CN108740219A - 神秘果叶水浸物和功能茶饮料的制备方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了神秘果叶水浸物和功能茶饮料的制备方法及其用途，属于食品技术领域。本发明提供的神秘果叶功能茶饮料制备方法，神秘果叶经挑选后晒干或烘干，用去离子水洗净，再加纯净水于90‑100°C煮15‑20分钟，先用棉纱布过滤，得到神秘果叶水浸物,再加入有机酸、甜味剂等进行调味后进一步经过超滤，所得溶液再静置至室温，即得。所制备的神秘果叶水浸物及神秘果叶功能茶饮料可以用于糖尿病、肥胖症相关症状的辅助治疗。

Description

神秘果叶水浸物和功能茶饮料的制备方法及其用途

技术领域

本发明属于食品技术领域，具体涉及神秘果叶功能茶饮料的制备方法及其用途。

背景技术

葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一。α-葡萄糖苷酶位于小肠肠道细胞膜上，在生物的体内的糖代谢中起着重要的作用，催化糖类水解为可被小肠细胞吸收的单糖。α-淀粉酶催化水解淀粉、糖原中α-1,4糖苷键。碳水化合物的高摄入量使生物体的餐后血糖短时间快速升高，而糖尿病的产生正是由于碳水化合物和高糖指数食物的长时间摄入。饮食中摄入α-淀粉酶或者α-葡萄糖苷酶抑制剂可以降低餐后血糖水平，主要是通过降低α-葡萄糖苷酶的催化作用从而延缓碳水化合物的吸收。因此，从天然产物中提取到的α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制物可用于降低血糖，预防和治疗糖尿病。

一些药物是可口服的降糖药，比如用于糖尿病的临床治疗药物，阿卡波糖和伏格列波糖，均是一种α-葡萄糖苷酶的抑制子，通过抑制物使淀粉等碳水化合物分解为葡萄糖的速度有效减缓，从而使小肠对葡萄糖的吸收减少以此来降低血糖。虽然这些药物可平稳降糖，减少血糖波动，也可降低心血管等的并发症的发病率，但是这些药物不可避免有着副作用较多，易产生耐药性等缺点。天然活性产物中一些黄酮、多糖和多酚等物质具有抑制α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶作用。

神秘果在我国台湾省以及非洲等其他热带地区(如西非)可用作食品、医药及化妆品等行业的增甜剂、助食剂、食品色素、化妆品成分，在我国目前已有引种栽培。在民间医药中，神秘果树叶被作为预防与治疗高尿酸血症的药物。神秘果中存在丰富的蛋白质和纤维素，而脂肪的含量较低。而神秘果叶中含有多种氨基酸，且比例平衡。另外，神秘果叶矿物质元素丰富。神秘果叶具有低热量、高营养价值的特点，为其在功能性食品方面的利用提供了依据和可能。

发明内容

本发明的目的首先在于提供神秘果叶功能茶饮料，按重量百分数计，包括以下组分：神秘果叶水浸物1～3％、有机酸0.01～0.02％，甜味剂0.01～0.02％，余量为纯净水。

所述有机酸为柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、酒石酸中的一种或多种。

所述的甜味剂为天然罗汉果糖、木糖醇、甜菊糖中的一种或多种。

本发明的另外一个目的是提供所述神秘果叶功能茶饮料的制备方法，通过以下步骤实现：

(1)挑选绿色或深绿色、生长完好的神秘果叶，弃去不完整、虫蛀、干枯、发黄的不良叶子，洗净去除泥沙、灰尘等赃物，晒干或烘干机60～80℃烘干至水分少于≤5％，密封保存备用；

(2)经步骤(1)处理后的神秘果叶用纯净水快速清洗干净，沥干水分后按与水比例为1:8-12量置于90-100℃水中煮15-20min保持微沸15-20min，用棉纱布把茶汤水过滤出来，进行适当浓缩，使其含0.8～1mg/100mL多糖、2～3mg/100mL多酚、1.5～2mg/100mL黄酮类物质，然后迅速冷却至常温，即得神秘果叶水浸物；

(3)用纯净水溶解有机酸备用；

(4)用纯净水溶解甜味剂备用；

(5)将调配好的有机酸酸和甜味剂按需要量加入神秘果叶水浸物中，边加边搅拌，混合调配均匀，超滤，然后添加纯净水至规定体积；

(6)将调配好的茶汤脱气、灌装、灭菌，得到所述神秘果叶功能茶饮料。

本发明所制备的神秘果叶水浸物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶具有很强抑制作用，可以用于制备治疗糖尿病或肥胖症的药物中的应用

以神秘果叶水浸物为原料制备的神秘果叶功能茶饮料对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶也具有很强抑制作用，可以用于糖尿病、肥胖症相关症状的辅助治疗。

