CN108676762A - 一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用。本发明提供的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.的名称为BDGS‑17‑07，保藏编号为CGMCC No.15617。通过实验表明，BDGS‑17‑07发酵液对禾谷孢囊线虫二龄幼虫及南方根结线虫的卵及二龄幼虫均具有毒杀活性，对南方根结线虫卵粒及卵块孵化也具有明显的抑制作用，BDGS‑17‑07发酵液还具有很好的生防效果，仅施用50mL BDGS‑17‑07发酵液，接种线虫60天时的防效可达36％。本发明的赖氨酸芽孢杆菌BDGS‑17‑07 CGMCC No.15617作为生物药剂在植物寄生线虫的防治中具有良好的应用开发前景。

Description

一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用。
背景技术
目前已知的25000多种线虫中，植物寄生线虫约有4100余种，占已知线虫总数的15％左右，每年给全世界农业生产造成的损失估计达1570亿美元。植物寄生线虫的种类较多，主要包括根结线虫属(Meloidogyne)、粒线虫属(Anguina)、茎线虫属(Ditylenchus)、异皮线虫属(Heterodera)、拟滑刃线虫属(Aphelenchoides)和根外寄生线虫等。其中根结线虫和孢囊线虫是农业生产上造成危害非常严重的两类植物寄生线虫，在蔬菜和粮食作物上发病会造成比较重大的经济损失。
目前，植物寄生线虫的防治仍以化学防治为主，但化学杀线虫剂的品种少，且多为高毒、高残留，严重污染和破坏环境。随着人们环保意识的提高和对安全农产品需求的增长，符合现代农业可持续发展战略理念的生物防治产品日益受到重视。
发明内容
本发明的一个目的是提供一株用于防治植物寄生线虫的生防细菌-赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07。
本发明提供的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07来源于湖南省张家界八大公山土壤，其保藏编号为CGMCC No.15617。
本发明提供的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07的分类命名为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.，该菌株于2018年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)。
本发明的另一个目的是提供赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液的新用途。
本发明提供了赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液在防治植物寄生线虫中的应用。
本发明还提供了赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液在制备防治植物寄生线虫的产品中的应用。
上述应用中，所述植物寄生线虫为根结线虫或孢囊线虫。所述根结线虫具体为南方根结线虫；所述孢囊线虫具体为禾谷孢囊线虫。
上述应用中，所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
本发明还有一个目的是提供一种用于防治植物寄生线虫的产品。
本发明提供的用于防治植物寄生线虫的产品的活性成分为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液。
上述产品中，所述植物寄生线虫为根结线虫或孢囊线虫。所述根结线虫具体为南方根结线虫；所述孢囊线虫具体为禾谷孢囊线虫。
上述产品中，所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
本发明的最后一个目的是提供一种防治植物寄生线虫的方法。
本发明提供的防治植物寄生线虫的方法包括用赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液处理植物土壤的步骤。
上述方法中，所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
上述应用或产品或方法中，所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.发酵液是将赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617接种于发酵培养基中进行发酵培养得到的。该发酵液可作为生物药剂进行植物寄生线虫的防治。
进一步的，所述发酵培养基的溶剂为蒸馏水，溶质及其浓度具体如下：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L，酵母提取物(Yeast Extract)5g/L，NaCl 10g/L。
所述发酵培养基的pH值为6.0-8.0，具体可为7。
所述发酵培养条件为28℃，200r/min震荡培养60h。
实验结果表明，本发明的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07发酵液对禾谷孢囊线虫二龄幼虫具有一定的毒杀活性，对南方根结线虫的卵及二龄幼虫也具有很高的毒杀活性。用稀释5倍后的BDGS-17-07发酵液处理二龄幼虫，对禾谷孢囊线虫二龄幼虫的校正死亡率达50％左右，对南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率达80％左右。BDGS-17-07发酵液对南方根结线虫卵粒及卵块孵化具有明显的抑制作用。稀释5倍后的BDGS-17-07发酵液对卵粒孵化的抑制作用可达60％左右，对卵块孵化的抑制作用可达90％左右。BDGS-17-07发酵液也具有很好的生防效果。定植前穴施50mLBDGS-17-07发酵液，定植后接种线虫60天时的防效可达36％。本发明的生物药剂在植物寄生线虫的防治中具有良好的应用开发前景。
附图说明
图1为BDGS-17-07与GenBank Accession No.KY038739.1序列比对结果。
图2为BDGS-17-07稀释5倍的发酵液对植物寄生线虫二龄幼虫的作用结果。
图3为BDGS-17-07不同稀释倍数的发酵液对南方根结线虫卵粒孵化抑制作用的结果。
图4为BDGS-17-07不同稀释倍数的发酵液对南方根结线虫卵块孵化抑制作用的结果。
保藏说明
菌种名称：赖氨酸芽孢杆菌
拉丁名：Lysinibacillus sp.
