CN108703919A - 一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及护肤品技术领域，公开了一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法。生物纤维素面膜的制备方法为：1）先将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，然后经过培养、活化得到种子液；2）将种子液接种到发酵培养基中进行培养得到生物纤维素膜；3）对生物纤维素膜进行预处理；4）经过裁剪后装入包装袋，向包装袋中灌入营养液，封口，即得。本发明生物纤维素膜上结合有大量的夏枯草多糖，使生物纤维素膜材具有持久保水性能。

Description

一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域，尤其是涉及一种高保湿生物纤维素面膜的制备方法。
背景技术
面膜因携带方便、效果明显等优势，成为深受爱美人士欢迎的护肤产品。面膜的作用机制包括以下三个方面:第一，面膜通过阻隔皮肤与空气接触、抑制汗水蒸发，保持面部肌肤充分的营养和水分，增强皮肤的弹性和活力；第二，面膜中大量的水分可以充分滋润皮肤角质层，使角质层的渗透力增强，使面膜中的营养物质能够有效渗进皮肤，促进上皮组织细胞的新陈代谢；第三，面膜具有粘附作用，当揭去面膜时，皮肤污物随面膜一起粘除，使皮肤毛囊通畅，皮脂顺利排出。生物纤维素面膜是面膜的一种，它是由葡萄糖杆菌自然发酵制成的纤维体，生物纤维面膜即利用生物纤维素作为面膜的介质，它的纳米纤维是从培养液面开始的，循序的由上往下朝培养基底端绵密的编织，形成具有梯度结构的密度结构，千万纳米级别的纤维远远小于皮肤的毛孔，可以帮助精华液有效地导入，更能让面膜完全贴合肌肤。生物纤维素面膜的梯度密度结构，能有效吸附皮肤中的多余油脂，将毛孔中的油脂导出，同时达到补水和净化的目的。
中国专利公开号CN107582513公开了一种激光美容术后生物纤维素面膜及其制备方法，该制备方法为将菌液加入到培养乳液中均匀分散后静置培养得到生物纤维素膜，经过处理后与天然成分提取物复合得到激光美容术后生物纤维素面膜。此面膜采用静置方式培养菌种制备生物纤维素膜，由于菌种是好氧菌，静置方式培养会造成培养基中氧气不足，影响菌种的繁殖生长，得到的生物纤维膜产量较低。
中国专利公开号CN106860030公开了一种超微纳米孔结构生物纤维素面膜的制备，该专利制备生物纤维素主要流程为取优化好的菌株接入灭菌后的培养基中，将接种后的培养基均匀倒入面膜模具中，经过处理后得到超微纳米孔结构生物纤维素面膜基质，然后面膜基质裁剪成合适的形状，将其塑封包装，高压灭菌后浸泡在灭菌后的植物提取液中浸泡，待面膜吸附饱和后将面膜基材直接放入冰箱中冷冻后进行真空干燥，得到超微纳米孔结构生物纤维素面膜。此面膜保水性能虽然优于其他普通材质面膜，但是面膜容易因为水分的蒸发而变干，从而从脸部脱离，所以此保水性能和保水持久性还有待提高。
发明内容
本发明是为了克服以上现有技术问题，提供一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29～30℃下培养20～28h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以150～200r/min转速振荡培养20～30h，得到种子液；
2)膜材制备：将发酵培养基在120～125℃下灭菌10～20min，冷却后将体积百分比为5～10％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为29～30℃、pH为5～7条件下发酵培养得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1～3％氢氧化钠水溶液中保持20～30min，取出后浸入去离子水中超声振荡20～30min，超声振荡频率为60～80kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理30～50min，然后在-10～-5℃下冷冻10～15h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得。
本发明生物纤维素膜处理过程中，将生物纤维素面膜先浸入氢氧化钠溶液中进行中和处理，除去生物纤维素膜上的酸液，然后进行超声振荡除去纤维素膜上残留的培养基溶液，相比于其他普通浸泡或冲洗的方法能够将彻底除去生物纤维素上的残留物，然后置于紫光灯下进行灭菌处理，冷冻后放入真空干燥箱中进行真空干燥，冷冻干燥不对生物纤维素造成损伤，从而有利于保持生物纤维素原有的优良性能。
作为优选，所述种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3～5％，蛋白胨0.4～0.8％，柠檬酸0.1～0.2％，酵母粉0.5～1％，余量为水。
作为优选，所述步骤2)中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养3～5天后超声振荡5～10min，然后静态培养1～2天后超声振荡2～5min，再静态培养2～3天得到生物纤维素膜。
本发明先将巴氏醋杆菌在静态下培养3～5天，巴氏醋杆菌在静态条件培养下稳定产生生物纤维素，随着时间的延长，培养基液面的生物纤维素逐渐增厚，阻碍空气中的氧气浸入培养基中，对氧气起到隔绝作用，由于巴氏醋杆菌为好氧菌，氧气不足影响巴氏醋杆菌的生长繁殖，所以本发明在静态培养3～5后超声震荡2～5min，提高培养基中的溶氧量，再静态培养1～2天后超声振荡2～5min，最后静态培养2～3天得到生物纤维素膜，本发明通过交替静态动态培养的方式，大大提高巴氏醋杆菌产生生物纤维素的总量，另外采用超声震荡的方式相比其他方式如旋转震荡培养能够对生物纤维素膜起到保护作用，旋转震荡的方式容易导致纤维素成膜不均匀，厚度大小不一，影响面膜质量。
作为优选，所述超声振荡频率为20～35kHz。
本发明研究中发现超声震荡频率低于20kHz时，氧气溶入培养基的量较少，不能满足巴氏醋杆菌的需求，超声震荡频率高于35kHz时，会影响到生物纤维素的成膜，所以本发明控制超声振荡频率为20～35kHz，能够得到产量较多和质量较好的生物纤维素膜。
作为优选，所述步骤2)中发酵培养基包括以下质量百分比的组分：
蔗糖1.5～2.5％，蛋白胨0.8～2％，硫酸铵0.5～1％，柠檬酸0.1～0.15％，改性夏枯草多糖2.4～3.2％，硫酸镁0.2～0.3％，磷酸氢二钠0.1～0.3％，磷酸氢二钾0.1～0.2％，余量为水。
本发明使用蔗糖作为巴氏醋杆菌的碳源，部分蔗糖被巴氏醋杆菌转化为葡萄糖酸，能够使发酵液的pH值降低，有利于巴氏醋杆菌的繁殖生长，合成更多的醋酸纤维；蛋白胨和硫酸铵作为巴氏醋杆菌的氮源；柠檬酸不仅为巴氏醋杆菌生长及纤维素的合成提供能源物质，还可以作为碳源被细菌吸收；磷酸氢二钠和磷酸氢二钾为巴氏醋杆菌提供生长必要的无机元素；镁元素能够促进巴氏醋杆菌生成纤维素。
夏枯草多糖上具有大量亲水性的羟基，具有较好的保水锁水性能，本发明将夏枯草多糖与生物纤维素膜结合，大大提高生物纤维素的持久保水性能，实验中发现如果使用巴氏醋杆菌发酵培养制备而成的生物纤维素面膜基材直接浸入夏枯草多糖溶液中的方法来实现夏枯草多糖与生物纤维素膜结合，结合效果并不理想，这是因为夏枯草多糖为高分子化合物，另外由于具有一定的粘度，从而对夏枯草多糖向相互交织的生物纤维素内部扩散造成较大影响，导致夏枯草多糖不能充分与生物纤维素结合，达不到改善生物纤维素持久保水的理想效果。本发明为解决此问题将夏枯草多糖加入发酵培养基中，在生物纤维素合成过程中实现夏枯草多糖与生物纤维素的结合，即在巴氏醋杆菌分泌葡萄糖进行组装成生物纤维素的过程中夏枯草多糖分子能够通过化学键连接和通过物理作用粘结在生物纤维素上，从而使大量的夏枯草多糖固定在相互交织的生物纤维素的内部，夏枯草多糖与生物纤维素充分结合，大大提高生物纤维素膜的保水持久性；另外，夏枯草多糖具有灭菌的作用，能够延长面膜的保质期；夏枯草多糖还具有较好的保湿和抗氧化作用，面膜使用过程中，部分与生物纤维素结合的夏枯草多糖会缓慢释放，作用于皮肤表面，与其它保湿剂复配具有协同保湿的作用，从而达到护肤的效果。
