CN108467381B - 骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 - Google Patents
骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108467381B CN108467381B CN201810210307.2A CN201810210307A CN108467381B CN 108467381 B CN108467381 B CN 108467381B CN 201810210307 A CN201810210307 A CN 201810210307A CN 108467381 B CN108467381 B CN 108467381B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- cells
- cancer
- alhagi sparsifolia
- methoxyphenol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 62
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 58
- 241001626384 Alhagi sparsifolia Species 0.000 title claims abstract description 56
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 10
- UMDJLUGAMDTLDI-UHFFFAOYSA-N 4-ethenyl-3-methoxyphenol Chemical compound COC1=CC(O)=CC=C1C=C UMDJLUGAMDTLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 28
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 8
- IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1O IBGBGRVKPALMCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 34
- MJBPUQUGJNAPAZ-AWEZNQCLSA-N butin Chemical compound C1([C@@H]2CC(=O)C3=CC=C(C=C3O2)O)=CC=C(O)C(O)=C1 MJBPUQUGJNAPAZ-AWEZNQCLSA-N 0.000 abstract description 32
- WEKCEGQSIIQPAQ-XFKFGYJUSA-N (2S,3R,4S,5S,6R)-2-[4-[(3S,3aR,6R,6aR)-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrofuro[3,4-c]furan-6-yl]-2,6-dimethoxyphenoxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound COc1cc(cc(OC)c1O)[C@H]1OC[C@H]2[C@@H]1CO[C@H]2c1cc(OC)c(O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)c(OC)c1 WEKCEGQSIIQPAQ-XFKFGYJUSA-N 0.000 abstract description 31
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 abstract description 22
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 abstract description 22
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 abstract description 21
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 abstract description 21
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 abstract description 21
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 abstract description 20
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 abstract description 20
- 229960003371 protocatechualdehyde Drugs 0.000 abstract description 17
- MJBPUQUGJNAPAZ-UHFFFAOYSA-N Butine Natural products O1C2=CC(O)=CC=C2C(=O)CC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 MJBPUQUGJNAPAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 126
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 92
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 90
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 83
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 69
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 33
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 28
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 20
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 13
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 13
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 12
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 9
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 9
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 8
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 7
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 235000008011 Alhagi graecorum Nutrition 0.000 description 5
- 241000214035 Alhagi maurorum Species 0.000 description 5
- 235000017398 Alhagi maurorum Nutrition 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 241001234745 Camelina Species 0.000 description 3
- 235000016401 Camelina Nutrition 0.000 description 3
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000214034 Alhagi Species 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- AYMYWHCQALZEGT-ORCRQEGFSA-N butein Chemical compound OC1=CC(O)=CC=C1C(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 AYMYWHCQALZEGT-ORCRQEGFSA-N 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 244000052707 Camellia sinensis Species 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 240000004530 Echinacea purpurea Species 0.000 description 1
