CN108601720B - 口腔护理产品和方法 - Google Patents
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Abstract
本文提供的是包含部分水解的植物蛋白的口腔护理组合物,其可用于修复或抑制牙侵蚀、促进牙补充矿质和/或增强氟化物的抗牙腔作用的方法中。
Description
本申请要求以下申请的优先权:2015年10月30日提交的美国临时申请序列号62/248992;2015年10月26日提交的美国临时申请序列号62/246161;2015年10月26日提交的美国临时申请序列号62/246163;以及2015年10月26日提交的美国临时申请序列号62/246165,所述申请中的每一个的内容以引用的方式并入本文。
背景
牙釉质是覆盖牙齿的齿冠的钙化材料的薄的硬质层。牙釉质的主要矿物质组分是羟基磷灰石,这是磷酸钙的结晶形式。牙釉质的化学侵蚀可能由于牙齿暴露于酸性食物和饮料或暴露于从胃回流产生的胃酸而发生。牙釉质的侵蚀可能由于增加的牙质小管暴露而导致增强的牙齿敏感性,并且导致增加的牙质可见性,从而导致外观更黄的牙齿。唾液薄膜(沉积在牙齿上的唾液糖蛋白的薄层)在保护牙齿免受侵蚀性刺激方面是必不可少的。因此,经历口腔干燥的人更易受酸侵蚀损害的影响。
发展来帮助预防釉质侵蚀的现有方法包括将游离氟的来源并入到口腔护理组合物中。氟化物通过形成氟磷灰石并且通过维持包围牙齿的使牙齿脱矿质最小化的蚀斑液内的过饱和环境来减少对于釉质的损害,氟磷灰石比羟基磷灰石在更低的pH下溶解并且因此更耐受酸损害。还将亚锡盐并入到牙粉制剂中来通过形成更耐受酸的矿物质层来类似地保护釉质表面。也已描述了涂覆并保护釉质表面的聚合物。
当含有生龋齿细菌的蚀斑代谢碳水化合物时,酸也在口腔中生成。因为蚀斑形成控制通过釉质的质子和矿物质扩散的动力学的屏障,所以蚀斑酸造成龋齿损伤。在牙粉制剂中并入氟离子是减轻蚀斑酸的影响的最常见的方法。氟化物降低脱矿质的速率并且增强补充矿质。也已发展了若干种方法来稳定磷酸钙盐或控制蚀斑pH以增强补充矿质。
虽然已发展了方法来减轻非细菌和细菌生成酸对于牙齿的影响,但是仍然需要提供有效地使釉质从酸侵蚀和细菌酸的影响修复的改进的口腔护理组合物。
简述
本发明人意外地发现部分水解的植物蛋白在修复牙侵蚀或减轻牙侵蚀的影响、促进牙补充矿质和增强氟化物的抗牙腔作用方法是有效的,所述部分水解的植物蛋白例如来自小麦、大米、杏仁、马铃薯、黄豆、大豆或其组合的部分水解的蛋白质,例如部分水解的谷物蛋白(来自禾本科的谷粒的水解的蛋白质,例如部分水解的小麦蛋白或部分水解的大米蛋白。
例如,在一个实施方案中,制备包含具有约500D至约10000D,例如1000D至5000D的分子量分布的低聚和多肽分子的部分水解的植物蛋白以用于具有合适的口服可接受载体的成分的制剂,通过在缓冲液例如磷酸盐缓冲液诸如Na2HPO4缓冲液(1.5mM)和CaCl2(2.5mM)中稀释以提供具有所需pH(例如pH 6-8,例如pH 7-8,例如约pH 7.5)的缓冲溶液、过滤并离心所述溶液以获得包含部分水解的植物蛋白的滤液来进行。杀生物剂(例如十六烷基氯化吡啶鎓,例如在0.1%下)和/或氟化物可添加到所述滤液。然后部分水解的植物蛋白可与口服可接受载体例如牙膏或漱口水基的组分组合,以提供用于修复牙侵蚀或减轻牙侵蚀的影响、促进牙补充矿质和增强氟化物的抗牙腔作用的口腔护理组合物。
因此,本公开涉及一种口腔护理组合物(组合物1),例如牙粉,所述组合物包含:
a)部分水解的植物蛋白,所述植物蛋白包含具有一定分子量的低聚和多肽分子,其中低聚和多肽分子的至少95%是约500D至约10000D,例如约1000D至约5000D;例如具有如下的分子量分布:约65%<3500D,约84%-92%<6000D,约0.9%-3.6%>9000D,以及约0.1%-0.6%>13000D;
b)口服可接受的载体,
其中按所述组合物的总重量计,所述部分水解的植物蛋白以0.01重量%至3重量%的量存在于所述组合物中。例如,本公开提供:
1.1.组合物1,其中所述部分水解的植物蛋白从禾本科的谷粒获得,例如是部分水解的玉米(苞谷)、小麦、大米、大麦、燕麦或粟蛋白。
1.2.组合物1.1,其中所述部分水解的植物蛋白是部分水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白。
1.3.组合物1,其中所述部分水解的植物蛋白从小麦、大米、杏仁、马铃薯、大豆、黄豆或其组合获得。
1.4.任一种前述组合物,其中所述部分水解的植物蛋白是基本上不含面筋的部分水解的小麦蛋白。
1.5.任一种前述组合物,其中所述部分水解的植物蛋白包含氟化物。
1.6.任一种前述组合物,其中所述部分水解的植物蛋白例如通过使用磷酸盐缓冲液调整至所需pH,例如pH 6-8,例如pH 7-8。
1.7.任一种前述组合物,其中所述部分水解的植物蛋白包含杀生物剂,例如在有效浓度下的十六烷基氯化吡啶鎓(CPC),例如按滤液的重量计0.1%。
1.8.任一种前述组合物,其中所述部分水解的植物蛋白以按所述组合物的总重量计0.1重量%至3重量%的量存在于所述组合物中,例如按所述组合物的总重量计0.2重量%至2重量%,例如约0.2重量%、约1重量%、约1.5重量%或约2重量%。
1.9.任一种前述组合物,其中所述组合物包含有效量的氟化物。
1.10.任一种前述组合物,所述组合物包含100ppm至2500ppm,例如250ppm至750ppm的氟化物的量,例如约500ppm氟化物。
1.11.任一种前述组合物,所述组合物包含2500ppm至5000ppm的氟化物的量。
1.12.任一种前述组合物,所述组合物包含口服可接受的锌盐或氧化物,例如选自氧化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、磷酸锌、醋酸锌、氯化锌、与氨基酸的锌复合物、以及前述中的任一种的混合物,例如其中锌的量是按锌离子的重量计算0.1重量%至3重量%,例如约1重量%至约2重量%。
1.13.任一种前述组合物,所述组合物包含口服可接受的亚锡盐,例如SnF2或SnCl2。
1.14.任一种前述组合物,其中所述组合物呈选自以下的形式:口洗剂、牙膏、牙齿凝胶、牙齿粉末、非研磨剂凝胶、摩丝、泡沫、口部喷剂、口香糖、以及片剂,例如牙粉,例如牙膏或口洗剂。
1.15.任一种前述组合物,其中所述组合物还包含选自以下的一种或多种药剂:研磨剂、pH改变剂、表面活性剂、泡沫调节剂、增稠剂、粘度改性剂、湿润剂、抗牙垢剂或牙石控制剂、甜味剂、调味剂以及着色剂。
1.16.任一种前述组合物,其中所述组合物是牙膏。
1.17.任一种前述组合物,所述组合物包含一种或多种可溶性磷酸盐,例如其中“可溶性磷酸盐”意指在25℃下在水中具有至少1g/100ml的溶解性;例如其中所述一种或多种可溶性磷酸盐是焦磷酸盐和/或聚磷酸盐例如三聚磷酸盐的钠盐和/或钾盐;例如,其中所述一种或多种可溶性磷酸盐包括焦磷酸四钠(TSPP)、三聚磷酸钠(STPP)或TSPP和STPP的组合;例如,其中所述一种或多种可溶性磷酸盐按所述组合物的重量计以1%-20%,例如2%-8%,例如大约5%的量存在。
