CN108498849B

CN108498849B - 一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂及其制备方法

Info

Publication number: CN108498849B
Application number: CN201810431480.5A
Authority: CN
Inventors: 罗亮; 黄丽萍; 张一漪; 孟凡玲
Original assignee: Wuhan Baina Likang Biopharmaceutical Co ltd
Current assignee: Wuhan Baina Likang Biopharmaceutical Co ltd
Priority date: 2018-05-08
Filing date: 2018-05-08
Publication date: 2021-04-30
Anticipated expiration: 2038-05-08
Also published as: CN108498849A

Abstract

本发明公开一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂及其制备方法，该液晶凝胶主要由85‑95wt％A相和5‑15wt％B相混合组合，所述A相包括33‑52wt％的至少一种二酰基甘油、33‑52wt％的至少一种磷脂酰胆碱、0‑15wt％的表面活性剂；所述B相包括8‑20wt％的溶剂、80‑92wt％的活性成分；所述活性成分为抗肿瘤药物，所述二酰基甘油包含二油酸甘油酯，所述磷脂酰胆碱包含大豆磷脂酰胆碱，所述溶剂为乙醇。利用液晶凝胶的构成组分以及独特的液晶相结构可达到有效控制包载物的释放，延长体内的循环时间，从而提高生物利用度。

Description

一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体地，涉及一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂及其制备方法。

背景技术

液晶是长程有序、短程无序的分子聚合体，是物质三态之外的第四态，是介于固态和液态之间的热力学稳定的中间相态，它一方面具有像液体一样的流动性和连续性，另一方面又具有像晶体一样的各向异性，是一类具有特殊结构的物质。液晶可分为溶致液晶和热致液晶，溶致液晶主要是由两种或以上组分在一定条件下形成的体系，这一体系多为两亲分子与溶剂组成，当两亲分子与溶剂混合时，溶剂浸入两亲分子的固体晶格中，分布在亲水基的双层之间，从而破坏了晶体的取向有序性。随着溶剂的不断加入，该体系可以转变为不同的液晶相。而溶致液晶为单组分的纯化合物或均匀混合物，体系在一定的温度范围内形成液晶相，分子形状多为盘状或棒状。液晶一般表现为三种相态，分别是层状、六方相和立方相，其中，备受瞩目的为立方相液晶，该体系是以立方晶格为结构单元，在空间上三维延伸，属于双连续的网格结构，立方液晶能够包载各种不同极性和剂量的药物，水溶性药物可以包结在立方液晶的水道中，而脂溶性的药物能包结在立方液晶的脂质双层膜中。层状液晶的粘度较低，可以用于注射当层状液晶进入体内后遇到水分就会转变成高粘度高强度的立方液晶。

介入栓塞治疗术是通过插入动脉的导管将化疗栓塞剂输送到靶组织或器官的手术，是目前临床中晚期肝癌首选的治疗方法。该手术可栓塞肿瘤供血动脉，造成肿瘤组织缺血缺氧而坏死，并同时提高局部药物浓度，延长药物与肿瘤组织的接触时间，使肿瘤处于高浓度化疗药物环境中却不引起明显的全身不良反应。