- 241000220485 Fabaceae Species 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 241000282840 Vicugna vicugna Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical group C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 239000000498 cooling water Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 235000014134 echinacea Nutrition 0.000 description 1
- 238000005485 electric heating Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006481 glucose medium Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000000039 preparative column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及骆驼刺技术领域，是一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用，本发明首次从骆驼刺提取物中分离出单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚，本发明骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本发明首次公开了tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚对结肠癌HT‑29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用，从而使本发明tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚可以用于制备防治结肠癌、胃癌、肝癌、口腔癌的药物或/和保健品。
Description
技术领域
本发明涉及骆驼刺技术领域，是一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用。
背景技术
骆驼刺(Alhagi sparsifolia Shap)是新疆干旱沙漠地区特有的一种落叶灌木，它也是沙漠戈壁“三宝”之一，具有开通阻滞、止咳祛痰、消除异常黏液质等功效，用于腹痛腹胀、痢疾腹泻、风湿病、滋补强壮、平衡体液和异常胆液质的常见药方。课题组对乌鲁木齐周边的骆驼刺与吐鲁番地区骆驼刺进行了比较，近年来由于乌鲁木齐周边等地气候较温和适宜的地区，其骆驼刺已不产生刺糖。因此本发明采用吐鲁番地区含刺糖骆驼刺作为研究对象。本发明借鉴前期发现的骆驼刺提取物抗肿瘤和增强免疫的研究基础，为了深入探讨骆驼刺提取物对宫颈癌的影响，本发明通过体外培养人宫颈癌Hela细胞，观察骆驼刺提取物中单体化合物对宫颈癌Hela细胞、结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞增殖、凋亡的影响，并初步探讨其发生机制，明确骆驼刺中具有抗肿瘤活性的单体化合物的种类，为利用骆驼刺活性成分治疗宫颈癌提供实验依据，同时对寻找新的抗癌药物和充分挖掘利用新疆维药资源无疑是一项非常有意义的工作。
发明内容
本发明提供了一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用，本发明骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本发明首次公开了tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用。
本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物，包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h至1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h至2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。
本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法，按照下述方法进行：
取所需量乙醇提取物与等体积的水均匀混合，得到乙醇提取物稀释液，再量取所需量乙醇提取物稀释液，依次用与乙醇提取物稀释液等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物；
取所需量乙酸乙酯萃取粗提取物，采用硅胶吸附柱色谱，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到乙酸乙酯萃取粗提取物的8个馏分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分通过硅胶吸附柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为42:56的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱进行梯度洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分的第2组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物tortoside A；
取所需量正丁醇萃取粗提取物，采用HPD100大孔吸附树脂进行粗分后，依次用体积百分比浓度为30％的乙醇、水、体积百分比浓度为90％的乙醇、水梯度洗脱，得到正丁醇萃取洗脱物，取所需量正丁醇萃取洗脱物，采用硅胶吸附柱色谱，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到的正丁醇萃取粗提取物的5个馏分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到2个组分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物紫铆素，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物原儿茶醛。
下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：
上述乙酸乙酯萃取粗提取物，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的体积比为0至100:0至100，石油醚由100递减至0，乙酸乙酯由0递增至100或/和，正丁醇萃取洗脱物，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，二氯甲烷与甲醇体积比为0至100:0至100，二氯甲烷由100递减至0，甲醇由0递增至100。
上述乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，二氯甲烷与甲醇的体积比为1:1；或/和，乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用的甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1。
本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品中的应用。
本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种骆骆驼刺提取物作为制备抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用。
本发明的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。
本发明的技术方案之六是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。
本发明的技术方案之七是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物tortoside A作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。
本发明的技术方案之八是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物tortoside A作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。
