CN108593828A - 血浆制备卡中药物和毒物含量的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种检测血浆制备卡中至少一种目标药物或毒物含量的方法，包括步骤：从临床获得的血浆制备卡样品按一定步骤提取后，经超高效液相色谱仪‑四极杆飞行时间质谱仪分析，获得目标药物或毒物的保留时间以及高分辨一级和二级质谱图，与预设的分析物数据库匹配，确认药物或毒物种类；对于筛查阳性的药物毒物，建立适用于临床检测的标准曲线范围，运用超高效液相色谱仪‑三重四极杆质谱技术，定量血浆卡中药物或毒物的浓度；该浓度经公式转换后获得对应的血浆浓度，为临床医生提供疾病的辅助诊断。本发明的检测方法，较全血斑法排除了全血基质的干扰以及血细胞压积的影响，检测结果更为准确，具有较高的灵敏度和分辨率。

Description

血浆制备卡中药物和毒物含量的检测方法
技术领域
本发明涉及一种化合物检测方法，尤其涉及一种血浆制备卡中药物和毒物含量的检测方法。
背景技术
近几十年，每年的药物、农药、无机物、重金属等有毒物质中毒在全球范围内呈上升趋势，中毒死亡人数不断增加。根据我国原卫生部第三次全国死因调查结果显示，损伤与中毒是我国居民第五大死亡原因，死亡人数占总死亡人数的10.7％，仅职业中毒患者就达370万人，且以每年100万人次的速度递增。我国急诊中毒病例中常见的中毒物质有药物、农药、鼠药、毒品、一氧化碳、酒精、重金属等，其中药物中毒以安眠类药物、解热镇痛类药物等为主，而农药中毒则以百草枯等除草剂、有机磷农药、杀虫剂等为主。
目前通常医院急诊中应对中毒事件的主要方法是由临床医生根据诊治经验、患者临床症状及实验室检查、家属询问等方式判断可疑毒物的种类，并采取对症治疗的方式实施解救，由于缺乏快速和全面的毒物分析方法，对疑似中毒患者，临床医生经常难以采取针对性的解救措施，因此，毒物的快速筛查是临床救治中毒患者的首要和关键环节。
传统的药物、毒物分析以单个或少量毒物为检测对象，检测方法繁多，处理过程复杂，难于实现快速诊断。对于血液中药物、毒品等成分的含量的检测，目前最多的是尿液，而尿检的不足之处在于只能反映采样前1-3天的药物摄入情况，比较容易造假，另外，由于尿样检测的敏感度高，其带来的假阳性问题也是要考虑的。而血液中药品、毒品及其代谢物的浓度较高，利用血液的测定，可以较为真实地反映被检测者身体受损害程度。采用快速、准确的药物、毒物筛查和定量技术，开展急诊疑似中毒患者的样本检测，同时对中毒患者体内毒物浓度及消除过程进行监测，可为临床快速诊断和救治这类患者提供重要的依据，故毒物分析在急诊医学领域具有非常重要的意义。
然而，中毒样本有分散广、储存和运输困难、样本稳定性差等特点，并且血液成分分析主要在液态样本中进行，通常需要的血液样本量大约为1-3mL，被检测者必须抽取静脉血，需血量较大，并且血清的运输保存都有严格的要求，采血也需要专业的医护人员，尤其对于偏远地区的人来说检测非常不方便。
为了便于运输和更长时间的保存，液体可以在合适的载体上进行干燥，例如，干血纸片法(亦称为干血斑法，DBS)是最小血液取样技术，滴加至少一个小血滴到纸载体上，送入实验室检测之前，血斑可在室温下风干几个小时，但是经过后续萃取分离等步骤后，干血斑中的分析物分布可能受到一些因素的影响，例如，血斑大小、红细胞压积水平和扩散性质(色层效应)，样品制备和随后的分析仍然是基本问题，大大限制了干血斑分析领域的应用。
NoviplexTM血浆制备卡是最新的一种血浆采集方式，其允许在25-125μL不同体积的血液中提取固定体积的全血，在几分钟内去除红细胞，完成一两滴血的血浆制备，15分钟内干燥完毕，其无需离心、无需冷冻保存，没有生物危害。
应用血浆制备卡检测药物毒物是一种理想的方法，相对于干血纸片法，血浆制备卡检测方法无需进行血浆和全血浓度的转换，也排除了更为复杂的全血基质的干扰，更提高了定量检测的准确度(干血纸片法由受到血细胞压积的影响，不同人样本变异较大)。结合高灵敏度和选择性的液相色谱串联质谱技术，只需根据化合物特征和检测方法需求选择合适血浆制备卡的提取溶剂，制定标准操作规程，即可快速、准确的检测血浆中的药物或毒物。
有鉴于此，需要一种采集方便、易于运输、储存稳定、检测准确的方法应用于临床，尤其亟需一种简单、快速且可靠的利用血浆制备卡检测血液中药物和毒物含量的检测方法，消除血细胞干扰的同时具有较高的灵敏度和分辨率，以消除现有技术中的上述缺陷和不足，是业内相关技术人员亟待解决的一项课题。
发明内容
为了克服现有技术中无法快速、准确、稳定地检测血液中常见药物或毒物浓度的技术问题，本发明提供了一种血浆制备卡中药物和毒物含量的检测方法。
本发明提供一种检测血浆制备卡中200多种临床上常见药物和毒物含量的方法，检测的物质包含了镇静催眠类药物、精神治疗药物、镇痛剂与麻醉品、农药与杀鼠药、其它治疗药物及毒物等几大类。含药物和毒物的血浆制备卡中加入内标工作液和提取剂，经液相色谱串联质谱法分析，所得分析物的浓度经换算因子转换后得到其对应的血浆浓度。本方法可解决全血样本的运输和分析物的不稳定问题，实现不同来源血浆样本中药物和毒物的精准定量。
为了实现上述发明目的，本发明公开了一种检测血浆制备卡中至少一种目标药物或毒物含量的方法，包括步骤：
S01：提供一血浆制备卡样本，加入内标工作液和提取剂，振荡离心后取上清液，获得进样溶液，将所述进样溶液注入超高效液相色谱仪，再经四极杆飞行时间质谱仪分析，获得目标药物或毒物的保留时间和高分辨质谱一级和二级特征谱，与预设的数据库匹配，确认目标药物或毒物的种类；
S02：建立已知浓度梯度的目标药物或毒物的标准曲线，所述标准曲线的建立包括步骤：
(1)提供所需质量的药物或毒物的标准品，加入体积比浓度为10-50％的甲醇、丙酮或乙腈-水溶液，获得浓度为10μg/mL的标准品储备液，置于-20℃储存；
(2)取所述标准品储备液，连续稀释后获得已知浓度梯度的目标药物或毒物的标准曲线工作液，向每个浓度梯度的目标药物或毒物工作液中添加空白基质，混合均匀制得血浆制备卡标准曲线样品；
