CN108348530A

CN108348530A - 法尼醇x受体调节剂

Info

Publication number: CN108348530A
Application number: CN201680063616.0A
Authority: CN
Inventors: R·佩里恰里; A·焦伊洛
Original assignee: Ntercept Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Ntercept Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2015-10-07
Filing date: 2016-10-07
Publication date: 2018-07-31
Anticipated expiration: 2036-10-07
Also published as: BR112018006892B1; AU2016335765A1; TN2018000106A1; AR106293A1; JP2018530559A; EA038665B1; HK1253558A1; BR112018006892A2; US20170101434A1; MX2018004186A; CA3000881A1; EP3359160A4; EA201890899A1; EP3359160B1; JP7021080B2; CR20180201A; CO2018003728A2; IL258359A; ES2898705T3; IL258359B1

Abstract

本申请提供一种具有式I的化合物：

Description

法尼醇X受体调节剂

背景技术

法尼醇X受体(FXR)是作为控制胆汁酸稳态的胆汁酸传感器起作用的核受体。FXR在各种器官中表达，并显示参与许多疾病和病状(如肝脏疾病、肺部疾病、肾脏疾病、肠道疾病和心脏疾病)以及生物过程(包括葡萄糖代谢、胰岛素代谢和脂质代谢)。许多天然胆汁酸是FXR调节剂，并且能够调控FXR介导的疾病和病状(Gioiello等人，2014Curr.Top.Med.Chem.[医药化学当前论题]14,2159)。例如，天然胆汁酸如鹅去氧胆酸(CDCA)、去氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA)、以及它们的牛磺酸和甘氨酸共轭物用作FXR配体。

天然胆汁酸的衍生物也一直被描述为FXR调节剂。欧洲专利号0312867描述了天然胆汁酸诸如熊去氧胆酸、熊果胆酸、鹅去氧胆酸、以及胆酸的6-甲基衍生物。WO 2002/75298披露了作为FXR调节剂的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-酸(下文也称为6-乙基-鹅去氧胆酸，或6-ECDCA)、其盐、溶剂化物、以及氨基酸共轭物，其可以用于预防或治疗FXR介导的疾病或病状。

然而，众所周知的是，天然胆汁酸和胆汁酸衍生物不仅调节其他核激素受体，而且还是用于G蛋白偶联受体(GPCR)TGR5的调节剂。受体选择性是与开发旨在调节核激素受体如FXR的治疗性化合物有关的问题。非选择性治疗化合物可能携带增加的副作用风险。在治疗化合物的开发中需要克服的其他障碍包括不适合的药物代谢动力学概况、安全问题如毒性(例如，肝脏)以及不良的药物-药物相互作用。

因此，仍然需要适用于药物开发的另外的选择性FXR调节剂，例如对其他核受体具有选择性和/或不会显著活化胆汁酸GPCR TGR5的化合物。

发明内容

本发明的目的是提供调节FXR的化合物。在一方面，本发明提供一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R²和R³各自独立地是H、OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或者R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

R⁴是H、卤素、任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基、烯基或炔基；

R⁵和R⁶各自独立地是H、OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素，或者R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

R⁷是OH、OSO₃H、SO₃H、OSO₂NH₂、SO₂NH₂、OPO₃H₂、PO₃H₂、CO₂H、C(O)NHOH、四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基；

R⁸、R⁹和R¹⁰各自独立地是H、OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或R⁸和R⁹与它们所附接的碳原子一起形成3-至6-元碳环或杂环，该杂环包含1或2个选自N、O和S的杂原子，或R⁹和R¹⁰与它们所附接的碳原子一起形成3-至6-元碳环或杂环，该杂环包含1或2个选自N、O和S的杂原子；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键，条件是当每个是单键，m、n和p的和是2，R¹是OH，并且R⁸、R⁹和R¹⁰各自是H时，则R⁷不是CO₂H。

本发明进一步提供一种药物组合物，该药物组合物包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物、以及药学上可接受的载体或赋形剂。

本发明还提供一种用于治疗或预防由FXR介导的疾病或病状的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

本发明还提供生产用于治疗或预防由FXR介导的疾病和病状的药物的，其中该药物包含具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

本发明进一步提供用于治疗或预防由FXR介导的疾病或病状的组合物，包括药物组合物，其中该组合物包含具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

除非另外定义，否则在此所使用的所有技术和科技术语均具有如本发明所属的领域中的普通技术人员通常所理解的相同含义。尽管可以在本发明的实践或测试中使用类似于或等效于在此所述的那些方法和材料的方法和材料，但适合的方法和材料描述如下。这些材料、方法和实例仅是说明性的并且不意图具有限制性。

根据以下详细说明，本发明的其他特征和优点将是清楚的。

具体实施方式

定义

在此收集了在说明书和权利要求书中使用的某些术语。

如在此所使用，短语“本发明的化合物”是指具有式I、II、III、IV、V、VI、VII、Ia、Ib、Ic、Id、Ie、Id中任一个的化合物、或在此明显披露的任何化合物。

如在此所使用，术语“烷基”是指直链或支链的饱和烃部分。术语“C₁-C₆烷基”是指具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烃部分。“C₁-C₄烷基”是指具有1、2、3或4个碳原子的直链或支链烃部分，包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、以及叔丁基。

术语“烯基”是指含有至少一个碳-碳双键的直链或支链烃部分。具有碳-碳双键的反式和顺式异构体两者均涵盖在术语“烯基”下。烯基部分的实例包括但不限于乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、以及2-己烯基。

如在此所使用，“炔基”是指含有至少一个碳-碳三键的直链或支链烃部分。炔基部分的实例包括但不限于乙炔基、2-丙炔基、5-丁-1-烯-3-炔基、以及3-己炔基。

术语“烷氧基”是指共价附接至氧原子的直链或支链的饱和烃。烷氧基部分的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、异丙氧基、正丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、以及戊氧基。

如在此所使用，术语“卤素”是指氟、溴、氯和碘。

术语“任选取代的”是指可以或不可以被取代的指定部分，并且当被取代时是单取代的、二取代的或三取代的，如被1、2或3个取代基取代。在一些情况下，取代基是卤素或OH。

如在此所使用，“碳环(carbocycle)”、“碳环的”或“碳环(carbocyclic ring)”旨在包括具有指定数目的碳的任何稳定的单环或双环，该单环或双环中的任一个可以是饱和的、不饱和的或芳族的。碳环包括环烷基和芳基。例如，C₃-C₈碳环旨在包括具有3、4、5、6、7或8个碳原子的单环或双环。碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、以及苯基。

如在此所使用，“杂环”、“杂环的”或“杂环基团”包括含有至少一个环杂原子(例如，N、O或S)的任何环结构(饱和的、不饱和的或芳族的)。杂环包括杂环烷基和杂芳基。杂环的实例包括但不限于吗啉、吡咯烷、四氢噻吩、哌啶、哌嗪、氧杂环丁烷、吡喃、四氢吡喃、氮杂环丁烷、以及四氢呋喃。杂环基团的实例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫呋喃基、四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、亚吲哚基、二氢吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛红酰基(isatinoyl)、异苯并呋喃基、异吲唑基、异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、亚甲基二氧基苯基、吗啉基、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基(pyridyl)、以及嘧啶基。

如在此所使用，术语“环烷基”是指具有3至10个碳原子(例如C₃-C₆)的饱和或不饱和的非芳族烃单环或多环(例如稠环、桥环或螺环)系统。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环戊烯基、环己烯基、以及环庚烯基。

除非另外说明，否则术语“杂环烷基”是指具有一个或多个杂原子(如O、N或S)的饱和或不饱和的非芳族3-8元单环或双环(稠环、桥环或螺环)。杂环烷基基团的实例包括但不限于哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、二噁烷基、四氢呋喃基、异二氢吲哚基、二氢吲哚基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、三唑烷基、四氢呋喃基、环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2,3,6-四氢吡啶基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、吡喃基、吗啉基、以及四氢噻喃基等。

如在此所使用，任何所叙述的包括但不限于烷基、烯基、炔基、烷氧基、碳环、杂环、环烷基、杂环烷基等的部分可以任选地被取代。

术语“FXR调节剂”是指与FXR受体相互作用的任何化合物。相互作用不限于充当FXR受体的拮抗剂、激动剂、部分激动剂或反向激动剂的化合物。在一个实施例中，本发明的化合物充当FXR受体的拮抗剂。在另一方面，本发明的化合物充当FXR受体的激动剂。在另一方面，本发明的化合物充当FXR受体的部分激动剂。在另一方面，本发明的化合物充当FXR受体的反向激动剂。

如在此所使用，“溶剂化物”是指含有化学计量或非化学计量的量的溶剂的本发明化合物的溶剂加成形式。一些化合物具有在结晶固体状态下捕获固定摩尔比的溶剂分子，从而形成溶剂化物的倾向。如果溶剂是水，那么所形成的溶剂化物是水合物，并且当溶剂是醇时，所形成的溶剂化物是醇化物。通过将一个或多个水分子与其中水保持其作为H₂O的分子状态的物质之一组合形成水合物，这样的组合能够形成一种或多种水合物。

如在此所使用，术语“氨基酸共轭物”是指本发明的化合物与任何适合的氨基酸的共轭物。牛磺酸(-NH(CH₂)₂SO₃H)、甘氨酸(-NHCH₂CO₂H)和肌氨酸(-N(CH₃)CH₂CO₂H)是氨基酸共轭物的实例。化合物的适合的氨基酸共轭物具有增强胆汁或肠液完整性的额外的优点。适合的氨基酸不限于牛磺酸、甘氨酸和肌氨酸。

如在此所定义，术语“代谢物”是指在此所述的化合物的葡糖醛酸化和硫酸化衍生物，其中一个或多个葡糖醛酸或硫酸部分连接至本发明的化合物。葡糖醛酸部分可以通过与化合物的羟基基团(例如3-羟基、7-羟基、11-羟基和/或R⁷基团的羟基)的糖苷键连接至化合物。化合物的硫酸化衍生物可以通过羟基基团(例如3-羟基、7-羟基、11-羟基和/或R⁷基团的羟基)的硫酸化而形成。代谢物的实例包括但不限于在此所述的化合物的3-O-葡糖苷酸、7-O-葡糖苷酸、11-O-葡糖苷酸、3-O-7-O-二葡糖苷酸、3-O-11-O-三葡糖苷酸、7-O-11-O-三葡糖苷酸、以及3-O-7-O-11-O-三葡糖苷酸，以及在此所述的化合物的3-硫酸酯、7-硫酸酯、11-硫酸酯、3,7-硫酸酯、3,11-二硫酸酯、7,11-二硫酸酯、以及3,7,11-三硫酸酯。

如在此所使用，“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的衍生物，其中母体化合物是通过形成其酸盐或碱盐来改性的。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基如胺的无机酸盐或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱金属盐或有机盐；等。药学上可接受的盐包括例如从无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规的无毒盐或季铵盐。例如，此类常规无毒盐包括，但不局限于，来源于无机酸和有机酸的那些，这些无机酸和有机酸选自2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氢酸、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙二磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、乙二醇氨苯胂酸、己基间苯二酚酸、海巴酸(hydrabamic)、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基马来酸、羟萘甲酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、萘磺酸、硝酸、草酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、聚半乳糖醛酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、碱式乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、以及甲苯磺酸。

短语“药学上可接受的载体”是本领域公认的，并且包括例如涉及将任何主题组合物从身体的一个器官或部分携带或转运至身体的另一器官或部分的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包囊材料。各载体在可与主题组合物的其他成分相容并且对患者无害的意义上是“可接受的”。在某些实施例中，药学上可接受的载体是非热原性的。可以充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素和它的衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；(4)粉状黄蓍；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；(9)油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、以及大豆油；(10)二醇，如丙二醇；(11)多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇、以及聚乙二醇；(12)酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲溶液；以及(21)在药物配制品中采用的其他无毒相容的物质。

“组合物”或“药物组合物”是含有本发明的化合物或其盐、溶剂化物或氨基酸共轭物的配制品。在一个实施例中，该药物组合物处于散装形式或单位剂型。单位剂型是多种形式中的任一种，包括例如，胶囊剂、IV袋、片剂、气溶胶吸入器上的单泵或小瓶。单位剂量的组合物中活性成分(例如本发明化合物或其盐的配制品)的量是有效量，并根据所涉及的特定治疗而变化。本领域的技术人员应理解，可能有必要依据患者的年龄和病状对剂量进行常规改变。该剂量也将取决于给药途径。考虑了各种途径，包括口服、眼部、眼部、肺部、直肠、胃肠外、经皮、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内、鼻内等。用于局部或经皮给予本申请的化合物的剂型包括散剂、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、贴剂、以及吸入剂。在另一个实施例中，在无菌条件下将活性化合物与药学上可接受的载体以及需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。