1.18.任一种前述组合物,其中所述氟化物通过选自以下的盐提供:氟化亚锡、氟化钠、氟化钾、单氟磷酸钠、氟硅酸钠、氟硅酸铵、氟化胺(例如,N′-十八烷基三亚甲二胺-N,N,N′-三(2-乙醇)-二氢氟酸盐)、氟化铵、氟化钛、六氟硫酸盐以及其组合。
1.19.任一种前述组合物,所述组合物是包含例如选自以下的润湿剂的牙粉:甘油、山梨醇、丙二醇、聚乙二醇、木糖醇、以及其混合物,例如包含按所述组合物的重量计至少30%,例如40%-50%甘油。
1.20.任一种前述组合物,所述组合物是包含例如选自以下的一种或多种表面活性剂的牙粉:阴离子、阳离子、两性离子和非离子表面活性剂以及其混合物,例如,其中所述牙粉碱包含阴离子表面活性剂,例如,选自月桂基硫酸钠、月桂基醚硫酸钠以及其混合物的表面活性剂,所述表面活性剂例如呈约0.3重量%至约4.5重量%的量,例如按所述组合物的重量计1%-2%月桂基硫酸钠(SLS)。
1.21.任一种前述组合物,所述组合物是包含两性离子表面活性剂的牙粉,所述两性离子表面活性剂例如甜菜碱表面活性剂,例如椰油酰胺丙基甜菜碱,所述表面活性剂例如呈约0.1重量%至约4.5重量%的量,例如按所述组合物的重量计0.5%-2%椰油酰胺丙基甜菜碱
1.22.任一种前述组合物,所述组合物是包含粘度改变量的多糖胶中的一种或多种的牙粉,所述多糖胶例如黄原胶或角叉菜胶、二氧化硅增稠剂、以及其组合。
1.23.任一种前述组合物,所述组合物是包含胶条或片段的牙粉。
1.24.任一种前述组合物,所述组合物是口香糖。
1.25.任一种前述组合物,所述组合物包含调味剂、芳香剂和/或着色剂。
1.26.任一种前述组合物,所述组合物是包含有效量的一种或多种抗菌剂的牙粉,例如,包含选自以下的抗菌剂的牙粉:卤代二苯基醚(例如,三氯沙),草药提取物和精油(例如,迷迭香提取物、茶叶提取物、木兰提取物、百里酚、薄荷醇、桉叶脑、香叶醇、香芹酚、柠檬醛、日桧醇、儿茶酚、水杨酸甲酯、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、没食子酸、米斯瓦克(miswak)提取物、沙棘提取物),双胍防腐剂(例如,氯己定、阿来西定或奥替尼啶),季铵化合物(例如,西吡氯铵氯化物(CPC)、苯扎氯铵、十四烷基吡啶鎓氯化物(TPC)、N-十四烷基-4-乙基吡啶鎓氯化物(TDEPC)),酚类防腐剂,合克替啶(hexetidine),奥替尼啶(octenidine),血根碱,聚维酮碘,地莫匹醇(delmopinol),salifluor,金属离子(例如,锌盐,例如,柠檬酸锌;亚锡盐、铜盐、铁盐),血根碱,蜂胶(propolis)和氧化剂(例如,过氧化氢、缓冲的过氧硼酸钠或过氧碳酸钠),邻苯二甲酸和其盐,单过氧邻苯二甲酸和其盐以及酯,硬脂酸抗坏血酸酯,肌氨酸油酰酯,硫酸烷酯,磺基琥珀酸二辛酯,水杨酰苯胺,溴化度米芬(domiphen bromide),地莫匹醇(delmopino)),辛哌乙醇和其他哌啶子基衍生物,烟酸(nicin)制剂,亚氯酸盐;以及前述中的任一种的混合物;例如,包含三氯沙或西吡氯铵氯化物。
1.27.任一种前述组合物,所述组合物是包含增白剂的牙粉,所述增白剂例如选自由以下组成的组:过氧化物、金属亚氯酸盐、过硼酸盐、过碳酸盐、过氧酸、次氯酸盐、以及其组合;例如过氧化氢或过氧化氢源,例如过氧化脲或过氧化物盐或复合物(例如像过氧磷酸盐、过氧碳酸盐、过硼酸盐、过氧硅酸盐或过硫酸盐;例如过氧磷酸钙、过硼酸钠、碳酸钠过氧化物、过氧磷酸钠、以及过硫酸钾)。
1.28.任一种前述组合物,所述组合物是包含干涉或防止细菌附着的药剂的牙粉,所述药剂例如对羟基苯甲酸甲酯(solbrol)或壳聚糖。
1.29.任一种前述组合物,所述组合物是包含可溶性钙盐的牙粉,所述可溶性钙盐例如选自硫酸钙、氯化钙、硝酸钙、乙酸钙、乳酸钙以及其组合。
1.30.任一种前述组合物,所述组合物是包含生理学上或口服可接受的钾盐的牙粉,所述钾盐例如硝酸钾或氯化钾,呈有效降低牙质敏感性的量。
1.31.任一种前述组合物,所述组合物是牙粉,包含阴离子聚合物例如合成的阴离子聚合物聚羧酸盐,例如,其中所述阴离子聚合物选自马来酸酐或马来酸与另一种可聚合的烯键式不饱和单体的1∶4至4∶1共聚物;例如,其中所述阴离子聚合物是具有约30,000至约1,000,000,例如约300,000至约800,000的平均分子量(M.W.)的甲基乙烯基醚/马来酸酐(PVM/MA)共聚物,例如,其中所述阴离子共聚物是所述组合物的重量的约1%-5%,例如约2%。
1.32.任一种前述组合物,所述组合物是包含口气清新剂、芳香剂或调味剂的牙粉。
1.33.前述组合物中的任一种,其中所述组合物的pH是大约中性的,例如pH 6-8,例如约pH 7。
1.34.前述组合物中的任一种,所述组合物用于减少酸侵蚀,清洁牙齿,减少细菌生成的生物膜和蚀斑,减少牙龈炎,抑制牙齿腐烂和牙腔形成,并且降低牙质超敏感性。
1.35任一种前述组合物,所述组合物用于减少、抑制或修复牙釉质侵蚀。
1.36.任一种前述组合物,所述组合物用于促进牙釉质的补充矿质。
1.37.任一种前述组合物,所述组合物用于增强氟化物的抗牙腔作用。
组合物1的特定新型实施方案是牙粉,包含
a)a)部分水解的植物蛋白,所述植物蛋白包含具有一定分子量的低聚和多肽分子,其中所述植物蛋白的至少95%是约500D至约10000D,例如约1000D至约5000D;例如具有如下的分子量分布:约65%<3500D,约84%-92%<6000D,约0.9%-3.6%>9000D,以及约0.1%-0.6%>13000D;例如其中水解的小麦蛋白的量是0.1重量%至2重量%,例如约0.2%水解的小麦蛋白;
b)任选地有效量的氟化物;例如其中氟化物以100ppm至1500ppm,例如约500ppm的量存在;以及
c)口服可接受的载体。
在另一个具体实施方案中,组合物是漱口水(组合物1A),包含:
a)部分水解的植物蛋白,所述植物蛋白包含具有一定分子量的低聚和多肽分子,其中低聚和多肽分子的至少95%是约500D至约10000D,例如约1000D至约5000D;例如具有如下的分子量分布:约65%<3500D,约84%-92%<6000D,约0.9%-3.6%>9000D,以及约0.1%-0.6%>13000D;
b)口服可接受的载体,
其中按所述组合物的总重量计,所述部分水解的植物蛋白以0.01重量%至3重量%的量存在于所述组合物中。
例如,根据组合物1及以下中的任一种的漱口水,例如
1A.1组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白从禾本科的谷粒获得,例如是部分水解的玉米(苞谷)、小麦、大米、大麦、燕麦或粟蛋白。