(3)提供所需质量的卡马西平-d8和水杨酸-d4，加入甲醇溶解，配制成浓度为1μg/mL的混合内标工作液；
(4)在标准曲线样品中加入内标工作液和提取剂，振荡离心后取上清液，制得标准曲线进样溶液，采用三重四极杆质谱的多反应监测模式，根据母离子与特征碎片离子，测定标准曲线样品中各目标药物或毒物以及卡马西平-d8和水杨酸-d4的保留时间和色谱峰面积，以目标药物和毒物的理论浓度为横坐标，以测得的目标药物和毒物与卡马西平-d8和/或水杨酸-d4的色谱峰面积比值为纵坐标拟合出标准曲线；
S03：将S01制备的进样溶液进行定量测定，用S02所述方法记录目标药物或毒物与卡马西平-d8和水杨酸-d4的保留时间和色谱峰面积，计算目标药物和毒物与卡马西平-d8和/或水杨酸-d4的色谱峰面积比值，通过S02所得的标准曲线计算血浆卡样本中的药物或毒物浓度；
S04：通过换算因子计算得到血浆中药物或毒物的浓度。
在另一优选例中，所述换算因子的测定方法包括步骤：
(a)提供无特定药物或毒物的健康人空白全血，添加标准曲线工作液，制备含一定药物和毒物浓度的全血样本，用该全血样本制备血浆卡，按照所述步骤S01、S02和S03测定血浆卡中药物和毒物的浓度；
(b)将(a)中制备的全血样本离心后获得血浆，另取健康人空白血浆制作已知浓度梯度的血浆标准曲线，采用三重四极杆质谱的多反应监测模式定量该血浆样本中药物和毒物的浓度；
(c)根据以下公式计算换算因子：换算因子＝血浆制备卡样本中药物或毒物浓度/血浆中药物或毒物浓度。
在另一优选例中，所述空白基质的制备方法包括步骤：提供一不含所述目标药物或毒物的健康人全血制备的血浆卡，加入提取剂后，制得上清液作为空白基质。
在另一优选例中，所述提取剂按照如下方法制备：
(i)制备流动相A：提供2mL甲酸、4mL 5M乙酸铵水溶液、100mL有机相D和894mL水，制得流动相A，其中，有机相D为187.5mL异丙醇和812.5mL乙腈的混合物；
(ii)制备流动相B：提供2mL甲酸、4mL 5M乙酸铵水溶液、850mL有机相D和144mL水，制得流动相B；
(iii)取流动相A和流动相B按照5:5或1:9或9:1混匀，制得所述提取剂。
在另一优选例中，所述血浆制备卡样本吸收血浆的体积为2.0μL-30μL，较佳地，所述血浆制备卡样本吸收血浆的体积为2.5μL。
在另一优选例中，所述血浆制备卡包括至少一个血浆收集区域。
在另一优选例中，所述步骤S01中，所述标准曲线工作液与空白基质的体积比为1:9。
在另一优选例中，所述步骤S01中，所述标准曲线工作液与所述内标工作液的体积比为15:1。
在另一优选例中，所述药物和毒物选自下组：镇静催眠类、精神治疗类、镇痛剂与麻醉品或农药与杀鼠药。
在另一优选例中，所述镇静催眠类选自下组：唑吡坦、苯海拉明、地西泮、硝西泮、奥沙西泮、氯硝西泮、三唑仑、佐匹克隆、艾司唑仑、劳拉西泮、咪达唑仑、阿普唑仑、替马西泮、去甲西泮、7-氨基氟硝西泮、7-氨基氯硝西泮、氟硝西泮、α-羟基阿普唑仑、α-羟基咪达唑仑、α-羟基三唑仑、异戊巴比妥、阿普比妥、仲丁比妥、司可巴比妥、苯妥英钠、巴比妥、戊巴比妥、苯巴比妥、2-硫代巴比妥酸；
所述精神治疗类选自下组：扑米酮、拉莫三嗪/利必通、美利曲辛(黛力新)、奥氮平、舍曲林、米氮平、文拉法辛、多塞平、利培酮、阿立哌唑、加巴喷丁、氯氮平、帕罗西汀、舒必利、氟哌啶醇、奋乃静、氟西汀、苯海索、阿米替林、齐拉西酮、氯普噻吨(泰尔登)、西酞普兰、曲唑酮、喹硫平、丁螺环酮、氯丙嗪、丙咪嗪(托弗尼尔)、苯丙醇胺、马普替林(路滴美)；
所述镇痛剂与麻醉品选自下组：利多卡因、布比卡因、普鲁卡因、罗哌卡因、丁卡因、哌替啶/杜冷丁、可待因、美沙酮、纳洛酮、氢化吗啡、羟考酮、罂粟碱、曲马多、对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林、丁丙诺啡、布桂嗪、氢吗啡酮、吲哚美辛、麻黄碱、布洛芬、双氯芬酸钠、氨基比林、去甲丁丙诺啡、乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、乙酰可待因、蒂巴因、右丙氧芬、辛可尼丁、那可丁、乙基吗啡、O3-单乙酰吗啡、O6-单乙酰吗啡、芬太尼、海洛因、氯胺酮、可卡因、去甲氯胺酮、尼美西泮、7-氨基尼美、苯丙胺/安非他命、甲卡西酮、爱康宁、爱康宁甲酯、苯甲酰爱康宁、甲基苯丙胺/冰毒、3,4-亚甲基二氧基苯丙胺、3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺/摇头丸、1-(3,4-亚甲二氧基苯)-2-丁胺、N-甲基-1-(3,4-亚甲二氧基苯)-2-丁胺、3,4-亚甲二氧基-N-乙基-苯丙胺、尼古丁/烟碱、吗啡；和
所述农药与杀鼠药选自下组：敌稗、克百威、敌敌畏,DDVP、久效磷、乐果、灭线磷、敌百虫、甲拌磷、特丁硫磷、异稻瘟净、对硫磷、辛硫磷、杀扑磷、二嗪农、甲胺磷、灭多威、速灭威、乙酰甲胺磷、异丙威、甲萘威/西维因、异丙隆、氧乐果、莠去津/阿特拉津、甲基对硫磷/甲基1605、乙草胺、甲草胺、稻丰散、治螟磷、马拉硫磷、胺菊酯、毒死蜱、伏杀磷、甲磺隆、苯磺隆、苄嘧磺隆、阿维菌素、甲氨基阿维菌素、杀螟松、百草枯、草甘膦、敌鼠钠、杀鼠醚、溴敌隆、溴鼠灵、毒鼠强、氟乙酸盐。
在另一优选例中，所述药物和毒物还包括：阿托品、昂丹司琼、艾司洛尔、比索洛尔、洛贝林、硝苯地平、氨溴索、哌唑嗪、尼索地平、地塞米松、福尔可定、氨氯地平、尼可刹米、乙胺丁醇、异丙嗪、尼莫地平、多潘立酮、西地那非、特布他林、西米替丁、拉贝洛尔、法莫替丁、阿曲库铵、尼群地平、金刚烷胺、加兰他敏、克仑特罗、酚妥拉明、山莨菪碱、氯苯那敏、右美沙芬、氯霉素、雌二醇、氢氯噻嗪、曲安奈德、可乐定、东莨菪碱、芬氟拉明、沙丁胺醇、洋地黄毒苷。
与现有技术相比较，本发明所提供的技术方案具有以下优点：
