CN108904557A - 一种含富马酸卢帕他定的眼膏及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含富马酸卢帕他定的眼膏,所述眼膏包括如下组分:富马酸卢帕他定、白蒺藜提取物和药学上可接受的眼膏用辅料;其中,每100重量份的眼膏中富马酸卢帕他的重量份为0.1‑0.5份。本发明改提供该眼膏的制备方法。本发明的眼膏,治疗效果好、性质稳定、毒副作用小等优点。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,更具体地说,涉及一种含富马酸卢帕他定的眼膏及其制备方法。
背景技术
过敏性结膜炎是致盲的一种常见多发因素,如不及时治疗,可造成不可逆性的视力丧失。国内外许多眼科学家对这一病变过程进行过大量研究,包括临床诊治和实验性研究,目前仍没有一个较理想的治疗方案。
有研究表明,组胺是在变态反应早期和症状出现时含有的最多炎症介质,而PAF则是气道炎症中又一重要炎症介质,抑制组胺等炎症介质活性是治疗炎症的重点。卢帕他定是目前上市的唯一既具有抗组胺作用又拮抗血小板活化因子(PAF)活性的抗过敏药,可治疗季节性和常年性过敏性鼻炎。有学者利用豚鼠回肠功能实验比较了卢帕他定和其他第一、二代抗组胺药的抗组胺活性,证明卢帕他定较特非那定、氯雷他定、西替利嗪、安他乐及苯海拉明具有更强的抗组胺活性。卢帕他定对肺组织H1受体,较之小脑H1受体具有更好的选择性结合能力,氯雷他定却未见类似效应。卢帕他定对组胺H1受体和缓激肽受体B2的基因表达具有抑制作用;此外多项体外及动物模型实验均证实了卢帕他定拮抗PAF的作用。此外,卢帕他定还能LAD2型肥大细胞PAF诱导的组胺、白细胞介素(IL)8、白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13和肿瘤坏死因子(TNF)的释放,能够对结膜炎能起到一定得治疗作用。
目前,卢帕他定的研究主要集中在滴鼻剂和口服剂上,如CN103108635A的中国发明专利文件,公开了一种富马酸卢帕他定的无环糊精含水液态制剂,其可用于治疗过敏性鼻炎及荨麻疹。所述制剂包含富马酸卢帕他定、一种或多种共溶剂及一种或多种pH调节剂,其中该组合物的pH介于4与6.5之间,其用于治疗过敏性疾病。
而目前富马酸卢帕他定的眼部用药研究较少,对于眼部用药,结膜下和玻璃体内注射用药可以在眼组织内达到有效的药物浓度,但眼内注射给药是一种创伤性的给药方法,多次重复注射给药会大大增加感染性眼内炎的发生率。现有的部分研究将富马酸卢帕他定制备成眼部用药液体制剂,如:
CN101926762A的中国发明专利文件,公开了一种富马酸卢帕他定滴眼液,该滴眼液是以富马酸卢帕他定为主药,辅以增稠剂、缓冲盐、等渗剂、抑菌剂、增溶剂。配制方法A为先将增稠剂用一定量水溶解,再将主药、缓冲盐、等渗剂、抑菌剂、增溶剂用一定量注射用水溶解,混合两种溶液,加适量注射用水至所需浓度;制备方法B为将增稠剂、富马酸卢帕他定、缓冲盐、抑菌剂、等渗剂、增溶剂和注射用水一起长时间搅拌至溶液澄清,再补加注射用水至全量即得。本发明富马酸卢帕他定滴眼液的制备方法简单,用于治疗眼表过敏性疾病,具有疗效显著、无刺激性、无毒副作用、稳定性好等特点。
CN101669901A的中国发明专利文件,公开了一种用于眼部给药的液体制剂。所述液体制剂含有0.1-25g/100mL的卢帕他定,以及0.5-30g/100mL的环糊精类化合物;本发明还涉及所述液体制剂的制备方法。本发明的液体制剂具有吸收迅速、使用方便、疗效确切、稳定的特点,对于治疗结膜炎,尤其是过敏性结膜炎具有良好的疗效。
上述液体制剂,无需通过注射,降低了对用药者的眼部损失,使用安全,但在针对过敏性结膜炎、角膜炎等症状的疗效方面还存在一定的局限。
发明内容
针对现有富马酸卢帕他定眼部制剂在治疗过敏性结膜炎、角膜炎等症状疗效存在一定程度的局限情况,本发明的目的在于提供一种具有治疗效果好、眼部透过性好、性质稳定、毒副作用小的含富马酸卢帕他定的眼膏,同时本发明还提供该眼膏的制备方法。
一种含富马酸卢帕他定的眼膏,所述眼膏包括如下组分:富马酸卢帕他定、白蒺藜提取物和药学上可接受的眼膏用辅料;其中,每100重量份的眼膏中富马酸卢帕他的重量份为0.1-0.5份。
