CN109021132A - 广东虫草多糖ccg-psw和ccg-pss及制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了广东虫草多糖CCG‑PSW和CCG‑PSS及制备方法与应用。首次对广东虫草多糖CCG‑PSW和CCG‑PSS的结构进行鉴定，明确了两种多糖组分的理化性质及结构，并进一步探索其抗氧化活性，结果显示，在抗氧化活性实验中，本发明得到的CCG‑PSW和CCG‑PSS多糖纯品具有羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除作用，亚铁离子的螯合能力以及还原能力，并且其作用力呈浓度依赖性，可用于制备抗氧化化妆品、食品、保健品或药物。

Description

广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS及制备方法与应用
技术领域
本发明涉及保健食品、化妆品及医药技术领域，具体涉及广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS及制备方法与应用。
背景技术
广东虫草(Cordyceps guangdongensis T.H.Li,Q.Y.Lin&B.Song)，其子实体已被卫生部批准为“新食品原料”(卫生部2013年1号公告)，是继蛹虫草之后的第二种虫草新食品资源，研究表明广东虫草子实体有抗氧化、延长寿命、治疗肾衰竭和支气管炎等作用(曾宏彬,2009；闫文娟等,2010,2014；Yan et al.,2013,2014)。因此广东虫草子实体不仅可以成为人们餐桌上的美食，还兼具有药用价值，有着很大的开发应用前景。
虫草多糖是一种复杂的有机高分子，人们主要从其一级结构单糖组成及其摩尔比例、均一相对分子量、糖苷键的键型及其连接方式、以及高级结构分子构象的分析对其结构进行分析。通过检测多糖水解后的衍生物了解其单糖的种类并通过面积归一法得到其组成摩尔比；通过高碘酸氧化和Smith降解实验判断其异头碳的位置以及其可能的糖苷键的连接方式；通过红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱法判断其存在的官能团、原子间的连接方式(Luo et al,2017)；而虫草多糖中的冬虫夏草多糖和蛹虫草多糖则为常用的研究材料，Xiang等(2016)和李蓉等(2015)已有研究表明冬虫夏草(O.sinensis)的菌丝体多糖、蛹虫草子实体胞内多糖的单糖的组成均主要为D-葡萄糖：D-甘露糖：D-半乳糖(李蓉等,2015；Xiang et al,2016；Openyemi et al,2016；Luo et al,2017)，并且其糖苷键的主要键型为α-型(廖春丽等，2009；刘金花等，2014；邵双双，2016)。
生物体在其生命成长的过程中，正常的细胞代谢活动是维持机体内环境平衡的必要事件，机体的自我调节功能是生物体能启动自身生命程序并进行一切生理活动的重要保障。但随着生物体年龄的增长，机体的自我调节功能逐渐降低，导致体内代谢活动产生的一些因子、过氧化氢、超氧自由基、羟基自由基等自由基不能及时清除，而体内堆积的这些自由基则会攻击体内的细胞膜，夺取其电子，使细胞膜弹性减弱甚至无弹性，丧失功能，导致机体内疾病的产生，自由基还可能攻击基因，破坏其分子结构，导致基因发生突变，使体内的生命系统混乱，加速机体的衰老(Frankel et al.,2000)。在寻找抗氧化物质的过程中，学者们发现许多食物的多糖有良好的抗氧化效果，如植物多糖中的芥菜多糖、甘薯多糖、黄芪多糖、玉米花粉多糖和大蒜多糖等(Kim et al.,1997；王金亭，2008；李宝霞等，2011；李云捷等，2015；宋莎莎等，2017)；真菌多糖如香菇多糖、木耳多糖、姬松茸多糖、灰树花多糖、云芝多糖、杏鲍菇多糖、灵芝多糖、蛹虫草和冬虫夏草多糖等(盖玉红，2007；Dong et al.,2008；曹磊，2010；Liu et al.,2010；Mao et al.,2014；杨岚等，2017)。本发明对广东虫草多糖是否具有抗氧化作用进行研究，不仅为广东虫草多糖的开发利用方向提供理论参考数据，也为其将来在保健食品和医药等领域的应用上奠定基础。
