CN108623705A - 一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法。具体步骤包括：将铁皮石斛粗碎后，第一次水提，过滤分离，提取1～3次，将过滤后收集的药渣捣碎后进行第二次水提，离心分离，提取1～2次，收集离心液；然后干燥即得铁皮石斛多糖提取物b；所述的铁皮石斛多糖提取物b为含有分子量为150万～250万多糖的提取物。本发明方法很好的解决了现有水提技术存在的技术缺陷，实现了同时提取不同分子量的铁皮石斛多糖，解决了细粉不易提取、能耗高等技术缺陷，同时也解决了粗粉提取率不高的技术缺陷，本发明方法操作简单，易于工业化生产应用，具有极高的市场应用前景。

Description

一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法

技术领域

本发明属于植物组分提取技术领域，具体涉及到一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法。

技术背景

铁皮石斛为兰科石斛属草本植物，作为我国传统的珍稀药材，名列“中华九大仙草之首”，现代临床应用和药理研究均已证实，铁皮石斛具有滋阴润肺、养胃生津、健脑明目等神奇功效。

目前文献对铁皮石斛的主要化学成分报道较多，主要以铁皮石斛多糖研究最为常见。多糖是生物体内一类重要的物质，是由单糖聚合形成的天然高分子化合物。研究表明，石斛多糖具有提高免疫力、降血糖、抗肿瘤等功效。我国对多糖的研究起步较晚，始于20 世纪70年代，但发展迅速，并成为现代药理学研究的新热点。铁皮石斛多糖的提取方法众多,如酶提法、醇提法、水提法等，其中水提法具有操作简便、条件要求低、花费少、不会引入其他物质，是最经济安全的一种提取方法。

铁皮石斛多糖水提法的制备方法一般为：将铁皮石斛药材粉碎，加水提取，提取液过滤后进行浓缩，最后将浓缩液进行干燥。铁皮石斛多糖的水提方法其一为：将铁皮石斛药材粉碎成细粉，加水进行提取，按常规加水量提取，铁皮石斛细粉会在水提过程中吸水加热成糊状，无法有效进行提取。若提高加水量，会造成料液比大，提取效率不高，不利于工业化生产，而且加水量高也会导致提取、浓缩、干燥能耗增加，造成能源的浪费。铁皮石斛多糖的提取方法其二为：使用粗粉提取，粗粉提取不会出现糊状，但是使用粗粉提取也存在以下问题，多糖得率不高以及无法有效得到高分子量的多糖，这是由于粗粉的固体颗粒物过大，水提时无法使粗粉中大分子多糖分子析出。

专利申请CN201711480845.5公开了一种铁皮石斛多糖的提取工艺，经过洗净、压榨、粉碎、冷冻-解冻、水提、过滤、浓缩等步骤得到铁皮石斛多糖粗品以及铁皮石斛多糖纯品，该工艺使用了粉碎技术、多次冷冻-解冻技术、有机溶剂回流脱脂技术、水提技术等得到铁皮石斛多糖粗品的得率约为16%，含量约为66%，该工艺生产步骤复杂，多次使用冷冻-解冻技术，耗能高，且铁皮石斛多糖粗品的含量及得率均不高。

同时，不同分子量的多糖的性质及功效均有差异，目前还没有将铁皮石斛中多糖按照分子量大小进行产业化分离提取的报道。

因此，有必要探索一种高效提取不同分子量的铁皮石斛中多糖的方法。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于一种高效提取不同分子量铁皮石斛多糖提取物的方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法，包括提取、干燥等步骤，具体步骤包括：

将铁皮石斛粗碎后，第一次水提，过滤分离，提取1～3次，将过滤后收集的药渣捣碎后进行第二次水提，离心分离，提取1～2次，收集离心液；然后干燥即得铁皮石斛多糖提取物b；

所述的铁皮石斛多糖提取物b为含有至少81.8wt%分子量为150万～250万多糖的提取物。

作为一种优选方案，所述的铁皮石斛粗碎的粒度为1mm～25mm。

作为一种优选方案，所述的第一次水提及第二次水提的条件为80～100℃水中提取1～2小时；

作为一种优选方案，所述的离心的条件为：4000转/min，时间10～15min。

作为一种更优的方案，所述的干燥条件为：在50～70℃的条件真空干燥。

作为一种更优的方案，所述的铁皮石斛多糖提取物b为含有至少81.8wt%分子量为150万～250万多糖的提取物。

作为一种优选方案，在所述的收集离心液后，然后醇沉，得到沉淀物，然后对沉淀物进行干燥得铁皮石斛多糖提取物b。

作为一种更优方案，所述的醇沉条件为：将离心液加入90 vol %以上的醇至上清液醇浓度达到50 vol %～85 vol %，静置8h～24h，收集沉淀物，将沉淀物加入90 vol %以上的醇脱出剩余水分得到沉淀物。

