CN108689847B - 一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，涉及植物提取技术领域。本发明以环氧树脂和壳聚糖为原料，通过交联聚合制成纯化树脂，该树脂内部形成了一层壳聚糖吸附膜，通过树脂和吸附膜的双层吸附，可以将绿原酸中的杂质完全吸附在树脂中，同时不破坏绿原酸的结构和生理活性；聚谷氨酸、黄烷醇为原料合成的稳定剂能够增强绿原酸对外界高温、高氧的抗性，保护绿原酸不失活；本发明采用超声波辅助提取，大大缩短提取时间，提升了绿原酸提取率，操作简单、高效，适合工业化生产。

Description

一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法
技术领域：
本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法。
背景技术：
杜仲是杜仲科杜仲属植物，落叶乔木。我国适应杜仲生长的地域十分广阔，可用于种植杜仲的土地达1000万公顷以上，目前全国杜仲栽培面积约35万公顷，占世界杜仲种植总面积的99％以上，具有独特的资源优势，我国每年可产叶400万吨。
绿原酸属于苯丙素类化合物，是一类含有羧基和邻二酚基的有机酸，化学名为3-咖啡酰奎尼酸。绿原酸广泛存在于高等双子叶植物和蕨类植物中，主要存在于忍冬科忍冬属、菊科蒿属植物中，其中含量较高的植物主要有金银花、杜仲、向日葵、可可树、咖啡及沙棘等，金银花中绿原酸含量最高，杜仲叶次之。市场上金银花资源较少且售价高，用金银花提取绿原酸成本较高，从杜仲资源中提取绿原酸可以解决以上问题。
发明内容：
本发明所要解决的技术问题在于提供一种高效、低成本、高得率、高纯度，适用于工业生产的绿原酸提取方法。
本发明所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：
一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，包括以下步骤：
(1)选择5-8月份采摘的杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入4-8倍量的40-60℃，pH为4-7的纯水后，采用20-40kHz频率超声波辅助提取30-60min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入0.1-0.3％重量的稳定剂，30℃搅拌10-20min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5-6.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5-1倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40-50℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、40-60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
所述稳定剂的制备方法为：将聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入黄烷醇和钛酸四乙酯，升温至50-60℃搅拌1-2h，然后加入环氧大豆油和氢化蓖麻油，50-60℃搅拌30-40min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
所述聚谷氨酸、黄烷醇、钛酸四乙酯、环氧大豆油、氢化蓖麻油的质量比为20-30：15-20：1-5：1-5：1-3。
所述聚谷氨酸的分子量为5000-20000。
所述纯化树脂的制备方法为：
(1)将壳聚糖固体投入到反应釜中，加入质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10-20min，然后加入三羟甲基乙烷和引发剂，继续回流搅拌1-2h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和离子交联剂，继续回流搅拌1-2h；
(3)向步骤2中体系加入改性剂，降温至50-55℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5-10min，静置15-30min后继续微波处理5-10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到纯化树脂。
所述壳聚糖固体、5％的醋酸溶液的质量比为20-30：30-50。
所述环氧氯丙烷、三羟甲基乙烷、引发剂、离子交联剂、改性剂的质量比为10-15：15-20：1-5：1-5：1-5。
所述引发剂选自过氧化苯甲酰或过氧化月桂酰。
所述离子交联剂选自焦磷酸钠、三聚磷酸钠、四聚磷酸钠中的一种。
所述改性剂为茶多酚、海藻酸钠、聚乙二醇400的混合物，质量比为5-10：5-10：10-15。
改性剂的工作原理为：
茶多酚为食品中常用的添加剂，在本发明中可以提高树脂的抗老化性，延长树脂的使用寿命；壳聚糖是一种聚阳离子多糖，海藻酸钠是一种聚阴离子多糖，两者之间发生静电聚合反应，在树脂表面形成一层薄膜，可以有效阻止没有被树脂吸附的杂质、色素流出吸附树脂；聚乙二醇是一种成膜助剂，在本发明中可以通过氢键的作用，提升吸附树脂的结构稳定性，提高树脂对其它杂质、色素的吸附效率。
本发明的有益效果是：
(1)本发明以环氧树脂和壳聚糖为原料，通过离子交联剂，交联聚合制成纯化树脂，该树脂内部形成了一层壳聚糖吸附膜，通过树脂和吸附膜的双层吸附，可以将绿原酸中的杂质完全吸附在树脂中，同时不破坏绿原酸的结构和生理活性；
(2)以茶多酚、海藻酸钠、聚乙二醇400为原料的改性剂，可以提高纯化树脂的结构强度和使用寿命，同时能在树脂表面形成一层海藻酸钠电解质膜，进一步阻止杂质的流出，提高纯化效率；另一方面电解质膜可以防止外部的其它因素在提纯过程中对绿原酸产生破坏；
(3)聚谷氨酸、黄烷醇为原料合成的稳定剂能够增强绿原酸对外界高温、高氧的抗性，保护绿原酸不失活；
(4)本发明采用超声波辅助提取，超声波具有空化效应、机械效应和热效应，不仅能够大大缩短提取时间，还能有效提高绿原酸的提取率。
具体实施方式：
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1h，然后加入2g环氧大豆油和1g氢化蓖麻油，50℃搅拌30min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
纯化树脂的制备：
(1)将22g壳聚糖固体投入到反应釜中，加入35g质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将10g环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10min，然后加入15g三羟甲基乙烷和2g过氧化苯甲酰，继续回流搅拌1h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和2g焦磷酸钠，继续回流搅拌1h；
(3)向步骤2中体系加入3g改性剂，降温至50℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5min，静置15min后继续微波处理10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到吸附树脂。
改性剂：5g茶多酚、5g海藻酸钠、10g聚乙二醇400的混合物。
实施例2
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1h，然后加入2g环氧大豆油和1g氢化蓖麻油，50℃搅拌30min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
纯化树脂的制备：
(1)将22g壳聚糖固体投入到反应釜中，加入35g质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将10g环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10min，然后加入15g三羟甲基乙烷和2g过氧化苯甲酰，继续回流搅拌1h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和2g焦磷酸钠，继续回流搅拌1h；
(3)向步骤2中体系加入3g改性剂，降温至50℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5min，静置15min后继续微波处理10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到吸附树脂。
改性剂：5g茶多酚、5g海藻酸钠、10g聚乙二醇400的混合物。
对照例1
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1h，然后加入2g环氧大豆油和1g氢化蓖麻油，50℃搅拌30min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
纯化树脂的制备：
(1)将10g环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10min，然后加入15g三羟甲基乙烷和2g过氧化苯甲酰，继续回流搅拌1h；接着加入2g焦磷酸钠，继续回流搅拌1h；
(2)向步骤2中体系加入3g改性剂，降温至50℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5min，静置15min后继续微波处理10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到吸附树脂。
改性剂：5g茶多酚、5g海藻酸钠、10g聚乙二醇400的混合物。
对照例2
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1h，然后加入2g环氧大豆油和1g氢化蓖麻油，50℃搅拌30min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
纯化树脂的制备：
(1)将22g壳聚糖固体投入到反应釜中，加入35g质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将10g环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10min，然后加入15g三羟甲基乙烷和2g过氧化苯甲酰，继续回流搅拌1h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和2g焦磷酸钠，继续回流搅拌1h；
(3)将步骤2中体系降温至50℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5min，静置15min后继续微波处理10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到吸附树脂。
对照例3
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过HPD826树脂，再用树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1h，然后加入2g环氧大豆油和1g氢化蓖麻油，50℃搅拌30min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
对照例4
(1)选择5-8月份采摘的20kg杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入80kg40℃，pH为6的纯水后，采用20kHz频率超声波辅助提取30min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入20g稳定剂，30℃搅拌10min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。
稳定剂的制备：将25g聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入15g黄烷醇和3g钛酸四乙酯，升温至50℃搅拌1.5h，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂。
纯化树脂的制备：
(1)将22g壳聚糖固体投入到反应釜中，加入35g质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将10g环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10min，然后加入15g三羟甲基乙烷和2g过氧化苯甲酰，继续回流搅拌1h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和2g焦磷酸钠，继续回流搅拌1h；
(3)向步骤2中体系加入3g改性剂，降温至50℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5min，静置15min后继续微波处理10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到吸附树脂。
改性剂：5g茶多酚、5g海藻酸钠、10g聚乙二醇400的混合物。
实施例3
以实施例1为基础，设置不添加壳聚糖醋酸溶液的对照例1、不添加改性剂的对照例2、通过HPD826树脂来除杂的对照例3、不添加环氧大豆油和氢化蓖麻油的对照例4。
利用实施例1-2、对照例1-4对杜仲鲜叶中的绿原酸进行提取，绿原酸的纯度和提取率如表1所示。
表1绿原酸的纯度和提取效率
Figure BDA0001758683460000081
Figure BDA0001758683460000091
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (3)

