CN108414668A - 一种中药解毒颗粒的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种中药解毒颗粒的检测方法，包括性状、鉴别、含量测定项目，其中，鉴别包括芫花、荆芥、连翘的薄层色谱鉴别，含量测定是金银花中绿原酸的含量测定，本发明针对该中药制剂常规标准的检测方法无法对其有效成分进行相应的检测，以及无法监测药品中是否有伪品芫花的混入而进行的，本发明制定了科学合理、切实可行的成分鉴别和含量测定方法，保证了药品的临床疗效，另一方面，金银花的伪品芫花也能有效的检测，避免了有毒有害的成分危害患者的健康。

Description

一种中药解毒颗粒的检测方法

技术领域

本发明涉及一种中药成方制剂的检测方法，特别涉及一种中药解毒颗粒的检测方法。

背景技术

这种中药解毒颗粒是《卫生部药品标准》中药成方制剂第三册收载的品种，处方为金银花、连翘、薄荷、荆芥、淡豆豉、牛蒡子(炒)、桔梗、淡竹叶、甘草，是纯中药的颗粒剂，它具有疏风解表，清热解毒的作用，目前市场于治疗风热感冒、发热头痛、咳嗽口干、咽喉疼痛常用这种药品。但是，该药品的常规检测标准存在如下问题：一方面，本药品处方中使用了大量的金银花，由于金银花属于常用药，且药食同源，其使用量非常大，但是金银花的产量有限，因此其伪品也就被有意或者无意混入使用，其中有一种很容易混入的伪品是芫花，芫花是瑞香科植物的花，又名闹鱼花、老鼠花，因为有毒，有的地方人们用来毒鱼、毒老鼠，如果有人误用，会对健康造成损害；另一方面是检验方法中使用到了氯仿，即三氯甲烷，其具有较强的毒性，不仅会污染环境，而且还会损害检验人员的健康；第三，标准中的理化鉴别其专属性不强，不能很好地监测药品质量，方法中也没有含量检测项目，所以，寻找一种更好的方法来控制芫花混入，用低毒无毒的试剂代替三氯甲烷，增加含量检测项目，是十分必要的。

发明内容：

本发明的目的是提供一种中药解毒颗粒的检测方法，一方面，增加一个薄层色谱鉴别来监测药品中是否有芫花混入，以防止其对人们的健康造成伤害；另一方面，用低毒无毒的试剂二氯甲烷来代替三氯甲烷、用环己烷代替正己烷，减少对环境造成污染，降低对检验人员的健康造成损害；第三是避免采用专属性不强的理化鉴别方法，同时增加绿原酸的含量测定，来监测金银花的投入，以保证药品质量，保证药品的临床疗效，维护患者的利益。

处方：金银花200g连翘200g薄荷120g荆芥80g淡豆豉100g牛蒡子(炒)120g桔梗120g淡竹叶80g

制法：以上九味，取薄荷、荆芥、连翘蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余金银花等六味分别粉碎，加水煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液及上述水溶液，浓缩成相对密度为1.33～1.35(80℃)的清膏，取清膏，加蔗糖粉、糊精及乙醇适量，制成颗粒，干燥，制成1120g，喷加上述薄荷等挥发油，混匀，即得。

本发明提供了一种中药解毒颗粒的检测方法，包括性状、鉴别、检查、含量测定项目。

其中：

（1）芫花的薄层鉴别：

取本品研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=7～9∶3～5∶0.1～0.3为展开剂，展开，取出晾干，置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别：

取本品研细，加石油醚，密塞，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材，加石油醚，密塞，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=16～18∶2～4为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别：

取本品，研细，加乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材，加水，置水浴中浸渍，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=24～26∶0.5～1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，加热至斑点显色清晰，放冷，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（4）金银花的含量测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=8～10∶89～93为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成溶液，即得；

供试品溶液的制备取本品，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，超声处理，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。

上述鉴别和含量测定方法更具体的步骤如下：

（1）芫花的薄层鉴别是取本品10g，研细，加甲醇25ml，在功率250W、频率25KHz的条件下超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=8∶4∶0.2为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别是取本品10g，研细，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材0.8g，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别是取本品5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材2g，加水40ml，置95～98℃水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=25∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（4）金银花的含量测定是采用照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=9∶91为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，在功率250W、频率40KHz的条件下超声处理10分钟，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含金银花以绿原酸（C₁₆H₁₈O₉）计，每克不得少于0.4mg。

