CN108349964A - N-（吡啶-2-基）-4-（噻唑-5-基）嘧啶-2-胺类化合物作为治疗性化合物 - Google Patents

N-（吡啶-2-基）-4-（噻唑-5-基）嘧啶-2-胺类化合物作为治疗性化合物 Download PDF

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Abstract

一类新颖的蛋白激酶抑制剂，其可用于治疗细胞增殖性疾病，特别是特征在于过度表达CDK4，CDK6和/或细胞周期蛋白D的癌症，如肺癌，乳腺癌，脑癌，中枢神经系统癌，结肠直肠癌和白血病。该抑制剂具有一般结构Ⅰ：

Description

N-(吡啶-2-基)-4-(噻唑-5-基)嘧啶-2-胺类化合物作为治疗 性化合物
技术领域
本发明涉及一类新颖的可用于治疗细胞增殖性疾病和病症包括癌症在内的蛋白激酶抑制剂。
优先权文件
本申请要求于2015年8月4日提交的标题为“新型激酶抑制剂II”的澳大利亚临时专利申请号2015903106的优先权，其内容通过引用整体并入本文。
参考引用
以下出版物在本文中被引用，并且其内容通过引用整体并入本文：
常州英诺升康生物医药科技有限公司名下的国际专利申请号PCT/GB2013/050982(WO2013/156780)，标题为“治疗性化合物”。
背景技术
目前仍然需要鉴定和开发用于治疗包括癌症在内的增殖性疾病和病症的新化合物。其中研究的潜在抗增殖化合物的众多“靶点”是被称为蛋白激酶的酶组。
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)是一种蛋白激酶。已知它们与各种细胞周期蛋白亚基相关，在细胞各种重要的调节通路的调节中起关键作用，包括细胞周期控制，细胞凋亡，神经元生理机能，分化和转录。目前总共有超过20种CDK，根据他们的功能主要分为两类：即细胞周期调节剂CDK和转录调节剂CDK。细胞周期调节剂CDK的类别包括CDK1、CDK2、CDK3、CDK4和CDK6，并且它们与其细胞周期蛋白配体(例如细胞周期蛋白A、B、D1、D2、D3、E和F)起作用以调节细胞周期的促进。包括CDK7、CDK8、CDK9和CDK11在内的转录调节剂CDK的类别与细胞周期蛋白C、H、K、LI、L2、T1和T2一起起作用，并倾向于在转录调节中起作用。鉴于这两种CDK类别的功能，CDK与细胞增殖性疾病和病症特别是癌症密切相关，也许就并不奇怪了。细胞增殖是细胞分裂周期直接或间接失控的后果，CDK在调节该周期的各个阶段调节中起关键作用。因此，CDK及其相关细胞周期蛋白的抑制剂被认为是癌症治疗的有用靶点。
某些嘧啶类化合物已经被研究用于治疗包括癌症在内的细胞增殖性疾病和病症，例如4-噻唑-2-吡啶氨基-嘧啶和5-取代-4-噻唑-嘧啶(分别参见国际公开专利WO2005/012298和WO2013/156780)。这些化合物能抑制多种蛋白激酶，特别是CDK，包括CDK1/细胞周期蛋白B，CDK2/细胞周期蛋白E，CDK2/细胞周期蛋白A，CDK4/细胞周期蛋白D1，CDK7/细胞周期蛋白H和CDK9/细胞周期蛋白T1。
本申请现在已经确定了一类新的噻唑嘧啶化合物，用于预防和/或治疗包括癌症在内的增殖性疾病和病症。虽然不希望受理论束缚，但是认为这些新化合物能够通过抑制CDK4和/或CDK6的活性来抑制细胞增殖。
概要
本发明的第一方面提供了下文所示的式Ⅰ化合物：
其中：
z表示任选的键，使N原子和相邻碳原子之间的键可以是单键或双键；
R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7各自独立选自以下基团包括H，烷基，烷基-R10，芳基，芳基-R10，芳烷基，芳烷基-R11，卤素，NO2，CN，CF3，OH，O-烷基，COR10，COOR10，O-芳基，O-R10，NH2，NH-烷基，NH-芳基，N-(烷基)2，N-(芳基)2，N-(烷基)(芳基)，NH-R10，N-(R10)(R11)，N-(烷基)(R10)，N-(芳基)(R10)，SH-烷基，SH-芳基，S-(烷基)2，S-(芳基)2，S-(烷基)(芳基)，SH-R10，S-(R10)(R11)，S-(烷基)(R10)，S-(芳基)(R10)，COOH，CONH2，CONH-烷基，CONH-芳基，CON-(烷基)(R10)，CON-(芳基)(R10)，CONH-R10，CON-(R10)(R11)，SO3H，SO2-烷基，SO2-烷基-R10，SO2-芳基，SO2-芳基-R10，SO2NH2，SO2NH-R10，SO2N-(R10)(R11)，CF3，CO-烷基，CO-烷基-R10，CO-芳基，CO-芳基-R10和R12，其中所述烷基、芳基和芳烷基可以任选地被一个或多个选自卤素，CN，OH，O-甲基，NH2，COOH，CONH2和CF3的基团取代，并且当不存在z键时，R1与R8一起成为＝O或＝S；
当z键不存在时，R8和R1一起是＝O或＝S，或当z键存在时，R8不存在；
当z键不存在时，R9是H，烷基，芳基或杂环基，或当z键存在时，R9不存在；和
R10，R11，R12独立选自水增溶基团；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
第二方面，本发明提供了如第一方面定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药的用途，其可用于治疗癌症或其它细胞增殖性疾病或病症。
第三方面，本发明提供了治疗受试者的癌症或其他细胞增殖性疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，任选与药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂组合。
第四方面，本发明提供了如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药在制备药物中的用途，所述药物用于治疗癌症或其他细胞增殖性疾病或病症。
第五方面，本发明提供一种药物组合物或药剂，包含如第一方面中定义的化合物和其药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。
第六方面，本发明提供了调节细胞中蛋白激酶活性的方法，包括向所述细胞导入或接触有效量如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
附图说明
图1提供了本发明代表性化合物(即本文所述的化合物60)的细胞周期分析的结果图，其中急性骨髓性白血病细胞系MV4-11的细胞用所示浓度的60处理24小时；和
图2提供了使用本发明的代表性化合物(即本文所述的化合物47)的细胞凋亡检测获得的结果图，其中MV4-11细胞用浓度为0.25μM、1.25μM和2.50μM的47处理24小时。
详细说明
本申请已经确定了一类新的4-噻唑-N-(吡啶-2-基)嘧啶-2-胺类衍生物，可用于预防和/或治疗包括癌症在内的增殖性疾病和病症，其具有令人满意的生物活性(如能通过抑制CDK4和/或CDK6的活性来抑制细胞增殖)。
第一方面，本发明提供了如下所示的式Ⅰ化合物：
其中：z表示任选的键，使N原子和相邻碳原子之间的键可以是单键或双键；
R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7各自独立选自以下基团包括H，烷基，烷基-R10，芳基，芳基-R10，芳烷基，芳烷基-R11，卤素，NO2，CN，CF3，OH，O-烷基，COR10，COOR10，O-芳基，O-R10，NH2，NH-烷基，NH-芳基，N-(烷基)2，N-(芳基)2，N-(烷基)(芳基)，NH-R10，N-(R10)(R11)，N-(烷基)(R10)，N-(芳基)(R10)，SH-烷基，SH-芳基，S-(烷基)2，S-(芳基)2，S-(烷基)(芳基)，SH-R10，S-(R10)(R11)，S-(烷基)(R10)，S-(芳基)(R10)，COOH，CONH2，CONH-烷基，CONH-芳基，CON-(烷基)(R10)，CON-(芳基)(R10)，CONH-R10，CON-(R10)(R11)，SO3H，SO2-烷基，SO2-烷基-R10，SO2-芳基，SO2-芳基-R10，SO2NH2，SO2NH-R10，SO2N-(R10)(R11)，CF3，CO-烷基，CO-烷基-R10，CO-芳基，CO-芳基-R10和R12，其中所述烷基、芳基和芳烷基可以任选被一个或多个选自卤素，CN，OH，O-甲基，NH2，COOH，CONH2和CF3的基团取代，并且当不存在键z时，R1与R8一起且是＝O或＝S；
当z键不存在时，R8和R1一起是＝O或＝S，或当z键存在时，R8不存在；
当z键不存在时，R9是H，烷基，芳基或杂环基，或当z键存在时，R9不存在；和
R10，R11，R12独立选自水增溶基团；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
在一些实施方案中，式Ⅰ化合物可优选包含至少一种水增溶(solubilising)基团R10、R11或R12。即，在这些实施方案中，化合物如段落[0018]中所定义，条件是所述化合物包括至少一个所述R10，R11和R12基团。本申请人发现，尽管添加了这样的增溶基团，该化合物仍具有令人满意的生物活性(例如通过抑制CDK4和/或CDK6的活性)。至少一种水增溶基团的存在可增强体内吸收和口服生物利用度。
已经发现式Ⅰ化合物具有抗增殖活性，因此被认为可用于治疗细胞增殖性疾病和病症如癌症，白血病，淋巴瘤以及与不受控制的细胞增殖相关的其它疾病和病症(或者，换句话说，需要控制细胞周期)，例如一些心血管疾病或病症如再狭窄和心肌病，一些自身免疫性疾病如肾小球性肾炎和类风湿性关节炎，皮肤病如牛皮癣、真菌或寄生虫病。如本文所用，在本发明范围内的抗增殖作用可以通过在体外全细胞测定中抑制细胞增殖的能力来证明。这些测定法，包括其性能的方法，会在下文提供的实施例中更详细地描述。
式I的化合物可以抑制细胞周期中的任何步骤或阶段，例如核包膜的形成，从细胞周期的静止期(G0)退出，G1进展，染色体解聚，核包膜分解，START，DNA复制的引发，DNA复制的进展，DNA复制的终止，中心体复制，G2进展，有丝分裂或减数分裂功能的活化，染色体聚集，中心体分离，微管成核，纺锤体形成和作用，与微管动力蛋白的相互作用，染色单体分离(separation)和隔开(segregation)，有丝分裂功能的失活，收缩环的形成和胞质分离功能。另外，式I化合物可影响某些基因功能，例如染色质结合，复制复合体的形成，复制许可，磷酸化或其他二级修饰活性，蛋白水解性降解，微管结合，肌动蛋白结合，隔膜蛋白(septin)结合，微管组织中心成核活性和与细胞周期信号通路成分的结合。
第二方面，本发明提供了如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药的用途，其可用于治疗癌症或其它细胞增殖性疾病或病症。
第三方面，本发明提供了治疗受试者的癌症或细胞增殖性疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，任选与药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂组合。
第四方面，本发明提供了如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药在制备药物中的用途，所述药物用于治疗癌症或其他细胞增殖性疾病或病症。
第五方面，本发明提供一种药物组合物或药剂，包括如第一方面中定义的化合物和其药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。
第六方面，本发明提供了调节细胞中蛋白激酶活性的方法，包括向所述细胞导入或接触有效量如第一方面中定义的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
在该说明书中，本文使用了本领域技术人员众所周知的许多术语。然而，为了清楚的目的，这些术语中的一些在下文中被定义。
如本文所用，术语“治疗”包括预防和缓解病症的已确立的症状。因此，“治疗”疾病或病症的行为包括：(1)预防或延迟患有或易患有疾病或病症的受试者中发展的疾病或病症的临床症状的出现；(2)抑制疾病或病症，即阻止、减少或延迟疾病或病症的发展或其复发(在维持治疗的情况下)或其至少一种临床或亚临床症状；和(3)缓解或减轻疾病或病症(即引起疾病或病症或其至少一种临床或亚临床症状的消退)。
如本文所用，术语“烷基”包括具有1至8个碳原子的直链和支链烷基(如甲基、乙基丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等)。
如本文所用，术语“芳基”是指取代的(单或多)或未取代的单芳族或多芳族基团，其中所述多芳族基团可以是稠合的或不稠合的。因此，术语“芳基”包括具有6至10个碳原子的基团(例如苯基，萘基等)。也应理解术语“芳基”与术语“芳香族”同义。
如本文所用，术语“芳烷基”是指如上文定义的术语烷基和芳基的结合。
如本文所用，术语“脂环族”是指环脂肪族基团。
术语“脂肪族”在本领域中具有通常含义包括非芳香基团如烷烃、烯烃和炔烃及其取代的衍生物。
术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
如本文所用，术语“杂环基”是指在环中包含一个或多个杂原子的饱和或不饱和的环状基团。
如本文使用的术语“衍生物”包括实体的任何化学修饰。这种化学修饰的实例是用卤素基团、烷基、酰基或氨基取代氢。
如本文所用，短语“制备药物”包括使用一种或多种式Ⅰ化合物直接作为药物或在制备包含一种或多种式Ⅰ化合物的药物的任何阶段。
一些式I化合物可以作为单立体异构体、外消旋体、和/或对映异构体和/或非对映异构体的混合物存在。所有这些单立体异构体，外消旋体及其混合物都包括在本发明的范围内。可以通过本领域技术人员已知的物理和/或化学方法分离异构体形式如非对映异构体、对映异构体和几何异构体。
如本文所用术语“药学上可接受的盐”指的是保持式Ⅰ化合物的所需生物活性的盐，包括药学上可接受的酸加成盐和碱加成盐。式Ⅰ化合物的合适的药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。这种无机酸的实例包括盐酸、硫酸和磷酸。适合的有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳香族、杂环羧酸和磺酸类的有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、丁二酸、甘醇酸，葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、富马酸、马来酸、烷基磺酸和芳基磺酸。药学上可接受的盐的附加信息参见雷明顿的制药科学(Remington's PharmaceuticalSciences),第19版,麦克出版公司(Mack Publishing Co.),Easton,PA 1995。
在式Ⅰ化合物为固体的情况下，本领域技术人员应理解化合物(或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药)可能存在不同的晶型或多晶型，所有这些都包含在本发明的范围内。
“前药”是指在生物系统中，通常通过代谢手段(如通过水解、还原或氧化)转化成式Ⅰ化合物的化合物。例如，含羟基的式Ⅰ化合物的酯类前药可在体内通过水解转化为式Ⅰ化合物。含羟基的式Ⅰ化合物的合适的酯类可能是，例如：乙酸酯、柠檬酸酯、乳酸酯、酒石酸酯、丙二酸酯、草酸酯、水杨酸酯、丙酸酯、丁二酸酯、富马酸酯、马来酸酯、亚甲基-双-P-羟基萘甲酸酯(methylene-bis-P-hydroxynaphthoates)，龙胆酸酯(gestisates)，羟乙基磺酸酯，二对甲苯甲酰基酒石酸酯，甲磺酸酯，乙磺酸酯，苯磺酸酯，对甲苯磺酸酯，环己基氨基磺酸酯(cyclohexylsulfamates)和奎宁酸酯(quinates)。作为另一个实例，含有羧基的式Ⅰ化合物的酯类前药可以通过体内水解转化为式Ⅰ化合物。所述酯类前药的实例参见Leinweber FJ，Dmg Metab Rev 18：379-439(1987)。类似的，含有氨基的式Ⅰ化合物的酰基前药可通过体内水解转化为式Ⅰ化合物。这些和其他官能团(包括胺)的前药的例子参见《前药：挑战和奖励》，瓦伦蒂诺J斯特拉(主编)，施普林格，2007年(Prodrugs：challenge and rewards，Valentino J Stella(ed)，Springer，2007)。
术语“治疗有效量”或“有效量”是足以产生有益或期望的临床结果的量。治疗有效量可以单次或多次给药。通常，治疗有效量足以治疗疾病或病症或至少缓解，改善，稳定，逆转，减缓或延迟疾病或病症例如癌症或其它细胞增殖性疾病或病症的进展。仅作为实例，治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药可以含每天约0.1～250mg/kg体重，更优选每天约0.1～100mg/kg体重，还更优选每天约0.1～25mg/kg体重。然而，尽管如此，本领域技术人员应理解，治疗有效量可以变化并且取决于多种因素，包括特定化合物(或其盐、溶剂合物或前药)的活性、代谢稳定性、特定化合物(或其盐、溶剂合物或前体药物)作用时间长短，年龄、体重、性别、健康状况、施用途径、施用时间、特定化合物(或其盐、溶剂合物或前药)的排泄速率和待治疗例如癌症或其他细胞增殖性疾病或病症的严重性。
式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物和前药能够抑制蛋白激酶，特别是CDK，并且与其它蛋白激酶相比，它(对抑制)CDK4和/或CDK6显示更高的选择性。如上所述，CDK4和CDK6能促进癌细胞增殖。因此，被认为能抑制CDK4和/或CDK6的式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物和前药在体外和体内应用中均有用(例如体外细胞实验)，且它可作为治疗受试者中癌症或其他细胞增殖性疾病或病症的治疗方法的基础。
式Ⅰ化合物具有通过环碳原子之一(特别是4位碳)连接到嘧啶环上的噻唑基团。
式Ⅰ化合物可具有至少一个水增溶基团(例如由R10、R11和/或R12提供)。术语“水增溶基团”将被本领域技术人员很好地理解为指任何极性官能团，其可以离子化或能够与水分子形成氢键以增加化合物的水溶性(即相对于缺乏水增溶基团的相应化合物的水溶性)。合适的水增溶基团的实例及其引入的方法和考虑因素描述参见Gareth Thomas的药物化学基础(Fundamentals of Medicinal Chemistry)(出版社：John Wiley&Sons)。
优选地，当存在时，R10和R11独立优选自以下组中的水增溶基团：
(ⅰ)单-，双-和多羟基化脂环基、双-或多羟基化脂肪基或芳基、一个或多个羟基或氨基取代的含N、O和/或S的杂环基、含一个或多个酰胺、亚砜、砜或磺酰胺的脂肪基和芳基，和卤代烷基羰基；和
(ⅱ)COOH，SO3H，OSO3H，PO3H2和OPO3H2。
优选地，当存在时，R12选自以下组中的水增溶基团：
(ⅰ)单-，双-和多羟基化脂环基、双-或多羟基化脂肪基或芳基、一个或多个羟基或氨基取代的含N、O和/或S的杂环基、含一个或多个酰胺、亚砜、砜或磺酰胺的脂肪及和芳基，和卤代烷基羰基；
(ⅱ)COOH，SO3H，OSO3H，PO3H2和OPO3H2；
(ⅲ)NHCO(CH2)m[NHCO(CH2)m’]P[NHCO(CH2)m”]qY和
NHCO(CH2)tNH(CH2)t’Y其中p和q各自独立地选自0或1的整数，且m，m’，
m”，t和’各自独立地选自1至10整数，且Y选自：
(a)脂环族、芳基和含一个或多个O-、S-或N-杂原子的杂环基，其可以进一步包含烷基桥(例如-CH2-或-CH2CH2-桥)；
(b)包含一个或多个-O-、NH2、-NH-、＝N-的脂环基、季铵盐、脒，和
(c)吗啉、哌嗪或1,4-二氮杂环庚烷基，其各自可以任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：SO2-烷基、任选地被一个或多个OH取代的烷基、CO-烷基、芳烷基，COO-烷基和任选地被一个或者多个OH取代的醚基团；
(ⅳ)(CH2)nNR13COR14，(CH2)n'NR13SO2R14和SO2R15，其中R13选自H和烷基，R14和R15各自独立选自任选地含一个或多个杂原子的烷基和/或任选地被一个或多个独立地选自OH，NH2，卤素和NO2的取代基取代，n和n’各自独立地选自整数0，1，2或3；
(ⅴ)任选被一个或多个OH或Y取代的醚和聚醚，其中Y如在(iii)中所定义；
(ⅵ)(CH2)rNH2，其中r选自整数0，1，2或3；
(ⅶ)(CH2)r’OH，其中r’选自整数0，1，2或3；
(ⅷ)(CH2)n”NR16COR17，其中R16是H或烷基，n”选自整数0，1，2或3，且R17是任选被一个或多个选自卤素、NO2、OH、烷氧基、NH2、COOH、CONH2和CF3的取代基取代的芳基；和
(ⅸ)SO2NR18R19，其中R18和R19各自独立地选自H，烷基和芳基，条件是R18和R19中的至少一个不是H，或者R18和R19形成任选地含一个或多个选自N、O和S的杂原子的环基，其中所述烷基、芳基或环基可任选被一个或多个选自卤素、NO2、OH、烷氧基、NH2、COOH、CONH2和CF3的取代基所取代。
在一些实例中，所述化合物为如下所示的式Ⅱ化合物：
其中R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7的定义如同式Ⅰ。
在一些实例中，所述化合物为如下所示的式Ⅲ化合物：
其中R2，R3，R4，R5，R6和R7的定义如同式Ⅰ，R8和R1一起是＝O或＝S，R9是H、烷基(例如C1-6烷基，或优选为C1-3烷基如甲基和乙基，和环戊基)、芳基或杂环基。
在一些实例中，R1是H、烷基(例如C1-6烷基或优选为C1-3烷基如甲基，乙基和C(CH3)2)、芳基、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基如NH(C5H9)(即NH-环戊基)，或优选为NH-C1-3烷基例如NH-CH3)、N(烷基)2(例如N(C1-6烷基)2，例如N(C5H9)2或者N(C1-3烷基)2例如N(CH3)2)、NH-芳基，N-(烷基)(芳基)，SH-烷基(例如SH-C1-6烷基，或优选为SH-C1-3烷基如SHCH3和SHC(CH3))或R12。当R1是R12时，R12优选为单-、双-或多羟基化脂环基或被一个或多个羟基或氨基取代的含N、O和/或S的杂环基。
在一些实例中，R2是H，烷基(例如C1-6烷基或优选为C1-3烷基如甲基或乙基)、芳基、CN、CF3、NH2、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基如NH(C5H9)，或优选为NH-C1-3烷基例如NH-CH3)、N(烷基)2(例如N(C1-6烷基)2例如N(C5H9)2，或者N(C1-3烷基)2例如N(CH3)2)、N-(烷基)(芳基)或R12。当R2是R12时，R12优选为单-、双-或多羟基化的脂环基或被一个或多个羟基或氨基取代的含N、O和/或S的杂环基。
在一些实例中，R3是H，烷基(例如C1-6烷基，或优选为C1-3烷基如甲基或乙基)、CN或卤素(优选为F)。
在一些实例中，R4是H，O-烷基(优选为C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基如甲氧基或乙氧基)或卤素(优选为F)。
在一些实例中，R5和R6中的至少一个，但优选R5，是R12，其中R12优选为被一个或多个羟基、氨基或烷氧基(如-COCH3)取代的含N、O和/或S的杂环基。杂原子优选是N。
在一些实例中，当R5和R6中的至少一个为R12时，R12优选自以下基团：
任选地，前述段落[0055]中所示的R12取代基还可以在吡啶/苯环的第4/5位碳原子上进一步包含烷基桥(例如-CH2-或-CH2CH2-桥)。
当R5为R12时，R6优选为H。反之亦然，当R6为R12时，R5优选为H。
在一些实例中，R7是H。
在一些实例中，R5是R12，且R2，R3，R4，R6和R7各自独立选自H、烷基(例如C1-6烷基或优选为C1-3烷基)、芳基、脂环基、杂环基、卤素、NO2、CN、CF3、OH、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基如甲氧基或乙氧基)、NH2、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基如NH(C5H9)，或优选为NH-C1-3烷基例如NH-CH3)或N(烷基)2(例如N(C1-6烷基)2例如N(C5H9)2，或者N(C1-3烷基)2例如N(CH3)2)。
在一些实例中，化合物是式Ⅱ化合物，且R5是R12，R1是烷基(例如C1-6烷基如环戊基，或优选为C1-3烷基如甲基和乙基)、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)、N(烷基)2(例如N(C1-6烷基)2，例如N(C5H9)2或者N(C1-3烷基)2例如N(CH3)2)、NH(芳基)、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或优选为C1-3烷氧基)，S-烷基(例如S-C1-6烷基或S-C1-3烷基)或NH2，且R2，R3，R4，R6和R7各自独立选自H、烷基(例如C1-6烷基如环戊基或C1-3烷基)、卤素、CN、CF3、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基)、NH2或NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)。
