CN106367452A - 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法 - Google Patents

一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106367452A
CN106367452A CN201610900985.2A CN201610900985A CN106367452A CN 106367452 A CN106367452 A CN 106367452A CN 201610900985 A CN201610900985 A CN 201610900985A CN 106367452 A CN106367452 A CN 106367452A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medium
tryptone
hpo
culture medium
count
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610900985.2A
Other languages
English (en)
Inventor
马霞
李路遥
陈世文
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Institute of Technology
Shanghai Sixth Peoples Hospital
Original Assignee
Shanghai Institute of Technology
Shanghai Sixth Peoples Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Institute of Technology, Shanghai Sixth Peoples Hospital filed Critical Shanghai Institute of Technology
Priority to CN201610900985.2A priority Critical patent/CN106367452A/zh
Publication of CN106367452A publication Critical patent/CN106367452A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0212—Face masks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/731—Cellulose; Quaternized cellulose derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，将木醋杆菌活化，然后将活化好的木醋杆菌接种至种子培养基中进行培养，得到种子液；将所得的种子液接种至发酵培养基中，充分振荡使种子液和发酵培养基混合均匀，然后按总体积1%‑5%的量添加盐酸利多卡因注射液，静置培养6‑14天，生成具有麻醉功效的细菌纤维素膜浮于液面，然后除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面及膜中的培养基及杂质，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。本发明的具有麻醉功能的细菌纤维素膜具有良好的生物相容性、抗炎、麻醉功效等生物活性，而且本发明的制备方法操作简单，保护环境。

Description

一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法
技术领域
本发明属于生物医药领域，涉及一种膜材料，具体来说是一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法。
背景技术
细菌纤维素是Brown首次发现的，其直径仅为人头发丝的1/10，即为10-100nm，是一种新型的纳米生物材料。细菌纤维素与植物纤维素的主要区别在于不掺杂其他多糖，如木质素、半纤维素等，因此具有很多独特的性质，如高结晶度，高化学纯度，高抗张强度，高弹性模量，高持水量等，广泛应用与医药、食品、环境等方面。同时，细菌纤维素也是一种生物可降解，而在人体内不降解的纳米生物纤维。
盐酸利多卡因具有麻醉功效，将盐酸利多卡因引用到细菌纤维素膜的制备中，可以制备出具有麻醉功效的细菌纤维素膜，尤其在医学美容方面，这种新型医用膜更加简单方便安全，其相关研究也将日益受到研究者的重视。
发明内容
本发明提供了一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，所述的这种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法要解决现有技术中的面膜容易后化学残留，对使用者的皮肤产生伤害和过敏的技术问题。
本发明提供了一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，包括如下步骤：
1)首先将斜面菌种木醋杆菌转接至新鲜斜面培养基中，控制温度为27-32℃，活化48-72h后得活化好的斜面菌种木醋杆菌；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%柠檬酸，2-4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为5-6；上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用；
2)一个培养种子液的步骤，取活化好的斜面菌种木醋杆菌接种至种子培养基中，控制温度为30-32℃，转速为140-200r/min进行培养18-30h，得到种子液；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5-6，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用；
3)将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，所述的种子液与发酵培养基的体积比为6-10：100，充分振荡使种子液和发酵培养基混合均匀，然后按总体积1%-5%的量添加盐酸利多卡因注射液，于28-32℃静置培养6-14天，生成具有麻醉功效的细菌纤维素膜浮于液面，然后除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面及膜中的培养基及杂质，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5-6，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用。
进一步的，所述的木醋杆菌Gluconacetobacterxylinum)为GMCCNo.1.1812或CGMCCNo.1.2378；
步骤1）中控制温度27℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成， pH为5；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到100mL种子培养基中，30℃振荡培养18h，摇床转速为140r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量去离子水组成，pH为5；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积1%的量添加盐酸利多卡因注射液，在28℃静置培养6天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5。
进一步的，步骤1）控制温度为32℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到100mL种子培养基中，32℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积5%的量添加盐酸利多卡因注射液，在32℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6。