如在此所使用，术语“治疗”是指缓解、减轻、减少、消除、调节或改善疾病状态或病状，即引起该疾病状态或病状的消退。

如在此所使用，术语“预防”是指完全或几乎完全阻止疾病状态或病状在患者或受试者中发生，特别是当该患者或受试者易患这种疾病状态或病状或处于感染该疾病状态或病状的风险时。预防还可以包括抑制疾病状态或病状(即阻止该疾病状态或病状的发展)，以及缓解或改善该疾病状态或病状(即引起该疾病状态或病状的消退)，例如当该疾病状态或病状可能已经存在时。

如在此所使用，短语“降低......的风险”是指降低中枢神经系统疾病、炎性疾病和/或代谢疾病在患者中发生的可能性或概率，尤其是当受试者易于这种发生时。

“组合疗法”(或“共同疗法”)是指给予本发明的化合物和作为特定治疗方案的一部分的至少第二药剂，该治疗方案旨在提供由这些治疗剂(即，本发明的化合物和至少第二药剂)的共同作用产生的有益作用。该组合的有益作用包括但不限于由治疗剂的组合产生的药代动力学或药效动力学共同作用。这些治疗剂的组合给予典型地在限定时间段(取决于所选择的组合通常数分钟、数小时、数天或数周)内进行。“组合疗法”可以但通常不旨在涵盖给予这些治疗剂中的两种或更多种作为附带且任意产生本发明的组合的单独单药治疗方案的一部分。“组合疗法”旨在包括以顺序方式给予这些治疗剂，即其中各治疗剂在不同时间给予，以及以实质上同时的方式给予这些治疗剂或这些治疗剂中的至少两种。实质上同时给予可以例如通过向受试者给予具有固定比率的各治疗剂的单一胶囊或各治疗剂的多个单一胶囊来实现。顺序或实质上同时给予各治疗剂可以通过包括但不限于口服途径、静脉内途径、肌肉内途径以及通过粘膜组织直接吸收的任何适当途径来实现。这些治疗剂可以通过相同途径或通过不同途径给予。例如，所选择的组合的第一治疗剂可以通过静脉内注射来给予，而该组合的其他治疗剂可以口服给予。或者，例如，所有治疗剂都可以口服给予或所有治疗剂都可以通过静脉内注射来给予。给予治疗剂所依的顺序并不是严格关键的。

“组合疗法”还包括给予如上文所述的治疗剂进一步与其他生物活性成分和非药物疗法(例如，外科手术或机械治疗)组合。当组合疗法进一步包括非药物治疗时，非药物治疗可以在任何适合的时间进行，只要实现治疗剂与非药物治疗的组合的共同作用的有益作用即可。例如，在适当情况下，从给予治疗剂中暂时移除非药物治疗(可能数天或甚至数周)时，仍实现有益作用。

本发明的化合物或化合物的组合的“有效量”是一种或多种化合物的量(数量或浓度)。在一个实施例中，当将治疗有效量的化合物给予至需要治疗的受试者时，在给予化合物一次或多次即刻或之后改善由该疾病引起的症状。有待给予至受试者的化合物的量将取决于特定病症、给药模式、共同给予的化合物(如果有的话)、以及受试者的特征，如一般健康状况、其他疾病、年龄、性别、基因型、体重和对药物的耐受性。熟练的技术人员将能够依据这些和其他因素确定适当的剂量。

术语“预防有效量”是指为防止或降低疾病的风险–换句话说，提供预防性或防治性作用而给予的本发明的化合物或化合物的组合的量(数量或浓度)。有待给予至受试者的本发明化合物的量将取决于特定病症、给药模式、共同给予的化合物(如果有的话)、以及受试者的特征，如一般健康状况、其他疾病、年龄、性别、基因型、体重和对药物的耐受性。熟练的技术人员将能够依据这些和其他因素确定适当的剂量。

“受试者”包括哺乳动物，例如，人、伴侣动物(例如，狗、猫、鸟等)、农场动物(例如，牛、绵羊、猪、马等)、以及实验室动物(例如，大鼠、小鼠、豚鼠等)。典型地，受试者是人。

如在此所使用的，法尼醇X受体或FXR是指此类受体的所有哺乳动物形式，包括例如选择性剪接同种型和天然存在的同种型(参见，例如，Huber等人,Gene[基因]290:35-43(2002))。代表性FXR种类包括但不限于大鼠FXR(基因库登录号NM_021745)、小鼠FXR(基因库登录号NM_009108)、以及人FXR(基因库登录号NM_005123)。

本发明的化合物

在一方面，本披露提供一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式Ia的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式Ib或Ic的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R¹是OH、烷氧基或氧代。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R¹是OH或烷氧基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R¹是卤素。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R¹是OH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R¹是烷氧基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R³是H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R³是OH或卤素。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R³是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R⁶是OH或H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Ic的化合物，其中R⁶是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式Id的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式Ie的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、SO₃H、OSO₂NH₂、SO₂NH₂、OPO₃H₂、PO₃H₂、CO₂H或C(O)NHOH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、OSO₂NH₂、OPO₃H₂或CO₂H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是CO₂H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OSO₃H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是SO₃H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OSO₂NH₂或SO₂NH₂。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OPO₃H₂、PO₃H₂、或C(O)NHOH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、OSO₂NH₂、OPO₃H₂、CO₂H、四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R²是OH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R²是H或卤素。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R²是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁵是OH或H。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁵是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁴是H或卤素。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁴是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁴是C₂-C₆烯基或C₂-C₆炔基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁴是甲基、乙基或丙基。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中m是0。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中m是1。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中m是2。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中n是1。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中p是0。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁴处于α位置。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R¹处于β位置。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I的化合物，其中该化合物选自：

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物的盐。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OSO₃ ^-。

在这些实施例中的一个中，本披露提供具有式I和Ia-Id的化合物，其中R⁷是OSO₃ ^-Na⁺。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是烷氧基或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R⁷是OSO₃H、OSO₂NH₂、OPO₃H₂、C(O)NHOH、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R²是H、OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或者R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

R³是OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或者R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R⁵是OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素；

R⁶是H、OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素；

或R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R⁵是H、OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素；

R⁶是OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素，

或R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式I的化合物，其中R₇是OH。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种具有式I的化合物，

其中该化合物选自：

在一个实施例中，该化合物是具有式II的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在另一个实施例中，该化合物是具有式III的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在另一个实施例中，该化合物是具有式IV的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在一个实施例中，该化合物是具有式V的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在另一个实施例中，该化合物是具有式VI的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在另一个实施例中，该化合物是具有式VII的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VI的化合物，其中R¹是卤素。在另一个实施例中，R¹是氟。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是C₁-C₆烷氧基。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II或III的化合物，其中R¹是氧代。

在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R²是OH。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R²是H或卤素。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R²是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH并且R²是OH。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH并且R²是H或卤素。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH并且R²是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R³是H。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R³是OH或卤素。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R³是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，并且R³是H。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，并且R³是OH或卤素。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，并且R³是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁴是H或卤素。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁴是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。在一个实施例中，R⁴是C₂-C₆烯基或炔基。在一个实施例中，R⁴是甲基、乙基或丙基。在一个实施例中，R⁴是乙基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，R³是H，并且R⁴是甲基、乙基或丙基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，R³是H，并且R⁴是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，R³是H，并且R⁴是C₂-C₆烯基或炔基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁵是OH或H。在另一个实施例，R⁵是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。在另一个实施例中，R⁵是卤素。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，R³是H，R⁴是甲基、乙基或丙基，并且R⁵是OH或H。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R¹是OH，R²是OH，R³是H，R⁴是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基，并且R⁵是OH或H。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁶是OH或H。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁶是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。在另一个实施例中，R⁶是卤素。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是OH。在一个实施例中，R⁷是CO₂H。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是OSO₃H。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是SO₃H。在另一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是OSO₂NH₂或SO₂NH₂。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是OPO₃H₂、PO₃H₂或C(O)NHOH。

在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是四唑基。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是噁二唑基。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是噻二唑基。在一个单独实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是5-氧代-1,2,4-噁二唑基。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是噁唑烷-二酮基。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是噻唑烷-二酮基。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁷是2,4-二氟-3-羟苯基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁸是H。在一个实施例中，R⁸独立地是H或OH。在一个实施例中，R⁸独立地是H或卤素。在一个实施例中，R⁸独立地是H或烷基。在一个实施例中，R⁸独立地是H或被一个或多个卤素或OH取代的烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁹是H。在一个实施例中，R⁹是H或OH。在一个实施例中，R⁹是H或卤素。在一个实施例中，R⁹是H或烷基。在一个实施例中，R⁹是H或被一个或多个卤素或OH取代的烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中R⁸和R⁹是烷基并且与它们所附接的碳原子一起形成3、4、5或6个原子大小的环。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、VI或VII的化合物，其中R¹⁰是H。在一个实施例中，R¹⁰是H或OH。在一个实施例中，R¹⁰是H或卤素。在一个实施例中，R¹⁰是H或烷基。在一个实施例中，R¹⁰是H或被一个或多个卤素或OH取代的烷基。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、VI或VII的化合物，其中R⁹和R¹⁰是烷基并且与它们所附接的碳原子一起形成3、4、5或6个原子大小的环。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中m是0。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中m是1。在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中m是2。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、II、III、IV、V、VI或VII的化合物，其中n是0。在一个实施方案中，n是1。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I、VI或VII的化合物，其中p是0。在一个实施例中，p是1。

在一个实施例中，本披露涉及一种具有式I的化合物，其中该化合物选自：

在这些实施例中的一个中，本披露涉及一种具有式I的化合物，其中该化合物选自：

本发明的化合物具有不对称中心并且可以光学活性形式或消旋形式分离。如何制备光学活性形式在本领域是熟知的，如通过消旋形式的拆分，或通过从光学活性起始材料合成。烯烃的许多几何异构体等也可存在于在此所述的化合物中，并且所有此类稳定异构体均涵盖在本发明中。本发明的化合物的顺式和反式几何异构体可以作为异构体的混合物或者作为分离的异构形式被分离。除非具体地指出特定的立体化学或异构形式，否则一种结构的所有手性、非对映异构体、消旋以及几何异构体形式都被预期。用于制备本发明的化合物的以及其中制造的中间体的所有方法被认为是本发明的部分。展示或描述的化合物的所有互变异构体也被认为是本发明的一部分。此外，本发明还包括在此描述的化合物的代谢物。

本发明还包括同位素标记的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其与本申请和以下的式中列举的那些相同，但是事实上，一个或多个原子被具有与自然中最常见的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。可以掺入本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氟的同位素，如³H、¹¹C、¹⁴C和¹⁸F。

为了便于制备和可检测，可以使用氚化(即³H)和碳-14(即¹⁴C)的同位素。另外，使用较重同位素诸如氘(即2H)的取代可以提供由较大代谢稳定性产生的某些治疗优点，例如体内半衰期增加或剂量需求降低，并且因此可以用于一些情况。同位素标记的本发明化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物通常可以通过执行在方案和/或实例中披露的程序、通过用容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂来制备。然而，本领域技术人员将认识到，并非所有的同位素都可以通过取代非同位素标记的试剂而被包括。在一个实施例中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、或氨基酸共轭物是同位素标记的。在一个实施例中，氘化的本发明化合物适用于生物分析测定。在另一个实施例中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物是放射性标记的。

药物组合物

“药物组合物”是含有一种或多种本发明化合物的配制品，该配制品处于适合于向受试者给予的形式。在一个实施例中，该药物组合物处于散装形式或单位剂型。以易于给予和实现剂量均匀性的剂量单位形式配制组合物可以是有利的。如在此使用的单位剂型是指作为针对待治疗的受试者的单一剂量适合的物理上离散单位；每个单位含有经计算产生与所需药物载体相关的所希望的治疗效果的活性试剂的预定量。剂量单位形式的规格由如下决定并且直接依赖于：活性试剂的独特特征和待实现的具体治疗效果，和本领域中配制用于治疗个体的这种活性剂的固有局限性。

可能的配制品包括适用于口服、舌下、经颊、胃肠外(例如，皮下、肌内或静脉内)、直肠、局部(包括经皮，鼻内和吸入)给予的那些配制品。对于特定患者，最适合的给药方式将取决于正治疗疾病的性质和严重程度或所用疗法的性质并且取决于活性化合物的性质，但是可能的话，口服给药可用于预防和治疗FXR介导的疾病和病状。适于口服给药的配制品可以作为以下形式提供：离散单位，如片剂、胶囊剂、扁囊剂、锭剂，每一单位含有预定量的活性化合物；粉剂或颗粒剂；呈水性或非水性液体的溶液或悬浮液；或水包油或油包水型乳液。适于舌下或经颊给药的配制品包括：锭剂，其含有活性化合物和典型地调味基体，如糖和阿拉伯胶或黄耆胶；以及软锭剂，其包含在惰性基体中的活性化合物，该惰性基底如明胶和甘油、或蔗糖阿拉伯胶。