在一些实例中，化合物是式Ⅱ化合物，且R5是R12，R1是烷基(例如C1-6烷基如环戊基或C1-3烷基如甲基和乙基)、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)、N(烷基)2(例如N(C1-6烷基)2，或更优选为N(C1-3烷基)2)、NH(芳基)、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基)，S-烷基(例如S-C1-6烷基或S-C1-3烷基)或NH2。R3选自H、烷基、卤素或CN，且R2，R4，R6和R7各自独立选自H、烷基(例如C1-6烷基如环戊基或C1-3烷基)、卤素、CN、CF3、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基)、NH2或NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)。
一些实例中，化合物是式Ⅲ化合物，且R5是R12，且R2、R3、R4、R6和R7各自独立选自H、烷基(例如C1-6烷基如环戊基或C1-3烷基)、卤素、CN、CF3、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基)、NH2或NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)。
一些实例中，化合物是式Ⅲ化合物，且R5是R12，R3选自H、烷基(例如C1-6烷基如环戊基或C1-3烷基)、卤素、CN，且R2、R4、R6和R7各自独立选自H、烷基(例如C1-6烷基如环戊基，或C1-3烷基)、卤素、CN、CF3、O-烷基(例如C1-6烷氧基，或更优选为C1-3烷氧基)、NH2、NH-烷基(例如NH-C1-6烷基，或优选为NH-C1-3烷基)。
在一些优选的实例中，如通过标准细胞毒性实验所测定，本发明的化合物在人类细胞系中表现出抗增殖活性。优选地，如通过下文实施例2中所述的细胞活力(MTT增殖)实验所测定，所述化合物表现出IC50值小于5μM，优选值小于1μM。更优选地，所述化合物表现出IC50值小于0.5μM。
在一些优选的实例中，如通过本领域技术人员熟知的任何标准实验所测量，本发明的化合物能抑制一种或多种蛋白激酶。优选地，如通过下文实施例2中描述的激酶实验所测定，所述化合物表现出IC50值小于1μM或小于0.5μM，更优选地小于0.1μM。
第一方面的化合物的具体实例示参见下表1。
表1本发明的所选化合物的化学结构
化合物(及其药学上可接受的盐、溶剂合物和前药)可以与一种或多种另外的用于治疗癌症或其它增殖性疾病或病症的药剂组合施用。例如，化合物可以与其它抗癌剂组合使用以同时抑制多种癌症信号传导通道，以使癌细胞对抗癌疗法(例如用其它抗癌剂，化疗，放疗或其组合)更为敏感。因此，式Ⅰ化合物可以与一种或多种以下类别的抗癌剂组合使用：
如用于医学肿瘤学中的其他抗增殖/抗肿瘤药物及其组合，例如烷化剂(例如顺铂，奥沙利铂，卡铂，环磷酰胺，氮芥，美法仑，苯丁酸氮芥，白消安，替莫唑胺和亚硝基脲)；抗代谢药(例如吉西他滨和抗叶酸剂如氟嘧啶比如5-氟尿嘧啶和替加氟，雷替曲塞，甲氨蝶呤，阿糖胞苷，氟达拉滨和羟基脲)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类药物如阿霉素，博来霉素，多柔比星，道诺霉素，表柔比星，伊达比星，丝裂霉素-C，更生霉素和光辉霉素)；抗有丝分裂药(例如长春花生物碱如长春新碱、长春花碱、长春地辛和长春瑞滨，紫杉烷类包括紫杉醇和多烯紫杉醇和polo激酶(polokinase)抑制剂)；和拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素如依托泊苷和替尼泊苷，安吖啶，托泊替康和喜树碱)；
细胞抑制剂如抗雌激素药(例如他莫昔芬，氟维司群，托瑞米芬，雷洛昔芬，屈洛昔芬和艾多昔芬(iodoxyfene))，抗雄激素药(例如比卡鲁胺，氟他胺，尼鲁他胺和醋酸环丙孕酮)，LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如戈舍瑞林(goserelin)，亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素(例如醋酸甲地孕酮)，芳香酶抑制剂(如阿那曲唑，来曲唑，伏立唑(vorazole)和依西美坦)和5α还原酶抑制剂如非那雄胺；
抗侵袭剂(例如c-Src激酶家族抑制剂如4-(6-氯-2,3-亚甲基二氧苯胺基)-7-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基]-5-四氢吡喃-4-基氧基喹唑啉(AZD0530；国际公开专利号WO 01/94341)，N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-{6-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基嘧啶-4-基氨基}噻唑-5-甲酰胺(达沙替尼)和伯舒替尼(SKI-606))和金属蛋白酶抑制剂，包括马立马司他、尿激酶纤溶酶原激活物受体功能抑制剂或抗乙酰肝素酶抗体；
生长因子功能抑制剂(如生长因子抗体和生长因子受体抗体如抗erbB2抗体曲妥珠单抗(赫赛汀TM)，抗EGFR抗体帕尼单抗，抗erbB1抗体西妥昔单抗(爱必妥，C225)和由Stern等人.肿瘤学/血液学评论(Critical reviews in oncology/haematology)，2005，Vol.54，pp11-29公开的任何生长因子或生长因子受体抗体)。这类抑制剂还包括酪氨酸激酶抑制剂，例如表皮生长因子家族抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂如：N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，ZD1839)、N-(3-乙炔苯基)-6,7-双(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-胺(厄洛替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI1033)，erbB2酪氨酸激酶抑制剂如拉帕替尼)；肝细胞生长因子家族抑制剂；胰岛素生长因子家族抑制剂；血小板衍生生长因子家族抑制剂，如伊马替尼和/或尼洛替尼(AMN107)；丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(例如Ras/Raf信号传导抑制剂，如法尼基转移酶抑制剂包括索拉非尼(BAY 43-9006)、替吡法尼(R115777)和洛那法尼(SCH66336))、通过MEK和/或AKT激酶的细胞信号传导抑制剂、c-kit抑制剂、abl激酶抑制剂、PI3激酶抑制剂、Plt3激酶抑制剂、CSF-1R激酶抑制剂、IGF受体(胰岛素样生长因子)激酶抑制剂；极光激酶(aurora kinase)抑制剂(例如AZD1152，PH739358，VX-680，MLN8054，R763，MP235，MP529，VX-528和AX39459)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂如CDK2和/或CDK9抑制剂；
抗血管生成剂如抑制血管内皮生长因子作用的那些(例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗(阿瓦斯丁TM)和VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂如凡德他尼(ZD6474)、瓦他拉尼(PTK787)、舒尼替尼(SU11248)、阿西替尼(AG-013736)、帕唑帕尼(GW 786034)和4-(4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基)-6-甲氧基-7-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)喹唑啉(AZD2171；国际公开专利号WO 00/47212中的实施例240)，化合物如国际公开专利号WO97/22596、WO97/30035、WO97/32856和WO98/13354中公开的化合物，以及通过其它机理起作用的化合物(如利诺胺、整合素avb3功能抑制剂和血管抑素)；
血管损伤剂如康普瑞汀A4和国际公开专利号WO 99/02166、WO 00/40529、WO00/41669、WO 01/92224、WO02/04434和WO 02/08213公开的化合物；
内皮素受体拮抗剂，如齐泊腾坦(ZD4054)或阿曲生坦；
反义疗法如针对上述靶标的那些，如ISIS 2503，抗ras反义物(an anti-rasantisense)；
基因疗法，包括替代异常基因如异常p53或异常BRCA1或BRCA2的方法，GDEPT(基因介导的酶前药治疗)方法如使用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的方法和增加患者对化疗或放疗耐受性的方法，例如多药抗性基因治疗；和
免疫治疗法，包括例如体外和体内方法来增加患者肿瘤细胞的免疫原性，例如转染细胞因子如白细胞介素2，白细胞介素4或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，降低T细胞失能的方法，使用转染的免疫细胞如细胞因子转染的树突状细胞的方法，使用细胞因子转染的肿瘤细胞株的方法和使用抗独特型抗体的方法。
当与其它抗癌剂组合使用时，本发明化合物和其它抗癌剂可以以相同的药物组合物或分开的药物组合物施用。如果在分开的药物组合物中施用，则化合物和其它抗癌剂可以以任何顺序(例如在几秒或几分钟甚至几小时内(例如2到48小时))同时或依次施用。
本发明通常用于治疗人类受试者中的癌症或其它细胞增殖疾病或病症。然而，该受试者也可以选自例如家畜(例如牛，马，猪，绵羊和山羊)，宠物(例如狗和猫)和野外动物(例如非人灵长类，老虎，大象等)。
可以根据本发明治疗的癌症和其他细胞增殖疾病和病症包括胆道癌、脑癌(包括成胶质细胞瘤和成神经管细胞瘤)、乳腺癌、子宫颈癌、绒毛膜癌、结肠癌、子宫内膜癌、食道癌、胃癌、血液肿瘤(包括急性淋巴细胞白血病(ALL))、慢性淋巴细胞白血病(CLL)和慢性骨髓性白血病(CML)、急性骨髓性白血病(AML)、多发性骨髓瘤、AIDS相关白血病和成人T细胞白血病淋巴瘤、上皮内肿瘤(包括鲍温氏(Bowen's)病和佩吉特氏(Paget's)病)、肝癌、肺癌、淋巴瘤(包括霍奇金氏(Hodgkin's)疾病和淋巴细胞淋巴瘤)、成神经细胞瘤、口腔癌(包括鳞状细胞癌)、卵巢癌(包括上皮细胞、间质细胞、生殖细胞和间充质细胞)、胰腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肉瘤(包括平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤))、皮肤癌(包括黑素瘤、卡波西(Kaposi's)肉瘤、基底细胞癌和鳞状细胞癌)、睾丸癌(包括生殖(germinal)肿瘤如精原细胞瘤、非精原细胞畸胎瘤和绒毛膜癌等)、间质瘤、生殖细胞肿瘤、甲状腺癌(包括甲状腺腺癌和髓质癌)和肾癌(包括腺癌和维尔姆斯(Wilms)瘤)。
在一些实例中，本发明的化合物用于治疗特征在于CDK4和/或细胞周期蛋白D过度表达的癌症，包括如肺癌(Wu等人,J TransI Med 9:38(2011))，乳腺癌(An等人,Am JPathol154(1)：113-118(1999))，中枢神经系统癌(CNS)和结肠直肠癌(Ikeda等人,Jap JClin Med 54(4)：1054-1059(1996))。例如通过使用任何本领域技术人员已知的任何技术(例如定量扩增技术，如qPCR)，评估在合适的样品中编码CDK4和/或细胞周期蛋白D的mRNA的量来测定CDK4和/或细胞周期蛋白D过表达。
在一些实例中，本发明的化合物用于治疗特征在于过度表达CDK6和/或细胞周期蛋白D的癌症，包括如T细胞急性成淋巴细胞白血病(ALL)、结肠直肠癌和髓母细胞瘤(参见Tadesse等人，细胞循环(Cell Cycle).14(20)：3220-30，2015)。例如通过使用任何本领域技术人员已知的方法来测定(例如定量扩增技术，如qPCR)，评估在合适的样品中编码CDK6和/或细胞周期蛋白D的mRNA的量来测定CDK6和/或细胞周期蛋白D过表达。
本发明的化合物可以与药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂一起配制成药物组合物。合适的载体和稀释剂的实例是本领域技术人员公知的，并且描述于例如雷明顿药物科学，麦克出版公司.，Easton，PA 1995。用于本文描述的各种不同形式的药物组合物的合适赋形剂的实例可以在由A Wade and PJ Weller编辑的药用赋形剂手册(Handbook ofPharmaceutical Excipients)，第2版，(1994)中找到。合适的载体的实例包括乳糖、淀粉、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露糖醇、山梨醇等。合适的稀释剂的实例包括乙醇、甘油和水。载体、稀释剂和/或赋形剂可以根据预期的给药途径和标准药物实践来选择。
包含本发明化合物的药物组合物还可包含任何合适的粘合剂、润滑剂，悬浮剂、包衣剂和增溶剂。合适的粘合剂的实例包括淀粉、明胶、天然糖如：葡萄糖、无水乳糖、游离乳糖、β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶如：阿拉伯胶，黄蓍胶或藻酸钠、羧甲基纤维素和聚乙二醇。合适的润滑剂的实例包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。可以提供防腐剂、稳定剂、染料和甚至调味剂在药物组合物中。防腐剂的实例包括苯甲酸钠、山梨酸和对羟基苯甲酸酯。组合物中可以使用抗氧化剂和悬浮剂。
包含本发明化合物的药物组合物可适用于口、直肠、阴道、肠胃外、肌内、腹膜内、动脉内、鞘内、支气管内、皮下，皮内、静脉内、鼻腔、口腔或舌下给药途径。对于口服给药，可以特别使用压缩片剂、丸剂、片剂、凝胶剂、滴剂和胶囊。对于其它形式的给药，药物组合物可以包含静脉内、动脉内、鞘内、皮下、皮内、腹膜内或肌肉内注射并且由无菌或可灭菌溶液制备的溶液或乳剂。包含本发明化合物的药物组合物也可以是栓剂、阴道栓剂、悬浮液、乳液、洗剂、软膏，霜剂、凝胶剂、喷雾剂、溶液剂或撒粉剂。药物组合物可以配制成单位剂量(即以含有单位剂量的分散部分、或单位剂量的多个或亚单位的形式)。
本发明的化合物可以作为药学上可接受的盐提供，包括例如其适当的酸加成盐或碱式盐。合适的药用盐的综述可以参见Berge等人，J Pharm Sci 66：1-19(1977)。例如用强无机酸(例如硫酸、磷酸或氢卤酸)、用强有机羧酸如未取代或取代(如卤素)的1至4个碳原子的烷基羧酸如乙酸、用饱和或不饱和二羧酸(例如草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、邻苯二甲酸或四邻苯二甲酸(tetraphthalic acid))、用羟基羧酸(例如抗坏血酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸)、用氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸)、用苯甲酸或用有机磺酸(例如未取代或取代(如卤素)的(C1–C4)-烷基-或芳基-磺酸)如甲烷-或对甲苯磺酸)形成盐。
本发明的化合物可以以其各种晶型形式、多晶型形式和含水或无水晶型形式提供。在这方面，本领域技术人员公知，可以通过稍微改变纯化方法和/或从合成制备这些化合物中使用的溶剂中分离方法，以任何这种形式分离化合物。
本发明还进一步提供合成根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药的方法。
关于下文所述合成方法以及在用于制备起始原料的参考合成方法的描述中，本领域技术人员应理解：可以容易地选择所有提出的反应条件，包括溶剂的选择、反应氛围、反应温度、实验持续时间和后处理操作。而且，本领域技术人员应理解：在分子各部分上存在的官能团必须与使用的试剂和反应条件相容。
必要的原料可以通过标准的有机化学方法获得。结合以下代表性方法的变通方案在下文所述实施例描述了这类原料的制备。或者，必要的原料可以通过与所说明的方法相类似的方法获得，这属于本领域技术人员的普通技术范围。此外，应当理解，在下文所述方法中化合物的合成期间或在某些起始原料的合成期间，可能需要保护某些取代基团以防止它们发生不希望的反应。本领域技术人员应容易理解何时需要这类保护以及如何引入这类保护基和随后除去。保护基的实例描述于例如Theodora Green的有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)(出版商：John Wiley&Sons)。保护基可以通过本领域技术人员熟知的适于除去所述保护基的任意便利方法除去，选择这类方法以在对分子中其它基团干扰最小的情况下除去保护基。因此，如果反应物包括诸如氨基、羧基或羟基的基团，则可能需要在本文提及的一些反应中对所述基团进行保护。
本发明的化合物可以通过例如国际专利WO 2013/156780中描述的一般合成方法制备，特此引入本文作为参考。
在本发明的另一方面，提供了合成本发明化合物(或其药学上可接受的盐，溶剂合物或前药)的方法，所述方法包括：
a)使式Ⅳ化合物
其中
Z代表任选的键，使得N和相邻碳原子之间的键可以是单键或双键；和
R1，R2，R3，R8和R9如第一方面所定义；
与式Ⅴ化合物反应：
其中R4，R5，R6和R7如第一方面所定义；如需要
b)除去存在的任何保护基团，和/或形成其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
式IV和式V化合物之间的偶联反应可以在合适的溶剂或混合溶剂中进行。本领域技术人员将能够容易地选择适用于该反应的溶剂或溶剂混合物。适宜溶剂的实例包括乙醇、乙腈、卤化溶剂等。
此外，本领域技术人员将能够选择适当的反应条件用于式IV和式V化合物之间的偶联反应。然而通常，反应将在无水条件下和惰性气氛如氩气或氮气下进行。该反应也可以在升高的温度(例如80-180℃的范围内)进行合适的时间(例如20分钟至48小时)。适当地，该反应在微波加热下进行，例如在80～180℃下进行20分钟至1.5小时。
所得化合物可以使用本领域熟知的技术进行分离和纯化。
合成本发明化合物(或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药)的方法进一步包括：
c)使式Ⅰ化合物进行盐交换(特别是在化合物形成为不同盐形式的混合物的情况下)。
盐交换可以包括将化合物固定在合适的固体载体或树脂上，并用合适的酸洗脱该化合物得到式I(II或III)化合物的盐。
特别适合合成本发明化合物方法的实例如下面的流程1所示：
其中一般反应条件为：(a)DMF-DMA或布雷德奈克(Bredereck's)试剂，回流；(b)选择氟，MeOH；(c)Et3N，HgCl2，DCM；(d)TFA/DCM(1:1)，回流；(e)A，B，NaOH，2-甲氧基乙醇，微波和(f)Pd2dba3，XantPhos，t-BuONa，二氧六环，微波。
参考以下非限制性实施例和附图在下文中描述本发明。
具体实施方式
实施例1合成
使用Bruker AVANCE III 500波谱仪在300K下得到1H和13C NMR谱(1H NMR在500MHz和13CNMR在125MHz)。1H和13CNMR谱参考非氘代溶剂残留(或四甲基硅烷)的1H信号和氘代溶剂残留的13C信号。在AB SCIEX TripleTOF5600质谱仪上记录高分辨率质谱，所有样品的电离都使用ESI进行。化合物的纯度是通过分析型HPLC来确定，并且大于95％。分析型HPLC是Shimadzu Prominence UFLC(UltraFast Liquid Chromatograph)，该系统含CBM-20A通信总线模块，DGU-20A5R脱气装置，LC-20AD液相色谱泵，SIL-20AHT自动进样器，SPD-M20A光电二极管阵列检测器，CTO-20A柱温箱和Phenomenex Kinetex 5u C18 100A 250mm×4.60mm色谱柱，使用方法A(7分钟内梯度5至95％含有0.1％FA的MeOH，然后在13分钟内用含有0.1％FA的95％MeOH，流速1mL/min)，方法B(7分钟内梯度5～95％含有0.1％FA 的MeCN，然后在13分钟内用含有0.1％FA的95％MeCN，流速为1mL/min)。
1-(4-(6-((4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(1)
向乙酰哌嗪(5.00g，39.0mmol)和5-溴-2-硝基吡啶(5.00g，24.6mmol)的DMSO(10mL)溶液中加入三乙胺(10.2mL，73.9mmol)。反应混合物在120℃下加热16小时，冷却至室温并用EtOAc研磨。形成的固体过滤，EtOAc(10mL)和H2O(30mL)洗涤，得到第一份1-(4-(6-硝基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮，为黄色固体。滤液和洗涤液合并并用DCM(3×100mL)萃取。将有机萃取物合并，用Na2SO4干燥，然后再减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6梯度洗脱)，得到第二份1-(4-(6-硝基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮。1H NMR(CDCl3)δ5.16(s，3H)，3.47(t，2H，J 5.5)，3.52(t，2H，J 5.5)，3.71(t，2H，J 5.5)，3.83(t，2H，，J 5.5)，7.23(dd，1H，J 9.5&3.0)，8.14(d，1H，J 3.0)，8.20(d，1H，J 9.0)。HRMS(ESI)251.1130([M+H]+)；C11H15N4O3 +计算值251.1139。
向1-(4-(6-硝基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(2.51g，10.0mmol)和MeOH(200mL)的混合物中加入10％Pd/C(107mg，0.100mmol，1mol％)。将此反应混合物用H 2在室温下鼓泡5小时，并通过硅藻土过滤，用MeOH(50mL)洗涤。滤液和洗涤液合并，减压浓缩，得到1-(4-(6-氨基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮，为棕色固体(2.20g，100％)，其不经纯化即可用于下一步骤。HRMS(ESI)：m/z 221.1390[M+H]+；C11H17N4O+计算值221.1397。
向1-(4-(6-氨基吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(2.21g，10.0mmol)、N，N’-双Boc-S-甲基硫脲(3.50g，12.0mmol)和三乙胺(4.90mL，35.1mmol)在DCM(100mL)中的溶液中，在冰浴下加入HgCl2(5.45g，20.1mmol)。冰浴下搅拌0.5小时，将反应混合物升温至室温，搅拌12小时，并通过硅藻土过滤。固体用DCM(50mL)洗涤。合并滤液和洗涤液并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM:MeOH＝95:5到90:10)得到1-辛基-4-(6-(2,3-双(叔丁氧羰基)胍基)吡啶-3-基)哌嗪，为浅黄色固体(3.82g，82％)。1H NMR(CDCl3)δ1.53(s，18H)，(2.14，s，3H)，3.13(t，2H，J 5.5)，3.18(t，2H，J 5.5)，3.63(t，2H，J 5.5)，3.78(t，2H，，J 5.5)，7.29(dd，1H，J 9.5&3.0)，7.87(d，1H，J 7.5)，7.99(d，1H，J 2.5),10.90(br s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 463.2668([M+H]+)；C22H35N6O5 +计算值463.2663。
向1-乙酰基-4-(6-(2,3-双(叔丁氧羰基)胍基)吡啶-3-基)哌嗪(724mg，1.56mmol)的DCM(5mL)溶液中加入TFA(5mL)。将反应混合物加热回流16小时，减压浓缩。残余物用MeOH(50mL)溶解，加入过量的树脂(氢氧根形式，依次用水和甲醇预膨胀30分钟)的MeOH(50mL)溶液。将混合物在室温下搅拌过夜，过滤，固体用MeOH(50mL)洗涤。滤液和洗涤液合并减压浓缩，得到1-(5-(4-乙酰哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍米色固体(410mg，100％)，其不经纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)：m/z263.2[M-TFA+H]+。