1A.2.组合物1A.1,其中所述部分水解的植物蛋白是部分水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白。
1A.3.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白是基本上不含面筋的部分水解的小麦蛋白。
1A.4.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白从小麦、大米、杏仁、马铃薯、大豆、黄豆或其组合获得。
1A.5.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白包含氟化物。
1A.6.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白例如通过使用磷酸盐缓冲液调整至所需pH,例如pH 6-8,例如pH 7-8。
1A.7.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白包含杀生物剂,例如在有效浓度下的十六烷基氯化吡啶鎓(CPC),例如按滤液的重量计0.01%-0.1%。
1A.8.任一种前述组合物1A,其中所述部分水解的植物蛋白以按所述组合物的总重量计0.1重量%至3重量%的量存在于所述组合物中,例如按所述组合物的总重量计0.2重量%至2重量%,例如约0.2重量%。
1A.9.任一种前述组合物1A,其中所述组合物包含有效量的氟化物,例如协同有效量的氟化物,例如与部分水解的植物蛋白组合的氟化物的量有效减少或抑制脱矿质和/或增强牙齿釉质的补充矿质。
1A.10.任一种前述组合物1A,所述组合物1A包含有效量的来自氟离子源的氟化物,所述氟离子源是选自氟化亚锡、氟化钠、氟化钾、单氟磷酸钠、氟硅酸钠、氟硅酸铵、氟化胺(例如,N′-十八烷基三亚甲二胺-N,N,N′-三(2-乙醇)-二氢氟酸盐)、氟化铵、氟化钛、六氟硫酸盐以及其组合。
1A.11.任一种前述组合物1A,所述组合物1A包含润湿剂,例如选自甘油、山梨醇、丙二醇、聚乙二醇、木糖醇、以及其混合物,所述润湿剂例如呈10重量%-25重量%,例如18%-20%的量,
1A.12.任一种前述组合物1A,所述组合物1A包含阴离子表面活性剂,例如月桂基硫酸钠或月桂基醚硫酸钠或其混合物,所述阴离子表面活性剂例如呈0.01重量%-0.5重量%,例如约0.05重量%的量。
1A.13.任一种前述组合物1A,所述组合物1A包含非离子表面活性剂,例如(i)丙二醇和乙二醇的共聚合物,例如由与聚乙二醇的两个亲水性嵌段侧接的聚丙二醇的中心疏水性嵌段组成的三嵌段共聚物,例如泊洛沙姆,例如泊洛沙姆188、泊洛沙姆338、泊洛沙姆407、或其混合物,所述共聚物例如呈0.1重量%-2重量%,例如约0.5%的量,和/或(ii)聚山梨醇酯,例如聚山梨醇酯20,所述聚山梨醇酯例如呈0.1重量%-1重量%,例如约0.5%的量,和/或(iii)聚乙氧基化植物油,例如聚氧乙烯40氢化蓖麻油,所述聚乙氧基化植物油例如呈0.05重量%-0.5重量%,例如约0.1%的量。
1A.14.任一种前述组合物1A,所述组合物包含口气清新剂、芳香剂或调味剂。
1A.15.任一种前述组合物1A,其中所述组合物的pH是大约中性的,例如pH 6-8,例如约pH 7。
iA.16.任一种前述组合物1A,所述组合物包含例如0.05重量%-1重量%,例如约0.2%的量的部分水解的小麦蛋白,和提供200ppm至1000ppm氟化物,例如约225ppm或约500ppm氟化物的氟离子源。
1A.17.任一种前述组合物1A,所述组合物基本上不含乙醇,例如具有小于0.5重量%乙醇。
1A.18.任一种前述组合物1A,所述组合物对于用作漱口水是适口且安全的。
1A.19.任一种前述组合物1A,所述组合物包含
a)例如0.05重量%-1重量%,例如约0.2%的量的部分水解的小麦蛋白,
b)提供200ppm至1000ppm氟化物,例如约225ppm或约500ppm氟化物的氟离子源,和
c)例如0.01重量%-0.1重量%,例如约0.04%的量的十六烷基氯化吡啶鎓。
1A.20.任一种前述组合物1A,所述组合物是漱口水,包含
a)例如0.05重量%-1重量%,例如约0.2%的量的部分水解的小麦蛋白,
b)提供200ppm至1000ppm氟化物,例如约225ppm或约500ppm氟化物的氟离子源,
c)例如0.01重量%-0.1重量%,例如约0.04%的量的十六烷基氯化吡啶鎓,
d)例如0.1重量%-1重量%,例如约0.5%的量的非离子表面活性剂,例如泊洛沙姆,
e)10重量%-25重量%,例如18%-20%的量的润湿剂,例如包括山梨醇、甘油、丙二醇、和/或这些中的任两种或更多种的混合物,
f)甜味剂和调味剂,
g)任选地例如0.01重量%-0.1重量%,例如约0.05%的量的防腐剂,例如山梨酸钾,以及
h)例如75重量%-85重量%的量的水。
1A.21.任一种前述组合物1A,所述组合物用于减少酸侵蚀,清洁牙齿,减少细菌生成的生物膜和蚀斑,减少牙龈炎,抑制牙齿腐烂和牙腔形成,并且降低牙质超敏感性。
1A.22.任一种前述组合物1A,所述组合物用于减少、抑制或修复牙釉质侵蚀。
1A.23.任一种前述组合物1A,所述组合物用于促进牙釉质的补充矿质。
1A.24.任一种前述组合物1A,所述组合物用于增强抗牙腔和修复氟化物的作用。
在一方面,本公开提供组合物1及以下中的任一种,所述组合物用于修复或抑制牙侵蚀,促进补充矿质,和/或增强氟化物的抗牙腔作用;例如用于在根据方法1及以下所述的以下方法中的任一种中使用。
在另一方面,本公开提供一种修复或抑制牙侵蚀、促进牙补充矿质和/或增强氟化物的抗牙腔作用的方法(方法1),所述方法包括向牙齿施加组合物,例如组合物1及以下中的任一种,例如组合物1A及以下中的任一种,例如口腔护理组合物,所述组合物包含:
a)部分水解的植物蛋白,所述植物蛋白包含具有一定分子量的低聚和多肽分子,其中所述植物蛋白的至少95%是约500D至约10000D,例如约1000D至约5000D;例如具有如下的分子量分布:约65%<3500D,约84%-92%<6000D,约0.9%-3.6%>9000D,以及约0.1%-0.6%>13000D;以及
b)口服可接受的载体,
例如,其中按所述组合物的总重量计,所述部分水解的植物蛋白以0.01重量%至3重量%的量存在于所述组合物中。例如,本公开提供:
1.1.方法1,其中所述部分水解的植物蛋白从小麦、大米、杏仁、马铃薯、大豆、黄豆或其组合获得;例如来自禾本科的谷粒,例如是部分水解的玉米(苞谷)、小麦、大米、大麦、燕麦或粟蛋白。
1.2.方法1.1,其中所述部分水解的植物蛋白是部分水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白。
1.3.方法1,其中所述部分水解的植物蛋白从杏仁、马铃薯或黄豆获得。
