CN109463065A

CN109463065A - 一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法

Info

Publication number: CN109463065A
Application number: CN201811582483.5A
Authority: CN
Inventors: 王斌; 赵利; 谢亚萍; 赵玮
Original assignee: CROP Research Institute of Gansu Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: CROP Research Institute of Gansu Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2018-12-24
Filing date: 2018-12-24
Publication date: 2019-03-15

Abstract

本发明提供一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法，包括下述步骤：（1）种子采集；（2）种子低温处理；（3）种子的消毒；（4）温水浸种；（5）移种；（6）发芽培养：将步骤（5）中的容器进行光照培养，培养至种子露白；（7）成苗：在容器中加入1/2MS营养液或1/2Hoad land营养液，至野生亚麻种子萌发长高。本发明提供的野生亚麻种子萌发方法简单易行，无复杂操作，可快速、有效的促进野生亚麻种子的萌发和成苗，使野生亚麻种子萌发率提高到90.24%以上。对于加快繁殖和保存优异亚麻野生资源，提取DNA进行分子水平研究，利用野生亚麻资源发掘优异基因、拓宽亚麻遗传基础，对亚麻遗传研究和品种改良具有重要意义。

Description

一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法

技术领域

本发明属于种子萌发技术领域，具体涉及一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法。

背景技术

野生亚麻（Linum perenne L．）属于亚麻科（Linaceae）亚麻属（Linum）多年生草本植物，多年生野生宿根型亚麻原产中欧、东欧、近东、西伯利亚，根据中国植物志记载，我国已知有 9 个种，除了栽培种外，8 个近缘种在很多地方都有分布，但以西北、东北、华北和西南地区较多。20世纪80年代以来，陆续有采集到野生亚麻的研究报道，如吉林长白山、黑龙江省林甸、河北坝上、河北张北、新疆、青海、陕西七里川等，在甘肃天祝县、会宁县、定西、静宁县、清水县、宁夏六盘山以及内蒙等地都采集到野生亚麻种子。野生亚麻具有抗旱耐瘠、单茎分枝多、单株果数多、产量性状好等优点，是抗病虫性、抗逆性、优良品质及丰产性等基因的来源。中国亚麻种质资源遗传基础狭窄，种质资源比较匮乏。栽培胡麻品种由于长期的人工选择和驯化，亲缘关系比较近，抗逆性比较差。具有丰富遗传基因的种质资源是选育优良品种的基础，而野生亚麻蕴藏着多种优异基因，早熟、一年多熟及抗旱、抗寒、耐盐碱、耐瘠薄、抗病虫等特点，可以作为胡麻品种改良的基因来源。利用野生亚麻资源发掘优异基因、拓宽亚麻遗传基础，对亚麻遗传研究和品种改良具有重要意义。

野生亚麻生长生态条件十分恶劣，分布零散，容易受到人类活动和环境变化的影响而灭绝。野生亚麻在野外极难发现，因此，研究和保护野生亚麻种质资源刻不容缓。野生亚麻在育种中的应用有两个方面，一是作为杂交育种的材料，二是提取野生亚麻DNA在进行分子水平上进一步的研究。无论是在哪一方面应用，适时获得足够的野生亚麻植株都是最为关键的，野生亚麻的扩繁与保存显得尤其重要。亚麻野生种种子休眠性强，用常规方法很难繁殖成功。有时种植几十粒种子只能得到了几株亚麻，而且结实率很低，进行种质资源的保存颇有难度，因而不便于育种和遗传利用研究。野生亚麻种子呈黑褐色，特别瘦秕，自带营养成分少，通过试验可知野生亚麻直播不出苗，必须通过育苗移栽的方式才能存活。在人工条件下萌发，也不易成活。我国西北地区环境不断恶化以及人为的破坏，很多珍贵的野生亚麻可能面临灭绝。如果能使野生亚麻种子萌发率显著提高，通过种子繁殖的方式进行繁殖育苗来进行种质资源保存，满足育种和遗传研究需要，对亚麻遗传研究和品种改良具有重要意义。

有关各种野生植物种子的萌发条件的研究已有报道，但对野生亚麻最佳萌发条件的研究鲜见报道。现有的方法打破种子休眠效果不理想，发芽率不整齐，没有解决成苗问题。由于野生亚麻种子瘦秕，自带营养成分少，萌发后不容易成活，需要补充营养成分。以上所述对于破除野生亚麻种子休眠，促使种子成苗这一关键问题没有得到解决。