向粗品1-(5-(4-乙酰哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(1.08g，4.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-1-(2,4-二甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(420mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(6mL)溶液中加入NaOH(160mg，4.00mmol)。将反应混合物180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝92:8)，并用DCM和正己烷重结晶，得到化合物1，为黄色固体(100mg，12％)。1H NMR(CDCl3)δ2.09(s，3H)，2.64(s，3H)，2.65(s，3H)，3.20(m，4H)，3.58(t，2H，J 5.0)，3.74(t，2H，J 5.0)，6.91(d，1H，J 5.5)，7.31(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.98(d，1H，J 2.5)，8.14(s，1H)，8.25(d，1H，J 9.0)，8.42(s，1H，J 5.5)。13CNMR(CDCl3)δ18.3，19.6，21.5，41.4，46.3，50.2，50.5，109.4，113.2，127.4，131.4，137.5，142.5，146.9，152.6，158.7，159.0，159.1，167.1，169.1。HRMS(ESI)：m/z410.1763[M+H]+；C20H24N7OS+计算值410.1758。RP-HPLC方法A：tR 8.22min，纯度>99％，方法B：tR 2.81min，纯度>99％。
4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-N-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(2)
往1(71.0mg，0.17mmol)的甲醇悬浮液中加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(DCM至DCM:MeOH:NH4OH＝90:10:1)得到2，为黄色固体(49mg，77％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.63(s，3H)，2.65(s，3H)，2.65(s，3H)，3.11(t，4H，J 5.5)，3.26(t，4H，J 4.5)，7.11(d，1H，J 5.0)，7.49(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.05(d，1H，J 3.0)，8.10(d，1H，J 9.0)，8.53(d，1H，J 5.5)，9.70(br，1H)。HRMS(ESI)：m/z 368.1653[M+H]+；C18H22N7S+计算值368.1652。RP-HPLC方法A：tR 8.00min，纯度>98％，方法B：tR 2.88min，纯度>96％。
以下化合物通过类似路线合成。
4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(3)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-1-(2,4-二甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(210mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝92:8)，并用DCM和己烷重结晶得到2，为黄色固体(119mg，31％)。熔点183-184℃。1H NMR(CDCl3)δ2.36(s,3H)，2.60(t,4H,J 5.0)，2.70(s,3H)，2.71(s,3H)，3.19(t，4H，J 5.0)，6.95(d，1H，J5.0)，7.37(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.05(d，1H，J 2.5)，8.23(br，1H)，8.27(d，1H，J 9.0)，8.48(d，1H，J 5.0)。HRMS(ESI)：m/z382.1788[M+H]+；C19H24N7S+计算值328.1808。RP-HPLC方法A：tR 8.54min，纯度>99％，方法B：tR 3.23min，纯度>99％。
4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(4)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-2-(2,4-二甲基噻唑-5-基)丙烯腈(235mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5)，并用DCM和己烷重结晶得到4，为黄色固体(90mg，23％)。熔点110-113℃。1H NMR(DMSO-d6)δ2.91(s，4H，噻唑-CH3&哌嗪-NH)，3.11(s，3H)，3.27(t，4H，J 4.5)，3.48(t，4H，J 4.0)，7.84(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.31(d，1H，J 9.0)，8.48(d，1H，J 2.0)，9.33(s，1H)，11.13(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z393.1597[M+H]+；C19H21N8S+计算值393.1604。RP-HPLC方法A：tR 9.18min，纯度>95％，方法B：tR 7.68min，纯度>96％。
4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(5)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-2-(2,4-二甲基噻唑-5-羰基)丙烯腈(235mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将将混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，用MeOH重结晶得到5，为棕色固体(114mg，28％)。熔点112-114℃。1HNMR(CDCl3)δ2.37(s，3H)，2.60(t，4H，J 5.0)，2.63(s，3H)，2.76(s，3H)，3.21(t，4H，J 5.0)，7.33(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.13(s，1H)，8.20(d，1H，J 9.0)，8.76(s，1H)8.76(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 407.1772[M+H]+；C19H21N8S+计算值407.1761。RP-HPLC方法A：tR 9.58min，纯度>100％，方法B：tR 8.18min，纯度>100％。
2-((5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-4-(2,4-二甲基噻唑-5-基)嘧啶-5-甲腈(6)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-2-(2,4-二甲基噻唑-5-羰基)丙烯腈(235mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，并用DCM和己烷重结晶得到6，为黄色固体(150mg，34％)。熔点99-101℃。1H NMR(DMSO-d6)δ1.79(s，3H)，2.25(s，3H)，2.45(s，3H)，2.85(t，2H，J 4.0)，2.92(s，2H)，3.33(d，4H，J4.0)，7.22(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.67(d，1H，J 9.0)，7.85(d，1H，J 2.5)，8.68(s，1H)，10.47(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 435.1700[M+H]+；C22H29N8S+计算值435.1710。RP-HPLC方法A：tR10.92min，纯度>97％，方法B：tR 8.69min，纯度>96％。
4-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(哌嗪-1-基)-吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(7)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-甲基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(224mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝91:9)并用MeOH重结晶得到7，为黄色固体(35mg，9％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.32(t，3H，J 7.5)，2.65(s，3H)，2.98(q，2H，J 7.5)，3.26(t，2H，J 2.5)，3.34(app s，4H)，7.13(d，1H，J 5.0)，7.52(dd，1H，J 9.5&3.5)，8.07(d，1H，J 3.0)，8.11(d，1H，J 9.0)，8.53(d，1H，J 5.5)，8.66(s，1H)，9.65(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 382.1810[M+H]+；C19H24N7S+计算值382.1808。RP-HPLC方法A：tR 12.55min，纯度>99％，方法B：tR 3.71min，纯度>98％。
4-(2-乙基]-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(8)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(224mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝91:9)，并用MeOH重结晶，得到8，为黄色固体(50mg，13％)。1HNMR(CDCl3)δ1.41(t，3H，J7.5)，2.34(s，3H)，2.58(t，4H，J5.0)，2.69(s，3H)，3.00(q，2H，J7.5)，3.18(t，4H，J5.0)，6.93(d，1H，J5.0)，7.35(dd，1H，J9.0&3.0)，8.12(d，1H，J3.0)，)，8.28(d，1H，J9.0)，8.52(d，1H，J5.5)，8.97(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 396.1980[M+H]+；C19H24N7S+计算值396.1965。RP-HPLC方法A：tR12.58min，纯度>99％，方法B：tR 3.86min，纯度>96％。
4-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(9)
向粗品1-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(497mg，2.00mmol)和(E)-3-(2-甲基氨基)-1-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(224mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5)，并用MeOH重结晶，得到9，为黄色固体(51mg，13％)。1HNMR(CDCl3)δ1.13(t，3H，J 7.5)，1.42(t，3H，J7.5)，2.49(q，2H，J7.0)，2.63(t，4H，J 5.0)，2.70(s，3H)，3.02(q，2H，J8.0)，3.20(t，4H，J5.0)，6.95(d，1H，J5.0)，7.36(dd，1H，J9.0&3.0)，8.07(d，1H，J3.0)，8.28(d，1H，J9.5)，8.40(s，1H)，8.49(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 410.2129[M+H]+；C21H28N7S+计算值410.2121。RP-HPLC方法A：tR 12.61min，纯度>99％，方法B：tR 3.82min，纯度>94％。
1-(4-(6-((4-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-乙基)乙-1-酮(10)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(224mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5)，并用MeOH重结晶，得到10，为黄色固体(175mg，41％)。1HNMR(CDCl3)δ1.43(t，3H，J7.5)，2.15(s，3H)，2.71(d，3H，J2.5)，3.03(q，2H，J 5.0)，3.15(t，2H，J5.0)，3.65(s，6H)，3.80(t，2H，J5.0)，3.78(t，2H，J 5.0)，6.98(d，1H，J 5.5)，7.37(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.03(d，1H，J3.0)，8.05(s，1H)，8.32(d，1H，J9.0)，8.48(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 424.1932[M+H]+；C21H26N7OS+计算值424.1914。RP-HPLC方法A：tR 14.52min，纯度100％，方法B：tR10.33min，纯度100％。
1-(4-(6-((5-氯-4-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(11)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-2-氯-3-(二甲基氨基)-1-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(259mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，用MeOH重结晶，得到11，为黄色固体(30mg，7％)。1HNMR(CDCl3)δ1.44(t，3H，J7.5)，2.15(s，3H)，2.54(s，3H)，3.05(q，2H，J7.5)，3.10(t，2H，J5.0)，3.13(t，2H，J5.0)，3.64(t，2H，J4.5)，3.79(t，2H，J5.0)，7.32(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.03(d，1H，J2.5)，8.22(d，1H，J9.0)，8.31(d，1H，J5.5)，8.49(s，1H，NH)。HRMS(ESI)：m/z458.1525[M+H]+；C21H25ClN7OS+计算值458.1524。RP-HPLC方法A：tR 11.26min，纯度>99％，方法B：tR 8.76min，纯度>98％。
4-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-吗啉代吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(12)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(442mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-乙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(224mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)，将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)并用MeOH重结晶，得到12，为黄色固体(61mg，16％)。1HNMR(CDCl3)δ1.43(t，3H，J 7.5)，2.71(d，3H，J2.5)，3.03(q，2H，J7.5)，3.14(t，4H，J5.0)，3.89(t，4H，J5.0)6.97(d，J 5.0，1H)，7.35(dd，1H，J9.0&3.0)，7.99(s，1H)，8.02(d，1H，J2.5)，8.30(d，1H，J 9.0)，8.47(d，J5.5,1H)。HRMS(ESI)：m/z383.1656[M+H]+；C19H23N6OS+计算值383.1649。RP-HPLC方法A：tR 14.71min，纯度>98％，方法B：tR 10.48min，纯度>97％。
4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(13)
向N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)-4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)嘧啶-2-胺(150mg，0.34mmol)的甲醇溶液加入HCl(32％，3mL)，回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH:NH4OH)＝90:10:1)，得到13，为黄色固体(108mg，80％)。Rf0.1(DCM:MeOH＝9:1+10滴32％氨水)。1HNMR(CDCl3)δ1.43(d，6H，J7.0)，1.65(br，1H)，2.71(s，3H)，3.07(t，4H，J2.0)，3.11(t，4H，J3.0)，3.30(m，1H)，6.96(d，J5.5)，7.36(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.97(s，1H)，8.02(d，1H，J3.0)，8.28(d，1H，J9.0)。HRMS(ESI)：m/z 396.1961[M+H]+；C20H26N7S+计算值396.1965。RP-HPLC方法A：tR 9.08min，纯度>98％，方法B：tR 7.44min，纯度100％。
4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(14)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(238mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，并用MeOH重结晶，得到14，为黄色固体(200mg，48.9％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.34(d，6H，J7)，2.21(s，1H)，2.4 5(t，4H，J 5)，2.6 3(s，3H)，3.11(t，4H，J4.5)，3.25(m，1H)，7.09(d，1H，J5.5)，7.44(dd，1H，J9.5&3.0)，8.01(d，1H，J9.5)，8.5 2(d，1H，J.5.5)，9.6(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z410.121[M+H]+；C21H28N7S+计算值410.2121。RP-HPLC方法A：tR 9.14min，纯度>97％，方法B：tR 7.53min，纯度100％。
N-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)-4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-胺(15)
向粗品1-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(496.6mg，2.00mmol)和(E)-3-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(238mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝93:7)，得到15，为浅黄色固体(178mg，42％)。1HNMR(CDCl3)δ1.14(t，3H，J7.0)，1.43(d，6H，J7.0)，2.50(q，3H，J7.0)，2.64(t，4H，J5.0)，2.71(s，3H)3.20(t，4H，J5.0)，3.30(m，1H)，6.96(d，1H，J5.5)，7.36(dd，1H，J 9.5&3.0)，8.05(d，1H，J2.5)，8.33(d，1H，J9.5)，8.47(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 424.2298[M+H]+；C22H30N7S+计算值424.2278。RP-HPLC方法A：tR 9.18min，纯度>99％，方法B：tR 7.15min，纯度>98％
1-(4-(6-((4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(16)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(238mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝93:7)，得到16，为黄色固体(360mg，42％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.41(d，6H，J7)，2.13(s，1H)，2.9(s，3H)，3.11(app m，4H)，3.28(m，1H)，3.62(t，2H，J5.0)，3.78(t，2H，J5.0)，6.96(d，1H，J5.5)，7.35(dd，1H，J9.5&3.0)，8.14(d，1H，J2.5)，8.33(d，1H，J 9.5)，8.55(d，1H，J5.0)，9.24(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 438.2088[M+H]+；C22H28N7OS+计算值438.2071。RP-HPLC方法A：tR 10.50min，纯度>98％，方法B：tR 8.45min，纯度>98％。
4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-吗啉代吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(17)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(331.7mg，1.50mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(238mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(60.0mg，1.50mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝97:3)，得到17，为白色固体(238mg，60％)。1HNMR(CDCl3)δ1.43(d，6H，J7.0)，2.71(s，3H)，3.14(t，4H，J5.0)，3.32(m，1H)，3.89(t，4H，J5.0)，6.97(d，1H，J 5.0)，7.35(dd，1H，J9.5&3.0)，8.09(d，1H，J3.0)，8.10(s，1H)，8.31(d，1H，J9)，8.46(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 397.1797[M+H]+；C20H25N6OS+计算值397.1805。RP-HPLC方法A：tR 10.97min，纯度>99％，方法B：tR 8.68min，纯度100％。
N-(5-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-胺(18)
向1-((6-溴吡啶-3-基)甲基)-4-乙基哌嗪(341mg，1.20mmol)和4-(2-异丙基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-胺(234.3mg，1.00mmol)的二氧六环(3mL)溶液中分别加入Pd2dba3(45.8mg，0.05mmol)，xantphose(57.9mg，0.1mmol)和t-BuONa(144.2mg，1.50mmol)。将反应混合物在150℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到18，为白色固体(210mg，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ0.97(t，3H，J7.5)，1.36(d，6H，J7.0)，2.28(q，2H，J7.5)，2.36(s br，8H)，2.67(s，3H)，3.24-3.30(m，1H)，3.42(s，1H)，7.17(d，1H，J5.5)，7.70(dd，1H，J 8.5&2.0)，8.20(d，1H，J2.0)，8.22(d，1H，J8.5)，8.58(d，2H，J5.5)，9.92(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 438.2435[M+H]+；C23H32N7S+计算值438.2434。RP-HPLC方法A：tR 9.43min，纯度>99％，方法B：tR 8.66min，纯度>98％。