1.一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选择5-8月份采摘的杜仲鲜叶经过打浆机打浆；
(2)加入4-8倍量的40-60℃，pH为4-7的纯水后，采用20-40kHz频率超声波辅助提取30-60min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；
(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入0.1-0.3％重量的稳定剂，30℃搅拌10-20min；
(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5-6.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5-1倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；
(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40-50℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、40-60℃真空干燥，即得到绿原酸成品；
所述稳定剂的制备方法为：将聚谷氨酸加入到去离子水中，30℃搅拌至完全溶解，然后加入黄烷醇和钛酸四乙酯，升温至50-60℃搅拌1-2h，然后加入环氧大豆油和氢化蓖麻油，50-60℃搅拌30-40min，过滤，滤饼用15℃去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入冷冻机中干燥至恒重，即得到稳定剂；
所述聚谷氨酸、黄烷醇、钛酸四乙酯、环氧大豆油、氢化蓖麻油的质量比为20-30：15-20：1-5：1-5：1-3；
所述聚谷氨酸的分子量为5000-20000；
所述纯化树脂的制备方法为：
(1)将壳聚糖固体投入到反应釜中，加入质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；
(2)将环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10-20min，然后加入三羟甲基乙烷和引发剂，继续回流搅拌1-2h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和离子交联剂，继续回流搅拌1-2h；
(3)向步骤2中体系加入改性剂，降温至50-55℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5-10min，静置15-30min后继续微波处理5-10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到纯化树脂；
所述壳聚糖固体、5％的醋酸溶液的质量比为20-30：30-50；
所述环氧氯丙烷、三羟甲基乙烷、引发剂、离子交联剂、改性剂的质量比为10-15：15-20：1-5：1-5：1-5；
所述改性剂为茶多酚、海藻酸钠、聚乙二醇400的混合物，质量比为5-10：5-10：10-15。
2.根据权利要求1所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述引发剂选自过氧化苯甲酰或过氧化月桂酰。
3.根据权利要求1所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述离子交联剂选自焦磷酸钠、三聚磷酸钠、四聚磷酸钠中的一种。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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