作为优选，所述改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量20～30倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90～95％，在60～65℃下加热回流提取2～5h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2～3.5％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为20～30g/L纤维素酶水溶液，在50～60℃下酶解30～50min，然后在60～70℃下超声震荡3～6h，超声震荡频率为100～200kHz，再加入离心机中以2000～2500r/min离心20～30min，收集上清液，然后向上清液中加入3～5倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置10～18h，放入离心机中以3000～4000r/min离心35～50min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为5～10％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.4～0.6，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:20～30，加热至60～80℃，搅拌反应15～20h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
将夏枯草多糖加入发酵培养基中，虽然能够充分使夏枯草多糖与生物纤维素结合，但是由于夏枯草多糖上含有较多的羟基，使分子间存在较多的氢键作用，进而使夏枯草多糖在水溶液具有较高的粘度，另外发酵培养基中的蔗糖也具有一定粘度，较高粘度的培养基对巴氏醋杆菌生长繁殖非常不利，导致生物纤维素的产量和质量下降，进而导致生物纤维素的力学性能下降。加水稀释的方法虽然能够降低粘度，但是培养基营养液的浓度也会降低，不利于巴氏醋杆菌的生长繁殖，另外发酵液体积过多，不利于微生物吸收氧气，而巴氏醋杆菌是严格好氧的微生物，所以将降低微生物纤维素的产量。本发明为解决此问题对夏枯草多糖进行改性处理，利用乙酸与夏枯草多糖在缩合剂二环己基碳二亚胺的作用下发生酯化反应，乙酸上的羧基与夏枯草多糖的羟基发生酯化生成酯基，从而暂时隐藏夏枯草多糖上的羟基，降低分子间氢键作用，进而降低夏枯草多糖的粘度，达到适合巴氏醋杆菌生长繁殖的粘度，得到的生物纤维素力学性能较好；在后续的生物纤维素膜预处理过程中，加入的氢氧化钠的作用不仅是中和pH的作用，还能够使夏枯草多糖发生酯化反应生成的酯基水解，从而恢复夏枯草多糖上的大量羟基基团，使生物纤维素膜具有持久的保水性能。
作为优选，所述步骤4)中营养液包括按重量份配比的下述组分：
甘油10～15份，山梨醇5～10份，石榴籽提取物5～10份，没食子酸丙酯1～3份，茶多酚1～3份，卵磷脂1～2份，薄荷油2～3份，苯氧乙醇1～2份，卡拉胶1～3份，三乙醇胺1～3份，去离子水40～60份。
甘油和山梨醇复配具有较好的保湿性能；石榴籽提取物、没食子酸丙酯、茶多酚具有协同增效抗氧化的作用，可以帮助皮肤抵抗自由基和胶原质降解酶的伤害，从而保持皮肤的光滑和弹性；卵磷脂作为表面活性剂，能够增加皮肤对营养物质的吸收作用；薄荷油具有清凉的香气，作为面膜液的香料；卡拉胶起到增稠的作用，提高营养液的粘度，从而增加纤维素面膜基材与脸部贴合的牢度，使面膜不易从脸部脱落；苯氧乙醇起到防腐的作用，延长面膜的保质期，三乙醇胺作为营养液的pH调节剂，使面膜液的pH值接近中性。
作为优选，所述石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入40～50倍量的水中，加热至70～80℃，超声振荡提取1～3h，将提取液放入离心机中以2500～3000r/min离心15～20min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
因此，本发明具有如下有益效果：(1)生物纤维素膜上结合有较多的夏枯草多糖，使生物纤维素膜材具有持久保水性能；(2)生物纤维膜具有较好的力学性能。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案做进一步说明。
本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的，实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
实施例1
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养25h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以150r/min转速振荡培养25h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4％，蛋白胨0.6％，柠檬酸0.15％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在123℃下灭菌15min，冷却后将体积百分比为8％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨1％，硫酸铵0.8％，柠檬酸0.12％，改性夏枯草多糖3％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸氢二钾0.15％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡10min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡5min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养2天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1～3％氢氧化钠水溶液中保持25min，取出后浸入去离子水中超声振荡20min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理40min，然后在-6℃下冷冻12h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油12份，山梨醇8份，石榴籽提取物6份，没食子酸丙酯2份，茶多酚2份，卵磷脂1.5份，薄荷油2.5份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2份，三乙醇胺2份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量22倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在63℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为25g/L纤维素酶水溶液，在55℃下酶解40min，然后在65℃下超声震荡4h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2200r/min离心25min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置15h，放入离心机中以3500r/min离心40min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为8％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.5，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:25，加热至70℃，搅拌反应18h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至70℃，超声振荡提取2h，将提取液放入离心机中以2500r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例2