适用于胃肠外给药的配制品典型地包括含有预定浓度的活性化合物的无菌水溶液；该溶液可以是与预期接受者的血液等渗的。适于胃肠外给药的另外的配制品包括含有生理上适合的共溶剂和/或络合剂如表面活性剂和环糊精的配制品。对于胃肠外配制品，水包油型乳液也是适合的。尽管这些溶液可以通过静脉给予，但是它们也可以通过皮下或肌内注射来给予。

适于直肠给药的配制品可以被提供为单位剂量的栓剂，这些栓剂包含在形成栓剂基体的一种或多种固体载体(例如可可脂)中的活性成分。

适于局部或鼻内施加的配制品包括软膏剂、霜剂、洗剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂以及油剂。适于此类配制品的载体包括凡士林油、羊毛脂、聚乙二醇、醇类以及它们的组合。

本发明的配制品可以通过任何适合的方法来制备，典型地通过按所需的比例将活性化合物与液体或细分的固体载体或与这二者均一地且紧密地混合，然后，如果需要的话，将所得混合物成型为所希望的形状。

例如，片剂可以通过压制包含活性成分的粉末或颗粒及一种或多种任选的成分如粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂或表面活性分散剂的紧密混合物，或通过模制粉状活性成分和惰性液体稀释剂的紧密混合物来制备。适于吸入给药的配制品包括可由不同类型的定量加压喷雾器、雾化器或吹入器产生的细粒粉尘或薄雾。

对于通过口腔的肺部给药来说，粉末或小滴的粒径典型地在0.5μm至10μm，或可以是约1μm至5μm的范围内，以便确保递送到支气管树中。对于鼻内给药来说，可以使用在10μm至500μm范围内的粒径，以便确保保留在鼻腔中。

定量吸入器是加压的气雾剂分配器，它通常含有活性成分于液化的推进剂中的悬浮液或溶液配制品。在使用时，这些装置将配制品排放通过适于递送定量体积(典型地10μm至150μm)的一个阀，以产生含有活性成分的微粒喷雾。适合的推进剂包括某些氯氟烃化合物，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、以及它们的混合物。该配制品可以另外地含有一种或多种共溶剂，例如乙醇表面活性剂(如油酸或失水山梨糖醇三油酸酯)、抗氧化剂、以及适合的调味剂。

雾化器是可商购获得的装置，其通过使压缩气体(典型地空气或氧气)加速通过窄的文氏管口或通过超声搅拌而将活性成分的溶液或悬浮液转变成治疗性气雾剂薄雾。适用于雾化器的配制品由分散于液体载体中且占配制品的高达40％w/w，优选低于20％w/w的活性成分组成。该载体典型地为水或一种稀释的水性醇溶液，优选通过加入例如氯化钠使之与体液是等渗的。任选的添加剂包括例如羟基苯甲酸甲酯的防腐剂(如果该配制品不是无菌制备的)、抗氧化剂、调味剂、挥发性油、缓冲剂、以及表面活性剂。

适于通过吹入法给药的配制品包括精细粉碎的粉末，这些粉末可以通过一种吹入器递送或以鼻吸药的方式带进鼻腔。在吹入器中，粉末被容纳在典型地由明胶或塑料制成的囊或药筒中，该囊或药筒在原位被刺穿或打开，并且该粉末通过吸入时吸引流过该装置的空气递送或借助于手动操作泵递送。吹入器中所采用的粉末或仅由活性成分组成，或由包含活性成分、一种合适的粉末稀释剂如乳糖以及一种任选的表面活性剂的粉末混合物组成。活性成分典型地占配制品的0.1％至100％w/w。

在另一实施例中，本发明提供一种药物组合物，该药物组合物包含作为活性组分的本发明的化合物连同至少一种药用载体或稀释剂，和/或本发明的化合物与至少一种药用载体或稀释剂的混合物。这些药物组合物可以用于预防或治疗前述疾病或病状。

载体是药学上可接受的并且必须与该组合物中的其他成分相容，即不会对其他成分造成不利影响。载体可以是一种固体或液体，并且优选被配制为一种单位剂量配制品，例如可能含有按重量计0.05％至95％的活性成分的片剂。如果需要，也可以将其他生理活性成分掺入在本发明的药物组合物中。

除了以上特别提到的成分之外，本发明的配制品可以包括药学领域的技术人员已知的其他试剂，这与所讨论的配制品的类型有关。例如，适于口服给药的配制品可以包括调味剂，而适于鼻内给药的配制品可以包括香料。

在这些实施例中的一个中，本披露提供一种药物组合物，该药物组合物包含具有式I和Ia-Id的化合物以及药学上可接受的载体或赋形剂。

治疗方法

本发明的化合物适用于受试者如哺乳动物(包括人)的治疗。具体地，本发明的化合物适用于治疗或预防受试者的疾病或病状的方法中，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，该疾病或病状是FXR介导的(例如，FXR在该疾病或病状的引发或进展中起作用)。在一个实施例中，该疾病或病状是由降低的FXR活性介导的。在一个实施例中，该疾病或病状选自心血管疾病、慢性肝病、脂质失调、胃肠疾病、肾脏疾病、代谢疾病、癌症、以及神经疾病。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防

受试者的心血管疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗心血管疾病的方法。在一个实施例中，心血管疾病选自动脉粥样硬化、动脉硬化、血脂异常、高胆固醇血症、高血脂症、高脂蛋白血、以及高甘油三酯血症。

术语“高血脂症”是指血液中存在异常升高的脂质水平。高血脂症可以至少三种形式出现：(1)血胆固醇过多，即升高的胆固醇水平；(2)高甘油三酯血症，即升高的甘油三脂水平；以及(3)混合型高脂血症，即血胆固醇过多和高甘油三酯血症的组合。

术语“血脂异常”是指血浆中脂蛋白的不正常水平，包括脂蛋白的抑制水平和/或升高水平(例如，LDL、VLDL的升高水平以及HDL的抑制水平)。

在一个实施例中，本发明涉及一种方法，该方法选自在受试者中降低胆固醇水平或调节胆固醇代谢、分解代谢、膳食胆固醇的吸收、以及胆固醇逆转运，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在另一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的影响胆固醇、甘油三酯或胆汁酸水平的疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在一个实施例中，本发明涉及一种降低受试者的甘油三酯的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的与升高的胆固醇水平相关的疾病状态的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗受试者的与升高的胆固醇水平相关的疾病状态的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防受试者的与升高的胆固醇水平相关的疾病状态的方法。在一个实施例中，该疾病状态选自冠状动脉疾病、心绞痛、颈动脉病、中风、脑动脉硬化、以及黄色瘤。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的脂质失调的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗脂质失调的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防脂质失调的方法。

脂质失调是关于胆固醇以及甘油三酯的异常的术语。脂质异常与患血管病、尤其是心脏病和中风的风险增加相关联。脂质失调的异常是遗传易感性与膳食摄入的性质的组合。许多脂质失调与体重过重相关联。脂质失调还可与其他疾病包括糖尿病、代谢性综合征(有时称作胰岛素抵抗综合征)、甲状腺功能减退相关联，或者是某些药物(如用于经历移植的人的抗排斥方案的那些)造成的后果。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的影响脂质代谢的疾病(即，脂肪代谢障碍)的一种或多种症状的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗影响脂质代谢的疾病的一种或多种症状的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防影响脂质代谢的疾病的一种或多种症状的方法。

在一个实施例中，本发明涉及一种减少受试者的脂质积累的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的慢性肝病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗慢性肝病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防慢性肝病的方法。在一个实施例中，慢性肝病选自原发性胆汁性肝硬化(PBC)、脑腱黄瘤病(CTX)、原发性硬化性胆管炎(PSC)、药物诱导的胆汁淤积症、妊娠肝内胆汁淤积症、胃肠外营养相关的胆汁淤积症(PNAC)、细菌过度生长或败血症相关的胆汁淤积症、自身免疫性肝炎、慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝移植相关的移植物抗宿主疾病、活供体移植肝再生、先天性肝纤维化、胆总管结石病、肉芽肿性肝病、肝内或肝外恶性肿瘤、舍格伦综合征(Sjogren'ssyndrome)、类肉状瘤病、威尔逊氏病(Wilson's disease)、戈谢氏病(Gaucher'sdisease)、血色素沉着症、以及α1-抗胰蛋白酶缺乏症。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的胆汁淤积症的一种或多种症状(包括胆汁淤积症的并发症)的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗胆汁淤积症的一种或多种症状的方法。在一个实施例中，本发明涉及预防胆汁淤积症的一种或多种症状。

胆汁淤积症典型地由在肝脏内(肝内)或在肝脏外(肝外)的因素造成，并且导致胆盐、胆汁色素胆红素、以及脂质在血流中积累，而非被正常地排除。肝内胆汁淤积症的特征为小导管的广泛堵塞、或失调(如肝炎)，这些损害了身体排除胆汁的能力。肝内胆汁淤积症还可由酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、从身体的另一部分蔓延(转移)的癌症、原发性硬化性胆管炎、胆结石、胆绞痛、以及急性胆囊炎造成。它也可能作为外科手术、严重损伤、囊性纤维化、感染、或静脉内营养的并发症发生，或者是被药物诱导的。胆汁淤积症也可能作为妊娠的并发症发生，并且常常在妊娠第六个月与第九个月期间出现。

肝外胆汁淤积症最经常由胆总管结石病(胆管结石)、良性胆道狭窄(总胆管的非癌性变窄)、胆管癌(导管癌)、以及胰腺癌造成。肝外胆汁淤积症可能以许多药物的副作用的形式发生。

本发明的化合物可用于治疗或预防肝内或肝外胆汁淤积症的一种或多种症状，包括但不限于胆道闭锁、产科胆汁淤积症、新生儿胆汁淤积症、药物诱导的胆汁淤积症、丙型肝炎感染引起的胆汁淤积症、慢性胆汁淤积肝病如原发性胆汁性肝硬化(PBC)、以及原发性硬化性胆管炎(PSC)。

在一个实施例中，本发明涉及一种增强受试者的肝再生的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，该方法是针对肝移植增强肝再生。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的纤维化的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗纤维化的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防纤维化的方法。

因此，如在此所使用的，术语纤维化是指所有公认的纤维变性病，包括由于病理状况或疾病导致的纤维化、由于物理创伤导致的纤维化(“创伤性纤维化”)、由于放射性损伤导致的纤维化、以及由于接触化疗药物导致的纤维化。如在此所使用，术语“器官纤维化”包括但不限于肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、以及肠纤维化。”创伤性纤维化”包括但不限于后继于外科手术(手术瘢痕)、意外物理创伤、烧伤、以及增生性瘢痕的纤维化。

如在此所使用，“肝纤维化”包括由于任何原因所致的肝纤维化，包括但不限于病毒诱导的肝纤维化如由于乙型肝炎或丙型肝炎病毒所致的肝纤维化；

由于与酒精(酒精性肝病)、某些药用化合物(包括但不限于甲氨蝶呤、一些化学治疗剂、以及大剂量长期摄入的含砷制剂或维生素A)、氧化应激、癌症放射疗法或某些化工原料(包括但不限于四氯化碳和

二甲基亚硝胺)所致的肝纤维化；以及由如原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、脂肪肝、肥胖症、非酒精性脂肪性肝炎、囊性纤维化、血色素沉着症、自身免疫性肝炎、以及脂肪性肝炎的疾病所致的肝纤维化。目前对肝纤维化的疗法主要涉及除去致病因子，例如除去过量的铁(例如，就血色素沉着症而言)、减少病毒载量(例如，就慢性病毒性肝炎而言)、或者消除或减少对毒素的接触(例如，就酒精性肝病而言)。也已知消炎药如皮质类固醇和秋水仙碱可用于治疗可引起肝纤维化的炎症。如本领域所已知的，通常基于活组织检查标本的组织学检查，肝纤维化在临床上可以被划分为五个严重度时期(S0、S1、S2、S3以及S4)。S0指示没有纤维化，而S4指示肝硬化。尽管对于纤维化严重度分期存在不同的标准，但一般而言纤维化的早期是以肝脏的一个门(区)中的不连续、局部的瘢痕区域鉴定的，而纤维化的晚期是以桥接的纤维化(跨越肝脏的多个区的瘢痕)鉴定的。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的器官纤维化的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，纤维化是肝纤维化。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防

