CN108703070A - 一种利用组培快速繁殖海州常山的方法 - Google Patents

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许俊强
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吕霞
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Abstract

本发明提供一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，涉及植物繁殖技术领域，包括以下步骤：(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2‑3cm带芽茎段，用流水冲洗干净，消毒后，水，诱导培养基中培养，直至生成丛生芽；(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6‑0.8cm长的茎段；(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中；(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中；(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，自然生长即可，繁殖系数和成活率高，有利于实现规模化人工种植。

Description

一种利用组培快速繁殖海州常山的方法
技术领域
本发明涉及植物繁殖技术领域，具体涉及一种利用组培快速繁殖海州常山的方法。
背景技术
海州常山别名斑鸠菜、泡花树，因叶大有特殊臭气，又叫臭梧桐，为马鞭草科大青属落叶灌木或小乔木。海州常山是一种风味独特的木本野生蔬菜，又是应用很广的药用植物，在中药材市场上的用量很大。此外，海州常山一株树上花果共存，而且花果期长，色泽亮丽，为良好的观花、观果园林植物；具有一定抗旱、耐淹、耐涝和抗污染的能力，对重金属砷的耐受性和富集能力都较强，是砷污染地的理想修复树种。海州常山市场需求量大，具有广泛的开发利用前景，但种苗繁殖难是规模化种植的一个制约因素。由于扦插和分株的繁殖系数低，而种子发芽较困难，因此，找到一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，对海州常山种质资源保护及规模化人工种植都具有重要意义。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，繁殖系数和成活率高，有利于实现规模化人工种植。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，先进行暗培养，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2500-3000lx，温度25-28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.2-2.4mg/L 6-BA、0.5-0.8mg/L NAA、12-16g/L蔗糖、6-8g/L琼脂、0.6-1.2g/L CaCO3、0.2-0.5g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25-28℃，光照时间为14h/d，光照强度为1500-2000lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养10-12d，光照强度为500-800lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，保持湿度80-90％，15d后自然生长即可。
优选地，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂。
优选地，所述暗培养的温度为20-22℃。
优选地，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20-40份、蛭石20-40份、珍珠岩5-15份、蔗渣10-20份、腐熟牛粪10-20份。
优选地，所述育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭25-35份、蛭石25-35份、珍珠岩8-12份、蔗渣12-18份、腐熟牛粪12-18份。
优选地，所述育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭30份、蛭石30份、珍珠岩10份、蔗渣15份、腐熟牛粪15份。
优选地，所述育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌。
优选地，所述高压蒸汽灭菌压力为103.4kPa，温度121℃，时间15-20min。
(三)有益效果
本发明提供了一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，具有以下有益效果：
本发明能对海州常山进行快速培养繁殖，繁殖效率高，海州常山苗株成苗率高，苗株品质好，栽培后适应性强，可以满足规模化生产的需求，为企业规模化、产业化提供了技术支持。同时本组培快速繁殖方法消毒效果好、染病率低，从而大大提高了成活率。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2800lx，温度26℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、2mg/L 6-BA、0.6mg/L NAA、15g/L蔗糖、7g/L琼脂、0.8g/LCaCO3、0.4g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度26℃，光照时间为14h/d，光照强度为1800lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养11d，光照强度为600lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭25份、蛭石35份、珍珠岩12份、蔗渣15份、腐熟牛粪10份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间16min，保持湿度85％，15d后自然生长即可。
实施例2：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2600lx，温度28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.5mg/L 6-BA、0.8mg/L NAA、14g/L蔗糖、8g/L琼脂、1g/LCaCO3、0.4g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度28℃，光照时间为14h/d，光照强度为1500lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养10d，光照强度为500lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20份、蛭石40份、珍珠岩8份、蔗渣15份、腐熟牛粪12份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间16min，保持湿度82％，15d后自然生长即可。
实施例3：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2500lx，温度25℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.2mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、12g/L蔗糖、6g/L琼脂、0.6g/L CaCO3、0.2g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25℃，光照时间为14h/d，光照强度为1500lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养10d，光照强度为500lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20份、蛭石20份、珍珠岩5份、蔗渣10份、腐熟牛粪10份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间15min，保持湿度80％，15d后自然生长即可。
实施例4：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度3000lx，温度28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、2.4mg/L 6-BA、0.8mg/L NAA、16g/L蔗糖、8g/L琼脂、1.2g/L CaCO3、0.5g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度28℃，光照时间为14h/d，光照强度为2000lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养12d，光照强度为800lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭40份、蛭石40份、珍珠岩15份、蔗渣20份、腐熟牛粪20份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间20min，保持湿度90％，15d后自然生长即可。
实施例5：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2500lx，温度28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.2mg/L 6-BA、0.8mg/L NAA、12g/L蔗糖、8g/L琼脂、0.6g/L CaCO3、0.5g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25℃，光照时间为14h/d，光照强度为2000lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养10d，光照强度为800lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭30份、蛭石30份、珍珠岩10份、蔗渣15份、腐熟牛粪15份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间15min，保持湿度90％，15d后自然生长即可。
实施例6：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度3000lx，温度25℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、2.4mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、12g/L蔗糖、6g/L琼脂、1.2g/L CaCO3、0.2g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25-28℃，光照时间为14h/d，光照强度为1600lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养12d，光照强度为500lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20份、蛭石40份、珍珠岩15份、蔗渣20份、腐熟牛粪20份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间20min，保持湿度90％，15d后自然生长即可。
实施例7：
一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂，先进行暗培养，温度为20-22℃，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2700lx，温度28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.6mg/L 6-BA、0.8mg/L NAA、12g/L蔗糖、8g/L琼脂、0.8g/L CaCO3、0.4g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25℃，光照时间为14h/d，光照强度为2000lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L 6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养12d，光照强度为500lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20份、蛭石40份、珍珠岩15份、蔗渣20份、腐熟牛粪10份，育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌，压力为103.4kPa，温度121℃，时间15min，保持湿度90％，15d后自然生长即可。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (8)