栓塞材料是介入栓塞疗法成功的关键所在。目前临床上常用的栓塞材料有明胶海绵、聚乙烯醇微球及氰丙烯酸正丁酯液体栓塞材料等。但是，上述栓塞材料都存在一定的缺陷，明胶海绵流动性差，微球弥散不良，液体栓塞材料易致血管毒性等。基于两亲性液晶材料与水可自组装成不同结构热力学稳定体系的理论基础，科学家利用立方液晶独特的结构、生物亲和性及稳定特性，采用原位凝胶技术，制备溶剂诱导的液晶溶液，但大多数都是采用单油酸甘油酯和植烷三醇等液晶材料来制备凝胶，虽然具有较好的栓塞性能，且有良好的生物相容性，但一定浓度的不饱和单脂肪酸甘油酯可导致动物体内溶血现象。韩柯《基于植烷三醇立方液晶的肝动脉栓塞剂的研究》-(2010.06)提出以植烷三醇作为液晶材料制备栓塞剂，虽然具有较好的栓塞性能，但是一定浓度植烷三醇容易导致溶血现象，CN103120640A专利中介绍了一种栓塞剂的制备方法，在脂质体内包裹有131I-碘油和磁性纳米颗粒，磁性纳米颗粒分散于所述131I-碘油中，脂质体外表面接有抗肿瘤药物，但是这种制备方法过于复杂，且碘油栓塞时间稳定性差。目前常见的抗肿瘤药物有烷化剂、激素类药物、抗代谢药、抗肿瘤抗生素、抗肿瘤植物药等，其中以顺铂、多柔比星、丝裂霉素、表柔比星较为常用。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种生物利用度高、具有长效缓释作用的可注射的液晶凝胶肝动脉栓塞剂。

本发明的另一个目的是提供上述液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备方法，并且此制备方法简单，生产及原料成本低，且容易产业化生产。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，由85-95wt％A相和5-15wt％B相混合组合，所述A相包括33-52wt％的至少一种二酰基甘油、33-52wt％的至少一种磷脂酰胆碱、0-15wt％的表面活性剂；所述B相包括8-20wt％的溶剂、80-92wt％的活性成分，所述活性成分为抗肿瘤药物。

进一步的，所述液晶凝胶肝动脉栓塞剂由91-94wt％A相和6-9wt％B相混合组成。

进一步的，所述A相包括44-51wt％的至少一种二酰基甘油、44-51wt％的至少一种磷脂酰胆碱，5wt％的表面活性剂；所述B相包括10-15wt％的溶剂、85-90wt％的活性成分。

进一步的，所述的抗肿瘤药物为顺铂、多柔比星、丝裂霉素、表柔比星中的一种。

进一步的，所述的二酰基甘油为二油酸甘油酯。

进一步的，所述磷脂酰胆碱为大豆磷脂酰胆碱。

进一步的，所述的表面活性剂为泊洛沙姆。

进一步的，所述的溶剂包含乙醇、丙醇、异丙醇或其混合物中的至少一种。

进一步的，所述的溶剂为乙醇。

本发明还提供了上述液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备方法。

具体技术方案如下：

一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将所述二酰基甘油、磷脂酰胆碱、表面活性剂加热熔融，漩涡混匀，得到A相；

(2)将所述活性成分溶于溶剂中，获得溶解的药液，为B相；

(3)在20-35℃下，将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂。

更优选地，步骤(1)中所述加热熔融的温度为70℃。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)通过调节脂类分子的组成、配比等形成不同的液晶相，可依此来调节药物分子在不同液晶相中的存贮方式和释放速率，增加难溶药物的载药量和包封率，从而实现药物的可控释放。

(2)本发明一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂选用的都是天然来源的材料，无免疫原性，生物相容性好，所选用的二油酸甘油酯、大豆磷脂酰胆碱相较于单油酸甘油酯和植烷三醇更为安全可靠。

(3)本发明液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备方法简单，原料易得到，生产工艺低能耗，设备成本和原料成本较低，易于产业化。

附图说明

图1为本发明的液晶凝胶肝动脉栓塞剂制备流程图；

图2为本发明中加入不同比例泊洛沙姆液晶凝胶肝动脉栓塞剂样品的累积释放率；

图3为本发明的液晶凝胶肝动脉栓塞剂的MTT毒性检测结果图，图中各组比例下的系列1分别代表前体制剂a₁、b₁、c₁，系列2代表a₂、b₂、c₂，系列3代表a₃、b₃、c₃；