受试者的胃肠疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗胃肠疾病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防胃肠疾病的方法。在一个实施例中，胃肠疾病选自炎症性肠病(IBD)、肠道易激综合征(IBS)、细菌过度生长、吸收障碍、放射后结肠炎、以及显微镜下结肠炎(microscopic colitis)。在一个实施例中，炎症性肠病选自克罗恩病和溃疡性结肠炎。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的肾脏疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗肾脏疾病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防肾脏疾病的方法。在一个实施例中，肾脏疾病选自糖尿病性肾病、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)、高血压性肾硬化、慢性肾小球肾炎、慢性移植肾小球病、慢性间质性肾炎、以及多囊肾病。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的代谢疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗肾脏疾病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防肾脏疾病的方法。在一个实施例中，代谢疾病选自胰岛素抗性、高血糖症、糖尿病、糖胖症、以及肥胖症。在一个实施例中，糖尿病是I型糖尿病。在一个实施例中，糖尿病是II型糖尿病。

糖尿病，通常称为多尿症，是指通常特征为在葡萄糖的产生和利用上有代谢缺陷而导致无法保持身体内适当的血糖水平的一种疾病或病状。

就II型糖尿病而言，该疾病的特征为胰岛素抗性，其中胰岛素丧失其在宽浓度范围内发挥其生物效应的能力。这种对胰岛素反应性的抗性导致肌肉内对葡萄糖摄取、氧化和贮存的胰岛素激活不足，以及对脂肪组织中脂类分解和肝中葡萄糖产生和分泌的胰岛素抑制不足。所导致的病状是血糖升高，这也称作“高血糖症”。不受控制的高血糖症与死亡率增加和过早死亡相关联，这归因于患微血管疾病和大血管疾病的风险增加，这些疾病包括视网膜病变(眼中的血管损伤所导致的视力损害或丧失)；神经病变(神经系统的血管损伤所导致的神经损伤和脚部问题)；以及肾病变(肾脏中的血管损伤所导致的肾脏疾病)；高血压、脑血管病以及冠心病。因此，控制葡萄糖稳态是治疗糖尿病的至关重要的途径。

假设胰岛素抗性使高血压、葡萄糖耐受不良、高胰岛素血症、甘油三酯水平增加和HDL胆固醇降低、以及中心性肥胖症和全身性肥胖症的簇集合为一体。已将胰岛素抗性与葡萄糖耐受不良、血浆甘油三酯的增加和高密度脂蛋白胆固醇浓度的降低、高血压、高尿酸血症、较小较致密的低密度脂蛋白颗粒、以及高循环水平的纤溶酶原激活物抑制剂-1的结合称为“X综合征”。因此，提供了治疗或预防与胰岛素抗性有关的任何病症(包括组成“X综合征”的疾病状态、病状或病症的簇集)的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的代谢综合征的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗代谢综合征的方法。在另一个实施例中，本发明涉及一种预防代谢综合征的方法。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的癌症的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗癌症的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防癌症的方法。在一个实施例中，癌症选自肝细胞癌、结肠直肠癌、胃癌、肾癌、前列腺癌、肾上腺癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宫体癌、以及肺癌。在一个实施例中，癌症是肝细胞癌。在一个实施例中，癌症是结肠直肠癌。在一个实施例中，癌症是胃癌。在一个实施例中，癌症是肾癌。在一个实施例中，癌症是前列腺癌。在一个实施例中，癌症是肾上腺癌。在一个实施例中，癌症是胰腺癌。在一个实施例中，癌症是乳腺癌。在一个实施例中，癌症是膀胱癌。在一个实施例中，癌症是唾液腺癌。在一个实施例中，癌症是卵巢癌。在一个实施例中，癌症是子宫体癌。在一个实施例中，癌症是肺癌。

在另一个实施例中，选自索拉非尼、舒尼替尼、埃罗替尼或伊马替尼的药剂中的至少一种与本发明的化合物共同给予以治疗癌症。在一个实施例中，选自以下的药剂中的至少一种与本发明的化合物共同给药以治疗癌症：阿巴瑞克、阿地白介素(aldeleukin)、别嘌呤醇、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑(anastozole)、贝伐单抗、卡培他滨、卡铂、顺铂、多西他赛、阿霉素、埃罗替尼、依西美坦、5-氟尿嘧啶、氟维司群、吉西他滨、醋酸戈舍瑞林、伊立替康、二甲苯磺酸拉帕替尼、来曲唑(letozole)、亚叶酸、左旋咪唑、奥沙利铂、紫杉醇、帕尼单抗、培美曲塞二钠、卟吩姆钠、它莫昔芬、拓扑替康、以及曲妥珠单抗。

用于癌症的适当治疗取决于肿瘤所来源的细胞的类型、恶性的分期和严重程度、以及促成肿瘤的遗传性异常。

癌症分期系统描述癌症进展的程度。

一般而言，这些分期系统描述肿瘤扩散的程度，并将具有相似预后和治疗的患者分入同一分期组。

一般而言，对于已经变得侵入性或转移的肿瘤，预后较差。

在一种类型的分期系统中，病例被分为四个阶段，用罗马数字I至IV表示。

在I期，癌症通常是局部的，且通常是可治愈的。

II期和IIIA期癌症通常更晚期，并且可能已侵入周围组织并扩散至淋巴结。

IV期癌症包括已经扩散至淋巴结外部位的转移性癌症。

另一种分期系统是TNM分期，它代表类别：肿瘤、节和转移。

在这个系统中，根据各个类别的严重程度描述恶性肿瘤。例如，T将原发肿瘤的程度从0至4分类，其中0代表不具有侵入性活性的恶性肿瘤，并且4代表已经从原始部位延伸侵入其他器官的恶性肿瘤。

N将淋巴结受累的程度分类，其中0代表没有淋巴结受累的恶性肿瘤，并且4代表伴有广泛淋巴结受累的恶性肿瘤。

M将转移的程度从0至1分类，其中0代表无转移的恶性肿瘤，并且1代表具有转移的恶性肿瘤。

这些分期系统或这些分期系统的变化形式或其他适合的分期系统可以用于描述诸如肝细胞癌的肿瘤。

根据癌症的分期和特征，只有很少的选择可供用于治疗肝细胞癌。

治疗包括外科手术、用索拉非尼治疗和靶向治疗。一般来说，外科手术是用于早期局部肝细胞癌的第一线治疗。

另外的全身治疗可以用于治疗侵入性和转移性肿瘤。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的胆结石的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗胆结石的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防胆结石的方法。

胆结石是通过胆汁组分的堆积而在胆囊内形成的一种结晶架。这些结石在胆囊中形成，但是可向远端进入胆道的其他部分，如胆囊管、总胆管、胰管、或法特氏壶腹。罕见地，在严重炎症的情况下，胆结石可侵蚀穿过胆囊进入黏附的肠中，这可能造成阻塞，称之为胆石性肠梗阻。胆囊中胆结石的存在可能导致急性胆囊炎，这是一种特征为胆囊中胆汁滞留以及常常由肠微生物(主要为大肠杆菌和拟杆菌属种类)引起的继发性感染的炎症性病状。

胆道其他部分中胆结石的存在可能致使胆管阻塞，这可导致严重的病状如上行性胆管炎或胰腺炎。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的胆固醇性胆结石病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗胆固醇性胆结石病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防胆固醇性胆结石病的方法。

在一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防受试者的神经疾病的方法，该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种治疗神经疾病的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种预防神经疾病的方法。在一个实施例中，神经疾病是中风。

在一个实施例中，本发明涉及一种如在此所描述的方法，并且此外，其中该化合物通过选自以下的途径来给予：口服、胃肠外、肌内、鼻内、舌下、气管内、吸入、眼睛、阴道、直肠、以及脑室内。在一个实施例中，该途径是口服。

在一个实施例中，在一种或多种在此描述的方法中使用的化合物是FXR激动剂。在一个实施例中，该化合物是选择性FXR激动剂。在另一个实施例中，该化合物不活化TGR5。在一个实施例中，该化合物不活化参与代谢途径的其他核受体(例如，如通过AlphaScreen测定所测量的)。在一个实施例中，参与代谢途径的此类其他核受体选自LXRβ、PXR、CAR、PPARα、PPARδ、PPARγ、RAR、RARα、VDR、TR、PR、RXR、GR、以及ER。在一个实施例中，该化合物诱导细胞凋亡。

在一个实施例中，本发明涉及一种调控胆汁酸体内平衡所涉及的一种或多种基因的表达水平的方法。

在一个实施例中，本发明涉及一种通过向细胞给予本发明的化合物而下调该细胞中选自CYP7αl和SREBP-IC的一种或多种基因的表达水平的方法。在一个实施例中，本发明涉及一种通过向细胞给予本发明的化合物而上调该细胞中选自OSTα、OSTβ、BSEP、SHP、UGT2B4、MRP2、FGF-19、PPARγ、PLTP、APOCII、以及PEPCK的一种或多种基因的表达水平的方法。

本发明还涉及对用于治疗或预防疾病或病状(例如，由FXR介导的疾病和病状)的药物的生产，其中该药物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及对用于治疗或预防上文所述的任何一种疾病或病状的药物的生产，其中该药物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

本发明还涉及一种在用于治疗或预防疾病或病状(例如，由FXR介导的疾病和病状)的方法中使用的组合物，其中该组合物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。在一个实施例中，本发明涉及一种在用于治疗或预防上文所述的任何一种疾病或病状的方法中使用的组合物，其中该组合物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

本发明的方法包括给予有效量的本发明的化合物的步骤。如在此所使用的，术语“有效量”是指足以实现指定作用的本发明的化合物的量。

因此，在用于预防或治疗FXR介导的疾病或病状的方法中使用的本发明的化合物的有效量将是足以预防或治疗该FXR介导的疾病或病状的量。

类似地，在用于预防或治疗胆汁淤积肝病或增加胆汁流量的方法中使用的本发明的化合物的有效量将是足以增加胆汁向肠的流量的量。

产生所希望的生物效应所需的本发明的化合物的量将取决于许多因素，如预期的用途、给药方式以及受者，并且最终将由负责的医师或兽医来判断。一般来说，用于治疗一种FXR介导的疾病和病状的典型的每日剂量，例如，可以预期在约0.01mg/kg至约100mg/kg的范围内。这个剂量可以作为单一的单位剂量或作为几个独立的单位剂量或者通过连续输注来给予。类似的剂量将适用于其他疾病、病状的治疗、以及包括预防和治疗胆汁淤积肝病的疗法。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，并且其中该疾病或病状是由FXR介导的。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病选自心血管疾病、慢性肝病、脂质失调、胃肠疾病、肾脏疾病、代谢疾病、癌症、以及神经疾病。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的心血管疾病：动脉粥样硬化、动脉硬化、血脂异常、高胆固醇血症、高血脂症、高脂蛋白血、以及高甘油三酯血症。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的慢性肝病：原发性胆汁性肝硬化(PBC)、脑腱黄瘤病(CTX)、原发性硬化性胆管炎(PSC)、药物诱导的胆汁淤积症、妊娠肝内胆汁淤积症、胃肠外营养相关的胆汁淤积症(PNAC)、细菌过度生长或败血症相关的胆汁淤积症、自身免疫性肝炎、慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝移植相关的移植物抗宿主疾病、活供体移植肝再生、先天性肝纤维化、胆总管结石病、肉芽肿性肝病、肝内或肝外恶性肿瘤、舍格伦综合征、类肉状瘤病、威尔逊氏病、戈谢氏病、血色素沉着症、以及α1-抗胰蛋白酶缺乏症。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的胃肠疾病：炎症性肠病(IBD)、肠道易激综合征(IBS)、细菌过度生长、吸收障碍、放射后结肠炎、以及显微镜下结肠炎。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该炎症性肠病是克罗恩病或溃疡性结肠炎。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的肾脏疾病：糖尿病性肾病、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)、高血压性肾硬化、慢性肾小球肾炎、慢性移植肾小球病、慢性间质性肾炎、以及多囊肾病。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的代谢疾病：胰岛素抗性、高血糖症、糖尿病、糖胖症、以及肥胖症。

在这些实施例中的一个中，本披露证实一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的具有式I或Ia-Id的化合物，其中该疾病是选自以下的癌症：肝细胞癌、结肠直肠癌、胃癌、肾癌、前列腺癌、肾上腺癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宫体癌、以及肺癌。

