CN108318601A - 一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种糠醛和5‑羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,样品检测的色谱条件为:选择285nm作为糠醛和5‑羟甲基糠醛的检测波长;选定用C18柱作为糠醛和5‑羟甲基糠醛分离的色谱柱;选择流动相比例为甲醇/水=15/85;选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。本发明的检测方法可同时测定糠醛和5‑羟甲基糠醛,可较好的用于食品领域,特别适用于膨化食品、肉制品、蜂蜜、牛奶制品和酒类样品中糠醛和5‑羟甲基糠醛的检测;本发明的检测方法操作方便、分析快速、结果准确,值得推广应用。
Description
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域,具体是一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法。
背景技术
食品的热加工处理(比如油炸、烘烤、焖煮、蒸煮等)不仅可以延长食品的保质期,保证食品的质量,而且可以增加食品的风味口感特征和加强食品的色泽,因为食品的加热过程中伴随着美拉德反应、油脂氧化反应和焦糖化反应,这些反应在某种程度上或多或少都增进了香气,质地等一系列的特征。糠醛和5-羟甲基糠醛的前体物质和形成途径主要是由美拉德和焦糖化反应产生,然而这种反应都是提供食品颜色、口味、香味的主要形成途径。所以在很多经过热加工的食品中,很有可能含有糠醛和5-羟甲基糠醛。影响形成糠醛和5-羟甲基糠醛的因素有很多,比如温度,吋间,pH值、催化剂和水分活度等,其中温度和时间是首要因素。
通常情况下在单一糖溶液中,戊糖经过脱水反应生成糠醛,己糖经脱水反应生成5-羟甲基糠醛。5-羟甲基糠醛的生成途径主要通过己糖脱水生成,而糠醛的生成途径主要有两条:一是戊糖经过脱水反应;二是5-羟甲基糠醛受热裂解可生成糠醛。在食品中,糠醛主要是由戊糖在酸性条件或者高温条件下转化而来的在食品中,5-羟甲基糠醛主要是在酸性条件或者高温条件下由己糖加热分解产生的。己糖脱去三分子水后生成5-羟甲基糠醛。
鉴于糠醛和5-HMF的形成过程,可知糠醛和5-HMF广泛存在于含有糖类物质的植物和食品中,如苹果汁、酱油、焦糖色和蜂蜜等中。在含糖食品的生产、加工和存放过程中都有可能生成糠醛和5-HMF。由于食品中糖的热降解反应和美拉得反应是主要反应,所以含糖食品在生产和储存过程中都不可避免的发生上述反应,致使能经过多道生成工序步骤后,糠醛和5-HMF的含量会逐渐增高。例如:蜂蜜的存放、苹果汁的浓缩、果汁饮料的生产和膨化食品的焙烤等过程。然而,上述两个反应都会产生一种可用来指示反应程度的物质。糠醛和5-羟甲基糠醛可作为上述两种反应的指示反应程度的物质,可见对于测定二者的含量对食品工业来说至关重要。它们的含量既可以指示产品的稳定性,还可以反映加工条件的优劣。
糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法经历了从显色法、紫外-可见分光光度法到色谱检测法、色谱-质谱联用检测法的发展。目前,国内外关于糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法主要有:高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法,气相色谱串联质谱法和紫外-可见分光光度法。在现行的国家标准方法中,只有针对5-羟甲基糠醛的检测方法,而对于糠醛和-5羟甲基糠醛的同时检测方法还是空白。紫外-可见分光光度法所求的是单一波长下总的吸光度,不能排除有非糠醛和-5羟甲基糠醛在此波长也有吸收,容易产生假阳性,使得测定结果偏大。气质联用法和液质联用法虽然具有高选择性和高灵敏度,但由于仪器价格昂贵,并不是每个实验室都有条件,而且仪器运行和维护需要专业的操作人员,对人员综合素质要求较高,所以有一定的局限性。
糠醛和5-HMF都属于呋喃环系化合物,化学性质相似,极性相近,而且均有紫外吸收,最大吸收波长也相同。因此,本发明提供一种同时测定糠醛和5-羟甲基糠醛的高效液相色谱法,其操作方便、分析快速、结果准确。
发明内容
本发明的目的在于提供一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,样品检测的色谱条件为:选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长;选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱;选择流动相比例为甲醇/水=15/85;选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
作为本发明进一步的方案:所述样品为食品。
作为本发明进一步的方案:所述样品为肉制品、酒类样品、蜂蜜、牛奶制品或膨化食品。
作为本发明进一步的方案:所述样品为肉制品,肉制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集肉制品样品,将肉制品样品剪碎后用高速粉碎机粉碎;准确称取粉碎后的肉制品样品5g于50mL聚丙烯刻度离心管,加入35mL提取剂,超声辅助提取30min,然后加入10mL正己院,用力震荡2min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,去除上层液,用提取剂定容,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
作为本发明进一步的方案:所述样品为蜂蜜;蜂蜜中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集蜂蜜,准确称取10g蜂蜜样品,置于100mL烧杯中,加人10mL甲醉,用玻璃棒轻轻搅拌均匀,使试样完全溶解;转移至100mL容量瓶中,用水释稀至刻度,充分混匀;用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