1.4.任一种前述方法,其中所述部分水解的植物蛋白包含氟化物。
1.5.任一种前述方法,其中所述部分水解的植物蛋白例如使用磷酸盐缓冲液调整至所需pH,例如pH 6-8,例如pH 7-8。
1.6.任一种前述方法,其中所述部分水解的植物蛋白包含杀生物剂,例如在有效浓度下的十六烷基氯化吡啶鎓(CPC),例如按滤液的重量计0.1%。
1.7.任一种前述方法,其中所述部分水解的植物蛋白以按所述组合物的总重量计0.1重量%至3重量%的量存在于所述组合物中,例如按所述组合物的总重量计0.2重量%至2重量%,例如约0.2重量%、约1重量%、约1.5重量%或约2重量%。
1.8.任一种前述组合物,其中所述组合物包含有效量的氟化物。
1.9.任一种前述方法,其中所述氟化物的量是100ppm至1000ppm,例如约500ppm氟化物。
1.10.任一种前述方法,其中所述组合物呈选自以下的形式:口洗剂、牙膏、牙齿凝胶、牙齿粉末、非研磨剂凝胶、摩丝、泡沫、口部喷剂、以及片剂。
1.11.任一种前述方法,其中所述组合物还包含选自以下的一种或多种药剂:研磨剂、pH改变剂、表面活性剂、泡沫调节剂、增稠剂、粘度改性剂、湿润剂、抗牙垢剂或牙石控制剂、甜味剂、调味剂以及着色剂。
1.12.任一种前述方法,其中所述组合物是牙粉,例如牙膏。
1.13.任一种前述方法,其中所述组合物选自组合物1及以下中的任一种,出处同上。
1.14.任一种前述方法,所述方法是一种用于减少、抑制或修复牙侵蚀,例如釉质的侵蚀的方法,例如其中所述组合物施加到鉴定为具有牙侵蚀或处于具有牙侵蚀的高风险下的患者的牙齿。
1.15.任一种前述方法,所述方法是一种用于促进牙补充矿质,例如釉质的补充矿质的方法,例如其中所述组合物施加到鉴定为具有脱矿质的患者的牙齿。
1.16.任一种前述方法,所述方法是一种用于增强氟化物的抗牙腔作用的方法,例如其中所述组合物施加到鉴定为具有牙齿腐烂的早期迹象,例如早期釉质龋或鉴定为具有活性腐烂或鉴定为处于牙齿腐烂的高风险下的患者的牙齿。
1.17.方法1.16,其中所述组合物包含有效量的氟化物并且/或者其中所述方法还包括施用包含有效量的氟化物口洗剂的口腔护理产品或包含有效量的氟化物的牙膏。
1.18.任一种前述方法,其中所述组合物选自组合物1及以下中的任一种。
1.19.任一种前述方法,其中所述组合物选自组合物1A及以下中的任一种。
在另一个实施方案中,本公开提供部分水解的植物蛋白,例如部分水解的小麦蛋白或部分水解的大米蛋白在制造例如根据组合物1及以下中的任一种,例如组合物1A及以下中的任一种所述的口腔护理组合物中的用途,以用于例如在方法1及以下中的任一种中修复或抑制牙侵蚀、促进补充矿质和/或增强氟化物的抗牙腔作用。
在另一方面,本公开提供一种制备口腔护理产品的方法(方法2),所述口腔护理产品例如可用于修复或抑制牙侵蚀、促进牙补充矿质和/或增强氟化物的抗牙腔作用的口腔护理产品,例如根据组合物1及以下中的任一种,例如组合物1A及以下中的任一种所述的产品,所述方法包括:
a)部分水解的植物蛋白,所述植物蛋白包含具有约500D至约10000D,例如约1000D至约5000D的分子量分布的低聚和多肽分子,通过使用水性缓冲溶液例如磷酸盐缓冲溶液调整pH例如以获得具有所需pH,例如pH 6-8,例如pH 7-8的溶液;
b)过滤并离心a)的溶液产品以获得包含部分水解的植物蛋白的滤液;
c)向b)的滤液产物添加氟化物(例如,呈包含氟化物的口服可接受的盐的形式,例如氟化钠或单氟磷酸钠)和任选地杀生物剂(例如,在有效量下,例如按滤液的重量计0.01%至1%,例如约0.1%的十六烷基氯化吡啶鎓);
d)将c)的产物混合到口服可接受的载体的组分以获得包含按组合物的总重量计0.01重量%至3重量%的量的部分水解的植物蛋白的口腔护理组合物。
例如,本公开提供:
2.1.方法2,其中所述部分水解的植物蛋白从小麦、大米、杏仁、马铃薯、大豆、黄豆或其组合获得,例如来自禾本科的谷粒,例如是部分水解的玉米(苞谷)、小麦、大米、大麦、燕麦或粟蛋白。
2.2.方法2.1,其中所述部分水解的植物蛋白是部分水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白。
2.3.方法2,其中所述部分水解的植物蛋白从杏仁、马铃薯或黄豆获得。
2.4.任一种前述方法,其中所述组合物是根据组合物1及以下中的任一种所述的组合物。
2.5.任一种前述方法,其中所述组合物是根据组合物1A及以下中的任一种所述的组合物。
例如,本公开提供一种包含部分水解的植物蛋白的口腔护理组合物,例如根据组合物1及以下中的任一种,例如组合物1A及以下中的任一种所述的组合物,其中所述口腔护理组合物通过方法2及以下的过程获得或可获得。
本发明的其他适用领域将根据下文提供的详细描述而变得显而易见。应理解,详细描述和具体实施例虽然指示了本发明的优选实施方案,但是仅仅意图用于说明的目的,而不是意图限制本发明的范围。
详细描述
以下对优选实施方案的描述在本质上仅为示例性的,并且决不意图限制本发明、其应用或用途。
如全篇中所用的,范围用作描述范围内的各个和每个值的简略表达方式。范围内的任何值均可选择为范围的端值。此外,本文中引用的所有参考文献均以引用的方式整体并入本文。在本公开中的定义和引用的参考文献的定义有冲突的情况下,以本公开为准。
除非另外指出,否则本文和本说明书中其他地方表示的所有百分比和量均应理解为重量百分比。所给定的量是基于材料的有效重量。
水解的植物蛋白
水解的植物蛋白是来自植物的蛋白质,例如来自可食用植物部分,例如来自小麦、大米、杏仁、马铃薯、大豆、黄豆或其组合,例如来自谷物谷粒诸如玉米、小麦、大米、大麦、燕麦、以及粟。在具体实施方案中,水解的植物蛋白来自小麦或大米。
水解的小麦蛋白通常通过使用内切蛋白酶和外切蛋白酶酶促水解小麦蛋白来获得。水解的小麦蛋白还可通过酸或碱水解来获得。制备水解的小麦蛋白的方法对于蛋白质化学的领域中的技术人员将是已知的。然而,水解的小麦蛋白还可作为来自BASF的W20、Gluadin W40和作为来自IKEDA的商购获得。Gluadin W20是通过小麦面筋的酶促水解获得的部分水解产物。它含有至少20.0%的干物质。Gluadin W40是通过小麦面筋的酶促水解获得的部分水解产物。它含有至少40.0%的干物质。
在另一个实施方案中,水解的植物蛋白由不含面筋的加工的小麦蛋白制成。
水解的大米蛋白通常通过使用内切蛋白酶和外切蛋白酶酶促水解大米蛋白来获得。水解的大米蛋白还可通过酸或碱水解来获得。制备水解的大米蛋白的方法对于蛋白质化学的领域中的技术人员将是已知的。然而,水解的大米蛋白还可作为来自BASF的R和作为来自TRI-K Industries的Rice Pro-Tein商购获得
在本文中的组合物和方法中使用的水解的植物蛋白是不完全水解的,并且因此有时称为“部分水解的”来强调这一点。“部分水解的”意指肽键中的至少一些但并非全部被水解。因此,水解的植物蛋白通常包含变化大小的氨基酸和肽的混合物。相关活性成分的MW在约500D-约10,000D,例如约1000D至约5000D的范围内。