4-(2-甲氧基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(19)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(374mg，1.60mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-甲氧基-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(183mg，0.80mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(64.0mg，1.60mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到19，为黄色固体(52mg，13％)。熔点190-192℃。1HNMR(CDCl3)δ2.37(s，3H)，2.58(s，3H)，2.60(t，4H，J5.0)，3.19(t，4H，J 5.0)，3.37(s，3H)，6.73(d，1H，J5.0)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.97(s，1H)，8.01(d，1H，J3.0)，8.21(d，1H，J 9.0)，9.40(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z398.1779[M+H]+；C19H24N7OS+[M+H]+计算值398.1758。RP-HPLC方法A：tR 8.36min，纯度>97％，方法B：tR3.59min，纯度>99％。
4-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)-N-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(20)
向1-(4-(6-((4-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(100mg，0.23mmol)的甲醇溶液加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，得到20，为黄色固体(77mg，85％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.64(s，3H)，2.74(s，3H)，3.23(t，2H，J 5.5)，3.36(app s，4H)，7.12(d，1H，J5.5)，7.54(dd，1H，J9.0&3.0)，8.06(d，1H，J3.0)，8.08(d，1H，J9.0)，8.53(s，1H，J5.5)，8.82(s，1H)，9.69(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 400.1390[M+H]+；C18H22N7S2 +[M+H]+计算值400.1373。RP-HPLC方法A：tR 8.85min，纯度>98％，方法B：tR 7.44min，纯度>99％。
4-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-基)2-胺(21)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-1-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(242mg，1.00mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到21，为黄色固体(200mg，48％)。熔点206-207℃。1HNMR(CDCl3)δ2.37(s，3H)，2.61(t，4H，J5.0)，2.69(s，3H)，2.73(s，3H)，3.19(t，4H，J5.0)，6.93(d，J5.0)7.36(dd，1H，J9.0&3.0)，8.05(d，1H，J3.0)，8.20(s，1H)，8.24(d，1H，J9.0)，8.46(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 414.1552[M+H]+；C19H24N7S2 +[M+H]+计算值414.1529。RP-HPLC方法A：tR 9.36min，纯度>99％，方法B：tR7.83min，纯度>99％。
1-(4-(6-((4-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(22)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(242mg，1.00mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过纯化色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95：5)得到22，为黄色固体(141mg，32％)。1HNMR(CDCl3)δ2.15(s，3H)，2.69(s，3H)，2.73(s，3H)，3.13(app m，4H)，3.64(t，2H，J5.0)，3.80(t，2H，J5.0)，6.95(d，1H，J5.5)，7.37(dd，1H，J9.&3.0)，8.08(d，1H，J3.0)，8.29(d，1H，J 9.0)，8.49(s，1H，J5.0)，8.53(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z442.1478[M+H]+；C20H24N7OS2 +[M+H]+计算值442.1486。RP-HPLC方法A：tR 8.23min，纯度>97％，方法B：tR 2.81min，纯度100％。
4-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(23)
向1-(4-(6-((4-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(100mg，0.21mmol)的甲醇溶液加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH:NH4OH＝90:10:1)，得到23，为黄色固体(82mg，90％)。1HNMR(CDCl3)δ1.47(s，3H)，1.48(s，3H)，2.7(s，3H)，3.06(t，4H，J4.5)，3.13(t，4H，J 5.0)，3.89(m，1H)，6.94(d，1H，J5.0)，7.36(dd，1H，J9.&3.0)，8.03(d，1H，J3.0)，8.04(s，1H)，8.25(d，1H，J 9.0)，8.46(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 428.1696[M+H]+；C20H26N7S2 +[M+H]+计算值428.1686。RP-HPLC方法A：tR 9.86min，纯度>93％，方法B：tR7.96min，纯度>96％。
4-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(24)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.0mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-酮(270mg，1.00mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，得到24，为黄色固体(97mg，22％)。熔点198-200℃。1HNMR(CDCl3)δ1.46(s，3H)，1.47(s，3H)，2.37(s，3H)，2.61(t，4H，J 5.0)，2.69(s，3H)，3.19(t，4H，J5.0)，3.88(m，1H)，6.93(d，1H，J5.0)，7.36(dd，1H，J9.0&3.0)，8.08(s，1H)，8.25(d，1H，J9.0)，8.49(d，1H，J5.0)，8.62(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 442.1865[M+H]+；C21H28N7S2 +[M+H]+计算值442.1842。RP-HPLC方法A：tR10.34min，纯度>96％，方法B：tR 8.36min，纯度>98％。
1-(4-(6-((4-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(25)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙硫基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(270mg，1.00mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH＝94:6)，得到25，为黄色固体(193mg，41％)。1HNMR(CDCl3)δ1.47(s，3H)，1.48(s，3H)，2.15(s，3H)，2.70(s，3H)，3.13(app m，4H)，3.65(t，2H，J5.0)3.89(m，1H)，6.95(d，1H，J5.5)，7.37(dd，1H，J9.0&3.0)，8.05(d，1H，J3.0)，8.29(app br d，2H)，8.48(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 470.1787[M+H]+；C18H22N7S2 +[M+H]+计算值470.1791。RP-HPLC方法A：tR 8.23min，纯度>93％，方法B：tR 2.81min，纯度>95％。
N，4-二甲基-5-(2-((5-哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(26)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(264mg，1.20mmol)乙二醇单甲醚(4mL)的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(225mg，1.00mmol)和NaOH(82.0mg，2.40mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，氯仿至氯仿：MeOH＝91：9，连续加入32％氨水，至10％)。固体用DCM和MeOH洗涤，然后过滤，得到26，为淡黄色固体(94.0mg，24％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.47(s，3H)，2.83(t，4H，J5.0)，2.87(d，3H，J4.5)，3.01(t，4H，J5.0)，6.91(d，1H，J5.5)，7.38(dd，1H，J9.0&3.0)，7.97(d，1H，J3.0)，8.04-8.07(m，2H)，8.33(d，1H，J4.0)，9.25(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 383.1674[M+H]+；C18H23N8S+[M+H]+计算值383.1761。RP-HPLC方法A：tR 8.37min，纯度>99％，方法B：tR7.10min，纯度>99％。
4-(4-甲基-2-(甲氨基)噻唑-5-基)-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-嘧啶-5-甲腈(27)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(264mg，1.20mmol)的乙二醇单甲醚(4mL)溶液中加入(E)-(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)甲酸甲酯(350mg，1.00mmol)和NaOH(82.0mg，2.40mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残留物是通过色谱法(硅胶，氯仿至氯仿：MeOH＝91:9，连续加入32％氨水3mL)。固体用DCM和MeOH洗涤，然后过滤，得到27，为浅黄色固体(131mg，32％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.41(s，3H)，2.88-2.89(m，7H)，3.07(t，4H，J5.5)，7.41(dd，1H，J9.0&3.0)，7.88(d，1H，J9.0)，8.03(d，1H，J3.0)，8.26(q，1H，J4.5)，8.75(s，1H)，10.30(s，1H)。MS(ESI)：m/z 408.1660[M+H]+；C19H22N9S+[M+H]+计算值408.1713。
5-(5-氟-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(28)
向1-(4-(6-((5-氟-4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(200mg，0.45mmol)在甲醇(32％，3mL)中的溶液中，被加入并反复过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至EtOAc:MeOH:NH4OH＝90:10:1)，得到28，为黄色固体(140mg，77％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.47(d，3H，J2.0)，2.83(t，4H，J4.5)，2.87(d，3H，J4.5)，3.00(t，4H，J5.0)，7.37(dd，1H，J 9.0&2.5)，7.94(d，1H，J9.0)，7.96(d，1H，J3.0)，8.11(app d，1H，J4.5)，8.41(d，1H，J3.0)，9.48(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 401.1678[M+H]+；C18H22FN8S+[M+H]+计算值401.1667。RP-HPLC方法A：tR 8.14min，纯度>95％，方法B：tR2.80min，纯度100％。
N，4-二甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶-4-基)噻唑-2-胺(29)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(200mg，0.854mmol)在乙二醇单甲醚(4.0mL)中的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮和NaOH(58.1mg，1.71mmol)。将反应混合物在160℃加热30分钟，冷却至室温，减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝91:9)纯化，用DCM和MeOH洗涤，得到29，为浅黄色固体(91.0mg，27％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.22(s，3H)，2.45-2.47(m，7H)，2.87(d，3H，J4.5)，3.11(t，4H，J5.0)，6.91(d，1H，J5.5)，7.40dd，1H，J9.0&3.0)，7.99(d，1H，J3.0)，8.06-8.08(m，2H)，8.33(d，1H，J5.5)，9.24(s，1H)。MS(ESI)：m/z 397.1958[M+H]+；C20H25N7S+[M+H]+计算值397.1917。RP-HPLC方法A：tR 8.27min，纯度>90％，方法B：tR7.09min，纯度>94％。
4-(4-甲基-2-(甲氨基)噻唑-5-基)-2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)-氨基)嘧啶-5-甲腈(30)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(4mL)溶液中加入(E)-(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)甲酸甲酯(350mg，1.00mmol)和NaOH(136mg，4.00mmol)。将反应混合物在180℃加热60分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝91:9)，并用DCM和MeOH洗涤，得到30，为浅黄色固体(363mg，43％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.43(s，3H)，2.74(s，3H)，2.89(d，4H，J5.0)，3.17(d，4H，J5.0)，7.50(dd，1H，J9.0&3.0)，7.93(d，1H，J9.0)，8.11(d，1H，J3.0)，8.28(d，1H，J4.5)，8.77(s，1H)，10.39(s，1H)。MS(ESI)：m/z 422.1808[M+H]+；C20H24N9S+[M+H]+计算值422.1870。RP-HPLC方法A：tR 8.72min，纯度>99％，方法B：tR7.36min，纯度>99％。
5-(5-氟-2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(31)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下加热60分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝92:8:1)并用DCM和MeOH洗涤，得到31，为红色棕色固体(124mg，30％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.22(s，3H)，2.45(t，4H，J 4.5)，2.47(app d，3H，J2)，2.87(d，3H，J5)，3.10(t，4H，J5)，7.40(dd，1H，J9.0&3.0)，7.95(d，1H，J9.0)，7.97(d，1H，J3.0)，8.11(q，1H，J4.5)，8.42(d，1H，J3.5)，9.53(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 415.1846[M+H]+；C19H24FN8S+[M+H]+计算值415.1823。RP-HPLC方法A：tR 8.09min，纯度>95％，方法B：tR 2.83min，纯度>99％。
5-(2-((5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(32)
向粗品1-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(496.6mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下加热60分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，得到32，为黄色固体(146mg，34％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.03(t，3H，J7.0)，2.36(q，3H，J7.0)，2.48(app d，3H，J2.0)，2.50(br，4H)，2.87(d，3H，J5.0)，3.10(t，4H，J5.0)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，7.96(d，1H，J9.0)，7.99(d，1H，J 3.0)，8.13(q，1H，J4.5)，8.43(d，1H，J3.5)，9.55(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z429.1982[M+H]+；C20H26FN8S+[M+H]+计算值429.1980。RP-HPLC方法A：tR 8.30min，纯度100％，方法B：tR 2.80min，纯度100％。
1-(4-(6-((4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(33)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(525mg，2.00mmol)在乙二醇单甲醚(3毫升)中的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(225mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10+0.5ml 32％氨水)，得到33，为黄色固体(100mg，24％)。1H NMR(CDCl3)δ2.15(s，3H)，2.56(s，3H)，3.05(s，3H)，3.10(t，2H，J4.5)，3.14(t，2H，J4.5)，3.64(t，2H，J4.5)，3.79(t，2H，J4.5)，5.73(s，1H)，6.88(d，1H，J5.5)，7.35(dd，1H，J9.0&2.5)，7.89(s，1H)，8.01(d，1H，J2.0)，8.31(d，1H，J9.0)，8.35(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 425.1878[M+H]+；C20H25N8OS+[M+H]+计算值425.1867。RP-HPLC方法A：tR9.92min，纯度100％，方法B：tR8.00min，纯度100％
2-((5-(4-乙酰哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-5-甲腈(34)
向粗品1-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(315mg，1.20mmol)乙二醇单甲醚(4mL)溶液中，加入(E)(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，1.00mmol)和NaOH(82.0mg，2.40mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残留物是通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10，连续加入32％氨水，至3％)。固体用DCM和MeOH洗涤，然后过滤得到34，为浅黄色固体(157mg，35％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.04(s，3H)，2.40(s，3H)，2.87(s，3H)，3.10(t，2H，J5.0)，3.16(t，2H，J5.0)，3.58(t，4H，J 5.0)，7.46(dd，1H，J9.5和3.0)，7.90(d，1H，J9.0)，8.06(d，1H，J 3.0)，8.26(q，1H，J 3.0)，8.75(s，1H)，10.33(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z450.1844[M+H]+；C21H24N9OS+[M+H]+计算值450.1819。RP-HPLC方法A：tR 10.34min，纯度>97％，方法B：tR 8.769min，纯度>98％。
1-(4-(6-((5-氟-4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(35)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(1.08g，2.06mmol)在乙二醇单甲醚(6mL)中的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(500mg，2.06mmol)和NaOH(164.4mg，4.11mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热150分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10，连续加入32％氨水，至1％)。固体用DCM和MeOH洗涤，然后过滤，得到35，为红棕色固体(400mg，44％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.04(s，3H)，2.47(d，3H，J2.5)，2.87(d，3H，J4.5)，3.05(t，2H，J5.0)，3.11(t，2H，J5.0)，3.58(app q，4H，J6.0)，7.43(dd，1H，J9.0&3.0)，7.98(d，1H，J9.0)，8.02(d，1H，J 3.0)，8.12(q，1H，J 4.5)，8.43(d，1H，J 3.5)，9.59(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 443.1800[M+H]+；C20H24FN8OS+[M+H]+计算值443.1772。RP-HPLC方法A：tR 9.75min，纯度>95％，方法B：tR 7.77min，纯度>95％。