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在30℃下培养25h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以180r/min转速振荡培养20h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4％，蛋白胨0.6％，柠檬酸0.15％，酵母粉0.5％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在122℃下灭菌18min，冷却后将体积百分比为8％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨1％，硫酸铵0.8％，柠檬酸0.12％，改性夏枯草多糖3％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸氢二钾0.15％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡8min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养1天后超声振荡3min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2％氢氧化钠水溶液中保持25min，取出后浸入去离子水中超声振荡20min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理40min，然后在-10℃下冷冻13h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油14份，山梨醇6份，石榴籽提取物8份，没食子酸丙酯2.5份，茶多酚2份，卵磷脂1.5份，薄荷油2份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2份，三乙醇胺1份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量25倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在65℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为25g/L纤维素酶水溶液，在55℃下酶解40min，然后在60℃下超声震荡5h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2000r/min离心25min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置12h，放入离心机中以3500r/min离心45min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为6％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.5，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:25，加热至70℃，搅拌反应18h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至70℃，超声振荡提取2h，将提取液放入离心机中以2800r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例3
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养22h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以200r/min转速振荡培养30h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4.5％，蛋白胨0.5％，柠檬酸0.1％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在124℃下灭菌18min，冷却后将体积百分比为6％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨1.8％，硫酸铵0.7％，柠檬酸0.13％，改性夏枯草多糖2.8％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.15％，磷酸氢二钾0.2％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡8min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡4min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.5％氢氧化钠水溶液中保持25min，取出后浸入去离子水中超声振荡20min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理45min，然后在-5℃下冷冻13h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油13份，山梨醇9份，石榴籽提取物8份，没食子酸丙酯2.5份，茶多酚2份，卵磷脂1份，薄荷油3份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2.5份，三乙醇胺2份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量28倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在62℃下加热回流提取4h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2.5％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为22g/L纤维素酶水溶液，在58℃下酶解45min，然后在65℃下超声震荡4h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2400r/min离心24min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置15h，放入离心机中以3500r/min离心45min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为6％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.45，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:28，加热至75℃，搅拌反应15h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入50倍量的水中，加热至75℃，超声振荡提取2.5h，将提取液放入离心机中以2600r/min离心16min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例4
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养27h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以190r/min转速振荡培养21h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3.5％，蛋白胨0.45％，柠檬酸0.16％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在124℃下灭菌17min，冷却后将体积百分比为6％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨0.1％，硫酸铵0.9％，柠檬酸0.14％，改性夏枯草多糖3％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.1％，磷酸氢二钾0.2％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡9min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡3min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.5％氢氧化钠水溶液中保持22min，取出后浸入去离子水中超声振荡28min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理45min，然后在-7℃下冷冻13h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油12份，山梨醇6份，石榴籽提取物9份，没食子酸丙酯2份，茶多酚2.5份，卵磷脂1.5份，薄荷油3份，苯氧乙醇1份，卡拉胶3份，三乙醇胺2.5份，去离子水45份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量25倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在62℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为28g/L纤维素酶水溶液，在55℃下酶解45min，然后在62℃下超声震荡5h，超声震荡频率为120kHz，再加入离心机中以2200r/min离心25min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置12h，放入离心机中以3500r/min离心40min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为6％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.5，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:28，加热至62℃，搅拌反应16h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入50倍量的水中，加热至75℃，超声振荡提取1.5h，将提取液放入离心机中以2600r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例5
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在30℃下培养27h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以180r/min转速振荡培养26h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4.5％，蛋白胨0.7％，柠檬酸0.18％，酵母粉0.7％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在123℃下灭菌16min，冷却后将体积百分比为6％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨1.8％，硫酸铵0.6％，柠檬酸0.14％，改性夏枯草多糖3％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.25％，磷酸氢二钾0.15％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡9min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡4min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.5％氢氧化钠水溶液中保持26min，取出后浸入去离子水中超声振荡23min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理35min，然后在-7℃下冷冻12h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油14份，山梨醇6份，石榴籽提取物9份，没食子酸丙酯2.5份，茶多酚1.5份，卵磷脂1.5份，薄荷油3份，苯氧乙醇1份，卡拉胶2.5份，三乙醇胺2份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量25倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在63℃下加热回流提取4h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为28g/L纤维素酶水溶液，在52℃下酶解45min，然后在68℃下超声震荡5h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2300r/min离心30min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置16h，放入离心机中以3500r/min离心45min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为9％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.55，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:27，加热至63℃，搅拌反应17h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至73℃，超声振荡提取2.5h，将提取液放入离心机中以2600r/min离心16min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例6
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在30℃下培养25h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以170r/min转速振荡培养29h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4.5％，蛋白胨0.55％，柠檬酸0.16％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在12℃下灭菌18min，冷却后将体积百分比为7％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为29℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2％，蛋白胨0.12％，硫酸铵0.9％，柠檬酸0.14％，改性夏枯草多糖2.9％，硫酸镁0.26％，磷酸氢二钠0.24％，磷酸氢二钾0.17％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡8min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡4min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.5％氢氧化钠水溶液中保持28min，取出后浸入去离子水中超声振荡25min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理45min，然后在-8℃下冷冻12h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油12份，山梨醇6份，石榴籽提取物8份，没食子酸丙酯2.5份，茶多酚2份，卵磷脂2份，薄荷油2.4份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2.5份，三乙醇胺1.5份，去离子水60份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量28倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在63℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为27g/L纤维素酶水溶液，在53℃下酶解45min，然后在64℃下超声震荡5h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2300r/min离心25min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置16h，放入离心机中以3500r/min离心40min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为7％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.55，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:22，加热至75℃，搅拌反应16h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入50倍量的水中，加热至76℃，超声振荡提取2.5h，将提取液放入离心机中以2800r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例7
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养27h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以190r/min转速振荡培养26h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖4.5％，蛋白胨0.5％，柠檬酸0.19％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在121℃下灭菌19min，冷却后将体积百分比为8％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2.2％，蛋白胨1.6％，硫酸铵0.7％，柠檬酸0.14％，改性夏枯草多糖2.8％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.25％，磷酸氢二钾0.15％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡8min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡2min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1.5％氢氧化钠水溶液中保持26min，取出后浸入去离子水中超声振荡23min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理36min，然后在-7℃下冷冻14h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油11份，山梨醇9份，石榴籽提取物6份，没食子酸丙酯2.8份，茶多酚2.2份，卵磷脂1.5份，薄荷油2.2份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2.8份，三乙醇胺2份，去离子水60份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量24倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在62℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2.4％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为22g/L纤维素酶水溶液，在55℃下酶解40min，然后在68℃下超声震荡5h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2200r/min离心23min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置11h，放入离心机中以3500r/min离心46min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为9％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.55，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:26，加热至77℃，搅拌反应19h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至75℃，超声振荡提取2.2h，将提取液放入离心机中以3000r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例8
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养27h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以180r/min转速振荡培养21h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3.3％，蛋白胨0.55％，柠檬酸0.16％，酵母粉0.9％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在121℃下灭菌12min，冷却后将体积百分比为8％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为7条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2.3％，蛋白胨0.9％，硫酸铵0.6％，柠檬酸0.14％，改性夏枯草多糖2.7％，硫酸镁0.28％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸氢二钾0.15％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡9min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡3min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.5％氢氧化钠水溶液中保持22min，取出后浸入去离子水中超声振荡27min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理35min，然后在-7℃下冷冻14h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油11份，山梨醇8份，石榴籽提取物6份，没食子酸丙酯2.6份，茶多酚2.2份，卵磷脂1.5份，薄荷油2.2份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶1份，三乙醇胺3份，去离子水60份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量22倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在63℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为27g/L纤维素酶水溶液，在59℃下酶解35min，然后在66℃下超声震荡4h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2300r/min离心29min，收集上清液，然后向上清液中加入3.5倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置17h，放入离心机中以3500r/min离心40min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为6.5％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.44，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:27，加热至65℃，搅拌反应18h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至76℃，超声振荡提取2.5h，将提取液放入离心机中以2500r/min离心11min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例9
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养22h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以170r/min转速振荡培养24h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3.8％，蛋白胨0.75％，柠檬酸0.14％，酵母粉0.8％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在121℃下灭菌18min，冷却后将体积百分比为7％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为5条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖1.9％，蛋白胨0.18％，硫酸铵0.7％，柠檬酸0.12％，改性夏枯草多糖3.1％，硫酸镁0.27％，磷酸氢二钠0.1％，磷酸氢二钾0.2％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡8min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡4min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为2.2％氢氧化钠水溶液中保持28min，取出后浸入去离子水中超声振荡22min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理45min，然后在-6℃下冷冻13h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油13份，山梨醇9份，石榴籽提取物8份，没食子酸丙酯2.3份，茶多酚1.2份，卵磷脂1.5份，薄荷油2份，苯氧乙醇2份，卡拉胶2.7份，三乙醇胺2.5份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量25倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在64℃下加热回流提取4h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2.5％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为26g/L纤维素酶水溶液，在54℃下酶解40min，然后在62℃下超声震荡5h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2300r/min离心22min，收集上清液，然后向上清液中加入3～5倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置10～18h，放入离心机中以3500r/min离心40min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为7％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.5，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:23，加热至75℃，搅拌反应16h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入45倍量的水中，加热至77℃，超声振荡提取2h，将提取液放入离心机中以3000r/min离心18min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例10
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在30℃下培养24h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以190r/min转速振荡培养27h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3.8％，蛋白胨0.6％，柠檬酸0.15％，酵母粉0.7％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在122℃下灭菌15min，冷却后将体积百分比为6％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为6条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖1.9％，蛋白胨1％，硫酸铵0.9％，柠檬酸0.11％，改性夏枯草多糖2.9％，硫酸镁0.25％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸氢二钾0.1％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养4天后超声振荡9min，超声振荡频率为30kHz，然后静态培养2天后超声振荡3min，超声振荡频率为30kHz，再静态培养2天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1.5％氢氧化钠水溶液中保持27min，取出后浸入去离子水中超声振荡26min，超声振荡频率为70kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理33min，然后在-7℃下冷冻14h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油11份，山梨醇6份，石榴籽提取物6份，没食子酸丙酯2份，茶多酚2份，卵磷脂1.2份，薄荷油2.8份，苯氧乙醇1.5份，卡拉胶2.6份，三乙醇胺2.5份，去离子水50份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量22倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在61℃下加热回流提取3h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2.3％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为24g/L纤维素酶水溶液，在53℃下酶解36min，然后在68℃下超声震荡4h，超声震荡频率为150kHz，再加入离心机中以2300r/min离心22min，收集上清液，然后向上清液中加入4倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置16h，放入离心机中以3500r/min离心38min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为6％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.5，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:27，加热至65℃，搅拌反应19h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入42倍量的水中，加热至80℃，超声振荡提取1.5h，将提取液放入离心机中以2500r/min离心16min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例11
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在30℃下培养28h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以200r/min转速振荡培养30h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖5％，蛋白胨0.8％，柠檬酸0.2％，酵母粉1％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在125℃下灭菌20min，冷却后将体积百分比为10％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为30℃、pH为7条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖2.5％，蛋白胨2％，硫酸铵1％，柠檬酸0.15％，改性夏枯草多糖3.2％，硫酸镁0.3％，磷酸氢二钠0.3％，磷酸氢二钾0.2％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养5天后超声振荡10min，超声振荡频率为35kHz，然后静态培养2天后超声振荡5min，超声振荡频率为35kHz，再静态培养3天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为3％氢氧化钠水溶液中保持30min，取出后浸入去离子水中超声振荡30min，超声振荡频率为80kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理50min，然后在-5℃下冷冻15h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油15份，山梨醇10份，石榴籽提取物10份，没食子酸丙酯3份，茶多酚3份，卵磷脂2份，薄荷油3份，苯氧乙醇2份，卡拉胶3份，三乙醇胺3份，去离子水60份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量30倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为95％，在65℃下加热回流提取5h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为3.5％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为30g/L纤维素酶水溶液，在60℃下酶解50min，然后在70℃下超声震荡6h，超声震荡频率为200kHz，再加入离心机中以2500r/min离心30min，收集上清液，然后向上清液中加入5倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置18h，放入离心机中以4000r/min离心50min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为10％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.6，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:30，加热至80℃，搅拌反应20h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入50倍量的水中，加热至80℃，超声振荡提取3h，将提取液放入离心机中以3000r/min离心20min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
实施例12
一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，包括以下步骤：
1)种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29℃下培养20h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以150r/min转速振荡培养20h，得到种子液，其中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3％，蛋白胨0.4％，柠檬酸0.1％，酵母粉0.5％，余量为水；
2)膜材制备：将发酵培养基在120℃下灭菌10min，冷却后将体积百分比为5％的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为29℃、pH为5条件下发酵培养得到生物纤维素膜，发酵培养基包括以下质量百分比的组分：蔗糖1.5％，蛋白胨0.8％，硫酸铵0.5％，柠檬酸0.1％，改性夏枯草多糖2.4％，硫酸镁0.2％，磷酸氢二钠0.1％，磷酸氢二钾0.1％，余量为水；其中中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养3天后超声振荡5min，超声振荡频率为20kHz，然后静态培养1天后超声振荡2min，超声振荡频率为20kHz，再静态培养2天得到生物纤维素膜；
3)生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1％氢氧化钠水溶液中保持20min，取出后浸入去离子水中超声振荡20min，超声振荡频率为60kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理30min，然后在-10℃下冷冻10h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4)灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得；营养液包括按重量份配比的下述组分：甘油10份，山梨醇5份，石榴籽提取物5份，没食子酸丙酯1份，茶多酚1份，卵磷脂1份，薄荷油2份，苯氧乙醇1份，卡拉胶1份，三乙醇胺1份，去离子水40份。
改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量20倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90％，在60℃下加热回流提取2h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2％纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为20g/L纤维素酶水溶液，在50℃下酶解30min，然后在60℃下超声震荡3h，超声震荡频率为100kHz，再加入离心机中以2000r/min离心20min，收集上清液，然后向上清液中加入3倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置10h，放入离心机中以3000r/min离心35min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为5％夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.4，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:20，加热至60℃，搅拌反应15h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：
将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入40倍量的水中，加热至70℃，超声振荡提取1h，将提取液放入离心机中以2500r/min离心15min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
对比例：
对比例1：对比例1与实施例1的区别在于步骤2)中发酵培养基中没有改性夏枯草多糖。
对比例2：对比例2与实施例1的区别在于步骤2)中发酵培养基中将改性夏枯草多糖替换为夏枯草多糖。
对比例3：对比例3与实施例1的区别在于步骤2)中发酵培养基中没有改性夏枯草多糖，将步骤3)得到的生物纤维素干膜浸入质量分数为3％夏枯草多糖水溶液中8天。
对比例4：对比例4与实施例2区别在于步骤4)中没有石榴籽提取物。
对比例5：对比例5与实施例2区别在于步骤4)中没有茶多酚。
对比例6：对比例6与实施例2区别在于步骤4)中没有没食子酸丙酯。
一、面膜液性能测试：
1、面膜营养液的抗氧化性性能测试：
称取DPPH自由基2mg，然后使用95％的乙醇定容在50mL容量瓶中，分别取2mL面膜营养液和2mL DPPH溶液加入试管中，摇荡均匀，以溶剂作为对照测定吸光度As，然后测定2mL面膜营养液与2mL95％的乙醇混合后的吸光度Ar，再测定2mL DPPH溶液与2mL95％的乙醇混合后的吸光度A0，通过公式计算出DPPH自由基清除率。
清除率Y＝[1-(As-Ar)/A0]×100％。
2、面膜营养液保湿率测定：
通过称重法测试面膜营养液的保湿率，在75mm×75mm的玻璃板上贴上3M胶带，然后设定温度为37℃，湿度为60％，将面膜营养液涂敷在贴有3M胶带的玻璃板上，置于恒温恒湿箱内，分在在4h，8h和24h称重，通过公式计算出保湿率。