在一些实施方案中,按组合物的总重量计,水解的植物蛋白以0.01重量%至3重量%的量存在于组合物中。在一些实施方案中,按组合物的总重量计,水解的植物蛋白以0.1重量%至3重量%、或0.1重量%至2重量%、或0.1重量%至1重量%的量存在于组合物中。在其他实施方案中,按组合物的总重量计,水解的植物蛋白以0.05重量%至1重量%或0.1重量%至0.5重量%的量存在于组合物中。在另外的实施方案中,按组合物的总重量计,水解的植物蛋白以0.5重量%至3重量%或0.5重量%至2重量%或0.5重量%至1重量%的量存在于组合物中。在再另外的实施方案中,按组合物的总重量计,水解的植物蛋白以1重量%至3重量%或1重量%至2重量%的量存在于组合物中。
在一种布置中,本发明的组合物包含水解的小麦蛋白和水解的大米蛋白两者。在此布置中,水解的小麦蛋白和水解的大米蛋白可以以上定义的量存在于组合物中。任选地,按组合物的总重量计,组合物中的水解的小麦蛋白和水解的大米蛋白的总量是0.1重量%至3重量%、或0.1重量%至2重量%、或0.1重量%至1重量%、或0.1重量%至0.5重量%。在一些实施方案中,按组合物的总重量计,组合物中的水解的小麦蛋白和水解的大米蛋白的总量是1重量%至3重量%或1重量%至2重量%。
口服可接受的载体和任选的成分
如本文所用的表达“口服可接受的载体”表示以预期的量和浓度由对于口服使用安全且可接受的材料,例如如存在于常规牙膏和漱口水中的材料制成的载体。此类材料包括水和可含有润湿剂(诸如甘油、山梨醇、木糖醇等)的其他溶剂。在一些方面,术语“口服可接受的载体”涵盖除了水解的植物蛋白和氟化物以外的口腔护理组合物的全部组分。在其他方面,所述术语是指作用来将水解的植物蛋白和/或任何其他功能性成分递送到口腔的惰性或非活性成分。
用于本发明的口服可接受的载体包括用于制备口洗剂或漱口水、牙膏、牙齿凝胶、牙齿粉末、锭剂、胶、珠、可食用条、片剂等的常规和已知的载体。载体应选择用于与彼此和与组合物的其他成分相容。
提供以下非限制性实例。在牙膏组合物中,载体通常是提供按组合物的重量计的主要部分的水/润湿剂系统。可替代地,牙膏组合物的载体组分可包含水、一种或多种润湿剂以及除了水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白以外的其他功能性组分。在口洗剂或漱口水制剂中,载体通常是水解的小麦蛋白或水解的大米蛋白溶解或分散在其中的水/醇液体混合物。在可溶性锭剂中,载体通常包含在口腔中缓慢溶解的固体基质材料。在口香糖中,载体通常包含胶基,而在可食用条中,载体通常包含一种或多种膜形成聚合物。
本文提供的口腔护理组合物还可包含选自以下的一种或多种另外的成分:研磨剂、pH改变剂、表面活性剂、泡沫调节剂、增稠剂、粘度改性剂、湿润剂、抗牙垢剂或牙石控制剂、甜味剂、调味剂、着色剂以及防腐剂。这些成分也可被认为是载体材料。以下提供非限制性实例。
在一个实施方案中,本发明的组合物包含例如可用作抛光剂的至少一种研磨剂。可使用任何口服可接受的研磨剂,但是研磨剂的类型、细度(粒度)和量可选择成使得在组合物的正常使用过程中牙齿釉质不被过度磨损。合适的研磨剂包括但不限于例如呈二氧化硅凝胶、水合二氧化硅或沉淀二氧化硅形式的二氧化硅、氧化铝、不可溶性磷酸盐、碳酸钙、树脂研磨剂诸如脲-甲醛缩合产物等。可用作研磨剂的不可溶性磷酸盐是正磷酸盐、聚偏磷酸盐和焦磷酸盐。说明性实例是二水合正磷酸二钙、焦磷酸钙、[β]-焦磷酸钙、磷酸三钙、聚偏磷酸钙以及不可溶性聚偏磷酸纳。按组合物的总重量计,一种或多种研磨剂任选地以1重量%至5重量%的量存在于本发明的口腔护理组合物中。如果存在的话,研磨剂的平均粒度通常是0.1μm至30μm,并且优选地是5μm至15μm。
在另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种碳酸氢盐,所述碳酸氢盐由于起泡和释放二氧化碳而可用于例如赋予牙齿和胶“清洁感”。可使用任何口服可接受的碳酸氢盐,包括但不限于碱金属碳酸氢盐诸如碳酸氢钠和碳酸氢钾、碳酸氢铵等。按组合物的重量计,一种或多种碳酸氢盐任选地以1重量%至10%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种pH改变剂。此类药剂包括降低pH的酸化剂、升高pH的碱化剂以及将pH控制在所需范围内的缓冲剂。例如,可包含选自酸化剂、碱化剂和缓冲剂的一种或多种化合物以提供2至10的pH,或在各种说明性实施方案中,2至8、3至9、4至8、5至7、6至10、7至9的pH。可使用任何口服可接受的pH改变剂,包括但不限于羧酸、磷酸和磺酸、酸盐(例如,柠檬酸一钠、柠檬酸二钠、苹果酸一钠)、碱金属氢氧化物诸如氢氧化钠、碳酸盐诸如碳酸钠、碳酸氢盐、硼酸盐、硅酸盐、磷酸盐(例如,磷酸二氢钠、磷酸三钠、焦磷酸盐)、咪唑等。一种或多种pH改变剂任选地以有效将组合物维持在口服可接受的pH范围内的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的组合物包含至少一种表面活性剂,所述表面活性剂可用于例如提供给组合物增强的稳定性和包含在其中的组分,以便帮助通过去污剂作用清洁牙表面并且在搅动时(例如,在使用本发明的牙粉组合物刷洗过程中)提供泡沫。可使用任何口服可接受的表面活性剂,包括是阴离子、非离子或两性的那些表面活性剂。合适的阴离子表面活性剂包括但不限于C8-20烷基硫酸盐的水可溶性盐、磺化的C8-20脂肪酸甘油单酯、肌氨酸盐、牛磺酸盐等。合适的非离子表面活性剂包括但不限于泊洛沙姆、聚氧乙烯失水山梨醇酯、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚、叔胺氧化物、叔膦氧化物、二烷基亚砜等。合适的两性表面活性剂不限于具有阴离子基团(诸如羰酸根、硫酸根、磺酸根、磷酸根或膦酸根)的C8-20)脂肪族仲胺和叔胺的衍生物。合适的实例是椰油酰胺丙基甜菜碱。按组合物的总重量计,一种或多种表面活性剂任选地以0.01重量%至10重量%,例如0.05重量%至5重量%或0.1重量%至2重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种泡沫调节剂,所述调节剂可用于例如增加在搅动时由组合物生成的泡沫的量、稠度或稳定性。可使用任何口服可接受的泡沫调节剂,包括但不限于聚乙二醇(PEG)。按组合物的总重量计,一种或多种PEG任选地以0.1重量%至10重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种增稠剂,所述增稠剂可用于例如赋予组合物所需稠度和/或口感。