N，4-二甲基-5-(2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(36)
向粗品1-(5-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(266mg，1.20mmol)的乙二醇单甲醚(4mL)溶液中加入(E)-3-(二甲氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(225mg，1.00mmol)和NaOH(82.0mg，2.40mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)。用DCM和MeOH洗涤固体，然后过滤，得到36，为浅黄色固体(69.0mg，18％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.47(s，3H)，2.86(d，2H，J5.0)，3.08(t，4H，J 5.0)，3.74(t，4H，J5.0)，6.92(d，1H，J5.0)，7.41(dd，1H，J9.0&3.0)，7.99(d，1H，J 3.0)，8.06(q，1H，J5.0&4.5)，8.08(d，1H，J9.0)，8.33(d，1H，J5.0)，9.26(s，1H)。MS(ESI)：m/z 384.1674[M+H]+；C18H21N7OS+[M+H]+计算值384.1601。RP-HPLC方法A：tR 10.08min，纯度>99％，方法B：tR 7.98min，纯度>99％。
4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)-2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(37)
向粗品1-(5-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(222mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(4mL)溶液中，加入(E)-(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，1.00mmol)和NaOH(68.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残留物是通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝97:3)，用DCM和MeOH，然后过滤，得到37，为浅黄色固体(126mg，31％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.42(s，3H)，2.89(d，3H，J4.5)，3.12(t，4H，J 5.0)，3.75(t，4H，J 5.0)，7.42(dd，1H，J 9.03.0)，7.93(d，1H，J9.0)，8.04(d，1H，J3.0)，8.23(dd，1H，J9.0&4.5)，8.73(s，1H)，10.28(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 409.1549[M+H]+；C19H20N8OS+[M+H]+计算值409.1554。RP-HPLC方法A：tR10.88min，纯度>98％，方法B：tR 8.60min，纯度>97％。
5-(5-氟-2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(38)
向粗品1-(5-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸(332mg，1.5mmol)的乙二醇单甲醚(4mL)溶液中，加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(60.0mg，1.5mmol)，将反应混合物在180℃下微波照射加热90分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)纯化，得到38，为紫色固体(138mg，34％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.48(d，3H，J2.0)，2.87(d，3H，J4.5)，3.08(t，4H，J5.0)，3.75(t，4H，J5.0)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，7.97(d，1H，J9.0)，7.99(d，1H，J3.0)，8.12(q，1H，J4.5)，8.42(d，1H，J3.5)，9.52(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 402.154[M+H]+；C18H21FN7OS+[M+H]+计算值402.1507。RP-HPLC方法A：tR 9.95min，纯度100％，方法B：tR 7.97min，纯度100％。
5-(2-((5-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(39)
向粗品1-(5-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(640mg，≤0.999mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(390mg，1.20mmol)和NaOH(80.0mg，2.03mmol)。将反应混合物在140℃下，微波照射加热45分钟，冷却至室温并过滤。固体用MeOH(15mL)和DCM(30mL)，并通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5)纯化得到39，为黄色固体(64.0mg，14％，两步的总产率)。m.p.275-276℃。1H NMR(DMSO-d6)δ2.46(s，3H)，2.52(t，4H，J 4.0)，3.12(t，4H，J 3.6)，3.53(s，2H)，6.91(d，1H，J4.4)，7.24-7.28(m，1H)，7.33-7.36(m，4H)，7.38(dd，1H，J7.2和2.4)，7.96(d，1H，J2.4)，8.03(q，1H，J4.0)，8.06(d，1H，J7.6)，8.32(d，1H，J4.4)，9.18(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 473.2252[M+H]+；C25H29N8S+[M+H]+计算值473.2230。RP-HPLC方法A：tR 7.51min，纯度>99％，方法B：tR 6.26min，纯度>99％。
2-((5-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-5-甲腈(40)
向粗品1-(5-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(640mg，≤0.999mmol)的乙二醇单甲醚(3mL溶液)加入(E)-(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，0.999mmol)和NaOH(80.0mg，2.03mmol)。将反应混合物在140℃，微波辐射加热45℃分钟，冷却至室温并过滤。固体用MeOH(15mL)和DCM(30mL)洗涤，并通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5)纯化得到40，为黄色固体(177mg，36％，基于6计算两步的总收率)。熔点255-256℃。1H NMR(DMSO-d6)δ2.40(s，3H)，2.51(t，4H，J3.6)，2.87(d，3H，J3.2)，3.14(t，4H，J3.6)，3.51(s，2H)，7.23-7.28(m，1H)，7.32-7.35(m，4H)，7.40(dd，1H，J7.2和2.4)，7.87(d，1H，J7.2)，8.03(d，1H，J2.4)，8.23(q，1H，J3.2)，8.73(s，1H)，10.29(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 498.2188[M+H]+；C26H28N9S+[M+H]+计算值498.2183。RP-HPLC方法A：tR 8.38min，纯度>95％，方法B：tR 6.75min，纯度>96％。
5-(2-((4-(4-苄基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(41)。
向粗品1-(4-(4-苄基哌嗪-1-基)苯基)胍三氟乙酸盐(530mg，≤1.71mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(200mg，0.888mmol)和NaOH(73.0mg，1.82mmol)。将反应混合物在160℃下微波照射加热30分钟，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到41，为黄色固体(60.0mg，14％)。熔点212-213℃。1H NMR(DMSO-d6)δ2.44(s，3H)，2.50(t，4H，J 4.0)，2.85(d，3H，J 3.6)，3.05(t，4H，J 4.0)，3.51(s，2H)，6.81(d，1H，J4.4)，6.85(d，2H，J7.6)，7.23-7.29(m，1H)，7.31-7.35(m，4H)，7.57(d，2H，J7.2)，7.98(q，1H，J4.0)，8.26(d，1H，J4.4)，9.13(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 472.2295[M+H]+；C26H30N7S+[M+H]+计算值472.2278。RP-HPLC方法A：tR 8.11min，纯度>99％，方法B：tR 6.62min，纯度>99％。
2-((4-(4-苄基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)嘧啶-5-甲腈(42)
向粗品1-(4-(4-苄基哌嗪-1-基)-苯基)胍三氟乙酸盐(353mg，≤1.14mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-(5-(2-氰基-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-4-甲基噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.571mmol)和NaOH(45.7mg，1.14mmol)。将反应混合物在160℃下微波照射加热30分钟，冷却至室温，减压浓缩。残留物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：EtOAc＝1:3)纯化，并用DCM和MeOH重结晶，得到42，为黄色固体(80.0mg，28％)。熔点220-221℃。1H NMR(DMSO-d6)δ2.34(s，3H)，2.50(t，4H，J4.0)，2.86(d，3H，J3.6)，3.08(t，4H，J4.0)，3.51(s，2H)，6.89(d，2H，J7.2)7.23-7.29(m，1H)，7.31-7.35(m，4H)，7.48(d，2H，J6.4)，8.17(q，1H，J3.6)，8.67(d，1H，J4.0)，10.03(S，1H)。HRMS(ESI)：m/z 497.2206[M+H]+；C27H29N8S+[M+H]+计算值497.2230。RP-HPLC方法A：tR 8.36min，纯度>96％，方法B：tR10.18min，纯度>95％。
N，N，4-三甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(43)
氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(100mg，0.23mmol)的甲醇溶液加入HCl(32％，3mL)并回流反应过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法(硅胶，DCM至EtOAc:MeOH:NH4OH＝90:10:1)纯化，得到43，为黄色固体(83mg，92％)。熔点210-211℃。1H NMR(DMSO-d6)δ1.74(br，1H)，2.57(s，3H)，3.06(t，4H，J5.5)，3.11(t，4H，J3.5)，3.18(s，6H)，6.84(d，4H，J5.5)，7.33(dd，1H，J9.0&3.0)，7.79(s，1H)，7.99(d，1H，J3.0)，8.28(d，1H，J9.5)，8.31(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 397.1925[M+H]+；C19H25N8S+[M+H]+计算值397.1917。RP-HPLC方法A：tR 8.39min，纯度>95％，方法B：tR 7.42min，纯度100％。
5-(5-氟-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，N，4-三甲基噻唑-2-胺(44)
向1-(4-(6-((4-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(100mg，0.22mmol)的甲醇的溶液中加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，得到44，为黄色固体(45.4mg，50％)。1HNMR(CDCl3)δ2.58(d，3H，J2.0)，3.05(t，4H，J6.0)，3.09(t，4H，J 6.0)，3.17(s，6H)，7.30(dd，1H，J＝9.0&3.0)，7.98(br s，1H)，8.00(s，1H)，8.19(d，1H，J9.0)，8.23(d，1H，J1.5)。HRMS(ESI)：m/z 415.1821[M+H]+；C19H24FN8S+[M+H]+计算值415.1823。RP-HPLC方法A：tR 9.00min，纯度>98％，方法B：tR 7.30min，纯度>99％。
N，N，4-三甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(45)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(239mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00毫摩尔)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10，恒定加入0.5ml 32％氨水)，得到45，为黄色固体(40.0mg，10％)。1HNMR(CDCl3)δ2.36(s，3H)，2.57(s，3H)，2.59(t，4H，J5.0)，3.17(br s，10H)，6.84(d，1H，J5.5)，7.33(dd，1H，J9.0&3.0)，8.02(d，1H，J3.0)，8.28(d，1H，J9.0)，8.33(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z411.2048[M+H]+；C20H27N8S+[M+H]+计算值411.2074。RP-HPLC方法A：tR 8.77min，纯度>99％，方法B：tR 3.24min，纯度>95％。
5-(5-氟-2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，N，4-三甲基噻唑-2-胺(46)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(257mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00毫摩尔)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5，恒定加入0.5ml 32％氨水)，得到46，为棕红色固体(61.0mg，14％)。1HNMR(CDCl3)δ2.36(s，3H)，2.57(d，3H，J2.5)，2.59(t，4H，J5.0)，3.17(s，10H)，7.30(dd，1H，9.0&3.0)，8.33(d，1H，J2.0)，8.18(d，1H，J9.0)，8.23(d，1H，J3.5)。HRMS(ESI)：m/z429.1981[M+H]+；C20H26FN8S+[M+H]+计算值429.1980。RP-HPLC方法A：tR 8.99min，纯度>96％，方法B：tR 7.30min，纯度>98％。
5-(2-((5-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(47)
向粗品1-(5-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过纯化层析(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10，恒定加入0.5ml 32％氨水)，得到47，为棕色固体(76mg，17.2％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.50(q，2H，J 11.0)，1.84(d，3H，J 11.0)，2.21(s，7H)，2.47(s，3H，噻唑-CH3)，2.64(t，2H，J 11.0)，2.86(t，3H，J3.5)，3.63(d，1H，J 11.0)，7.39(app d，1H，J7.0)，7.92(d，1H，J9.0)，7.98(s，1H)，8.10(1H，J4.0)，8.41(s，1H)9.43(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z443.2136[M+H]+；C21H28FN8S+[M+H]+计算值443.2133。RP-HPLC方法A：tR9.12min，纯度>95％，方法B：tR 2.84min，纯度>99％。
1-(4-(6-((4-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(48)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(525mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-]-酮(239mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，EtOAc至PE：EtOAc＝100％)，得到48，为黄色固体(100mg，10％)。熔点234-235℃。1HNMR(CDCl3)δ2.12(s，3H)，2.55(s，3H)，3.08(t，2H，J5.0)，3.11(t，2H，J5.0)，3.15(s，6H)，3.61(t，2H，J 5.0)3.77(t，2H，J4.5)，6.83(d，1H，J5.5)，7.32(dd，1H，J9.0&3.0)，8.08(d，1H，J3.0)，8.32(d，1H，J9.0)，8.37(d，1H，J 5.5)，8.73(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 439.2040[M+H]+；C21H27N8OS+[M+H]+计算值439.2023。RP-HPLC方法A：tR 10.06min，纯度>97％，方法B：tR 8.62min，纯度>96％。
1-(4-(6-((4-(2-(二甲基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(49)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(525mg，2.00mmol)乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(257mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5，恒定加入0.5ml 32％氨水)得到49，为红棕色固体(148mg，32％)。1HNMR(CDCl3)δ2.14(s，3H)，2.57(d，3H，J2.5)，3.08(t，2H，J10.0)，3.11(t，2H，J 10.0)，3.17(s，6H)，3.63(t，2H，J10.0)，3.78(t，2H，J10.0)，7.31(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.04(d，1H，J3.0)，8.23(d，1H，J 9.0)，8.25(app d，J3.0，1H)，8.31(s，1H，NH)。HRMS(ESI)：m/z 457.1925[M+H]+；C21H26FNOS+[M+H]+计算值457.1929。RP-HPLC方法A：tR 10.43min，纯度>95％，方法B：tR8.29min，纯度>95％。
5-(5-氟-2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，N，4-三甲基噻唑-2-胺(50)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(44.3mg，2.00mmol)乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(二甲基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(257mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残留物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝95:5，恒定加入0.5ml 32％氨水)，得到50，为红棕色固体(166mg，40％)。1HNMR(CDCl3)δ2.58(s，3H)，3.11(t，4H，J5.0)，3.17(s，6H)，3.89(t，4H，J4.5)，7.29(dd，1H，J9.0&2.5)，8.01(d，1H，J3.0)，8.05(s，1H)，8.21(d，1H，J9.0)，8.23(d，1H，J3.5)。HRMS(ESI)：m/z 416.1665[M+H]+；C19H23FN7OS+[M+H]+计算值416.1663。RP-HPLC方法A：tR 10.60min，纯度>95％，方法B：tR8.52min，纯度>97％。
5-(5-氟-2-((5-(哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基]]-N，4-二甲基噻唑-2-胺(51)
向粗品1-(5-(哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍(439mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到51，为红棕色固体(66mg，17％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.52(m，2H)，1.63(m，4H)，2.47(s，3H)，2.87(d，3H，J5.0)，3.07(t，4H，J5.0)，7.38(dd，1H，J9.0&2.5)，7.93(d，1H，J 9.0)，7.97(d，1H，J2.5)，8.10(d，1H，J5.0)8.41(d，1H，J 3.5)，9.45(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 400.170[M+H]+；C19H23FN7OS+[M+H]+计算值400.1714。RP-HPLC方法A：tR 12.08min，纯度>95％，方法B：tR8.70min，纯度>98％。
5-(5-氟-2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(52)
向粗品1-(5-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍(596mg，2.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到52，为红棕色固体(29mg，6％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.88(d，3H，J 4.5)，2.94(s，3H)，3.23(t，4H，J5.0)，3.27(t，4H，J5.5)，3.33(s，3H)，7.52(app d，1H，J 8.0)，7.6(d，1H，J9.0)，8.02(d，1H，J2.5)，8.15(d，1H，J4.5)，8.44(d，1H，J3.5)，9.69(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 479.1441[M+H]+；C19H24FN8O2S+[M+H]+计算值479.1442。RP-HPLC方法A：tR10.60min，纯度>94％，方法B：tR 8.08min，纯度>97％。