根据发明人检索情况，各国专利文献数据库并没有野生亚麻种子萌发相关方面的报道。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法。该方法首次以野生亚麻种子为研究对象，摸索出了一套适用于野生亚麻种子萌发，提高成苗率的方法。

本发明提供一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法，包括下述步骤：

（1）种子的采集：采集成熟的野生亚麻种子；

（2）种子低温处理：将种子在温度0-4℃，相对湿度30%-35%的条件下，储存20-30天；

（3）种子的消毒；

（4）温水浸种：将消毒后的种子在温水中浸种；

（5）移种：在容器中放入滤纸，浸透，将步骤（4）浸种后的种子放入容器中；

（6）发芽培养：将步骤（5）中的容器进行光照培养，培养至种子露白；

（7）成苗：在容器中加入1/2MS营养液或加入1/2Hoad land营养液，至野生亚麻种子萌发长高。

作为优选，步骤（1）中，所述采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

作为优选，步骤（2）中，所述低温为3℃。

作为优选，步骤（4）中，所述温水浸种是将消毒后的种子在35℃-50℃的温水中浸种8-10min。

作为优选，步骤（4）中，所述温水浸种是将消毒后的种子在45℃的温水中浸种10min。

作为优选，步骤（5）中，所述滤纸为2层。

作为优选，步骤（6）中，所述光照培养为在光照强度3500-5500 lx，温度20℃-30℃下进行光照培养。

作为优选，步骤（6）中，所述光照培养为在光照强度4500 lx，温度25℃下进行光照培养。

本发明提供的野生亚麻种子萌发方法简单易行，无复杂操作，可快速、有效的促进野生亚麻种子的萌发和成苗，使野生亚麻种子萌发率提高到90.24%以上。可将此方法应用于科学研究，对于加快繁殖和保存优异亚麻野生资源，提取DNA 进行分子水平研究，利用野生亚麻资源发掘优异基因、拓宽亚麻遗传基础，对亚麻遗传研究和品种改良具有重要意义。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。

本发明的一种野生亚麻种子快速萌发的方法，包括以下步骤：

（1）种子采集与选种：在当年7-9 月采集成熟的野生亚麻种子，人工挑除不成熟种子和杂质，在常温下晒干。采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

（2）低温处理：所选种子在储存环境为0-4℃，相对湿度在30%-35%之间，储存20-30天。该步骤的作用是：打破种子休眠。其中的最优条件为3℃，此时，有利于打破野生亚麻种子休眠。

（3）消毒：将低温处理的种子用质量分数为2%的次氯酸钠消毒液消毒10min，然后用无菌水冲洗干净。

（4）温水浸种：将步骤（3）处理的种子在35℃-50℃的温水中浸种8-10min。该步骤的作用是：打破种子休眠。其中的最优条件为45℃ 10min，此时，对打破野生亚麻种子休眠的效果非常明显。

（5）移种：用消毒的培养皿作为发芽床，培养皿内放入2层滤纸，用蒸馏水浸透，将步骤（4）处理的野生亚麻种子均匀摆入培养皿。

（6）发芽培养：将步骤（5）的种子置于光照强度3500-5500lx之间，温度在20℃-30℃的光照培养箱中24h连续光照培养，每天加入适量无菌水以保持滤纸湿润，连续培养一周左右，至野生亚麻种子露白。该步骤的作用是：有利于野生亚麻种子萌发。其中的最优条件为培养箱温度25℃，光照强度4500lx，此时，最有利于野生亚麻种子萌发。

（7）培养皿内加入适量1/2MS营养液或加入1/2Hoad land营养液，加入的营养液使滤纸湿润且不淹过种子，连续培养至野生亚麻种子萌发长高。该步骤的作用是：促进野生亚麻种子快速生长。其中的营养液为野生亚麻种子萌发、幼苗长高持续不断的提供营养。

其中，1/2MS营养液中全部成分用量为MS培养基的1/2。

1/2Hoad land营养液中全部成分用量为Hoad land培养基的1/2。

在本发明中采用了（2）、（3）（4）、（6）、（7）步骤，使得野生亚麻种子的发芽率提高至90.24%以上；并对营养液配方进行了优化，使用1/2MS营养液或1/2Hoad land营养液时，能够使得野生亚麻种子幼苗长高到6-8cm。