可使用任何口腔可接受的增稠剂,包括但不限于卡波姆(羧乙烯基聚合物)、角叉菜胶、纤维素聚合物(诸如羟乙基纤维素、羧甲基纤维素(CMC)及其盐)、天然胶(诸如刺梧桐胶、黄原胶、阿拉伯胶和黄蓍胶)、胶体硅酸镁铝、胶体二氧化硅等。按组合物的总重量计,一种或多种增稠剂任选地以0.01重量%至15重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的组合物包含至少一种粘度改性剂,所述粘度改性剂可用于例如抑制成分的沉淀或分离或者在液体组合物搅动时促进成分的重新分散。可使用任何口服可接受的粘度改性剂,包括但不限于矿物油、凡士林、粘土、二氧化硅等。按组合物的总重量计,一种或多种粘度改性剂任选地以0.01重量%至10重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种润湿剂,所述润湿剂可用于在暴露于空气时防止牙膏的硬化,或者在漱口水的情况下,提供改善的加湿和口感并且增强可溶性较差的组分诸如调味油的混溶性。可使用任何口服可接受的湿润剂,包括但不限于多元醇诸如甘油、山梨醇、木糖醇或低分子量PEG。大多数湿润剂还充当甜味剂。按组合物的总重量计,一种或多种润湿剂任选地以1重量%至50重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含增强组合物的味道的至少一种甜味剂。可使用任何口服可接受的天然或人造甜味剂,包括但不限于葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、糊精、甘露糖、木糖、核糖、果糖、左旋糖、半乳糖、玉米糖浆、部分水解的淀粉、氢化的淀粉水解产物、山梨醇、甘露醇、木糖醇、麦芽糖醇、异麦芽糖醇、阿斯巴甜、纽甜、糖精及其盐、基于二肽的强效甜味剂、环磺酸盐等。按组合物的总重量计,一种或多种甜味剂任选地以0.005重量%至5重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含增强组合物的味道的至少一种调味剂。可以使用任何口服可接受的天然或合成调味剂,包括但不限于香草醛、鼠尾草、马郁兰、欧芹油、留兰香油、桂皮油、冬青油(水杨酸甲酯)、薄荷油、丁香油、月桂油、茴香油、桉树油、柑桔油、水果油和香精等。还涵盖在调味剂内的是在口腔中提供芳香和/或其他感官效果(包括凉爽或温热效果)的成分。此类成分说明性地包括薄荷醇、乙酸薄荷酯、乳酸薄荷酯、樟脑、桉树油、桉油醇、丁香酚、肉桂(cassia)、覆盆子酮(oxanone)、α-紫罗兰酮、麝香草酚、里哪醇、苯甲醛、肉桂醛、N-乙基-对-薄荷烷-3-甲酰胺(N-ethyl-p-menthan-3-carboxamine)、N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、3-(1-薄荷氧基)-丙烷-1,2-二醇、肉桂醛甘油缩醛(CGA)、薄荷酮甘油缩醛(MGA)等。按组合物的总重量计,一种或多种调味剂任选地以0.01重量%至5重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含至少一种着色剂。着色剂可发挥多种功能。这些功能包括在牙表面上提供白色或浅色着色的涂层、指示牙表面上的被组合物有效接触的位置、和/或改变组合物的外观以增强对消费者的吸引力。可使用任何口服可接受的着色剂,包括但不限于滑石、云母、碳酸镁、碳酸钙、硅酸镁、硅酸镁铝、二氧化硅、二氧化钛、氧化锌、铁氧化物、氰亚铁酸铁铵(ferric ammonium ferrocyanide)、锰紫(manganese violet)、钛酸化云母(titaniated mica)、氯氧化铋等。按组合物的总重量计,一种或多种着色剂任选地以0.001重量%至20重量%的总量存在。
在再另一个实施方案中,本发明的口腔护理组合物包含防腐剂。防腐剂可选自对羟基苯甲酸酯、山梨酸钾、苯甲醇、苯氧基乙醇、聚氨基丙基双胍、辛酸、苯甲酸钠以及十六烷基氯化吡啶鎓。在一些实施方案中,按组合物的总重量计,防腐剂在约0.001重量%至约1重量%的浓度下存在。
以下实施例说明本发明的组合物及其用途。举例说明的组合物是说明性的,并且不限制本发明的范围。
实施例
实施例1-表面粗糙度
切割牛牙齿,研磨并抛光以获得具有大约3mm x 3mm x 2mm的尺寸的釉质块。釉质的厚度是大约1mm至2mm,并且牙质的厚度是大约1mm。全部测量在釉质表面上进行。
在酸蚀之前和之后测量釉质块的表面粗糙度。通过将釉质块放置在1%柠檬酸溶液(pH 3.8)中,直至表面粗糙度(Sq)达到100-200为止来实现酸蚀。此Sq值记录为蚀刻的釉质的表面粗糙度。(Sq是在ISO 25178中定义的标准测量值,基本上作为相对于所测量的表面的算数平均值高度的均方根高度,所以它对应于在测量的区域内轮廓与中心平面的全部绝对距离的平均值,使得如果Sq较高,则意味着表面上存在较多明显的峰和谷,即表面较粗糙,并且如果Sq较低,则表面较平滑。)使用来自BASF的GLUADIN W20制备水解的小麦蛋白制品。使用Na2HPO4缓冲液(1.5mM)和CaCl2(2.5mM)将水解产物稀释至最终浓度。在中和至7.5的pH之后,过滤并离心溶液。随后将酸蚀的釉质块与包含在0.5重量%的浓度下的处理的水解小麦蛋白的溶液(2ml溶液/块)一起孵育60分钟。
在60分钟孵育时间段之后,将釉质块在人造唾液(AS)溶液(0.4g NaCl,0.4g KCl,0.8g CaCl2,0.69g NaH2PO4,1g脲,1升蒸馏水;pH 7(使用1M NaOH调整))孵育22小时。然后将釉质块使用水解蛋白溶液处理第二次,并且再次与人造唾液一起孵育22小时。然后将所述块使用去离子(DI)水冲洗并且进行空气干燥,之后测量其表面粗糙度。使用0.5%PBS处理的釉质块用作实验的阴性对照。结果示于表1中。%补充矿质代表相对于蚀刻的釉质的表面粗糙度(在处理和人造唾液孵育之前)的最终表面粗糙度(Sq)的%减少:
表1-表面粗糙度测定的结果
测试溶液 | 平均%补充矿质 | S.D. |
0.5%水解的小麦蛋白 | 14.58% | 5.43% |
PBS | -15.76% | 14.62% |
如表1指示的,水解的小麦蛋白在0.5重量%的浓度下在减少酸蚀的釉质块的表面粗糙度方面是有效的。
实施例2-纳米压痕
如实施例1所述制备釉质块。通过将釉质块放置在1%柠檬酸溶液(pH 3.8)中15分钟来实现酸蚀。在蚀刻之前和之后测量在500nm深度下的纳米硬度和杨氏模量。将蚀刻的釉质块与在0.5重量%的浓度下的水解的小麦蛋白(GLUADIN W20)的溶液一起孵育30分钟(2ml溶液/块),接着与如实施例1所述的AS溶液一起孵育22至24小时。将水解的小麦蛋白和AS孵育步骤重复另外两次,之后将釉质块使用DI水冲洗并且进行空气干燥。在500nm深度下测量处理的釉质块的纳米硬度和杨氏模量以评定水解的小麦蛋白的釉质修复作用。500ppm氟化物的溶液用作实验的阳性对照。结果示于表2和表3中。