作为本发明进一步的方案:所述样品为酒类样品,酒类样品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集酒类样品,用单标移液管准确吸取10.0mL试样至100mL容量瓶中,用10%的甲醇水溶液定容至刻度,超声辅助提取10min后,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
作为本发明进一步的方案:酒类样品检测前预先超声脱气:取100mL试样倒入带排气塞的瓶子中,在室温条件下超生辅助脱气,直至无气泡逸出。
作为本发明进一步的方案:所述样品为牛奶制品,牛奶制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集市售液体牛乳样品,准确称取10 g试样,置于50mL聚丙烯刻度离心管,加水至40mL,再加5mL甲醇,摇匀后超声辅助提取30min,添加2.0mL乙酸锌溶液和2.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,用甲醇定容,离心机离心10min,转速5000r/min,用0.45μm 的滤膜过滤上清液,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
作为本发明进一步的方案:所述样品为膨化食品,膨化食品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集市售膨化食品,将样品剪碎后用高速粉碎机粉碎;准确称取粉碎后的样品5.0g于50mL聚丙烯刻度离心管,加入25mL提取剂,超声辅助提取30min,再添加1.0mL乙酸锌溶液和1.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,转移上清液;将沉淀物再用适量提取剂超声提取提取一次,离心后合并上清液,最后用提取剂定容于50mL容量瓶里,上机检测;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明的检测方法可同时测定糠醛和5-羟甲基糠醛,可较好的用于食品领域,特别适用于膨化食品、肉制品、蜂蜜、牛奶制品和酒类样品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测;本发明的检测方法操作方便、分析快速、结果准确,值得推广应用。
附图说明
图1为猪肉脯采用实施例1的方法得到的检验色谱图。
图2为龙眼蜜采用实施例2的方法得到的检验色谱图。
图3为虫草酒采用实施例3的方法得到的检验色谱图。
图4为液态牛乳采用实施例4的方法得到的检验色谱图。
图5为膨化食品沙琪玛采用实施例5的方法得到的检验色谱图。
具体实施方式
本发明所要解决的技术问题是提供一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法。色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1 肉制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法
一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,采集肉制品样品,将肉制品样品剪碎后用高速粉碎机粉碎;准确称取粉碎后的肉制品样品5g(精确至0.0001g)于50mL聚丙烯刻度离心管,加入35mL提取剂,超声辅助提取30min,然后加入10mL正己院,用力震荡2min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,去除上层液,用提取剂定容,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定。色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。例:猪肉脯肉制品得到的检验色谱图见图1。
实施例2 蜂蜜中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法
一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,采集市场上的蜂蜜,准确称取10g(精确至0.0001g)蜂蜜样品,置于100mL烧杯中,加人10mL甲醉,用玻璃棒轻轻搅拌均匀,使试样完全溶解;转移至100mL容量瓶中,用水释稀至刻度,充分混匀;用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定。色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。例:龙眼蜜得到的检验色谱图见图2。
实施例3 酒类样品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法
一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,采集酒类样品,酒类样品预先超声脱气:取100mL试样倒入带排气塞的瓶子中,在室温条件下超生辅助脱气,直至无气泡逸出;用单标移液管准确吸取10.0mL试样至100mL容量瓶中,用10%的甲醇水溶液定容至刻度,超声辅助提取10min后,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定。色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。例:虫草酒得到的色谱图见图3。
实施例4 牛奶制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法
采集市售牛奶制品样品,准确称取10 g(精确至0.0001g)试样,置于50mL聚丙烯刻度离心管,加水至40mL,再加5mL甲醇,摇匀后超声辅助提取30min,添加2.0mL乙酸锌溶液和2.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,用甲醇定容,离心机离心10min,转速5000r/min,用0.45μm 的滤膜过滤上清液,滤液上机测定,色谱条件同实施例1。例,液态牛乳得到的色谱图见图4。