本发明的化合物的合成

以下方案和实例是说明性的并且不应以任何方式解释为限制本发明的范围。

本发明提供一种合成具有式I的化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物的方法，其中R¹-R¹⁰、m、n、p、以及---是如在此所描述的。

本发明的合成方法可以容许各种各样的官能团，因此可以使用各种取代的起始材料。该方法在整个过程结束时或接近结束时基本上提供所希望的最终化合物，但是在某些情况下可能需要进一步使该化合物转化成其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

本发明的化合物可以使用商业上可获得的起始材料、文献中已知或来自容易制备的中间体的化合物，通过采用本领域技术人员已知的或鉴于在此的教导对熟练的技术人员将是显而易见的标准合成方法和步骤，以各种方式来制备。用于有机分子制备以及官能团转化和操控的标准合成方法和程序可以从相关科学文献或从本领域中的标准教科书中获得。虽然不局限于任何一种或多种来源，但是通过引用结合在此的以下经典文献是有用的，并且是本领域的技术人员已知的公认的有机合成参考教科书：如Smith,M.B.,March,J.,March's Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure[马奇的高等有机化学：反应、机理和结构],第5版,约翰威立父子公司(John Wiley&Sons):纽约,2001；以及Greene,T.W.,Wuts,P.G.M.,Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基],第3版,约翰威立父子公司:纽约,1999。合成方法的以下描述是为说明而设计的，而非限制用于制备本发明的化合物的通用程序。

在此申请中使用的所有缩写见于由约翰威立父子公司(John Wiley&Sons,Inc.)的”Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基]”、或默克公司(MERCK&Co.,Inc.)的MERCK INDEX[默克索引]、或由化学品供应商如奥德里奇(Aldrich)或根据本领域中的使用技术提供的其他化学书或化学品目录。

用于得到本发明化合物的合成方法可以根据以下方案1-6中列出的程序而使用。

本发明化合物的药理学

一般来说，本发明的化合物作为候选药物的可能性可以使用本领域已知的不同测定来测试。例如，对于FXR的体外验证，它的活性和选择性可以使用AlphaScreen(生物化学测定)来评价；基因表达可以使用RT-PCR(FXR靶基因)来评价；并且细胞毒性(例如，HepG2)可以使用ATP含量、LDH释放以及半胱天冬酶-3活化来评价。对于TGR5的体外验证，它的活性和选择性可以使用HTR-FRET(基于细胞的测定)来评价；基因表达可以使用RT-PCR(TGR5靶基因(即，cFOS))来评价；并且细胞毒性(例如，HepG2)可以使用ATP含量、LDH释放以及半胱天冬酶-3活化来评价。以下化合物可以用作以下实例中的对照。

如在此所使用的，化合物A是

其也被称为奥贝胆酸、INT-747、6-ECDCA、6-α-乙基鹅去氧胆酸、或6α-乙基-3α,7α-二羟基-5β-胆烷-24-酸。

如在此所使用的，化合物B是

其也被称为INT-767或6α-乙基-3α,7α,23-三羟基-24-降-5β-胆烷-23-硫酸钠盐。

如在此所使用的，化合物C是

其也被称为INT-777或6α-乙基-23(S)-甲基-3α,7α,12α三羟基-5β-胆烷-24-酸。

如在此所使用的，化合物D是

其也被称为6α-乙基-23(R)-甲基鹅去氧胆酸、以及S-EMCDCA。

如在此所使用的，化合物E是

如在此所使用的，胆酸是

其也被称为CA。

如在此所使用的，鹅去氧胆酸是

其也被称为CDCA。

如在此所使用的，熊去氧胆酸是

其也被称为UDCA。

如在此所使用的，牛磺鹅去氧胆酸是

其也被称为TCDCA。

如在此所使用的，牛磺熊去氧胆酸是

其也被称为TUDCA。

如在此所使用的，石胆酸是

其也被称为LCA。

实例

实例1. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸(化合物1)的合成

根据方案1中描述的程序并由作为起始材料的6-乙基-胆酸(6-ECA，化合物A1)来制备化合物1。通过本领域中已知的方法来制备化合物A1。例如，化合物A1可以通过在Pellicciari,R.等人,J.Med.Chem.[医药化学杂志]2009,52,7958-7961中描述的程序来制备。

方案1.

方案1.试剂和条件：a)MeOH，p-TSA，超声；b)Et₂O中的PhMgBr，THF，回流；HCl，EtOH，回流，然后室温；c)MeOAc，p-TSA、回流；d)PCC，CH₂Cl₂；e)Ac₂O，Bi(OTf)₃，CH₂Cl₂；f)NaIO₄，H₂O，H₂SO₄，RuCl₃，MeCN，EtOAc；g)MeOH，p-TSA，回流；h)Br₂，苯，30℃；i)NaBH₄，NaOAc，吡啶，25℃；j)HI，AcOH；k)CrO₃，AcOH；l)锌粉，NaOAc，AcOH，回流；m)NaOH，MeOH，H₂O，回流；以及n)NaBH₄，THF，H₂O。

3α,7α,12α-三羟基-6α-乙基-5β-双降胆烷基二苯基乙烯(化合物B1)：

在超声下处理化合物A1(8g，18.32mmol)和对甲苯磺酸(p-TSA)(352mg，1.83mmol)于MeOH(200mL)中的溶液3小时。将混合物在真空下浓缩，用CHCl₃稀释，并用饱和NaHCO₃溶液洗涤。将有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩以获得7.96g的6α-乙基胆酸甲酯衍生物。将因此形成的甲酯(17.66mmol)溶解于新蒸馏的THF(80mL)中，并在磁力搅拌和氩气氛下将混合物升温至50℃。然后逐滴添加Et₂O中的PhMgBr(176.6mmol)，并将所得混合物回流14小时。将悬浮液用HCl水溶液(50mL)处理并用EtOAc(3×120mL)萃取。将收集的有机层用饱和NaHCO₃溶液、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。将所得油用160mL的HCl:EtOH(3:1，v/v)处理，回流3小时并在室温搅拌过夜。在真空下除去EtOH，并将混合物用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的有机相用饱和NaHCO₃溶液、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化粗品，从而以76％的产率获得所希望的产物B1(7.7g，13.85mmol)。

3α,7α-二乙酰氧基-12-氧代-6α-乙基-5β-双降胆烷基二苯基乙烯(化合物C1)：

将化合物B1(7.7g，13.85mmol)和p-TSA(266mg，1.38mmol)于MeOAc(70mL)中的溶液回流2天。用饱和NaHCO₃溶液、盐水洗涤混合物，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩以得到8.15g的3α-乙酰氧基-7α,12α-二羟基-6α-乙基-5β-双降胆烷基二苯基乙烯。将粗品(8.18g)溶解于无水CH₂Cl₂(270mL)中。加入氯铬酸吡啶鎓(PCC)(2.95g)并搅拌混合物4小时。将所得棕色悬浮液过滤，用HCl水溶液处理，并用H₂O和盐水洗涤有机层。在经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩后，通过硅胶快速色谱法纯化粗品以得到5.6g(9.39mmol)的所希望的12-氧代衍生物。然后将中间体溶解于CH₂Cl₂(80mL)中，用Ac₂O(4.5mL，46.95mmol)、Bi(OTf)₃(306mg，0.469mmol)处理，并搅拌40分钟。将因此获得的悬浮液过滤并用HCl水溶液酸化。将有机相用H₂O和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将粗品在硅胶垫上过滤，从而以60％的产率获得5.3g(8.29mmol)的化合物C1。

3α,7α-二乙酰氧基-12-氧代-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸甲酯(化合物D1)：

在15mL的H₂O和2N H₂SO₄(2.4mL)中搅拌NaIO₄(15.97g，74.66mmol)。在1小时后，将溶液在0℃冷却，丙烷加入RuCl₃(85.9mg，0.415mmol)并将混合物磁力搅拌1小时。加入MeCN(23.5mL)作为相转移，并且在5分钟后，滴加化合物C1(5.3g，8.29mmol)于EtOAc(32.5mL)中的溶液并使其反应1小时。将混合物滤出，倒入H₂O中，并用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。将所得残余物在硅胶垫上过滤以得到5.33g的6α-乙基-24-降-胆酸衍生物，将该衍生物溶解于MeOH(90mL)中，在p-TSA(160mg，0.829mmol)存在下在超声下处理3小时，且然后回流1小时。将混合物在真空下浓缩，用CHCl₃稀释，并用饱和NaHCO₃溶液洗涤。将有机相用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化粗品，从而以86％的产率获得化合物D1(3.73g，7.19mmol)。

11α-溴-3α,7α-二乙酰氧基-12-氧代-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸甲酯(化合物E1)：

将Br₂于无水苯(2M，4.67mL)中的溶液逐滴添加至化合物D1(3.73g，7.19mmol)于苯(156mL)中的溶液。使所得红色溶液在30℃和氩气氛下反应3天。将该混合物倒入Na₂S₂O₃的水溶液中，并用EtOAc(3×100mL)萃取黄色悬浮液。将收集的有机层用H₂O和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化粗品，以获得呈白色-黄色固体的化合物E1(2.65g，4.43mmol)。

3α,7α-二乙酰氧基-11β,12β-氧代-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸甲酯(化合物F1)：

将NaOAc(2.65g，32.81mmol)和NaBH₄(808mg，21.27mmol)加入化合物E1(2.65g，4.43mmol)于新蒸馏的吡啶(27.5mL)中的溶液并使悬浮液在25℃在N₂气氛下反应14小时。将混合物用HCl水溶液处理并用EtOAc(3×80mL)萃取。将合并的有机相用H₂O、盐水洗涤，并在真空下干燥。通过硅胶快速色谱法纯化粗制油状物，从而以64％产率获得1.52g(2.85mmol)的化合物F1。

12α-碘-3α,7α-二乙酰氧基-11-氧代-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸甲酯(化合物G1)：

向化合物F1(1.52g，2.85mmol)于AcOH(40mL)中的溶液逐滴添加HI 57％(3.6g，28.5mmol)，并使混合物在室温反应30分钟。将混合物用NaHSO₃水溶液处理，倒入冰H₂O中，过滤，并将所得固体溶解于AcOH(35mL)中。逐滴加入CrO₃(1.4g，14.3mmol)于AcOH(40mL)和H₂O(8mL)中的溶液，并将混合物搅拌45分钟。将反应用NaHSO₃水溶液淬灭并倒入冰水中。过滤悬浮液并将固体溶解于CHCl₃中。然后将溶液用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化粗品以得到呈纯产物的化合物G1(1g，1.67mmol)。

3α,7α-二羟基-11-氧代-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸(化合物H1)：

将NaOAc(3.8g，46.76mmol)和锌粉(3.8g，58.45mmol)添加至化合物G1(1g，1.69mmol)于AcOH(30mL)中的溶液中，并将所得悬浮液回流2小时。将混合物过滤并在0℃将滤液用H₂O处理至沉淀。将沉淀物溶解于CHCl₃中，并用CHCl₃(3×50mL)萃取水相。将收集的有机层用饱和NaHCO₃溶液处理，用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，且然后在真空下浓缩。将粗品(880mg)溶解于MeOH和H₂O中，加入NaOH(25.45mmol)并将混合物回流36小时。将所得溶液在减压下浓缩，用H₂O稀释并用HCl水溶液处理。将其用CHCl₃(3×50mL)萃取并将合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在真空下浓缩以得到化合物H1。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸(化合物1)：

在0℃，向化合物H1(650mg，1.54mmol)于THF:H₂O(33mL，4:1v/v)中的溶液分批加入NaBH₄(407mg，10.78mmol)，并允许所得悬浮液在室温反应5小时。在用H₂O和HCl水溶液处理后，将粗反应混合物用CHCl₃(3×50mL)萃取。将收集的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在真空下浓缩以得到650mg的化合物1(1.69mmol，定量产率)(来自1的9％总产率)。

化合物1：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.89(3H,t,J＝7.33Hz,CH₃-25),0.94(3H,s,CH₃-18),1.04(3H,d,J＝5.46Hz,CH₃-21),1.13(3H,s,CH₃-19),3.30-3.35(1H,m,CH-3),3.71(1H,s,CH-7),4.19(1H,s,CH-11)。¹³C-NMR(400MHz,CD₃OD):12.0,14.6,19.9,23.5,24.6,27.7,29.1,31.9,34.7,35.2,36.4,36.9,38.3(2x),42.6(2x),42.8,49.5,49.9,52.2,57.9,69.0,71.4,73.3,177.7。

实例2. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-醇(化合物2)的合成

化合物2是根据方案2中所列出的程序来制备。化合物2是由作为起始材料的化合物1制备。

实例3. 3α,7α,11β,23-四羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-O-硫酸钠盐(化合物3)的合成

化合物3是根据方案2中所列出的程序来制备。化合物3是由作为起始材料的化合物1制备。

方案2.