作为一种更优方案，在所述的收集离心液后浓缩，然后醇沉，得到沉淀物，然后对沉淀物进行干燥得铁皮石斛多糖提取物b，所述的浓缩为在65℃～75℃、真空度为0.06 Mpa～0.1 Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达2 wt%～5wt%的浓缩液。

作为一种优选方案，所述的醇为乙醇。

作为一种优选方案，在所述的第一次水提后，收集提取液，将提取液离心得离心液，然后将离心液进行干燥，即得铁皮石斛多糖提取物a；所述的铁皮石斛多糖提取物a为含有至少25wt%分子量为500～30万多糖的提取物。

作为一种更优方案，在所述的第一次水提后，收集提取液，将提取液离心得离心液，然后将离心液进行浓缩后干燥，即得铁皮石斛多糖提取物a；所述的浓缩为在65℃～75℃、真空度为0.06 Mpa～0.1 Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达2 wt%～5wt%的浓缩液。

本发明的铁皮石斛多糖制备是通过对药材先进行切段、提取出低分子量多糖后，再对药渣进行再次捣碎，进行再次提取，可以制备不同分子量大小的多糖提取物，同时也制备了高纯度（纯度高达80%以上）高分子量的铁皮石斛多糖提取物，并且分子量在500～300000的铁皮石斛多糖的得率也可达20%以上，本发明方法弥补了现有技术无法大批量的生产不同分子量梯度的铁皮石斛多糖产品的技术空白，且本发明的方法操作简单易行，便于产业化生产。

本发明的制备方法采用水提、醇沉等步骤，最大可能的避免了植物多糖提取中引入新的物质，确保了提取物不含有其他杂质。

现有研究表明植物多糖的生物学活性与其分子量密切相关，鲍素华等报道（不同分子量铁皮石斛多糖体外抗氧化活性研究 [J].食品科学, 2009, 30(21): 123-127）不同分子量的铁皮石斛多糖对不同的自由基的清除作用强弱不同，可针对不同的自由基应用不同分子量的多糖进行清除，也可根据多糖高、低分子量的不同应用到不同的领域，比如低分子量的多糖易于透皮吸收，可应用到化妆品领域，高分量的多糖因其分子量越大，粘度也越大，降脂效果会更好，可应用到食品领域。

本发明方法很好的解决了现有水提技术存在的技术缺陷，实现了同时提取不同分子量的铁皮石斛多糖，解决了细粉不易提取、能耗高等技术缺陷，同时也解决了粗粉提取率不高的技术缺陷，因此具有很好的技术优势；本发明方法操作简单，易于工业化生产应用，具有极高的市场应用前景。

具体实施方式

为了可以更容易地理解本公开内容，在此对某些术语进行限定。另外的限定在具体实施方式中阐述。

本文使用的术语“wt%”为质量百分比。

本文使用的术语“vol%”为体积百分比。

本文中多糖含量检测方法依据《中华人民共和国药典》2015版一部铁皮石斛项下多糖的检测；多糖分子量分布采用高效凝胶过滤色谱法进行检测，此项检测委托江南大学分析测试中心完成。

实施例1 铁皮石斛多糖提取物的制备

提取：取350g铁皮石斛（购自安国市一方药业有限公司）干条，粗碎成粒度为1mm～25mm的粗粉，置容器中，依次加入3500g水中于100℃提取1次，提取2h，过网分别收集提取液a和药渣，将药渣捣碎后加入20倍质量的水提取2次，每次提取2h，得提取液b；将提取液a、b分别在4000转/min的条件下离心10min，得离心液a、b；分别将离心液a、b在70℃、真空度为0.06Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达2wt%，得浓缩液a和浓缩液b；在浓缩液b中加入95vol %乙醇，静置过夜，过滤滤液回收乙醇得沉淀物b，再用95 vol %乙醇洗涤沉淀物b 2～5次，脱去沉淀物b中的大部分水分；将浓缩液a和沉淀物b分别在60℃下真空干燥，得30g铁皮石斛多糖提取物a及80g石斛多糖提取物b。

经过检测铁皮石斛多糖提取物a的多糖含量为30.5wt%，其多糖分子量分布为500～300000；测得铁皮石斛多糖提取物b多糖含量为92.8wt%，多糖分子量分布为150万～250万。