实施例5 膨化食品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法
采集市售膨化食品样品,将样品剪碎后用高速粉碎机粉碎。准确称取粉碎后的样品5.0g(精确至0.0001g)于50mL聚丙烯刻度离心管,加入25mL提取剂,超声辅助提取30min,再添加1.0mL乙酸锌溶液和1.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,转移上清液;将沉淀物再用适量提取剂超声提取提取一次,离心后合并上清液,最后用提取剂定容于50mL容量瓶里,上机检测。色谱检验条件同实施例3。例,膨化食品沙琪玛得到的色谱图见图5。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明,但是本专利并不限于上述实施方式,在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (9)
1.一种糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,样品检测的色谱条件为:选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长;选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱;选择流动相比例为甲醇/水=15/85;选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
2.根据权利要求1所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为食品。
3.根据权利要求1或2所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为肉制品、酒类样品、蜂蜜、牛奶制品或膨化食品。
4.根据权利要求3所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为肉制品,肉制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集肉制品样品,将肉制品样品剪碎后用高速粉碎机粉碎;准确称取粉碎后的肉制品样品5g于50mL聚丙烯刻度离心管,加入35mL提取剂,超声辅助提取30min,然后加入10mL正己院,用力震荡2min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,去除上层液,用提取剂定容,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
5.根据权利要求3所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为蜂蜜;蜂蜜中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集蜂蜜,准确称取10g蜂蜜样品,置于100mL烧杯中,加人10mL甲醉,用玻璃棒轻轻搅拌均匀,使试样完全溶解;转移至100mL容量瓶中,用水释稀至刻度,充分混匀;用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
6.根据权利要求3所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为酒类样品,酒类样品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集酒类样品,用单标移液管准确吸取10.0mL试样至100mL容量瓶中,用10%的甲醇水溶液定容至刻度,超声辅助提取10min后,用0.45μm的滤膜过滤,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
7.根据权利要求6所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,酒类样品检测前预先超声脱气:取100mL试样倒入带排气塞的瓶子中,在室温条件下超生辅助脱气,直至无气泡逸出。
8.根据权利要求3所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为牛奶制品,牛奶制品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集市售液体牛乳样品,准确称取10 g试样,置于50mL聚丙烯刻度离心管,加水至40mL,再加5mL甲醇,摇匀后超声辅助提取30min,添加2.0mL乙酸锌溶液和2.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,用甲醇定容,离心机离心10min,转速5000r/min,用0.45μm 的滤膜过滤上清液,滤液上机测定;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
9.根据权利要求3所述的糠醛和5-羟甲基糠醛的液相色谱检测方法,其特征在于,所述样品为膨化食品,膨化食品中糠醛和5-羟甲基糠醛的检测方法为:采集市售膨化食品,将样品剪碎后用高速粉碎机粉碎;准确称取粉碎后的样品5.0g于50mL聚丙烯刻度离心管,加入25mL提取剂,超声辅助提取30min,再添加1.0mL乙酸锌溶液和1.0mL亚铁氰化钾溶液,剧烈振摇2min,再超声波提取10min,离心机离心10min,转速5000r/min分层,转移上清液;将沉淀物再用适量提取剂超声提取提取一次,离心后合并上清液,最后用提取剂定容于50mL容量瓶里,上机检测;
色谱条件选择285nm作为糠醛和5-羟甲基糠醛的检测波长,选定用C18柱作为糠醛和5-羟甲基糠醛分离的色谱柱,选择流动相比例为甲醇/水=15/85,选定流速为1.0ml/min,柱温为35℃。
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