方案2.试剂和条件：o)Ac₂O，THF，回流；p)EtCOCl，Et₃N，THF；NaBH₄，THF，H₂O；以及q)PyrSO₃，吡啶；NaOH，MeOH，H₂O，回流。

3α-乙酰氧基-7α,11β-二羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-酸(化合物J1)：

将Ac₂O(2.08mL，21.6mmol)添加至化合物1(460mg，1.08mmol)于THF(35mL)中的溶液并将混合物回流18小时。将所得溶液用HCl水溶液处理，用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机相用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化粗品，以获得化合物J1(255mg，0.548mmol)。

3α-乙酰氧基-7α,11β-二羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-醇(化合物K1)：

使化合物J1(250mg，0.538mmol)、EtCOCl(0.51mL，5.326mmol)和Et₃N(0.81mL，5.649mmol)于THF(7.5mL)中的溶液在室温反应14小时。然后将反应混合物过滤，用NaBH₄(306mg，8.07mmol)于H₂O(2.5mL)中的悬浮液处理并搅拌2小时。将混合物用HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在真空下浓缩。将粗品在硅胶垫上过滤以得到化合物K1(150mg，0.333mmol)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-醇(2)和3α,7α,11β,23-四羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-O-硫酸钠盐(化合物3)的合成：

向化合物K1(150mg，0.333mmol)于吡啶(6mL)中的溶液添加PyrSO₃(133mg，0.832mmol)，并将所得混合物在氩气氛下搅拌24小时。将反应混合物用H₂O(2mL)稀释并在减压下浓缩以除去吡啶。将残余物用NaOH(200mg，4.995mmol)于MeOH:H₂O(10mL)中的溶液处理并回流过夜。将混合物在真空下干燥以除去MeOH，用H₂O(2mL)稀释，并用Et₂O(3×20mL)洗涤：将合并的醚相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并通过快速色谱法纯化以得到呈纯白色固体的3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-醇(2)(55mg，0.134mmol)。将碱性水相在反相RP-18垫上过滤以获得呈纯白色固体的化合物3(60mg，0.117mmol)。

化合物2：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.88-0.92(6H,m,CH₃-25,CH₃-18),0.97(3H,d,J＝6.5Hz,CH₃-21),1.14(3H,s,CH₃-19),3.40-3.47(1H,m,CH-3),3.62-3.72(2H,m,CH₂-23),3.80(1H,s,CH-7),4.25(1H,d,J＝2.72Hz,CH-11)。¹³C-NMR(400MHz,CDCl₃):11.6,14.4,18.8,22.2,23.8,27.0,28.0,31.1,32.9,34.1,35.3,35.7,36.4,37.1,38.8,40.6,41.6,47.7,48.8,50.9,56.8,60.7,68.8,71.0,72.3。

化合物3：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.90-0.94(6H,m,CH₃-25,CH₃-18),1.04(3H,d,J＝6.4Hz,CH₃-21),1.15(3H,s,CH₃-19),3.32-3.40(1H,m,CH-3),3.74(1H,s,CH-7),4.02-4.08(2H,m,CH₂-23),4.21(1H,s,CH-11)。¹³C-NMR(400MHz,CD₃OD):12.0,14.6,19.1,23.5,24.7,27.7,29.1,31.9,34.3,34.8,36.4,36.5,36.9,38.3(x2),42.6,42.8,49.5,50.0,52.2,58.2,67.2,69.0,71.4,73.3。

实例4. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-醇(化合物4)的合成

4是根据方案3中所列出的程序来制备。4的合成是由作为起始材料的化合物L1制备。化合物L1通过本领域中已知的方法来制备。例如，化合物L1可以通过美国公开号2014/0371190中描述的程序来制备。

方案3.

方案3.试剂和条件：r)LiAlH₄，THF，0℃至室温。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-醇(化合物4)：

将化合物L1(25mg，0.057mmol)于THF(2mL)中的溶液逐滴添加至在0℃冷却的LiAlH₄(21.8mg，0.572mmol)于THF(1mL)中的悬浮液。使所得混合物在氩气氛和室温反应12小时。将悬浮液用EtOAc(5mL)稀释，首先用H₂O处理，然后用HCl水溶液处理，并最终用EtOAc(3×5mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法纯化粗产物以得到呈白色固体的化合物4(21mg，0.051mmol，90％产率)。

化合物4：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.88-0.92(6H,m,CH₃-26,CH₃-18),1.00(3H,d,J＝6.25Hz,CH₃-21),1.14(3H,s,CH₃-19),3.31-3.40(1H,m,CH-3),3.48-3.55(2H,m,CH₂-24),3.73(1H,s,CH-7),4.19(1H,s,CH-11)。¹³C-NMR(400MHz,CD₃OD):12.0,14.6,19.2,23.5,24.7,27.7,29.1,30.3,31.9,33.2,34.8,36.4,36.9,37.2,38.3(x2),42.6,42.7,49.5,50.1,52.2,58.1,63.6,69.1,71.4,73.3。

实例5. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-O-硫酸钠盐(化合物5)的合成

化合物5是根据方案4中所列出的程序来制备。化合物5的合成是由作为起始材料的化合物M1制备。化合物M1通过本领域中已知的方法来制备。例如，化合物M1可以通过美国公开号2014/0371190中描述的程序来制备。

方案4.

方案4.试剂和条件：s)Ac₂O，NaHCO₃，THF，回流；t)Et₃N，ClCO₂Et，THF，室温；NaBH₄，THF，H₂O；u)NaBH₄，THF，H₂O；以及v)PyrSO₃，吡啶；NaOH，MeOH，H₂O。

3α-乙酰氧基-7α-羟基-11-氧代-6α-乙基-5β-胆烷-24-醇(化合物N1)：

向化合物M1(120mg，0.27mmol)于新蒸馏的THF(4mL)中的溶液添加NaHCO₃(417mg，4.97mmol)和Ac₂O(0.47mL，4.97mmol)，并将悬浮液在氩气氛下回流24小时。将混合物冷却至室温，用HCl水溶液处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。将收集的有机相依次用HCl水溶液、水、饱和NaHCO₃溶液、盐水洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩后，将粗品溶解于新蒸馏的THF(3mL)中，用Et₃N(0.22mL，1.54mmol)和ClCO₂Et(0.14mL，1.45mmol)处理，并使混合物在室温在氩气氛下反应2小时。过滤悬浮液，并将滤液用NaBH₄(125mg，3.30mmol)于H₂O(1mL)中的悬浮液处理并搅拌3小时。将混合物用HCl水溶液酸化并用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机层用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。通过快速色谱法纯化粗品，从而获得化合物N1(70mg，0.15mmol)。

3α-乙酰氧基-7α,11β-二羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-醇(化合物P1)：

向化合物N1(0.15mmol)于THF和H₂O的二元混合物中的溶液添加NaBH₄(3.75mmol)，并将混合物在室温搅拌24小时。将悬浮液用HCl水溶液处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。将收集的有机相用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩，从而以定量产量得到化合物P1。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-5β-胆烷-24-O-硫酸钠盐(化合物5)：

将PyrSO₃(48mg，0.30mmol)添加至化合物P1(70mg，0.15mmol)于吡啶(2.7mL)中的溶液中，并使其在室温在氩气氛下反应30小时。在真空下除去吡啶并将残余物与NaOH(60mg，1.5mmol)于MeOH和H₂O中的混合物中的溶液一起搅拌3天。将混合物在减压下浓缩以蒸发MeOH，用H₂O(2mL)稀释，并用Et₂O(3×10mL)洗涤。将碱性水相在反相RP-18垫上过滤以获得呈纯白色固体的化合物5(47mg，0.085mmol，57％产率)。

化合物5：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.88-0.92(6H,m,CH₃-18,CH₃-26),1.00(3H,d,J＝6.3Hz,CH₃-21),1.14(3H,s,CH₃-19),3.32-3.35(1H,brm,CH-3),3.72(1H,brs,CH-7),3.94-3.97(2H,brm,CH₂-24),4.20(1H,brs,CH-11)。¹³C-NMR(400MHz,CD₃OD):12.1,14.7,19.1,23.6,24.7,27.1,27.7,29.1,31.9,33.1,34.8,36.4,36.9,37.0,38.3(x 2),42.6,42.7,49.5,50.1,52.2,58.0,69.1,69.7,71.4,73.3。

实例6. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-22-(1,2,4-噁二唑-5-氧代-3-基)-23,24-双降-5β-胆烷(化合物6)

方案5.

方案5.试剂和条件：a)Ac₂O，Bi(OTf)₃，CH₂Cl₂；b)TFAA，NaNO₂，TFA；c)NaOH，MeOH；d)NH₂OH·HCl，Na₂CO₃·10H₂O，EtOH；e)ClCO₂Et，吡啶，THF；f)吡啶，甲苯。

3α,7α,11β-乙酰氧基-6α-乙基-5β-胆烷-24-酸(化合物Q1)：

向化合物L1(660mg，1.5mmol)于CH₂Cl₂(15mL)中的悬浮液添加Ac₂O(22.7mmol)和Bi(OTf)₃(0.08mmol)，并将混合物在室温搅拌1小时。过滤反应混合物，并将滤液用37％HCl处理。将有机相用H₂O、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩以获得Q1(820mg，1.46mmol，96％产率)，其不经进一步即用于下一步骤。

化合物Q1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.76(3H,s,CH₃-18),0.87-0.90(6H,m,CH₃-21,CH₃-26),1.04(3H,s,CH₃-19),2.03-2.05(6H,m,OCOCH3x2),2.08(3H,s,OCOCH₃),4.52-4.61(1H,m,CH-3),5.20(1H,s,CH-7),5.25(1H,s,CH-11)。

3α,7α,11β-三乙酰氧基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-腈(化合物R1)：

在0℃，将化合物Q1(820mg，1.46mmol)于TFA(4.6mL)中的悬浮液用TFAA(1.55mL)处理并在0℃搅拌45分钟。添加NaNO₂(4.4mmol)，并使混合物在0℃反应45分钟，并在50℃再反应45分钟。将反应混合物冷却至室温并倒入碎冰中。将水相在真空下过滤并将所得橙黄色固体溶解于EtOAc(30mL)中，用饱和NaHCO₃溶液、H₂O和盐水洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩并获得呈粗品的化合物R1(770mg)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物R1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.76(3H,s,CH₃-18),0.84-0.87(3H,m,CH₃-25),1.02(3H,s,CH₃-19),1.08(3H,d,J＝6.4Hz,CH₃-21),2.01(6H,brs,OCOCH₃x2),2.07(3H,s,OCOCH₃),4.52-4.61(1H,m,CH-3),5.18(1H,s,CH-7),5.24(1H,s,CH-11)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-5β-胆烷-23-腈(化合物S1)：

将化合物R1(770mg)溶解于MeOH(10mL)中并用NaOH(1.2g)回流3天。在除去溶剂后，将残余物溶解于CHCl₃(30mL)中并用1N HCl处理。用CHCl₃萃取水相，并将合并的有机层用H₂O和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。使用CH₂Cl₂和MeOH作为洗脱溶剂通过硅胶快速色谱法纯化粗品以获得高纯度等级的化合物S1(180mg，0.445mmol)。

化合物S1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.87-0.91(6H,m,CH₃-18,CH₃-25),1.13(3H,s,CH₃-19),1.17(3H,d,J＝6.5Hz,CH₃-21),3.42-3.50(1H,m,CH-3),3.77(1H,s,CH-7),4.28(1H,s,CH-11)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-N-羟基-5β-胆烷-23-脒(化合物T1)：

将NH₂OH·HCl(557mg)和Na₂CO₃·10H₂O(2.30g)添加至化合物S1(180mg，0.445mmol)于EtOH(8mL)中的溶液并将所得混合物回流2天。将悬浮液冷却至室温并在真空下过滤。将固体用EtOAc洗涤并将有机相用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。含有所希望的中间化合物T1的粗品不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物T1：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.90(3H,t,J＝7.3Hz,CH₃-25),0.96-0.98(6H,m,CH₃-18,CH₃-21),1.14(3H,s,CH₃-19),3.31-3.40(1H,m,CH-3),3.72(1H,s,CH-7),4.20(1H,s,CH-11)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-24-降-N-[(乙氧基羰基)氧基]-5β-胆烷-23-脒(化合物U1)：