进一步的，步骤1）中控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，3%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到250mL种子培养基中，30℃振荡培养24h，摇床转速为160r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为8：100，然后按总体积3%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养7天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6。
进一步的，步骤1）中控制温度为28℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到150mL种子培养基中，32℃振荡培养28h，摇床转速为180r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积2%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养10天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的蔗糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6。
进一步的，步骤1）中控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到250mL种子培养基中，30℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积4%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5。
进一步的，在步骤3)中：在所述的除去具有麻醉功能的细菌纤维素膜的膜表面的培养基及杂质的过程中，取步骤3)浮于液面的具有麻醉功能的细菌纤维素膜，用水冲洗5-15次；将已除去培养基及杂质的细菌纤维素膜浸泡于碱溶液中，控制温度为80-100℃煮30-80min，然后用蒸馏水冲洗至流出液的pH为7.0-7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功能的细菌纤维素膜：所述的碱溶液为浓度为0.05-0.4mol/l的NaOH水溶液。
进一步的，在步骤3)中：所述的盐酸利多卡因注射液中溶剂和溶质的物料比为20mL：0.4g，由上海朝晖药业有限公司生产。
进一步的，所述的膜的厚度为0.05-3mm，含水率为96.4%-97.9%，拉伸强度为30MPa-90MPa，盐酸利多卡因的含量为112μg/mL-182μg/mL，断裂伸长率为2%-4%。
本发明实施例采用的木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812和木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.2378均来自中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所；邮编100101；根据网站：http://www.cgmcc.net首页订购流程的介绍，上述两个菌株均可以订购。
本发明选取能分泌细菌纤维素的菌株木醋杆菌活化制备成种子液；将种子液接种到灭菌后的发酵培养基中；同时按总体积1%-5%的量添加盐酸利多卡因注射液，将其均匀混合；然后于28-32℃静置培养6-10天，生成具有麻醉功能的细菌纤维素膜浮于液面，然后除去具有麻醉功能的细菌纤维素膜的膜表面及膜中的培养基及杂质，即得具有麻醉功能的细菌纤维素膜。
本发明和已有技术相比，其技术进步是显著的。本发明通过向生产细菌纤维素的发酵培养基中添加盐酸利多卡因注射液制备而成具有麻醉功效的细菌纤维素膜，具有良好的生物相容性、抗炎、麻醉功效等生物活性，在化妆品医用领域具有良好的应用前景。同时，本发明的方法，工艺简单，操作简单，成本低，对环境友好无污染。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进一步阐述，但并不限制本发明。
本发明个实施例中所得的具有麻醉功能的细菌纤维素膜的厚度所用仪器型号为0-25mm的千分尺，由上海量具刃具厂生产；
盐酸利多卡因含量的测定仪器为TV-6000PC紫外分光光度计，由上海元析仪器有限公司生产。
含水率进行检测的仪器型号为 YP1002N 电子天平 ：由上海精科天平公司生产；
拉伸强度和断裂伸长率进行检测的仪器的型号为TA-XTPlus Exponent32物性测试仪，
由英国 Stable Micro System 公司生产 ；
实施例1
一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)、菌种的活化
取1环木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812斜面菌种至步骤(1)中的斜面培养基中，控制温度27℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为5，上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(2)、种子液的培养
取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到100ml的种子培养基中，30℃振荡培养18h，摇床转速为140r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量去离子水组成，调节pH为5，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(3)、将步骤（2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积1%的量添加盐酸利多卡因注射液，在28℃静置培养6天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为5，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
将上述生成的具有麻醉功效的细菌纤维素膜粗品，用水冲洗5次，以除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜的表面的培养基及杂质，再将具有麻醉功效的细菌纤维素膜浸泡于0.05mol/l的NaOH水溶液中，80℃煮80min，去除具有麻醉功效的细菌纤维素膜中的菌体和残留培养基，这时具有麻醉功效的细菌纤维素膜呈乳白色半透明，然后用蒸馏水冲洗直至流出液的pH值为7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。
上述所得的具有麻醉功效的细菌纤维素膜经检测，其厚度为0.05mm、含水率为96.9%、盐酸利多卡因的含量为143μg/mL、拉伸强度为45MPa、断裂伸长率为2.4%。
实施例2
一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)、菌种的活化
取1环木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812斜面菌种至步骤(1)中的斜面培养基中，控制温度为32℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌15min，冷却至25℃后备用；
(2)、种子液的培养
取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到100ml的种子培养基中，30℃振荡培养24h，摇床转速为160r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌15min，冷却至25℃后备用；