保湿率(％)＝M2/M1×100％，
其中M1为放置前水分重量，M2为放置后水分重量。
从测试数据对比可以得到本发明面膜营养液具有较好的清除自由基效果，另外具有较好的保湿效果，在37℃的环境中存放8h后面膜液的保湿效果趋于达到稳定状态。
二、生物纤维素膜基材性能测试
1、生物纤维素膜基材力学性能测试
对制备的生物纤维素面膜进行湿膜拉伸性能测试，面膜样条尺寸为2cm×8cm，拉伸速率控制为5mm/min，使用下列公式分别计算面膜的拉伸强度、断裂伸长率、拉伸弹性模量。
στ＝p/b·d，
其中στ拉伸强度(MPa)；p为最大破坏负荷(N)；b为试样宽度(mm)；d为试样厚度(mm)。
ετ＝(L-L0)/L0×100％，
其中ετ为断裂伸长率(％)；L为试样断裂时标线间的伸长度(mm)；L0为试样的有效长度(mm)。
Eτ＝Δp·L0/b·d·ΔL，
其中Eτ为拉伸弹性模量(MPa)；Δp为载荷增量；ΔL为变形增量。
στ(MPa) ετ(mm) Eτ(MPa)
实施例1 1.53 18.24 6.18
实施例2 1.62 16.35 6.25
实施例3 1.56 17.68 6.22
实施例4 1.63 16.22 6.28
实施例5 1.59 16.53 6.24
实施例6 1.61 16.47 6.25
对比例2 0.64 34.52 3.26
由实施例和对比例2对比可以得到，本发明生物纤维素面膜基材相对于对比例2具有较好的拉伸强度和拉伸弹性模量，这是因为对比例2夏枯草多糖没有经过改性处理，导致夏枯草多糖上具有较多的羟基，使培养基粘度增大，影响细菌的生长和繁殖，导致细菌产生的生物纤维素的力学性能下降。
2、生物纤维素面膜基材持水性能测试
将生物纤维素膜基材剪为2cm×2cm大小的膜片，然后放入100℃的沸水中煮2h，然后将其放入烘箱中，设定温度为37℃，分别称量记录10min，20min，30min，40min，50min后面膜的持水倍率。
持水倍率＝湿膜重量/干膜重量。
10min 20min 30min 40min 50min
实施例1 232 185 143 122 85
实施例2 235 191 148 124 91
实施例3 228 173 131 108 72
实施例4 225 168 123 102 69
实施例5 237 202 165 133 92
实施例6 222 164 122 95 67
对比例1 153 92 62 28 12
对比例3 176 105 82 43 26
由测试得到本发明生物纤维素面膜在37℃下干燥50min后持水倍率在60倍以上，说明本发明生物纤维素面膜具有较持久的保水性能。
3、生物纤维素面膜基材吸水性能测试
将生物纤维素膜基材剪为2cm×2cm大小的膜片，放入100℃沸水中煮2h，使生物纤维素膜达到饱和状态，采用压榨法将饱和状态下的生物纤维素膜放在玻璃片上进行压制相同时间，然后将膜片置于去离子水中进行复水测试，按下式计算含水率。
P＝(m-m0)/m0×100％，
其中P为含水率(％)，m为湿膜重量，m0为干膜重量。
实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 对比例1 对比例3
P(％) 96.3 98.2 95.7 94.8 82.5 84.2
本发明和对比例1和3相比生物纤维素膜复水后具有更高的含水率，这是因为本发明生物纤维素上具有较多的夏枯草多糖，夏枯草多糖具有较多的亲水性基团。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (8)

1.一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）种子液制备：将巴氏醋杆菌接种到斜面固体培养基上，置于恒温电热培养箱中在29~30℃下培养20~28h，得到活化巴氏醋杆菌，将活化巴氏醋杆菌接入种子培养基中，在摇床上以150~200r/min转速振荡培养20~30h，得到种子液；
2）膜材制备：将发酵培养基在120~125℃下灭菌10~20min，冷却后将体积百分比为5~10%的种子液接种到发酵培养基中，搅拌使巴氏醋杆菌均匀分散，然后在温度为29~30℃、pH为5~7条件下发酵培养得到生物纤维素膜；
3）生物纤维素膜预处理：将生物纤维素膜浸入质量分数为1~3%氢氧化钠水溶液中保持20~30min，取出后浸入去离子水中超声振荡20~30min，超声振荡频率为60~80kHz，取出生物纤维素膜并放在紫光灯下处理30~50min，然后在-10~-5℃下冷冻10~15h，再放入真空干燥箱中进行干燥得到生物纤维素干膜；
4）灌装：将生物纤维素干膜经过压缩后裁剪成与脸部相对应的形状，折叠装入包装袋中，然后向包装袋中灌入营养液，封口，即得。
2.根据权利要求1所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中种子培养基包括以下质量百分比的组分：葡糖糖3~5%，蛋白胨0.4~0.8%，柠檬酸0.1~0.2%，酵母粉0.5~1%，余量为水。
3.根据权利要求1所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中巴氏醋杆菌发酵培养过程为：静态培养3~5天后超声振荡5~10min，然后静态培养1~2天后超声振荡2~5min，再静态培养2~3天得到生物纤维素膜。
4.根据权利要求3所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述超声振荡频率为20~35kHz。
5.根据权利要求1所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中发酵培养基包括以下质量百分比的组分：
蔗糖1.5~2.5%，蛋白胨0.8~2%，硫酸铵0.5~1%，柠檬酸0.1~0.15%，改性夏枯草多糖2.4~3.2%，硫酸镁0.2~0.3%，磷酸氢二钠0.1~0.3%，磷酸氢二钾0.1~0.2%，余量为水。
6.根据权利要求5所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述改性夏枯草多糖的制备方法包括以下步骤：
将夏枯草果穗干燥后用粉碎机粉碎得到夏枯草粉，加入夏枯草粉重量20~30倍的乙醇水溶液，乙醇的体积分数为90~95%，在60~65℃下加热回流提取2~5h，过滤收集残渣，干燥得到脱除色素和小分子多糖的夏枯草粉末，然后将其加入质量浓度为2~3.5%纤维素酶水溶液，夏枯草粉末的浓度为20~30g/L纤维素酶水溶液，在50~60℃下酶解30~50min，然后在60~70℃下超声震荡3~6h，超声震荡频率为100~200kHz，再加入离心机中以2000~2500r/min离心20~30min，收集上清液，然后向上清液中加入3~5倍量的乙醇中进行醇沉，冰浴放置10~18h，放入离心机中以3000~4000r/min离心35~50min，收集沉淀，然后经过冷冻干燥得到夏枯草多糖，将夏枯草多糖加入去离子水中搅拌得到质量分数为5~10%夏枯草多糖溶液，然后加入乙酸，夏枯草多糖与乙酸的质量比为1:0.4~0.6，再加入二环己基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺与夏枯草多糖质量比为1:20~30，加热至60~80℃，搅拌反应15~20h，冷却后进行旋转蒸发得到改性夏枯草多糖。
7.根据权利要求1所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述步骤4）中营养液包括按重量份配比的下述组分：
甘油10~15份，山梨醇5~10份，石榴籽提取物5~10份，没食子酸丙酯1~3份，茶多酚1~3份，卵磷脂1~2份，薄荷油2~3份，苯氧乙醇1~2份，卡拉胶1~3份，三乙醇胺1~3份，去离子水40~60份。
8.根据权利要求7所述的一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法，其特征在于，所述石榴籽提取物的制备方法包括以下步骤：将清洗干净后的石榴籽干燥后粉碎得到石榴籽粉，将石榴籽粉加入40~50倍量的水中，加热至70~80℃，超声振荡提取1~3h，将提取液放入离心机中以2500~3000r/min离心15~20min，然后依次经过过滤、冷冻干燥得到石榴籽提取物。
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