本发明的有益之处在于：提供神秘果叶水浸物及神秘果叶功能茶饮料，可以用于糖尿病、肥胖症相关症状的辅助治疗，制成的茶饮料易于工业化大生产、携带、服用和质量控制。

附图说明

图1为多糖含量的标准测定曲线。

图2为多酚含量的测定标准曲线。

图3为黄酮含量的测定标准曲线。

图4为不同浓度神秘果叶提取液对α-葡萄糖苷酶的抑制率。

图5为不同浓度神秘果叶提取液对α-淀粉酶的抑制率。

具体实施方式

下面将结合实施例进一步详细说明本发明的实质内容和有益效果，这些实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。此外，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1神秘果叶水浸物的制备

挑选绿色或深绿色、生长完好的神秘果叶，弃去不完整、虫蛀、干枯、发黄的不良叶子，洗净去除泥沙、灰尘等赃物，晒干或烘干机60～80℃烘干至水分少于≤5％，密封保存备用；处理后的神秘果叶用纯净水快速清洗干净，沥干水分后按与水比例为1:8-12量置于90-100℃水中煮15-20分钟保持微沸15-20分钟，用棉纱布把茶汤水过滤出来，进行适当浓缩，使其含0.8～1mg/100mL多糖、2～3mg/100mL多酚、1.5～2mg/100mL黄酮类物质，然后迅速冷却至常温，即得神秘果叶水浸物；

实施例2神秘果叶功能茶饮料的制备

(1)按质量重量百分数计，称取以下组分：神秘果叶水浸物1～3％、有机酸0.01～0.02％，甜味剂0.01～0.02％，余量为纯净水。

(2)将有机酸和甜味剂分别用纯净水溶解备用；将调配好的有机酸酸和甜味剂加入神秘果叶水浸物中，边加边搅拌，混合调配均匀，超滤，然后添加纯净水至规定体积；调配好的茶汤脱气、灌装、灭菌，即得神秘果叶功能茶饮料。

实施例3神秘果叶水浸物中多糖含量测定

分别精密吸取1mg/mL的葡萄糖溶液标准0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0mL于100mL的容量瓶中，加入蒸馏水摇匀并定容至刻度，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液。首先分别移取2.0mL的葡萄糖标准溶液于25mL的具塞比色试管中，随后加入5％的苯酚溶液1.0mL，摇匀，快速加入浓硫酸5.0mL。放置5min后，于沸水中加热保温20min，取出后快速冷却，以第一管作空白对照，在490nm波长处测吸光度。

试样多糖含量按如下公式计算：

式中：

x：样品多糖的含量(mg/g)；

n：稀释的倍数；

c：稀释的已知多糖的浓度(mg/mL)；

v：提取液的体积，单位为毫升(mL)；

m：液试样的质量，单位为克(g)。

样品的测定：取1mL神秘果叶水浸物，按标准溶液配置方法测得吸光值。计算得到神秘果叶水浸物中多糖含量为0.8～1mg/100mL。

实施例3神秘果叶水浸物中总酚含量测定

将0.5000g没食子酸用10mL的水溶解，定容至100mL，分别移取0、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0mL至100mL的容量瓶中，分别加入60mL的水，混合加入5mL福林酚试剂，在8min内加入15mL的20％碳酸钠溶液，用水定容后将上述标准溶液于室温下放置2h后，在波长765nm下测定吸光值，绘制标准曲线。

准确移取样神秘果叶水浸物1mL于100mL容量瓶中，按照标准曲线测定方法，测得吸光度值。

按以下公式换算多酚含量

式中：

x：样品多酚的含量(mg/g)；

n：稀释的倍数；

c：稀释的已知多糖的浓度(mg/mL)；

v：提取液的体积，单位为毫升(mL)；

m：液试样的质量，单位为克(g)。

测得神秘果叶水浸物中多酚的含量2～3mg/100mL。

实施例4神秘果叶水浸物中总黄酮含量测定

分别移取0.2mg/mL的芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0mL于25mL容量瓶中，加入60％乙醇溶液稀释至15mL，加入5％(w/v)亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，静置5min，加入10％(w/v)硝酸铝溶液0.3mL，摇匀，再加入1mol/L氢氧化钠溶液2mL，用60％乙醇溶液稀释至刻度线处，室温静置15min。以第一管为空白对照，于波长510nm处测定吸光度值，绘制芦丁标准曲线。