实施例2 铁皮石斛多糖提取物的制备

提取：取350g铁皮石斛（购自安国市一方药业有限公司）干条，粗碎成粒度为1mm～25mm的粗粉，置容器中，依次加入4900g的水于90℃提取2次，每次2h，过网分别收集得提取液a和药渣，将药渣捣碎后加入15倍质量的水提取1次，每次提取2h，得提取液b；将提取液a、b分别在4000转/min的条件下离心15min，得离心液a、b；将离心液a在65℃、真空度为0.1 Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达5wt%的浓缩液a；在离心液b中加入90 vol %的乙醇，静置过夜，过滤滤液回收乙醇得沉淀物b；将浓缩液a和沉淀物b分别在在50℃下真空干燥，得28g铁皮石斛多糖提取物a及69.9g石斛多糖提取物b。

经过检测铁皮石斛多糖提取物a的多糖含量为25wt%，其多糖分子量分布为500～300000；测得铁皮石斛多糖提取物b多糖含量为81.8wt%，多糖分子量分布为150万～250万。

实施例3 铁皮石斛多糖提取物的制备

提取：取100g铁皮石斛（购自安国市一方药业有限公司）干条，粗碎成粒度为1mm～25mm的粗粉，置容器中，依次加入800g的水于80℃提取2次，每次2h，过网分别收集得提取液a和药渣，将药渣捣碎后加入10倍质量的水提取2次，每次提取1h，得提取液b；将提取液a、b分别在4000转/min条件的下离心10min，得离心液a、b；分别将离心液a、b在75℃、真空度为0.08Mpa条件下浓缩至可溶性固含量达3wt%，得到浓缩液a及得到浓缩液b；在浓缩液b中加入95vol %的乙醇，静置过夜，过滤滤液回收乙醇得沉淀物b；将浓缩液a和沉淀物b分别在在70℃下真空干燥，得9.2g铁皮石斛多糖提取物a及28.1g石斛多糖提取物b。

经过检测铁皮石斛多糖提取物a的多糖含量为32.4wt%，其多糖分子量分布为500～300000；测得铁皮石斛多糖提取物b多糖含量为90.4wt%，多糖分子量分布为150万～250万。

以上列举的仅是本发明的几个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形，本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均认为是本发明的保护范围。

Claims (12)

1.一种铁皮石斛多糖提取物的制备方法，包括提取、干燥等步骤，其特征在于，具体步骤包括：

将铁皮石斛粗碎后，第一次水提，过滤分离，提取1～3次，将过滤后收集的药渣捣碎后进行第二次水提，离心分离，提取1～2次，收集离心液；然后干燥即得铁皮石斛多糖提取物b；

所述的铁皮石斛多糖提取物b为分子量为150万～250万多糖的提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的铁皮石斛粗碎的粒度为1mm～25mm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的第一次水提及第二次水提的条件为80～100℃水中提取1～2小时。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的离心的条件为：4000转/min，时间10～15min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的干燥条件为：在50～70℃的条件真空干燥。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的铁皮石斛多糖提取物b为含有至少81.8wt%分子量为150万～250万多糖的提取物。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在所述的收集离心液后，然后醇沉，得到沉淀物，然后对沉淀物进行干燥得铁皮石斛多糖提取物b。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述的醇沉条件为：将离心液加入90vol %以上的醇至上清液醇浓度达到50 vol %～85 vol %，静置8h～24h，收集沉淀物，将沉淀物加入90 vol %以上的醇脱出剩余水分得到沉淀物。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：在所述的收集离心液后浓缩，然后醇沉，得到沉淀物，然后对沉淀物进行干燥得铁皮石斛多糖提取物b，所述的浓缩为在65℃～75℃、真空度为0.06 Mpa～0.1 Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达2 wt%～5wt%的浓缩液。

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述的醇为乙醇。

11.根据权利要求1-10中任一所述的制备方法，其特征在于：在所述的第一次水提后，收集提取液，将提取液离心得离心液，然后将离心液进行干燥，即得铁皮石斛多糖提取物a；所述的铁皮石斛多糖提取物a为含有至少25wt%分子量为500～30万多糖的提取物。

12.根据权利要求1-10中任一所述的制备方法，其特征在于：在所述的第一次水提后，收集提取液，将提取液离心得离心液，然后将离心液进行浓缩后干燥，即得铁皮石斛多糖提取物a；所述的浓缩为在65℃～75℃、真空度为0.06 Mpa～0.1 Mpa条件下浓缩至可溶性固形物含量达2 wt%～5wt%的浓缩液。