1.本发明的方法采用血浆制备卡作为采血方式，无需离心、无需冷冻保存，易于运输，并且排除了全血基质的干扰，检测结果更为准确，具有较高的灵敏度和分辨率。
2.结合高灵敏度和选择性的液相色谱串联质谱技术，本发明的方法只需根据化合物特征和检测方法需求选择合适血浆制备卡的提取溶剂，制定标准操作规程，即可快速、准确的检测血浆中的药物或毒物。
附图说明
关于本发明的优点与精神可以通过以下的发明详述及所附图得到进一步的了解。
图1(a)-图1(c)显示了药物毒物高分辨鉴定流程；
图2显示了唑吡坦血浆卡的标准曲线；
图3显示了唑吡坦的色谱图；
图4显示了内标色谱图。
具体实施方式
下面结合附图详细说明本发明的具体实施例。然而，应当将本发明理解成并不局限于以下描述的这种实施方式，并且本发明的技术理念可以与其他公知技术或功能与那些公知技术相同的其他技术组合实施。
在以下具体实施例的说明中，为了清楚展示本发明的结构及工作方式，将借助诸多方向性词语进行描述，但是应当将“前”、“后”、“左”、“右”、“外”、“内”、“向外”、“向内”、“轴向”、“径向”等词语理解为方便用语，而不应当理解为限定性词语。
在以下具体实施例的说明中，需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不理解为对本发明的限制。
此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或隐含地包括一个或多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的规定。
在本发明中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接连接，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
本发明中，所述内标包括但不限于卡马西平-d8或水杨酸-d4。
原料与制备
本发明方法中，采用的原料及制备方法如下表1所示：
表1 原料及制备方法
超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF MS)：具有高通量、高分辨率、高质量准确度、高灵敏度的特点，适用于检测未知物质，可以有效区分质荷比(m/z)较为接近的干扰物，用信息依赖性扫描(Information dependent acquisition，IDA)模式，一次进样分析不仅可以获得准确的一级质谱信息，而且可以同时获得检出物质的MS/MS精确质量质谱图，通过搜索标准质谱库进行匹配，完成对药物或毒物的准确定性。
预设的分析物数据库：采用本领域通用的标准质谱库的建库方法，本领域技术人员可根据被检测物、仪器条件等进行调整，本发明不做特别限制。
药物和毒物：本发明所指的待检测的“药物和毒物”指临床上常见的中毒物质，例如药物、农药、鼠药、毒品、酒精、重金属等，所列举的药物或毒物分类仅为示例性说明。本领域技术人员可以根据临床检测的需求按照本发明所述方法对引起患者中毒的物质进行定性定量检测。
本发明中，所述血浆制备卡、血浆制备卡、NoviplexTM采样卡、血浆采集卡、血浆收集卡具有相同含义，可替换使用。本文所述的血浆制备卡可包括至少一个(即一个或一个以上的)血浆收集区域，指的是，采集血液时，用户可根据血浆用量，选择不同规格的血浆制备卡(主要区别在于中间层吸收的血浆体积不同，较大体积的血浆可由多个血浆收集区共同采集后合并得到，也可由较大体积的一个血浆收集区单独采集后得到)，只需将血液滴到血浆卡设置的固定采集区域，即可获得某一规格相对应的血浆体积。
实施例一：
本发明的方法采用高效液相色谱-串联质谱检测技术检测临床疑似中毒样本中可疑的药物或毒物。从临床采集的血浆制备卡样本中加入适量的提取剂和内标工作液，经振荡、离心后取上清液进样分析。处理后的样本经色谱分离后，用四极杆飞行时间质谱全扫描触发信息依赖检索(IDA)的方法进行检测，通过与已建立的预设的分析物数据库中各项信息进行匹配度筛查，确定药物或毒物种类；应用三重四极杆质谱的多反应监测模式(MRM)根据母离子与特征碎片离子确定血浆样本中疑似药物或毒物的浓度。记录每个药物或毒物与其对应内标的峰面积，用内标法根据标准曲线计算血浆制备卡样本中的药物或毒物浓度，再通过换算因子换算得到用户血浆中的药物或毒物浓度。
一、样本采集
本实施例中，采用市售的血浆制备卡NoviplexTM为采样卡(该血浆采集卡吸收血浆的理论体积为2.5μL)。采样前用酒精棉球擦拭任意一只手的无名指，待酒精风干后，用消毒采血针在指垫中心以外进行皮肤穿刺，拭去第一滴血后将第二滴血滴到血浆制备卡的收集区域，待旁边的控制点(Control Spot)变红表示滴加成功，3min后弃去上层纸片，室温放置15min等待中间血浆层干燥，干燥后取中间层的圆卡片于包装袋中封存(也可使用其它外周静脉采集的全血样本直接滴于血浆制备卡收集区域，制备血浆卡)。
样本运输和保存：室温运输和保存。
二、样本预处理
2.1药物/毒物储备液、药物/毒物工作液、血浆制备卡标准曲线样品、内标工作液的制备
药物/毒物储备液配制方法：分别精密称量适量药物/毒物标准品(市售，纯度≥95％)，用甲醇溶解成一定浓度的储备液置于-80℃保存。
药物/毒物工作液配制方法：取一定体积(一般大于50μL)的药物/毒物储备液10μg/mL，用50％的甲醇水溶液配制成浓度为1000ng/mL的工作液，并依次稀释为500、200、50、20、10ng/mL，放置于-20℃保存待用。
血浆制备卡对照品配制方法：分别取15μL上述药物/毒物标准曲线工作液，加入135μL空白基质，混匀后即得血浆制备卡标准曲线样品，制备成浓度为1、2、5、20、50、100ng/mL，待用。
内标工作液配制方法：精密称量适量卡马西平-d8和水杨酸-d4，用甲醇溶解成一定浓度的储备液，再用50％的甲醇水溶液配制成浓度为1μg/mL的内标工作液，置于-20℃储存，临用时取出，放至室温后使用。如图4所示，显示了内标工作液的色谱图。
2.2标准曲线样品的处理