5-(2-((5(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(53)
向粗品1-(5-(1，4-二氮杂环庚烷-1-基)吡啶-2-基)胍双2,2,2-三氟乙酸盐(469mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-2-氟-1-(4-甲氧-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(243mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00毫摩尔)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)纯化，得到53，为橙色固体(40mg，10％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.75-1.80(m，2H)，2.45(d，3H，J2.0)，2.62(t，2H，J6.0)，2.85(t，2H，J5.5)，3.45(t，2H，J5.0)，3.53(t，2H，J6.0)，7.13(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.78(s，1H)，7.79(d，1H，J4.5)，8.08(q，1H，J4.5)，8.37(d，1H，J3.5)，9.21(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 415.1821[M+H]+；C19H24FN8S+[M+H]+计算值415.1823。RP-HPLC方法A：tR 8.72min，纯度>98％，方法B：tR 2.84min，纯度100％。
5-(5-氟-2-(吡啶-2-基-氨基)嘧啶-4-基)-N，4-二甲基噻唑-2-胺(54)
向粗品1-(吡啶-2-基)胍2,2,2-三氟乙酸盐(409mg，3.00mmol)的乙二醇单甲醚(8mL)溶液中加入(E)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(4-甲基-2-(甲基氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(487mg，2.00mmol)和NaOH(160mg，4.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到54，为橙色固体(70mg，22％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.89(d，3H，J4.5)，3.34(s，1H)，6.99(m，2H)，7.75(t，1H，J7.5)，8.14(m，2H)，8.29(d，1H，J3.0)，8.50(d，1H，J 3.0)，9.79(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 317.0989[M+H]+；C14H14FN6S+[M+H]+计算值317.0979。RP-HPLC方法A：tR10.45min，纯度>97％，方法B：tR 9.24min，纯度>98％。
N-异丙基-4-甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(55)
向1-(4-(6-((4-(2-(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(143mg，0.32mmol)的甲醇溶液中，加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并纯化色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，得到黄色的55固体(120mg，92％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.19(d，6H，J6.5，CH(CH3)2)，2.46(s，3H)，2.87(t，4H，J5.0)，3.03(t，4H，J 5.5)，3.80-3.87(m，1H，CH)，6.90(d，1H，J 5.5)，7.37(dd，1H，J9.0&3.0)，8.00(d，1H，J 3.0)，8.05(d，2H，J 7.5)，8.08(d，1H，J 9.0)，8.33(d，1H，J5.5)，9.29(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 411.2072[M+H]+；C20H27N8S+[M+H]+计算值411.2074。RP-HPLC方法A：tR 8.43min，纯度>96％，方法B：tR 7.61min，纯度>99％。
N-异丙基-4-甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(56)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(253mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过纯化层析(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到黄色固体56(131mg，31％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.19(d，6H，J 6.5)，2.22(s，3H)，2.46(s br，7H)，3.11(t，4H，J 5.0)3.81-3.85(m，1H)，6.90(d，1H，J5.5)，7.38(dd，1H，J9.0&3.0)，8.00(d，1H，J3.0)，8.04(d，2H，J7.5)，8.08(d，1H，J9.0)，8.34(d，1H，J 5.5)，9.32(s，1H).HRMS(ESI)：m/z 425.2235[M+H]+；C21H29N8S+[M+H]+计算值425.2230。RP-HPLC方法A：tR8.563min，纯度100％，方法B：tR 7.73min，纯度100％。
1-(4-(6-((4-2(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(57)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(525mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(253mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，得到57，为橙色固体(80mg，18％，)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.19(d，6H，J6.5)，2.05(s，3H)，2.46(s，3H)，3.06(t，2H，J5.0)，3.13(t，2H，J5.0)，3.59(q，4H，J5.5)，3.81-3.85(m，1H)，6.91(d，1H，J5.5)，7.40(dd，1H，J9.0&3.0)，8.02(d，1H，J3.0)，8.05(m，2H，J7.5)，8.10(d，1H，J9.0)，8.33(d，1H，J5.5)，9.31(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 453.2187[M+H]+；C22H29N8OS+[M+H]+计算值453.2180。RP-HPLC方法A：tR 10.03min，纯度100％，方法B：tR 8.85min，纯度>99％。
N-异丙基-4-甲基-5-(2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(58)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(443mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(253mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，得到58，为黄色固体(200mg，48％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.19(d，6H，J6.5)，2.45(s，3H)，3.09(t，4H，J4.0)，3.76(t，4H，J4.0)，3.81-3.85(m，1H)，6.90(d，1H，J5.5)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，7.01(d，1H，J2.5)，8.05(d，2H，J7.5)，8.10(d，1H，J9.0)，8.34(d，1H，J5.5)，9.33(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 412.1912[M+H]+；C20H26N7OS+[M+H]+计算值412.1914。RP-HPLC方法A：tR10.21min，纯度100％，方法B：tR 9.08min，纯度>99％。
5-(2-((5-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N-异丙基-4-甲基噻唑-2-胺(59)
向粗品1-(5-(1，4-二氮杂环庚烷)-1-基)吡啶-2-基)胍二2,2,2-三氟乙酸盐(469mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(2-(异丙基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(253mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)，将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物用色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，得到59固体(114mg，34％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.19(d，6H，J6.5)，2.04-2.09(m，2H)，2.47(s，3H)，3.16(s，1H，J 5.5)，3.27(s，2H，J 5.0)，3.50(d，2H，J6.0)，3.70(t，2H，J 5.0)，3.80-3.86(m，1H)，6.87(d，1H，J 5.5Hz)，7.24(dd，1H，J6.0&3.0)，7.89(d，1H，J 3.0)，8.03(d，1H，J5.5Hz)，8.05(d，1H，J4.0)，8.31(d，1H，J5.5)，8.75(s，1H)，9.15(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 425.2231[M+H]+；C21H29N8S+[M+H]+计算值425.2230。RP-HPLC方法A：tR 8.48min，纯度>95％，方法B：tR 7.69min，纯度>98％。
N-环戊基-4-甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(60)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)和NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝92:8)，并用DCM和MeOH重结晶，得到60，为深黄色固体(70.0mg，16％)。熔点210-213℃。1HNMR(DMSO-d6)δ1.49-1.68(m，7H)，1.89-1.94(m，2H)，2.46(s，3H)，2.85(t，4H，J4.5)，3.02(t，4H，J5.0)，3.98(m，1H)，6.90(d，1H，J5.5)，7.36(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.98(d，1H，J3.0)，8.07(d，1H，J9.0)，8.18(d，1H，J7.0)，8.33(d，1H，J5.5)，9.33(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z437.2222[M+H]+；C22H29N8S+[M+H]+计算值437.2230。RP-HPLC方法A：tR 10.10min，纯度>99％，方法B：tR 7.78min，纯度>99％。
N-环戊基-5-(5-氟-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(61)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH:NH4OH＝90:10:1)，得到61，为黄色固体(101mg，22％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.44-1.57(m，4H)，1.66-1.69(m，2H)，1.92-1.95(m，2H)，2.47(s，3H)，3.26(t，4H，J2.5)，3.31(t，4H，J2.5)，3.95(m，1H，环戊烷-CH)，7.46(dd，1H，J9.0&3.0)，8.00(d，1H，J9.0)，8.05(d，1H，J3.0)，8.25(d，1H，J7.0)，8.42(d，1H，J3.5)，8.84(d，1H，J3.5)，9.57(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z455.2139[M+H]+；C22H28FN8S+[M+H]+计算值455.2136。RP-HPLC方法A：tR 9.55min，纯度100％，方法B：tR 7.86min，纯度100％。
N-环戊基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)噻唑-2-胺(62)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(333mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，得到62，为橙色固体(260mg，53％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.50-1.59(m，4H)，1.65-1.70(m，2H)，1.92-1.97(m，2H)，2.26(s，1H)，2.84(t，4H，J5.0)，3.02(t，4H，J5.0)，3.96(m，1H)，6.96(d，1H，J6.0)，7.37(dd，1H，J9.0&3.0)，7.98(d，1H，J4.0)，7.99(d，1H，J1.0)，8.50(d，1H，J5.5)，8.59(d，1H，J6.5)，9.59(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 491.1952[M+H]+；C22H26F3N8S+[M+H]+计算值491.1948。RP-HPLC方法A：tR 10.31min，纯度100％，方法B：tR 8.30min，纯度>98％。
N-环戊基-4-甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(63)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝93:7)，并用DCM和MeOH重结晶，得到63，为黄色固体(100mg，22％)。熔点202-205℃。1HNMR(CDCl3)δ1.51-1.71(m，6H)，1.99-2.05(m，2H)，2.35(s，3H)，2.48(s，3H)，2.62(t，4H，J5.0)，3.14(t，4H，J5.0)，3.79(br，1H)，6.03(br，1H)，6.78(d，1H，J5.0)，7.27(dd，1H，J9.0&3.0)，7.96(d，1H，J3.0)，8.10(s，1H)，8.21(d，1H，J9.0)，8.29(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z451.2396[M+H]+；C23H31N8S+[M+H]+计算值451.2387。RP-HPLC方法A：tR 9.56min，纯度>99％，方法B：tR 9.50min，纯度>98％。
N-环戊基-5-(5-氟-2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(64)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(234mg，1.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(148mg，0.50mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(40.0mg，1.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝94:6:0.5)，并用Et2O重结晶，得到64，为深棕色固体(100mg，5％)。熔点207-209℃。1HNMR(CDCl3)δ1.52-1.79(m，6H)，1.06-2.12(m，2H)，2.38(s，3H)，2.55(s，3H)，2.63(t，4H，J 5.0)，3.18(t，4H，J5.0)，3.84(m，1H)，5.56(d，J6.0，1H)，7.31(dd，1H，J9.0&3.0)，7.82(s，1H)，7.99(d，1H，J3.0)，8.18(d，1H，J 9.0)，8.23(d，1H，J3.5)。HRMS(ESI)：m/z 469.2287[M+H]+；C23H30FN8S+[M+H]+计算值469.2293。RP-HPLC方法A：tR 10.37min，纯度>97％，方法B：tR 8.42min，纯度>98％。
N-环戊基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)噻唑-2-胺(65)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(148mg，0.50mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过纯化层析(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到65，为棕色固体(30mg，6％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.66-1.59(m，4H)，1.67-1.69(m，2H)，1.93-1.97(m，2H)，2.21(s，1H)，2.46(t，4H，J5.0)，3.12(t，4H，J 5.0)，3.96(m，1H)，6.96(d，1H，J6.0)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，8.00(d，1H，J79.0)，8.01(d，1H，J3.0)，8.50(d，1H，J5.5)，8.59(d，1H，J7.0)，9.62(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 505.2103[M+H]+；C23H28F3N8S+[M+H]+计算值505.2104。RP-HPLC方法A：tR 10.49min，纯度96％，方法B：tR9.46min，纯度>97％。
N-环戊基-5-(2-((5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(66)
向粗品1-(5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(496mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，并用MeOH重结晶，得到66，为黄色固体(117mg，25％)。1HNMR(CDCl3)δ1.14(t，3H，J7.0)，1.56-1.76(m，6H)，2.06-2.12(m，2H)，2.49(q，2H，J7.5)，2.54(s，3H)，2.64(s，3H)，3.19(t，4H，J4.5)，3.14(t，4H，J5.0)，3.86(app s，1H)，5.77(s，1H)6.84(d，1H，J5.0)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.94(d，1H，J3.0)，7.94(s，1H)，8.01(d，1H，J3.0)，8.26d，1H，J9.0)，8.33(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 465.2541[M+H]+；C24H33N8S+[M+H]+计算值465.2543。RP-HPLC方法A：tR 13.24min，纯度>98％，方法B：tR 8.96min，纯度100％。
N-环戊基-5-(2-((5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(67)
向粗品I-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(497mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到67，为黄色固体(74mg，15％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.03(t，3H，J7.0)，1.50-1.57(m，4H)，1.66-1.69(m，2H)，1.90-1.95(m，2H)，2.37(q，2H，J7.0)，2.46(d，3H，J2.5)，3.11(t，4H，J5.0)，3.32(s，4H)，3.96(app s，1H)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，7.94(d，1H，J9.0)，7.97(d，1H，J3.0)，8.23(d，1H，J 7.0)，8.40(d，1H，J 3.5)，9.44(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 483.2442[M+H]+；C24H32FN8S+[M+H]+计算值483.2449。RP-HPLC方法A：tR9.78min，纯度>98％，方法B：tR 7.88min，纯度100％。
1-(4-(6-((4-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(68)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-酮(279mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液，加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，得到68，为浅黄色固体(153mg，32％)。熔点207-2100℃。1HNMR(CDCl3)δ1.57-1.75(m，6H)，2.05-2.11(m，2H)，2.14(s，3H)，2.54(s，3H)，3.08-3.14(m，4H)，3.63(t，2H，J5.0)，3.79(t，2H，J 5.0)，3.87(m，1H)，5.70(s，1H)，6.86(d，1H，J5.0)，7.33(dd，1H，J9.0&3.0)，8.03(d，1H，J2.0)，8.19(br s，1H)，8.31(d，1H，J9.0)，8.35(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 479.2340[M+H]+；C24H31N8OS+[M+H]+计算值479.2336。RP-HPLC方法A：tR10.86min，纯度>99％，方法B：tR 8.51min，纯度>98％。
1-(4-(6-((4-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(69)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，得到69，为浅黄色固体(153mg，32％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.51-1.75(m，4H)，1.66-1.68(m，2H)，1.92-1.95(m，2H)，2.04(s，3H)，2.47(d，3H，J 2.0)，3.06(t，2H，J5.0)，3.12(t，2H，J5.0)，3.58(t，4H，J5.0)，3.96(t，1H)，7.43(dd，1H，J9.0&3.0)，7.98(d，1H，J9.0)，8.01(d，1H，J3.0)，8.24(d，1H，J7.0)，8.42(d，1H，J3.5)，9.51(br s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 497.2245[M+H]+；C24H30FN8OS+[M+H]+计算值497.2242。RP-HPLC方法A：tR11.02min，纯度>97％，方法B：tR 9.91min，纯度>96％。