发明内容
本发明的目的是提供广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS及制备方法与应用，所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS可显著地清除自由基，螯合亚铁离子，具有很强的还原能力，可用于制备抗氧化化妆品、食品、保健品或药物。
本发明采取的技术方案为如下：
一种广东虫草多糖CCG-PSW，主要由D-葡萄糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，所述D-葡萄糖：D-甘露糖：D-半乳糖的摩尔比为：1.00:8.17:4.31，糖苷键型主要为β-型糖苷键，以吡喃环糖残基为主；扫描电镜下该多糖为海绵样状，表面略显粗糙，有很多明显的不规则的孔隙，链状和片状，中间层分层明显，梯状。
一种广东虫草多糖CCG-PSS，主要由D-葡萄糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，所述D-葡萄糖：D-甘露糖：D-半乳糖的摩尔比为：1.00:3.68:1.85，糖苷键型主要为β-型糖苷键，以吡喃环糖残基为主；扫描电镜下该多糖为海绵样状，表面较光滑，网状，少有小孔，片状和链状。
一种广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，包括以下步骤：将干燥的广东虫草子实体粉末加入到石油醚中脱脂直至石油醚溶液呈无色，收集残渣，待残渣中剩余的石油醚挥发，晾干；然后将残渣用水浸提，得到水提取液，水提取液用乙醇进行醇沉，收集沉淀得到粗多糖CPS；往粗多糖CPS中加入胰蛋白酶酶解，然后再用sevag试剂脱蛋白，残渣去残余sevag试剂后，即得粗多糖CPS-1，粗多糖CPS-1上DEAE纤维离子交换层析柱进行分离纯化，再经透析得到多糖CCG-PSW和CCG-PSS。
优选，具体步骤如下：
1)将干燥至恒重的广东虫草子实体粉碎，得到子实体粉末；
2)按料液比为1:5往步骤1)的子实体粉末加入石油醚，常温脱脂至溶液呈无色，待残渣中剩余的石油醚挥发，晾干；
3)将步骤2)得到的残渣称重，按料液比为1:20～30加入蒸馏水，于85～90℃中浸提，得到水提液；
4)将步骤3)得到的水提液减压浓缩至0.25～1L，然后加入乙醇进行醇沉，离心取沉淀，得到粗多糖CPS；
5)将步骤4)得到的粗多糖CPS溶于水，按粗多糖水溶液体积加入1％m/v的胰蛋白酶处理30min，然后加入sevag试剂进行多次脱蛋白处理，经减压浓缩去除残余的sevag试剂，即得粗多糖CPS-1；
6)将步骤5)得到的粗多糖CPS-1用去离子水溶解，借助DEAE纤维离子交换层析柱进行分离纯化，即分别用0M、0.1M的NaCl溶液先后洗脱，并用苯酚-硫酸法检测所收集到的洗脱液，绘制糖峰图，合并糖液，减压浓缩，分别得到0M NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-1和0.1M的NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-2，然后分别3000Da的透析袋于4℃下透析48h，冷冻干燥，分别得到相对分子量均一的两组分多糖CCG-PSW(对应粗多糖CPS-1-1)和CCG-PSS(对应粗多糖CPS-1-2)。
上述步骤3)于85～90℃中浸提具体为：于85～90℃的恒温浴中浸提2次，第二次浸提是在第一次浸提后5000rpm离心20min收集上清液后所剩下的残渣的基础上，每次浸提2h，中间每隔30min搅拌一次，第二次浸提后合并上清液。