本发明首次从骆驼刺提取物中，分离出单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortosideA、4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，本发明骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本发明首次公开了tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用，从而使本发明tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚可以用于制备防治结肠癌、胃癌、肝癌、口腔癌的药物或/和保健品。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量百分数；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例1：该骆驼刺提取物，包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h至1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h至2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。
实施例2：该骆驼刺提取物，包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h或1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h或2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。
实施例3：该骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法，按照下述方法进行：
取所需量乙醇提取物与等体积的水均匀混合，得到乙醇提取物稀释液，再量取所需量乙醇提取物稀释液，依次用与乙醇提取物稀释液等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物；
取所需量乙酸乙酯萃取粗提取物，采用硅胶吸附柱色谱，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到乙酸乙酯萃取粗提取物的8个馏分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分通过硅胶吸附柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为42:56的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱进行梯度洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分的第2组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物tortoside A；
取所需量正丁醇萃取粗提取物，采用HPD100大孔吸附树脂进行粗分后，依次用体积百分比浓度为30％的乙醇、水、体积百分比浓度为90％的乙醇、水梯度洗脱，得到正丁醇萃取洗脱物，取所需量正丁醇萃取洗脱物，采用硅胶吸附柱色谱，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到的正丁醇萃取粗提取物的5个馏分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到2个组分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物紫铆素，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物原儿茶醛。
用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取乙醇提取物稀释液时，得到的石油醚萃取粗提取物为极性较低的叶绿素和脂类，不需要进行进一步的分离。
实施例4：作为上述实施例2的优化，乙酸乙酯萃取粗提取物，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的体积比为0至100:0至100，石油醚由100递减至0，乙酸乙酯由0递增至100或/和，正丁醇萃取洗脱物，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，二氯甲烷与甲醇体积比为0至100:0至100，二氯甲烷由100递减至0，甲醇由0递增至100
实施例5：作为上述实施例3至实施例4的优化，乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，二氯甲烷与甲醇的体积比为1:1；或/和，乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用的甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1。
实施例6：该驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品中的应用。
实施例7：该骆骆驼刺提取物作为制备抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用。
实施例8：该骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。
实施例9：该骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。
实施例10：该骆驼刺提取物中单体化合物tortoside A作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。
实施例11：该骆驼刺提取物中单体化合物tortoside A作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。
实施例12：该该骆驼刺提取物，包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，按照下述步骤得到：第一步，取9000g骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物。
实施例13：该骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法，按照下述方法进行：
取1550g乙醇提取物与等体积的水均匀混合，得到乙醇提取物稀释液，再量取9L乙醇提取物稀释液，依次用9L的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物；
取80g乙酸乙酯萃取粗提取物，采用硅胶吸附柱色谱，用体积比为50:50的石油醚和乙酸乙酯进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到乙酸乙酯萃取粗提取物的8个馏分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分通过硅胶吸附柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为42:56的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用体积比为50:50的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为50:50的甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分的第2组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物tortoside A；
取250g正丁醇萃取粗提取物，采用HPD100大孔吸附树脂进行粗分后，依次用体积百分比浓度为30％的乙醇、水、体积百分比浓度为90％的乙醇、水梯度洗脱，得到正丁醇萃取洗脱物，取70g正丁醇萃取洗脱物，采用硅胶吸附柱色谱，依次用体积比为50:50的二氯甲烷和甲醇进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到的正丁醇萃取粗提取物的5个馏分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用体积比为50:50的甲醇和水作洗脱剂，得到2个组分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物紫铆素，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用体积比为50:50的甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物原儿茶醛。
骆驼刺提取物中单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚和tortoside A抗肿瘤药效学实验
1.试剂与仪器
1.1试剂与药材
DMEM高糖培养基(Hyclone公司)；胎牛血清(Gibco公司，FBS)；0.25％胰酶(Hyclone公司)；PBS缓冲溶液(Thermo公司)；双抗(青霉素-链霉素PS)；四甲基偶氮盐(sigma公司，MTT)和5-氟尿嘧啶(上海旭东海普药业有限公司，5-Fu)；硅胶G薄层板，硅胶GF254薄层板(青岛海洋化工有限公司)，C18柱色谱(大连江申分离科学技术公司)，ODS制备型色谱柱(YMC公司)，葡聚糖凝胶色谱柱(sephadex LH-20，GE Healthcare Bio-ScienceAB公司)，色谱甲醇(美国fisher scientific，色谱纯)；石油醚，甲醇，乙醇，乙酸乙酯，正丁醇，浓硫酸，二甲基亚砜(DMSO)等试剂均为分析纯(天津市致远化学试剂有限公司)。骆驼刺采自新疆吐鲁番地区，经新疆中药民族药研究所王果平副研究员鉴定其为豆科骆驼刺属植物骆驼刺(Alhagi sparsifolia Shap.)。