图4为本发明专属性考察中PBS缓冲液光谱扫描结果图；

图5为本发明专属性考察中空白液晶凝胶在PBS缓冲液中上清液的光谱扫描结果图；

图6为本发明专属性考察中丝裂霉素对照品溶液光谱扫描结果图；

图7为本发明专属性考察中丝裂霉素液晶凝胶的体外释药溶液的光谱扫描结果图。

具体实施方式

下面将结合本发明中的附图，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明专利保护的范围。

实施例1：一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备，方法参见图1：

称取0.42g二油酸甘油酯、0.52g大豆磷脂酰胆碱、0.06g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.80g丝裂霉素，0.20g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下，分别按14:86、10:90、6:94的质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂a₁、b₁、c₁，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例2：

称取0.51g二油酸甘油酯、0.34g大豆磷脂酰胆碱、0.15g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.92g丝裂霉素，0.08g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下，分别按14:86、10:90、6:94的质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂a₂、b₂、c₂，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例3：

称取0.45g二油酸甘油酯、0.50g大豆磷脂酰胆碱、0.05g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.90g丝裂霉素，0.10g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下,分别按14:86、10:90、6:94的质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂a₃、b₃、c₃，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例4：

称取0.51g二油酸甘油酯、0.44g大豆磷脂酰胆碱、0.05g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.85g丝裂霉素，0.15g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下，分别按14:86、10:90、6:94的质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂a₄、b₄、c₄，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例5：

称取0.40g二油酸甘油酯、0.50g大豆磷脂酰胆碱、0.10g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.87g丝裂霉素，0.13g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下，按6:94质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂c₅，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例6：

称取0.50g二油酸甘油酯、0.50g大豆磷脂酰胆碱，在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.80g丝裂霉素，0.20g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下，按6:94质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂c₆，避光、密封、4℃冰箱保存。

实施例7：加入不同比例泊洛沙姆时的累积释放率考察

按下表各组份的含量制备液晶凝胶肝动脉栓塞剂，考察加入不同比例泊洛沙姆时的累积释放率。

其中加入的泊洛沙姆的量依次为0％、5％、10％和15％；累积释放率如图2所示，其中A1-A4依次是加入0％、5％、10％和15％泊洛沙姆的凝胶。可知，加入泊洛沙姆之后丝裂霉素液晶凝胶的累积释放量明显高于未加泊洛沙姆的体系。说明配方中的泊洛沙姆对于提高该液晶体系的释药率效果显著。泊洛沙姆在一定的温度下和浓度条件下可以形成水凝胶，因此泊洛沙姆含量高的凝胶体系可能既含有液晶凝胶，也含有部分水凝胶，水凝胶堵塞了部分液晶凝胶的通道，导致含有5％泊洛沙姆的体系要比15％的释药效果更好。在50小时左右，含有15％泊洛沙姆的体系累积释放率反而超过了5％的体系，是由于泊洛沙姆可溶于水，因此泊洛沙姆含量高的话，在释药的同时泊洛沙姆也会随之释放出来，使得整个体系的泊洛沙姆含量逐渐减少，从而减弱泊洛沙姆对于体系释药通道的影响。结合图2的综合分析，含有5％泊洛沙姆的凝胶体系对于丝裂霉素的释放效果更好。

实施例8：进行体外释放实验

释放条件：利用转蓝法进行释放实验，内衬0.22μm的水系滤膜防止还未来得及凝胶化的制剂被甩出，100rpm，温度37℃条件下进行释放，释放介质为纯净水，凝胶制剂2g，每次取样量为1ml，补空白释放介质1ml。

将实施例1-4中所得的各三组前体制剂和实施例5-6中的前体制剂分别进行体外释放，各组释放时间和累计释放率分别如表1、表2、表3、表4和表5所示：

表1

表2

时间(小时)	前体制剂a2	前体制剂b2	前体制剂c2
				1	10％	8％	15％
6	18％	15％	23％
				12	32％	25％	38％
24	49％	34％	56％
				48	65％	52％	76％
72	85％	78％	82％

表3

时间(小时)	前体制剂a3	前体制剂b3	前体制剂c3
				1	20％	15％	23％
6	32％	21％	34％
				12	51％	39％	58％
24	68％	53％	74％
				48	82％	79％	88％
72	92％	90％	96％