本发明还提供该眼膏的制备方法,包括如下步骤:按配方取各原料、混合,制成膏剂,即得。具体的,可以为:所述药学上可接受的眼膏用辅料包括无水羊毛脂、石蜡和黄凡士林;取富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物混合,加入经灭菌、冷却的液状石蜡,研磨成细糊状,过150-250目筛,再缓慢渐加入无菌并过150-250目筛的羊毛脂、黄凡士林混合物,混匀,即得。
本发明的眼膏,通过富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物的复配,能够提升对过敏性结膜炎、角膜炎等炎症的疗效;同时具有良好的眼内穿透性,在房水、角膜、结膜、玻璃体中均可以达到有效的治疗浓度;并且该眼膏还具有性质稳定、毒副作用小等优点。本发明的制备方法简单、易操作,便于工业化生产。
具体实施方式
一种含富马酸卢帕他定的眼膏,所述眼膏包括如下组分:富马酸卢帕他定、白蒺藜提取物和药学上可接受的眼膏用辅料;其中,每100重量份的眼膏中富马酸卢帕他的重量份为0.1-0.5份。
进一步的是,所述富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物的重量比为富马酸卢帕他:白蒺藜提取物=1∶1-3。
进一步的是,对于药学上可接受的眼膏用辅料,可以为能够应用于眼用药膏的各种药物辅料;所述药学上可接受的眼膏用辅料包括无水羊毛脂、石蜡和黄凡士林;进一步的是,所述石蜡为液状石蜡。
进一步的是,每100重量份的药膏中除富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物外还包括按重量份计的如下组分:无水羊毛脂8-15重量份、液状石蜡2-10重量份、余量为黄凡士林。
本发明还提供该眼用药膏的制备方法,可以采用现有的各种制备眼用药膏的制备工艺;包括如下步骤:按配方取各原料、混合,制成膏剂,即得。本文现列举一种眼用药膏的制备方法,所述药学上可接受的辅料包括无水羊毛脂、石蜡和黄凡士林;取富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物混合,加入经灭菌、冷却的液状石蜡,研磨成细糊状,过150-250目筛,再缓慢渐加入无菌并过150-250目筛的羊毛脂、黄凡士林混合物,混匀,即得。
本发明的含富马酸卢帕他定的眼膏,可治疗过敏性结膜炎、角膜炎。
下面,结合具体实施方式,对本发明做进一步描述:
实施例1-3
表1:实施例1-3眼膏配方表
制备方法为:取富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物混合,加入经灭菌、冷却的液状石蜡,研磨成细糊状,过150-250目筛,再缓慢渐加入无菌并过150-250目筛的羊毛脂、黄凡士林混合物,混匀,即得。
实验例1稳定性试验
加速试验:采用按本发明实施例2方法制备的0.3%富马酸卢帕他定眼膏在市售包装条件下,放入恒温恒湿箱,在温度40℃±2℃、相对湿度25%±5%的条件下放置,分别于第1、2、3、6个月按时取样,照《中国药典》2015版相关要求进行测定。结果见表2:
表2:加速试验数据表
长期试验:采用按本发明实施例2方法制备的眼膏在市售包装条件下,放入恒温恒湿箱,在温度25℃±2℃、相对湿度40%±5%的条件下放置,分别于第3、6、9、12、18个月按时取样,照《中国药典》2015版相关要求进行测定。测定结果与0月测定结果比较,结果见表3:
表3:长期试验数据表
结果表明:性状无变化,金属异物符合规定;含量测定检查结果均无明显变化,无菌进行考察,均无菌生长,说明本发明提供的眼膏稳定性好。本发明其他实例产品也进行了相同的试验,并得到相同趋势的试验结果,受篇幅所限不再一一列举。
实验例2不同浓度的眼膏对眼部刺激性测试
采用本发明实施例1-3方法制备的0.1%、0.3%、0.5%进行眼部刺激性试验。