1.2细胞株
人宫颈癌Hela细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库(中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)。
1.3仪器
电热真空干燥箱DZF-2B(北京永光明医疗仪器厂)、旋转蒸发仪V-100(上海爱朗仪器有限公司)、冷却水循环装置CCA-1111(上海爱朗仪器有限公司)、循环水式多用真空泵SHB-III(郑州长城科工贸有限公司)、二氧化碳培养箱BC-J80S(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)、洁净工作台SW-CJ-2F(苏州尚田洁净技术有限公司)、冷冻离心机MIKRO 220R(德国Hettich)、酶标仪BioTeK、Gen5 BioTeK、优普超纯水机UPT-I-5T/L(成都超纯科技有限公司)、液相色谱质谱联用仪、核磁共振光谱用Bruker ARX-300和AV-600型核磁共振仪；高效液相色谱仪；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
2.实验方法
2.1不同极性的骆驼刺提取物对Hela细胞活性的筛选
2.1.1细胞培养
将细胞从液氮中取出，迅速置于37℃水浴锅中解冻，然后吸入离心管，加入3ml细胞培养液(10％胎牛血清DMEM培养液)，1 000r/min离心5min，弃去上清液，将细胞重悬于1ml细胞培养液，并转移至10cm细胞培养皿中，加入5ml细胞培养液，混匀后放入细胞培养箱进行培养(37℃、5％二氧化碳CO2)。每两天更换1次培养液，观察细胞形态，维持细胞处于对数生长期备用。
2.1.2活性筛选
取对数生长期的Hela细胞，用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液后细胞计数,将细胞密度调整为6×104个/mL，铺板，培养24h后给药。空白对照组给予等体积的PBS；给药组分别加入不同浓度的石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物，其浓度依次为32，16，8，4，2，1mg/mL，阳性对照组加入不同浓度的5-FU，每个浓度设3个复孔，再培养48h后，加入5mg/mL的MTT液(10μL/孔)4h后，弃去上清加入DMSO 100μL/孔。于摇床上震荡5至10min,使完全混匀溶解结晶，在酶标仪上于570nm处测吸光度，每个剂量设平行重复3孔，实验重复3次。按以下公式计算抑制率，拟合后求IC50值。抑制率＝(1-A实验组/A对照组)×100％。
2.2骆驼刺中各单体化合物对Hela细胞的活性筛选
2.2.1细胞培养同2.1.1
2.2.2活性筛选取对数生长期的Hela细胞，用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液后细胞计数，将细胞密度调整为6×104个/mL，铺板，培养24h后给药。空白对照组给予等体积的PBS；给药组分别加入不同浓度的化合物，其浓度依次为200，100，50，25，12.5，6.25μg/mL。具体操作步骤见2.1.2
2.3骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚和tortoside A对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞的活性筛选
2.3.1细胞培养同2.1.1
2.3.2活性筛选取对数生长期的结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞，分别用0.25％胰蛋白酶消化制成单细胞悬液后细胞计数，将细胞密度调整为6×104个/mL，铺板，培养24h后给药。空白对照组给予等体积的PBS；给药组分别加入不同浓度的化合物，其浓度依次为200，100，50，25，12.5，6.25μg/mL。具体操作步骤见2.1.2
2.4统计学处理实验数据采用SPSS统计软件进行统计学分析，采用单因素方差(one way ANOVE)分析，P<0.05为差异，有统计学意义。
3.结果
3.1活性筛选
3.1.1不同极性的骆驼刺提取物对Hela细胞活性的筛选结果，如表1所示。表1为不同极性骆驼刺提取物对Hela细胞的抑制率和IC50值的数据。由表1可知，乙酸乙酯萃取粗提取物和正丁醇萃取粗提取物的IC50值分别为：20.0mg/mL和16.9mg/mL，石油醚萃取粗提取物和水提取物IC50值均为32.0mg/mL以上，乙酸乙酯萃取粗提取物和正丁醇萃取粗提取物对Hela细胞有明显抑制作用，所以接下来我们对乙酸乙酯萃取粗提取物和正丁醇萃取粗提取物进行了单体化合物的分离和活性筛选。
3.1.2骆驼刺提取物中单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对Hela细胞的抑制作用
骆驼刺提取物中单体化合物对Hela细胞活性筛选结果，如表2所示。由表2可知，骆驼刺提取物中化合物紫铆素、原儿茶醛、单体化合物tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚的IC50值分别为44.7μg/mL，23.1μg/mL，91.2μg/mL，41.2μg/mL，对骆驼刺提取物中所含其他单体化合物的IC50值测定，其IC50值为147.3μg/mL以上，可见骆驼刺提取物中单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对Hela细胞增单体殖有较强的抑制作用。
3.1.3骆驼刺提取物中单体化合物中4-乙烯基-3-甲氧基苯酚和tortoside A对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞的抑制作用
骆驼刺提取物中单体化合物中4-乙烯基-3-甲氧基苯酚和tortoside A对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞的活性筛选结果，如表3所示。由表3可知，骆驼刺提取物中单体化合物中4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞增殖具有显著的抑制作用。
因此，在活性筛选的研究中，首先利用MTT法检测各不同极性提取物对肿瘤细胞和正常细胞的增殖抑制能力，明确其中的乙酸乙酯萃取粗提取物和正丁醇萃取粗提取物对Hela细胞具有一定的抑制作用，进而对上述二种萃取粗提取物进行筛选，利用5-FU与骆驼刺提取物中的单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚进行比较，发现骆驼刺提取物中的单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对宫颈癌Hela细胞增殖有较强的抑制作用(P<0.05)，且呈现一定的剂量依赖性；tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞增殖具有显著的抑制作用。
综上所述，本发明首次从骆驼刺提取物中，分离出单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A、4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，本发明骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本发明首次公开了tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用，从而使本发明tortoside A和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚可以用于制备防治结肠癌、胃癌、肝癌、口腔癌的药物或/和保健品。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。
表1
表2
| 骆驼刺提取物中单体化合物种类 | IC50值(μg/mL) |
| 紫铆素 | 44.7 |
| 原儿茶醛 | 23.1 |
| tortoside A | 91.2 |
| 4-乙烯基-3-甲氧基苯酚 | 41.2 |
表3
Claims (2)
1.一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚在制备防治口腔癌药物或/和保健品中的应用。
2.一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚在制备抑制或/和杀灭KB细胞的药物或/和保健品中的应用。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210502447.3A CN115444854B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA在制备防治癌症药物或保健品中的应用 |