(3)、步骤（2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积5%的量添加盐酸利多卡因注射液，在32℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌15min，冷却至25℃后备用；
将上述生成的具有麻醉功效的细菌纤维素膜粗品，用水冲洗15次，以除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面的培养基及杂质，再将具有麻醉功效的细菌纤维素膜浸泡于0.4mol/l的NaOH水溶液中，100℃煮80min，去除具有麻醉功效的细菌纤维素膜中的菌体和残留培养基，这时具有麻醉功效的细菌纤维素膜呈乳白色半透明，然后用蒸馏水冲洗直至流出液的pH值为7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。
上述所得的具有麻醉功效的细菌纤维素膜经检测，其厚度为3mm、含水率为96.4%、盐酸利多卡因的含量为182μg/mL、拉伸强度为30MPa、断裂伸长率为3.2%。
实施例3
一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)、菌种的活化
取1环木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812斜面菌种至步骤(1)中的斜面培养基中，控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，3%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌25min，冷却至30℃后备用；
(2)、种子液的培养
取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到250ml的种子培养基中，32℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌25min，冷却至30℃后备用；
(3)、将步骤（2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为8：100，然后按总体积3%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养7天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌25min，冷却至30℃后备用；
将上述生成的具有麻醉功效的细菌纤维素膜粗品，用水冲洗10次，以除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面的培养基及杂质，再将具有麻醉功效的细菌纤维素膜浸泡于0.1mol/l的NaOH水溶液中，60℃煮60min，去除具有麻醉功效的细菌纤维素膜中的菌体和残留培养基，这时具有麻醉功效的细菌纤维素膜呈乳白色半透明，然后用蒸馏水冲洗直至流出液的pH值为7.0-7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。
上述所得的具有麻醉功效的细菌纤维素膜经检测，其厚度为2.3mm、含水率为97.2%、盐酸利多卡因的含量为167μg/mL、拉伸强度为70MPa、断裂伸长率为2%。
实施例4
一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)、菌种的活化
取1环木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812斜面菌种至步骤(1)中的斜面培养基中，控制温度为28℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(2)、种子液的培养
取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到150ml的种子培养基中，32℃振荡培养28h，摇床转速为180r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(3)、将步骤（2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积2%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养10天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的蔗糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
将上述生成的具有麻醉功效的细菌纤维素膜粗品，用水冲洗7次，以除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面的培养基及杂质，再将具有麻醉功效的细菌纤维素膜浸泡于0.1mol/l的NaOH水溶液中，100℃煮30min，去除具有麻醉功效的细菌纤维素膜中的菌体和残留培养基，这时具有麻醉功效的细菌纤维素膜呈乳白色半透明，然后用蒸馏水冲洗直至流出液的pH值为7.0时停止冲洗，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。
上述所得的具有麻醉功效的细菌纤维素膜经检测，其厚度为1.3mm、含水率为97.9%、盐酸利多卡因的含量为112μg/mL、拉伸强度为90MPa、断裂伸长率为4%。
实施例5
一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)、菌种的活化
取1环木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinum)CGMCCNo.1.1812斜面菌种至步骤(1)中的斜面培养基中，控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6，上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(2)、种子液的培养
取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到250ml的种子培养基中，30℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为5，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
(3)、将步骤（2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积4%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为5，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌20min，冷却至30℃后备用；
将上述生成的具有麻醉功效的细菌纤维素膜粗品，用水冲洗10次，以除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面的培养基及杂质，再将具有麻醉功效的细菌纤维素膜浸泡于0.4mol/l的NaOH水溶液中，100℃煮80min，去除具有麻醉功效的细菌纤维素膜中的菌体和残留培养基，这时具有麻醉功效的细菌纤维素膜呈乳白色半透明，然后用蒸馏水冲洗直至流出液的pH值为7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜。
上述所得的具有麻醉功效的细菌纤维素膜经检测，其厚度为2.4mm、含水率为97.5%、盐酸利多卡因的含量为137μg/mL、拉伸强度为67MPa、断裂伸长率为3.7%。

Claims (10)

1.一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
1）首先将斜面菌种木醋杆菌转接至新鲜斜面培养基中，控制温度为27-32℃，活化48-72h后得活化好的斜面菌种木醋杆菌；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%柠檬酸，2-4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为5-6；上述的斜面培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用；