本发明的技术效果：

本发明通过该中药解毒颗粒的检验方法增加一个芫花的薄层色谱鉴别来监测药品中是否有芫花混入，以防止其对人们的健康有害；通过将用到的三氯甲烷用低毒的二氯甲烷试剂代替，用环己烷代替正己烷，降低了对检验人员的健康造成损害，也减少了对环境造成污染；避免采用专属性不强的理化鉴别方法，增加金银花的含量测定，用其主要成分绿原酸来监测金银花的投入，以保证药品质量，保证药品疗效。本发明能更好更全面地反映解毒颗粒的质量，从而保证了药品的疗效和安全，保证了患者的利益，本发明科学合理、切实可行。

具体实施方式

实施例1

处方：金银花200g连翘200g薄荷120g荆芥80g淡豆豉100g牛蒡子(炒)120g桔梗120g淡竹叶80g甘草100g

制法：以上九味，取薄荷、荆芥、连翘蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余金银花等六味分别粉碎，加水煎煮二次，每次1小时，滤过；合并滤液及上述水溶液，浓缩成相对密度为1.33～1.35(80℃)的清膏，取清膏，加蔗糖粉、糊精及乙醇适量，制成颗粒，干燥，制成1120g，喷加上述薄荷等挥发油，混匀，即得。

性状：本品为浅棕色的颗粒；味甜、微苦。

鉴别：（1）芫花的薄层鉴别是取本品10g，研细，加甲醇25ml，在功率250W、频率25KHz的条件下超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=7∶3∶0.1为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别是取本品10g，研细，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材0.8g，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=16∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别是取本品5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材2g，加水40ml，置95～98℃水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=24∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：金银花的含量测定是采用照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=8∶89为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，在功率250W、频率40KHz的条件下超声处理10分钟，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含金银花以绿原酸（C₁₆H₁₈O₉）计，每克含绿原酸0.52mg。

功能与主治：疏风解表，清热解毒。用于风热感冒，症见发热头痛、咳嗽口干、咽喉疼痛。

用法与用量：开水冲服。一次15g，一日3次；重症者加服1次。

规格：每袋装15g。

贮藏：密封。

实施例2

除鉴别和含量测定与实施例1不同,其余方法均相同。

鉴别：（1）芫花的薄层鉴别是取本品10g，研细，加甲醇25ml，在功率250W、频率25KHz的条件下超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=9∶5∶0.3为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别是取本品10g，研细，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材0.8g，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=18∶4为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别是取本品5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材2g，加水40ml，置95～98℃水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=26∶1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：金银花的含量测定是采用照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=10∶93为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，在功率250W、频率40KHz的条件下超声处理10分钟，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含金银花以绿原酸（C₁₆H₁₈O₉）计，每克含绿原酸0.55mg。

实施例3

除鉴别和含量测定与实施例1不同,其余方法均相同。

鉴别：（1）芫花的薄层鉴别是取本品10g，研细，加甲醇25ml，在功率250W、频率25KHz的条件下超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=8∶4∶0.2为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别是取本品10g，研细，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材0.8g，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别是取本品5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材2g，加水40ml，置95～98℃水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=25∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：金银花的含量测定是采用照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=9∶91为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，在功率250W、频率40KHz的条件下超声处理10分钟，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含金银花以绿原酸（C₁₆H₁₈O₉）计，每克含绿原酸0.56mg。

Claims (2)

1.一种中药解毒颗粒的检测方法，该检测方法包括鉴别及含量测定，其特征在于：

（1）芫花的薄层鉴别：

取本品研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=7～9∶3～5∶0.1～0.3为展开剂，展开，取出晾干，置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点；

（2）荆芥的薄层鉴别：

取本品研细，加石油醚，密塞，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材，加石油醚，密塞，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=16～18∶2～4为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）连翘的薄层鉴别：

取本品，研细，加乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材，加水，置水浴中浸渍，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=24～26∶0.5～1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，加热至斑点显色清晰，放冷，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（4）金银花的含量测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=8～10∶89～93为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成溶液，即得；

供试品溶液的制备取本品，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，超声处理，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.根据权利要求1所述的中药解毒颗粒的检测方法，其特征在于：

（1）所述芫花的薄层鉴别是取本品10g，研细，加甲醇25ml，在功率250W、频率25KHz的条件下超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取芫花素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸=8∶4∶0.2为展开剂，展开，取出晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点；

（2）所述荆芥的薄层鉴别是取本品10g，研细，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为供试品溶液，另取荆芥对照药材0.8g，加60～90℃石油醚20ml，密塞，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至1ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的环己烷∶乙酸乙酯=17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（3）所述连翘的薄层鉴别是取本品5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液，另取连翘对照药材2g，加水40ml，置95～98℃水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的二氯甲烷∶甲醇=25∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比计的醋酐∶硫酸=20∶1溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（4）所述金银花的含量测定是采用照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比计的乙腈∶0.3%磷酸溶液=9∶91为流动相，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15µg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，在功率250W、频率40KHz的条件下超声处理10分钟，放冷，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。