CN104782489A - 一种白刺组培快繁技术 - Google Patents
一种白刺组培快繁技术 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104782489A CN104782489A CN201510216174.6A CN201510216174A CN104782489A CN 104782489 A CN104782489 A CN 104782489A CN 201510216174 A CN201510216174 A CN 201510216174A CN 104782489 A CN104782489 A CN 104782489A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nitraria
- illumination
- days
- bud
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种白刺组培快繁技术，白刺属（NitrariaL.)是蒺藜科（Zygophyllaceae）的1个古老小属，属地中海线-中亚荒漠植物区的灌木层中的建群种或优势种之一，具有极强的耐旱性、耐盐碱性和耐寒性,它可以防风固沙、改善土壤,是盐碱地生态植被恢复的优良树种。本发明以白刺半木质化的侧芽为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白刺离体再植株，建立了有效的白刺组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
Description
技术领域
本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种白刺组培快繁技术。
背景技术
白刺属（Nitraria L.)是蒺藜科（Zygophyllaceae）的1个古老小属，属地中海线-中亚荒漠植物区的灌木层中的建群种或优势种之一，具有极强的耐旱性、耐盐碱性和耐寒性,它可以防风固沙、改善土壤,是盐碱地生态植被恢复的优良树种。白刺分布广泛、抗逆性强,是优良固沙保土树种,因其果实营养成分高而有“第三代果树”之称。通过对白刺优良品种进行无性繁殖进而得到大量苗木,从而满足盐碱地区对耐盐碱植物的需求。
在自然状态下,白刺的果实性状分化变异严重,即使相邻植株,果实的大小、形状、颜色、味道等性状的变异也极大。在白刺繁殖方面，多采用种子育苗造林，但种子引进成本高,数量少,并且种子繁殖生产周期长,得到的苗木易产生变异。而扦插繁殖方式则存在生根困难的问题,繁殖系数较低,繁殖上的困难限制了该产业的发展。本发明以白刺半木质化的侧芽为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白刺离体再植株，建立了有效的白刺组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
发明内容
本发明的目的在于提供出一种白刺组培快繁技术，本发明以白刺半木质化的侧芽为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白刺离体再植株，建立了有效的白刺组培快繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。
本发明的一种白刺组培快繁技术，包括以下的步骤：
（1）外植体采集及消毒：选择连续3天以上的晴天,并在中午太阳暴晒后进行外植体采集。采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室。用自来水冲洗10～20min,在加有l%洗洁精的洗涤液中浸泡5～10min,用毛笔刷轻刷枝条,再用自来水冲洗30～50min,移至超净工作台。在超净工作台中,用70%～80%的酒精浸泡20～30s后,用0.1% HgCl溶液消毒15～30min,并用无菌水冲洗4～6次后备用。
（2）诱导培养：将步骤（1）处理好的白刺茎段切成1.5～2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率。
（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况。
（4）生根培养：将经步骤（3）后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况。
（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5～7天,再开盖炼苗3～5天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次,每次喷50s。
上述步骤（2）所述的诱导培养基为：N6+1.0～5.0mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L 6-BA+0.5～1mg/L AC+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
上述步骤（3）所述的增殖培养基为：N6+1.0～2.0mg/L 6－BA+0.1～0.5mg/LIBA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
上述步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～0.5mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
本发明的优点是：通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白刺离体再植株，建立了有效的白刺组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
实施例1
（1）外植体采集及消毒：选择连续3天以上的晴天,并在中午太阳暴晒后进行外植体采集。采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室。用自来水冲洗10min,在加有l%洗洁精的洗涤液中浸泡5min,用毛笔刷轻刷枝条,再用自来水冲洗30min,移至超净工作台。在超净工作台中,用70%的酒精浸泡20s后,用0.1% HgCl溶液消毒15min,并用无菌水冲洗4次后备用。
（2）诱导培养：将步骤（1）处理好的白刺茎段切成1.5～2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照12小时，光照强度为1000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后诱导率达到79.3%。所述的诱导培养基为：N6+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L AC+25g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后增殖系数为2.78。所述的增殖培养基为：N6+1.0mg/L 6－BA+0.1mg/LIBA+25g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
（4）生根培养：将经步骤（3）后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导。接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率达到91.5%。所述的生根培养基为：1/2MS+0.2mg/LNAA+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天,再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次,每次喷50s，移栽20天后成活率达到90%以上。
实施例2
（1）外植体采集及消毒：选择连续3天以上的晴天,并在中午太阳暴晒后进行外植体采集。采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室。用自来水冲洗15min,在加有l%洗洁精的洗涤液中浸泡10min,用毛笔刷轻刷枝条,再用自来水冲洗40min,移至超净工作台。在超净工作台中,用75%的酒精浸泡30s后,用0.1% HgCl溶液消毒20min,并用无菌水冲洗5次后备用。
（2）诱导培养：将步骤（1）处理好的白刺茎段切成1.5～2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照13小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后诱导率达到81.8%。所述的诱导培养基为：N6+4.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 6-BA+0.8mg/L AC+20g/L蔗糖+5.5g/L琼脂，pH为5.4。
（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照14小时，光照强度为3000lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后增殖系数为3.41。所述的增殖培养基为：N6+1.5mg/L 6－BA+0.3mg/LIBA+30g/L蔗糖+4.5g/L琼脂，pH为5.4。
（4）生根培养：将经步骤（3）后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导。接种后置于每天光照13小时，光照强度为3000lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率达到92.6%。所述的生根培养基为：1/2MS+0.5mg/LNAA+25g/L蔗糖+5.5g/L琼脂，pH为5.4。
（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天,再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次,每次喷50s，移栽20天后成活率达到95%以上。