根据检测要求对血浆制备卡样本进行分类后选择合适的药物/毒物工作液，并按2.1方法配制血浆制备卡标准曲线样品，每个标准曲线点取150μL，分别添加10μL内标工作液，振荡混匀后离心5分钟(15000g，4℃)，取上清液进样10μL分析。选择100ng/mL标准曲线样品作为定性方法的阳性对照；制作标准曲线后处理、进样并进行定量。以唑吡坦为例，图2显示了唑吡坦血浆卡的标准曲线。
方法验证时需同时测定血浆中的药物/毒物浓度，并制作血浆标准曲线，其浓度为：10、20、50、200、500、1000ng/mL，具体制作和处理方法如下：取50μL 2.1配制的药物/毒物工作液，加入50μL健康人空白血浆，混匀后加入10μL内标工作液，添加150μL甲醇，振荡5分钟，离心5分钟(15000g，4℃)，再用蒸馏水稀释5倍后进样10μL。
2.3待测血浆制备卡样本的处理
取待测的血浆制备卡的中间层的圆卡片放置在1.5mL离心管中，添加150μL提取剂和10μL内标工作液，震荡5min(3200rpm)，离心5min(15000g，4℃)后取上清液，进样10μL分析。
三、待检测药物/毒物的定性检测
3.1本发明的方法中，采用超高效液相色谱仪-四极杆飞行时间质谱仪分析，获得血浆制备卡样本的液相色谱质谱图，与预设的分析物数据库匹配，定性确定药物或毒物种类。如图1(a)-图1(c)所示，为药物毒物高分辨鉴定流程；在未知样品中筛查可疑的药物毒物，根据发现的药物毒物的保留时间、高分辨一级质谱图及其同位素分布、二级碎片谱图与数据库中的已知毒物的匹配度鉴定药物毒物的种类。
液相色谱仪分离条件如下表2所示：
表2 液相色谱仪分离条件
四极杆飞行时间质谱仪分离条件如表3所示：
表3 四极杆飞行时间质谱仪分离条件
四、待检测药物/毒物的定量检测
本发明方法中所用的三重四极杆质谱定量检测条件如下表4所示：
表4 三重四极杆质谱仪分离条件
如图3所示，以唑吡坦为例，显示了唑吡坦的色谱图。
五、方法学验证及结果
5.1检出限
考察血浆制备卡样本中待检测的药物/毒物在四极杆飞行时间质谱仪上的检出限，以表5中各药物或毒物的结果为例。
表5 检出限结果
5.2标准曲线范围
考察血浆制备卡样本中待检测的药物/毒物在三重四极杆质谱上可线性定量的范围，该范围至少经过三次重复测试后确定，相关系数≥0.98，以表6中各药物或毒物的结果为例。
表6 可线性定量的范围
5.3准确度和精密度
按照如下方法配制含低浓度或高浓度药物或毒物的全血1mL：取10μL低、高两个浓度的药物/毒物工作液于1.5mL离心管中，40℃吹干后用1mL EDTA抗凝的空白全血溶解，配制成低、高两个浓度的全血样品，按照样品采集方法制作血浆制备卡样本，每个分析物至少各制作6片。剩余全血经3000g离心10min后取50μL血浆待测。
血浆制备卡样本按2.3的方法处理后用标准曲线法测定其中的药物、毒物的浓度。50μL血浆中加入50μL的50％甲醇后按2.3的方法处理，并制作标准曲线测定其中的药物或毒物浓度。将血浆制备卡样本中的药物或毒物经换算因子换算后所得的浓度与对应的血浆浓度进行比较，计算准确度，准确度至少在85～115％之间；测定同一个浓度制作的6片血浆制备卡样本中的分析物浓度，计算精密度，精密度至少不大于±15％，以表7中各药物或毒物的结果为例。
表7 准确度和精密度
可以看出，利用本发明方法测得分析物浓度的准确度和精密度都很高，完全符合美国FDA以及中国CFDA关于药物分析检测的准确度(85％-115％)和精密度(<15％)的要求。
5.4回收率
考察血浆制备卡经提取后待检测的药物/毒物在卡片上的回收率，具体测定方法为：用EDTA抗凝的血浆配制含一定浓度待检测的药物/毒物的血浆样品，取5μL样品直接滴加到血浆制备卡中间层上，干燥15min后将血浆制备卡中间层放置在1.5mL离心管中，添加150μL提取剂和10μL内标工作液，震荡5min(3200rpm)，离心5min(15000g，4℃)后取上清液，进样10μL分析；另用提取剂配制与血浆制备卡样本浓度一致的化学品，按与血浆制备卡样本相同的方法处理后进样分析。回收率用血浆制备卡样本峰面积与化学品峰面积比值表示(％)，以表8中各药物或毒物的结果为例。
表8 回收率
血浆制备卡能实时分离血细胞和血浆，使血浆中的活性成分被固化并保持稳定，减少活性成分的增加或分解，处于干血浆状态，而非液态，其稳定性大大优于液态血浆。并且，本发明选择的提取剂可以更好地从血浆卡中提取大部分常见的药物和毒物。
六、换算因子
6.1换算因子的测定
血浆制备卡样本检测得到的药物、毒物直接浓度并不等同于人血浆浓度，必须经过换算因子的换算。每个化合物的换算因子与其透过渗透膜的效率、从血浆制备卡的回收率和血细胞压积值(HCT)有关。通过分别测定同一个样本的血浆制备卡和血浆样品中分析物的浓度可计算某一分析物的换算因子。
具体方法为：采集6名健康志愿者的全血样品，按5.3的方法制作含一定浓度的血浆制备卡与血浆样品。并用标准曲线法各自测定每个样品中的分析物浓度，换算因子(VF)＝血浆制备卡浓度/血浆浓度。以表9中各药物或毒物的体积因子结果为例。
表9 体积因子
血浆渗透过时，滤膜时全血的血细胞压积值(HCT)仍可能影响血浆渗透的体积，从而改变某个分析物的换算因子，因此需考察HCT对换算因子的影响。
考察方法为：按5.3方法分别制作含一定浓度的6个人的全血样品(6mL)，测定这6个样品的HCT值(sysmex500i)。将全血轻轻混匀后分装成12管，每管400μL，3000g离心10min，其中1管分离出血浆后待测，剩余管用于调配不同HCT值的样品。方法为：根据HCT值计算400μL全血中的红细胞体积和血浆体积，用血浆加减法配制20％、30％、40％、50％、60％、70％HCT值的全血样品(每个HCT值样品需转移的血浆体积＝红细胞体积/目标HCT值-红细胞体积-血浆体积)。
