CN108426880A - 一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法，其特征在于包括下述步骤：(1)污泥清洗干燥；(2)Na2CO3溶液中破碎并加热溶解；(3)冷却离心，去除残渣；(4)加酸调pH值，获取藻酸沉淀；(5)NaOH溶液中溶解；(6)咔唑硫酸法测溶液中藻酸盐浓度，确定总含量。利用该方法较传统称重法的优势在于：(1)省去乙醇析出及干燥的过程，节省测定时间；(2)避免蛋白质、脂质、细胞残渣等杂志对结果的影响，测定更准确；(3)节省乙醇试剂及成本。

Description

一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法，具体适用于普通活性污泥、生物膜、好氧颗粒污泥及厌氧颗粒污泥，属于污水生物处理领域。
背景技术：
细菌藻酸盐是污泥中细菌胞外多糖的重要组分，可以作为海藻酸钠的潜在替代物，有广泛的应用价值。如在食品生产中用作稳定剂、增稠剂和胶凝剂，在制药技术和生物技术工业中用于固定化细胞，经特殊处理后可用作抗癌药物等。污泥中细菌藻酸盐含量因泥质的不同，含量在约2.8％-16％之间，较高的藻酸盐含量使污泥具备一定的回收利用价值。但是，虽然越来越多的研究关注污泥中的细菌藻酸盐，污泥中细菌藻酸盐含量测定的方法仍比较费力耗时，且准确性差。在近年的相关研究中，污泥中细菌藻酸盐的测定方法是通过将污泥在Na2CO3溶液中加热溶解，通过先加酸降低pH值并离心，再用氢氧化钠溶液溶解，最终将藻酸盐于无水乙醇中析出，并冷冻干燥后称重，从而确定污泥中的细菌藻酸盐含量的。该测定方法的缺点是测定时间长，尤其是最终用乙醇析出并冷冻干燥的环节较耗费时间，并消耗大量乙醇试剂。此外，在提取过程中会有大量的非藻酸盐杂志掺杂在最终的样品中，比如蛋白质，脂质，细胞残渣等，会严重影响最终称量定量的准确性。故亟需建立一种能够快速准确的测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法。
发明内容：
为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种能够快速准确的测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法。该方法能够大幅缩短污泥中细菌藻酸盐测定的周期，并能够提高测定结果的准确性。
本发明的技术解决方案如下：
1.一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法，其特征包括以下步骤：
(1)污泥清洗干燥：将污泥用去离子水清洗，并在30-80℃下烘干至恒重；
(2)Na2CO3溶液中破碎并加热溶解：将上述干燥后的污泥置于0.2mol/L的Na2CO3溶液中，于匀浆仪中破碎3min，然后于水浴锅中80℃加热1h；
(3)冷却离心：将上述加热后的产物冷却至室温，然后高速离心去除杂质，获得上清液；
(4)调pH值：在上清液中滴入浓度约为1∶4的盐酸溶液调节pH值至2.2，获得藻酸沉淀，然后高速离心收集藻酸沉淀，用去离子水清洗2次；
(5)NaOH溶液中溶解：将上述藻酸沉淀溶解于0.1mol/L的NaOH溶液中，制得细菌藻酸钠溶液。
(6)咔唑硫酸法比色测定：将上述藻酸钠溶液用咔唑硫酸法比色测定，确定溶液中藻酸盐浓度，根据溶液体积确定藻酸盐总含量；
本发明所述的污泥为活性污泥、生物膜、好氧颗粒污泥和厌氧颗粒污泥的一种；
本发明步骤(6)中所述的咔唑硫酸法过程为：
1ml样品与5ml浓度为100mmol/L的H3BO3-浓硫酸溶液混合，再加0.15ml浓度为0.1％的咔唑-乙醇溶液。混匀后于100℃加热15min，流水冷却20min，于530nm波长下比色测定。本方法所用标准物质为市售海藻酸钠(褐藻中提取)，并绘制标准曲线。
本发明的藻酸盐测定方法较传统称重法的优点在于：(1)测定速度快：应用咔唑硫酸法比色测定污泥提取液藻酸盐浓度，省去了用乙醇析出藻酸盐及干燥与称重的过程，大幅节省测定时间；(2)测定准确：咔唑硫酸法能够根据样品中藻酸盐含量不同而显色不同，专一性强，从而避免用称重法测量时样品中其它杂志物质(蛋白质、脂质、细胞残渣等)对藻酸盐含量测定的影响，大幅提升测定准确性；(3)节省试剂成本：避免了对藻酸盐用无水乙醇析出的过程，从而节省了大量的乙醇试剂。
附图说明：
图1为实例中咔唑硫酸法测定藻酸盐的标准曲线。
具体实施方式
下文通过具体测定实例对本发明的方法进行进一步详细阐述。
称取0.375g已干燥的好氧颗粒污泥样品，置于锥形瓶中，加入60ml浓度为0.2mol/L的Na2CO3溶液，于匀浆仪下10000r/min搅拌3min，于80℃水浴加热1h。取出冷却至室温，在转速11000r/min下高速离心，去除残渣。取上清液，用浓度约为1∶4的盐酸溶液调节pH值至2.2，形成絮状沉淀，11000r/min高速离心，去除上清液，并用去离子水清洗2次。沉淀物用浓度为0.1mol/L的NaOH溶液溶解，定容到25ml。该溶液稀释十倍，用咔唑硫酸法比色测定。
咔唑硫酸法测定过程：
(1)标准曲线的绘制：取市售海藻酸钠(褐藻中提取)，配制成浓度梯度为：10、20、40、60、80mg/L的标准溶液；分别取1ml标准溶液样品，加5ml浓度为100mmol/L的H3BO3-浓硫酸试剂，再加0.15ml浓度为0.1％的咔唑-乙醇溶液，混匀后100℃加热15min，流水冷却20min；于530nm波长下比色测定，用去离子水作参比，测定吸光度。标准曲线如图1所示。
(2)样品的测定：取1ml稀释过的待测样品，按与标准曲线相同的步骤测定吸光度。
测定结果：该例中，测定结果及与传统称重法结果对比如下表所示：
表1藻酸盐测定结果及与称重法对比
由表可见，应用本发明方法测定的藻酸盐含量远小于传统称重法所得含量数值。考虑到称重法样品中杂志含量较多，对测定结果影响较大，如样品中蛋白质含量超过60％，故本发明的方法测定的藻酸盐含量更具代表性，更加接近真实值，准确性远高于称重法。