1-(4-(6-((4-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(70)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(333mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过使用纯化色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96：4)，得到70，为棕色固体(50mg，9％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.53-1.59(m，4H)，1.67-1.69(m，2H)，1.94-1.97(m，2H)，2.05(s，3H)3.08(t，2H，J4.5)，3.14(t，2H，J4.5)，3.59(app d，4H，J4.5)，3.95(m，1H)，6.97(d，1H，J5.0)，7.43(dd，1H，J9.0&3.0)，8.02(s，1H)，8.04(d，1H，J 3.0)，8.50(d，1H，J5.5)，8.59(d，1H，J6.5)，9.66(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 533.2053[M+H]+；C24H27F3N8OS+[M+H]+计算值533.2058。RP-HPLC方法A：tR12.56min，纯度>97％，方法B：tR 9.39min，纯度>95％。
N-环戊基-4-甲基-5-(2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(71)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(442mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，并用Et2O重结晶，得到71，为深棕色固体(130mg，30％)。熔点262-263℃。1HNMR(CDCl3)δ1.57-1.74(m，6H)，2.06-2.12(m，2H)，2.55(s，3H)，3.13(t，4H，J4.5)，3.88(t，4H，J4.5)，5.67(d，J4.5,1H)，6.85(d，1H，J5.5)，7.32(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.02(d，1H，J 3.0)，8.16(s，1H)，8.30(d，1H，J9.5)，8.35(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 438.2088[M+H]+；C22H28N7OS+[M+H]+计算值438.2071。RP-HPLC方法A：tR 10.92min，纯度100％，方法B：tR 9.51min，纯度>99％。
N-环戊基-5-(2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)噻唑-2-胺(72)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(442mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，并用DCM和MeOH重结晶，得到72，为棕色固体(120mg，26％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.50-1.57(m，4H)，1.66-1.69(m，2H)，1.90-1.95(m，2H)，2.47(d，1H，J2.5)，3.09(t，4H，J5.0)，3.75(t，4H，J5.0)，3.96(m，1H)，7.42(dd，1H，J9.0&3.0)，7.96(d，1H，J9.0)，7.98(d，1H，J3.0)，8.24(d，1H，J7.0)，8.41(d，1H，J7.0)，9.52(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 456.1976[M+H]+；C22H25F3N7OS+[M+H]+计算值456.1967。RP-HPLC方法A：tR 11.28min，纯度96％，方法B：tR8.93min，纯度100％。
N-环戊基-5-(2-((5-吗啉代吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)噻唑-2-胺(73)
向粗品1-(5-吗啉代吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(442mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(333mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，PE至PE：EtOAc＝60:40)，得到73，为橙色固体(200mg，41％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.52-1.59(m，4H)，1.64-1.69(m，2H)，1.92-1.99(m，2H)，3.09(t，4H，J4.5)，3.75(t，4H，J4.5)，3.95(m，1H)6.97(d，1H，J5.0)，7.41(dd，1H，J9.0&3.0)，8.01(s，1H)，8.02(d，1H，J2.5)，8.51(d，1H，J5.5)，8.59(d，1H，J6.5)，9.64(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 492.1786[M+H]+；C22H24F3N7OS+[M+H]+计算值492.1788。RP-HPLC方法A：tR 12.90min，纯度>97％，方法B：tR 9.69min，纯度>99％。
5-(2-((5-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N-环戊基-4-甲基噻唑-2-胺(74)
向粗品1-(5-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(702mg，3.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(558mg，2.00mmol)的2-甲氧基乙醇(5mL)中的溶液中加入NaOH(160.0mg，4.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，并用正己烷和DCM重结晶，得到74，为深黄色固体(90mg，10％)。熔点185-186℃。1HNMR(CDCl3)δ1.50-1.77(m，10H)，1.95(d，2H，J10.5)，2.07-2.13(m，2H)，2.54(s，3H)，2.75-2.85(m，3H)，3.53-3.56(m，2H)，3.85-3.91(m，1H)，6.84(d，1H，J5.5)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.75(s，1H)，8.00(d，1H，J3.0)，8.25(d，1H，J9.0)，8.32(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 451.2415[M+H]+；C23H31N8S+[M+H]+计算值451.2387。RP-HPLC方法A：tR9.34min，纯度>95％，方法B：tR 8.06min，纯度>95％。
N-环戊基-4-甲基-5-(2-((5-(哌啶-1-基)-吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(75)
向粗品1-(5-(哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍(439mg，2.00mmol)和(E)1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝92:8)，并用DCM和MeOH重结晶，得到75，为黄色固体(250mg，57％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.53(s br，6H)，1.64(s br，6H)，1.93(s br，2H)，2.46(s，3H)，3.07(t，4H，J 10.0)，3.98(s br，H)，6.89(d，1H，J 5.0)，7.37(app d，1H，J9.0)，7.99(s，1H)，8.06(d，1H，J9.0)，8.18(s，1H)，8.33(d，1H，J5.0)，9.26(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 436.2280[M+H]+；C23H30N7S+[M+H]+计算值436.2278。RP-HPLC方法A：tR 12.08min，纯度>99％，方法B：tR 9.36min，纯度>99％。
N-环戊基-4-甲基-5-(2-(吡啶-2-基-氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(78)
向粗品1-(吡啶-2-基)胍2,2,2-三氟乙酸盐(272mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(279mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝97:3)，得到78，为橙色固体(150mg，43％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.50-1.57(m，4H)，1.66-1.69(m，2H)，1.91-1.95(m，2H)，2.48(s，3H)，3.98(m，1H)，6.99(m，2H)，7.74(m，1H)，8.23(d，1H，J7.0)，8.26(d，1H，J 8.5)，8.29(m，1H)，8.39(d，1H，J5.5)，9.59(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 353.1555[M+H]+；C18H21N6S+[M+H]+计算值353.1543。RP-HPLC方法A：tR 10.45min，纯度>97％，方法B：tR9.24min，纯度>98％。
4-(6-((4-(2-(环戊基氨基)-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲醛(79)
在N-环戊基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)噻唑-2-胺合成并纯化的过程中得到副产物79，为米色固体(25mg，7％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.53-1.59(m，4H)，1.67-1.69(m，2H)，1.94-1.97(m，2H)，3.08(t，2H，J 5.0)，3.14(t，2H，J5.0)，3.59(m，4H)，3.96(m，1H)，6.97(d，1H，J4.5)，7.45(dd，1H，J9.0&3.0)，8.03(d，1H，J9.0)。8.05(d，1H，J3.0)，8.09(s，1H)，8.50(d，1H，J5.5)，8.59(d，1H，J 7.0)，9.67(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 519.1897[M+H]+；C23H26F3N8OS+[M+H]+计算值519.1906。RP-HPLC方法A：tR11.57min，纯度>91％，方法B：tR 9.39min，纯度>95％。
N-环戊基-5-(2-((5-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(80)
向粗品1-(5-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(524mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOI1(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过纯化层析(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝90:10:1)，得到80黄色固体(134mg，27％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.49-1.56(m，6H)，1.64-1.70(m，2H)，1.84(d，3H，J 11.5)1.90-1.96(m，2H)，2.20(s，7H)，2.46(s，3H)，2.65(t，2H，J11.0)，3.63(d，1H，J12.0)，3.92-3.99(m，1H)，7.39(dd，1H，J9.0&3.0)，7.93(d，1H，J9.0)，7.98(d，1H，J2.5)，8.23(1H，J7.0)，8.40(d，1H，J3.0)，9.41(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 497.2608[M+H]+；C25H34FN8S+[M+H]+计算值497.2606。RP-HPLC方法A：tR9.81min，纯度>95％，方法B：tR 8.75min，纯度>99％。
5-(2-((5-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-N-环戊基-4-甲基噻唑-2-胺(81)
向粗品1-(5-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)吡啶-2-基)胍二(2,2,2-三氟乙酸)盐(469mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的2-甲氧基乙醇(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)纯化，得到81，为黄色固体(100mg，21％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.49-1.59(m，4H)，1.64-1.72(m，2H)，1.92-1.95(m，2H)，2.05-2.09(m，2H)，2.47(d，3H，J2.0)，2.55(s，1H)，3.16(s br，2H)，3.27(d，2H，J4.0)，3.70(t，2H，J 5.0)，3.94-3.98(m，1H)，7.32(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.87(d，1H，J2.5)，7.89(d，1H，J3.0)，8.27(d，1H，J7.0)，8.40(d，1H，.73.5)，8.9(sbr，1H)，9.54(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 497.2608[M+H]+；C25H34FN8S+[M+H]+计算值497.2606。RP-HPLC方法A：tR 9.81min，纯度>95％，方法B：tR 8.75min，纯度>99％。
N-环戊基-5-(5-氟-2-((5-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基噻唑-2-胺(82)
将粗品I-(5-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍(596mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(297mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，得到82，为黄色固体(53mg，10％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.51-1.57(m，4H)，1.66-1.68(m，2H)，1.91-1.95(m，2H)，2.47(s，3H)，2.94(s，3H)，3.22(t，4H，J5.0)，3.26(t，4H，J5.0)，3.95-3.97(m，1H)，7.46(dd，1H，J9.0&2.5)，7.98(d，1H，J9.0)，8.02(d，1H，J2.5)，8.24(d，1H，J7.0)，8.42(d，1H，J3.5)，9.57(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 533.1916[M+H]+；C23H30FN8O2S2 +[M+H]+计算值53.1912。RP-HPLC方法A：tR10.96min，纯度>99％，方法B：tR10.25min，纯度>98％。
N-环戊基-5-(2-((5-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(83)
向5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-环戊基-4-甲基噻唑-2-胺(275mg，1.00mmol)的二氧六环(3mL)溶液中加入1-((6-溴吡啶-3-基)甲基)-4-乙基哌嗪(341mg，1.2mmol)，Pd2dba3(45.8mg，0.05mmol)，xantphose(58mg，0.1mmol)和t-BuONa(144mg，1.5mmol)，将反应混合物在150℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝9:1:0.3)，并用DCM和MeOH重结晶得到83，为白色固体(200mg，42％)。1HNMR(CDCl 3)δ1.09(t，3H，J7.0)，1.58-1.76(m，6H)，2.08-2.14(m，2H)，2.43(q，2H，J7.0，CH2CH3)，2.55(s br，11H)，3.48(s，2H)，3.86-3.92(m，1H)，5.42(d，2H，J7.0)，6.90(d，1H，J5.5)，7.68(dd，1H，J9.0&2.5)，7.89(s，1H)，8.19(d，1H，J2.0)，8.35-8.38(m，2H)。HRMS(ESI)：m/z 479.2703[M+H]+；C25H35N8S+[M+H]+计算值479.2700。RP-HPLC方法A：tR 9.89min，纯度>96％，方法B：tR 8.66min，纯度>96％。
N-环戊基-5-(2-((5-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2-胺(84)
向5-(2-氨基-5-氟嘧啶-4-基)-N-环戊基-4-甲基噻唑-2-胺的溶液(200mg，0.68mmol)的二氧六环(3mL)溶液中加入1-((6-溴吡啶-3-基)甲基)-4-乙基哌嗪(233mg，0.82mmol)，Pd2dba3(31mg，0.034mmol)，xantphose(41mg，0.07mmol)和t-BuONa(98mg，1.02mmol)，将反应混合物在150℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残留物是通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝93:7)纯化，得到84，为橙色固体(100mg，29％)。1HNMR(DMSO-d6)δ0.99(t，3H，J 7.0)，1.49-1.59(m，4H)，1.64-1.72(m，2H)，1.90-1.97(m，2H)，2.38(s br，10H)，2.48(d，3H，J2.5)，3.42(s，2H)，3.95-3.98(m，1H)，7.64(dd，1H，J8.5和2.0)，8.10(d，1H，J8.5)，8.16(d，1H，J2.0)，8.27(d，1H，J7.0)，8.46(d，1H，J3.5)，9.77(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 497.2601[M+H]+；C25H34FN8S+[M+H]+计算值497.2606。RP-HPLC方法A：tR 9.89min，纯度>96％，方法B：tR 8.66min，纯度>96％
N-环戊基-N，4-二甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(85)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(319mg，1.45mmol)和(E)-1-(2-(环戊基(甲基)氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(250mg，0.85mmol)乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(68.0mg，1.70mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝93:7)，并用己烷重结晶，得到85，为红棕色固体(113mg，25％)。熔点166-169℃。1HNMR(CDCl 3)δ1.58-1.79(m，6H)，1.96-2.02(m，2H)，2.11(br，1H)2.56(s，3H)，3.01(s，3H)，3.06(t，4H，J6.0)，3.10(t，4H，J6.0)，4.55(m，1H)，6.82(d，J5.5)，7.32(dd，1H，J9.0&3.0)，8.02(d，1H，J3.0)，8.13(br，1H)，8.28(d，1H，J9.0)，8.32(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 451.2387[M+H]+；C23H31N8S+[M+H]+计算值451.2387。RP-HPLC方法A：tR 10.28min，纯度>95％，方法B：tR 8.69min，纯度>95％。
N-环戊基-N，4-二甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶-4-基)噻唑-2-胺(86)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基(甲基)氨基)-4-甲基噻唑-2-基)吡啶-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(293mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过色谱法(硅胶，DCM倾至DCM:MeOH:NH40H＝93:7:0.5)纯化，并用MeOH重结晶，得到86，为黄色固体(149mg，32％)。熔点169-170℃。1HNMR(CDCl 3)δ1.65-1.76(m，6H)，1.99-2.02(m，2H)，2.56(s，3H)，2.75(s，3H)，2.75(s，3H)，3.16(br，4H)，3.47(t，4H，J5.0)，4.58(m，1H)，6.86(d，1H，J5.5)，7.36(dd，1H，9.0&3.0)，8.05(d，J3.0)，8.07(s，1H)，8.32(d，1H，J5.5)，8.35(d，1H，J 9.0)。HRMS(ESI)：m/z 465.2530[M+H]+；C24H33N8S+[M+H]+计算值465.2543。RP-HPLC方法A：tR10.15min，纯度>96％，方法B：tR 8.47min，纯度>96％。
1-(4-(6-((4-(2-(环戊基(甲基)氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(87)
向粗品1-(5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(525mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(环戊基(甲基)氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(293mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝96:4)，并用Et2O重结晶，得到87，为黄色固体(300mg，61％)。熔点153-154℃。1HNMR(CDCl 3)δ1.61-1.76(m，6H)，1.97-2.02(m，2H)，2.15(s，3H)，2.57(t，2H，J5.0)，3.01(s，3H)，3.09(t，2H，J5.0)，3.13(t，2H，J5.0)，3.63(t，2H，J5.0)，3.79(t，2H，J5.0)，4.56(m，1H)，6.85(d，1H，J5.5)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.93(s，1H)，8.00(d，1H，J3.0)，8.31(s，1H)，8.32(d，1H，J 5.0)。HRMS(ESI)：m/z 493.2493[M+H]+；C25H33N8OS+[M+H]+计算值493.2493。RP-HPLC方法A：tR 11.55min，纯度>96％，方法B：tR 9.57min，纯度>96％。