上述步骤4)加入乙醇进行醇沉具体为：加入水提液3倍体积的95％乙醇，于4℃下醇沉16～18h。
上述步骤5)的sevag试剂为正丁醇和氯仿以1:5的体积比组成。
上述步骤5)脱蛋白处理的条件为：加入粗多糖水溶液1/5倍体积的sevag试剂，于200rpm的摇床下震荡30～40min。
经试验证实，通过上述制备方法制得的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS可显著清除羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基，并对亚铁离子具有较强的螯合作用，具有很强的还原能力，可用于制备抗氧化化妆品、食品、保健品或药物。
本发明的有益效果是：
(1)本发明首次对广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的结构进行鉴定，明确了两种多糖组分的理化性质及结构，并进一步探索其抗氧化活性，加快其转化为医药用品和保健食品的进度，造福于社会。
(2)本发明所用的提取方法操作简单，成本低，且完好的保存了多糖的组分，得到的多糖结构明确，且质量可控，同时，本发明得到的多糖纯品在抗氧化活性实验中表明其具有羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除作用，亚铁离子的螯合能力以及还原能力，并且其作用力呈浓度依赖性，这些为其将来在食品、保健品、化妆品和医药等领域应用中提供依据。
附图说明
图1为CCG-PSW和CCG-PSS单糖组成的色谱图。其中，A为右旋糖酐标品，B为CCG-PSS的单糖组成图，C为CCG-PSW单糖组成图。
图2为CCG-PSW和CCG-PSS的NMR 1H图谱。其中，A为CCG-PSS的核磁共振氢谱图，B为CCG-PSW的核磁共振氢谱图。
图3为CCG-PSW和CCG-PSS的红外光谱图。其中，A为CCG-PSS的红外光谱图，B为CCG-PSW的红外光谱图。
图4为CCG-PSW和CCG-PSS的SEM观察多糖微观表面结构图。其中，A为CCG-PSS的扫描电镜图，B为CCG-PSW的扫描电镜图。
图5为CCG-PSW和CCG-PSS对OH·的清除作用。
图6为CCG-PSW和CCG-PSS对DPPH·的清除作用。
图7为CCG-PSW和CCG-PSS对ABTS自由基的清除作用。
图8为CCG-PSW和CCG-PSS对亚铁离子的螯合作用。
图9为CCG-PSW和CCG-PSS的还原能力。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备
1)将在50℃下烘干至恒重的广东虫草子实体粉末用万能高速搅拌机粉碎，过60目筛，得到
2)按料液比为1:5往步骤1)的子实体粉末加入石油醚，常温脱脂至溶液呈无色，待残渣中剩余的石油醚挥发，晾干；
3)将步骤2)得到的残渣称重，按料液比为1:20加入蒸馏水，于90℃的恒温浴中浸提2次，第二次的浸提是在第一次浸提后5000rpm离心20min收集上清液后所剩下的残渣的基础上，每次浸提2h，中间每隔30min搅拌一次，第二次浸提后合并上清液，得到水提液；
4)将步骤3)得到的水提液在52℃，100kpa下减压浓缩至1L，然后加入水提液3倍体积的95％乙醇，于4℃下醇沉16h，5000rpm离心15min，取沉淀，得到粗多糖CPS；
5)将步骤4)得到的粗多糖CPS溶于水，按粗多糖水溶液体积加入1％m/v的胰蛋白酶处理30min，然后加入粗多糖水溶液1/5倍体积的sevag试剂(正丁醇：氯仿＝1:5v/v)于200rpm的摇床下震荡35min进行除蛋白处理，静置，取上清液，再加入上清液1/5倍体积的sevag试剂重复除蛋白处理，sevag试剂除蛋白共三次，最后经减压浓缩去除残余的sevag试剂，即得粗多糖CPS-1；