神秘果叶水浸物总黄酮得率如下计算：

式中：

x：样品总黄酮的含量(mg/g)；

n：稀释的倍数；

c：稀释的已知多糖的浓度(mg/mL)；

v：提取液的体积，单位为毫升(mL)；

m：液试样的质量，单位为克(g)。

测得神秘果叶水浸物中总黄酮的含量1.5～2mg/100mL。

实施例5神秘果叶水浸物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

首先，将神秘果叶水浸物溶解于DMSO中配置成1mg/mL的溶液，稀释后得到分别为5、15、25、50，75μg/mL的样品溶液。随后在600μL的pH6.8磷酸盐缓冲溶液中，加入待测的神秘果叶水浸物200μL与0.01mg/mL的α-葡萄糖苷酶200μL，于37℃下保温15min，然后加入2.50mmol/L的PNPG溶液200μL，在37℃下反应10min，最后加入0.1mol/L的碳酸钠溶液5mL以结束反应，测定400nm处的吸光度值，每个样品平行三次，计算平均值，200μL的DMSO和阿卡波糖溶液分别用作空白对照和阳性对照。IC₅₀值表示样品对α-葡萄糖苷酶的抑制作用导致酶活仅为50％时的样品浓度。α-葡萄糖苷酶抑制活性计算公式如下：

酶抑制率(％)＝(A_样品-A_空白)/A_样品×100

表1不同浓度提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率

测得神秘果叶水浸物对α-葡萄糖苷酶IC₅₀值为39.93μg/mL，而阳性对照物阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的IC₅₀值为47.42μg/mL，神秘果叶水浸物物对α-葡萄糖苷酶抑制作用要比阿卡波糖强，说明其对糖尿病具有潜在治疗作用，可以用于制备治疗糖尿病的药物。

实施例6神秘果叶水浸物对α-淀粉酶的抑制作用

首先，将神秘果叶水浸物溶解于DMSO中配置成1mg/mL的溶液，稀释成不同的浓度，分别为15、25、50、75、100μg/mL。随后吸取400μL的α-淀粉酶溶液(20U/mL)与1.0mL的磷酸盐缓冲溶液(pH6.8)，200μL的神秘果叶水浸物溶液于37℃下反应10min，加入1％淀粉溶液300μL,在37℃下反应20min，加入0.2mL的DNS溶液在沸水浴中加热10min，最终加入8.0mL去离子水，于540nm处测定吸光度值，空白对照用DMSO代替神秘果叶水浸物溶液，阿卡波糖作为阳性对照，每个样品平行三次，计算平均值。

酶抑制率(％)＝(A_样品-A_空白)/A_样品×100

表2不同浓度提取物对α-淀粉酶的抑制率

测得神秘果叶水浸物对α-淀粉酶IC₅₀值为85.13μg/mL，而阳性对照物阿卡波糖对α-淀粉酶的IC₅₀值为93.77μg/mL，神秘果叶提取物对α-淀粉酶抑制作用要比阿卡波糖强，说明其对糖尿病具有潜在治疗作用,可以用于制备治疗糖尿病的药物。

Claims (10)

1.一种神秘果叶水浸物的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

（1）将神秘果叶洗净，干燥至水分含量≤5%，密封保存备用；

（2）将步骤（1）处理后的神秘果叶用纯净水清洗干净，沥干水分后置于90-100℃水中煮15-20 min，保持微沸15-20min，然后过滤，收集滤液并浓缩，即得神秘果叶水浸物。

2.根据权利要求1所述的一种神秘果叶水浸物的制备方法，其特征在于：所述干燥方式为阳光晒干或烘干机60~80℃烘干。

3.根据权利要求1所述的一种神秘果叶水浸物的制备方法，其特征在于：所述神秘果叶与水的质量比为1:8-12。

4.根据权利要求1所述的制备方法得到的神秘果叶水浸物。

5.根据权利要求4所述的神秘果叶水浸物，其特征在于：其含0.8~1mg/100mL多糖、2~3mg/100mL多酚、1.5~2mg/100mL黄酮类物质。

6.如权利要求4所述的神秘果叶水浸物在制备治疗糖尿病或肥胖症的药物中的应用。

7.一种神秘果叶功能茶饮料，其特征在于：按重量百分数计其包括以下组分：神秘果叶水浸物1~3%、有机酸0.01~0.02%，甜味剂0.01~0.02%，余量为纯净水。

8.根据权利要求7所述的神秘果叶功能茶饮料，其特征在于：所述有机酸为柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、酒石酸中的一种或多种。

9.根据权利要求7所述的神秘果叶功能茶饮料，其特征在于：所述甜味剂为天然罗汉果糖、木糖醇、甜菊糖中的一种或多种。

10.如权利要求7所述的神秘果叶功能茶饮料的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

（1）用纯净水溶解有机酸备用；

（2）用纯净水溶解甜味剂备用；

（3）将溶解好的有机酸酸和甜味剂加入神秘果叶水浸物中，混合调配均匀，超滤，然后添加纯净水至规定体积，得到混合液；

（4）将调配好的混合液脱气、灌装、灭菌，得到所述神秘果叶功能茶饮料。