健康新西兰兔(雌雄各半)24只,实验前24h检查动物双眼,选取眼部正常,无炎症、无缺陷、无陈旧性的角膜损伤动物进行试验。采用同体左右测自身对比法,左眼分别滴入各实施例0.1mL,阴性组左眼给予等体积0.9%氯化钠注射液,右眼均滴入等体积的0.9%氯化钠注射液。每日4次,连续给药7天。每天第一次给药前及第7天末次给药后1、2、4、24、48和72小时均对兔双眼进行荧光素钠染色,观察眼角膜、虹膜和结膜刺激反应情况,每个观察时间点的评分均值为动物左眼的角膜、虹膜、结膜的总积分除以6例动物数所得。按眼刺激分值标准表进行评分,见表4、5:
表4:眼刺激反应评分表
表5眼刺激性评价标准
结论:眼刺激试验结果表明,实施例1-3连续用药7天未见明显刺激性反应,停药后未见明显异常改变。根据眼刺激性评价标准,实施例1眼刺激性综合平均分值最高为0.65(D7),实施例2眼刺激性综合平均分值最高为0.87(D7),实施例3眼刺激性综合平均分值最高为0.64(D7),均属于无刺激性。结果表明本发明的眼膏连续用药没有明显刺激性。
实验例3本发明眼膏对小鼠花粉过敏性结膜炎早期反应相的免疫抑制作用
选取6-8周龄Balb/c雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10只。分别为正常组、模型对照组、富马酸卢帕他定眼膏组、盐酸奥洛他定滴眼液组,进行小鼠花粉过敏性结膜炎试验。
建立豚草花粉过敏性结膜炎模型,将含有50μg豚草花粉的PBS液与弗氏完全佐剂按1∶1的体积比例混合完全,除阴性对照组外其余各组均分别于小鼠尾根部及左后足垫皮下注射进行初次致敏,每个部位150μL,于注射后第7d将等量的豚草花粉PBS液与弗氏不完全佐剂按1∶1的体积比例混合完全后腹腔注射进行增强致敏,第14d以同样的方法再次增强致敏。治疗过程在末次增强致敏后7d第21-27d,富马酸卢帕他定眼膏组采用按本发明实施例1方法制备的0.1%富马酸卢帕他定眼膏;盐酸奥洛他定滴眼液组使用市售盐酸奥洛他定滴眼液(帕坦洛,Alcon),正常组及模型对照组大鼠用纯化水滴眼,一天3次,每次2滴。治疗结束后,各实验组每只小鼠给予300μg花粉蛋白粗浸液进行滴眼激发。激发后1h内,10%水合氯醛麻醉,采用眼球放血将小鼠处死,取下眼球用于制作病理切片行肥大细胞检测,收集的血清用于ELISA检测豚草花粉特异性IgE。
临床症状评估所有实验组小鼠经过相应药物的治疗后,经豚草花粉变应原激发后,在30min内于显微镜下观察小鼠体征并进行临床评估。评估指标包括:结膜水肿、结膜充血、眼睑肿胀、流泪,按0-3分评分,制定评分标准:无:0分;轻度:1分;中度:2分;重度:3分。这四个类别各自得分的总和为总的评分:眼睛有严重的结膜充血、水肿、眼睑肿胀、流泪者最高评分为12分,中度者最高评分为8分,轻度者最高评分为4分。
组织病理学检测采用眼科剪将小鼠眼球连同周边睑结膜一同剪下,此过程不要破坏穹隆部结膜,4%多聚醛溶液固定,常规石蜡包埋,制4μm切片,每只小鼠取不同层面的5张切片进行瑞士-吉姆萨染色,中性树胶封片,镜检。每张切片在×400倍光学显微镜下随机观察5个视野,对视野中肥大细胞总数与肥大细胞脱颗粒数进行统计,然后计算出每组小鼠肥大细胞脱颗粒百分比。
血清中豚草花粉特异性IgE水平检测激发30min后处理小鼠,眼球取血,室温静置2h后保存于4℃冰箱过夜。离心后吸取上层血清,利用间接ELISA法检测血清中豚草花粉特异性IgE水平。依照本实验室常规方法,用豚草花粉粗蛋白(2ng/μL)包被,4℃过夜,3%BAS-PBS封闭,洗板后依次加入小鼠血清、生物素标记的HRP-羊抗小鼠IgE二抗,最后加入显色液、底物及终止液,酶标仪450nm处读取OD值。统计学分析:采用SPSS 17.0软件对实验数据进行分析,各实验数据用均数±标准差(x±s)表示。多个样本所代表的总体均值比较采用单因素方差分析,多个样本均数两两之间的比较采用最小显著差值法(least-significant difference,LSD)。以P<0.05为差异有统计学意义。
临床症状评分结果各组小鼠结束治疗后,用豚草花粉蛋白粗浸液进行滴眼激发,激发后30min内,对各实验组小鼠临床症状进行评分。,
模型组小鼠出现了明显的过敏症状,包括结膜充血、水肿、眼睑肿胀、流泪;富马酸卢帕他定眼膏组与盐酸奥洛他定滴眼液组均能观察到轻度的过敏性结膜炎的临床症状,与模型组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);盐酸奥洛他定滴眼液组与富马酸卢帕他定眼膏组比较差异无统计学意义(P>0.05,表6)。