上述样品配制完成后重新混匀，按照2.3方法制作血浆制备卡，不同HCT值的血浆制备卡以及血浆样品分别测定其中的分析物浓度，按上述方法计算换算因子。一般认为换算因子对分析物浓度的影响不应超出±15％，以表10中各药物或毒物的可接受HCT(％)范围为例。
表10 可接受HCT(％)范围
根据以下公式换算得到血浆浓度：血浆浓度＝血浆制备卡浓度÷换算因子(VF)。
如无特别说明，本文中出现的类似于“第一”、“第二”的限定语并非是指对时间顺序、数量、或者重要性的限定，而仅仅是为了将本技术方案中的一个技术特征与另一个技术特征相区分。同样地，本文中出现的类似于“一”的限定语并非是指对数量的限定，而是描述在前文中未曾出现的技术特征。同样地，本文中在数词前出现的类似于“大约”、“近似地”的修饰语通常包含本数，并且其具体的含义应当结合上下文意理解。同样地，除非是有特定的数量量词修饰的名词，否则在本文中应当视作即包含单数形式又包含复数形式，在该技术方案中即可以包括单数个该技术特征，也可以包括复数个该技术特征。本说明书中所述的只是本发明的较佳具体实施例，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明的限制。凡本领域技术人员依本发明的构思通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在本发明的范围之内。

Claims (11)

1.一种检测血浆制备卡中至少一种目标药物或毒物含量的方法，包括步骤：
S01：提供一血浆制备卡样本，加入内标工作液和提取剂，振荡离心后取上清液，获得进样溶液，将所述进样溶液注入超高效液相色谱仪，经四极杆飞行时间质谱仪分析，获得目标药物或毒物的保留时间和高分辨质谱一级和二级特征谱，与预设的数据库匹配，确认目标药物或毒物的种类；
S02：建立已知浓度梯度的目标药物或毒物的标准曲线，所述标准曲线的建立包括步骤：
(1)提供所需质量的药物或毒物的标准品，加入体积比浓度为10-50％的甲醇、丙酮或乙腈-水溶液，获得浓度为10μg/mL的标准品储备液，置于-20℃储存；
(2)取所述标准品储备液，连续稀释后获得已知浓度梯度的目标药物或毒物的标准曲线工作液，向每个浓度梯度的目标药物或毒物工作液中添加空白基质，混合均匀制得血浆制备卡标准曲线样品；
(3)提供所需质量的卡马西平-d8和水杨酸-d4，加入甲醇溶解，配制成浓度为1μg/mL的混合内标工作液；
(4)在标准曲线样品中加入内标工作液和提取剂，振荡离心后取上清液，制得标准曲线进样溶液，采用三重四极杆质谱的多反应监测模式，根据母离子与特征碎片离子，测定标准曲线样品中各目标药物或毒物以及卡马西平-d8和水杨酸-d4的保留时间和色谱峰面积，以目标药物和毒物的理论浓度为横坐标，以测得的目标药物和毒物与卡马西平-d8和/或水杨酸-d4的色谱峰面积比值为纵坐标拟合出标准曲线；
S03：将S01制备的进样溶液进行定量测定，用S02所述方法记录目标药物或毒物与卡马西平-d8和水杨酸-d4的保留时间和色谱峰面积，计算目标药物和毒物与卡马西平-d8和/或水杨酸-d4的色谱峰面积比值，通过S02所得的标准曲线计算血浆卡样本中的药物或毒物浓度；
S04：通过换算因子计算得到血浆中药物或毒物的浓度。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述换算因子的测定方法包括步骤：
(a)提供无特定药物或毒物的健康人空白全血，添加标准曲线工作液，制备含一定药物和毒物浓度的全血样本，用该全血样本制备血浆卡，按照所述步骤S01、S02和S03测定血浆卡中药物和毒物的浓度；
(b)将(a)中制备的全血样本离心后获得血浆，另取健康人空白血浆制作已知浓度梯度的血浆标准曲线，采用三重四极杆质谱的多反应监测模式定量该血浆样本中药物和毒物的浓度；
(c)根据以下公式计算换算因子：换算因子＝血浆制备卡样本中药物或毒物浓度/血浆中药物或毒物浓度。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述空白基质的制备方法包括步骤：提供一不含所述目标药物或毒物的健康人全血制备的血浆卡，加入提取剂后，制得上清液作为空白基质。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取剂按照如下方法制备：
(i)制备流动相A：提供2mL甲酸、4mL 5M乙酸铵水溶液、100mL有机相D和894mL水，制得流动相A，其中，有机相D为187.5mL异丙醇和812.5mL乙腈的混合物；
(ii)制备流动相B：提供2mL甲酸、4mL 5M乙酸铵水溶液、850mL有机相D和144mL水，制得流动相B；
(iii)取流动相A和流动相B按照5:5或1:9或9:1混匀，制得所述提取剂。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述血浆制备卡样本吸收血浆的体积为2.0μL-30μL。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述血浆制备卡包括至少一个血浆收集区域。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S01中，所述标准曲线工作液与空白基质的体积比为1:9。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S01中，所述标准曲线工作液与所述内标工作液的体积比为15:1。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述药物和毒物选自下组：镇静催眠类、精神治疗类、镇痛剂与麻醉品或农药与杀鼠药。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，