N，N-二环戊基-4-甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(88)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(441mg，2.00mmol)和(E)-1-(2-(二环戊基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(200mg，0.58mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:10)，并用DCM和MeOH重结晶，得到88，为黄色固体(60mg，21％)。1HNMR(CDCl 3)δ1.53-1.59(m，8H)，1.74-1.76(m，4H)，1.85-1.19(m，2H)，1.91-1.98(m，2H)，2.42-2.47(m，1H)，2.58(s，3H)，3.05(t，4H，J3.0)，3.10(t，4H，J3.0)，3.41-3.44(m，1H)，4.47-4.54(m，1H)，6.61(d，1H，J5.5)，7.32(dd，1H，J9.0&3.0)，7.70(s，1H)，7.98(d，1H，J3.0)，8.25(d，IH，J9.0)，8.28(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 505.2873[M+H]+；C27H37N8S+[M+H]+计算值505.2856。RP-HPLC方法A：tR 8.57min，纯度>98％，方法B：tR 7.33min，纯度>96％。
4-甲基-N-苯基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(89)
向粗品1-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(2-二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(苯氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(287mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM倾斜至DCM:MeOH:NH4OH＝90:10:0.5)，得到89，为淡黄色固体(178mg，40％)。熔点228-230℃。1HNMR(DMSO-d6)δ2.58(s，4H)，2.86(t，4H，J4.5)，3.03(t，4H，J4.0)，7.00(m，2H)，7.35(m，3H)，7.65(d，2H，J8.0)，8.00(d，1H，J2.5)，8.06(d，1H，J9.0)，8.41(d，1H，J5.0)，9.46(s，1H)，10.53(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z445.1918[M+H]+；C23H25N8S+[M+H]+计算值445.1917。RP-HPLC方法A：tR 10.01min，纯度100％，方法B：tR 8.17min，纯度100％。
4-甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-N-苯基噻唑-2-胺(90)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲氨基)-1-(4-甲基-2-(苯氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(287mg，1.00mmol)在乙二醇单甲醚(3mL)中的溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝90:8)，并用DCM重结晶，得到90，为淡黄色(220mg，48％)。熔点210-211℃。1HNMR(DMSO-d6)δ2.23(s，3H)，2.58(s，3H)，3.12(br，4H)，3.38(t，4H)，7.00(m，2H)，7.37(m，3H)，7.65(d，2H，J8.0)，8.01(d，1H，J2.0)，8.07(d，1H，J9.0)，8.41(d，1H，J5.0)，9.46(s，1H)，10.54(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z459.2063[M+H]+；C24H27N8S+[M+H]+计算值459.2074。RP-HPLC方法A：tR9.93min，纯度100％，方法B：tR 9.17min，纯度100％。
N，4-二甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-4-基)-N-苯基噻唑-2-胺(91)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲基-2-(甲基(苯基))氨基)噻唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(301mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)，将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝92:8)纯化，用己烷重结晶，得到91，为红棕色固体(184mg，39％)，熔点212-215℃。1HNMR(CDCl 3)δ2.36(s，3H)，2.59(app br，7H),3.14(t，4H，J5.0)，3.57(s，3H)，6.80(d，1H，J5.5)，7.19(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.32(m，1H)，7.44(m，4H)，8.00(d，1H，J 3.0)，8.04(s，1H)，8.16(d，1H，J9.0)，8.32(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z 473.2220[M+H]+；C25H29N8S+[M+H]+计算值473.2230。RP-HPLC方法A：tR 9.57min，纯度>98％，方法B：tR7.90min，纯度>98％。
4-甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2(3H)-酮(92)
在合成并纯化4-(2-甲氧基-4-甲基噻唑-5-基)-N-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺时得到副产物92，为灰色固体(31mg，10％)。熔点228-230℃。1HNMR(DMSO-d6)δ2.23(s，3H)，2.42(s，3H)，2.47(t，4H，J4.5)，3.12(t，4H，J4.5)，6.90(d，1H，J5.0)，7.45(dd，1H，J 9.0&3.0)，7.99(d，1H，J3.0)，8.02(d，1H，J9.0)，8.41(d，1H，J5.0)，9.53(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 384.1596[M+H]+；C18H22N7OS+[M+H]+计算值384.1601。RP-HPLC方法A：tR8.59min，纯度>97％，方法B：tR 3.59min，纯度>99％。
3,4-二甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2(3H)-酮(93)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-5-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-3,4-二甲基噻唑-2(3H)-酮(226mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH：NH4OH＝94:6:0.5)，并用己烷重结晶，得到93，为黄色固体(72mg，18％)。熔点243-244℃。1HNMR(CDCl 3)δ2.37(s，3H)，2.59(s，3H)，2.61(t，4H，J 4.0)，3.19(t，4H，J4.0)，3.37(s，3H)，6.73(d，1H，J5.0)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.87(s，1H)，8.00(d，1H，J3.0)，8.21(d，1H，J9.0)，8.406(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 398.1769[M+H]+；C19H24N7OS+[M+H]+计算值398.1758。RP-HPLC方法A：tR 8.25min，纯度100％，方法B：tR 3.31min，纯度100％。
3-乙基-4-甲基-5-(2-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2(3H)-酮(94)
向粗品1-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)胍三氟乙酸盐(468mg，2.00mmol)和(E)-5-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-3-乙基-4-甲基噻唑-2(3H)-酮(240mg，1.00mmol)的乙二醇单甲醚(3mL)溶液中加入NaOH(80.0mg，2.00mmol)。将反应混合物在180℃下微波照射加热1小时，冷却至室温并减压浓缩。残余物通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝94:6)，得到94，为黄色固体(108mg，26％))。熔点181-182℃。1HNMR(CDCl3)δ1.31(t，3H，J7.0)，2.37(s，3H)，2.59(s，3H)，2.61(t，4H，J5.0)，3.19(t，4H，J5.0)，3.87(q，3H，J7.0)，6.73(d，1H，J5.0)，7.34(dd，1H，J 9.0&3.0)，8.03(s，1H)，8.22(s，1H)，8.22(d，1H，J9.0)，8.40(d，1H，J5.0)。HRMS(ESI)：m/z 412.1888[M+H]+；C20H26N7OS+[M+H]+计算值412.1914。RP-HPLC方法A：tR 8.36min，纯度>99％，方法B：tR3.23min，纯度>95％。
5-(2-((5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2(3H)-酮(95)
在合成并纯化1-(4-(6-((4-(4-甲基-2-(甲硫基)噻唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌嗪-1-基)乙-1-酮时得到副产物95，为棕色固体(30mg，7％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.04(s，3H)，2.42(s，3H)，3.07(t，2H，J 5.0)，3.14(t，2H，J 5.0)，3.58(app m，4H)，6.91(d，1H，J5.5)，7.50(dd，1H，J9.0&3.0)，8.02(d，1H，J3.0)，8.0 5(d，1H，J 9.0)，8.42(d，1H，J5.0)，9.56(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 412.1560[M+H]+；C19H22N7O2S+[M+H]+计算值412.1550。RP-HPLC方法A：tR 9.03min，纯度>99％，方法B：tR7.58min，纯度100％。
3-环戊基-4-甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2(3H)-酮(96)
向5-(2-((5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-3-环戊基-4-甲基噻唑-2(3H)-酮(100mg，0.21mmol)在甲醇溶液中加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM：MeOH＝9:1)，得到96，为黄色固体(73mg，80％)。1HNMR(CDCl3)δ1.61-1.64(m，2H)，1.90-1.99(m，4H)，2.26-2.30(m，2H)，2.58(s，3H)，3.07(t，4H，J 2.5)，3.11(t，4H，J 3.0)，4.43(m，1H)，6.70(d，1H，J5.5)，7.34(dd，1H，J9.0&3.0)，7.90(s，1H)，8.00(d，1H，J3.0)，8.22(d，1H，J9.0)，8.39(d，1H，J5.5)。HRMS(ESI)：m/z438.2073[M+H]+；C22H28N7OS+[M+H]+计算值438.2071。RP-HPLC方法A：tR 13.52min，纯度>94％，方法B：tR10.0min，纯度>99％。
4-甲基-5-(2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)噻唑-2(3H)-酮(97)
向5-(2-((5-(4-乙酰基哌嗪-1-基)哌啶-2-基)氨基)嘧啶-4-基)-4-甲基噻唑-2(3H)-酮(50mg，0.13mmol)甲醇的溶液加入HCl(32％，3mL)并回流过夜。将反应混合物浓缩并通过色谱法纯化(硅胶，DCM至DCM:MeOH:NH4OH)＝9:1:1)，得到97，为灰色固体(41mg，91％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.42(s，3H)，3.00(t，4H，J5.0)，3.16(t，4H，J5.0)，6.91(d，1H，J9.0&3.0)，7.47(dd，1H，J9.0&3.0)，8.01(d，1H，J3.0)，8.04(d，1H，J9.0)，8.41(d，1H，J5.5)，9.54(s，1H)。HRMS(ESI)：m/z 370.1433[M+H]+；C17H20N7OS+[M+H]+计算值370.1445。RP-HPLC方法A：tR7.42min，纯度>97％，方法B：tR3.59min，纯度>99％。
实施例2生物活性
激酶分析
Eurofins Pharma Discovery或Reaction Biology Corporation Kinase Profilerservices被用来通过放射测定法测定CDK和其他激酶的抑制作用。CDK4/D1、CDK6/D3和CDK9/T1的抑制作用也使用ADP Glo激酶测定仪测定(Promega Corporation，Madison，USA)。简言之，CDK4/D1和CDK6/D3的激酶反应进行了表达用激酶反应缓冲液(40nM Tris碱pH7.5,20mM MgCl 2，0.4mM DTT)，0.1mg/ml BSA和RB-CTF底物(视网膜母细胞瘤蛋白C末端级分)。对于CDK9/CyclinT1，激酶反应用标准测定缓冲液和激酶稀释缓冲液和RBER-IRStide底物进行。制备10种浓度(10μM～0.5nM)1:3的稀释液用来测试化合物。加入ATP开始激酶反应，在37℃下孵育40分钟，然后加入10μL的ADP Glo试剂终止反应。在室温下黑暗中孵育40分钟后，每孔加入20μL激酶检测试剂，孵育40分钟。发光用EnVision多标记微孔板检测仪(PerkinElmer，Buckinghamshire，UK)测量。存在和不存在CDK激酶的情况下分别进行了阳性对照和阴性对照。半最大抑制值(IC50)使用Graphpad prism(版本6.0)的4参数对数非线性回归模型计算。对于各自的激酶的表观抑制常数值(Ki)是从Km(ATP)和IC50计算得来。结果示于表2。
细胞活力分析
将来自实施例1的化合物用标准MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑鎓溴化物)和刃天青，在固体肿瘤细胞株和白血病细胞株上测试，分别如先前报道的(Wang S等，J Med Chem 47：1662-1675，2004和Diab S.等，Che Med Chem 9：962-972，2014)。抑制50％细胞生长所需的化合物浓度(GI50)是使用非线性回归分析来计算。结果示于表3和表4。
细胞周期分析和细胞凋亡
细胞周期分析和凋亡研究如前文所述(Diab S.等，Che Med Chem 9：962-972，2014；Teo T.等，Cancer Letters，357(2)：612-623，2015)。简单来说，人类急性髓性白血病MV4-11细胞(1×105)，接种后在37℃和5％CO2下孵育过夜。用抑制剂处理细胞后以300×g离心5分钟。细胞沉淀收集并用70％乙醇在冰上固定15分钟，然后以300×g离心5分钟。将收集的沉淀与染色溶液(50μL/mL PI，0.1mg/mL核糖核酸酶A，0.05％Triton X-100)在37℃下孵育1小时，并用Gallios流式细胞仪进行分析。1x 105的剩余细胞用Annexin V-FITCApoptosis Detection Kit进行细胞凋亡测定。样品在染色后1小时内通过FACS进行分析。分析数据使用Kaluza V1.2。
在图1所示的实施例中，MV4-11细胞在用化合物60以图中浓度处理24小时。化合物60在细胞周期的G1期阻滞细胞且有剂量依赖性，证实其对细胞CDK4/6的抑制作用。用化合物处理癌症细胞导致凋亡，可由早期(膜联蛋白-V+/PI-)和晚期(Annexin-V+/PI+)凋亡总和代表。代表性的例子如图2所示。
实施例3药代动力学
对于药代动力学测量，将健康雄性成年Balb/C小鼠(体重20-25g)或Wistar Rat(体重250-350g)分成重量匹配的组，每组3只。化合物是通过尾静脉(小鼠2mg/kg，大鼠5mg/kg)或口服管饲法(20mg/kg)给药。通过颈静脉插管(大鼠)或麻醉状态下心脏穿刺(小鼠)，在24小时内间隔从动物收集血液样品。将获取的血液以7000xG离心2分钟，将血浆吸入并在-20℃冷冻直到分析。血浆中化合物的定量分析使用LC-MS/MS方法进行。药代动力学数据使用Phoenix WinNonlin 6.4非分区分析。口服生物利用度(％F)是计算药量标准化AUC值，口服对注射剂量(IV)的比值。示例化合物的药代动力学特征示于表5中。
表2细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制作用
表3实施例中化合物的抗增殖活性(72h，GI50μM)
表4代表化合物的的抗增殖活性(72h，GI50μM)
表5代表化合物60,71和34的药代动力学特性
a40mg/kg大鼠，b10mg/kg小鼠
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本领域技术人员将理解，本发明不限于其用途描述的具体应用。在其优选实施例中本发明也不限于此关于本文描述或描述的特定元素和/或特征。本发明不限于实施例或展示的实施例，而是能够重排，修改和替换，而不背离本发明所附权利要求限定的范围。
请注意，以下权利要求仅作为临时权利要求，并作为可能权利要求的示例，并不意图限制任何未来专利中可能基于本申请的要求保护的应用范围。整数可以添加到示例中或从示例中省略以在以后的日子，进一步限定或重新定义本发明
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。

Claims (23)

1.一种如下所示的式Ⅰ化合物：
其中：
z表示任选的键，使N原子和相邻碳原子之间的键可以是单键或双键；
R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7各自独立地选自下组：H，烷基，烷基-R10，芳基，芳基-R10，芳烷基，芳烷基-R11，卤素，NO2，CN，CF3，OH，O-烷基，COR10，COOR10，O-芳基，O-R10，NH2，NH-烷基，NH-芳基，N-(烷基)2，N-(芳基)2，N-(烷基)(芳基)，NH-R10，N-(R10)(R11)，N-(烷基)(R10)，N-(芳基)(R10)，SH-烷基，SH-芳基，S-(烷基)2，S-(芳基)2，S-(烷基)(芳基)，SH-R10，S-(R10)(R11)，S-(烷基)(R10)，S-(芳基)(R10)，COOH，CONH2，CONH-烷基，CONH-芳基，CON-(烷基)(R10)，CON-(芳基)(R10)，CONH-R10，CON-(R10)(R11)，SO3H，SO2-烷基，SO2-烷基-R10，SO2-芳基，SO2-芳基-R10，SO2NH2，SO2NH-R10，SO2N-(R10)(R11)，CF3，CO-烷基，CO-烷基-R10，CO-芳基，CO-芳基-R10和R12，其中所述烷基、芳基和芳烷基可以任选地被一个或多个选自卤素，CN，OH，O-甲基，NH2，COOH，CONH2和CF3的基团取代，并且当不存在z键时，R 1与R8一起成为＝O或＝S；当z键不存在时，R8和R1一起是＝O或＝S，或当z键存在时，R8不存在；当z键不存在时，R9是H，烷基，芳基或杂环基，或者当z键存在时，R9不存在；和
R10，R11，R12独立选自水增溶基团；
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物如式Ⅱ所示：
其中R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7的定义同权利要求1。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，R1是H、C1-6烷基、芳基、NH-C1-6烷基、N(C1-6烷基)2、NH-芳基、N-(C1-6烷基)(芳基)或SH-C1-6烷基。
4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物如式Ⅲ所示：
其中R2，R3，R4，R5，R6和R7的定义同权利要求1，R8和R1一起是＝O或＝S，且R9是H、烷基、芳基或杂环基。
5.根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其特征在于，R2是H、C1-6烷基、芳基、CN、CF3、NH2、NH-C1-6烷基、N-(C1-6烷基)2、N-(C1-6烷基)(芳基)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的化合物，其特征在于，R3是H、C1-6烷基、CN或卤素。
7.根据权利要求1-6任一项所述的化合物，其特征在于，R4是H、O-C1-6烷基或卤素。
8.根据权利要求1-7任一项所述的化合物，其特征在于，R5和R6中至少一个是R12。
9.根据权利要求8所述的化合物，其特征在于，R5是R12。
10.根据权利要求8所述的化合物，其特征在于，R5是R12且R6是H。
11.根据权利要求8所述的化合物，其特征在于，R6是R12且R5是H。
12.根据权利要求8-11任一项所述的化合物，其特征在于，R12是一个或多个羟基、氨基或烷氧基取代的含N-、O-和/或S-的杂环基。
13.根据权利要求8-11任一项所述的化合物，其特征在于，R12选自下组：
14.根据权利要求8-11任一项所述的化合物，其特征在于，R12选自下组：
15.根据权利要求1-14任一项所述的化合物，其特征在于，R7是H。
16.如权利要求1-15任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药的用途，用于治疗癌症或其它细胞增殖性疾病或病症。
17.一种治疗受试者的癌症或细胞增殖性疾病或病症的方法，其特征在于，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1-15任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，任选地与药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂组合。
18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，被治疗的细胞增殖性疾病或病症选自那些特征为CDK4和/或CDK6过度表达的。
19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，被治疗的细胞增殖性疾病或病症选自下组：肺癌，乳腺癌，脑癌，中枢神经系统癌和结肠直肠癌。
20.如权利要求18所述的方法，其特征在于，被治疗的细胞增殖性疾病或病症选自下组：急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)。
21.如权利要求1-15任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药的用途，用于制造治疗癌症或其它细胞增殖性疾病或病症的药物。
22.一种药物组合物或药剂，包含权利要求1-15任一项所述的化合物和药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。
23.一种调节细胞中蛋白激酶活性的方法，包括向所述细胞导入或接触有效量的权利要求1-15任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药。
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