Claims (1)

1.一种测定污泥中细菌藻酸盐含量的方法，其特征包括以下步骤：
(1)污泥清洗干燥：将污泥用去离子水清洗，并在30-80℃下烘干至恒重；
(2)Na2CO3溶液中破碎并加热溶解：将上述干燥后的污泥置于0.2mol/L的Na2CO3溶液中，于匀浆仪中破碎3min，然后于水浴锅中80℃加热1h；
(3)冷却离心：将上述加热后的产物冷却至室温，然后高速离心去除杂质，获得上清液；
(4)调pH值：在上清液中滴入浓度约为1∶4的盐酸溶液调节pH值至2.2，获得藻酸沉淀，然后高速离心收集藻酸沉淀，用去离子水清洗2次；
(5)NaOH溶液中溶解：将上述藻酸沉淀溶解于0.1mol/L的NaOH溶液中，制得细菌藻酸钠溶液。
(6)咔唑硫酸法比色测定：将上述藻酸钠溶液用咔唑硫酸法比色测定，确定溶液中藻酸盐浓度，根据溶液体积确定藻酸盐总含量；
本发明所述的污泥为活性污泥、生物膜、好氧颗粒污泥和厌氧颗粒污泥的一种；
本发明步骤(6)中所述的咔唑硫酸法过程为：
1ml样品与5ml浓度为100mmol/L的H3BO3-浓硫酸溶液混合，再加0.15ml浓度为0.1％的咔唑-乙醇溶液，混匀后于100℃加热15min，流水冷却20min，于530nm波长下比色测定；本方法所用标准物质为市售海藻酸钠(褐藻中提取)，并绘制标准曲线。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN115322342A (zh) * 2022-08-12 2022-11-11 哈尔滨工业大学 序贯式同步回收活性污泥中聚羟基脂肪酸酯和海藻酸盐的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101186655A (zh) * 2007-11-26 2008-05-28 中国海洋大学 一种提取细菌藻酸盐的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101186655A (zh) * 2007-11-26 2008-05-28 中国海洋大学 一种提取细菌藻酸盐的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
候丽: ""海带加工 副产物褐藻胶的综合利用"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115322342A (zh) * 2022-08-12 2022-11-11 哈尔滨工业大学 序贯式同步回收活性污泥中聚羟基脂肪酸酯和海藻酸盐的方法

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