2）一个培养种子液的步骤，取活化好的斜面菌种木醋杆菌接种至种子培养基中，控制温度为30-32℃，转速为140-200r/min，进行培养18-30h，得到种子液；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5-6，上述的种子培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用；
3）将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，所述的种子液与发酵培养基的体积比为6-10：100，充分振荡使种子液和发酵培养基混合均匀，然后按总体积1%-5%的量添加盐酸利多卡因注射液，于28-32℃静置培养6-14天，生成具有麻醉功效的细菌纤维素膜浮于液面，然后除去具有麻醉功效的细菌纤维素膜表面及膜中的培养基及杂质，即得具有麻醉功效的细菌纤维素膜；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2-4%的葡萄糖，0.5-1%的酵母粉，0.5-1%的胰蛋白胨，0.1-0.5%的Na2HPO4，0.1-0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5-6，上述的发酵培养基在121℃的温度下灭菌15-25min，冷却至25-30℃后使用。
2.如权利要求2所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：所述的木醋杆菌为CGMCCNo.1.1812或CGMCCNo.1.2378。
3.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：
步骤1）中控制温度27℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成， pH为5；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种木醋杆菌接入到100mL种子培养基中，30℃振荡培养18h，摇床转速为140r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量去离子水组成，pH为5；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积1%的量添加盐酸利多卡因注射液，在28℃静置培养6天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，0.5%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.1%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5。
4.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：
步骤1）控制温度为32℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到100mL种子培养基中，32℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积5%的量添加盐酸利多卡因注射液，在32℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，1%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6。
5.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：
步骤1）中控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，3%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到250mL种子培养基中，30℃振荡培养24h，摇床转速为160r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.7%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为8：100，然后按总体积3%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养7天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由3%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，0.6%的胰蛋白胨，0.3%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6。
6.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：
步骤1）中控制温度为28℃培养48h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸，4%的琼脂和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤2)中取1环步骤(1)中活化好的斜面菌种接入到150mL种子培养基中，32℃振荡培养28h，摇床转速为180r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由2%的葡萄糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为6；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为6：100，然后按总体积2%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养10天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由2%的蔗糖，0.5%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.5%的Na2HPO4，0.4%的柠檬酸和余量的去离子水组成，调节pH为6。
7.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：
步骤1）中控制温度为30℃培养72h；所述的斜面培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸，2%的琼脂和余量的去离子水组成，调节pH为6；
步骤2)中取步骤1)中活化好的斜面菌种接入到250mL种子培养基中，30℃振荡培养30h，摇床转速为200r/min；所述的种子培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5；
步骤3)中将步骤2）所得的种子液接种至发酵培养基中，种子液与发酵培养基的体积比为10：100，然后按总体积4%的量添加盐酸利多卡因注射液，在30℃静置培养14天；所述的发酵培养基，按重量百分比计算，由4%的葡萄糖，0.6%的酵母粉，1%的胰蛋白胨，0.1%的Na2HPO4，0.2%的柠檬酸和余量的去离子水组成，pH为5。
8.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：在步骤3)中，在所述的除去具有麻醉功能的细菌纤维素膜的膜表面的培养基及杂质的过程中，取步骤3)浮于液面的具有麻醉功能的细菌纤维素膜，用水冲洗5-15次；将已除去培养基及杂质的细菌纤维素膜浸泡于碱溶液中，控制温度为80-100℃，煮30-80min，然后用蒸馏水冲洗至流出液的pH为7.0-7.2时停止冲洗，即得具有麻醉功能的细菌纤维素膜：所述的碱溶液为浓度为0.05-0.4mol/l的NaOH水溶液。
9.如权利要求1所述的一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法，其特征在于：在步骤3)中：所述的盐酸利多卡因注射液中溶剂和溶质的物料比为20mL：0.4g。