表6:各组小鼠过敏原激发后眼部体征评分比较(n=10,)
注:aP<0.05,vs正常对照组,bP<0.05,vs模型对照组
组织病理学染色结果阴性对照组的肥大细胞脱颗粒百分比为(27.4±8.47)%,模型组为(68.6±9.61)%,盐酸奥洛他定滴眼液组(37.6±6.30)%,卢帕他定眼膏组为(36.9.4±5.97)%。与阴性对照组比较,其余各组小鼠结膜组织中肥大细胞浸润明显,肥大细胞脱颗粒百分比增高,差异有统计学意义(P<0.05);盐酸奥洛他定滴眼液组和富马酸卢帕他定眼膏组小鼠结膜组织中肥大细胞浸润程度及脱颗粒百分与模型组比较显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),盐酸奥洛他定滴眼液组和卢帕他定眼膏组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。
血清中豚草花粉特异性IgE的测定结果各组小鼠血清中豚草花粉特异性IgE抗体水平分别为:阴性对照组0.64±0.25,模型组2.72±0.34,盐酸奥洛他定滴眼液组1.43±0.11,卢帕他定眼膏组1.41±0.21。各组小鼠与阴性对照组小鼠血清中豚草花粉特异性IgE的水平比较,差异均有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,盐酸奥洛他定滴眼液组、盐酸富马酸卢帕他定眼膏组血清中豚草花粉特异性IgE水平显著下降,差异有显著统计学意义(P<0.01);富马酸卢帕他定眼膏组豚草花粉特异性IgE水平较盐酸奥洛他定滴眼液组有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。
研究结果表明,本发明所制备的卢帕他定眼膏可明显抑制小鼠花粉过敏性结膜炎症状、早期反应相中肥大细胞脱颗粒比率和豚草花粉特异性IgE的产生,对卢帕他定过敏性结膜炎具有一定的治疗作用。
本发明其他实例产品也进行了相同的试验,并得到相类似的试验结果,受篇幅所限不再一一列举。
对本领域的技术人员来说,可根据以上描述的技术方案以及构思,做出其它各种相应的改变以及形变,而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种含富马酸卢帕他定的眼膏,其特征在于所述眼膏包括如下组分:富马酸卢帕他定、白蒺藜提取物和药学上可接受的眼膏用辅料;其中,每100重量份的眼膏中富马酸卢帕他的重量份为0.1-0.5份。
2.根据权利要求1所述的眼膏,其特征在于:所述富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物的重量比为富马酸卢帕他:白蒺藜提取物=1∶1-3。
3.根据权利要求1所述的眼膏,其特征在于:所述药学上可接受的眼膏用辅料包括无水羊毛脂、石蜡和黄凡士林。
4.根据权利要求3所述的眼膏,其特征在于:所述石蜡为液状石蜡。
5.根据权利要求3所述的眼膏,其特征在于每100重量份的药膏中除富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物外还包括按重量份计的如下组分:无水羊毛脂8-15重量份、液状石蜡2-10重量份、余量为黄凡士林。
6.根据权利要求1-5任一项所述的眼用药膏的制备方法,包括如下步骤:按配方取各原料、混合,制成膏剂,即得。
7.根据权利要求6所述的眼用药膏的制备方法,其特征在于:所述药学上可接受的眼膏用辅料包括无水羊毛脂、石蜡和黄凡士林;取富马酸卢帕他定和白蒺藜提取物混合,加入经灭菌、冷却的液状石蜡,研磨成细糊状,过150-250目筛,再缓慢渐加入无菌并过150-250目筛的羊毛脂、黄凡士林混合物,混匀,即得。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20181130 |
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