向在0℃冷却的化合物T1(180mg)于THF(2mL)和吡啶(50μL，0.6mmol)中的溶液逐滴添加ClCO₂Et(0.45mmol)于THF(1mL)中的溶液，并将所得悬浮液在氩气氛下搅拌30分钟。将混合物用H₂O处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。将收集的有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，在真空下浓缩以提供化合物U1，其不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物U1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.86-0.92(6H,m,CH₃-25,CO₂CH₂CH₃),1.00(3H,d,J＝6.1Hz,CH₃-21),1.11(3H,s,CH₃-18),1.23(3H,s,CH₃-19),3.35-3.44(1H,m,CH-3),3.77(1H,s,CH-7),4.13-4.39(3H,m,CH-11,CO₂CH₂CH₃),4.90-5.05(1H,m,NH)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-22-(1,2,4-噁二唑-5-氧代-3-基)-23,24-双降-5β-胆烷(化合物6)：

将化合物U1(210mg，0.412mmol)溶解于甲苯(6mL)和吡啶(0.6mL)中并在氩气氛下回流20小时。在冷却至室温后，将混合物用EtOAc(10mL)稀释并用1N HCl、H₂O、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩并纯化以获得化合物6(35mg，0.076mmol)。

化合物6：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.89-0.93(3H,t,J＝7.3Hz,CH₃-24),0.96-0.99(6H,m,CH₃-18,CH₃-21),1.15(3H,s,CH₃-19),2.09(1H,d,J＝14.1Hz),2.37(1H,d,J＝12.3Hz),2.57(1H,d,J＝13.4Hz),3.31-3.40(1H,m,CH-3),3.66(1H,s,OH),3.73(1H,s,CH-7),4.21(1H,s,CH-11)。¹³C-NMR(100.6MHz,CD₃OD):δ12.0,14.7,19.2,23.5,24.7,27.6,29.1,31.9,34.5,34.7,36.1,36.4,36.9,38.2(x2),42.6,43.0,49.4,49.9,52.2,58.4,68.9,71.3,73.3,169.3,173.0。

实例7. 3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-23-(1,2,4-噁二唑-5-氧代-3-基)-23-降-5β-胆烷(化合物7)的合成

方案6.

方案6.试剂和条件：a)MeOH，p-TSA，超声；b)MOMCl，DIPEA，DMAP，CH₂Cl₂；c)NaOH，MeOH；d)ClCO₂iBu，Et₃N，THF，NH₄OH30％；e)CNCl，DMF；f)NH₂OH·HCl，Na₂CO₃·10H₂O，EtOH；g)ClCO₂Et，吡啶，THF；h)吡啶，甲苯；i)HCl 3N，丙酮。

6α-乙基-3α,7α,11β-三甲氧基甲基氧基-5β-胆烷-24-酸甲酯(化合物V1)：

在超声下处理化合物L1(730mg，1.7mmol)和p-TSA(0.17mmol)于MeOH(10mL)中的溶液3小时。除去溶剂，将残余物溶解于EtOAc(10mL)中并用饱和NaHCO₃溶液洗涤。将水相用EtOAc(2×10mL)萃取并将合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将粗品(700mg，1.55mmol)溶解于CH₂Cl₂(20mL)中并与DIPEA(18.6mmol)、DMAP(0.16mmol)和MOMCl(15.5mmol)一起回流3天。将混合物冷却至室温，并依次用饱和NH₄Cl溶液、H₂O和盐水洗涤。将有机相经无水Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩，并将获得的粗化合物V1不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物V1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.81(3H,s,CH₃-18),0.85-0.89(3H,m,CH₃-26),0.93(3H,d,J＝6.2Hz,CH₃-21),1.10(3H,s,CH₃-19),3.34-3.40(10H,m,CH-3,OCH₂OCH₃x3),3.53(1H,s,CH-7),3.65(3H,s,CO₂CH₃),3.93(1H,s,CH-11),4.55-4.70(6H,m,OCH₂OCH₃x3)。

6α-乙基-3α,7α,11β-三甲氧基甲基氧基-5β-胆烷-24-酰胺(化合物W1)：

向化合物V1(980mg，1.6mmol)于MeOH(10mL)中的溶液添加NaOH(15.5mmol)并使混合物在50℃反应。在真空下除去溶剂，将残余物溶解于H₂O(5mL)中并用1N HCl处理。将悬浮液用CHCl₃(3×10mL)萃取并将合并的有机相用H₂O和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。将粗品(840mg)溶解于新蒸馏的THF(18mL)中，在0℃冷却并在氩气氛下与Et₃N(0.288mL)和ClCO₂iBu(0.250mL)一起搅拌20分钟。添加30％NH₄OH(0.28mL)并使所得悬浮液在室温反应40分钟。将混合物用H₂O处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。将收集的有机相用1NHCl、H₂O、饱和NaHCO₃溶液、H₂O和盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩以获得化合物W1(900mg)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物W1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.62-0.82(9H,m,CH₃-18,CH₃-21,CH₃-26),0.99(3H,s,CH₃-19),3.22-3.30(10H,m,CH-3,OCH₂OCH₃x3),3.42(1H,s,CH-7),3.82(1H,s,CH-11),4.46-4.57(6H,m,OCH₂OCH₃x3),6.03(1H,brs,CONH₂),6.27(1H,brs,CONH₂)。

6α-乙基-3α,7α,11β-三甲氧基甲基氧基-5β-胆烷-24-腈(化合物X1)：

将化合物W1(890mg)和CNCl(578mg)在DMF(22mL)中的溶液在室温在氩气氛下搅拌12小时。将所得悬浮液用EtOAc(50mL)稀释并用H₂O(3×15mL)洗涤。将有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。使用PET-EtOAc作为洗脱溶剂系统通过硅胶上快速色谱法纯化粗品以得到呈淡黄色油状物的化合物X1(260mg，0.473mmol)。

化合物X1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.83-0.88(6H,m,CH₃-18,CH₃-26),0.95(3H,d,J＝6.0Hz,CH₃-21),1.05(3H,s,CH₃-19),3.33-3.40(10H,m,CH-3,OCH₂OCH₃x3),3.52(1H,s,CH-7),3.91(1H,s,CH-11),4.55-4.69(6H,m,OCH₂OCH₃x3)。

6α-乙基-3α,7α,11β-三甲氧基甲基氧基-N-羟基-5β-胆烷-24-脒(化合物Y1)：

将NH₂OH·HCl(386mg)和Na₂CO₃·(1.6g)添加至化合物X1(170mg，0.309mmol)于EtOH(6mL)中的溶液并回流直到起始材料消耗。将悬浮液冷却至室温并在真空下过滤。将剩余的固体用EtOAc(15mL)洗涤并将过滤的有机相用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。含有所希望的中间化合物Y1的粗品不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物Y1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.77(3H,s,CH₃-18),0.81-0.84(3H,t,J＝6.8Hz,CH₃-26),0.90(3H,d,J＝6.2Hz,CH₃-21),1.05(3H,s,CH₃-19),3.30-3.36(10H,m,CH-3,OCH₂OCH₃x3),3.48(1H,s,CH-7),3.88(1H,s,CH-11),4.51-4.65(6H,m,OCH₂OCH₃x3),4.76(2H,brs,NH,NH-OH)。

6α-乙基-3α,7α,11β-三甲氧基甲基氧基-N-[(乙氧基羰基)氧基]-5β-胆烷-24-脒(化合物Z1)：

向在0℃冷却的化合物Y1(200mg)于THF(2mL)和吡啶(0.46mmol)中的溶液逐滴添加ClCO₂Et(0.34mmol)于THF(1mL)中的溶液，并将所得悬浮液在氩气氛下搅拌30分钟。将混合物用H₂O处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。将收集的有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，在真空下浓缩以提供化合物Z1，其不经进一步纯化即用于下一步骤。

化合物Z1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃):δ0.77(3H,s,CH₃-18),0.81-0.84(3H,t,J＝6.8Hz,CH₃-26),0.92(3H,d,J＝6.1Hz,CH₃-21),1.05(3H,s,CH₃-19),1.27(3H,t,J＝7.0Hz,OCH₂CH₃),3.30-3.36(10H,m,CH-3,OCH₂OCH₃x3),3.48(1H,s,CH-7),3.88(1H,s,CH-11),4.21(2H,q,J＝7.0Hz,OCH₂CH₃),4.51-4.65(6H,m,OCH₂OCH₃x3),4.88(2H,brm,NH,NH-OH)。

3α,7α,11β-三羟基-6α-乙基-23-(1,2,4-噁二唑-5-氧代-3-基)-24-降-5β-胆烷(化合物7)：

将从前一步骤获得的化合物Z1(200mg)溶解于甲苯(5mL)和吡啶(0.5mL)中，在氩气氛下回流8小时，并在室温再搅拌12小时。将混合物用EtOAc(10mL)稀释并依次用1N HCl、H₂O、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。将所得粗品溶解于丙酮(15mL)中，并在40℃与3N HCl(1.5mL)一起搅拌6小时。用H₂O稀释混合物，并在减压下浓缩有机层。然后将水相用EtOAc(3×10mL)萃取并将合并的有机层用饱和NaHCO₃溶液处理，用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。通过快速色谱法纯化粗品以得到呈白色固体的化合物7(29.6mg，0.062mmol)。

化合物7：¹H-NMR(400MHz,CD₃OD):δ0.89-0.93(6H,m,CH₃-18,CH₃-25),1.05(3H,d,J＝6.3Hz,CH₃-21),1.15(3H,s,CH₃-19),2.07-2.11(1H,m),2.20-2.24(1H,m),2.45-2.50(1H,m,CH-23),2.58-2.68(1H,m,CH-23),3.32-3.36(1H,m,CH-3),3.73(1H,s,CH-7),4.20(1H,s,CH-11)。¹³C-NMR(100.6MHz,CD₃OD):12.0,14.6,18.7,23.0,23.5,24.7,27.7,29.1,30.8,31.9,33.1,34.7,36.4,36.8,36.9,38.3(x2),42.6,42.8,50.0,52.2,57.6,69.0,71.4,73.3,162.2,162.8。

实例6化合物1-7的FXR/TGR5活性

在细胞核中，配体结合的核受体(NR)通过直接与基本转录机器相互作用或通过接触称作共活化因子的桥接因子来调节转录的起始(Onate等人,Science[科学],1995,270,1354-1357；Wang等人,J Biol Chem[生物化学杂志],1998,273,30847-30850；以及Zhu等人,Gene Expr[基因表达],1996,6,185-195)。NR与它们的共活化因子的配体依赖性相互作用发生在位于受体配体结合结构域(LBD)中的活化功能2(AF-2)与位于共活化因子上的核受体盒(NR盒)之间(Nolte等人,Nature[自然],1998,395,137-143)。若干条证据证实了NR盒中存在的LXXLL肽序列表示促进不同蛋白质与AF-2区的相互作用的特征基序(Heery等人,Nature[自然],1997,387,733-736；以及Torchia等人,Nature[自然],1997,387,677-684)。

使用AlphaScreen是为了通过利用主要在FXR与类固醇受体共活化因子1(SRC-1)的NR盒中存在的LXXLL基序之间的双分子相互作用来鉴定新颖调节剂。

在生物素化的LXXLL SRC-1肽存在下，用递增浓度的指定配体孵育人FXR-LBD-GST。当形成复合物受体-共活化因子时，AlphaScreen信号增加。本发明的化合物是有效FXR激动剂。数据在表1和表2中提供。

胆汁酸(BA)不仅调节若干核激素受体，而且还是G蛋白偶联受体(GPCR)TGR5的激动剂(Makishima等人,Science[科学],1999,284,1362-1365；Parks等人,Science[科学],1999,284,1365-1368；Maruyama等人,Biochem Biophys Res Commun[生物化学与生物物理研究通讯],2002,298,714-719；以及Kawamata等人,J Biol Chem[生物化学杂志],2003,278,9435-9440)。经由FXR和TGR5的信号传导调节若干个代谢途径，不但调控BA合成和肠肝再循环，而且还调节甘油三脂、胆固醇、葡萄糖、以及能量体内平衡。为了评价本发明的化合物活化TGR5的能力，针对作为TGR5活化的读出的细胞内cAMP增加，对本发明的化合物和其他比较化合物进行了筛选。将组成性表达TGR5的人肠内分泌NCI-H716细胞暴露于递增浓度的本发明的化合物，并且通过TR-FRET测量细胞内的cAMP水平。使用石胆酸(LCA)作为阳性对照。本发明的化合物显示超过TGR5的对FXR的高选择性。数据提供于