所述镇静催眠类选自下组：唑吡坦、苯海拉明、地西泮、硝西泮、奥沙西泮、氯硝西泮、三唑仑、佐匹克隆、艾司唑仑、劳拉西泮、咪达唑仑、阿普唑仑、替马西泮、去甲西泮、7-氨基氟硝西泮、7-氨基氯硝西泮、氟硝西泮、α-羟基阿普唑仑、α-羟基咪达唑仑、α-羟基三唑仑、异戊巴比妥、阿普比妥、仲丁比妥、司可巴比妥、苯妥英钠、巴比妥、戊巴比妥、苯巴比妥、2-硫代巴比妥酸；
所述精神治疗类选自下组：扑米酮、拉莫三嗪/利必通、美利曲辛(黛力新)、奥氮平、舍曲林、米氮平、文拉法辛、多塞平、利培酮、阿立哌唑、加巴喷丁、氯氮平、帕罗西汀、舒必利、氟哌啶醇、奋乃静、氟西汀、苯海索、阿米替林、齐拉西酮、氯普噻吨(泰尔登)、西酞普兰、曲唑酮、喹硫平、丁螺环酮、氯丙嗪、丙咪嗪(托弗尼尔)、苯丙醇胺、马普替林(路滴美)；
所述镇痛剂与麻醉品选自下组：利多卡因、布比卡因、普鲁卡因、罗哌卡因、丁卡因、哌替啶/杜冷丁、可待因、美沙酮、纳洛酮、氢化吗啡、羟考酮、罂粟碱、曲马多、对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林、丁丙诺啡、布桂嗪、氢吗啡酮、吲哚美辛、麻黄碱、布洛芬、双氯芬酸钠、氨基比林、去甲丁丙诺啡、乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、乙酰可待因、蒂巴因、右丙氧芬、辛可尼丁、那可丁、乙基吗啡、O3-单乙酰吗啡、O6-单乙酰吗啡、芬太尼、海洛因、氯胺酮、可卡因、去甲氯胺酮、尼美西泮、7-氨基尼美、苯丙胺/安非他命、甲卡西酮、爱康宁、爱康宁甲酯、苯甲酰爱康宁、甲基苯丙胺/冰毒、3,4-亚甲基二氧基苯丙胺、3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺/摇头丸、1-(3,4-亚甲二氧基苯)-2-丁胺、N-甲基-1-(3,4-亚甲二氧基苯)-2-丁胺、3,4-亚甲二氧基-N-乙基-苯丙胺、尼古丁/烟碱、吗啡；和
所述农药与杀鼠药选自下组：敌稗、克百威、敌敌畏,DDVP、久效磷、乐果、灭线磷、敌百虫、甲拌磷、特丁硫磷、异稻瘟净、对硫磷、辛硫磷、杀扑磷、二嗪农、甲胺磷、灭多威、速灭威、乙酰甲胺磷、异丙威、甲萘威/西维因、异丙隆、氧乐果、莠去津/阿特拉津、甲基对硫磷/甲基1605、乙草胺、甲草胺、稻丰散、治螟磷、马拉硫磷、胺菊酯、毒死蜱、伏杀磷、甲磺隆、苯磺隆、苄嘧磺隆、阿维菌素、甲氨基阿维菌素、杀螟松、百草枯、草甘膦、敌鼠钠、杀鼠醚、溴敌隆、溴鼠灵、毒鼠强、氟乙酸盐。
11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述药物和毒物还包括：阿托品、昂丹司琼、艾司洛尔、比索洛尔、洛贝林、硝苯地平、氨溴索、哌唑嗪、尼索地平、地塞米松、福尔可定、氨氯地平、尼可刹米、乙胺丁醇、异丙嗪、尼莫地平、多潘立酮、西地那非、特布他林、西米替丁、拉贝洛尔、法莫替丁、阿曲库铵、尼群地平、金刚烷胺、加兰他敏、克仑特罗、酚妥拉明、山莨菪碱、氯苯那敏、右美沙芬、氯霉素、雌二醇、氢氯噻嗪、曲安奈德、可乐定、东莨菪碱、芬氟拉明、沙丁胺醇、洋地黄毒苷。
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Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109541108A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法
CN109613126A (zh) * 2018-11-01 2019-04-12 中国环境科学研究院 一种鱼体中非法药物及其代谢产物的测定方法
CN109633048A (zh) * 2019-02-27 2019-04-16 梧州市食品药品检验所 一种动物体内颠茄生物碱的快速检测方法
CN109668985A (zh) * 2019-02-22 2019-04-23 梧州市食品药品检验所 一种动物体内曼陀罗生物碱的快速检测方法
CN110187016A (zh) * 2019-05-07 2019-08-30 司法鉴定科学研究院 一种干血样品中的卡西酮类物质的分析方法
CN110243962A (zh) * 2019-06-13 2019-09-17 苏州海科医药技术有限公司 一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法
CN110927306A (zh) * 2019-11-07 2020-03-27 徐州立兴佳正医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中布洛芬浓度的方法
CN110967434A (zh) * 2019-12-30 2020-04-07 南京广祺医药科技有限公司 一种定量测定血浆中尼美舒利的方法及应用
US10656059B2 (en) 2018-03-07 2020-05-19 Alcala Pharmaceutical, Inc. Method for qualitative and quantitative multiplexing of drug analytes from biological samples
CN111257460A (zh) * 2020-02-25 2020-06-09 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种贝类中三嗪类除草剂及其代谢产物的检测方法
CN112362783A (zh) * 2020-11-10 2021-02-12 江苏省淡水水产研究所 一种渔用非药品中潜在污染物高通量、快速筛查方法
CN112394124A (zh) * 2020-11-05 2021-02-23 广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 一种血浆中西地那非、n-去甲基西地那非及n1,n4-去二甲基西地那非含量分析方法