1.一种利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选择当年生萌发枝条中生长健壮、无病虫害的海州常山，剪成2-3cm带芽茎段，修剪掉多余的叶片，只留少许叶柄，用流水冲洗干净，在超净工作台先用紫外灯照射10min后75％酒精处理，再分别放入10％的NaClO溶液和0.1％HgCl2溶液中浸泡消毒10min，最后用无菌水冲洗4-6次，无菌滤纸吸干水分后，接入诱导培养基中培养，先进行暗培养，待腋芽萌发后进行常规光照培养，光照强度2500-3000lx，温度25-28℃，光照时间为12h/d，直至生成丛生芽；
(2)将培养得到的丛生芽，用远红外光与紫外光交替进行照射，照射时间20h，然后剪成0.6-0.8cm长的茎段；
(3)将茎段接种到增殖培养基中，接种时，将茎段平放在培养基表面，伤口压入到培养基中，所述增殖培养基为：MS、1.2-2.4mg/L 6-BA、0.5-0.8mg/L NAA、12-16g/L蔗糖、6-8g/L琼脂、0.6-1.2g/L CaCO3、0.2-0.5g/L MgSO4，pH值为5.8-6.0；培养温度25-28℃，光照时间为14h/d，光照强度为1500-2000lx；
(4)将增殖培养后得到的小苗转移进入生根培养基中，所述生根培养基为：MS、0.6mg/L6-BA、0.02mg/L NAA、0.2mg/L IBA、25g/L蔗糖、4g/L琼脂，先弱光培养10-12d，光照强度为500-800lx，再常规光照培养；
(5)待小苗生根后，将其移栽至育苗盘中，保持湿度80-90％，15d后自然生长即可。
2.如权利要求1所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述诱导培养基为MS、3mg/L IBA、1mg/L NAA、6mg/L 6-BA、10g/L蔗糖、4g/L琼脂。
3.如权利要求1所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述暗培养的温度为20-22℃。
4.如权利要求1所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述育苗盘中的育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭20-40份、蛭石20-40份、珍珠岩5-15份、蔗渣10-20份、腐熟牛粪10-20份。
5.如权利要求4所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭25-35份、蛭石25-35份、珍珠岩8-12份、蔗渣12-18份、腐熟牛粪12-18份。
6.如权利要求5所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述育苗介质包括以下重量份数的组成：草炭30份、蛭石30份、珍珠岩10份、蔗渣15份、腐熟牛粪15份。
7.如权利要求6所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述育苗介质预先经过高压蒸汽灭菌。
8.如权利要求7所述的利用组培快速繁殖海州常山的方法，其特征在于，所述高压蒸汽灭菌压力为103.4kPa，温度121℃，时间15-20min。
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CN109496844A (zh) * 2018-11-23 2019-03-22 韦宇 一种常山的组织培养快繁方法

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