表1.化合物1-5的FXR/TGR5活性

表2.化合物L1、3、5、6、以及7的FXR/TGR5活性

表3.跨越人、小鼠、大鼠和狗直向同源物的FXR激动剂活性

表4.种间交叉TGR5活性

实例7核受体选择性分布

使用AlphaScreen测定，可以评价本发明的化合物针对参与代谢途径的以下核受体的选择性：LXRβ、PXR、CAR、PPARα、PPARδ、PPARγ、RAR、RARα、VDR、TR、PR、RXR、GR、以及ER。

以激动剂和拮抗剂两种模式对化合物L1、3、5、6和7针对该组可用核受体进行了测试。这两种化合物在激动剂(对200μM的剂量反应)或拮抗剂(在10μM下的固定浓度)模式下都不活化这些受体中的任一种。

实例8.FXR靶基因组

为了评价本发明的化合物调节FXR靶基因的能力，进行了定量RT-PCR测定。选择HepG2细胞作为相关的细胞系来测定本发明的化合物是否能够调控内源性FXR遗传网络。通过从用1μM化合物A、化合物B和本发明的化合物过夜处理的细胞分离出总RNA来评估本发明的化合物诱导FXR靶基因的能力。将化合物A确立为有效的FXR选择性激动剂，并且将化合物B确立为双重有效的FXR/TGR5激动剂。

FXR调控BA体内平衡所涉及的若干种靶基因的表达。简言之，FXR在若干代谢途径中起着中心作用，包括即脂质代谢、胆汁酸代谢、以及碳水化合物代谢。关于基因表达谱，编码参与脂质代谢的蛋白质的基因包括例如APOCII、APOE、APOAI、SREBP-1C、VLDL-R、PLTP以及LPL；编码参与胆汁酸代谢的蛋白质的基因包括例如OSTα/β、BSEP、MRP2、SHP、CYP7A1、FGF19、SULT2A1、以及UGT2B4；并且编码参与碳水化合物代谢的蛋白质的基因包括例如PGCla、PEPCK、以及GLUT2。在化合物3、5、6、以及7在HepG2细胞上刺激18小时后评价FXR靶基因：BSEP、SHP、OSTβ、以及CYP7A1。化合物L1用作对照。化合物3、5、6、以及7显著结合至肝细胞中的FXR，从而显著调节FXR靶基因。

实例9.体外细胞毒性

为了评价本发明化合物的体外细胞毒性，使用两种不同的测定方法。这些测定通过测量ATP水平来评价细胞活力，并且通过测量LDH释放来评价细胞毒性。三磷酸腺苷(ATP)核苷酸表示基础分子水平下的能量来源，因为它是在每个细胞中用作辅酶的多功能分子，并且是线粒体DNA的组成部分(Kangas等人,Medical Biology[医用生物学],1984,62,338-343；Crouch等人,J Immunol.Methods[免疫学方法杂志],1993,160,81-88；以及Petty等人,J Biolumin.Chemilumin.[生物发光和化学发光杂志]1995,10,29-34)。当涉及到细胞内能量转移时，它被称为”分子通货(molecular unit of currency)”。这是为了确保ATP在代谢中的重要作用，并且ATP含量的降低是揭示细胞损害的第一步(Storer等人,MutationResearch[突变研究],1996,368,59-101；以及Cree和Andreotti,Toxicology In-Vitro[体外毒理学],1997,11,553-556)。

用于确定细胞活力的另一种方法是检测限定细胞区室化的膜的完整性。在受损的细胞膜中测量到来自细胞质的组分的漏出，这指示细胞膜完整性的缺失，并且LDH释放是用于确定细胞中的常见毒性的方法。用本发明的化合物处理HepG2细胞，并进行连续稀释。

将LCA稀释液与无细胞和未处理的细胞一起添加至接种的细胞中作为测定对照。对于每个测试化合物浓度，一式三份进行测定。

细胞活力被确定为与测试化合物的暴露时间和浓度相关的细胞内ATP的量度(Sussman,Promega Cell Notes[生命科学细胞分析],第3期,2002)。数据提供于表5A和表5B中。

表5A.化合物3和5的体外细胞毒性

*Rizzo等人,Mol.Pharm.[分子制药]2010,78,617-630。

表5B.化合物6和7的体外细胞毒性(相对于化合物6和7对HepG2的刺激的LDH释放和ATP含量。

他莫昔芬用作该测定的阳性对照，并且LCA用作参考。

实例10.CYP450筛选

为了评价本发明的化合物对于药物-药物相互作用的潜力，对六种主要的CYP450同种型(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4)进行了研究(Obach等人,JPharmacol.Exp.Ther[药理学与实验治疗学杂志],2006,316,336-348)。

为了测定本发明的化合物与细胞色素P450酶之间的相互作用，使用重组CYP450蛋白(baculosomes；英杰公司(Invitrogen))、底物以及抑制剂，通过本发明的化合物抑制(或不抑制)荧光信号的产生的能力来分析本发明的化合物(Bidstrup等人,Br JClin.Pharmacol[英国临床药理学杂志],2003,56,305-14)。作为阳性对照，在相同的板中测试用于每种CYP450同种型的选择性抑制剂。

表6.CYP450s抑制(针对6种主要同工酶的测试)

实例11.人ERG钾通道

为了确定离子通道功能，采用Predictor^TM hERG荧光偏振测定，因为它提供了用于初始测定测试化合物阻断hERG通道的倾向的有效方法(Dorn等人,J Biomol.Screen[生物分子筛选杂志],2005,10,339-347)。该测定是基于以下假设：hERG钾通道活性有助于永久转染细胞中的静息膜电位，且因此阻断hERG通道会引起细胞膜的去极化。该测定被设计来通过产生与膜片钳电生理学研究准确相关的数据来鉴定潜在的hERG通道阻断剂。来自Predictor^TM测定的结果证实了与获自膜片钳技术的那些结果的高度相关性(Dorn等人,JBiomol Screen[生物分子筛选杂志],2005,10,339-347)。

使用该Predictor^TM荧光偏振测定将来自用hERG钾通道稳定转染的中国仓鼠卵细胞的膜制品用于评价本发明的化合物对这一通道的潜在抑制作用。抑制hERG钾通道导致的膜极化减少直接与荧光偏振(FP)的减少相关。

通过使用测试化合物以及阳性对照E-4031和它莫西芬的16点剂量-反应来一式三份地进行该测定。获得E-4031的IC₅₀为15nM(ΔmP＝163)，它莫西芬的IC₅₀为1.4μM(ΔmP＝183)。认为超过100mP(毫偏振)的测定窗是良好的。通过GraphPad Prism(GraphPad软件公司)分析获得非线性回归曲线，以用来计算_IC50值。

表7.人ERG钾通道抑制

化合物L1、3、5、6、以及7不抑制hERG钾通道。

实例12.理化性质

使用本领域中已知的方法测定本发明化合物的理化性质，如水溶性、临界胶束浓度、表面张力以及LogP_A。数据提供于表8中。

表8.理化性质

^a CMC：在0.15M NaCl水溶液中测定的临界胶束浓度

^b LogP_A ^-：作为已电离的物质的所研究的胆汁酸的1-辛醇-水分配系数。

Claims

1.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

2.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物是具有式Ia的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

3.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物是具有式Ib或Ic的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

4.如权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R¹是OH、烷氧基或氧代。

5.如权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R¹是OH或烷氧基。

6.如权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R¹是卤素。

7.如权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R¹是OH。

8.如权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R¹是烷氧基。

9.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中R³是H。

10.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中R³是OH或卤素。

11.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中R³是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

12.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R⁶是OH或H。

13.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R⁶是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。

14.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物是具有式Id的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

15.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物是具有式Ie的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物。

16.如权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、SO₃H、OSO₂NH₂、SO₂NH₂、OPO₃H₂、PO₃H₂、CO₂H或C(O)NHOH。

17.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、OSO₂NH₂、OPO₃H₂或CO₂H。

18.如权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中R⁷是OH。

19.如权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中R⁷是CO₂H。

20.如权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中R⁷是OSO₃H。

21.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R⁷是SO₃H。

22.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R⁷是OSO₂NH₂或SO₂NH₂。

23.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R⁷是OPO₃H₂、PO₃H₂或C(O)NHOH。

24.如权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R⁷是四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基。

25.如权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R⁷是OH、OSO₃H、OSO₂NH₂、OPO₃H₂、CO₂H、四唑基、噁二唑基、噻二唑基、5-氧代-1,2,4-噁二唑基、5-氧代-1,2,4-噻二唑基、噁唑烷-二酮基、噻唑烷-二酮基、3-羟基异噁唑基、3-羟基异噻唑基或2,4-二氟-3-羟苯基。

26.如权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中R²是OH。

27.如权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中R²是H或卤素。

28.如权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中R²是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

29.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R⁵是OH或H。

30.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R⁵是OSO₃H、OCOCH₃或OPO₃H₂。

31.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基。

32.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R⁴是H或卤素。

33.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R⁴是任选地被一个或多个卤素或OH取代的C₁-C₆烷基。

34.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R⁴是C₂-C₆烯基或C₂-C₆炔基。

35.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R⁴是甲基、乙基或丙基。

36.如权利要求1至35中任一项所述的化合物，其中m是0。

37.如权利要求1至35中任一项所述的化合物，其中m是1。

38.如权利要求1至35中任一项所述的化合物，其中m是2。

39.如权利要求1至38中任一项所述的化合物，其中n是1。

40.如权利要求1至39中任一项所述的化合物，其中p是0。

41.如权利要求1至40中任一项所述的化合物，其中R⁴处于α位置。

42.如权利要求1至41中任一项所述的化合物，其中R¹处于β位置。

43.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物选自：

44.一种如权利要求1所述的化合物的盐。

45.如权利要求44所述的化合物，其中R⁷是OSO₃ ^-。

46.如权利要求35所述的化合物，其中R⁷是OSO₃ ^-Na⁺。

47.一种具有式I的化合物

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是烷氧基或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

48.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

49.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

50.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R⁵是OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素；

R⁶是H、OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素，

或R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

51.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R⁵是H、OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素；

R⁶是OH、OSO₃H、OCOCH₃、OPO₃H₂或卤素，

或R⁵和R⁶与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。

52.一种药物组合物，该药物组合物包含如权利要求1至51中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂。

53.一种治疗或预防对其有需要的受试者的疾病或病状的方法，该方法包括施用有效量的如权利要求1至54中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，并且其中该疾病或病状是由FXR介导的。

54.如权利要求53所述的方法，其中该疾病选自心血管疾病、慢性肝病、脂质失调、胃肠疾病、肾脏疾病、代谢疾病、癌症、以及神经疾病。

55.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的心血管疾病：动脉粥样硬化、动脉硬化、血脂异常、高胆固醇血症、高血脂症、高脂蛋白血以及高甘油三酯血症。

56.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的慢性肝病：原发性胆汁性肝硬化(PBC)、脑腱黄瘤病(CTX)、原发性硬化性胆管炎(PSC)、药物诱导的胆汁淤积症、妊娠肝内胆汁淤积症、胃肠外营养相关的胆汁淤积症(PNAC)、细菌过度生长或败血症相关的胆汁淤积症、自身免疫性肝炎、慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝移植相关的移植物抗宿主疾病、活供体移植肝再生、先天性肝纤维化、胆总管结石病、肉芽肿性肝病、肝内或肝外恶性肿瘤、舍格伦综合征、类肉状瘤病、威尔逊氏病、戈谢氏病、血色素沉着症、以及α1-抗胰蛋白酶缺乏症。

57.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的胃肠疾病：炎症性肠病(IBD)、肠道易激综合征(IBS)、细菌过度生长、吸收障碍、放射后结肠炎、以及显微镜下结肠炎。

58.如权利要求60所述的方法，其中该炎症性肠病是克罗恩病或溃疡性结肠炎。

59.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的肾病：糖尿病性肾病、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)、高血压性肾硬化、慢性肾小球肾炎、慢性移植肾小球病、慢性间质性肾炎、以及多囊肾病。

60.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的代谢疾病：胰岛素抗性、高血糖症、糖尿病、糖胖症、以及肥胖症。

61.如权利要求54所述的方法，其中该疾病是选自以下的癌症：肝细胞癌、结肠直肠癌、胃癌、肾癌、前列腺癌、肾上腺癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、唾液腺癌、卵巢癌、子宫体癌、以及肺癌。

62.如权利要求1所述的化合物，其中R₇是OH。

63.如权利要求62所述的化合物，其中该化合物选自：

64.一种具有式I的化合物：

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或氨基酸共轭物，其中：

R¹是OH、烷氧基、卤素或氧代；

R²是OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或者R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

R³是H、OH、卤素、或任选地被一个或多个卤素或OH取代的烷基，或者R²和R³与它们所附接的碳原子一起形成羰基；

m是0、1或2；

n是0或1；

p是0或1；并且

是单键或双键。