在其他条件相同时，采用不同的温度处理方法野生亚麻的发芽率对比见表1。

表1 不同温度处理方法野生亚麻的发芽率

处理	发芽率
		CK	35%
低温处理	40%
		流水处理	50%
温水处理	80%
		低温+温水处理	90.24%

本发明提供的野生亚麻种子萌发方法简单易行，无复杂操作，可快速、有效的促进野生亚麻种子的萌发和成苗，使野生亚麻种子萌发率提高到90.24%以上，苗高长到6-8cm，幼苗生长整齐一致。利用低温+温水处理可以有效的打破种子休眠，比采用单独的一种处理方法更为有效；在种子露白后加入营养液，可以解决野生亚麻种子瘦秕，自带营养成分少，萌发后不容易成活成苗的问题。可将此方法应用于科学研究，对于加快繁殖和保存优异亚麻野生资源，提取DNA 进行分子水平研究具有重要意义。

实施例1

（1）种子采集与选种：在当年7月采集野生亚麻种子，人工挑除不成熟种子和杂质，在常温下晒干。采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

（2）低温处理：所选种子在储存环境为0℃，相对湿度在30%，储存25天。

（3）消毒：将低温处理后的种子用质量分数为2%的次氯酸钠消毒液消毒10min，然后用无菌水冲洗干净。

（4）温水浸种：将步骤（3）处理的种子在37℃的温水中浸种9min。

（6）发芽培养：将步骤（5）的种子置于光照强度4500lx，温度在28℃的光照培养箱中24h连续光照培养，每天加入适量无菌水以保持滤纸湿润，连续培养一周，野生亚麻种子露白；

（7）培养皿内加入适量1/2MS营养液，至野生亚麻种子萌发长高。

其中，1/2MS营养液中所有成分为MS营养液的1/2。

应用本实施例的方法，使得野生亚麻种子的发芽率为89.67%；成苗率为88.05%，幼苗生长旺盛，长势整齐。

实施例2

（1）种子采集与选种：在当年8月采集成熟的野生亚麻种子，人工挑除不成熟种子和杂质，在常温下晒干。采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

（2）低温处理：所选种子在储存环境为4℃，相对湿度在35%，储存30天。

（4）温水浸种：将步骤（3）处理的种子在45℃的温水中浸种8min。

（5）移种：用消毒的培养皿作为发芽床，培养皿内放入2张滤纸，用蒸馏水浸透，将步骤（4）处理的野生亚麻种子均匀摆入培养皿。

（6）发芽培养：将步骤（5）的种子置于光照强度3500 lx，温度在30℃的光照培养箱中24h连续光照培养，每天加入适量无菌水以保持滤纸湿润，连续培养6天，野生亚麻种子露白。

（7）培养皿内加入适量1/2Hoad land营养液，至野生亚麻种子萌发长高。

其中，1/2Hoad land营养液中所有成分为Hoad land营养液的1/2。

应用本实施例的方法，使得野生亚麻种子的发芽率为90.24%；成苗率为89.46%，幼苗生长旺盛，长势整齐。

实施例3

（1）种子采集与选种：在当年9 月采集成熟的野生亚麻种子，人工挑除不成熟种子和杂质，在常温下晒干。采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

（2）低温处理：所选种子在储存环境为3℃，相对湿度在32%，储存20天。

（4）温水浸种：将步骤（3）处理的种子在45℃的温水中浸种10min。

（6）发芽培养：将步骤（5）的种子置于光照强度4500 lx，温度在25℃的光照培养箱中24h连续光照培养，每天加入适量无菌水以保持滤纸湿润，连续培养7天，野生亚麻种子露白。

其中，1/2MS营养液中所有成分为MS营养液的1/2。

应用本实施例的方法，使得野生亚麻种子的发芽率为90.24%；成苗率为90.12%，幼苗生长旺盛，长势整齐。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种促进野生亚麻种子快速萌发的方法，其特征在于：包括下述步骤：

（1）种子的采集：采集成熟的野生亚麻种子；

（3）种子的消毒；

（4）温水浸种：将消毒后的种子在温水中浸种；

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述采集的成熟野生亚麻种子颜色为深褐色或者黑褐色，且种子在没有脱落前采集。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述低温为3℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述温水浸种是将消毒后的种子在35℃-50℃的温水中浸种8-10min。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述温水浸种是将消毒后的种子在45℃的温水中浸种10min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（5）中，所述滤纸为2层。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（6）中，所述光照培养为在光照强度3500-5500 lx，温度20℃-30℃下进行光照培养。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤（6）中，所述光照培养为在光照强度4500 lx，温度25℃下进行光照培养。