6)将步骤5)得到的粗多糖CPS-1用去离子水配制成30mg/mL的多糖溶液，借助DEAE纤维离子交换层析柱进行分离纯化，即分别用0M、0.1M的NaCl溶液先后洗脱，并用苯酚-硫酸法检测所收集到的洗脱液，绘制糖峰图，合并糖液，减压浓缩，分别得到0M NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-1和0.1M的NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-2，然后分别3000Da的透析袋于4℃下透析48h，冷冻干燥，分别得到相对分子量均一的两组分多糖CCG-PSW(对应粗多糖CPS-1-1)和CCG-PSS(对应粗多糖CPS-1-2)。
实施例2广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的结构分析
对实例1中得到的CCG-PSW和CCG-PSS作进一步的结构分析，具体为如下所示：
(1)气质联用色谱法分析单糖组成
用GC/MS法，在密封的玻璃管中用2M的H2SO4(5mL)在100℃下分别水解10mg的CCG-PSW和CCG-PSS 8h。在与BaCO3中和反应后，收集悬浮液，用旋转蒸发仪浓缩至干渣态，之后与10mg的盐酸羟胺和0.5mL的吡啶在90℃下反应30min，而后往玻璃管里加入0.5mL的醋酸酐90℃下反应30min，最后在GC仪器中检测，火焰原子检测器(FID),试验条件为：N2(50mL/min)，H2(38mL/min)，空气(370mL/min)，起始柱温为130℃，维持5min后升至240℃，每分钟升高4℃(1min/℃)，喷雾器温度为280℃，检测器温度为300℃，每次运行注射2uL样品，各个单糖标准品的处理方法与样品的处理一致，即先转化为乙酰化衍生物，再用相同的方法分析。
经过比对CCG-PSW和CCG-PSS水解乙酰化衍生物以及单糖标品的出峰及停留时间可知：广东虫草多糖主要由D-葡萄糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成(图1)，并且两组分CCG-PSW和CCG-PSS的这三个单糖比例分别为:1.00:8.17:4.31，1.00:3.68:1.85，另外，还检测出含有核糖，鼠李糖，阿拉伯糖，木糖。
(2)NMR 1H分析
CCG-PSW和CCG-PSS的一维核磁共振氢谱(1D-1HNMR)由中国广州分析与测试中心提供，所用仪器为500MHz超导核磁共振仪(AVANCEⅢ500MHz)，将两组分各30mg分别溶于0.5mL的D2O中，TMS为内标，测定NMR 1H谱。
结果见图2。由图2可知，CCG-PSW和CCG-PSS的H1化学位移大多分别出现在3.09～4.02ppm和2.66-4.99ppm之间，少量出现在5ppm以上，说明两者的糖苷键型为主要为β-型糖苷键。
(3)红外光谱分析
红外光谱是用来研究分子的不同原子之间的振动和极性键(Mathlouthi et al.,1987)分别取5mg多糖纯品CCG-PSW和CCG-PSS粉末与KBr粉在研钵中研磨均匀，经压片机压成薄片后在红外光谱仪中鉴定，频率为4000-400cm-1。
结果见图3。由图3可知，CCG-PSW和CCG-PSS中3365cm-1、3375cm-1处有的吸收峰为-OH伸缩振动吸收峰，而2931cm-1、2933cm-1处的吸收峰则为C-H键伸缩振动的吸收峰，1655cm-1、1590cm-1处的吸收峰则为溶剂水引起的，1396cm-1、1410cm-1处的伸缩振动则代表含有C-H，Uronic acid(糖醛酸)，1055cm-1、1070cm-1处出现吸收峰则由两种C-O伸缩振动引起的，一种是吡喃糖环的醚键C-O-C，一种是C-O-H，说明此两组分的糖环构型为吡喃糖环，α-型多糖的特征峰一般出现在844±8cm-1处，β-型多糖吸收峰在891±7cm-1，由图3A和图3B可知，两组分在897cm-1处均出现的吸收峰，说明CCG-PSW和CCG-PSS的糖苷键连接方式均为β-型糖苷键，而CCG-PSS的838cm-1处有吸收峰的出现，说明此多糖含α-型糖苷键；674cm-1、669cm-1处的吸收峰则为C-H键变角振动引起的，所以，可以判定CCG-PSW和CCG-PSS均主要以β-型糖苷键连接吡喃环糖残基，与NMR 1H的分析结果一致。