| CN201810210307.2A CN108467381B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810210307.2A CN108467381B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210502447.3A Division CN115444854B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA在制备防治癌症药物或保健品中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108467381A CN108467381A (zh) | 2018-08-31 |
| CN108467381B true CN108467381B (zh) | 2022-08-09 |
Family
ID=63264430
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210502447.3A Active CN115444854B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA在制备防治癌症药物或保健品中的应用 |
| CN201810210307.2A Active CN108467381B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210502447.3A Active CN115444854B (zh) | 2018-03-14 | 2018-03-14 | 骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA在制备防治癌症药物或保健品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN115444854B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110179041A (zh) * | 2019-05-09 | 2019-08-30 | 湖南川渝食品有限公司 | 一种含有骆驼刺提取物的固态火锅底料 |
| CN114195750A (zh) * | 2021-12-23 | 2022-03-18 | 新疆维吾尔自治区人民医院 | 一种骆驼刺处理工艺 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102008651A (zh) * | 2010-09-30 | 2011-04-13 | 刘松林 | 治疗及预防肿瘤的中药物及其生产方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI417089B (zh) * | 2011-01-20 | 2013-12-01 | Li Tek Biolog Technology Company | 具抗癌功效之天然組成物成分及其製備方法 |
-
2018
- 2018-03-14 CN CN202210502447.3A patent/CN115444854B/zh active Active
- 2018-03-14 CN CN201810210307.2A patent/CN108467381B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102008651A (zh) * | 2010-09-30 | 2011-04-13 | 刘松林 | 治疗及预防肿瘤的中药物及其生产方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Biological Activities of Plants used in Egyptian Ethnopharmacology;Khaled Rashed等;《Journal of Applied Pharmaceutical Science》;20170530;第7卷(第5期);第046页摘要，第047页左栏第1段，第048页Table 2 * |
| Di Zhou等.Natural potential neuroinflammatory inhibitors from Alhagi sparsifolia Shap..《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》.2016,第27卷第973页右栏倒数第2行，第974、977页. * |
| Natural potential neuroinflammatory inhibitors from Alhagi sparsifolia Shap.;Di Zhou等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》;20161230;第27卷;第973页右栏倒数第2行，第974、977页 * |
| 骆驼刺提取物体内外抗肿瘤作用及机制初探;马晓玲等;《天然产物研究与开发》;20151231;第27卷;第517-520页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115444854A (zh) | 2022-12-09 |
| CN108467381A (zh) | 2018-08-31 |
| CN115444854B (zh) | 2023-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110272342B (zh) | 马齿苋中一种萘酸化合物及其提取分离方法与用途 | |
| CN105017357A (zh) | 多酚黄酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN108467381B (zh) | 骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用 | |
| KR20170133497A (ko) | 인디고 내추럴리스로부터의 추출물 및 그의 제조 방법 | |
| CN101863871A (zh) | 蔷薇红景天总苷及其医药用途和制备方法 | |
| CN107854507B (zh) | 一种从艾叶中提取黄酮类成分的方法 | |
| CN104958330A (zh) | 一种木蝴蝶总黄酮的提取纯化方法及其应用 | |
| CN109336747B (zh) | 马齿苋中Oleralignan与其提取分离方法及其应用 | |
| Wang et al. | Online extraction and enrichment coupling with high‐speed counter‐current chromatography for effective and target isolation of antitumor anthraquinones from seeds of Cassia obtusifolia | |
| CN108774276B (zh) | 南方荚蒾果实木脂素提取物及其活性成分和用途 | |
| CN108113985B (zh) | 野马追黄酮部位在制备抗乙肝病毒药物中的应用 | |
| CN112300104A (zh) | 马齿苋中一种木脂素类化合物及其提取分离方法和应用 | |
| CN105294726A (zh) | 一种新的黄烷酮类化合物及其制备方法和医药用途 | |
| CN107936070A (zh) | 具有sirt 1抑制活性的糖苷类化合物及其制备方法 | |
| CN108250263B (zh) | 三七中三种具有抗肿瘤活性的化合物、制备方法和药物用途 | |
| CN110156859A (zh) | 芥子酸类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN112920151B (zh) | 异戊烯基黄酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN109879920B (zh) | 一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用 | |
| CN108771671B (zh) | 一种具有抗皮肤癌作用的组合物及其制备方法与应用 | |
| CN107722087B (zh) | 一种绞股蓝黄酮类化合物及其制备与在抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN108619179A (zh) | 老鹳草提取物及其医药用途 | |
| CN109748945A (zh) | 四种Gypenoside L和Gypenoside LI乙酰化衍生物及其制备抗肿瘤药物的用途 | |
| CN108129534B (zh) | 一种从北葶苈子中提取的北葶新碱c和北葶新碱d及其制备方法与应用 | |
| CN102440985A (zh) | 双酮类化合物flbg-1108或者其药用盐在制备抗癌药物中的应用 | |
| CN109897079B (zh) | 一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |