CN108853264B - 预防或改善缺血性脑中风之中草药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明关于一种中草药组合物,其包含川芎、白芷、鸡血藤、木贼、川红花及绿茶,及该中草药组合物的制备方法。本发明还关于一种中草药组合物在预防或改善血栓形成或血栓形成相关疾病中的用途一种中草药组合物在预防或改善血栓形成或血栓形成相关疾病中的用途,其中该中草药组合物包含川芎、白芷、鸡血藤、木贼、川红花及绿茶。
Description
技术领域
本发明提供一种中草药组合物,其包含川芎、白芷、鸡血藤、木贼、川红花、绿茶或其组合;本发明更提供制备该种中草药组合物以用于预防或改善血栓或血栓相关疾病的用途,以及该种中草药组合物的制备方法。
背景技术
脑中风也称作急性脑血管病变,为中国台湾地区仅次于癌症的第二大死因,若将癌症依照不同的种类来排名统计,则脑中风为所有单一类疾病致死率的第一位。脑中风属血管性疾病,当脑血管被血液栓块塞住而造成血液无法正常供应氧气及养分至脑部时,就会发生脑中风的现象;一旦脑部发生血液供应不足的情形,在短短数秒内,脑部的细胞就会开始死亡。脑中风的种类主要分为缺血性和出血性两大类。根据统计,有百分之八十的中风病患属缺血性脑中风,出血性脑中风约占百分之二十。
川芎对于治疗头痛有一定的效果。《神农本草经》记载:“主中风入脑头痛,寒痹”。金元四大家的李东元也说川芎可:“补血治血虚头痛”。然而川芎辛燥,只适合用于偏寒者。
川芎与白芷相配治病历史久远。《本草经集注》已指出“白芷为之(川芎)使”。白芷与川芎同为祛风止痛药,白芷并可除湿,与川芎共用可加强川芎的药效。
发明内容
除非另外特别加以定义,在此叙述中所用的名词将具有熟知此技术的人可了解的普通且常见的含意。如整个申请案中所使用,下列的术语具有下面所述的含意:
术语“个体”意指动物。较佳地,该动物为哺乳动物,例如小鼠、大鼠、人、狗、猫等等。在较佳实施例中,该个体为人类。
本发明将川芎与白芷先行炮制,再加上活血组合物等中草药组合以组成全新配方,以脑部为主要目标,并以动物实验评估其预防缺血性脑中风的疗效。
本发明的目的是提供一种中草药组合物,其中包含以干材料重量计的川芎约0.5~1.5 重量分,白芷约0.5~1.5重量分,鸡血藤约1.5~4.5重量分,木贼约0.5~1.5重量分,川红花约0.2~1重量分,绿茶约0.5~1.5重量分或其组合。较佳地,该中草药组合物包含以干材料重量计的川芎约1重量分,白芷约1重量分,鸡血藤约3重量分,木贼约1重量分,川红花约0.5重量分,以及绿茶约1重量分。
在本发明一具体实施例中,该中草药组合物用于预防或改善血栓形成或血栓形成相关疾病。在另一具体实施例中,该血栓形成相关疾病是指心血管疾病或脑血管疾病。在更具体实施例中,该脑血管疾病是指缺血性脑中风。
本发明另提供一种中草药组合物在预防或改善血栓形成或血栓形成相关疾病中的用途,其中该中草药组合物包含以干材料重量计的川芎约0.5~1.5重量分,白芷约0.5~1.5重量分,鸡血藤约1.5~4.5重量分,木贼约0.5~1.5重量分,川红花约0.2~1重量分,绿茶约 0.5~1.5重量分或其组合。较佳地,该中草药组合物包含以干材料重量计的川芎约1重量分,白芷约1重量分,鸡血藤约3重量分,木贼约1重量分,川红花约0.5重量分,绿茶约 1重量分。
本发明更提供一种制备中草药组合物的方法,该方法包含:将0.5~1.5重量分川芎与 0.5~1.5重量分白芷一起蒸煮半小时而成第一锅煮液;将1.5~4.5重量分鸡血藤与0.5~1.5重量分木贼煎煮二小时而成第二锅煮液;将0.2~1重量分川红花与0.5~1.5重量分绿茶加热半小时而成第三锅煮液;以及将第一锅、第二锅以及第三锅煮液混合而成中草药组合物的溶液。
在一具体实施例中,其中该中草药组合物的溶液进一步加以浓缩而成中草药组合物的浓缩液。较佳地,其中该中草药组合物的浓缩液进一步加以喷雾干燥而成中草药组合物的粉末。
将本发明的中草药组合物用脑动脉血管阻塞/再灌流中风模式小鼠进行试验,脑中风试验结果显示本发明的中草药组合物可有效预防缺血性脑中风所带来的脑部伤害(图1 ),以及改善中风所带来的神经缺陷行为(图2 )。
本发明的组合物可以以固体、溶液、乳剂、分散体、微胶粒、脂质体以及其他如含有本发明中的一种或多种成分作为活性成分的组合物产物,或与有机或无机载体或赋形剂混合以适用于肠内或肠胃外的施用。活性成分可以被混合,例如,药学上可接受的通常无毒性的载剂如片剂、丸剂、胶囊、栓剂、溶液、乳液、悬浮液以及其他任何合适的形式以供使用。可使用的载体包括葡萄糖、乳糖、阿拉伯树胶、明胶、甘露醇、淀粉糊、三硅酸镁、滑石、玉米淀粉、角蛋白、胶体二氧化硅、马铃薯淀粉、尿素、中等链长的甘油三酯、葡聚醣,以及合适用于制备制剂、固体、半固体或液体形式的其他载体。另外,也可以使用稳定剂、增稠剂和着色剂和香料作为辅助。
本发明的组合物可以口服的形式,例如作为片剂、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。口服使用的组合物可根据各种已知的医药组合物制备方法加以制备,而此组合物可含有一种或多种如蔗糖、乳糖或糖精等甜味剂,如薄荷、冬青油或樱桃等调味剂,着色剂和防腐剂以提供制药上的美观和口感。混合有活性成分与药学上可接受无毒赋形剂的片剂也可通过已知方法加以制造。可使用的赋形剂如:(1)惰性稀释剂,如碳酸钙、乳糖、磷酸钙或磷酸钠;(2)成粒剂和崩解剂,如玉米淀粉、马铃薯淀粉或海藻酸;(3)粘合剂,如黄蓍胶、玉米淀粉、明胶或阿拉伯胶,和(4) 润滑剂,如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可为未包衣,或可以通过已知技术进行包衣以延迟胃肠道中的崩解与吸收,从而提供较长时间的持续作用。例如延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯均可采用,也可通过如美国专利案号4256108、4160452及4,265,874所描述的技术包衣,以生成控制药效释放的渗透性治疗片剂。
在某些情况下,口服使用的组合物可为硬明胶胶囊的形式,其中活性成分与惰性固体稀释剂混合,例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。它们也可为软明胶胶囊的形式,其中活性成分与水或油介质混合,例如花生油、液体石蜡或橄榄油。
本发明的组合物实施例也可为无菌注射用悬浮液的形式。此悬浮液可根据已知的方法使用适合的分散或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌注射用制剂也可为无菌可注射溶液或悬浮液溶在无毒的肠道外可接受稀释剂或溶剂中,例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。无菌的不挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。为了这个目的,任何温和的固定油都可以使用,包括合成的单或二甘油酯、脂肪酸(包括油酸),天然存在的植物油如芝麻油、椰子油、花生油、棉籽油等,或合成的脂肪酸载体如油酸乙酯或类似物。缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂等可以根据需要进行结合。
本发明的组合物实施例也可以栓剂的形式在直肠腔投药。透过将药物与合适的非刺激性赋形剂,例如可可脂或聚乙二醇的合成甘油酯,混合而成组合物,此组合物在常温下为固体,但在直肠腔液化和/或溶解以释放药物。
由于个体受试者可能在症状的严重程度呈现广泛变化,而每种药物都有其独特的治疗特征,本发明的组合物实施应由医师确定受试者对治疗的反应,并相应地改变剂量。
附图说明
图1为本发明中草药组合物治疗中风后脑部伤害程度评估―梗塞面积暨水肿程度分析。事先喂食C57BL/6小鼠溶媒(CMC助悬剂)(对照组,CT)或不同倍数人体剂量(二倍:每天每公斤1.2公克,2x;或五倍:每天每公斤3公克,5x)的本发明中草药组合物一个月后,将小鼠进行中脑动脉梗塞手术,24小时后利用影像系统评估其(A及B)脑部梗塞面积与(C)水肿程度的变化。每组动物数为4-6只。***代表P值小于0.001。
图2为本发明中草药组合物治疗中风后脑部伤害程度评估――动物行为模式分析。事先喂食C57BL/6小鼠溶媒(CMC助悬剂)(对照组,CT)或不同倍数人体剂量(二倍:每天每公斤1.2公克,2x;或五倍:每天每公斤3公克,5x)的本发明中草药组合物一个月后,将小鼠进行中脑动脉梗塞手术,分别在1小时及24小时后评估其神经缺陷行为的程度。每组动物数为5-10只。
具体实施方式
本发明的目的是提供一种中草药组合物,其用于预防或改善血栓或血栓相关疾病的用途,以及其制备方法。其中,该中草药组合物包含川芎、白芷、鸡血藤、木贼、川红花、绿茶或其组合。
以下的实施例不是限定用途,仅用于呈现此发明的多种面向。
实施例一、中草药组合物的制备方法。
将川芎10克与白芷10克一起蒸煮半小时成第一锅煮液;将鸡血藤30克与木贼10克煎煮二小时成第二锅煮液;川红花5克与绿茶10克加热半小时成第三锅煮液。将第一锅、第二锅以及第三锅煮液混合后,进入浓缩,喷雾干燥成粉末。
实施例二、治疗中风后脑部伤害程度评估。
小鼠发中脑动脉血管阻塞/再灌流中风模式。
将六周大的C57BL/6品系小鼠(体重20~25公克)以3%异氟醚(isofluran,溶于95%O2和5%CO2)气体混合器麻醉并以2%异氟醚(isoflurane)维持麻醉。颈部皮肤由中线切开,找出右侧总颈动脉(right common carotid artery)、外颈动脉(external carotidartery)、与内颈动脉(internal carotid artery),将线栓经由外颈动脉插入至内颈动脉,即造成右侧中大脑动脉(right middle cerebral artery)的阻塞(ischemia),然后缝合伤口,使老鼠自然苏醒。利用行为测试确认小鼠处于成功的单一侧的脑部缺血。二十四小时后,将脑组织取下做进一步的分析。手术过程中老鼠体温均维持在温度37℃。
脑梗塞区域(infarct size)的测定。
经二十四小时的血液再灌流后,使用水合氯醛(chloral hydrate)每公斤200毫克麻醉老鼠,在低温及含氧下将大脑组织取出,将其冠状切片成2毫米厚度。以2%2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)在温度37℃下染色,细胞若存活则会将此染剂代谢成红色并累积在细胞内,反之死亡的细胞则呈现白色,30分钟后,随即放入10%甲醛溶液(formaldehyde solution)固定。隔天,脑切片用数码相机照相(NikonCoolpix 5000),最后用影像分析软件(Image-Pro Plus)计算脑梗塞体积的百分比(%infarction volume),本实验未受损的对侧半脑为控制组,并换算出脑细胞的存活率,以评估药物治疗缺血性脑梗塞引发脑部伤害的疗效。A:同侧脑半球(右脑)未受损面积;B:对侧脑半球(左脑)面积;校准后的脑梗塞率:(B-A)/B×100%。
神经缺陷分级(neurological deficits)。
为评估老鼠中风后运动神经受损的程度。分别在第一小时与第二十四小时的血液再灌流时,请旁观者先判定小鼠的行为模式,再将小鼠处以其他的实验。此分级制度详述如下,若老鼠呈现较严重的等级,以较严重的等级分类。神经学检查过程历时3~5分钟。实验步骤为:首先温和地握住老鼠尾巴使其悬挂距离地面一公尺,观察前掌弯曲的现象。若老鼠的两前掌能均衡延展向地面,并且没有观察到其他的神经缺损现象,为正常的老鼠,表示0级。有脑梗塞的老鼠会将前肢一致性地往脑损伤半球的对侧(contralateral)收缩;而前肢收缩随着损伤的程度不同而改变,轻度的收缩如腕弯曲、肩内收和肘僵直。较严重收缩则造成腕、肘完全弯曲与肩的内收和向内旋转。老鼠有上述程度的前肢收缩且没有其他异常时,归类为第1级。老鼠被放置于软质塑料涂覆的大纸(counter protection paper,KimberlyClarke)上时,会以爪子紧紧抓住纸张。用手抓住老鼠的尾巴,从肩后施以力量直到老鼠的前肢滑动数英吋。依此步骤从不同的方向操作数次,正常或轻微中风的老鼠对于不同方向的拉力有相同的抵抗力,严重中风的老鼠对朝麻痹体侧的横向施力会减低抵抗力,归类为第2 级。接着让老鼠自由活动,观察其绕圈的行为,若老鼠往麻痹的体侧移动,归类为第3级。若老鼠丧失走路或困难于行走,归类为第4级。
本实验的给药设计为预先口服给予小鼠不同剂量的本发明中草药组合物一个月后再进行手术;实验分组分为:(1)未进行手术控制组(sham group)、(2)进行手术但未给药组、(3)给予低剂量本发明中草药组合物组、(4)给予高剂量本发明中草药组合物组,观察其脑部伤害面积大小及脑梗塞的各项指标。
实验数据皆以平均值±标准误差(mean±S.E.M.)表示,控制组与实验组之间的差异,实验的统计则以单因子变异数分析(one-way ANOVA)作统计分析。若有意义差别,再以纽柯检定法(Newman-Keuls)比较各组间的差异性,若P值小于0.05则表示有意义的差别。
实验结果发现,以每天每公斤1.2公克或每天每公斤3公克剂量喂食小鼠本发明中草药组合物一个月后,可有效预防缺血性脑中风手术所带来的脑部伤害(图1),及改善中风所带来的神经缺陷行为(图2)。
为使此发明所属技术领域中具有公知常识的人得以了解制作以及使用这项技艺的方法,此发明已描述并已充分详细举例说明,然而,各式各样的变体,修改或改进应被视为无异于此项发明的精神与范围。
本发明所属技术领域中具有公知常识的人易于理解并实现本发明的目的,并获得先前所提到的结果及优点。本发明所使用的动物、材料以及生产它们的过程和方法为代表最佳实施例,是示例性质,而不作为限制本发明的范围用途。本领域的技术人员与制作或使用此项技艺时所将产生的修改或其他用途皆涵盖于本发明的精神内,并且由权利要求界定的范围所限定。
Claims (6)
1.一种预防或改善缺血性脑中风的中草药组合物,其由以干材料重量计的川芎0.5~1.5重量份、白芷0.5~1.5重量份、鸡血藤1.5~4.5重量份、木贼0.5~1.5重量份、川红花0.2~1重量份、绿茶0.5~1.5重量份组成。
2.根据权利要求1的中草药组合物,其由以干材料重量计的川芎1重量份、白芷1重量份、鸡血藤3重量份、木贼1重量份、川红花0.5重量份及绿茶1重量份组成。
3.根据权利要求1或2所述的中草药组合物,其呈现形式为片剂、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、糖浆剂或酏剂。
4.一种中草药组合物在制备预防或改善缺血性脑中风药物中的应用,其中该中草药组合物由以干材料重量计的川芎0.5~1.5重量份、白芷0.5~1.5重量份、鸡血藤1.5~4.5重量份、木贼0.5~1.5重量份、川红花0.2~1重量份、绿茶0.5~1.5重量份组成。
5.根据权利要求4的应用,其中该中草药组合物由以干材料重量计的川芎1重量份、白芷1重量份、鸡血藤3重量份、木贼1重量份、川红花0.5重量份及绿茶1重量份组成。
6.根据权利要求4或5的应用,其呈现形式为片剂、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、糖浆剂或酏剂。
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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