(4)SEM观察多糖微观表面结构
CCG-PSW和CCG-PSS分别用蒸馏水稀释至10μg/mL，取10μL上样，室内放置2h晾干，于15kv的扫面电镜SEM(HITACHIS-3000N)下观察。
分别对CCG-PSW和CCG-PSS进行扫描电镜观察，结果见图4。由图4可知，CCG-PSW和CCG-PSS的表面在扫描电镜下可观察到都是海绵样的，但CCG-PSS的表面较光滑，似网状且少有小孔，片状和链状兼具(图4A)，而CCG-PSW的表面略显粗糙，链状和片状均有，分层明显，似梯状并且表面有很多明显的不规则的孔隙(图4B)。
实施例3广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的抗氧化活性测定
(1)CCG-PSW和CCG-PSS对羟基自由基的清除能力
供试样品反应液包括1mL的0.15M的PBS(pH 7.4)、1mL的40μg/mL蕃红溶液、1mL的0.945mM的EDTA-Fe(Ⅱ)、1mL的3％(V/V)H2O2、0.5mL的多糖样品溶液(CCG-PSW或CCG-PSS)。
对照品反应液包括1mL的0.15M的PBS(pH 7.4)、1mL的40μg/mL蕃红溶液、1mL的0.945mM的EDTA-Fe(Ⅱ)、1mL的3％(V/V)H2O2、0.5mL的Vc溶液。
将上述供试样品反应液和对照品反应液在37℃下反应30min，反应结束后在560nm下测定吸光度A值，空白对照组为用双蒸水代替多糖样品溶液，计算公式如下：
羟基自由基的清除率＝[(A空白-A样品)/A空白]×100
结果见图5所示。由图5可知，通过差异显著性(p<0.05,p<0.01)分析，多糖样品CCG-PSW和CCG-PSS对羟基自由基的清除率均高于空白对照(双蒸水/0mg/mL)组，并呈浓度依赖性，在(2～10mg/mL)的浓度范围内，随着浓度的提高，其清除率增加较为明显(p<0.01)，当浓度为10mg/mL时，CCG-PSW的最大清除率为46.71％，CCG-PSS的最大清除率为45.21％。
(2)CCG-PSW和CCG-PSS对DPPH自由基的清除能力
用95％的乙醇将DPPH配置成50μM并用锡箔纸避光保存，再用双蒸水将供试样品多糖CCG-PPS和CCG-PPS以及阳性对照品(Vc和BHT)分别配制成0、2、4、6、8、10mg/ml的浓度梯度，并经过0.22mm的除菌过滤器，备用。取1.2mL的DPPH溶液与48μL的不同浓度的多糖样品溶液或Vc溶液或BHT溶液以4:1(V/V)的比例在黑暗条件下混合，之后在室温下反应30min，最后在517nm处测定DPPH的吸光度A值，空白对照组为用双蒸水代替多糖样品溶液，DPPH的清除率计算公式如下：
清除率/％＝[(A空白-A样品)/A空白]×100
结果见图6所示。由图6可知，通过差异显著性(p<0.05,p<0.01)分析，多糖样品CCG-PSW和CCG-PSS对DPPH自由基的清除率均高于空白对照(双蒸水/0mg/mL)组，并在浓度为0～10mg/mL内，对DPPH自由基的清除率随着浓度的增加而增加，其中，当浓度为10mg/mL时，CCG-PSW的最大清除率为41.79％，CCG-PSS的最大清除率为41.62％。
(3)CCG-PSW和CCG-PSS对ABTS自由基的清除能力