CN113238064A (zh) * 2021-04-16 2021-08-10 中国人民解放军总医院第三医学中心 全自动生化分析仪在化学中毒血清样本检测中的应用
CN113341026A (zh) * 2021-07-02 2021-09-03 北京和合医学诊断技术股份有限公司 Lc_ms_ms检测丁螺环酮及其代谢产物的方法
CN113671076A (zh) * 2021-08-17 2021-11-19 山东省海洋资源与环境研究院(山东省海洋环境监测中心、山东省水产品质量检验中心) 一种藻类中金刚烷胺类化合物和三嗪类除草剂的检测方法
CN113917049A (zh) * 2021-12-14 2022-01-11 湖南慧泽生物医药科技有限公司 临床研究血浆样本中氯丙嗪及代谢物浓度的生物分析方法
CN115015403A (zh) * 2022-04-08 2022-09-06 浙江大学 一种快速、全面、稳定的未知毒物的鉴定方法
CN116519849A (zh) * 2023-06-29 2023-08-01 湖南科锐斯医药科技有限公司 一种检测血浆中对乙酰氨基酚和羟考酮浓度的分析方法
RU2812598C1 (ru) * 2023-06-21 2024-01-30 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ определения нифедипина в биологическом материале
WO2024055447A1 (zh) * 2022-09-14 2024-03-21 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) 人体血浆钙离子拮抗剂串联质谱检测试剂盒

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014150900A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-25 Baylor Research Institute Methods and compositions for enhanced analyte detection from blood
CN104160274A (zh) * 2011-05-30 2014-11-19 奥德特里克公司 通过照护点药物动力学曲线分析进行治疗药物监测和投配的方法与组合物
CN105004799A (zh) * 2014-04-23 2015-10-28 上海中华药业有限公司 一种龙虎人丹植物药血浆中的8种不挥发性成分的含量检测方法
CN105651924A (zh) * 2016-03-16 2016-06-08 杭州汉库医学检验所有限公司 血液中激素的检测方法
CN106153762A (zh) * 2016-06-15 2016-11-23 司法部司法鉴定科学技术研究所 一种鉴定指甲中抗精神分裂症用药体内分析标志物的方法
WO2017147456A1 (en) * 2016-02-24 2017-08-31 Partnership For Clean Competition Multilayer device for separating blood components and uses thereof
WO2017173390A1 (en) * 2016-03-31 2017-10-05 Applied Proteomics, Inc. Biomarker database generation and use

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104160274A (zh) * 2011-05-30 2014-11-19 奥德特里克公司 通过照护点药物动力学曲线分析进行治疗药物监测和投配的方法与组合物
WO2014150900A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-25 Baylor Research Institute Methods and compositions for enhanced analyte detection from blood
CN105004799A (zh) * 2014-04-23 2015-10-28 上海中华药业有限公司 一种龙虎人丹植物药血浆中的8种不挥发性成分的含量检测方法
WO2017147456A1 (en) * 2016-02-24 2017-08-31 Partnership For Clean Competition Multilayer device for separating blood components and uses thereof
CN105651924A (zh) * 2016-03-16 2016-06-08 杭州汉库医学检验所有限公司 血液中激素的检测方法
WO2017173390A1 (en) * 2016-03-31 2017-10-05 Applied Proteomics, Inc. Biomarker database generation and use
CN106153762A (zh) * 2016-06-15 2016-11-23 司法部司法鉴定科学技术研究所 一种鉴定指甲中抗精神分裂症用药体内分析标志物的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JIN-HEE KIM ET AL: "Simple, Miniaturized Blood Plasma Extraction Method", 《ANAL. CHEM.》 *
LISA DELAHAYE ET AL: "Alternative sampling strategies for the assessment of biomarkers of exposure", 《CURRENT OPINION IN TOXICOLOGY》 *
