比較結果に基づいて、前記血液検体の判定を行う請求項1に記載の血液検体の判定方法。
- 前記光学的情報が、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過度又は吸光度であり、前記凝固波形が、前記散乱光量、透過度又は吸光度の経時的変化を表す波形である請求項1又は2に記載の血液検体の判定方法。
- 前記凝固波形の微分に関するパラメータが、最大凝固速度(|min 1|)、最大凝固加速度(|min 2|)、及び最大凝固減速度(max 2)からなる群より選択される少なくとも1つである請求項1〜3のいずれか1項に記載の血液検体の判定方法。
- 前記判定工程において、
|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第3の閾値とを比較して、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも1つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定し、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する
請求項4に記載の血液検体の判定方法。 - 前記パラメータの取得工程において、|min 1|を取得し、
前記判定工程において、|min 1|の値と第1の閾値とを比較して、|min 1|の値が第1の閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定し、|min 1|の値が第1の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する
請求項4に記載の血液検体の判定方法。 - 前記パラメータの取得工程において、|min 1|、|min 2|及びmax 2を取得し、
前記判定工程において、|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2の値と第3の閾値とを比較して、
|min 1|、|min 2|及びmax 2の少なくとも1つの値が、その値に対応する閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定し、
|min 1|の値が第1の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第2の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあると判定する
請求項4に記載の血液検体の判定方法。 - 前記凝固時間測定試薬が、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、希釈プロトロンビン時間、希釈活性化部分トロンボプラスチン時間、カオリン凝固時間、希釈ラッセル蛇毒時間、トロンビン時間、及び希釈トロンビン時間からなる群より選択される少なくとも1種を測定するための試薬である請求項1〜7のいずれか1項に記載の血液検体の判定方法。
- 前記血液検体が、全血又は血漿である請求項1〜8のいずれか1項に記載の血液検体の判定方法。
- 血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、前記測定試料から光量に関する光学的情報を取得する工程と、
取得した光学的情報に基づいて、凝固時間を取得するとともに凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも1つ取得する工程と、
凝固時間の延長が認められた血液検体について、取得したパラメータの値に基づいて、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるかを判定する工程と
を含む、血液検体の判定方法。 - 血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、前記測定試料から光量に関する光学的情報を取得する光学的情報取得部と、
前記光学的情報に基づいて、最大凝固速度(|min 1|)、最大凝固加速度(|min 2|)、及び最大凝固減速度(max 2)からなる群より選択される少なくとも1つのパラメータを取得する制御部と
を備え、
前記制御部が、取得した前記パラメータの値と所定の閾値とを比較し、比較結果に基づいて、前記血液検体についての参考情報を出力することを特徴とする、血液検体分析装置。 - 分析結果を表示する表示部をさらに備え、前記制御部が、前記血液検体についての参考情報を前記表示部に出力することを特徴とする請求項11に記載の血液検体分析装置。
- 前記光学的情報が、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過度又は吸光度である請求項11又は12に記載の血液検体分析装置。
- 前記制御部は、前記光学的情報に基づいて凝固時間を取得し、取得した凝固時間が、所定の時間より長い場合、前記参考情報を出力する請求項11〜13のいずれか1項に記載の血液検体分析装置。
- 前記制御部が、
|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第3の閾値とを比較して、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも1つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力し、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力する
請求項11〜14のいずれか1項に記載の血液検体分析装置。 - 前記制御部が、
|min 1|の値と第1の閾値とを比較して、
|min 1|の値が第1の閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力し、
|min 1|の値が第1の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力する
請求項11〜14のいずれか1項に記載の血液検体分析装置。 - 前記制御部が、
max 2の値と第3の閾値とを比較して、
max 2の値が第3の閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力し、
max 2の値が第3の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力する、
請求項11〜14のいずれか1項に記載の血液検体分析装置。 - 前記制御部が、
|min 1|の値と第1の閾値とを比較し、|min 2|の値と第2の閾値とを比較し、max 2の値と第3の閾値とを比較して、
|min 1|、|min 2|及びmax 2の少なくとも1つの値が、その値に対応する閾値以上であるとき、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力し、
|min 1|の値が第1の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第2の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第3の閾値より小さいとき、前記血液検体が、凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるとの参考情報を出力する、
請求項11〜14のいずれか1項に記載の血液検体分析装置。 - プロセッサ及び前記プロセッサの制御下にあるメモリを含むコンピュータを備え、
前記メモリには、下記のステップ:
血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料から光量に関する光学的情報を取得するステップと、
前記光学的情報に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも1つ取得するステップと、
取得したパラメータの値に基づいて、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるかを判定するステップと
を前記コンピュータに実行させるためのコンピュータプログラムが記録されている、
血液検体の判定のためのシステム。 - コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、下記のステップ:
血液検体と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料から光量に関する光学的情報を取得するステップと、
前記光学的情報に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも1つ取得するステップと、
取得したパラメータの値に基づいて、前記血液検体が、ループスアンチコアグラントを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを保有する被験者に由来する検体の疑いがあるかを判定するステップと
を前記コンピュータに実行させる、血液検体の判定のためのコンピュータプログラム。
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