表4

表5

时间(小时)	前体制剂c5	前体制剂c6
			1	12％	16％
6	20％	23％
			12	34％	39％
24	52％	61％
			48	73％	72％
72	86％	80％

由上述各实施例结果结合大量试验数据研究可知，对于栓塞剂而言，当二油酸甘油酯含量为44-51wt％，大豆磷脂酰胆碱含量为44-51wt％，泊洛沙姆的含量为5wt％，活性成分含量为85-90wt％，乙醇含量为10-15wt％时，且将A相的91％-94wt％和B相的6-9wt％相融合得到的栓塞剂释放效果更好，更优选的，B相：A相＝6:94时释放最快，均在72小时后达到释放平台期。

实施例9：MTT毒性检测

采用MTT法考察不同A相和B相比例条件下各组药物细胞毒性，如图3所示，结果发现B相和A相比例为6:94时候，细胞存活率最低，说明在该条件下对细胞的杀伤力最强，这和体外释放的结果一致，药物释放越快对细胞的杀伤力越强。

实施例10：通针性能的评价

取上述实施例1-6中制备的液晶凝胶前体制剂样品0.8ML，用1ML注射器(6号针头)进行推注，考察各组样品能否顺利通过针头，结果如下表所示。

实施例11：专属性考察

分别取PBS缓冲液、空白液晶凝胶在PBS缓冲液中的上清液、丝裂霉素对照品溶液(浓度为10μg/ml)和丝裂霉素液晶凝胶的体外释药溶液(介质为PBS缓冲液)，各组样品均用0.22μm针式过滤器过滤，在紫外分光光度计下进行光谱扫描，结果如图4-7所示。结果表明，主药丝裂霉素峰形良好，在体外模拟释药的过程中，辅料以及释放药介质等对于丝裂霉素的含量测定均没有干扰。

实施例12：

称取0.45g单油酸甘油酯、0.50g大豆磷脂酰胆碱、0.05g的泊洛沙姆在70℃下加热熔融，获得A相；称取0.90g丝裂霉素，0.10g的无水乙醇，混合器上混合均匀，使之完全溶解，获得溶解的药液，为B相；在20-35℃下,按6:94的质量百分比将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉栓塞剂前体制剂d，避光、密封、4℃冰箱保存。将前体制剂d和其他制剂c₃进行体外释放试验，体外释放的条件同实施例8，结果如下表：

前体制剂d	前体制剂c3
		13％	23％
20％	34％
		36％	58％
53％	74％
		72％	88％
85％	96％

由上表可以得知，同样条件制备的前体制剂，使用单油酸甘油酯制备出来的肝动脉栓塞剂的前体制剂的体外释放效果远远不如用二油酸甘油酯制备出来的肝动脉栓塞剂的前体制剂。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，由94wt％A相和6wt％B相混合组合，所述A相包括44-51wt％的至少一种二酰基甘油、44-51wt％的至少一种磷脂酰胆碱、5wt％的表面活性剂；所述B相包括10-15wt％的溶剂、85-90wt％的活性成分，所述活性成分为抗肿瘤药物。

2.根据权利要求1所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的抗肿瘤药物为顺铂、多柔比星、丝裂霉素、表柔比星中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的二酰基甘油为二油酸甘油酯。

4.根据权利要求1所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的磷脂酰胆碱为大豆磷脂酰胆碱。

5.根据权利要求1所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的表面活性剂为泊洛沙姆。

6.根据权利要求1所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的溶剂包含乙醇、丙醇、异丙醇或其混合物中至少一种。

7.根据权利要求6所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂，其特征在于，所述的溶剂为乙醇。

8.根据权利要求1-7任一项所述的一种液晶凝胶肝动脉栓塞剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(2)将所述活性成分溶于溶剂中，获得溶解的药液，为B相；

(3)在20-35℃下，将B相加入A相中，充分混匀，得到液晶凝胶肝动脉脉栓塞剂前体制剂。