菌株编号：BDGS-17-07
保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏机构简称：CGMCC
地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏日期：2018年04月16日
保藏中心登记入册编号：CGMCC No.15617
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
下述实施例中的LB固体培养基溶剂为蒸馏水，溶质及其浓度具体如下：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L，酵母提取物(Yeast Extract)5g/L，NaCl 10g/L，琼脂15-20g/L。
下述实施例中的发酵培养基溶剂为蒸馏水，溶质及其浓度具体如下：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L，酵母提取物(Yeast Extract)5g/L，NaCl 10g/L。
下述实施例中的南方根结线虫Meloidogyne incognita采自中国农业大学植物线虫实验室试验温室中被南方根结线虫Meloidogyne incognita侵染的空心菜的病根。
实施例1、BDGS-17-07菌株的分离、纯化及鉴定
一、BDGS-17-07菌株的分离、纯化
菌株BDGS-17-07是从湖南省张家界八大公山土壤中分离得到的。具体步骤如下：称取5g的土样，加入到装有45mL无菌水的三角瓶中，将三角瓶在转速为200rpm/min的摇床中震荡培养30min，配成10-1的土壤稀释液。在超净工作台中进行逐级稀释，配成一系列相应梯度的土壤稀释液。用移液枪吸取适量土壤稀释液于LB平板上，然后用涂布器涂布均匀，每个浓度重复3次。放置于28℃恒温培养箱中培养24h，观察平板上菌落生长情况，挑取平板上单菌落，将其命名为BDGS-17-07菌株，并在固体LB平板上三区划线进行纯化，获得纯培养。
二、BDGS-17-07菌株的鉴定
提取BDGS-17-07菌株的总DNA，采用细菌通用引物27F和1492R进行PCR扩增，扩增得到BDGS-17-07菌株的16S rDNA序列。引物序列如下：
27F：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；
1492R：5′-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3′。
对BDGS-17-07菌株的16S rDNA序列进行测序，结果表明：BDGS-17-07菌株的16SrDNA序列如序列1所示。
将BDGS-17-07菌株的16S rDNA序列与GenBank Accession No.KY038739.1进行序列比对，结果表明：两者同源性可达99％，具体的序列比对结果如图1所示。
三、BDGS-17-07菌株的保藏
根据鉴定结果和分析，菌株BDGS-17-07的分类命名为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.，该菌株于2018年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.15617。
实施例2、BDGS-17-07菌剂的制备
1、平板菌种的培养
将实施例1分离得到的BDGS-17-07菌株接种于LB固体培养基平板上，28℃培养24h，挑取单菌落，获得平板菌种。
2、液体发酵培养
将步骤1获得的平板菌种接种到装有100mL发酵培养基的250mL三角瓶中，28℃条件下，以200r/min摇床转速发酵培养60h，获得含有BDGS-17-07及其代谢产物的发酵液，将其命名为BDGS-17-07菌剂。
实施例3、BDGS-17-07菌剂在防治植物寄生线虫中的应用
一、BDGS-17-07菌剂对植物寄生线虫二龄幼虫的杀线虫活性试验
1、南方根结线虫Meloidogyne incognita二龄幼虫的获得
取接种南方根结线虫二龄幼虫60-90天的空心菜根，用自来水将根部土清洗干净，在放大镜下用镊子挑取成熟饱满的卵块置于孵化筛中，将盛有大量卵块的孵化筛置于培养皿中，培养皿中加入蒸馏水至稍没过卵块，在25℃恒温培养箱中孵化，为保证所孵化线虫的出齐率，弃掉第一天孵出的二龄幼虫；为保证孵化后的二龄幼虫的活性，每隔24h收集1次，收集2-5天的二龄幼虫，并置于4℃冰箱暂存。
2、南方根结线虫二龄幼虫悬浮液、南方根结线虫卵粒悬浮液的制备
2.1、南方根结线虫二龄幼虫悬浮液的制备
(1)将步骤1收集到的南方根结线虫二龄幼虫转移到1.5mL的离心管中，加入0.05％的吐温(以利于线虫沉淀富集)，8000rpm/min离心1min，弃上清液。
(2)完成步骤(1)后，在富集的线虫溶液中先加入无菌水定容至0.5mL，再加入1％次氯酸钠至1mL，使次氯酸钠浓度为0.5％，处理5min，8000rpm/min离心1min，弃上清液。
(3)完成步骤(2)后，用无菌水清洗3遍，每次清洗完后，10000rpm/min离心1min，弃上清液。
(4)完成步骤(3)后，用适量无菌水稀释，得到南方根结线虫二龄幼虫悬浮液。在体式显微镜下观察线虫密度，确定加入24孔细胞培养板中的体积，保证每孔100条左右线虫。