ROBERT STURM ET AL: "Novel membrane devices andpotential utility in blood sample collection prior to analysis of dried plasma spots their", 《BIOANALYSIS》 *

Cited By (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10656059B2 (en) 2018-03-07 2020-05-19 Alcala Pharmaceutical, Inc. Method for qualitative and quantitative multiplexing of drug analytes from biological samples
US11054349B2 (en) 2018-03-07 2021-07-06 Alcala Pharmaceutical, Inc. Method for preparation of dried blood sample for multiplexing of analytes
CN109613126A (zh) * 2018-11-01 2019-04-12 中国环境科学研究院 一种鱼体中非法药物及其代谢产物的测定方法
CN109613126B (zh) * 2018-11-01 2020-11-03 中国环境科学研究院 一种鱼体中非法药物及其代谢产物的测定方法
CN109541108A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中地塞米松浓度的方法
CN109668985A (zh) * 2019-02-22 2019-04-23 梧州市食品药品检验所 一种动物体内曼陀罗生物碱的快速检测方法
CN109633048A (zh) * 2019-02-27 2019-04-16 梧州市食品药品检验所 一种动物体内颠茄生物碱的快速检测方法
CN110187016A (zh) * 2019-05-07 2019-08-30 司法鉴定科学研究院 一种干血样品中的卡西酮类物质的分析方法
CN110243962A (zh) * 2019-06-13 2019-09-17 苏州海科医药技术有限公司 一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法
CN110927306A (zh) * 2019-11-07 2020-03-27 徐州立兴佳正医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中布洛芬浓度的方法
CN110967434A (zh) * 2019-12-30 2020-04-07 南京广祺医药科技有限公司 一种定量测定血浆中尼美舒利的方法及应用
CN111257460A (zh) * 2020-02-25 2020-06-09 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种贝类中三嗪类除草剂及其代谢产物的检测方法
CN112394124A (zh) * 2020-11-05 2021-02-23 广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 一种血浆中西地那非、n-去甲基西地那非及n1,n4-去二甲基西地那非含量分析方法
CN112362783A (zh) * 2020-11-10 2021-02-12 江苏省淡水水产研究所 一种渔用非药品中潜在污染物高通量、快速筛查方法
CN113238064A (zh) * 2021-04-16 2021-08-10 中国人民解放军总医院第三医学中心 全自动生化分析仪在化学中毒血清样本检测中的应用
CN113341026A (zh) * 2021-07-02 2021-09-03 北京和合医学诊断技术股份有限公司 Lc_ms_ms检测丁螺环酮及其代谢产物的方法
CN113671076A (zh) * 2021-08-17 2021-11-19 山东省海洋资源与环境研究院(山东省海洋环境监测中心、山东省水产品质量检验中心) 一种藻类中金刚烷胺类化合物和三嗪类除草剂的检测方法
CN113671076B (zh) * 2021-08-17 2023-10-03 山东省海洋资源与环境研究院(山东省海洋环境监测中心、山东省水产品质量检验中心) 一种藻类中金刚烷胺类化合物和三嗪类除草剂的检测方法
CN113917049A (zh) * 2021-12-14 2022-01-11 湖南慧泽生物医药科技有限公司 临床研究血浆样本中氯丙嗪及代谢物浓度的生物分析方法
CN115015403A (zh) * 2022-04-08 2022-09-06 浙江大学 一种快速、全面、稳定的未知毒物的鉴定方法
WO2024055447A1 (zh) * 2022-09-14 2024-03-21 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) 人体血浆钙离子拮抗剂串联质谱检测试剂盒
RU2812598C1 (ru) * 2023-06-21 2024-01-30 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ определения нифедипина в биологическом материале
CN116519849A (zh) * 2023-06-29 2023-08-01 湖南科锐斯医药科技有限公司 一种检测血浆中对乙酰氨基酚和羟考酮浓度的分析方法

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