Claims (4)
1.一种白刺组培快繁技术，其特征在于包括以下步骤：
（1）外植体采集及消毒：选择连续3天以上的晴天,并在中午太阳暴晒后进行外植体采集，采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室，用自来水冲洗10～20min,在加有l%洗洁精的洗涤液中浸泡5～10min,用毛笔刷轻刷枝条,再用自来水冲洗30～50min,移至超净工作台，在超净工作台中,用70%～80%的酒精浸泡20～30s后,用0.1% HgCl溶液消毒15～30min,并用无菌水冲洗4～6次后备用；
（2）诱导培养：将步骤（1）处理好的白刺茎段切成1.5～2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率；
（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况；
（4）生根培养：将经步骤（3）后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况；
（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽，移栽在遮阴棚中进行，将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5～7天,再开盖炼苗3～5天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋，用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中，移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透，以后每2h喷一次,每次喷50s。
2. 根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤（2）所述的诱导培养基为：N6+1.0～5.0mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L 6-BA+0.5～1mg/L AC+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
3.根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤（3）所述的增殖培养基为：N6+1.0～2.0mg/L 6－BA+0.1～0.5mg/LIBA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
4. 根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～0.5mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510216174.6A CN104782489A (zh) | 2015-05-02 | 2015-05-02 | 一种白刺组培快繁技术 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510216174.6A CN104782489A (zh) | 2015-05-02 | 2015-05-02 | 一种白刺组培快繁技术 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104782489A true CN104782489A (zh) | 2015-07-22 |
Family
ID=53548049
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510216174.6A Pending CN104782489A (zh) | 2015-05-02 | 2015-05-02 | 一种白刺组培快繁技术 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104782489A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106489744A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-03-15 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 沙米愈伤组织及其诱导增殖方法 |
| CN108077075A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-05-29 | 甘肃省治沙研究所 | 一种利用霸王柴无菌苗快速增殖培养无性系的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103250643A (zh) * | 2013-05-15 | 2013-08-21 | 中国林业科学研究院 | 一种唐古特白刺无性系离体生根培养方法 |
| CN103651143A (zh) * | 2013-12-18 | 2014-03-26 | 甘肃省农业科学院生物技术研究所 | 一种白刺组培苗的培养方法 |
-
2015
- 2015-05-02 CN CN201510216174.6A patent/CN104782489A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103250643A (zh) * | 2013-05-15 | 2013-08-21 | 中国林业科学研究院 | 一种唐古特白刺无性系离体生根培养方法 |
| CN103651143A (zh) * | 2013-12-18 | 2014-03-26 | 甘肃省农业科学院生物技术研究所 | 一种白刺组培苗的培养方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张启昌等: "西伯利亚白刺的微繁技术", 《东北林业大学学报》 * |
| 郭晔红等: "唐古特白刺组织培养及其培养基筛选研究", 《草业学报》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106489744A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-03-15 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 沙米愈伤组织及其诱导增殖方法 |
| CN106489744B (zh) * | 2016-12-13 | 2018-08-17 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 沙米愈伤组织及其诱导增殖方法 |
| CN108077075A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-05-29 | 甘肃省治沙研究所 | 一种利用霸王柴无菌苗快速增殖培养无性系的方法 |
| CN108077075B (zh) * | 2017-12-22 | 2020-06-02 | 甘肃省治沙研究所 | 一种利用霸王柴无菌苗快速增殖培养无性系的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102257963B (zh) | 姜荷花的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102301952B (zh) | 一种甘菊繁殖方法 | |
| CN104041412B (zh) | 一种贵州半蒴苣苔的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104663450A (zh) | 一种美国红枫组培快繁方法 | |
| CN104885773A (zh) | 一种快速培育蓝莓早期定型组培商品苗的方法 | |
| CN103858770A (zh) | 一种花叶玉簪快速繁殖的方法 | |
| CN104186351A (zh) | 一种草莓组织培养方法 | |
| CN102805035A (zh) | 结球甘蓝组织培养方法 | |
| CN103392597A (zh) | 一种北美海棠的组织培养方法 | |
| CN103430845A (zh) | 一种草莓组织培养方法 | |
| CN105613287A (zh) | 一种法斗木莲组织快繁育苗方法 | |
| CN103109747B (zh) | 一种基于茎节增殖的金钱松快速繁殖方法 | |
| CN105145363B (zh) | 一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法 | |
| CN106973796A (zh) | 一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法 | |
| CN102960249B (zh) | 一种利用朝鲜崖柏嫩茎段试管内生根和生长同步的高效育苗方法 | |
| CN103548695B (zh) | 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103109728B (zh) | 一种长白松试管内快速育苗方法 | |
| CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
| CN101743908A (zh) | 红花银桦组培快繁及栽培方法 | |
| CN101836589B (zh) | 一种南抗杨的快速繁殖方法 | |
| CN101564010B (zh) | 一种蓝果树的快速繁殖方法 | |
| CN104782489A (zh) | 一种白刺组培快繁技术 | |
| CN105519445A (zh) | 一种猪笼草离体快繁方法 | |
| CN104686336A (zh) | 一种臭椿组培快繁殖方法 | |
| CN112616675B (zh) | 一种舞花姜组织培养快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150722 |