上述步骤除离心和计数线虫密度外，其它操作均在超净工作台内进行。
2.2、南方根结线虫卵粒悬浮液的制备
将南方根结线虫卵块用无菌水冲洗，然后浸入0.05％的次氯酸钠溶液中，并用玻璃棒充分搅拌3分钟，以释放出卵粒。用无菌水反复冲洗卵粒，并分别过300目和500目筛，冲洗到无次氯酸钠味后，将500目上的卵粒移入100mL无菌水中，用1％的硫柳汞溶液消毒30min，无菌水洗涤3次，再用0.1％的硫酸链霉素和0.02％的放线菌酮4℃消毒过夜，无菌水冲洗3次，将消毒后的卵粒悬浮于无菌水中，得到南方根结线虫卵粒悬浮液。在体式显微镜下观察卵粒密度，确定加入24孔细胞培养板中的体积，保证每孔300粒卵粒左右。
3、禾谷孢囊线虫Heterodera avenae二龄幼虫的获得
①挖取病土：从禾谷孢囊线病发生严重的地块，用小铁铲挖取大量小麦根际土。
②淘洗-过筛法获取富含孢囊的混合物：将取回的病土用铁铲破碎，取适量已破碎的土样置于水桶中，加水至距桶上边缘5cm左右，浸泡数秒，手持木棍充分搅拌使土样与水充分混合，然后静置45-60秒，将桶内的上清液倒入20目-60目嵌套的网筛上(上层20目，下层60目)，用水反复冲洗20目网筛上的杂物使附着在其上的孢囊充分落在下层60目网筛上，然后倒掉20目网筛上的杂物。用相同的方法将桶内的混合物淘洗过筛3-4次，以提高分离效率，收集更多的孢囊。最后收集60目网筛上的滞留物置于干净容器中，获得富含孢囊的混合物，注意收集之前要用自来水反复冲洗60目网筛上的滞留物，以弃掉更多的细泥沙。
③在体视镜下用挑针及镊子挑取上述混合物中的孢囊于装有蒸馏水的1.5mL(或2mL)离心管中，挑取大量孢囊后置于4℃冰箱备用。
④将孢囊放入孵化筛中，放入17℃恒温培养箱中进行孵化，经过分子鉴定获得禾谷孢囊线虫二龄幼虫。分子鉴定的引物为HaF2：ATAATACGAAACAAACAGGAGTT和HaR2：CCAAATGGAATAGTCGAAAATGA，目的条带的大小为452bp。
4、禾谷孢囊线虫悬浮液的制备
按照步骤2中的南方根结线虫二龄幼虫悬浮液的制备方法制备得到禾谷孢囊线虫悬浮液。
5、杀线虫活性试验
在无菌的24孔细胞培养板中先加入BDGS-17-07菌剂200μL。然后在24孔细胞培养板中加入上述制备的植物寄生线虫二龄幼虫的悬浮液(约含100条线虫)。再用无菌水补足至1mL，得到含有线虫的BDGS-17-07菌剂5倍稀释液。放入25℃培养箱中培养24h，然后在解剖镜下计数各孔内线虫总数和死亡数，以线虫僵直不动视为死亡。以相同稀释倍数的空白培养基(LB培养基)处理为对照，按照下述公式计算线虫死亡率和校正死亡率(即杀线虫活性)：线虫死亡率(％)＝(死亡线虫数/供试线虫数)×100％，校正死亡率(％)＝【(处理线虫死亡率-对照线虫死亡率)/(1-对照线虫死亡率)】×100％。实验设三次重复。
结果如图2所示。结果表明，对照对南方根结线虫的死亡率为8％，BDGS17-07菌剂5倍稀释液对南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率为84.7％；对照对禾谷孢囊线虫的死亡率为6％，BDGS17-07菌剂5倍稀释液对禾谷孢囊线虫二龄幼虫的校正死亡率为52.3％。上述结果表明：BDGS17-07菌剂对南方根结线虫二龄幼虫和禾谷孢囊线虫二龄幼虫均具有良好的毒杀活性。
二、BDGS17-07菌剂对南方根结线虫卵粒和卵块孵化的影响
1、BDGS17-07菌剂对南方根结线虫卵粒和卵块孵化的影响
在无菌的24孔细胞培养板中先分别加入BDGS-17-07菌剂500μL、BDGS-17-07菌剂200μL和BDGS-17-07菌剂100μL。然后在上述24孔细胞培养板中加入上述制备的线虫卵粒悬浮液(约含300粒卵或者3个卵块)。再用无菌水补足至1mL，分别得到含有卵粒或卵块的BDGS-17-07菌剂2倍稀释液、5倍稀释液和10倍稀释液。放入25℃培养箱中进行孵化，7天后观察并计算孵化出的二龄幼虫的数量；同时以相同稀释倍数的空白培养基(LB培养基)作为对照。按照下述公式计算孵化率、孵化抑制率：孵化率(％)＝【孵化出的幼虫数/(孵化出的幼虫数+未孵化的卵粒数)】×100％；孵化抑制率＝【(对照孵化线虫数-处理孵化线虫数)/对照孵化线虫数】×100％。实验设三次重复。
结果如图3和图4所示。结果表明，BDGS-17-07菌剂对南方根结线虫卵的孵化具有强烈的抑制作用，其中，5倍稀释液对卵粒孵化的抑制作用可达60％，2倍稀释液和5倍稀释液对卵块孵化的抑制作用均可达90％。
三、BDGS-17-07菌剂的温室防效试验
1、移栽定植
将出苗两周的番茄苗移栽入装有高温灭菌沙土的花盆中(直径约20cm)，待培育的番茄苗长出4片真叶后，进行带土移栽定植(以减轻移栽时对番茄苗根部的伤害)，每盆1株，每处理30盆。移栽定植前分别做如下处理：
对照组1：定植前穴施200mL水(水)；
对照组2：定植前穴施50mL LB培养基(LB)；
处理组1：定植前拌土撒施福气多2kg/亩(噻唑膦)(由北京市植物保护站提供)；
处理组2：定植前穴施50mL BDGS-17-07菌剂(17-07)。
2、接种
番茄苗定植3天后开始接种。接种前，调节南方根结线虫二龄幼虫悬浮液(J2悬浮液)的密度为500条/mL。接种方法如下：用玻璃棒在番茄苗每株根部附近插4个小洞，用移液枪吸取混匀的J2悬浮液，打入小洞，每个小洞接入1mL，每株接入2000条南方根结线虫二龄幼虫。接种完毕后将小洞覆土，并适时浇水使土壤保持湿润，以利于线虫侵染。