10.如权利要求1-9中任意所述的一种所述的制备方法所得的具有麻醉功能的细菌纤维素膜，其特征在于：所述的膜的厚度为0.05-3mm，含水率为96.4%-97.9%，盐酸利多卡因的含量为112μg/mL-182μg/mL，拉伸强度为30MPa-90MPa，断裂伸长率为2%-4%。
CN201610900985.2A 2016-10-17 2016-10-17 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法 Pending CN106367452A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610900985.2A CN106367452A (zh) 2016-10-17 2016-10-17 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610900985.2A CN106367452A (zh) 2016-10-17 2016-10-17 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106367452A true CN106367452A (zh) 2017-02-01

Family

ID=57895517

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610900985.2A Pending CN106367452A (zh) 2016-10-17 2016-10-17 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106367452A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107557400A (zh) * 2017-10-12 2018-01-09 东北电力大学 一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法
CN107982089A (zh) * 2017-12-04 2018-05-04 上海应用技术大学 一种具有抑菌功效的细菌纤维素面膜的制备方法
CN108703919A (zh) * 2018-08-25 2018-10-26 郑州成济堂生物科技有限公司 一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法
CN108822323A (zh) * 2018-04-10 2018-11-16 上海应用技术大学 一种具有保湿抑菌功效的细菌纤维素膜的制备方法
CN108949834A (zh) * 2018-07-25 2018-12-07 佛山腾鲤新能源科技有限公司 一种光电材料专用CdS薄膜的制备方法
CN109200009A (zh) * 2018-09-28 2019-01-15 华南理工大学 一种具有抗氧化能力的细菌纤维素面膜及其制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103897219A (zh) * 2014-02-27 2014-07-02 上海应用技术学院 一种细菌纤维素/聚丙烯酰胺复合膜的制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103897219A (zh) * 2014-02-27 2014-07-02 上海应用技术学院 一种细菌纤维素/聚丙烯酰胺复合膜的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TROVATTI, E.等: "Bacterial cellulose membranes applied in topical and transdermal delivery of lidocaine hydrochloride and ibuprofen: In vitro diffusion studies", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107557400A (zh) * 2017-10-12 2018-01-09 东北电力大学 一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法
CN107557400B (zh) * 2017-10-12 2022-05-31 东北电力大学 一种提高玉米秸秆水解液培养油脂酵母产油量的方法
CN107982089A (zh) * 2017-12-04 2018-05-04 上海应用技术大学 一种具有抑菌功效的细菌纤维素面膜的制备方法
CN108822323A (zh) * 2018-04-10 2018-11-16 上海应用技术大学 一种具有保湿抑菌功效的细菌纤维素膜的制备方法
CN108949834A (zh) * 2018-07-25 2018-12-07 佛山腾鲤新能源科技有限公司 一种光电材料专用CdS薄膜的制备方法
CN108703919A (zh) * 2018-08-25 2018-10-26 郑州成济堂生物科技有限公司 一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法
CN108703919B (zh) * 2018-08-25 2021-04-27 素妆生物科技(上海)有限公司 一种持久保水生物纤维素面膜的制备方法
CN109200009A (zh) * 2018-09-28 2019-01-15 华南理工大学 一种具有抗氧化能力的细菌纤维素面膜及其制备方法
CN109200009B (zh) * 2018-09-28 2021-01-19 华南理工大学 一种具有抗氧化能力的细菌纤维素面膜及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106367452A (zh) 一种具有麻醉功能的细菌纤维素膜的制备方法
CN107982089A (zh) 一种具有抑菌功效的细菌纤维素面膜的制备方法
CN103211715B (zh) 一种具有梯度结构的细菌纤维素面膜及其制备方法
CN108822323A (zh) 一种具有保湿抑菌功效的细菌纤维素膜的制备方法
CN105012158B (zh) 含细菌纤维素和丝素蛋白的复合生物材料支架及制造方法
CN101805765B (zh) 以废弃果汁或果渣为原料生产可食用彩色细菌纤维素的方法
CN103006468B (zh) 一种保湿乳及其制备方法
CN103233050B (zh) 一种具有梯度结构的细菌纤维素膜及其制备方法
CN101756883A (zh) 一种微生物生态美容面膜及其制备方法
CN102784071A (zh) 一种利用细菌纤维素制备的保湿眼膜
CN104644500A (zh) 一种植物保湿组合物及其制备方法
CN105821094A (zh) 一种纳米级细菌纤维素膜的制备方法及应用
CN106389150A (zh) 透明质酸‑细菌纤维素生物面膜的制备方法
CN112877384A (zh) 一种细菌纤维素的制法、细菌纤维素-壳聚糖复合凝胶护肤面膜及其制法
CN110946822A (zh) 一种化妆品用乳酸菌发酵组合物及其制备方法
CN103897219A (zh) 一种细菌纤维素/聚丙烯酰胺复合膜的制备方法
CN106860030A (zh) 一种超微纳米孔结构生物纤维素面膜的制备
CN103222932B (zh) 一种激光治疗术后修复面膜及其制备方法
CN106753803A (zh) 藏香香料及其制作方法
CN109864943A (zh) 一种白芨多酚的制备方法与应用
CN109044876A (zh) 一种富含小核菌多糖的锁水保湿组合物
CN110403850B (zh) 一种多糖美白固态面膜及其制备方法与应用
CN102392062A (zh) 一种利用腐烂水果为原料制备细菌纤维素的方法
CN110314125B (zh) 一种婴幼儿用环保型湿巾及其制备方法
CN108451791A (zh) 一种丝胶蛋白/透明质酸-细菌纤维素复合生物面膜的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170201