表2-水解的小麦蛋白的修复功效-纳米硬度
测试 | 在500nm深度下的纳米硬度修复(%) |
水解的小麦蛋白 | 38.06 |
氟化物(对照) | 31.12 |
表3-水解的小麦蛋白的修复功效-杨氏模量
测试 | 在500nm深度下的杨氏模量修复(%) |
水解的小麦蛋白 | 52.52 |
氟化物(对照) | 48.50 |
如可在表2和表3中所见,水解的小麦蛋白在修复酸侵蚀的釉质方面是有效的。
实施例3-微硬度
如实施例1所述制备釉质块。使用具有努普金刚石压痕计和50g负荷的Micromet6020微硬度测试机(Buehler,Lake Bluff,IL,USA)测量微硬度。选择具有至少300努普硬度(KH)的块。通过浸没在30%磷酸中15秒来对所述块进行蚀刻。测量所述块的左侧和右侧上的KH。随后,将所述块的右侧用带覆盖,之后使用水解的小麦蛋白(来自BASF的GluadinW20)或水解的大米蛋白(来自BASF的GLUADINR)的20mg/ml溶液(各自如实施例1所述进行中和)处理所述块,进行两个30分钟的时间。(所述块的右手侧上的带防止此侧暴露于蛋白质溶液并且充当内部对照)。在两个处理之间并且在第二次处理之后在5分钟、500PRM下使用DI水洗涤所述块两次。随后,去除带并且将所述块在AS溶液(0.2mM MgCl2,1mM CaCl2.H2O,20mM HEPES缓冲液,4mM KH2PO4,16mM KCl,4.5mM NH4Cl,300ppm NaF,0.05重量%NaN3,在pH 7下(使用1M NaOH调整))中孵育7天。在使用DI水冲洗釉质块并且空气干燥冲洗块之后,再次测量微硬度。表面微硬度恢复(SMHL,补充矿质%)作为百分比计算为
微硬度测定的结果示于表4中。
表4-微硬度测定的结果
蛋白质 | %补充矿质(平均值) | S.D. |
2%水解的小麦蛋白 | 18.37% | 0.50% |
2%水解的大米蛋白 | 14.64% | 1.51% |
对照缓冲液 | 1.67% | 0.19% |
可从表4看出水解的小麦蛋白和水解的大米蛋白两者在对酸蚀刻的釉质块的釉质表面进行补充矿质方面均是有效的。需注意,对于所有的微硬度测试,来自右侧/内部对照侧(所述右侧/内部对照侧也浸没在人造唾液中并且具有来自人造唾液的一定修复)的补充矿质百分比从结果减去,使得数据呈现水解蛋白的差异作用。
然后将此实验延伸至测量水解的小麦蛋白和大米蛋白与氟化物对比和与氟化物组合的作用。
测试与氟化物(以NaF的形式提供)混合的水解产物的两个浓度(2重量%和0.2重量%),并且结果示出2重量%和0.2重量%的小麦水解产物(Gluadin W20,BASF)和大米水解产物(Gluadin R,BASF)两者均可增强氟化物修复。使用Na2HPO4缓冲液(1.5mM)和CaCl2(2.5mM)稀释水解产物。在中和至7.5的pH之后,过滤并离心溶液。将杀生物剂(CPC 0.1%)和氟化物(呈如表5所述的变化量)添加到滤液,并且如上所述实施微硬度测定。
与使用单独的氟化物处理的样品相比,使用水解产物+氟化物处理的蚀刻的釉质具有更高的补充矿质%。还使用甲胎蛋白(AFP)来运行测试,以用于与植物蛋白水解产物进行比较。
还测试0.2%水解产物w/不同剂量的氟化物的补充矿质%。在低浓度(0.2%)水解产物测试中,0.2重量%小麦水解产物+500ppm氟化物示出最好的结果。当氟化物水平升高至900ppm时,仅存在很少的改善。
表5-在微硬度测定中水解产物增强对于釉质修复的氟化物作用;
*测试在单独系列的实验中实施;数据集中以用于比较性目的。
实施例4-在牙腔模型中增强氟化物的抗牙腔作用
预筛选根据实施例1制备的牛釉质块,以选择具有(i)不含刮痕的釉质表面和(ii)KH>300的样本,从而如实施例3所述测量微硬度。然后使用如先前实施例所述制备的DI水(阴性对照)、500ppm F(阳性对照)和0.2%小麦水解产物(Gluadin W20)+500ppm F(测试材料)预处理所选的釉质块并且经受如下所述的4天循环。再次测量釉质块的微硬度作为最终(MH最终)。
预处理:如在实施例1中制备釉质块。将每个釉质块在乙醇中消毒两次,然后在无菌DI水中洗涤三次。然后将每个釉质块在4℃下在唾液上清液中预孵育过夜以在釉质表面上形成薄膜。
第二天至第五天-牙粉处理、脱矿质和补充矿质:从供体采集未刺激的全唾液,供体在早上避免进行进食和口腔卫生。集中唾液并且在8000rpm下离心10分钟。将所得的唾液上清液滗入到新无菌管中,并且在2∶1比率下(2份唾液上清液和1份TSB)与1.5%胰酶大豆肉汤(TSB)混合。使用无菌DI水洗涤沉淀物一次并且在8000rpm下离心10分钟。去除水上清液。然后将洗涤的沉淀物在唾液上清液TSB中稀释至OD(610nm)=0.5。将无菌蔗糖溶液添加至用于第一个实验的0.2%的最终浓度和用于第二个实验的0.4%的最终浓度(蔗糖的水平在第二个实验中增加以增加脱矿质水平)。此混合物代表反应混合物。此反应混合物充当脱矿质和补充矿质溶液,因为唾液沉淀物中的细菌将缓慢代谢蔗糖以产生酸
将釉质块转移到具有在特定孔中的2ml处理溶液(500ppm F或0.2%水解的小麦蛋白(Gluadin W20)+500ppm F)或阴性对照(DI水)的24孔板中。将板在室温下在100rpm下摇动10分钟。在处理之后,将釉质块使用无菌DI水洗涤两次。在洗涤之后,将釉质块转移到含有1ml的以上反应混合物/孔的新24孔板中,并且在37℃下孵育至少一小时。此处理和孵育过程在当天重复总计四次。在第4次处理之后,将釉质块留在反应混合物中,在37℃下孵育过夜。
以上程序重复总计四天(第二天至第五天)。在第五天结束时,将釉质块取出反应混合物,洗涤并且使其在台面上干燥。
评估:使用具有努普金刚石压痕计和25g负荷的Micromet 6020微硬度测试机(Buehler,Lake Bluff,IL,USA)评定机械特性的变化。在基线(确认的完好釉质)处并且在处理之后进行表面微硬度测量。将表面微硬度损失(SMHL,补充矿质%)作为百分比计算为(1-(微硬度最终/微硬度完好))*100。
实施例1-3示出水解的小麦蛋白可增强氟化物的釉质修复特性。此实验的结果示出水解的小麦蛋白加氟化物提供比单独的氟化物更高的抗牙腔功效。
使用以上所述的在体外抗牙腔模型中完成关于0.2%小麦水解产物(GluadinW20)+500ppm氟化物(提供为NaF)的两个研究(在0.2%和0.4%蔗糖的情况下)。
下表示出来自两个研究的结果。第一个研究使用用于唾液沉淀物中的细菌代谢并产生酸的0.2%蔗糖进行。第二个研究在相同的程序的情况下但是使用0.4%蔗糖进行。增加第二个实验中的蔗糖的水平,以便产生更多的酸,从而增加脱矿质的水平。来自两个实验的结果均示出与DI水相比,500ppm F具有更好的抗牙腔特性,但是当与0.2%小麦水解产物混合时,其抗牙腔特性进一步改善。
表5-水解的小麦蛋白与氟化物的抗牙腔/脱矿质保护