3、病情指数和防治效果
分别在接种线虫60天和90天后调查根结线虫为害番茄根部的病情指数、防治效果和根结级数。同时以噻唑膦(施用量为2kg/亩)作为化学药剂对照，以水作为空白对照。实验设八次重复。病情指数计算公式如下：
防效的计算公式如下(计算噻唑膦防效是以水对照作为对照，计算BDGS-17-07防效是以LB培养基作为对照)：
根结级数采用Bridge J.和Page S.1980年报道的10级根结线虫病分级标准进行评价。
结果如表1所示。结果表明，BDGS17-07菌剂对南方根结线虫具有一定的防治效果。
表1、接种60天后调查结果
处理 根结级数 病情指数 防效％
水对照 5.56±1.26a 69.44 -
LB对照 3.13±0.93b 62.50 -
噻唑膦 1.13±0.60cd 34.00 51.04
17-07 2.25±1.39bc 40.00 36.00
序列表
<110>中国农业大学
<120>一株防治植物线虫的赖氨酸芽孢杆菌及其应用
<160>1
<170>PatentIn version 3.5
<210>1
<211>1415bp
<212>DNA
<213>人工序列(Artificial Sequence)
<400>1
ccccgtggta ccgtcctccg aggttaacta gctacttctg gtgcacccac tcccatggtg 60
tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg cgacattctg attcgcgatt 120
actagcgatt ccgacttcac gcagtcgagt tgcagactgc gatccggact acgatcggtt 180
ttatgggatt agctccacct cgcggcttgg caaccctttg taccgaccat tgtagcacgt 240
gtgtagccca ggccgtaagg gccatgatga cttgacgtca tccccacctt cctccggttt 300
gtcaccggca gtctccttag agtgcccacc ataacgtgct ggtaactaag gacaagggtt 360
gcgctcgtta cgggacttaa cccaacatct cacgacacga gctgacgaca gccatgcagc 420
acctgtctca atgttcccga aggcaccaat ctatctctag aaagttcatt ggatgtcaag 480
gcctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg 540
cccccgtcaa ttcatttgag ttttaacctt gcggccgtac tccccaggcg gtcaacttaa 600
tgcgttagct gcgccactaa gagctcaagg ctcccaacgg ctagttgaca tcgtttacgg 660
cgtggactac cagggtatct aatcctgttt gctccccacg ctttcgcacc tcagtgtcag 720
tatcagtcca ggtggtcgcc ttcgccactg gtgttccttc ctatatctac gcatttcacc 780
gctacacagg aaattccacc accctctacc atactctagc ttgccagttt tggatgcagt 840
tcccaggttg agcccggggc tttcacatcc aacttaacaa accacctacg cgcgctttac 900
gcccagtaat tccgattaac gcttgcaccc tctgtattac cgcggctgct ggcacagagt 960
tagccggtgc ttattctgtc ggtaacgtca aaacaatcac gtattaggta actgcccttc 1020
ctcccaactt aaagtgcttt acaatccgaa gaccttcttc acacacgcgg catggctgga 1080
tcaggctttc gcccattgtc caatattccc cactgctgcc tcccgtagga gtctggaccg 1140
tgtctcagtt ccagtgtgac tgatcatcct ctcagaccag ttacggatcg tagccttggt 1200
gagccattac ctcaccaact agctaatccg acctaggctc atctaatagc gtgaggtccg 1260
aagatccccc actttctccc gtaggacgta tgcggtatta gcgcccgttt ccggacgtta 1320
tcccccacta ctaggcagat tcctaggcat tactcacccg tccgccgctc gccaccaggt 1380
acaagtaccc gtgtgccgct cgactgcagg tagct 1415

Claims (10)

1.一株赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07，其保藏编号为CGMCCNo.15617。