用双蒸水将ABTS配制成7mM，并用双蒸水将供试样品多糖CCG-PSW和CCG-PSS以及阳性对照品Vc分别配制成0、2、4、6、8、10mg/mL的浓度梯度。实验前24h，在黑暗处将7mM的ABTS与2.45mM的K2S2O8以2：1的体积比混合以产生ABTS自由基，并用94％的乙醇将ABTS稀释至其在734nm处的吸光度A值在(0.17±0.03)。取950μL的ABTS溶液与50μL不同浓度的多糖样品溶液或Vc溶液混合，并用锡箔纸包裹让混合液在黑暗处于室温下反应10min，反应结束后在734nm处测定其吸光度A值，空白对照组为用双蒸水代替多糖样品溶液，ABTS的清除率计算公式如下：
清除率/％＝[(A空白-A样品)/A空白]×100
结果见图7所示。由图7可知，通过差异显著性(p<0.05,p<0.01)分析，多糖样品CCG-PSW和CCG-PSS对ABTS自由基的清除率均高于空白对照(双蒸水/0mg/mL)组，并在浓度为2mg/mL时，对ABTS自由基的清除率达到最大值，其中，CCG-PSW对ABTS自由基的清除率为55.25％和CCG-PSS对ABTS自由基的清除率为55.11％。
(4)CCG-PSW和CCG-PSS对亚铁离子的螯合能力
用双蒸水将供试样品多糖CCG-PSW和CCG-PSS以及阳性对照品(Vc和EDTA)分别配制成0、2、4、6、8、10mg/mL的浓度梯度。取1mL不同浓度的多糖样品溶液分别与3.7mL去离子水混合，之后往混合物里加入0.1mL的FeCl2(2mmol/L)和0.2mL菲洛(5mmol/L)，反应20min，在波长为562nm处读取其吸收光度A值。空白对照组为双蒸水代替多糖样品溶液，Fe2+的螯合率的计算公式如下：
螯合率/％＝[(A空白-A样品)/A空白]×100
结果见图8所示。由图8可知，通过差异显著性(p<0.05,p<0.01)分析，多糖样品CCG-PSW和CCG-PSS对亚铁离子的螯合率均高于空白对照(双蒸水/0mg/mL)组，并在浓度为0～10mg/mL内，对Fe2+的螯合率随着浓度的增加而增加，其中，当浓度为10mg/mL时，CCG-PSW对Fe2+的螯合率为78.49％，CCG-PSS对Fe2+的螯合率为68.92％。
(5)CCG-PSW和CCG-PSS的还原能力
用双蒸水将供试样品多糖CCG-PSW和CCG-PSS以及阳性对照品(Vc)分别配制成0、2、4、6、8、10mg/mL的浓度梯度。将0.25mL不同浓度的多糖样品溶液分别与0.25mL的PBS(0.2M，pH6.6)和0.25mL的K3Fe(CN)6溶液(1％，W/V)混合，混合液在50℃下水浴20min，之后加入0.25mL的三氯乙酸(TCA)溶液(10％，W/V)，混合液在1500×g离心10min，取0.5mL的上清液并加入0.5mL双蒸水和0.1mL的FeCl3的溶液(0.1％，W/V)终止反应10min，最后在700nm下测定其吸光度值A，以双蒸水代替多糖样品溶液作为空白对照，还原能力的测定是参照Vernonia amygdalina和Gongronema latifolium法进行(还原能力以吸光度值表示)。
还原力＝Abs–As–Ab
Abs：样品和所有试剂都加
As：加样品，铁氰化钾溶液用水代替
Ab：样品用双蒸水代替
结果见图9所示。由图9可知，通过差异显著性(p<0.05,p<0.01)分析，多糖样品CCG-PSW和CCG-PSS的还原能力吸收光度值均大于空白对照组(双蒸水/0mg/mL)，并在0～10mg/mL的浓度范围内，吸收光度值均随着浓度的增加而增加。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种广东虫草多糖CCG-PSW，其特征在于，主要由D-葡萄糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，所述D-葡萄糖：D-甘露糖：D-半乳糖的摩尔比为：1.00:8.17:4.31；糖苷键型主要为β-型糖苷键，以吡喃环糖残基为主；扫描电镜下该多糖为海绵样状，表面略显粗糙，有很多明显的不规则的孔隙，链状和片状，中间层分层明显，梯状。