来自两个研究的结果均示出小麦水解产物+500ppm F比500ppmF或DI水具有更好的抗牙腔特性(即,更少的脱矿质)。
实施例5-氟化物的补充矿质和增强抗牙腔作用-临床研究
离体完成处理阶段。在完好的牛釉质块上进行初始微硬度(MH)测量(MH基线)。然后使用30%磷酸蚀刻所述块,直至在微硬度读数中存在相对于基线的40%变化为止。所述微硬度记录为蚀刻(等式1,MH蚀刻)。然后将每个蚀刻的釉质块浸没在如上所述制备的预处理的0.2%小麦水解产物(Gluadin W20)+500ppm F的2ml溶液或500ppm F的2ml溶液中,持续30分钟。在30分钟之后,将所述块使用DI水在500RPM下洗涤两次,持续5分钟,并且然后使用纸巾干燥。重复此处理循环。然后将所述块固定在保持器上的指定位置内以用于放置在受试者的口腔中。将六个釉质块放置在每个保持器中。保持器上的预冲孔允许唾液接触蚀刻的釉质并且提供用于补充矿质的矿物质。因此,每个受试者在研究过程中将在口腔中在保持器中具有六个釉质块(3个使用0.2%小麦水解产物+500ppm F处理,并且3个使用500ppm F处理作为对照)。处理釉质块和对照釉质块在保持器的左侧或右侧上随机化。然后将保持器保存在冷藏机中,直至研究第1天为止。
二十六个受试者包括在此随机化的盲性研究中。在一周洗刷时间段之后(其中小组成员使用抗牙腔牙膏(1100ppm fluoride)刷牙),给予受试者含有预处理釉质块的保持器。需要受试者佩戴保持器7天(24小时/天),同时在早上和晚上使用抗牙腔牙膏并且在每顿饭之后使用不含醇的口洗剂(100ppm氟化物)(持续总计多至3x/天)。还需要受试者每天夜里使用水冲洗保持器以避免蚀斑积聚。在7天之后,将釉质块从器具取出以进行最终微硬度测量(MH补充矿质)。脱矿质和补充矿质如下计算:
使用具有和不具有重量调整的双向ANOVA分析数据。小于0.05的p值用于指示统计学显著性。两个统计学分析均示出两个组之间的显著差异。以下结果示出在7天之后,与500ppm F对照组相比,针对0.2%小麦水解产物+500ppm F处理组测量到显著更大的补充矿质。
表6-原位临床结果
不具有相同字母的*平均值是显著不同的。
关于补充矿质功效临床研究的分析结果示出在两个处理循环(离体)和7天补充矿质(原位)之后,当与500ppm F对照比较时,使用0.2%小麦水解产物+500ppm F处理的釉质块表现出显著更好的补充矿质。
实施例6-漱口水制剂
此实施例探究小麦水解产物在促进补充矿质方面的令人意外的功效是否见于含有0.2%小麦水解产物和225ppm F的完全漱口水配方中。测试两种不同的处理方法:一次处理(持续7天)或重复处理(一次/天,持续7天)。结果示出小麦水解产物在一次处理和重复处理两者中均保持其补充矿质益处;并且小麦水解产物在重复处理中具有更好的修复功效。
制备测试漱口水和对照漱口水,包含以下成分:
切割牛牙齿,研磨并抛光以得到釉质块(大约3x3x2mm)。釉质厚度是1-2mm并且牙质厚度是~1mm厚。使用铅笔将釉质块标记为左侧(用于处理)和右侧(用作内部对照)。在釉质表面上的左侧和右侧两者上完成全部MH测量。
测量完好釉质的微硬度(努普硬度-KH,50g负荷)并且选择具有KH>300的块。然后使用30%磷酸蚀刻所述块15秒。将KH测量为蚀刻。
在每次处理之前,使用UPVC带覆盖每个块的右侧。所述块的右侧用作内部对照,所以仅将所述块的左侧暴露于处理。使用1ml指定的处理溶液(测试或对照漱口水)处理个体块1分钟。在1分钟处理完成之后,将所述块在500RPM下使用去离子水冲洗两次,持续5分钟,之后将其打开并且去除UPVC带。将所述块在无绒绵纸(Kimwipe)上进行空气干燥,并且然后在37℃下在15ml人造盐水(MgCl2 0.2mM,CaCl2·H2O 1mM,HEPES缓冲液20mM,KH2PO4 4mM,KCl 16mM,NH4Cl 4.5mM,NaF 300ppm,0.05重量%NaN3,pH=7.0,(使用1M NaOH调整))中孵育。因此将左侧暴露于处理,而仅将右侧在人造盐水中孵育。重新包装所述块的右侧,之后开始下一个处理。
评估四种不同的处理:
A-测试漱口水:处理并且然后在人造唾液中孵育过夜,重复7天。
B-对照漱口水:处理并且然后在人造唾液中孵育过夜,重复7天。
C-测试漱口水:处理(一次),并且然后在人造唾液中孵育,持续7天。
D-对照漱口水:处理(一次),并且然后在人造唾液中孵育,持续7天
在过夜孵育之后,将在处理A和B中使用的块从人造盐水中取出,使用DI水洗涤,空气干燥,并且将处理再重复6天。对于在C组和D组中的块,在初始处理之后不再进行另外的处理,但是每天补充新鲜唾液。在方案结束时,将所有的块取出,使用去离子水洗涤(在500rpm下洗涤两次,持续5分钟),空气干燥,并且然后保存以用于在完成处理/孵育时间段之后进行的最终测量。
测量微硬度并且使用以上等式1计算补充矿质百分比。通过从在左侧上观察到的百分比补充矿质减去在右侧上的内部对照中观察到的百分比补充矿质来计算通过使用测试相对于对照漱口水进行的处理提供的百分比补充矿质(即,处理的补充矿质%=左侧的补充矿质%-右侧的补充矿质%)。
每天处理一次、重复7天的块对于小麦漱口水具有大约15%补充矿质并且对于安慰剂漱口水具有8.5%补充矿质。仅处理一次的块对于小麦漱口水具有5.7%补充矿质并且对于安慰剂漱口水具有4.4%。这示出小麦水解产物在漱口水配方中保持其釉质修复益处;并且小麦水解产物在重复处理中显示更好的功效
虽然已说明并描述了本发明的特定实施方案,但是将对本领域技术人员显而易见的是,可在不背离如所附权利要求书中所限定的本发明范围的情况下进行各种变化和修改。
Claims (8)
1.部分水解的植物蛋白在制造用于修复或抑制牙侵蚀、促进牙补充矿质和/或增强氟化物的抗牙腔作用的口腔护理组合物中的用途,其中按所述组合物的总重量计,所述部分水解的植物蛋白以0.01重量%至3重量%的量存在于所述组合物中,并且其中所述部分水解植物蛋白选自部分水解的小麦蛋白、部分水解的大米蛋白以及其组合,其中所述部分水解的小麦蛋白是通过使用内切蛋白酶和外切蛋白酶酶促水解小麦蛋白获得的,其中所述部分水解的大米蛋白是通过使用内切蛋白酶和外切蛋白酶酶促水解大米蛋白获得的,并且其中所述部分水解的植物蛋白包含具有500D至10000D的分子量分布的低聚和多肽分子。
2.如权利要求1所述的用途,其中所述口腔护理组合物还包含有效量的氟化物。
3.如权利要求2所述的用途,其中氟化物的所述有效量是100-1500ppm。
4.如权利要求1所述的用途,其中按所述组合物的总重量计,所述部分水解的植物蛋白以0.1重量%至0.5重量%的量存在于所述组合物中。
5.如权利要求1所述的用途,其中所述组合物是牙膏、凝胶、口洗剂、片剂、牙齿粉末、或口香糖。
6.如权利要求1所述的用途,其中所述组合物是牙粉。
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