2.赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液在防治植物寄生线虫中的应用。
3.赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液在制备防治植物寄生线虫的产品中的应用。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述植物寄生线虫为根结线虫或孢囊线虫；
或，所述根结线虫为南方根结线虫；
或，所述孢囊线虫为禾谷孢囊线虫。
5.根据权利要求2-4任一所述的应用，其特征在于：所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
6.一种用于防治植物寄生线虫的产品，其活性成分为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液。
7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于：所述植物寄生线虫为根结线虫或孢囊线虫；
或，所述根结线虫为南方根结线虫；
或，所述孢囊线虫为禾谷孢囊线虫。
8.根据权利要求6或7所述的产品，其特征在于：所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
9.一种防治植物寄生线虫的方法，包括用赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.或其发酵液或其菌剂或其菌悬液或其代谢液或其培养液处理植物土壤的步骤。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.为赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.BDGS-17-07CGMCC No.15617。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109362787A (zh) * 2018-12-07 2019-02-22 江苏师范大学 暹罗芽胞杆菌在防治线虫中的应用
CN111763646A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 湖南省植物保护研究所 长形赖氨酸芽孢杆菌、微生物菌剂、生防药剂及其制备方法和应用

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114634889B (zh) * 2022-03-15 2023-04-18 青岛农业大学 一种副地衣芽孢杆菌nmxc2-1及其发酵产物、菌剂与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015114552A1 (en) * 2014-01-29 2015-08-06 University Of Pretoria Plant growth promoting rhizobacterial strains and their uses
CN107460151A (zh) * 2017-09-29 2017-12-12 南京师范大学 一种球形赖氨酸芽孢杆菌及其防治南方根结线虫的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015114552A1 (en) * 2014-01-29 2015-08-06 University Of Pretoria Plant growth promoting rhizobacterial strains and their uses
CN107460151A (zh) * 2017-09-29 2017-12-12 南京师范大学 一种球形赖氨酸芽孢杆菌及其防治南方根结线虫的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STURZ A，CHRISTIE B，NOWAK J.: "Bacterial endophytes：potential role in developing sustainable systems of crop production", 《CRITICAL REVIEWS IN PLANT SCIENCES》 *
王瑞芹 等: "油茶内生拮抗细菌Y13 的定殖能力及其对土著细菌的影响", 《生物技术通报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109362787A (zh) * 2018-12-07 2019-02-22 江苏师范大学 暹罗芽胞杆菌在防治线虫中的应用
CN111763646A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 湖南省植物保护研究所 长形赖氨酸芽孢杆菌、微生物菌剂、生防药剂及其制备方法和应用
CN111763646B (zh) * 2020-07-24 2021-11-30 湖南省植物保护研究所 长形赖氨酸芽孢杆菌、微生物菌剂、生防药剂及其制备方法和应用

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