2.一种广东虫草多糖CCG-PSS，其特征在于，主要由D-葡萄糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，所述D-葡萄糖：D-甘露糖：D-半乳糖的摩尔比为：1.00:3.68:1.85；糖苷键型主要为β-型糖苷键，以吡喃环糖残基为主；扫描电镜下该多糖为海绵样状，表面较光滑，网状，少有小孔，片状和链状。
3.一种广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将干燥的广东虫草子实体粉末加入到石油醚中脱脂直至石油醚溶液呈无色，收集残渣，待残渣中剩余的石油醚挥发，晾干；然后将残渣用水浸提，得到水提取液，水提取液用乙醇进行醇沉，收集沉淀得到粗多糖CPS；往粗多糖CPS中加入胰蛋白酶酶解，然后再用sevag试剂脱蛋白，残渣去残余sevag试剂后，即得粗多糖CPS-1，粗多糖CPS-1上DEAE纤维离子交换层析柱进行分离纯化，再经透析得到多糖CCG-PSW和CCG-PSS。
4.根据权利要求3所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将干燥至恒重的广东虫草子实体粉碎，得到子实体粉末；
2)按料液比为1:5往步骤1)的子实体粉末加入石油醚，常温脱脂至溶液呈无色，待残渣中剩余的石油醚挥发，晾干；
3)将步骤2)得到的残渣称重，按料液比为1:20～30加入蒸馏水，于85～90℃中浸提，得到水提液；
4)将步骤3)得到的水提液减压浓缩，然后加入乙醇进行醇沉，离心取沉淀，得到粗多糖CPS；
5)将步骤4)得到的粗多糖CPS溶于水，按粗多糖水溶液体积加入1％m/v的胰蛋白酶处理30min，然后加入sevag试剂进行多次脱蛋白处理，经减压浓缩去除残余的sevag试剂，即得粗多糖CPS-1；
6)将步骤5)得到的粗多糖CPS-1用去离子水溶解，借助DEAE纤维离子交换层析柱进行分离纯化，分别用0M、0.1M的NaCl溶液先后洗脱，并用苯酚-硫酸法检测所收集到的洗脱液，绘制糖峰图，合并糖液，减压浓缩，分别得到0M NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-1和0.1M的NaCl溶液洗脱的粗多糖CPS-1-2，然后分别用3000Da的透析袋于4℃下透析48h，冷冻干燥，分别得到多糖CCG-PSW和CCG-PSS。
5.根据权利要求4所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，其特征在于，所述步骤3)于85～90℃中浸提具体为：于85～90℃的恒温浴中浸提2次，第二次浸提是在第一次浸提后5000rpm离心20min收集上清液后所剩下的残渣的基础上，每次浸提2h，中间每隔30min搅拌一次，第二次浸提后合并上清液。
6.根据权利要求4所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，其特征在于，所述步骤4)加入乙醇进行醇沉具体为：加入水提液3倍体积的95％乙醇，于4℃下醇沉16～18h。
7.根据权利要求4所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-PSS的制备方法，其特征在于，所述步骤5)的sevag试剂为正丁醇和氯仿以1:5的体积比组成。
8.根据权利要求4所述的广东虫草多糖CCG-PSW和CCG-CPS的制备方法，其特征在于，所述步骤5)脱蛋白处理的条件为：加入粗多糖水溶液1/5倍体积的sevag试剂，于200rpm的摇床下震荡30～40min。
9.一种按照权利要求3、4、5、6、7或8制备得到的广东虫草多糖CCG-PSW或CCG-PSS。
10.权利要求9所述的广东虫草多糖CCG-PSW或CCG-PSS在制备抗氧化化妆品、食品、保健品或药物中的应用。
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